BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ LOẠI THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT LÊN SỰ PHÁT TRIỂN VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM CỦA TRICHODERMA SP Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực hiện: LÊ THỊ ÁNH TUYẾT Niên khóa: 2008 - 2012 Tháng 7/ 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ LOẠI THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT LÊN SỰ PHÁT TRIỂN VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM CỦA TRICHODERMA SP Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực THS NGUYỄN NHƯ NHỨT LÊ THỊ ÁNH TUYẾT Tháng 7/ 2012 LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian thực khóa luận tốt nghiệp, bên cạnh cố gắng, nỗ lực thân, em nhận giúp đỡ Thầy cơ, gia đình bạn bè Đó động lực để em hồn thành tốt khóa luận Đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu trường Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh, Bộ mơn Cơng Nghệ Sinh Học tất quý Thầy cô tận tình giảng dạy truyền đạt kiến thức cho em suốt năm học qua Em xin gửi lời biết ơn sâu sắc tới ThS Nguyễn Như Nhứt Người tận tình hướng dẫn, góp ý, tạo điều kiện cho em học hỏi, trao dồi kỹ năng, thao tác không ngừng động viên, quan tâm em suốt trình thực tập Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý Công ty TNHH Gia Tường tỉnh Bình Dương anh chị phòng thí nghiệm giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi giúp em hoàn thành tốt luận văn Cuối xin gửi lòng biết ơn chân thành tới gia đình động viên, quan tâm, hỗ trợ thời gian qua Mặc dù cố gắng hồn thành đề tài tất nhiệt tình lực mình, khó tránh khỏi sai sót, mong nhận đóng góp quý thầy cô bạn Em xin chân thành cảm ơn! Sinh viên thực tập Lê Thị Ánh Tuyết i TÓM TẮT Trong năm gần đây, Trichoderma sử dụng tác nhân sinh học có khả kiểm soát tốt vài loại bệnh dịch hại trồng Một số loại thuốc bảo vệ thực vật ảnh hưởng đến phát triển hoạt tính Trichoderma Đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng số loại thuốc bảo vệ thực vật lên phát triển khả kháng nấm Trichodema sp.” thực nhằm mục tiêu định hướng sử dụng kết hợp Trichoderma với số loại thuốc bảo vệ thực vật công tác quản lý đồng thời bệnh dịch hại trồng Để đạt mục tiêu đề ra, tiến hành xác định khả đối kháng Trichoderma nấm bệnh chon thời gian ni cấy thích hợp để khảo sát ảnh hưởng thuốc bảo vệ thực vật lên phát triển Trichoderma môi trường nuôi cấy lắc Sau đó, phân lập lại xác định khả đối kháng Trichoderma sau q trình ni cấy lắc mơi trường có bổ sung thuốc bảo vệ thực vật Với phương pháp nghiên cứu trên, cho kết hoạt chất Emamectin benzoate 5,5 % w/w (trong thuốc Tanwin), hoạt chất Imidacloprid % + isoprocarb 32 % (trong thuốc Qshisuco ) hoạt chất Flpronil 800 g/kg (trong thuốc Regent) có khả kích thích phát triển Trichoderma hoạt chất Ziram 76% w/w (trong thuốc Ziflo) hoạt chất Thiophanate - methyl 70 % (trong thuốc Topsin) gây ức chế phát triển Trichoderma Các chủng Trichoderma phân lập lại từ canh trường ni cấy có bổ sung thuốc bảo vệ thực vật có khả phát triển chậm có khả đối kháng với nấm bệnh Sclerotium rolfsii Tuy nhiên, khả phát triển hiệu đối kháng thay đổi không đáng kể ii SUMMARY In recent years, Trichoderma is used as a biological agent to control some phytopathology fungi and some pests on plant However, there are many fungal pathogens, also pests, that need to be managed by chemicals The thesis "The effects of some chemical fungicide and pesticides on growth and antagonism of Trichodema sp." was conducted with the purpose using Trichoderma in combination with one or more of either fungicide and pesticides integrated management of diseases and pests on plant To achieve these objectives, the determination of countervailing ability of Trichoderma to fungal pathogens and selection of the appropriate culture time to examine the effects of chemicals on the growth of Trichoderma on the lipsin shake culture were performed Then, Trichoderma was isolated and it antagonist ability after the shaking culture on medium supplemented with different chemicals was determined The result of antagonist ability of two selected Trichoderma strains, to Sclerotium rolfsii phytopathology on the Potato Glucose (PG) medium supplemented with different chemicals with rotation speed of 200 rpm showed that Emamectin benzoate 5,5 % w/w, Imidacloprid % + isoprocarb 32 % and Flpronil 800 g/kg were able to stimulate the growth of Trichoderma while Ziram 76% w/w and Thiophanate - methyl 70 % inhibited the growth of Trichoderma Trichoderma strains which were isolated from the culture developed slower than the ones isolated from stock culture They could antagonize to fungal pathogen, however, their growth and the effective antagonism was insignificantly changed iii MỤC LỤC Trang Lời cảm ơn i Tóm tắt ii Summary iii Danh mục chữ viết tắt vii Danh mục bảng viii Danh mục hình ix Chương Mở đầu 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Yêu cầu 1.3 Nội dung thực Chương Tổng quan tài liệu 2.1 Tổng quan Trichoderma 2.1.1 Vị trí phân loại 2.1.2 Đặc điểm nấm Trichodema 2.1.2.1 Đặc điểm hình thái, sinh trưởng 2.1.2.2 Các sản phẩm trao đổi nấm Trichodema 2.1.2.3 Khả kiểm soát sinh học 2.1.3 Vai trò nấm Trichoderma trồng trọt 11 2.1.3.1 Bảo vệ thực vật 11 2.1.3.2 Cải thiện suất trồng 12 2.1.3.3 Trong lĩnh vực xử lý môi trường 13 2.1.3.4 Nguồn gen để tạo giống trồng 13 2.1.3.5 Bảo quản nông sản 13 2.2 Tổng quan thuốc bảo vệ thực vật 14 2.2.1 Thuốc bảo vệ thực vật 14 2.2.2 Một số biện pháp kiểm soát nấm bệnh, sâu hại trồng 15 2.2.2.1 Thực trạng thuốc BVTV thị trường 15 2.2.2.2 Thực trạng nhân tố kiểm soát sinh học 17 2.2.2.3 Các trở ngại sử dụng nhân tố kiểm soát sinh học 17 2.3 Một số nghiên cứu sử dụng thuốc BVTV với Trichoderma 19 iv 2.4 Sơ lược số loại thuốc bảo vệ thực vật 19 2.4.1 Tanwin 5.5 WDG 19 2.4.2 Regent 800 WG 20 2.4.3 Qshisuco 35 WP 20 2.4.4 Ziflo 76 WG 20 2.4.5 Topsin M 70 WP 20 Chương Vật liệu phương pháp nghiên cứu 22 3.1 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 22 3.2 Vật liệu 22 3.2.1 Chủng giống nghiên cứu 22 3.2.2 Dụng cụ, thiết bị hóa chất 22 3.2.3 Mơi trường thí nghiệm 23 3.2.3.1 Môi trường PGA 23 3.2.3.2 Môi trường PG 23 3.3 Phương pháp 23 3.3.1 Phương pháp bảo quản giống thạch nghiêng 23 3.3.1.1 Bảo quản giống Trichoderma sp 23 3.3.1.2 Bảo quản giống nấm bệnh 23 3.3.2 Phương pháp cấy trung gian nấm bệnh 23 3.3.3 Phương pháp cấy trung gian Trichoderma sp 23 3.3.4 Phương pháp xác định khả đối kháng Trichoderma nấm bệnh 24 3.3.4.1 Nguyên tắc 24 3.3.4.2 Cách tiến hành 24 3.3.5 Phương pháp xác định số lượng bào tử nấm mốc 25 3.3.6 Phương pháp xác định tăng trưởng Trichoderma 25 3.3.7 Phương pháp phân lập chủng Trichoderma sau nuôi cấy mơi trường có bổ sung thuốc BVTV 25 3.3.8 Phương pháp xác định khả đối kháng Trichoderma nấm bệnh môi trường PGA sau nuôi cấy lắc mơi trường có bổ sung thuốc BVTV 26 3.4 Phương pháp nghiên cứu 26 3.4.1 Xác định hiệu ức chế nấm bệnh chủng Trichoderma 26 3.4.2 Khảo sát tăng trưởng Trichoderma 26 v 3.4.3 Khảo sát ảnh hưởng loại thuốc BVTV lên phát triển Trichoderma 26 3.4.4 Xác định hiệu ức chế nấm bệnh chủng Trichoderma phân lập từ canh trường ni cấy lắc có bổ sung thuốc BVTV 27 Chương Kết thảo luận 28 4.1 Hiệu đối kháng chủng Trichoderma nấm bệnh 28 4.2 Sự tăng trưởng chủng Trichoderma môi trường PG 30 4.3 Ảnh hưởng loại thuốc BVTV lên phát triển chủng Trichoderma 31 4.4 Phân lập chủng Trichoderma sau ni cấy mơi trường có bổ sung thuốc BVTV 33 4.5 Hiệu đối kháng chủng Trichoderma sau nuôi cấy môi trường có bổ sung thuốc BVTV nấm bệnh 41 Chương Kết luận đề nghị 47 5.1 Kết luận 47 5.2 Đề nghị 47 Tài liệu tham khảo 48 vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT a: Số bào tử trung bình lớn BCA: Nhân tố kiểm sốt sinh học BVTV: Bảo vệ thực vật Ctv: Cộng tác viên Dđc: Đường kính khuẩn lạc nấm bệnh trung bình đĩa đối chứng Dtt: Đường kính khuẩn lạc nấm bệnh trung bình đĩa đối kháng H: Hiệu ức chế KC: Khuyến cáo L: Số lần pha loãng dịch huyền phù bào tử MT: Môi trường NĐ-CP: Nghị định – Chính phủ NB: Nấm bệnh PG: Potato Glucose PGA: Potato Glucose Agar PTN: Phòng thí nghiệm S: Mật độ bào tử dịch huyền phù TNHH: Trách nhiệm hữu hạn vii DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Hướng dẫn sử dụng Topsin M 70 WP 21 Bảng 3.1 Các chủng Trichoderma sử dụng nghiên cứu 22 Bảng 4.1 Hiệu đối kháng chủng Trichoderma nấm bệnh NB01 28 Bảng 4.2 Sinh khối (mg/ml) chủng Trichoderma canh trường sau nuôi cấy môi trường PG 30 Bảng 4.3 Khối lượng sinh khối chủng TM2 (mg/ml) canh trường ni cấy có bổ sung thuốc BVTV 31 Bảng 4.4 Khối lượng sinh khối chủng T11 (mg/ml) canh trường ni cấy có bổ sung thuốc BVTV 32 Bảng 4.5 Đặc điểm chủng TM2 phân lập lại từ canh trường ni cấy có thuốc Tanwin 33 Bảng 4.6 Đặc điểm chủng TM2 phân lập lại từ canh trường ni cấy có thuốc Topsin 34 Bảng 4.7 Đặc điểm chủng TM2 phân lập lại từ canh trường nuôi cấy có thuốc Qshisuco 35 Bảng 4.8 Đặc điểm chủng TM2 phân lập lại từ canh trường ni cấy có thuốc Regent 36 Bảng 4.9 Đặc điểm chủng T11 phân lập lại từ canh trường ni cấy có thuốc Tanwin 37 Bảng 4.10 Đặc điểm chủng T11 phân lập lại từ canh trường ni cấy có thuốc Topsin 38 Bảng 4.11 Đặc điểm chủng T11 phân lập lại từ canh trường nuôi cấy có thuốc Qshisuco 39 Bảng 4.12 Đặc điểm chủng T11 phân lập lại từ canh trường ni cấy có thuốc Regent 40 Bảng 4.13 Hiệu ức chế nấm bệnh chủng TM2 từ canh trường ni cấy có bổ sung thuốc BVTV 42 Bảng 4.14 Hiệu ức chế nấm bệnh chủng T11 từ canh trường ni cấy có bổ sung thuốc BVTV 44 viii Hình 4.5 Biểu đồ hiệu ức chế nấm bệnh chủng T11 phân lập lại từ canh trường ni cấy có thuốc BVTV nồng độ khuyến cáo (A) (B) (C) (D) (E) (G) Hình 4.6 Hiệu ức chế nấm bệnh chủng T11 phân lập lại từ canh trường ni cấy có thuốc BVTV nồng độ khuyến cáo (A): T11 – NB01; (B): T11.1 – NB01; (C): T11.2 – NB01; (D): T11.3 – NB01; (E): T11.4 – NB01; (G): NB01 đối chứng 45 Nhìn chung chủng Trichoderma sau nuôi cấy với thuốc BVTV nồng độ khuyến cáo có hiệu đối kháng nấm bệnh NB01 Với thuốc kích thích tăng trưởng Tanwin, hiệu đối kháng với nấm bệnh NB01 chủng Trichoderma tăng lên, thuốc kích thích tăng trưởng Regent hiệu đối kháng với nấm bệnh NB01 chủng Trichoderma bị giảm xuống Sau ni cấy mơi trường có thuốc kích thích tăng trưởng Qshisuco, hiệu đối kháng với nấm bệnh NB01của chủng TM2 không đổi, hiệu đối kháng với nấm bệnh NB01 chủng T11 giảm xuống Với thuốc ức chế tăng trưởng Topsin, hiệu đối kháng với nấm bệnh NB01của chủng T11 giảm, hiệu đối kháng với nấm bệnh NB01của chủng TM2 tăng lên Theo kết hình 4.10 cho thấy chủng T11 ni mơi trường có thuốc Qshisuco, Regent Tanwin có hiệu đối kháng cao chủng TM2 ni mơi trường có thuốc Qshisuco, Regent Tanwin Chỉ có chủng TM2 ni mơi trường có thuốc Topsin có hiệu đối kháng cao chủng T11 ni mơi trường có thuốc Topsin Tuy nhiên, nhìn chung hiệu đối kháng với nấm bệnh NB01 chủng Trichoderma thay đổi không đáng kể 46 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.3 Kết luận Kết thúc q trình nghiên cứu chúng tơi rút kết luận sau: Trong chủng Trichoderma nghiên cứu (T03, T11, T15, TDA01, TDA24, TDA29, TM1 TM2), chủng Trichoderma T11 TM2 đối kháng mạnh với nấm bệnh Sclerotium rolfsii (NB01) Sau ngày nuôi cấy, hiệu đối kháng chủng T11 57,8 % chủng TM2 53,1 % Các chủng Trichoderma T11 TM2 nuôi cấy môi trường PG Sau ngày, chủng T11 cho sinh khối cao nhất, đạt khoảng 7,5 mg/ml môi trường Chủng TM2 cho sinh khối cao sau ngày nuôi cấy, đạt khoảng 8,6 mg/ml môi trường Khi nuôi cấy chủng Trichoderma T11 TM2 mơi trường PG có bổ sung loại thuốc BVTV diện thuốc BVTV gây ức chế kích thích phát triển chủng Trichoderma tùy theo loại thuốc Đặc biệt là, hầu hết chủng Trichoderma sau nuôi cấy chung với thuốc BVTV (trừ Ziflo), có khả phát triển đối kháng với nấm bệnh Sclerotium rolfsii Khả phát triển hiệu đối kháng thay đổi không đáng kể Điều cho thấy, sử dụng kết hợp Trichoderma với loại thuốc Tanwin, Topsin, Qshisuco Regent quản lý sâu bệnh hại trồng 5.4 Đề nghị Qua kết thí nghiệm cho thấy, để đề tài phát triển có khả ứng dụng thực tiễn hơn, cần phải nghiên cứu phòng thí nghiệm vấn đề cần kiểm tra xác nồng độ hoạt chất thuốc BVTV kết hợp với Trichoderma nhằm đánh giá xác mức độ ảnh hưởng chúng lên khả phát triển hiệu đối kháng Trichoderma Đồng thời, thử nghiệm với nhiều hoạt chất khác để đưa khuyến cáo sử dụng kết hợp Trichoderma với thuốc BVTV Bên cạnh đó, cần phải thử nghiệm đồng ruộng, nhằm đánh giá hiệu kết hợp Trichoderma loại thuốc BVTV quản lý sâu bệnh hại trồng 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Hứa Võ Thành Long 2010 Sản xuất bào tử nấm Trichoderma spp làm thuốc trừ nấm bệnh trồng Khóa luận tốt nghiệp cử nhân khoa học, ngành Công Nghệ Sinh Học, Trường Đại học Kỹ Thuật Cơng Nghệ Tp Hồ Chí Minh Huỳnh Văn Phục 2006 Khảo sát tính đối kháng nấm Trichoderma spp.đối với Rhizoctonia, Fusarium oxysporum gây bệnh lúa bắp Khóa luận tốt nghiệp, ngành Cơng Nghệ Sinh Học, Trường Đại Học Nơng Lâm, Tp Hồ Chí Minh Nguyễn Lý Nhơn 2011 Nghiên cứu thu nhận chế phẩm sinh khối vi khuẩn Bacillus subtilis phòng trừ số nấm bệnh hại trồng Khóa luận tốt nghiệp, ngành Công Nghệ Sinh Học, Trường Đại Học Nông Lâm, Tp Hồ Chí Minh Nguyễn Phương Lam 2011 Nghiên cứu sử dụng phối hợp Bacillus với thuốc diệt nấm để ức chế nấm bệnh trồng Khóa luận tốt nghiệp đại học, ngành Công Nghệ Sinh Học, Trường Đại Học Tơn Đức Thắng Tp Hồ Chí Minh Nguyễn Thị Lan Hương 2011 Nghiên cứu tạo chế phẩm Trichoderma đối kháng với số chủng nấm bệnh Phytophthora gây bệnh tiêu Luận văn tốt nghiệp đại học, ngành Công Nghệ Sinh Học, Trường Đại Học Tôn Đức Thắng Tp Hồ Chí Minh Phạm Thị Thảo 2011 Khảo sát ảnh hưởng số loại thuốc diệt nấm lên phát triển hiệu ức chế nấm bệnh Bacillus Khóa luận tốt nghiệp, ngành Cơng Nghệ Sinh Học, Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên Tp Hồ Chí Minh Tơ Duy Khương 2009 Khảo sát sinh tổng hợp enzyme chitinase Trichoderma spp.và khả đối kháng số nấm bệnh thực vật Luận văn thạc sỹ khoa học ngành sinh hóa, Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên Tp Hồ Chí Minh Tài liệu Tiếng Anh Ammanuel Bourguignon 2008 Ecology and diversity of indigenous Trichoderma species in vegetable cropping systems, National Centre for Advanced BioProtection Technologies, Lincoln University, Canterbury, New Zealand 48 De Schutter B, Aerts R, Rombouts L, 2002, The influence of fungicides on the growth of Trichoderma asperellum, Meded Rijksuniv Gent Fak Landbouwkd Toegep Biol Wet., 67 (2): 291-298 10 Emma W Gachomo and Simeon O Kotchoni, 2008, The use of Trichoderma harzianum and T viride as potential biocontrol agents against peanut microflora and their effectiveness reducing aflatoxin contamination of infected kernels Biotechnology, (3): 439-447 11 Enrique Monte, 2001, Understanding Trichoderma: between biotechnology and microbial ecology, Int Microbiol, 4: 1-4 12 Gary E Harman, Thomas Björkman, Kristen Ondik, and Michal Shoresh, 2008, Changing paradigms on the mode of action and uses of Trichoderma spp for biocontrol, Outlooks on Pest Management, February 13 Ikram-ul-Haq, Uzma Hameed, Kiran Shahzadi, M Mohsin Javed, Sikander Ali and M.A Qadeer Biotechnology Research Centre, Department of Botany, Government College University, Lahore, Pakistan 2005 Cotton Saccharifying Activity of Cellulases by Trichoderma harzianum UM-11 in Shake Flask International Journal of Botany, (1): 19-22 14 Mausam Verma, Satinder K Brar, R D Tyagi, R Y Surampalli and J R Valesro, 2007, Antagonistic fungi, Trichoderma spp.: Panoply of biological control, Biochemical Engineering Journal, 37: 1-20 15 M Isabel Trillas, Eva Casanova, Lurdes Cotxarrera, José Ordovás, Celia Borrero, and Manuel Avilés, 2006, Composts from agricultural waste and the Trichoderma asperellum strain T-34 suppress Rhizoctonia solani in cucumber seedlings, Biology Control, 39: 32-38 16 Quirico Mighell and Giovanni Antonio Farris, 2007 Biodiversity of the genus Trichoderma and identification of marker genes involved in the antagonism between Trichoderma spp and plant pathogenic fungi Universita’ degli studi di sassari 17 Zamir K Punja and Raj S Utkhede, 2003, Using fungi and yeasts to manage vegetable crop diseases, TRENDS in Biotechnology, 21 (9): 400-407 Tài liệu tham khảo internet 18 http://images.google.com.vn/imgres?imgurl Ngày truy cập 14/04/2012 49 19 Tình hình nhập sử dụng thuốc bảo vệ thực vật Việt Nam Vương Trường Giang Bùi Sĩ Doanh http://vea.gov.vn/VN/truyenthong/tapchimt/cccs/Pages/T%C3%ACnhh%C3%ACn hnh%E1%BA%ADpkh%E1%BA%A9uv%C3%A0s%E1%BB%ADd%E1%BB% A5ngthu%E1%BB%91cb%E1%BA%A3ov%E1%BB%87th%E1%BB%B1cv%E1 %BA%ADt%E1%BB%9FVi%E1%BB%87tNam.aspx Ngày truy cập 14/04/2012 20 Các biện pháp xử lý côn trùng hại ngô nông sản kho Minh Chung http://www.pestcontrol.com.vn/CAC-BIEN-PHAP-PHONG-TRU-CON-TRUNGHAI-NGO-VA-NONG-SAN-TRONG-KHO_C483_D353.htm Ngày truy cập 14/04/2012 50 PHỤ LỤC Bảng xử lý thống kê trắc nghiệm phân hạng hiệu đối kháng chủng Trichoderma nấm bệnh NB01 Bảng 1.1 Xử lý thống kê hiệu đối kháng chủng Trichoderma NB01 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 27.396 3.914 50.663 0.0000 Within 32 2.472 0.077 Total 39 29.868 Coefficient of Variation = 5.18% Bảng 1.2 Trắc nghiệm phân hạng hiệu đối kháng chủng Trichoderma NB01 Error Mean Square = 0.1320 Error Degrees of Freedom = 45 No of observations to calculate a mean = 10 Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.4370 s_ = 0.1149 at alpha = 0.010 x Original Order Mean = 3.550 Mean = 4.570 Mean = 4.080 Mean = 4.500 Mean = 3.930 Ranked Order D A BC AB CD Mean = 4.570 A Mean = 4.500 AB Mean = 4.080 Mean = 3.930 CD Mean = 3.550 D BC Bảng xử lý thống kê trắc nghiệm phân hạng tăng trưởng chủng Trichoderma Bảng 2.1 Xử lý thống kê tăng trưởng chủng T11 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 5.657 1.131 1.480 0.2452 Within 18 13.763 0.765 Total 23 19.420 Coefficient of Variation = 12.41% Bảng 2.2 Xử lý thống kê tăng trưởng chủng TM2 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12.202 2.440 1.647 0.1984 Within 18 26.668 1.482 Total 23 38.870 Coefficient of Variation = 15.46% Bảng xử lý thống kê trắc nghiệm phân hạng ảnh hưởng thuốc bảo vệ thực vật lên phát triển chủng Trichoderma Bảng 3.1 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Tanwin lên phát triển chủng Trichoderma T11 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 4.656 1.552 4.242 0.0454 Within 2.927 0.366 Total 11 7.582 Coefficient of Variation = 11.47% Bảng 3.2 Trắc nghiệm phân hạng ảnh hưởng thuốc Tanwin lên phát triển chủng Trichoderma T11 Error Mean Square = 0.3660 Error Degrees of Freedom = No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 1.139 s_ = 0.3493 at alpha = 0.050 x Original Order Mean Mean Mean Mean = = = = 6.130 5.530 4.970 4.470 Ranked Order A AB AB B Mean Mean Mean Mean = = = = 6.130 5.530 4.970 4.470 A AB AB B Bảng 3.3 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Topsin lên phát triển chủng Trichoderma T11 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 0.583 0.194 0.330 Within 4.707 0.588 Total 11 5.289 Coefficient of Variation = 67.19% Bảng 3.4 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Qshisuco lên phát triển chủng Trichoderma T11 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 10.217 3.406 6.822 0.0135 Within 3.993 0.499 Total 11 14.210 Coefficient of Variation = 40.37% Bảng 3.5 Trắc nghiệm phân hạng ảnh hưởng thuốc Qshisuco lên phát triển chủng Trichoderma T11 Error Mean Square = 0.4990 Error Degrees of Freedom = No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 1.330 s_ = 0.4078 at alpha = 0.050 x Original Order Mean Mean Mean Mean = = = = 3.300 1.600 1.070 1.030 Ranked Order A B B B Mean Mean Mean Mean = = = = 3.300 1.600 1.070 1.030 A B B B Bảng 3.6 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Regent lên phát triển chủng Trichoderma T11 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 12.847 4.282 2.676 0.1181 Within 12.800 1.600 Total 11 25.647 Coefficient of Variation = 62.21% Bảng 3.7 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Ziflo lên phát triển chủng Trichoderma T11 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 2.249 0.750 9.779 0.0047 Within 0.613 0.077 Total 11 2.862 Coefficient of Variation = 7.85% Bảng 3.8 Trắc nghiệm phân hạng ảnh hưởng thuốc Ziflo lên phát triển chủng Trichoderma T11 Error Mean Square = 0.07700 Error Degrees of Freedom = No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.7602 s_ = 0.1602 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean = = = = 3.000 3.300 3.630 4.170 Ranked Order B B AB A Mean Mean Mean Mean = = = = 4.170 3.630 3.300 3.000 A AB B B Bảng 3.9 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Tanwin lên phát triển chủng Trichoderma TM2 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 11.687 3.896 9.638 0.0049 Within 3.233 0.404 Total 11 14.920 Coefficient of Variation = 14.78% Bảng 3.10 Trắc nghiệm phân hạng ảnh hưởng thuốc Tanwin lên phát triển chủng Trichoderma TM2 Error Mean Square = 0.4040 Error Degrees of Freedom = No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 1.741 s_ = 0.3670 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean = = = = 5.700 4.730 3.570 3.200 Ranked Order A AB B B Mean Mean Mean Mean = = = = 5.700 4.730 3.570 3.200 A AB B B Bảng 3.11 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Topsin lên phát triển chủng Trichoderma TM2 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 7.697 2.566 2.345 0.1491 Within 8.753 1.094 Total 11 16.450 Coefficient of Variation = 32.19% Bảng 3.12 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Qshisuco lên phát triển chủng Trichoderma TM2 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 3.540 1.180 1.173 0.3788 Within 8.047 1.006 Total 11 11.587 Coefficient of Variation = 64.02% Bảng 3.13 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Regent lên phát triển chủng Trichoderma TM2 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 1.349 0.450 6.663 0.0144 Within 0.540 0.068 Total 11 1.889 Coefficient of Variation = 16.15% Bảng 3.14 Trắc nghiệm phân hạng ảnh hưởng thuốc Regent lên phát triển chủng Trichoderma TM2 Error Mean Square = 0.06800 Error Degrees of Freedom = No of observations to calculate a mean = Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.4910 s_ = 0.1506 at alpha = 0.050 x Original Order Mean Mean Mean Mean = = = = 2.100 1.330 1.730 1.270 Ranked Order A B AB B Mean Mean Mean Mean = = = = 2.100 1.730 1.330 1.270 A AB B B Bảng 3.15 Xử lý thống kê ảnh hưởng thuốc Ziflo lên phát triển chủng Trichoderma TM2 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 0.727 0.242 1.167 0.3807 Within 1.660 0.208 Total 11 2.387 Coefficient of Variation = 31.06% Bảng xử lý thống kê trắc nghiệm phân hạng hiệu đối kháng chủng Trichoderma phân lập lại từ canh trường ni cấy có bổ sung thuốc bảo vệ thực vật nấm bệnh NB01 Bảng 4.1 Xử lý thống kê hiệu đối kháng chủng Trichoderma T11 phân lập lại từ canh trường ni cấy có bổ sung thuốc bảo vệ thực vật nấm bệnh NB01 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 7.093 1.773 13.473 0.0000 Within 45 5.923 0.132 Total 49 13.016 Coefficient of Variation = 8.79% Bảng 4.2 Trắc nghiệm phân hạng hiệu đối kháng chủng Trichoderma T11 phân lập lại từ canh trường ni cấy có bổ sung thuốc bảo vệ thực vật nấm bệnh NB01 Error Mean Square = 0.1320 Error Degrees of Freedom = 45 No of observations to calculate a mean = 10 Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.4370 s_ = 0.1149 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 3.550 4.570 4.080 4.500 3.930 D A BC AB CD Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 4.570 4.500 4.080 3.930 3.550 A AB BC CD D Bảng 4.3 Xử lý thống kê hiệu đối kháng chủng Trichoderma TM2 phân lập lại từ canh trường ni cấy có bổ sung thuốc bảo vệ thực vật nấm bệnh NB01 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 6.709 1.677 18.153 0.0000 Within 45 4.158 0.092 Total 49 10.867 Coefficient of Variation = 7.10% Bảng 4.4 Trắc nghiệm phân hạng hiệu đối kháng chủng Trichoderma TM2 phân lập lại từ canh trường ni cấy có bổ sung thuốc bảo vệ thực vật nấm bệnh NB01 Error Mean Square = 0.09200 Error Degrees of Freedom = 45 No of observations to calculate a mean = 10 Duncan's Multiple Range Test LSD value = 0.3648 s_ = 0.09592 at alpha = 0.010 x Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 3.630 4.280 4.380 4.760 4.370 Ranked Order C B B A B Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 4.760 4.380 4.370 4.280 3.630 A B B B C ... triển nhanh, khuẩn lạc chuyển nhanh sang màu xanh hay xanh tối, có bào tử trơn láng, màu xanh, hình cầu với kích thước (2,7 – 3,5) x (2,1 – 2,6 μm) Trichoderma hamatum có bào tử màu xanh, trơn,... i Tóm tắt ii Summary iii Danh mục chữ viết tắt vii Danh mục bảng viii Danh mục hình ix Chương Mở đầu 1.1 Đặt... the shaking culture on medium supplemented with different chemicals was determined The result of antagonist ability of two selected Trichoderma strains, to Sclerotium rolfsii phytopathology on