1 LỜI MỞ ĐẦU Tinh dầu thiên nhiên hiện nay là một sản phẩm khá thông dụng trên thị trường Nó được ứng dụng tương đối phổ biến trong nhiều lĩnh vực như thực phẩm, dược phẩm, y học, mỹ phẩm và một số lĩnh vực khác… Hiện nay, có nhiều phương pháp để chiết rút tinh dầu từ thực vật, trong đó có phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước đơn giản, dễ thực hiện và cho hiệu xuất thu hồi tinh dầu tương đối cao Tinh dầu Citrus được sử dụng phổ biến do nó có mùi thơm dễ chịu, có tác dụng trị cảm, giảm stress và thanh nhiệt…Quất thuộc họ Citrus nhưng chưa có công trình nào được nghiên cứu sâu về nó, do đó chúng tôi sẽ thực hiện đề tài “Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu từ vỏ quả và lá Quất bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước” và phân tích xác định các tính chất hóa- lý của tinh dầu thành phẩm thu được để đánh giá chất lượng và khả năng ứng dụng làm hương liệu của nó 2 Chương 1 KHÁI QUÁT CHUNG Trong cuộc sống hàng ngày ta thường sử dụng tinh dầu thiên nhiên vào rất nhiều mục đích khác nhau, chẳng hạn như chữa bệnh, làm đẹp, nước giải khát, bánh kẹo, sữa tắm, nước hoa…Như vậy có thể nói tinh dầu thiên nhiên giữ một vai trò không thể thay thế trong các lĩnh vực y học, dược phẩm, mỹ phẩm…và cả trong cuộc sống đời thường, nhất là trong thời đại ngày nay khi mà xu hướng sử dụng các sản phẩm có nguồn gốc từ thiên nhiên Hiện nay, trên thế giới đã có rất nhiều công trình nghiên cứu về tinh dầu, nhất là các loại tinh dầu thuộc họ Citrus như Cam, Chanh, …vì các tác dụng ưu việt của nó mang lại như thanh nhiệt, giải cảm, giảm stress Tinh dầu từ vỏ quả, lá và hoa của các cây thuộc họ Citrus là một chất tạo mùi và hương thơm tự nhiên và được sản xuất hàng nghìn tấn khối mỗi năm Các nghiên cứu về tinh chất vật lý, thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của tinh dầu họ Citrus thu nhận được bằng các kỹ thuật tách chiết hiện đại đã được quan tâm nhiều trong những năm gần đây Chẳng hạn như, Lin và Rouseff (2001) và Napapor Thavanapong thuộc khoa Dược, Đại học Silpakorn, Thái Lan (2006) đã nghiên cứu về tinh dầu Bưởi bằng phương pháp ép lạnh; Atti -Santos, Serafini, Moyna và cs (2005) đã nghiên cứu xác định điều kiện tối ưu cho việc chiết tinh dầu chanh bằng phương pháp chưng cất hơi nước (HD) và chiết bằng CO 2 siêu tới hạn (CO 2 -SFC); M M Ahmad, Salim-ur-rehman, F M Anjum, E E Bajwa (2006) đã nghiên cứu tinh chất lý học của tinh dầu chiết từ vỏ của các loại Citrus khác nhau (6,7,9,10).Trong nước, có công trình nghiên cứu “Khảo sát tinh dầu vỏ trái giống Citrus họ Rutaceae” của Nguyễn Minh Hoàng (2006) hay “Tách tinh dầu và alkaloid từ quả Quất (Citrus japonica Thumb.)” của Nguyễn Thị Lý và Cs…hay đề tài tốt nghiệp Đại học “Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu từ vỏ bưởi Năm Roi (Citrus grandis (L.) Osbeck var grandis) bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước” (2010) của Sinh viên Nguyễn Đắc Phát Trường Đại học Nha Trang (2,3,5)  Các dạng chưng cất tinh dầu – Ưu và nhược điểm Trong công nghiệp, người ta chia các phương pháp chưng cất hơi nước ra thành ba dạng chính: chưng cất bằng nước (water distillation), chưng cất bằng nước và hơi nước (water and steam distillation) và chưng cấy bằng hơi nước trực tiếp nước (direct steam distillation) a) Chưng cất bằng nước (Water Distillation): 3 Nguyên liêu và nước cùng cho vào môt thiết Sinh hàncuốn theo tinh bị Khi đun sôi, hơi nước bay ra sẽ dầu, hơi ngưng tụ bay ra sẽ thu được hỗn hợp gồm nước và tinh dầu, hai thành phần này không tan vào nhau nên dễ dàng tách ra khỏi nhau Bình Phương pháp này đơn giản, thiết bị rẻ tiền và hứng Nước + dễ chế Nguyên tạo, phù hợp với những cơ sở sản xuất nhỏ, vốn đầu liệu tư ít Tuy nhiên, phương pháp này có nhược điểm như hiêu suất thấp, chất lượng tinh dầu không cao do nguyên liêu tiếp xúc trực tiếp với thiết bị nên dễ bị cháy khét, khó điều chỉnh các thông số kỹ thuât như tốc đô và nhi êt đô chưng Hình 1.1 Thiết bị chưng cất bằng nước cất b) Chưng cất bằng hơi nước không có nồi hơi riêng (Water and Steam Distillation): Nguyên liêu và nước cùng cho vào môt thiết bị nhưng cách nhau bởi m ôt vỉ nồi Khi đun sôi, hơi nước bốc lên qua khối nguyên liêu kéo theo tinh dầu và đi ra thiết bị ngưng tụ Để nguyên liêu khỏi rơi vào phần có nước ta có thể lót trên vỉ một hay nhiều lớp bao tải tùy theo từng loại nguyên liêu Phương pháp nay phù hợp với những cơ sở sản xuất có qui mô trung bình So với phương pháp chưng cất bằng nước trực tiếp, phương pháp này có ưu điểm hơn, nguyên liệu ít bị cháy khét vì không tiếp xúc trực tiếp với đáy thiết bị, các nhược điểm khác vẫn chưa khắc phục được Phương pháp này thích hợp cho những loại nguyên liệu không chịu được nhiệt độ cao 4 Ống ngưng tụ Van khóa Vỉ nồi Nguyên liệu Van xả nước ngưng Nguồn nhiệt Hình 1.2 Thiết bị chưng cất hơi nước không có nồi hơi riêng c) Chưng cất bằng hơi nước có nồi hơi riêng (Steam Distillation): Trong phương pháp này hơi nước được tạo ra từ một nồi hơi riêng và được dẫn vào các thiết bị chưng cất Phương pháp này phù hợp với những cơ sở sản xuất lớn Ưu điểm của phương pháp này là cùng một lúc có thể phục vụ được cho nhiều thiết bị chưng cất, điều kiện làm việc của công nhân nhẹ nhàng hơn, dễ cơ khí hóa và tự động hóa các công đoạn sản xuất, khống chế tốt hơn các thông số công nghệ, rút ngắn được thời gian sản xuất Ngoài ra, phương pháp này đã khắc phục được tình trạng nguyên liệu bị khê, khét và có thể dùng hơi quá nhiệt để chưng cất theo yêu cầu của công nghệ Tuy nhiên, đối với một số tinh dầu trong điều kiện chưng cất ở nhiệt độ và áp suất cao sẽ bị phân hủy làm giảm chất lượng Hơn nữa, các thiết bị sử dụng trong phương pháp này khá phức tạp và đắt tiền 5 Hơi nước và hơi tinh dầu Nước lạnh Nước nóng Tinh dầu Hơi nước Nhiệt Nước hoa Hình 1.3 Thiết bị chưng cất hơi nước có nồi hơi riêng Ưu- nhược điểm của phương pháp chưng cất Ưu điểm: - Quy trình kỹ thuật tương đối đơn giản - Thiết bị gọn, dễ chế tạo - Không đòi hỏi vật liệu phụ như các phương pháp tẩm trích, hấp thụ - Thời gian chưng cất tương đối nhanh Nhược điểm: - Không hiệu quả đối với những nguyên liệu có hàm lượng tinh dầu thấp - Chất lượng tinh dầu có thể bị ảnh hưởng nếu trong tinh dầu có những cấu phần dễ bị phân hủy - Không lấy được các loại nhựa và sáp có trong nguyên liệu (đó là những chất định hương thiên nhiên rất có giá trị) - Trong nước chưng luôn luôn còn một lượng tinh dầu tương đối lớn - Những tinh dầu có nhiệt độ sôi cao thường cho hiệu suất rất kém Phương pháp chiết (Extraction) Cơ sở của phương pháp dựa trên hiện tượng thẩm thấu, khuếch tán và hòa tan của tinh dầu có trong các mô nguyên liệu khi tiếp xúc với dung môi hữu cơ Phương pháp chiết thường dùng để tách các hương liệu dễ bay hơi mà phương pháp chưng cất tỏ ra kém hiệu quả 6 Trong phương pháp này nguyên liệu được ngâm trong dung môi hữu cơ thích hợp, sau đó cất chân không để thu hồi dung môi, phần còn lại là hỗn hợp tinh dầu và sáp được gọi là tinh dầu cô kết (gọi là “concrete oil”) Dùng cồn tuyệt đối hòa tan “concrete oil” rồi để lạnh, khi đó phần sáp sẽ đông đặc và được tách loại, phần dịch còn lại được đem chưng cất lôi cuốn hơi nước để thu tinh dầu tinh khiết (gọi là “absolute oil”) Đây cũng chính là hai dạng sản phẩm chính của chất thơm hiện lưu hành trên thị trường Yêu cầu của dung môi chiết Yếu tố quan trọng nhất cho sự thành công của phương pháp này là phẩm chất và đặc tính của dung môi sử dụng, do đó dung môi chiết cần phải đạt được những yêu cầu sau:  Hòa tan hoàn toàn và nhanh chóng các cấu phần có mùi thơm trong nguyên liệu  Hòa tan kém các hợp chất khác như sáp, nhựa dầu có trong nguyên liệu  Không có tác dụng hóa học với tinh dầu  Không biến chất khi sử dụng lại nhiều lần  Hoàn toàn tinh khiết, không có mùi lạ, không độc, không ăn mòn thiết bị, không tạo thành hỗn hợp nổ với không khí và có độ nhớt kém  Nhiệt độ sôi thấp vì khi chưng cất dung dịch ly trích để thu hồi dung môi, nhiệt độ sôi cao sẽ ảnh hưởng đến chất lượng tinh dầu Điểm sôi của dung môi nên thấp hơn điểm sôi của cấu phần dễ bay hơi nhất trong tinh dầu  Ngoài ra, cần có thêm những yếu tố phụ khác như: giá thành thấp, nguồn cung cấp dễ tìm, … Thường thì không có dung môi nào thỏa mãn tất cả những điều kiện kể trên Người ta sử dụng cả dung môi không tan trong nước (như dietyl ete, ete dầu hỏa, hexan, cloroform…) lẫn dung môi tan trong nước (như etanol, axeton…) Trong một số trường hợp cụ thể, người ta còn dùng một hỗn hợp dung môi Ưu và nhược điểm của phương pháp - Ưu điểm: Sản phẩm thu được theo phương pháp này thường có mùi thơm tự nhiên Hiệu suất sản phẩm thu được thường cao hơn các phương pháp khác - Khuyết điểm: Yêu cầu cao về thiết bị, thất thoát dung môi, quy trình tương đối phức tạp Phương pháp ướp (Enfleurage) Cơ sở của phương pháp dựa trên hiện tượng hấp phụ chất thơm bởi các chất béo dạng lỏng hay rắn (vaselin, parafin, dầu oliu hoặc mỡ động vật) đã tinh chế Người ta dùng 7 các khay sâu 8cm, rộng 60cm, dài 100cm đáy là mặt kính có phủ lớp chất béo để hấp phụ chất thơm Các khay có thể xếp chồng lên nhau, trên mặt khay xếp đều nguyên liệu để trích hương và để yên trong khoảng từ 12-72 giờ tùy từng loại nguyên liệu, sau đó thay lớp nguyên liệu mới và để hấp phụ từ 10-15 lần cuối cùng thu được chất béo có mùi thơm Đem lắc chất béo với etanol cao độ để trích ly tinh dầu, sau đó để lạnh -10 0C để loại bỏ hết chất béo bị kéo theo rồi cô đuổi etanol dưới áp suất thấp để thu tinh dầu Kỹ thuật này thuờng được dùng để chiết hương thơm của các loài hoa để thu sản phẩm dưới dạng tinh dầu cô đặc (“essence concentrée”) dùng trong mỹ phẩm Phương pháp ngâm (Hot Maceration) Phương pháp này dựa trên hiện tượng hấp thụ chất thơm bởi các loại dầu béo Hoa được ngâm trong dầu béo đã tinh chế trong một thiết bị được làm nóng bởi hơi nước ở 45600C trong thời gian từ 1-2h Sau mỗi lần ngâm, vớt hoa ra cho vào máy vẩy ly tâm để thu hồi dầu và cho tiếp nguyên liệu mới vào Mỗi mẻ dung môi có thể dùng để chiết 10-15 lần Dầu béo đã bão hòa chất thơm được đem lắc với etanol rồi cô dưới áp suất thấp để thu được tinh dầu cô đặc tương tự như trong phương pháp ướp Phương pháp ép (Expression hay Cold Pressing) Phương pháp này áp dụng cho các loại dược liệu có hàm lượng tinh dầu cao và tế bào chứa tinh dầu ở phần vỏ thuộc chi Citrus Nguyên liệu chiết được trích tinh dầu bằng cách ép ở nhiệt độ thường sử dụng các loại máy ép trục vít vô tận hoặc cối ép dùng nêm (giống như ép các loại dầu béo) Phần thu được là một hỗn hợp gồm tinh dầu và dịch cùi có thể dễ dàng tách bằng cách cho thêm nước muối bão hòa, tinh dầu sẽ nổi lên trên có kéo theo một phần sáp và nhựa Dùng etanol 75 800 để hòa tan tinh dầu, sau đó làm lạnh để loại bỏ sáp Sau khi cô dưới áp suất thấp để loại bỏ etanol ta có sản phẩm tinh dầu có lẫn một ít nhựa Phương pháp này có thể cho hiệu suất trên 90% so với hàm lượng tinh dầu định lượng trong phòng thí nghiệm Ngoài ra, ngày nay người ta còn sử dụng các phương pháp mới trong việc ly trích tinh dầu như phương pháp chưng cất hay chiết dưới sự hỗ trợ bởi vi sóng, bởi siêu âm, kỹ thuật vi chiết pha rắn (SPME: Solid phase micro-extraction), kỹ thuật chiết siêu tới hạn (SFE: Supercritical fluid extraction), chiết kết hợp với chưng cất (SDE: Simultaneous distillation extraction),…Tuy nhiên, các phương pháp trên chi phí đắt và thiết bị phức tạp hơn nên ít phổ biến hơn trong thực tế So với các phương pháp trên thì phương pháp chưng cất lối cuốn bằng hơi nước dễ áp dụng trong điều kiên phòng thí nghiệm, chi phí đầu tư ít, dễ dàng vận hành, cho hiệu quả 8 chiết tương đối cao Do đó chúng tôi đã áp dụng phương pháp chưng cất lôi cuốn bằng hơi nước để chưng cất tinh dầu từ vỏ và lá quất sử dụng cho đề tài Trong số các loài thuộc họ Citrus thì Quất cũng khá phổ biến nhưng vẫn chưa được quan tâm nhiều Quất là cây cảnh dễ trồng tại Việt Nam, như vậy việc chúng ta tận dụng nguồn nguyên liệu phong phú và rẻ tiền này để chiết xuất tinh dầu sẽ mang lại hiệu quả kinh tế cao (theo khảo sát thị trường có thể trên 100.000 đồng/10ml), đồng thời góp phần giải quyết vấn đề môi trường đang nóng bỏng hiện nay(11) Xuất phát từ yêu cầu thực tiễn trên đây, được sự đồng ý của Trường Đại học Nha Trang và khoa Công nghệ Thực phẩm, dưới sự hướng dẫn của TS Vũ Duy Đô và TS Hoàng Thị Huệ An, chúng em đã tiến hành nghiên cứu và thực hiện đề tài: “Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu từ vỏ quả và lá Quất bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước” Mục tiêu của đề tài chúng tôi là: nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng tới hiệu suất chiết tinh dầu Quất để làm cơ sở khoa học cho việc sản xuất trên quy mô công nghiệp Cụ thể là: - Xác lập điều kiện tối ưu cho việc tách chiết tinh dầu từ vỏ quả và lá Quất bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước - Đưa ra quy trình chưng cất tối ưu để thu nhận tinh dầu từ vỏ quả và lá Quất - Xác định các chỉ số lý-hóa cơ bản và thành phần hóa học của sản phẩm để sử dụng làm hương liệu Kết quả nghiên cứu của đề tài có thể xem là cơ sở khoa học ban đầu của việc xây dựng quy trình sản xuất tinh dầu từ vỏ quả và lá Quất trên quy mô công nghiệp cũng như cung cấp những dẫn liệu khoa học về thành phần hóa học và tính chất lý-hóa cơ bản của tinh dầu Quất nhằm phát triển các khả năng ứng dụng khác Do kiến thức và kinh nghiệm nghiên cứu còn hạn chế cũng như khó khăn về điều kiện thực nghiệm và điều kiện về kinh phí nên mặc dù đã rất cố gắng song đề tài này không tránh khỏi những thiếu sót Rất mong nhận được sự chỉ bảo của quý thầy cô cũng như sự góp ý kiến từ các bạn sinh viên để đề tài này được hoàn thiện hơn Nha Trang, ngày 18 tháng 11 năm 2011 Sinh viên thực hiện Phạm Thị Mỹ Loan Phan Anh quốc 9 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Nguyên liệu chính Nguyên liệu sử dụng tách tinh dầu trong nghiên cứu này là vỏ quả và lá Quất (Citrus japonica Thumb) được thu mua từ TP.HCM Nguyên liệu tươi, vỏ quả có màu vàng sáng bóng đặc trưng, không bị nấm mốc và lá xanh tươi, đạt độ trưởng thành và không bị sâu bệnh Hình 2.1 Quả Quất Hình 2.2 Lá Quất 2.1.2 Dụng cụ - Thiết bị - Hóa chất a Dụng cụ - Thiết bị - Cân kỹ thuật 1 mg (Shimadzu, Nhật) - Cân kỹ thuật 1 g (Việt Nam) - Cân phân tích 0,1 mg (Satorius, Nhật) - Bộ chưng cất tinh dầu định lượng, có hồi lưu kiểu Clevenger dùng cho tinh dầu nhẹ hơn nước (ISOLAB, Đức) - Bếp đun bình cầu 1000 ml (Trung Quốc) - Máy xay điện (Sanyo, Nhật) - Tủ sấy 10C (Memmert , Đức) - Tủ lạnh trữ mẫu -20 0 C - Bình đo tỷ trọng 25 ml (Bomex, Trung Quốc) - Buret, pipet, bình tam giác, cốc thủy tinh, đũa thủy tinh - Hệ thống sắc ký khí ghép khối phổ hai lần với thiết bị GC model G3440A của hãng Agilent (Agilent, USA) ghép với detector MS/MS model Quattro microTMGC của hãng Waters (USA) 10 b Hóa chất - Nước cất - NaCl - Na 2 SO 4 khan - KOH 0.1N và 0.5N - HCl 0.5N - Etanol 90 0 - Dung dịch chỉ thị phenolphtalein 1% 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Xác định thành phần khối lượng của quả Quất Chọn các quả Quất và lá đạt yêu cầu như đã nêu, tiến hành rửa sạch để loại bỏ các tạp chất và vi sinh vật có trên bề mặt nguyên liệu và để ráo nước Đối với quả thì tiến hành xác định thành phần khối lượng như sau: - Cân một lượng quả nhất đinh ta được khối lượng là mQ - Lột lấy phần vỏ bên ngoài có chứa các túi tinh dầu Đem cân phần này ta được khối lượng mV - Phần ruột quả (múi quả) đem cân ta được khối lượng là mR Thành phần khối lượng của quả Quất được tính như sau: Vỏ(%) = (mQ mV)/mQ *100% Ruột(%) = (mQ mR)/mQ *100% 2.2.2 Chuẩn bị nguyên liệu Nguyên liệu quả sau khi rửa sạch thì để ráo nước, đối với lá sau khi ráo thì cân chính xác 100g/mẫu rồi cho vào túi polyetylen cột kín để hạn chế sự không khí tới mức tối đa, rồi đem nguyên liệu bảo quản ở nhiệt độ -200C đến khi nghiên cứu Khi sử dụng, đối với quả thì ta dùng tay lột lấy phần vỏ vàng bên ngoài, rồi cân chính xác 100g/mẫu Thực hiện cắt nhỏ nguyên liệu, trộn đều để đồng nhất mẫu và tiến hành các thí nghiệm tiếp theo 2.2.3 Phương pháp chưng cất Đây là phương pháp đầu tiên được dùng để tách tinh dầu ra khỏi nguyên liệu thực vật Cơ sở của phương pháp này là nhiệt độ sôi của hỗn hợp sẽ thấp hơn nhiệt độ sôi của các cấu tử thành phần Do đó, khi chưng cất hơi nước các cấu tử tinh dầu sẽ được tách ra ở nhiệt độ thấp hơn nhiệt độ sôi của nước, vì vậy sẽ hạn chế sự biến tính hóa học (sự oxy hóa, nhiệt Ét - 29 - 3.5 Kết quả xác định thời gian chưng cất thích hợp Kết quả thí nghiệm được thể hiện ở hình 3.7 và 3.8 (bảng PL8) Hình 3.7 Thể tích tinh dầu vỏ và lá trong các thời gian chưng cất khác nhau(ml) Hình 3.8 Tỉ lệ khối lượng tinh dầu vỏ và lá trong các thời gian chưng cất khác nhau(%) Ét - 30 - Nhận xét và giải thích: Nhìn vào 2 đồ thị ta thấy: Thể tích tinh dầu quả tăng nhanh trong 10 phút đầu tiên (2,60ml) tương đương với tỉ lệ khối lượng là(2,15%), sau đó tăng chậm và ổn định trong 60 phút tiếp theo và đạt cực đại ở phút thứ 70 (3,14ml) tương đương với tỉ lệ khối lượng là(2,6%) Tuy nhiên nếu tiếp tục chưng cất thì thể tích tinh dầu không tăng thêm nữa Do vậy, thời gian chưng cất tối ưu với mẫu quả là 70 phút Trong khi đó tinh dầu vỏ thì tăng nhanh trong 20 phút đầu tiên (0,32ml) tương đương với tỉ lệ khối lượng là (0,3%) sau đó tăng chậm và ổn định trong 40 phút tiếp theo sau đó tăng chậm dần và đạt cực đại khi chưng cất được 80 phút(0,71ml) tương đương với tỉ lệ khối lượng là (0,67%) và không tăng thêm được nữa khi tiếp tục chưng cất Do vậy, thời gian chưng cất tối ưu của mẫu lá là 80 phút So sánh với mẫu quả, thì mẫu lá có thời gian chưng cất tối ưu cao hơn cũng là do trong thành phần của lá có nhiều chất sáp khiến cho việc thẩm thấu và trích ly tinh dầu gặp nhiều khó khăn hơn Vì thế, muốn đạt hiệu quả thu hồi tối ưu thì phải tiêu tốn nhiều thời gian hơn (80phút) Qua các kết quả thu được từ các thí nghiệm trên ta thấy hiệu suất thu hồi tinh dầu từ quả Quất cao nhất là 3,14ml, chiếm 2,60% về khối lượng so với mẫu Trong khi đó, tinh dầu chiết từ lá lại rất ít (chỉ 0,67% về khối lượng), thấp hơn gần 4,5 lần so với quả Qua đó cho thấy nếu tận dụng phần quả Quất sau khi chưng tết để chiết rút tinh dầu là một phương án có tính khả thi cao Đồng thời, đầu tư phối hợp với việc chiết rút từ phần lá sẽ mang lại hiệu quả kinh tế khá cao cho nhà sản xuất Ét - 31 - 3.6 Đề xuất quy trình tách chiết tinh dầu Quất 3.6.1 Quy trình hoàn thiện tách chiết tinh dầu từ quả Quất Vỏ Quất Xử lý Xay Ngâm Chưng cất lôi cuốn hơi nước Tỷ lệ nước/nguyên liệu(v/w): 3/1 Thời gian xay: 2 phút Nồng độ NaCl(w/v): 10% Thời gian ngâm : 3h Thời gian chưng cất: 70 phút Ngưng tụ Phân ly Tinh dầu thô Làm khan Na2SO4 khan Lắng, gạn Tinh dầu quả Hình 3.9 Sơ đồ quy trình tách chiết tinh dầu từ quả Quất Ét - 32 - Thuyết minh quy trình: - Chuẩn bị nguyên liệu: Chọn những quả Quất tươi, phần vỏ vàng sáng bóng và đạt độ chín kỹ thuật Sau đó rửa sạch để loại bỏ các bụi bẩn và tạp chất có trên nguyên liệu Ta chọn lấy phần vỏ bên ngoài và cân mỗi mẫu thí nghiệm 100g Tiến hành cắt nhỏ sơ bộ nguyên liệu tạo điều kiện thuận lợi cho các quá trình sau Trong trường hợp số lượng mẫu lớn, sau khi rửa sạch có thể bảo quản đông để chủ động nguồn nguyên liệu và đảm bảo chất lượng tinh dầu tạo ra - Xay: Cho nguyên liệu vào máy xay và thêm với nước sao cho tỷ lệ nước/nguyên liệu là 3/1 (v/w) Xay nhỏ nguyên liệu trong 2 phút - Ngâm muối: Thêm NaCl vào nguyên liệu đã xay nhỏ sao cho nồng độ NaCl trong hỗn hợp vào 10% (w/v) tương đương với 30g rồi chuyển hỗn hợp trên vào bình cầu của thiết bị chưng cất lôi cuốn hơi nước theo kiểu Clevenger (có hoàn lưu nước chưng),lắp kín thiết bị, để yên trong 3giờ - Chưng cất: Tiến hành chưng cất hỗn hợp nguyên liệu đã xử lý dưới áp suất khí quyển (nhiệt độ dưới 100 0 C) trong 70 phút để thu hồi tinh dầu - Ngưng tụ: Hỗn hợp hơi nước và tinh dầu thoát ra được đi vào ống sinh hàn của thiết bị chưng cất, dưới tác dụng của nước có trong ống sinh hàn sẽ chuyển hóa hỗn hợp trên từ dạng hơi sang dạng lỏng và sau đó được chảy vào bộ phận ngưng tụ của thiết bị - Phân ly: Để yên cho hỗn hợp thu được trong bộ phận ngưng tụ đến khi tách hoàn toàn thành 2 pha Cho lớp tinh dầu bên trên chảy qua ống xiphông vào bình hứng để thu tinh dầu thô - Làm khan: Thêm Na 2 SO 4 khan vào bình chứa tinh dầu thô, vừa thêm vừa khuấy đều cho đến khi quan sát thấy các tinh thể muối Na 2 SO 4 bắt đầu rời ra - Lắng gạn- Thu tinh dầu: Để lắng hỗn hợp trên Cho phần tinh dầu đã làm khan bên trên chảy qua ống xiphông vào bình chứa sản phẩm Sản phẩm tinh dầu thu được cho vào các bình chứa hay lọ sẫm màu, đậy kín, bảo quản trong tối ở 2-4 0 C cho đến khi đem phân phối Ét - 33 3.6.2 Quy trình hoàn thiện tách chiết tinh dầu lá Quất lá Quất Xử lý Xay Ngâm Chưng cất lôi cuốn hơi nước Tỷ lệ nước/nguyên liệu(v/w): 6/1 Thời gian xay: 2 phút Nồng độ NaCl(w/v): 0% Thời gian ngâm : 3h Thời gian chưng cất: 80 phút Ngưng tụ Phân ly Tinh dầu thô Làm khan Na2SO4 khan Lắng, gạn Tinh dầu lá Hình 3.10 Sơ đồ quy trình tách chiết tinh dầu từ lá Quất Ét - 34 - Thuyết minh quy trình: - Chuẩn bị nguyên liệu: Chọn những lá Quất tươi, màu xanh bóng và đạt được độ trưởng thành Sau đó rửa sạch để loại bỏ các bụi bẩn và tạp chất có trên nguyên liệu Tiến hành cân mỗi mẫu thí nghiệm 100g và cắt nhỏ sơ bộ nguyên liệu tạo điều kiện thuận lợi cho các quá trình sau Trong trường hợp số lượng mẫu lớn, sau khi rửa sạch có thể bảo quản đông để chủ động nguồn nguyên liệu và đảm bảo chất lượng tinh dầu tạo ra - Xay: Cho nguyên liệu vào máy xay và thêm với nước sao cho tỷ lệ nước/nguyên liệu là 6/1 (v/w) Xay nhỏ nguyên liệu trong 2 phút - Ngâm: Chuyển hỗn hợp sau khi xay vào bình cầu của thiết bị chưng cất lôi cuốn hơi nước theo kiểu Clevenger (có hoàn lưu nước chưng),lắp kín thiết bị, để yên trong 3giờ - Chưng cất: Tiến hành chưng cất hỗn hợp nguyên liệu đã xử lý dưới áp suất khí quyển (nhiệt độ dưới 100 0 C) trong 80 phút để thu hồi tinh dầu - Ngưng tụ: Hỗn hợp hơi nước và tinh dầu thoát ra được đi vào ống sinh hàn của thiết bị chưng cất, dưới tác dụng của nước có trong ống sinh hàn sẽ chuyển hóa hỗn hợp trên từ dạng hơi sang dạng lỏng và sau đó được chảy vào bộ phận ngưng tụ của thiết bị - Phân ly: Để yên cho hỗn hợp thu được trong bộ phận ngưng tụ đến khi tách hoàn toàn thành 2 pha Cho lớp tinh dầu bên trên chảy qua ống xiphông vào bình hứng để thu tinh dầu thô - Làm khan: Thêm Na 2 SO 4 khan vào bình chứa tinh dầu thô, vừa thêm vừa khuấy đều cho đến khi quan sát thấy các tinh thể muối Na 2 SO 4 bắt đầu rời ra Số lượng Na 2 SO 4 khan phụ thuộc vào lượng nước sau phân ly nhiều hay ít và tại thí nghiệm của chúng tôi thì lượng Na 2 SO 4 khan sử dụng là 3% - Lắng gạn- Thu tinh dầu: Để lắng hỗn hợp trên Cho phần tinh dầu đã làm khan bên trên chảy qua ống xiphông vào bình chứa sản phẩm Sản phẩm tinh dầu thu được cho vào các bình chứa hay lọ sẫm màu, đậy kín, bảo quản trong tối ở 2-4 0 C cho đến khi đem phân phối Ét - 35 - 3.7 Kết quả sản xuất thử nghiệm chiết xuất tinh dầu 3.7.1 Xác định tỷ lệ tinh dầu chiết xuất từ vỏ quả và lá Quất Tiến hành chưng cất 3 mẫu quả và 3 mẫu lá theo sơ đồ quy trình đề xuất trên Kết quả tỷ lệ tinh dầu chiết xuất được từ vỏ quả và lá thể hiện ở bảng 3.2 Bảng 3.2 Tỷ lệ tinh dầu chiết xuất được từ vỏ quả và lá Quất Mẫu Quả Trung bình Lá Trung bình Thí nghiệm 1 Khối lượng mẫu (g) 100,01 Thể tích tinh dầu (ml) 3,15 Hiệu suất chiết rút (%,v/w) 3,15 Hiệu suất chiết rút (%,w/w) 2,60 2 99,9 3,14 3,14 2,60 3 100,01 3,14 3,14 2,60 100,03 3,14 3,14 2,60 100,00 100,01 100,01 100,01 0,70 0,71 0,71 0,71 0,70 0,71 0,71 0,71 0,67 0,67 0,67 0,67 1 2 3 3.7.2 Kết quả đánh giá tính chất cảm quan và xác định các chỉ số hóa-lý của sản phẩm 1 Mô tả tính chất cảm quan sản phẩm Một số tính chất cảm quan sản phẩm thu từ qui trình đề xuất được thể hiện ở bảng 3.3 Bảng 3.3 Bảng mô tả tính chất cảm quan của tinh dầu quả và lá Quất Tinh dầu Tinh dầu quả Độ trong suốt Trong suốt Tính chất cảm quan Màu sắc Mùi Không màu Mùi thơm nhẹ, dịu, đặc trưng của tinh dầu quả Tinh dầu lá Trong suốt Màu vàng nhạt Quất Mùi thơm nồng, hấp dẫn, đặc trưng của tinh dầu lá Quất 2 Kết quả xác định các chỉ số hóa- lý của sản phẩm Kết quả xác định các chỉ số hóa- lý của tinh dầu quả và lá Quất thu từ qui trình đề xuất được thể hiện ở bảng 3.4 (xem các bảng PL9, PL10, PL11, PL12) Ét - 36 - Bảng 3.4 Kết quả xác định các chỉ số hóa- lý của Tinh dầu Quất Tỷ trọng Tỷ lệ Tinh Chỉ số acid Chỉ số xà Chỉ số este (d 25 ) dầu hòa tan (IA) phòng hóa (IE) Sản phẩm trong cồn (IS) 90 0 ,ở Tinh dầu 0,8265 25 0 C(v/v) 0,85/2 quả Tinh dầu lá 0,936 1,5/2 5,3295 6,732 1,4025 3,6465 34,5 30,8535 Từ kết quả bảng 3.4 chúng tôi có một vài nhận xét như sau: - Giá trị tỷ trọng của tinh dầu Quất ở 25 0C nhỏ hơn 1, điều này chứng tỏ nó nhẹ hơn nước và trong thành phần tinh dầu Quất có chứa nhiều hợp chất kém phân cực và dễ bay hơi (có thể là alcol, andehyt, xeton…) Như vậy, tinh dầu Quất cũng như đa số các loại tinh dầu khác đều kém bền nhiệt, do đó cần bảo quản chúng ở nhiệt độ thấp để hạn chế các biến đổi xấu ảnh hưởng đến chất lượng tinh dầu thành phẩm Ngoài ra, tinh dầu chiết từ lá có tỷ trọng lớn hơn từ quả và gần bằng 1(d 25 = 0,936) có thể chứng minh trong thành phần tinh dầu lá có chứa các hợp chất kém phân cực với số lượng ít hơn trong quả, nên dễ hòa tan trong môi trường nước chưng cất Điều này cũng góp phần giải thích tại sao lượng tinh dầu thu được từ lá lại ít hơn từ quả nhiều như vậy (0,71ml) - Tỷ lệ tinh dầu hòa tan trong Cồn 90 0 , ở 25 0 C(v/v) của lá nhiều hơn quả, điều đó chứng tỏ trong thành phần tinh dầu lá có chứa nhiều hợp chất phân cực nên dễ tan trong nước và đặc biệt dễ bị tổn hao trong môi trường chưng cất có bổ sung muối Do đó, khi chưng cất nguyên liệu có NaCl không những lượng tinh dầu thu được không tăng lên mà còn giảm đi đáng kể ( từ 0,71ml xuống còn 0,3ml ở nồng độ 10%) - Chỉ số acid (IA) của tinh dầu Quất thấp chứng tỏ tinh dầu khá bền, khó bị nhựa hóa hay biến chất [2] Tuy nhiên, khi so sánh các chỉ số IA, IS, IE của tinh dầu Quất so với tinh dầu từ các loại Citrus khác thì giữa chúng có sự khác biệt lớn (bảng PL13) Điều này có thể được lý giải là do sự khác biệt về mặt thành phần hóa học sẽ được phân tích sau đây - Chỉ số xà phòng hóa (IS) và chỉ số este (IE) của tinh dầu lá lại cao hơn tinh dầu quả rất nhiều chứng tỏ tinh dầu lá có chứa nhiều hợp chất este có thể sôi và bay hơi ở nhiệt độ thấp Nếu nhiệt độ cao nó sẽ bị phân hủy tạo các sản phẩm phụ và làm tổn thất tinh dầu thu hồi, đặc biệt khi chưng cất có muối Ét - 37 - Tuy nhiên, khi so sánh các chỉ số IA, IS, IE của tinh dầu Quất so với tinh dầu từ các loại Citrus khác thì giữa chúng có sự khác biệt lớn Điều này có thể được lý giải từ kết quả phân tích thành phần hóa học bằng phương pháp GC-MS ở mục sau 3.7.3 Kết quả xác định thành phần hóa học của tinh dầu Kết quả xác định thành phần hóa học của tinh dầu quả và lá Quất thu từ qui trình đề xuất được thể hiện ở bảng 3.5 Bảng 3.5 Kết quả phân tích GC/MS tinh dầu quả Quất STT 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Tên % á-cis-Ocimene 2,00 beta-Phellandrene 0,58 beta-Pinene 1,18 beta-Myrcene 5,91 Octanal 0,88 D-Limonene 79,60 á-Linalool 3,07 p-Menth-3-en,2-isopropenyl-1-vinyl0,30 Cyclohexane,2,4-diisopropenyl-1-methyl-1-vinyl0,39 1H-Cyclopenta[1,3]cyclopropa[1,2]benzene… 3,48 Isocaryophyllene 0,36 Germacrene B 0,45 o-Menth-8-ene-4-methenol, à, à-dimethyl-1-vinyl0,48 Guaiol 0,15 Aristolene 0,26 Eudesm-4(14)-en-11-ol 0,90 100,00 Dựa vào kết quả phân tích trên, ta thấy trong thành phần tinh dầu quả Quất có chứa khoảng 16 cấu tử trong đó chiếm chủ yếu là D-Limonene(79,6%), tiếp theo là 1HCyclopenta[1,3]cyclopropa[1,2]benzene…và beta-Myrcene, các cấu tử khác chỉ chiếm diện tích nhỏ Đây là những cấu tử đặc trưng tinh dầu họ Citrus Bảng 3.6 Kết quả phân tích GC/MS tinh dầu lá Quất STT 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Tên alpha-Phellandrene á-cis-Ocimene Bicyclo 4.1.0 heptane,7-(1-methylethylidene) beta-Pinene 2-Cyclohexen-1-ol,4-ethyl-1,4-dimethyl beta-Myrcene Tricyclene Limonene Eucalyptol Camphene Terpinen % 0,12 1,19 0,12 3,25 6,39 0,55 0,59 1,73 1,84 2,37 0,16 Ét - 38 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 á-Linalool 1,3,8-P-Menthatriene p-Menth-1-en-4-ol p-Menth-1-en-8-ol Decanal p-Menth-3-ene,2-isopropenyl-1-vinylp-Menth-1-en-4-ol, acetate p-Menth-1-en-8-ol, acetate Xem phổ Cyclobuta[1,2:3,4]dicyclopentene,1,2,3,3a,3bá… Cyclohexane,2,4-diisopropenyl-1-methyl-1-vinylBycyclo[7.2.0]undec-4-ene,4,11,11-trimethyl-8-methylene1,5-Cycloundecadiene,8,8-dimethyl-9-methyleneCadinene alpha-Caryophyllene Germacrene D Eudesma-4(11),11-diene Germacrene B Cadia-3,9-diene o-Menth-8-ene-4-methenol, à, à-dimethyl-1-vinylNerolidol 1H-Cycloprop e azulen-4-ol,decahydro-1,1,4,7-tetramethyl Spathulenol Guai-1(10)-en-11-ol Eudesma-4(14)-en-11-ol Linalyl propanoate Eudesmol Hinesol Xem phổ Guaiol Kauran-18-al,17-(acetyloxy)-,(4beta)5-Azulenemethanol,1,2,3,4,5à,6,7,8-octahydro-à,à,3á,8á- 44 tetramethyl-,acetate Phytol 7,74 0,35 0,30 0,46 0,39 0,30 1,91 0,12 0,07 0,13 1,45 3,19 0,57 0,28 0,57 8,47 2,80 2,19 0,20 0,83 18,80 0,71 1,02 1,02 0,47 0,51 3,41 4,01 4,93 12,48 1,17 0,26 0,57 100,00 Thành phần tinh dầu lá Quất có chứa rất nhiều cấu tử (44 cấu tử), chiếm diện tích lớn nhất là Nerolidol, tiếp theo là Guaiol và các hợp chất như Linalool; Cyclohexane,2,4-diisopropenyl-1-methyl1-vinyl-; Bycyclo[7.2.0]undec-4-ene,4,11,11-trimethyl-8-methylene-; 1,5-Cycloundecadiene,8,8-dimethyl-9-methylene-,đây là các hợp chất thuộc nhóm ancol Ngoài ra, còn có nhiều este như p-Menth-1-en-4-ol, acetate; p-Menth-1-en-8-ol, acetate, Cadia-3,9diene… và có chứa nhiều nhóm terpen như Limonene; Cadinene; Terpinen và các nhóm acid, aldehyt khác Ét - 39 Như vậy, tinh dầu lá Quất có chứa nhiều thành phần phân cực nên khi sử dụng dung môi nước hay nước có bổ sung muối để chưng cất thì dễ tổn hao các cấu tử trong đó Do vậy, cần tiến hành nghiên cứu thử nghiệm chiết rút tinh dầu lá Quất với nhiều phương pháp khác và đánh giá hiệu suất thu được để có sự đánh giá chính xác hơn về thành phần cũng như đặc tính của nó 3.8 Tính sơ bộ chi phí nguyên, vật liệu để tách tinh dầu trong điều kiện thí nghiệm Kết quả tính chi phí nguyên, vật liệu để tách tinh dầu từ quả quất trong điều kiện thí nghiệm được thể hiện ở bảng 3.7 Bảng 3.7 Chi phí nguyên, vật liệu để tách tinh dầu từ 10 kg vỏ Quất STT 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Nguyên vật liệu Quả Quất NaCl công nghiệp Na 2 SO 4 công nghiệp Điện Nước cất Nước máy Công lao động Lọ sẫm màu10ml Chi phí khác (vận Lượng sử Đơn giá Thành tiền dụng 48kg 1kg 0,5kg 2kWh 0,3m 3 2m 3 3 ngày 32 chiếc (VNĐ) 12.000 75.000 75.000 1.500 3.000 1.500 50.000 2.000 (VNĐ) 576.000 75.000 37.500 3.000 900 3.000 150.000 64.000 1.500.000 chuyển, tiếp thị…) Tổng cộng 2.409.400 Lượng tinh dầu chiết từ 10kg vỏ quả Quất là 3,14ml Như vậy, chi phí sản xuất 10ml tinh dầu quả Quất ước tính là: (2.409.400/314)*10 =76732 VNĐ Kết quả tính chi phí nguyên, vật liệu để tách tinh dầu từ lá quất trong điều kiện thí nghiệm được thể hiện ở bảng 3.8 Bảng 3.8 Chi phí nguyên vật liệu để tách tinh dầu từ 10 kg lá Quất STT 1 2 3 4 5 Nguyên vật liệu Lá Quất Na 2 SO 4 công nghiệp Điện Nước cất Nước máy Lượng sử dụng 10kg 0,5kg 2kWh 0,6m 3 2m 3 Đơn giá (VNĐ) 15.000 75.000 1.500 3.000 1.500 Thành tiền (VNĐ) 150.000 37.500 3.000 1.800 3.000 Ét - 40 6 7 8 Công lao động 3 ngày Lọ sẫm màu10ml 8 chiếc Chi phí khác (vận chuyển, tiếp thị…) Tổng cộng 50.000 2.000 150.000 16.000 1.500.000 1.861.300 Lượng tinh dầu chiết từ 10kg lá Quất là 71ml Như vậy, chi phí sản xuất 10ml tinh dầu quả Quất ước tính là: (1.861.300/71)*10 =262.155 VNĐ So với giá bán các loại tinh dầu khác trên thị trường hiện nay thì giá thành sản xuất với sản phẩm tinh dầu quả là chấp nhận được Tuy nhiên, sản phẩm tinh dầu lá Quất có giá thành tương đối cao do đề tài được tiến hành vào thời điểm khan hiếm nguồn nguyên liệu nên giá mua nguyên phẩm khá cao.Trên thực tế, để đi vào sản xuất quy mô lớn ta sẽ thực hiện phương án khép kín nên sẽ giải quyết các vấn đề tồn tại như trên Đồng thời, có thể tái sử dụng nước chưng chứa NaCl, thu hồi Na 2SO4 và nước máy làm mát ống sinh hàn nên sẽ tiết kiệm được lượng nước dùng Ngoài ra, có thể tận dụng phần nước ngưng để vận dụng trong công nghệ sản xuất nước hoa, sữa tắm… do còn một số lượng tương đối các cấu tử tinh dầu hòa tan nên sẽ mang đến hương thơm dễ chịu đặc trưng cho sản phẩm sau này, nhờ đó góp phần làm giảm giá thành sản phẩm Ét - 41 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1 Kết luận Từ các kết quả nghiên cứu trên đây có thể rút ra các kết luận sau:  Điều kiện thích hợp để tách chiết tinh dầu Quất bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước như sau: - Với tinh dầu quả: Tỷ lệ nước/nguyên liệu là 3/1 (v/w), nồng độ NaCl trong nước ngâm là 10% (w/v), thời gian ngâm NaCl là 3h giờ và chưng cất trong thời gian 70 phút Hiệu suất tách chiết tương ứng là 3,14% (v/w) hay 2,6%(w/w) - Với tinh dầu lá: Tỷ lệ nước/nguyên liệu là 6/1 (v/w), thời gian ngâm là 3h giờ và chưng cất trong thời gian 80 phút Hiệu suất tách chiết tương ứng là 0,71% (v/w) hay 0,66%(w/w)  Tinh dầu Quất thu được có một số tính chất sau:  Tinh dầu quả: Trong suốt, không màu, mùi thơm nhẹ, dịu, đặc trưng của tinh dầu quả Quất  Tinh dầu lá: Trong suốt, màu vàng nhạt, mùi thơm nồng, hấp dẫn, đặc trưng của tinh dầu lá Quất Hình 3.11 Hình ảnh sản phẩm tinh dầu Quất (tinh dầu quả - bên trái; tinh dầu lá - bên phải) - Các chỉ số vật lý và hóa học của tinh dầu Quất nằm trong khoảng giá trị tương ứng của tinh dầu họ Citrus đã được công bố  Tinh dầu quả: Ét - 42 Tỷ trọng (d 25 ) :0,8265 Tỷ lệ tinh dầu hòa tan trong cồn 90 0 ,ở 25 0 C(v/v): 0,85/2 Các chỉ số hóa-lý: Chỉ số acid(IA): 5,3295 Chỉ số xà phòng hóa(IS): 6,732 Chỉ số este(IE): 1,4025 Tinh dầu lá: Tỷ trọng (d 25 ) : 0,936 Tỷ lệ tinh dầu hòa tan trong cồn 90 0 ,ở 25 0 C(v/v): 1,5/2 Các chỉ số hóa-lý: Chỉ số acid(IA): 3,6465 Chỉ số xà phòng hóa(IS): 34,5 Chỉ số este(IE): 30,8535  Bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC/MS) đã xác định được 16 cấu tử chính trong tinh dầu quả Quất trong đó là D-Limonene là thành phần chiếm tỷ lệ cao nhất và 44 cấu tử chính trong tinh dầu lá Quất trong đó hợp chất thuộc nhóm ancol chiếm tỉ lệ cao nhất 2 Kiến nghị 1/ Tiếp tục nghiên cứu chiết tinh dầu Quất bằng các phương pháp hiện đại hơn ( hỗ trợ bằng vi sóng, chiết bằng CO2 siêu tới hạn,…) để tìm ra phương pháp chiết tối ưu 2/ Nghiên cứu thử hoạt tính sinh học của tinh dầu Quất trên các chủng vi sinh vật khác nhau, từ đó kết luận về khả năng ứng dụng của sản phẩm trong công nghiệp thực phẩm, y học, mỹ phẩm Ét - 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 1 Phan Thị Trân Châu, Nguyễn Thị Hiên, Phùng Gia Tường (1997), “Thực hành hóa sinh học”, NXB Giáo Dục 2 Nguyễn Minh Hoàng (2006), “Khảo sát tinh dầu vỏ trái giống Citrus họ Rutaceae”, khoa Công nghệ Sinh học, Đại học Mở thành phố Hồ Chí Minh 3 Nguyễn Thị Lý, Lê Thị Đề Oanh, Phan Thị Bảo Vy, Huỳnh Mai Thảo, “Tách tinh dầu và alkaloid từ quả Quất (Citrus japonica Thumb.)”, Hội nghị khoa học và công nghệ lần 9, Khoa công nghệ hóa học-Đại học Bách Khoa tp HCM 4 Nguyễn Thị Thảo Trân, Trịnh Hoàng Hiếu, Lê Ngọc Thạch,”Khảo sát tinh dầu vỏ trái và lá tắc”(Fortunella japonica, Thumb), Tạp chí phát triển KH&CN, Tập 12, Số 10 – 2009, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG-HCM 5 Nguyễn Văn Minh, “Các phương pháp sản xuất tinh dầu”, Báo điện tử http://www.ioop.org.vn/vn/ - Viện nghiên cứu dầu và cây có dầu - Bản tin khoa học công nghệ 6 Nguyễn Đắc Phát (2010), “Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu từ vỏ bưởi Năm Roi (Citrus grandis (L.) Osbeck var grandis) bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước”, khoa Chế Biến, Đại học Nha Trang 7 Atti-Santos, A C., Serafini, L A., Moyna, P., (2005), Extraction of Essential Oils from Lime (Citrus latifolia Tanaka) by Hydrodistillation and Supercritical Carbon Dioxide, Brazilian Archives of Biology and Technology, Vol.48 (1), p 155-160 8 Ahmad, M M., Salim-ur-rehman, Anjum, F M., Bajwa, E E (2006), Comparative physical examination of various Citrus pell essential oil, Int J Agri Biol., Vol 8, No 2, p.186-190 9 AOAC International CD-ROM (2000), AOAC Official Method 945.06, Specific Gravity (Apparent) of Distilled Liquors, Pycnometer Method 10 Dharmawan, J., (2008), Characterization of Volatile Compounds in selected Citrus Fruits from Asia, Doctor Thesis, Dept Chemistry, NUS, Singapore 11 Thavanapong, N (2006), The essential oil from peel and flower or Citrus Maxima, Master Thesis, Dept Pharmacology, Silpakorn University 12 http://tinhdau.vn 13.http://webphunu.net/content/cach-nau-che-dau-xanh ... xuất quy mô công nghiệp Cụ thể là: - Xác lập điều kiện tối ưu cho việc tách chiết tinh dầu từ vỏ Quất phương pháp chưng cất lôi nước - Đưa quy trình chưng cất tối ưu để thu nhận tinh dầu từ vỏ. .. hành nghiên cứu thực đề tài: ? ?Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu từ vỏ lá Quất phương pháp chưng cất lôi nước? ?? Mục tiêu đề tài là: nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng tới hiệu suất chiết tinh dầu Quất. .. tăng, hòa tan tinh dầu nước tăng phân hủy tăng theo 2.2.4 Dự kiến quy trình tách chiết tinh dầu từ Quất  Quy trình chung dự kiến tách chiết tinh dầu Quất phương pháp chưng cất lôi nước trình bày