XÁC ĐỊNH các yếu tố độc lực của các CHỦNG ESCHERICHIA COLI k88, k99, 987p gây BỆNH TIÊU CHẢY TRÊN HEO CON THEO mẹ và SAU CAI sữa tại TỈNH AN GIANG, bến TRE, VĨNH LONG và THÀNH PHỐ cần THƠ

82 350 0
XÁC ĐỊNH các yếu tố độc lực của các CHỦNG ESCHERICHIA COLI k88, k99, 987p gây BỆNH TIÊU CHẢY TRÊN HEO CON THEO mẹ và SAU CAI sữa tại TỈNH AN GIANG, bến TRE, VĨNH LONG và THÀNH PHỐ cần THƠ

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG -oOo- HUỲNH TẤN LỘC XÁC ĐỊNH CÁC YẾU TỐ ĐỘC LỰC CỦA CÁC CHỦNG ESCHERICHIA COLI K88, K99, 987P GÂY BỆNH TIÊU CHẢY TRÊN HEO CON THEO MẸ VÀ SAU CAI SỮA TẠI TỈNH AN GIANG, BẾN TRE, VĨNH LONG VÀ THÀNH PHỐ CẦN THƠ Luận văn tốt nghiệp Ngành: THÚ Y Cần Thơ, 2013 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG -oOo- Luận văn tốt nghiệp Ngành: THÚ Y Tên đề tài: XÁC ĐỊNH CÁC YẾU TỐ ĐỘC LỰC CỦA CÁC CHỦNG ESCHERICHIA COLI K88, K99, 987P GÂY BỆNH TIÊU CHẢY TRÊN HEO CON THEO MẸ VÀ SAU CAI SỮA TẠI TỈNH AN GIANG, BẾN TRE, VĨNH LONG VÀ THÀNH PHỐ CẦN THƠ Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS LÝ THỊ LIÊN KHAI HUỲNH TẤN LỘC MSSV: 3082866 LỚP: THÚ Y K34 Cần Thơ, 2013 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Đề tài: “Xác định yếu độc lực chủng Escherichia coli K88, K99, 987P gây bệnh tiêu chảy heo theo mẹ sau cai sữa tỉnh An Giang, Bến Tre, Vĩnh Long Thành phố Cần Thơ” sinh viên Huỳnh Tấn Lộc, thực phịng thí nghiệm vi sinh, khoa Thú Y, trường Đại Học Nông nghiệp Cơng nghệ Tokyo, Nhật Bản phịng thí nghiệm vệ sinh thực phẩm, Bộ môn Thú Y, khoa Nông nghiệp Sinh học Ứng dụng, trường Đại học Cần Thơ, từ tháng 10/2012 đến tháng 4/2013 Cần Thơ, ngày….tháng… năm 2013 Duyệt Bộ Môn Cần Thơ, ngày….tháng… năm 2013 Giáo viên hướng dẫn Lý Thị Liên Khai Cần Thơ, ngày….tháng… năm 2013 Duyệt Khoa Nông Nghiệp SHƯD i LỜI CẢM ƠN  Trong suốt trình học tập Trường Đại Học Cần Thơ, q thầy dìu dắt, ân cần truyền đạt tri thức vô giá cho chúng tơi, tri thức hành trang cho vững bước vào đời Hôm nay, ước mơ thành thật, với phấn đấu thân, tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp Trong suốt trình học tập thời gian thực đề tài, nhận giúp đỡ nhiều người Trong giây phút đây, tơi khơng biết nói ngồi lời cảm ơn chân thành đến người quan tâm, lo lắng giúp đỡ suốt thời gian qua Sự dạy dỗ, động viên lo lắng cha mẹ người thân gia đình nguồn động lực thúc đẩy tơi nổ lực phấn đấu Trong tận đáy lịng xin chân thành cám ơn người thân yêu kính dâng lên cha mẹ lịng biết ơn sâu sắc, người dành trọn đời cho tơi cất bước đến trường Tơi muốn gửi đến lịng biết ơn vô hạn ghi nhớ công ơn Cơ Lý Thị Liên Khai, người hết lịng bảo, khun răn, giúp đỡ động viên tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp Xin gửi lời chân thành đến quý Thầy Cô Bộ môn Thú y Bộ mơn Chăn ni hết lịng truyền đạt kinh nghiệm kiến thức quý báo cho rèn luyện, học tập tốt suốt thời gian học Đại học Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến chị Nguyễn Thị Hạnh Chi, giúp đỡ tơi q trình làm đề tài Xin cám ơn anh chị Cao học Thú y K18 K19 giúp đỡ trình thực đề tài Cám ơn tất bạn bè lớp Thú y K34, em sinh viên Thú y K35 học việc phòng thí nghiệm động viên, giúp đỡ chia vui buồn với suốt thời gian học Đại học thực đề tài Tôi không quên kỷ niệm vui buồn bên người suốt năm học vừa qua Cuối xin kính chúc người thật nhiều sức khỏe, hạnh phúc thành công! Huỳnh Tấn Lộc ii MỤC LỤC Trang bìa Trang tựa Trang duyệt i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh sách bảng vi Danh sách sơ đồ vii Danh sách biểu đồ viii Danh sách hình ix Danh sách chữ viết tắt x Tóm lược xi Chương 1: ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 2: CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Tình hình nghiên cứu ngồi nước vi khuẩn E coli gây bệnh tiêu chảy heo 2.1.1 Tình hình nghiên cứu nước 2.1.2 Tình hình nghiên cứu nước 2.2 Đặc điểm sinh lý heo 2.2.1 Chức thần kinh điều tiết nhiệt 2.2.2 Bộ máy tiêu hoá 2.2.3 Thay đổi máy tiêu hóa cai sữa 2.2.4 Hệ vi sinh vật đường ruột heo 2.3 Những nguyên nhân gây tiêu chảy heo 2.3.1 Tiêu chảy vi khuẩn 2.3.2 Tiêu chảy virus iii 2.3.3 Tiêu chảy ký sinh trùng 10 2.3.4 Tiêu chảy ảnh hưởng môi trường 10 2.4 Tổng quan vi khuẩn Escherichia coli 11 2.4.1 Lịch sử nghiên cứu 11 2.4.2 Đặc điểm vi khuẩn E coli 13 2.4.3 Cấu trúc kháng nguyên vi khuẩn E coli 14 2.4.4 Độc tố vi khuẩn 17 2.4.5 Sức đề kháng vi khuẩn 23 2.4.6 Khả gây bệnh 23 2.5 Bệnh tiêu chảy vi khuẩn E coli heo 25 2.5.1 Điều kiện xuất bệnh 25 2.5.2 Cơ chế gây bệnh tiêu chảy 26 2.5.3 Triệu chứng bệnh tích 27 2.5.4 Chẩn đoán chẩn đoán phân biệt 28 2.5.5 Điều trị phòng bệnh 30 Chương 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 32 3.1 Thời gian, địa điểm đối tượng nghiên cứu 32 3.1.1 Thời gian địa điểm thực 32 3.1.2 Đối tượng nghiên cứu 32 3.1.3 Động vật thí nghiệm 32 3.2 Phương tiện nghiên cứu 32 3.2.1 Dụng cụ trang thiết bị thí nghiệm 32 3.2.2 Hóa chất, mơi trường 32 3.3 Phương pháp tiến hành thí nghiệm 33 iv 3.3.1 Phương pháp định danh chủng vi khuẩn E coli phản ứng huyết học 33 3.3.2 Phương pháp PCR xác định độc tố ruột vi khuẩn ETEC gây tiêu chảy cho heo theo mẹ sau cai sữa 34 3.3.3 Phương pháp xác định độc lực chủng E coli phân lập chuột bạch 38 3.3.4 Các tiêu theo dõi 39 3.4 Phương pháp xử lý số liệu 39 Chương 4: KẾT QUẢ THẢO LUẬN 40 4.1 Kết định danh chủng E coli K88, K99, 987 heo trước sau cai sữa 40 4.2 Kết xác định độc tố vi khuẩn ETEC gây tiêu chảy heo 41 4.3 Kết kiểm tra độc lực chủng vi khuẩn ETEC phân lập chuột bạch 49 Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 57 5.1 Kết luận 57 5.2 Đề nghị 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 PHỤ CHƯƠNG 65 v DANH SÁCH BẢNG STT Tựa bảng Trang Mối liên quan kháng nguyên O vi khuẩn E coli đối tượng gây bệnh 17 Sự tương quan kháng nguyên khả sinh độc tố vi khuẩn E coli 18 Một số đặc tính loại độc tố LT ST vi khuẩn E coli 19 Một số yếu tố độc lực vi khuẩn E coli gây bệnh tiêu chảy heo 25 Trình tự nucleotide cặp mồi chu trình nhiệt phản ứng PCR xác định số yếu tố độc lực vi khuẩn E coli 36 Hổn hợp nhiên liệu (master mix) phản ứng PCR xác định số yếu tố độc lực vi khuẩn E coli gây tiêu chảy heo 37 Kết định danh chủng E coli K88, K99, 987P heo tiêu chảy 40 Kết xác định độc tố vi khuẩn E coli theo chủng K88, K99, 987P 47 Kết theo dõi khả gây tiêu chảy tỉ lệ chết chuột bạch sau tiêm chủng vi khuẩn ETEC 50 10 Kết kiểm tra độc lực chuột bạch qua độc tố vi khuẩn E coli 53 11 Kết kiểm tra độc lực vi khuẩn ETEC theo chủng K88, K99, 987P chuột bạch 54 vi DANH SÁCH SƠ ĐỒ Sơ đồ Tựa sơ đồ Định danh chủng E coli phản ứng huyết học vii Trang 34 DANH SÁCH BIỂU ĐỒ Biểu đồ Tựa biểu đồ Trang Khả sinh độc tố ruột STa, STb, LT chủng vi khuẩn ETEC 42 viii ... Học Cần Thơ, tiến hành thực đề tài ? ?Xác định yếu độc lực chủng Escherichia coli K88, K99, 987P gây bệnh tiêu chảy heo theo mẹ sau cai sữa tỉnh An Giang, Bến Tre, Vĩnh Long Thành phố Cần Thơ? ??... khuẩn E coli gây tiêu chảy heo 37 Kết định danh chủng E coli K88, K99, 987P heo tiêu chảy 40 Kết xác định độc tố vi khuẩn E coli theo chủng K88, K99, 987P 47 Kết theo dõi khả gây tiêu chảy tỉ... Cần Thơ, 2013 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Đề tài: ? ?Xác định yếu độc lực chủng Escherichia coli K88, K99, 987P gây bệnh tiêu chảy heo theo mẹ sau cai

Ngày đăng: 12/04/2018, 21:15

Từ khóa liên quan

Mục lục

  • TÓM LƯỢC

    • 2.2 Đặc điểm sinh lý heo con

      • 2.2.1 Chức năng thần kinh và điều tiết nhiệt

      • Hệ thống thần kinh heo con chưa hoàn thiện về chức năng (các phản xạ thích nghi, phản xạ điều tiết nhiệt). Do lớp vỏ đại não của heo con chưa hoàn chỉnh nên khả năng điều hòa thân nhiệt chưa tốt. Thân nhiệt heo con thường không ổn định, chịu ảnh hưởng của ngoại cảnh, đặc biệt là ẩm độ cao và nhiệt độ thấp làm cho heo con nhiễm lạnh dẫn đến giảm nhu động tiết dịch gây ra chứng tiêu chảy.

      • 2.2.2 Bộ máy tiêu hoá

      • 2.2.4 Vi sinh vật đường ruột của heo con

      • 2.3 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy ở heo con

      • 2.3.2 Tiêu chảy do virus

        • 2.3.3 Tiêu chảy do ký sinh trùng

        • Có nhiều loại ký sinh trùng gây bệnh tiêu chảy ở heo như cầu trùng, Cryptosporidium, Ascaris suum, Trichuris suis. Đặc điểm chủ yếu tiêu chảy do ký sinh trùng là con vật mắc bệnh tiêu chảy nhưng không liên tục, có sự xen kẽ giữa tiêu chảy và bình thường, cơ thể thiếu máu, da nhợt nhạt, gia súc kém ăn, thể trạng sa sút (The Merck Veterinary Manual, 2000).

          • 2.4.1 Lịch sử nghiên cứu

          • Enteropathogenic E. coli (EPEC): không có khả năng tạo ra độc tố hay khả năng xâm nhập như ETEC hay EIEC. Nhóm này gây tiêu chảy cho người, đặc biệt gây tiêu chảy cho trẻ em.

          • Enterotoxigenic E. coli (ETEC): là nhóm vi khuẩn khu trú thường xuyên trong ruột ở người và động vật. ETEC có khả năng xâm nhập và bám dính vào biểu mô ruột non để gây bệnh, cộng với khả năng sản sinh độc tố kém chịu nhiệt (LT) hay độc tố chịu nhiệt (ST) (Shinagawa et al.,1993).

          • Bệnh tiêu chảy cấp tính do ETEC gây ra qua hai bước chính yếu. Đầu tiên, ETEC phải tăng đủ số lượng trong ruột non (ETEC xâm nhập vào ruột non nhờ các yếu tố bám dính ở bề mặt vi khuẩn như F4 (K88), F5 (K99), F6 (987P), F41, F17, F18), kế đó chúng tiết độc tố ruột để gây tích tụ nước và chất điện giải ở ruột non (Nagy et al.,1978).

          • ETEC có khả năng sinh một hoặc nhiều loại độc tố đường ruột, bao gồm độc tố chịu nhiệt heat – stable enterotoxin (ST) và độc tố kém chịu nhiệt heat – labile enterotoxin (LT) (Fairbrother and Gyles, 2006). Những dòng ETEC tiết ra một hay hai loại độc tố tùy plasmid của chúng. Tiêu chảy kéo dài và trầm trọng khi vật bị nhiễm vi khuẩn có thể tiết cả hai loại độc tố này.

          • ETEC được nhiều tác giả trên thế giới thống nhất là một trong những nguyên nhân thường gặp và quan trọng nhất gây bệnh tiêu chảy ở heo con thời kỳ bú mẹ (1-3 tuần tuổi). Nên việc dùng kháng sinh từ lâu đã được coi là biện pháp hữu hiệu để phòng và trị bệnh (Cù Hữu Phú và ctv, 2003). Trong các chủng E. coli tìm thấy trên heo, ETEC được xem là chủng gây bệnh quan trọng nhất vì ETEC gây tiêu chảy nặng thể phân lỏng như nước làm chết heo sơ sinh (Lý Thị Liên Khai và ctv, 2003).

          • 2.4.3 Cấu trúc kháng nguyên của vi khuẩn E. coli

          • Kháng nguyên F (kháng nguyên bám dính)

          • Kháng nguyên bám dính F4 (K88)

          • Kháng nguyên bám dính F6 (987P)

            • Cơ chế tác động của độc tố LT

              • Độc tố chịu nhiệt (ST)

              • Hình 1. Cơ chế tác động của độc tố LT và ST (Nataro and Kaper, 1998)

              • 2.4.5 Sức đề kháng của vi khuẩn

              • Vi khuẩn E. coli đề kháng yếu với nhiệt độ, ở 55oC sẽ bị diệt trong một giờ, 60oC trong 30 phút và chết ngay khi đun sôi ở 100oC (Nguyễn Như Thanh và ctv, 1997).

              • Các chất tiêu độc bình thường như phenol, formol, vôi…ở nồng độ thông thường cũng làm E. coli chết rất nhanh. Tuy nhiên, ở môi trường bên ngoài các chủng E. coli độc có thể tồn tại đến bốn tháng (Nguyễn Như Thanh và ctv, 1997).

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan