CÁC VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT ĐẠI CƯƠNG VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT Họ vi khuẩn đường ruột họ lớn bao gồm trực khuẩn Gram âm, chia thành nhóm: Nhóm vi khuẩn gây bệnh Nhóm vi khuẩn gây bệnh hội 1.1 Đặc điểm sinh học VKĐR - Hình thể: hình trực khuẩn, kích thước 2-4 x 0,4-0,6 micromet - Một số lồi có lơng - Một số có vỏ - Tính chất nuôi cấy: Các VKĐR nuôi cấy dễ + Trên môi trường lỏng, vi khuẩn làm đục môi trường sau 12-18h ni cấy, số tạo váng lắng cặn đáy ống + Trên môi trường đặc, vi khuẩn mọc tạo thành dạng khuẩn lạc: S, R, M - Tính chất sinh vật hố học: Ưa khí kỵ khí tuỳ ngộ, oxydase (-) 100% chủng; lên men khơng lên men số loại đường; phát triển không số môi trường citrat simmon, Basikov, Ure-indol - Kháng nguyên: KN thân O, KN lông H KN K - Gây bệnh nội độc tố: phức hợp lipopolysaccharit, chịu nhiệt 1.2 Khả gây bệnh Các vi khuẩn đường ruột chủ yếu gây bệnh đường tiêu hoá tiêu chảy, viêm ruột ỉa chảy, viêm đại tràng Mỗi lồi vi khuẩn gây bệnh vị trí khác đường tiêu hoá chế gây bệnh khác Ngồi vi khuẩn đường ruột gây bệnh ngồi đường tiêu hố viêm đường tiết niệu, viêm màng não, viêm phổi, phế quản đặc biệt nhiễm khuẩn huyết Có thể nói vi khuẩn gây bệnh quan thể, bệnh song hành độc lập với bệnh đường tiêu hoá 1.3 Chẩn đoán Lấy bệnh phẩm tuỳ thuộc vào quan bị tổn thương đường tiêu hoá, đường tiết niệu, đường sinh dục… Bệnh phẩm sau lấy cần xét gnhiệm sớm - Nhuộm soi trực tiếp - Nuôi cấy phân lập: cấy bệnh phẩm vào môi trường chọn lọc cho vi khuẩn đường ruột Mac conkey, XLD… để tìm hiểu tính lên men đường lactose để có hướng chẩn đoán phù hợp với giống khác Nhuộm Gram từ khuẩn lạc trực khuẩn Gram âm, tiến hành định danh 1.4 Phòng điều trị : - Phòng khơng đặc hiệu: - Điều trị: dựa vào kết kháng sinh đồ Nếu khơng có điều kiện làm KSĐ sử dụng kháng sinh chọn lọc với trực khuẩn Gram âm, không nên lạm dụng kháng sinh phổ rộng dễ dẫn đến loạn khuẩn điều trị nhiễm khuẩn đường tiêu hoá SHIGELLA 2.1 Đặc điểm sinh học Hình thể: Trực khuẩn ngắn, 1- 3mm, hai đầu tròn, không vỏ, không lông, không sinh bào tử bắt màu Gram âm Nuôi: - Dễ nuôi môi trường ni cấy thơng thường, ưa khí tuỳ ngộ Trên mơi trường lỏng làm đục đều, môi trường đặc sau 24h có khuẩn lạc dạng S, chuyển thành R Đề kháng: Sức đề kháng Vi khuẩn chết 100 0C/ phút, ánh sáng mặt trời/30 phút Các hố chất khử trùng thơng thường dễ diệt vi khuẩn Trong phân vi khuẩn sống vài giờ, 50- 600C/ 20- 30 phút Ở quần áo vi khuẩn sống tuần Trong nước vi khuẩn lỵ sống tháng, O0C/ tháng Kháng sinh có tác dụng với vi khuẩn lỵ, nhiên có tỷ lệ đáng kể vi khuẩn kháng thuốc Kháng nguyên phân loại Shigella có kháng nguyên O Căn vào KNO, chia làm nhóm - Nhóm A: Sh.dysenteria gồm 10 typ huyết thanh, thường gặp typ Sh shigae typ Sh schmitzii - Nhóm B: Sh.flexneri gồm typ huyết Hay gặp typ 2a, 1b gây bệnh cho trẻ nhỏ - Nhóm C: Sh.boydii gồm 15 typ huyết - Nhóm D: Sh.sonnei gồm typ huyết Shigella có KN K vài KN chung với vi khuẩn đường ruột khác có giá trị thực tế lâm sàng 2.2 Khả gây bệnh - Độc lực: Các Shigella có nội độc tố có cấu tạo KN O, tác dụng gây rối loạn phản ứng ruột + Ngoại độc tố: có nhóm A, chất protein enterotoxin + Sh shigae có khả xâm nhập biểu mô nên gây bệnh nặng - Gây bệnh cho người: bệnh lỵ trực khuẩn viêm ruột ỉa chảy - Bệnh lỵ : vi khuẩn lây qua ăn uống, xuống dày dến ruột phát triển chủ yếu niêm mạc đại tràng, tiết độc tố, gây hội chứng nhiễm độc nặng, đau quặn bụng, mót rặn, ngồi nhày máu Tổn thương chỗ làm niêm mác đại tràng phù nề, xung huyết, loét nông, rộng Vi khuẩn thải theo phân ngồi - Một số vi khuẩn lỵ gây viêm dày ruột cấp tính trẻ em gây dịch ỉa chảy người lớn Đôi vi khuẩn lỵ tồn lâu phân bệnh nhân người khỏi bệnh người lành mang mầm bệnh Đây nguồn truyền nhiễm nguy hiểm cho cộng đồng - Miễn dịch: sau khỏi bệnh có miễn dịch yếu, khơng có tác dụng bảo vệ Cơ chế miễn dịch bảo vệ chủ yếu IgA tiết tạo niêm mạc ruột có tác dụng bảo vệ chỗ 2.3 Chẩn đoán - Phương pháp hiển vi: nhuộm soi hình thể giá trị chẩn đốn - Phân lập vi khuẩn: Bệnh phẩm phân tăm bơng ngốy hậu mơn Bệnh phẩm cần gửi đến phòng thí nghiệm Nếu khơng gửi bệnh phẩm phải cấy vào môi trường vận chuyển giữ OC Nuôi cấy phân lập: cấy bệnh phẩm môi trường phân lập SS, Indo, để tủ ấm 24h, nhận định khuẩn lạc nghi ngờ Shigella sau 24h tạo khuẩn lạc trong, không thay đổi màu mơi trường khơng lên men đường lactose Từ khuẩn lạc nhuộm Gram, thử oxydase, cấy chuyển vào mơi trường chẩn đốn đường ruột Xác định type kháng huyết đặc hiệu - Chẩn đoán huyết thanh: khơng dùng giá trị đặc hiệu nhóm 2.4 Phòng bệnh: phòng vi khuẩn đường ruột khác - Phòng đặc hiệu: nhiều nước nghiên cứu vacxin đường uống, vacxin sống, giảm độc lực SALMONELLA 3.1 Đặc điểm sinh học - Hình thể: Trực khuẩn, bắt màu Gram âm, 1- x 0,5- 0,7mm Có nhiều lơng xung quanh thân, di động Khơng có vỏ, khơng bào tử - Ni: - Vi khuẩn dễ ni, vừa ưa khí vừa kỵ khí, pH 6-8, nhiệt độ thích hợp 37 0C Trên mơi trường phân lập, khuẩn lạc 24 dạng S, tròn, nhẵn kích thước - mm Có thể gặp dạng R nuôi cấy lâu môi trường nhân tạo Trên môi trường lỏng vi khuẩn mọc làm đục mơi trường - Sức đề kháng: Vi khuẩn có sức đề kháng cao ngoại cảnh Trong nước canh trùng sống vài tháng, phân vài tuần, nước đá - tháng Vi khuẩn bị tiêu diệt 100 0C/ phút Formol 5% / phút, 600C/ 20- 30 phút Một số loại kháng sinh diệt vi khuẩn chloramphenicol, quinolon - Kháng nguyên: có loại kháng nguyên - Kháng nguyên O: chất lipopolysacharide Dựa vào KN O để xếp loại Salmonella điều tra dịch tễ học - Kháng ngun H: KN lơng Có ứng dụng để chẩn đoán huyết - Kháng nguyên K: ký hiệu KN Vi, có S typhi S pa paratyphi C * Phân loại: dựa vào tính chất sinh vật hố học cấu trúc kháng nguyên người ta phân loài Salmonella khác Hiện người ta biết có khoảng 1500 lồi khác + Salmonella typhi : gây bệnh thương hàn hay gặp Việt Nam + Salmonella paratyphi A: gây bệnh thương hàn + Salmonella paratyphi B: gây bệnh thương hàn + Salmonella paratyphi C: gây nhiễm khuẩn nhiễm độc thức ăn + Salmonella typhi murium: gây nhiễm khuẩn nhiễm độc thức ăn + Salmonella suis: gây nhiễm khuẩn nhiễm độc thức ăn + Salmonella enteritidis: gây nhiễm khuẩn nhiễm độc thức ăn 3.2 Khả gây bệnh Salmonella Tuỳ lồi Salmonella mà gây bệnh cho người gây bệnh cho động vật Một số lồi gây bệnh cho người động vật 3.2.1 Salmonella gây bệnh thương hàn Các mầm bệnh quan trọng: + S typhi: tác nhân quan trọng bệnh thương hàn người, tỷ lệ gặp bệnh nhân cao, Việt Nam + S paratyphi A: tác nhân hay gặp bệnh nhân sau S.typhi, nước ta vi khuẩn tương đối phổ biến + S paratyphi B: lồi vi khuẩn gặp gây bệnh người động vật Việt nam gặp vi khuẩn + S paratyphi C: vi khuẩn vừa gây bệnh thưng hàn vừa gây bệnh nhiễm khuẩn nhiễm độc thức ăn, bệnh thường gặp nước Đông Nam châu Việt Nam 3.2.2 Cơ chế gây bệnh thương hàn người: Cơ chế sinh bệnh theo Reilly: vi khuẩn xâm nhập vào thể người qua đường tiêu hoá ăn phải thức ăn, nước uống bị nhiễm khuẩn Sau qua dày, vi khuẩn vào ruột non xâm nhập qua niêm mạc, tới hạch bạch huyết bị chặn lại phát triển Thời kỳ chưa có triệu chứng lâm sàng Tại vi khuẩn phát triển xâm nhập vào máu, số vi khuẩn bị dung giải giải phóng nội độc tố nên gây triệu chứng bệnh thương hàn: sốt cao, ly bì Từ máu, vi khuẩn xâm nhập vào gan, lách quay trở lại máu hạch bạch huyết Vi khuẩn gây sưng loét mảng Payer gây chảy máu thủng ruột Từ lách, gan vi khuẩn vào máu đợt gây sốt vào túi mật xuống ruột theo phân ngồi kéo dài tới 2-3 tuần, có trường hợp tới vài năm Vi khuẩn đào thải qua nước tiểu 25% trường hợp Nội độc tố kích thích thần kinh phó giao cảm ruột gây triệu chứng loét, hoại tử chảy máu gây thủng ruột Đây biến chứng nặng bệnh thương hàn Nội độc tố theo máu lên thần kinh trung ương kích thích trung tâm thần kinh thực vật não thất Bệnh nhân có triệu chứng sơt cao hình cao ngun, mạch chậm (mạch nhiệt phân ly), trạng thái li bì, truỵ tim mạch, tử vong Những bệnh nhân qua khỏi sau bị bệnh 5% tiếp tục thải vi khuẩn theo phân nên họ trở thành nguồn truyền nhiễm nguy hiểm Miễn dịch: Sau khỏi bệnh, bệnh nhân có KT kháng lại KNO H máu không bảo vệ thể Tại đường ruột có kháng thể IgA tiết có vai trò quan trọng dự phòng bệnh 3.3 Chẩn đốn - Bệnh phẩm: - Nhuộm soi trực tiếp: Phương pháp có giá trị chẩn đoán, chủ yếu để xác diịnh lượng bạch cầu phân để định hướng chẩn đốn - Ni cấy Với trường hợp nghi ngờ mắc bệnh thương hàn: + Tuần 1: cấy máu tìm vi khuẩn gây bệnh phương pháp có giá trị chẩn đốn Cần lấy bệnh nhân sốt cao chưa điều trị kháng sinh Lấy 5-10 ml máu tĩnh mạch cấy vào bình canh thang BHI, ủ ấm 37 0C/24h Khi vi khuẩn mọc cấy chuyển môi trường phân lập để xác định vi khuẩn Tỷ lệ cấy máu (+) tới 90% bệnh nhân chưa dùng kháng sinh Có thể kết hợp lấy máu để tách chiết huyết làm Widal + Tuần 2: lấy máu, cấy máu chiết huyết làm phản ứng Widal Tốt lấy máu lần, lần hai cách lần thứ ngày tìm biến động kháng thể Cấy phân định từ tuần thứ bệnh phẩm đươc cấy vào mơi trường có tính chất chọn lọc SS (SalmonellaShigella), Mac conkey, XLD… + Tuần 3: cấy phân tìm vi khuẩn Cấy bệnh phẩm vào mơi trường SS, Mac conkey ủ ấm 37 0C, sau 24h đọc kết quả, tìm khuẩn lạc nghi ngờ, xác định tính chất sinh vật hố học thử ngưng kết Chỉ cho viện người bệnh có kết cấy phân lần liên tiếp âm tính Cấy phân áp dụng với người nghi ngờ người lành mang mầm bệnh, người làm cấp dưỡng để dự phòng bệnh Phản ứng Widal tiến hành nơi không nuôi cấy nuôi cấy âm tính, lấy máu lần Đây phản ứng ngưng kết với kháng nguyên O H vi khuẩn thương hàn Hiệu giá ngưng kết có giá trị chẩn đốn với KNO 1/200, KN H 1/400 Trường hợp gây nhiễm trùng nhiễm độc thức ăn: không lấy máu mà cấy phân, chất nôn lên môi trường phân lập chẩn đốn thương hàn Xác định lồi phản ứng sinh hố kháng huyết 3.4 Phòng bệnh điều trị - Phòng bệnh khơng đặc hiệu + Thực vệ sinh ăn uống, ăn chín, uống nước đun sôi, rửa tay trước ăn, sau vệ sinh + Sử dụng nguồn nước thực phẩm + Xử lý tốt chất thải rác thải, tiêu diệt động vật mang mầm bệnh ruồi, gián, chuột - Phòng bệnh đặc hiệu + Trước dùng vacxin TAB, ml vacxin có tỷ tế bào S typhi, 250 triệu tế bào S paratyphi A, 250 triệu tế bào S paratyphi B Vacxin không sử dụng hiệu bảo vệ không cao Hiện nay, số nước nghiên cứu sản xuất vacxin thương hàn sống, giảm độc lực dùng đường uống vacxin chiết từ kháng nguyên Vi Salmonella để phòng bệnh -Điều trị: kháng sinh nhóm quinolon (Nofloxacin, Ofloxacin…), Ceftriaxon định điều trị hiệu quả, có tỷ lệ vi khuẩn kháng lại kháng sinh ESCHERICHIA COLI E coli gọi vi khuẩn đại tràng Là vi khuẩn sống cộng sinh, chiếm 80% vi khuẩn ruột Vi khuẩn tổng hợp số vitamin B, K, E giữ cân quần thể vi khuẩn đường ruột 4.1 Đặc điểm sinh học Hình thể Trực khuẩn Gram âm, kích thước - x 0,4 - 0,7 mm Có lơng quanh thân, khơng bào tử, số có vỏ Ni Dễ ni, ưa khí kỵ khí, nhiệt độ thích hợp - 40oC, pH 5,5 - - Trên môi trường lỏng làm đục môi trường tạo thành váng mỏng vòng trắng quanh ống nghiệm Mơi trường đặc khuẩn lạc dạng S, màu trắng, ngày sau khuẩn lạc chuyển sang màu xám xanh, mọc lan rộng xung quanh Có thể gặp khuẩn lạc R M Đề kháng: Sức đề kháng yếu 55 - 60oC/ 30 phút Dễ bị diệt hố chất khử trùng thơng thường Kháng nguyên : có loại - Kháng nguyên O : phức tạp (khoảng 150 yếu tố) - Kháng ngun H : có 40 typ, khơng chịu nhiệt, cồn, men tiêu protein - Kháng nguyên K : có kháng nguyên L,B không chịu nhiệt, A,M kháng nguyên chịu nhiệt ( khoảng 100 kháng nguyên K khác Phân loại : dựa vào KN.O, KN.H KN.K 4.2 Khả gây bệnh Bình thường E coli sống cộng sinh đại tràng, không gây bệnh, số chủng có độc lực có khả gây bệnh - Độc lực : có nội độc tố tác động lên ruột Một số chủng có ngoại độc tố tác động lên tế bào thần kinh Ngồi có yếu tố tan máu, yếu tố tiêu Fibrin, gây sốt Có nhóm EPEC : Entero pathogenic E.coli : E.coli gây bệnh ETEC : Entero toxigenic E.coli : E.coli sinh độc tố EIEC : Entero invasive E.coli : E.coli xâm nhập EHEC : Entero haemorrhagic E.coli : E.coli sinh serotoxin - Khả gây bệnh : + Gây bệnh hội sức đề kháng thể giảm sút + Gây viêm dày ruột, thường gặp trẻ nhỏ + Gây nhiễm khuẩn mủ vết thương, vết bỏng + Gây nhiễm khuẩn đường tiết niệu, nguyên chủ yếu nguyên vi khuẩn , đặc biệt hay gặp trường hợp thai nghén, sỏi tiết niệu hay thủ thuật thông niệu đạo, niệu quản ngược dòng + Viêm phế quản, phổi, đường mật, đường viêm não màng não, viêm xoang + Chưa gây bệnh thực nghiệm 4.3 Chẩn đoán - Phương pháp hiển vi: có giá trị chẩn đốn sơ bệnh phẩm lấytừ đường tiêu hoá Lấy mủ, dịch nhuộm soi thấy vi khuẩn bạch cầu đa nhân - Phương pháp phân lập : Lấy bệnh phẩm cấy vào môi trường phân lập SS, Endo, Mac conkey ủ ấm 37 0C sau 24 giờ, chọn khuẩn lạc nghi ngờ ( lactose (+) ), xác định tính chất sinh hố, làm thử nghiệm IMVIC Cuối xác định týp phản ứng ngưng kết phiến kính với kháng huyết đặc hiệu - Chẩn đốn huyết : khơng có giá trị chẩn đốn huyết bệnh nhân nhiễm E coli khơng có ngưng kết tố đặc hiệu 4.4 Phòng bệnh điều trị - Phòng bệnh: với phòng vi khuẩn đường ruột (vệ sinh thực phẩm, ăn uống ) Xử lý chất thải tốt - Điều trị : dùng kháng sinh 4.5 Chỉ số Coli - Chỉ số Coli nước phản ánh mức độ nhiễm bẩn nước - Chỉ số Coli số Coli có lít nước 1gram chất rắn Tiêu chuẩn quốc tế : - coli/ lít Tiêu chuẩn Việt Nam : - 20 coli/ lít Là nước - Hiệu giá coli : số ml nước có coli  ... coli gọi vi khuẩn đại tràng Là vi khuẩn sống cộng sinh, chiếm 80% vi khuẩn ruột Vi khuẩn tổng hợp số vitamin B, K, E giữ cân quần thể vi khuẩn đường ruột 4.1 Đặc điểm sinh học Hình thể Trực khuẩn. .. loài vi khuẩn gặp gây bệnh người động vật Vi t nam gặp vi khuẩn + S paratyphi C: vi khuẩn vừa gây bệnh thưng hàn vừa gây bệnh nhiễm khuẩn nhiễm độc thức ăn, bệnh thường gặp nước Đông Nam châu Vi t... phù nề, xung huyết, loét nông, rộng Vi khuẩn thải theo phân ngồi - Một số vi khuẩn lỵ gây vi m dày ruột cấp tính trẻ em gây dịch ỉa chảy người lớn Đôi vi khuẩn lỵ tồn lâu phân bệnh nhân người