CHƯƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Giới thiệu Với điều kiện thuận lợi, nằm khu vực nhiệt đới gió mùa, mạng lưới sơng ngịi dày đặc, đường bờ biển dài Chính yếu tố giúp cho Việt Nam trở thành nước có ngành thủy sản phát triển, góp phần thúc đẩy phát triển kinh tế nước nhà mà bậc khu vực Đồng Bằng Sông Cửu Long (ĐBSCL) Theo thống kê sản lượng nuôi trồng thủy sản năm 2010 đạt 2,8 triệu tấn, tăng 160 so với năm 2009 (9%) (www.gso.gov.vn) ĐBSCL có hệ thống sơng ngịi chằn chịt, khí hậu ấm áp với chiều dài đường bờ biển 109 km2 diện tích mặt nước 960472 ha, với việc ứng dụng tiến khoa học kỹ thuật, thâm canh hóa, đa dạng đối tượng ni góp phần tạo điều kiện thuận lợi nâng cao hiệu nuôi trồng thủy sản khu vực Bên cạnh đối tượng chủ lực cá tra, cá basa, điêu hồng, số đối tượng người dân đưa vào mơ hình ao ni thâm canh hóa cá lóc, rơ đồng, thác lác, bống tượng, sặc rằn, chình, ni ngày phổ biển góp phần tăng thu nhập cho người ni Trong cá chình đánh giá đối tượng ni có nhiều tiềm phát triển Cá chình thủy động vật có thân hình thon dài, hình trụ phần trước ép lại dọc theo đuôi, đầu cá thường dài nhọn Cá chình lồi cá có tính thích ứng rộng với độ mặn, cá sống nước mặn, nước lợ, nước nuôi thâm canh ao đất, lồng bè (Nguyễn Chung, 2008) Bên cạnh đó, thịt cá chình thơm ngon, có giá trị dinh dưỡng cao, giá cá chình thị trường dao động từ 280-350 ngàn/kg Tuy giá cá chình cao nhiều người ưa chuộng, không nước người dân nước khác Trung Quốc, Nhật Bản, Malaysia, Indonesia ưa chuộng cá chình Vì cá chình khơng tiêu thụ nước mà cịn xuất (trang tin Dânviệt.vn, số ngày 15/5/2011) Trên giới nay, có nước phát triển nghề ni cá chình mạnh nhất: Nhật Bản, Đài Loan, Hàn Quốc, Trung Quốc Cịn nước ta nghề ni cá chình nói bước khởi đầu và, mang tính chất tự phát Quy mơ ni chủ yếu hộ gia đình hình thức ni lồng chiếm ưu thế, số tỉnh miền Nam có nghề ni cá chình phát triển như: Cà Mau, Bạc Liêu, An Giang, Đồng Tháp số tỉnh miền Trung: Bình Định, Phú Yên, Quảng Trị, Ninh Thuận Các cơng trình nghiên cứu cá chình ngồi nước nhiều, tác giả khơng nghiên cứu sâu hình thái, phân lồi, phân bố mà cịn nghiên cứu bệnh xuất cá chình, số tác giả tiêu biểu như: Evert and Olga, 1993; Gousset B., 1990; Dou S., T Seikai and K Tsukamoto, 2000; Amoro C., Biosca E.G., 1996 Cịn nước cá chình đối tượng chọn nuôi năm gần nên nghiên cứu nước ta cá chình tính cung cấp số liệu thành phần lồi, phân bố, chưa có cơng trình nghiên cứu sâu cá chình Những năm gần đây, nhu cầu tiêu thụ cá chình nhu cầu ni cá chình tự phát nhiều tỉnh, số tác giả biên soạn số tài liệu hướng dẫn kỹ thuật ni cá chình như: Ngô Trọng Lư, 1997; Ngô Trọng Lư Thái Bá Hồ, 2003; Nguyễn Chung, 2008 Các tài liệu chủ yếu dựa vào kỹ thuật ni cá chình giới thiệu tài liệu Trung Quốc, Đài Loan, Nhật Bản (www.mekongfish.net.vn) Do để có định hướng cho phát triển đối tượng hiệu bền vững vấn đề quản lý, chăm sóc sức khỏe cá, thông tin kỹ thuật cần quan tâm nghiên cứu nhiều Tuy nhiên, song song với việc phát triển nghề ni cá chình phát sinh vấn đề cấp thiết dịch bệnh, giống, thức ăn, quản lý ao Xuất phát từ thực tế nói đề tài “Xác định số mầm bệnh cá chình bơng (Anguilla marmorata) ni bể” thực 1.2 Mục tiêu đề tài Kiểm tra ngun nhân gây bệnh cá chình bơng ni bể, tạo sở khoa học để đưa biện pháp quản lý sức khỏe cá chình tốt 1.3 Nội dung đề tài - Xác định vi khuẩn tổng cộng môi trường nước bể nuôi - - Xác định mầm bệnh, định danh vi khuẩn, ký sinh trùng cá chình ni bể Thực kháng sinh đồ chủng vi khuẩn phân lập CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Một vài đặc điểm sinh học cá chình 2.1.1 Phân loại phân bố Vị trí phân loại cá chình Theo hệ thống phân loại Nguyễn Hữu Phụng (2001) trích Nguyễn Thị Bích Vân (2009) cá chình bơng thuộc Lớp: Oteichthyes Phân lớp: Acfinopterygii Bộ: Anguilliformes Họ: Anguillidae Giống: Anguilla Loài: Anguilla marmorata Theo nghiên cứu Việt Nam cá chình giống Anguilla có lồi phổ biến nước ta: cá chình hoa: A marmorata (Quoy and Gaimard, 1824); cá chình mun: A bicorlo pacifica (Schmidt, 1928), cá chình nhọn: A borneensis (Popta, 1924), cá chình Nhật Bản: A japonica (Tem and Schmidt, 1846) Trong cá chình hoa: A marmorata (Quoy and Gaimard, 1824) cịn gọi cá chình bơng có tên tiếng anh Giant mottled eel Cá có màu xám tro mặt lưng, vàng nhạt mặt bụng, vây lưng màu sẫm Rìa vây lưng, vây hậu mơn, với vây có màu đen Ở Viêt Nam cá chình bơng phân bố nhiều đầm Châu Trúc (Bình Định), sông Bồ, sông Hương đầm Cầu Hai tỉnh Thừa Thiên Huế, huyện Ddarkrong tỉnh Quảng Trị, giới phân bố Nhật Bản, Triết Giang (Trung Quốc), Indonesia, Australia, Borneo (Indonesia) Cá chình mun: A bicorlo pacifica (Schmidt, 1928) cịn gọi cá chình nhốt , cá có màu xám lưng, màu trắng ngã vàng phía bụng nhạt dần từ hàm tới hậu mơn Ranh giới hai màu phía lưng phía bụng rõ ràng Ở nước ta cá chình mun phân bố ở: xã Phong Sơn, huyện Phong Điền, xã Bố Đỏ huyện A Lưới, huyện Phú Lộc, huyện Nam Đơng (Thừa Thiên Thuế), đầm Trâu Trúc (Bình Định), sơng Trà Khúc (Quang Ngãi) giới phân bố Australia, Borneo (Indonesia), Phillippine, Sumatra (Indonesia) Cá chình nhọn: A borneensis (Popta, 1924), cá có màu xám tro mặt lưng, vàng nhạt mặt bụng, khơng có vân chấm hoa, vây lưng vây hậu mơn có màu đen sẫm phía trước vây hậu mơn màu sáng Thường xuất nhiều vùng Borneo, Sumata (Indonesia), Việt Nam cá có vùng đầm Châu Trúc Bình Định Cá chình Nhật Bản: A japonica (Tem and Schmidt, 1846) có tên tiếng anh Japanese eel Cá có màu nâu ánh xanh, vây lưng lùi phía sau liên tục với vây đuôi vây hậu môn, chiều dài thân gấp từ 16 - 18,5 lần chiều cao thân, 10 lần chiều dài đầu Chiều dài đầu gấp 10 - 11 lần đường kính mắt, - lần khoảng cách hai ổ mắt Trên giới phân bố nhiều Nhật Bản, Trung Quốc, Việt Nam vào năm 1935, Thanh Trì (sơng Hồng) bắt vài cá thể cá chình Nhật Bản, vịnh Bắc Bộ vùng viên biển có A B C D Hình 2.1: Một số hình ảnh cá chình Việt Nam (A) Cá chình bơng (A marmorata), (B) Cá chình Nhật Bản (A japonica), (C) Cá chình mun (A bicorlo pacifica), (D) Cá chình nhọn (A borneensis) Chú ý: Hình lấy từ trang Google.com 2.1.2 Môi trường Nhiệt độ Cá chình lồi có tốc độ tăng trưởng nhanh điều kiện khí hậu nhiệt đới với nhiệt độ thích hợp từ 23-28oC Biên độ dao động nhiệt độ nước ngày thay đổi đột ngột 3-5oC làm cá bị chết sốc nhiệt (Bùi Quan Tề, 2002) Cá chình lồi cá có phạm vi thích nhiệt rộng Nhiệt độ từ - 38oC cá sống được, 12oC cá bắt đầu bắt mồi Theo Lin (1991) (trích dẫn Chu Văn Cơng, 2005) cá chình sinh trưởng phát triển bình thường nhiệt độ dao động khoảng 13 - 30oC Nhiệt dộ cực thuận cho phát triển cá chình khoảng 25-27oC, ngưỡng nhiệt độ cá chình 1-2oC ngưỡng nhiệt độ 38oC Theo Ngơ Trọng Lư (2002), hàm lượng oxy hồ tan nước yêu cầu ppm, ppm thích hợp cho sinh trưởng, vượt 12 ppm có ảnh hưởng khơng tốt, cá dễ sinh bệnh bọt khí Ánh sáng Cá sợ ánh sáng mạnh thích bóng tối nên ban ngày chui rúc ẩn hang, đáy sơng, suối, ao đầm nước nơi có ánh sáng yếu, tối bị săn mồi di chuyển nơi khác Giai đoạn cá bột thân suốt, với ánh sáng yếu có tính hướng quang tùy theo tăng trưởng lớn lên cá, tính hướng quang giảm dần Cá bột hoạt động nhiều đêm, ban ngày nằm đáy tối ngoi lên theo chiều thẳng đứng trơi tìm thức ăn (Nguyễn Chung, 2008) pH Nguồn nước có chất lượng tốt, thích hợp cho ni thủy sản khơng có mầm bệnh hay hóa chất độc hại đảm bảo pH từ 7-8 Nếu nước có pH thấp hay cao khơng thể dùng để ni cá pH tăng tính độc NH3 tăng, ngược lại pH giảm làm cho tính độc H 2S tăng Hai loại khí gây độc cho cá Giá trị pH từ 6,5-9 thích hợp cho đối tượng thủy sản (Trương Quốc Phú, 2006) Độ mặn Ngơ Trọng Lư (2002), cho cá chình lồi có tính thích ứng rộng với độ mặn sống nước ngọt, lợ, mặn Cá chình lồi rộng muối chúng có khả thích ứng tốt với thay đổi độ mặn đột ngột nhờ có quan điều hịa áp suất thẩm thấu (Lin, 1991 trích dẫn Chu Văn Công, 2005) Oxy Lượng tiêu hao oxy cá chình lớn lồi sống đáy khác da cá, bong bóng, khoang miệng, ruột vây cá có chức hơ hấp phụ cá khơng sử dụng cịn nước Cá thích nơi có dịng chảy tùy lồi mà thích với dịng chảy mạnh hay nhẹ Khi hàm lượng oxy nước mg/l cá đầu Sau ăn no lượng tiêu hao oxy tăng gấp đôi, cá lớn tiêu hao oxy nhiều Lượng tiêu hao oxy tùy thuộc vào nhiệt độ nước trọng lượng cá (Nguyễn Chung, 2008) Đạm Nitrogen nước tồn dạng : NH3, NH4+, NO2-, NO3- Trong đó, NH3 nitrite yếu tố nguy hiểm gây độc động vật thủy sản Lượng NO2- cho phép ao nuôi từ 0,01 - 1,7 ppm với NH 0,2 ppm (Trương Quốc Phú, 2006) Đạm NH4+ nước cần thiết cho phát triển động thực vật thủy sinh tạo nguồn thức ăn tự nhiên thủy vực Hàm lượng thích hợp khoảng 0,2 - ppm (Nguyễn Văn Thường, 2006) NO3- thủy vực dạng đạm thực vật hấp thu dễ không độc thủy sinh vật, hàm lượng NO3- thích hợp cho ao ni giao động từ 0,1 - ppm 2.1.3 Đặc điểm hình thái Theo Nguyễn Chung (2008) mơ tả cá chình thủy động vật có thân hình thon dài, hình trụ phần trước ép lại dọc theo đuôi Đầu cá thường dài nhọn Miệng phía trước rộng to, há hốc kết thúc gần rìa mắt Hàm vượt xa hàm trên, hàm hàm mở rộng vào không phân chia rõ ràng Lỗ mang nhỏ nằm phía góc vây ngực Mắt phát triển hồn chỉnh, nhỏ chưa trưởng thành, lớn đực trưởng thành Gờ thịt mơi mơi phát triển hồn hảo Mũi hình trịn có lỗ, lỗ mũi đằng trước hình ống gần rìa đầu mõm trước nằm phía trước miệng, lỗ mũi đằng sau dạng mở đơn giản nằm từ trước tới mắt Vây lưng vây hậu môn tiếp tục kéo dài tới vây đuôi, vây lưng bắt đầu sau vây ngực nằm trước hay hậu môn, vây ngực phát triển tốt Vẩy cá nhỏ hình oval bao lấy da dấu da, sếp vỏ đang, đường bên hong hoàn chỉnh Cá chình sống ngồi tự nhiên thân có màu khác từ màu vàng xanh tới màu nâu hay đen, lốm đốm hay bề ngồi cẩm thạch, lưng màu đen tro bụng màu trắng nhạt Da cá chình có biểu bì với chức làm giảm bớt lực cản nước, giúp tăng tốc độ săn mồi chạy trốn kẻ thù 2.1.4 Tập tính cư trú Theo Nguyễn Chung (2008) ghi nhận cá chình lồi cá có tính thích ứng rộng với độ mặn, cá sống nước mặn, nước lợ, nước Cá thích bóng tối, sợ ánh sáng nên ban ngày chui rúc hang, đáy ao, nơi có ánh sáng yếu, tối bị kiếm mồi, di chuyển nơi khác Da ruột cá có khả hơ hấp, 15oC cần giữ cho da cá ẩm ướt sống lâu Trời mưa cá hoạt động khỏe bò trườn khắp ao Cá chình lồi cá có phạm vi thích nhiệt rộng Nhiệt độ từ - 38oC cá sống được, 12oC cá bắt đầu mồi Nhiệt độ sinh trưởng 13 - 30oC thích hợp 25 - 27oC Hàm lượng oxy hòa tan nước yêu cầu phải mg/1, mg/l thích hợp cho sinh trưởng, vượt 12 mg/l dễ sinh bệnh bọt khí Ngồi mang quan hơ hấp cá chình cịn có quan hơ hấp phụ như: da cá, bong bóng, khoang miệng, ruột, giúp cho cá chình sống lâu cạn Khi nhiệt độ nước 15oC cá chình dùng da (da phải ẩm ướt) để trì sống 2.1.5 Tập tính ăn sinh trưởng Theo Ngô Trọng Lư Thái Bá Hồ (2003), dày cá chình có dạng hình túi lớn hình chữ Y, thành dày dày, ruột ngắn, đoạn cuối ruột gần cong Bong bóng tương đối nhỏ, có ngăn Gan to 1,5 lần trọng lượng thể Cá ăn mạnh nhiệt độ nước 25 - 27 oC, mùa xuân nhiệt độ lên khoảng 10oC trở lên cá bắt đầu ăn mồi Cá chình loại cá ăn tạp, tự nhiên thức ăn cá tôm, cá con, động vật đáy nhỏ côn trùng thủy sinh Khi cịn nhỏ thức ăn cá động vật phù du, giun tơ Lượng mồi ăn ngày chiếm 10 - 12% trọng lượng thể Cá cho ăn thức ăn tổng hợp gồm bắp, cám gạo, bột cá, vitamim, chất vô Sau năm ni, cá đạt kích cỡ 50 - 200g Nếu thức ăn tốt sau năm nuôi kể từ lúc vớt ngồi tự nhiên đạt cỡ - con/kg Cá sinh trưởng chậm, cỡ từ 300g trở nên tốc độ sinh trưởng 1/10 tốc độ sinh trưởng giai đoạn cá có trọng lượng 70 - 100g Khi cịn nhỏ tốc độ sinh trưởng cá đàn tương đương nhau, đạt chiều dài 40 cm đực lớn chậm 2.1.6 Tập tính sinh sản Cá chình lồi cá di cư, cá mẹ đẻ biển sâu, cá sau nở trôi dạt vào bờ biển, cửa sông, vùng nước kiếm mồi lớn lên Khi trưởng thành, cá lại di cư biển sâu để đẻ trứng, tuổi thành thục cá - tuổi, cá đực - tuổi Một cá đẻ khoảng - 13 triệu trứng, trứng cá trơi (có kích thước khoảng 1mm) nước sau khoảng 10 ngày nở, cá bột nở có chiều dài thân mm có xu hướng bơi dần lên tầng Cá lớn có hình liễu, sau năm trôi dạt vào cửa sông Trải qua nhiều biến thái hình thành cá chình hương màu trắng, cá ngược dòng sắc tố đen tăng dần thành màu đen Việc sinh sản nhân tạo cá chình đến chưa có nước nghiên cứu thành cơng Tất cá giống dựa vào việc khai thác từ tự nhiên ngồi cửa sơng ven biển Ở nước ta cá chình phân bố nhiều từ Quảng Bình vào đến Bình Ðịnh, đặc biệt vùng hồ Châu Trúc Bình Ðịnh có cá chình phân bố, hàng năm cung cấp lượng cá giống quý cho nhân dân vùng để nuôi (Ngô Trong Lư Thái Bá Hồ, 2003) 2.2 Một số bệnh thường xuất cá chình 2.2.1 Bệnh ký sinh trùng Bệnh sán đơn chủ Trên cá chình Đại Tây Dương có tới 63 lồi sán ký sinh, cá chình Thái Bình Dương có 29 loài sán ký sinh Sán đơn chủ Pseudodactylogyrus bini, P anguillae xem mầm bệnh nguy hiểm cá chình, đặc biệt cá chình Thái Bình Dương Hai lồi ký sinh trùng khơng gây bệnh cá chình sống ngồi tự nhiên Ở cá chình ni, lồi Pseudodactylogyrus spp ký sinh mang, điều kiện thích hợp lây nhiễm gây bệnh nghiêm trọng Tuy nhiên, sử dụng thuốc để phòng trị ký sinh trùng (www.mekongfish.net.vn) Dactylogyrus (sán 16 móc), thường ký sinh da mang chủ yếu mang Khi bị ký sinh, da mang cá tiết nhiều dịch nhờn ảnh hưởng đến hô hấp cá Tổ chức da mang bị viêm loét tạo điều kiện cho vi khuẩn, nấm số sinh vật xâm nhập gây bệnh Để phòng bệnh ta phải vệ sinh bể thật kỹ, cho ăn đầy đủ giúp cá khỏe mạnh mau lớn vượt qua giai đoạn nhiễm bệnh Khi cá bị bệnh tắm cá nước muối 3% - 15 phút hay dùng formol 150 200 ppm tắm cá 30 - 60 phút Sử dụng KMnO4 với liều lượng 0.5 - 1mg/l H2O2 100 - 150 mg/L Thay nước cho cá xử lý hóa chất lần cá chưa hết bệnh (Nguyễn Chung, 2008) Bệnh trùng bánh xe Thường gây bệnh cá loài thuộc giống Trichodina, bệnh phát triển quanh năm bùng phát mạnh gây thành dịch vào mùa mưa làm cá chết hàng loạt Theo Ruangpan (1988) có 60 loài Trichodina ký sinh cá, tỷ lệ nhiễm 90 - 100% gây hại cho cá lứa tuổi cá hương cá giống Cá mắc bệnh có dấu hiệu sau màu sắc cá nhợt nhạt, thân cá có nhiều nhớt màu trắng đục, đi, vây bị xơ mịn, bơi lội khơng định hướng, thân cọ vào cỏ, thành bể bị ngứa, thường ký sinh da, mang, mũi (trích Woo, 2006) Để cá không bị mắc bệnh ta cần giữ môi trường nước sạch, tăng cường sức đề kháng cách tăng cường vitamin C Trị bệnh, tắm cá nước muối 3% 15 phút hay CuSO4 - ppm 10 - 15 phút phun thẳng xuống ao 0,5 - 0,7 ppm (Nguyễn Chung, 2008) Bệnh nhóm Myxobolus sp Bệnh tìm thấy cá chình châu Âu (Anguilla anguilla), cá chình Nhật Bản (Anguilla japonica) Khi bị nhiễm Myxobolus sp cá bơi lội không bình thường, di hình, cơng đi, ăn, cá chết Phụ thuộc vào mức độ nhiễm vị trí ký sinh trùng bào nang, mang cá bị nhiễm nặng có nhiều đốm trắng, hoại tử, hoạt động hô hấp bất thường Trường hợp nhiễm bên thành ruột khả nhiễm thay đổi tính lan truyền theo chiều rộng Đặc biệt giai đoạn cá giống lớp biểu mô da mang bị nhiễm nặng làm cho thể cá bị giảm cân, bơi tấp mé bờ, màu sắc cá trở nên đen (Woo, 2006) Bệnh sán đơn chủ Gyrodactylus sp Sán đơn chủ Gyrodactylus sp tìm thấy nhiều lồi cá chình Anguilla japonica, Anguilla anguilla, Anguilla marmorata Sán đơn chủ Gyrodactylus sp ký sinh da mang với số lượng nhiều làm cho tổ chức ký sinh tiết chất dịch trắng Cá hoạt động hoạt động khơng bình thường, số cá nằm đáy ao, bể, số lên mặt nước đớp khơng khí Cá bị nhiễm Gyrodactylus khả bắt mồi giảm, hơ hấp khó khăn gầy yếu (Nguyễn Chung, 2008) Bệnh nhóm giun trịn (Nematoda) Giun ký sinh chủ yếu cá chình số loài cá nước ngọt, ký sinh da, vẩy, gan…của nhiều loài cá nước với tỷ lệ nhiễm cao, có lên tới 80 - 90% Cường độ nhiễm 30 - 40 trùng/cá Cá lớn tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm cao Khi bị nhiễm bệnh cá có màu sắc da nhợt nhạt, di chuyển chậm, giảm sinh trưởng Phòng bệnh chủ yếu tiêu diệt ký chủ trung gian cắt đứt vòng đời (Woo, 2006) 2.2.2 Bệnh vi khuẩn Bệnh đốm đỏ Bệnh đốm đỏ (red spot disease) hay gọi “Sekiten-byo” vi khuẩn Pseudomonas spp gây nên, bệnh phát cá chình Nhật Bản (Anguilla japonica) cịn gọi “Winter disease syndrome”, vào khoảng năm 1981 bệnh tìm thấy Scotland cá chình Châu Âu Đây vi khuẩn Gram -, có hình que, di động, phát triển môi trường đơn giản thiếu khí Cần cẩn thận tiếp xúc với vi khuẩn gây bệnh cho người (Inglis et al, 1993) Cá mắc bệnh thường xuất xuất huyết đốm đỏ da, xung quanh miệng, nắp mang phía mặt bụng, thể bị tuột nhớt, Pseudomonas spp xâm nhập vô thể qua tổn thương mang da Bệnh thường xuất cá bị stress điều kiện quản lý không phù hợp Ta phịng bệnh cách cung cấp nguồn nước tốt, giảm mật độ nuôi KMnO4 (Từ Thanh Dung, 2011) Bệnh nhóm vi khuẩn Streptococcosis Trên cá chình Nhật Bản cá hồi vân nước Australia, Israel, Italy, thường xuất loại bệnh vi khuẩn thuộc nhóm Streptococcosis tác nhân gây bệnh cịn gọi với tên “pop-eye” Đây loài vi khuẩn Gram + , khơng sinh bào tử, hình cầu oval, khơng di động, phát triển tốt môi trường máu TSA Nó phát triển tốt nhiệt độ từ 25 30oC vòng 24 - 36 (Austin and Austin, 1993) Cá bị bệnh thường có biểu mắt cá bị xuất huyết, lồi, thân sẫm màu, bơi lội không định hướng, quan thận, gan, lách bị viêm, sưng, xoang bụng có dịch Mơi trường ni khơng thuận lợi, thời tiết nóng, lạnh bắt thường không tốt cho cá giống cá trưởng thành, cá dễ mắt bệnh cá tháng tuổi Vì ta phải quản lý môi trường nuôi thật tốt, xử lý môi trường hóa chất diệt khuẩn Trị bệnh dùng kháng sinh Penicilin V, Bactrim Navet Estc (Nguyễn Chung, 2008) Bệnh vi khuẩn Edwardsiella tarda Bệnh vi khuẩn Edwardsiella tarda mối đe dọa nghiêm trọng nghề ni trồng thủy sản Nhật Bản (cịn có tên gọi Paracolabacterium anguillimortiferum) Bệnh gây thiệt hại lớn nghề ni cá chình Nhật Đài Loan Đối với cá chình Nhật Bản bệnh thường xuất vào mùa hè, Đài Loan bệnh thường xảy vào khoảng nhiệt độ 10 – 18oC Đây lồi vi khuẩn có dạng hình que, Gram -, không sinh bào tử, 10 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết yếu tố mơi trường Để có thêm sở khoa học, đánh giá khách quan tình trạng sức khỏe cá chình ni bể, đề tài có ghi lại số kết theo dõi tiêu môi trường từ đề tài Hồ Thị Hoàng Uyên (2011) Nguyễn Bùi Đạt Thành (2011) Các yếu tố môi trường thể rõ bảng Phụ lục 6, Nhiệt độ Ở trại khoa thủy sản suốt q trình thí nghiệm nhiệt độ dao động khoảng 26,4-27,6oC (Phụ lục 6), nhiệt độ buổi sáng thấp nhiệt độ buổi chiều chênh lệch nhiệt độ sáng chiều không lớn (khoảng 1oC) Như nhiệt độ khoảng dao động nhiệt độ suốt q trình thí nghiệm trại cá khoa thủy sản thích hợp cho sinh trưởng phát triển bình thường cá Cịn huyện Thới Lai nhiệt độ dao động từ 27-30oC (Phụ lục 7) nằm khoảng nhiệt độ thích hợp cho phát triển cá, với cá chình từ 25-34oC (trung tâm khuyến ngư tỉnh Bạc Liêu) pH Qua kết biến động yếu tố môi trường (Phụ lục 6) cho thấy, giá trị pH suốt trình thí nghiệm trại khoa thủy sản dao động 7,8-8,1 thích hợp cho phát triển sinh trưởng bình thường cá chình thí nghiệm Cịn huyện Thới Lai theo kết thống kê từ bảng (Phụ lục 7), ta thấy giá trị pH trung bình buổi sáng bể vào khoảng 7,63 buổi chiều 7,80 với khoảng dao động sáng chiều nhỏ, với giá trị pH trung bình khoảng 7,7 Điều kiện pH nằm khoảng thuận lợi cho phát triển sinh vật cá chình TAN Qua bảng (Phụ lục 7) ta thấy giá trị TAN bể huyện Thới Lai dao động từ 0,09-0,16 ppm, cao mật độ 60 con/m3 với hàm lượng 0,16 ppm Như vậy, kết thí nghiệm đảm bảo yêu cầu độ đạm môi trường ao nuôi cho tăng trưởng cá Còn trại khoa thủy sản, ta thấy giá trị TAN dao động khoảng 0-0,1 ppm (Phụ lục 6) Vậy hàm lượng TAN nằm giới hạn cho phép để cá sinh trưởng phát triển tốt 22 N-NO2Hàm lượng N-NO2- (Phụ lục 6) bể trại khoa thủy sản dao động từ 0,3-0,7 ppm, với nồng độ hàm lượng N-NO2- nằm giới hạn cho phép đảm bảo cho cá sinh trưởng phát triển Còn huyện Thới Lai qua bảng (Phụ lục 7)cho ta thấy có chênh lệch hàm lượng NO2- mật độ ương khác nhau, nhiên nằm giới hạn cho phép chưa vượt 0,5ppm phù hợp cho tăng trưởng cá Giá trị cao 0,40 ppm ao ương mật độ 40 con/m3 Oxy Qua bảng (Phụ lục 7) ta thấy hàm lượng oxy trung bình bể ni huyện Thới Lai 4,4 ppm Đối với cá chình lượng oxy nước lớn 5ppm thích hợp kết nằm khoảng chấp nhận cho cá chình sinh trưởng phát triển Từ kết trên, cho ta thấy tiêu môi trường nằm giới hạn cho phép, không ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển cá chình 4.2 Kết kiểm tra mật độ vi khuẩn tổng cộng nước Kết kiểm tra mật độ vi khuẩn tổng cộng nước phần việc đánh giá chất lượng nước, cho biết mật độ vi khuẩn nước từ đánh giá khả phát sinh lây lan dịch bệnh cho cá nuôi, giúp cho hộ nuôi hạn chế tác hại vi khuẩn gây có giải pháp kip thời để cải thiện môi trường nuôi Vi sinh vật nước bao gồm loài vi khuẩn, tảo, nấm men, virus, chủ yếu vi khuẩn Vi khuẩn tổng cộng bao gồm nhiều giống loài khác nhau, chúng vừa có lợi vừa có hại Nhóm vi khuẩn có lợi tham gia vào trình phân giải hợp chất hữu cơ, vô làm môi trường nước Nhóm vi khuẩn gây hại có khả gây bệnh cho lồi cá ni số lồi thuộc giống Aeromonas spp Pseudomonas spp tác nhân gây bệnh nguy hiểm cho loài thủy sản nuôi Tùy thuộc vào thời gian nuôi, mật độ vi khuẩn hệ thống ni đạt đến mật độ 104 107 CFU/ml (Rombaut et al., 2001) Theo Anderson (1993) nước nuôi thủy sản coi mật độ vi khuẩn tổng cộng nhỏ 103 CFU/ml, mật độ vi khuẩn tổng cộng vượt 107 CFU/ml có hại cho tơm cá ni môi trường nuôi trở nên bẩn Mật độ vi khuẩn tổng cộng nước nuôi thủy sản theo tiêu chuẩn nghành Bộ Thủy Sản (số 28 TCN 101:1997) chấp nhận mức 106 CFU/ml (trích dẫn Nguyễn Mạnh Hùng, 2010) 23 Đề tài tiến hành thu mẫu nước địa điểm là: trại cá khoa Thủy sản huyện Thới Lai Mỗi địa điểm thu đợt, đợt thu đại diện mẫu nước cho giai đoạn đầu vụ nuôi Kết phân tích mật độ vi khuẩn thể Bảng 4.1 Bảng 4.1 Kết mật độ vi khuẩn tổng cộng bể ni cá chình địa điểm Địa điểm Trại cá khoa Thủy sản Thới Lai Thời gian Đợt/Sai số Bể 15/8/2011 Đợt 1 0,065x106 0,21 x106 0,213 x106 0,024 x106 0,14 x106 0,191 x106 16/2/2012 Đợt 0,068 x106 0,082 x106 0,044 x106 0,141 x106 0,093 x106 0,037 x106 15/8/2011 16/2/2012 Đợt Đợt 0,391 x106 0,268 x106 0,035 x106 0,045 x106 0,093 x106 0,077 x106 0,141 x106 0,11 x106 0,065 x106 0,029 x106 0,061 x106 0,163 x106 Qua Bảng 4.1 cho thấy mật độ vi khuẩn tổng cộng bể địa điểm giao động khoảng (0,024 - 0,391x106 CFU/ml), với mật độ vi khuẩn tổng cộng so với tiêu chuẩn ngành Bộ Thủy sản nằm mức độ cho phép Tuy nhiên theo nhận định Anderson (1993) nước có mật độ vi khuẩn tổng cộng nhỏ 103 CFU/ml mật độ vi khuẩn tổng cộng vượt 107 CFU/ml có hại cho tơm cá ni Theo thấy mơi trường nước bể ni cá chình địa điểm thu mẫu trở nên bẩn có nguy gây hại cho cá nuôi Điều chứng tỏ việc quản lý môi trường nước bể nuôi chưa thực tốt Tuy nhiên biến động địa điểm thu mẫu có khác thể chi tiết sau 4.2.1 Mật độ vi khuẩn tổng cộng trại ni cá chình khoa Thủy Sản Kết mật độ vi khuẩn tổng cộng đợt ni cá Chình trại Thủy sản thể chi tiết Hình 4.1 24 Đợt Đợt Mật độ vi khuẩn (x 10^6 CFU/ml) 0,25 0,213 0,21 0,191 0,2 0,141 0,15 0,1 0,0650,068 0,14 0,093 0,082 0,044 0,05 0,037 0,024 Bể thu mẫu Hình 4.1: Sự biến động mật độ vi khuẩn tổng cộng đợt thu trại Thủy Sản - ĐH Cần Thơ Từ Hình 4.1 thấy rằng, bể ni cá chình khoa Thủy sản mật độ vi khuẩn tổng cộng đợt thu có khác biệt không Cụ thể như: đợt mật độ vi khuẩn tổng cộng bể cao 0,213x106 CFU/ml, tiếp đến bể bể có mật độ vi khuẩn 0,21x10 CFU/ml, 0,191x106 CFU/ml, bể bể có mật độ vi khuẩn thấp 0,024x106 CFU/ml Ở đợt ta thấy biến động mật độ vi khuẩn tổng cộng bể tương đối thấp, bể có mật độ vi khuẩn tổng cộng cao mức 0,141x106 CFU/ml, cịn bể thấp với mật độ 0, 037x10 Từ kết trên, qua cho thấy việc quản lý nguồn nước bể đợt cần ý 4.2.2 Mật độ vi khuẩn tổng cộng huyện Thới Lai – Cần Thơ So với biến động mật độ vi khuẩn tổng cộng bể ni cá chình trại cá khoa Thủy sản huyện Thới Lai bể ni cá chình có mật độ vi khuẩn tổng cộng biến động thể chi tiết Hình 4.2 25 Mật độ vi khuẩn (x 10^6 CFU/ml) 0,45 0,4 Đợt 0,391 Đợt 0,35 0,3 0,268 0,25 0,2 0,15 0,093 0,077 0,1 0,065 0,029 0,0350,045 0,05 0,163 0,141 0,11 0,061 Bể thu mẫu Hình 4.2: Biến động mật độ vi khuẩn tổng cộng đợt thu huyện Thới Lai, Cần Thơ Nhìn chung biến đổi mật độ vi khuẩn tổng cộng bể qua đợt thu tương đối thấp Riêng có bể mật độ vi khuẩn tổng cộng cao đợt đợt 2: 0,391x106 0,268x106 CFU/ml Ở đợt bể có mật độ vi khuẩn tổng cộng thấp 0,035x106 CFU/ml, đợt bể có giá trị thấp với mật độ vi khuẩn tổng cộng 0,029x106 CFU/ml Qua kết cho ta thấy việc quản lý nguồn nước bể ni cá chình huyện Thới Lai – Cần Thơ đợt tốt Nhưng đợt ta cần phải ý tới bể có mật độ vi khuẩn tổng cộng cao So với mật độ vi khuẩn tổng cộng trại Thủy sản mật độ vi khuẩn tổng cộng huyện Thới Lai có biến đổi lớn (ngoại trừ trường hợp bể 1) Từ kết cho ta thấy nguồn nước nuôi cá chình bể huyện Thới Lai quản lý tốt Tóm lại kết phân tích mật độ vi khuẩn tổng cộng bể ni cá chình địa điểm thu mức độ cho phép tiêu chuẩn nghành Bộ Thủy sản (số 28 TCN 101:1997) mật độ vi khuẩn tổng cộng nước nuôi thủy sản nhỏ 106 CFU/ml Tuy nhiên cần có biện pháp quản lý mơi trường nước tốt 4.3 Kết kiểm tra ký sinh trùng Ký sinh trùng tác nhân gây bệnh truyền nhiễm, phần lớn chúng đóng vai trò tác nhân hội Ở cá giống ký sinh trùng tác nhân nguy hiểm gây hao hụt lớn đàn cá đồng thời làm giảm chất lượng đàn cá giống sau Ngược lại, cá lớn ký sinh trùng chưa phải nguyên nhân gây hao hụt lớn chúng tác nhân hội góp phần làm lây 26 lan mầm bệnh vi khuẩn, thúc đẩy bệnh vi khuẩn hay tác nhân khác gây trở nên phức tạp nghiêm trọng Sau phân tích 106 mẫu cá chình thu địa điểm: trại cá khoa Thủy Sản huyện Thới Lai cho thấy tỷ lệ nhiễm (TLN) cường độ nhiễm (CĐN) lồi ký sinh trùng cá chình cao Thành phần loài mức độ nhiễm ký sinh trùng cá chình thể Bảng 4.2 Bảng 4.2 Thành phần loài mức độ nhiễm ký sinh trùng cá chình Địa điểm Trại cá khoa Thủy sản Thới Lai Loài ký sinh trùng Dactylogyrus Trichodina Dactylogyrus Trichodina Cơ quan ký sinh Mang Da Mang Da TLN (%) 89,66 24,56 83,33 27,08 CĐN (trùng/lame) 1-25 1-5 1-22 1-2 Qua tháng phân tích mẫu cho ta thấy khơng có chênh lệch nhiều tỷ lệ nhiễm giống ký sinh trùng Dactylogyrus Trichodina cá chình ni bể dù thu địa điểm khác Kết phân tích cho thấy thời điểm thu mẫu, mẫu cá chình ni chủ yếu nhiễm ngoại ký sinh, đề tài khơng tìm thấy nội ký sinh trùng gây nhiễm cá chình địa điểm thu mẫu 4.3.1 Sán đơn chủ Dactylogyrus Qua kết thu mẫu quan sát kính hiển vi quang học (10X) Sán đơn chủ Dactylogyrus có thể nhỏ, dài, màu trắng nhạt vận động linh hoạt Phía sau thể có đĩa bám, đĩa bám có đơi móc nối với màng nối lưng màng nối bụng, xung quanh đĩa bám có đơi móc rìa Dactylogyrus đẻ trứng, sau vài ngày nở cho ấu trùng dài, có điểm mắt Sán đơn chủ Dactylogyrus thường ký sinh da mang chủ yếu mang, tổ chức da mang bị Dactylogyrus ký sinh làm cho da mang cá tiết nhiều dịch nhờn ảnh hưởng đến hô hấp cá, bị viêm loét tạo điều kiện cho vi khuẩn, nấm xâm nhập gây bệnh Như hình thái, cấu tạo vị trí ký sinh sán đơn chủ Dactylogyrus phù hợp với mô tả Hà Ký Bùi Quang Tề (2007) Sán đơn chủ Dactylogyrus thuộc Dactylogydea, họ Dactylogyridae, giống Dactylogyrus (Hà Ký Bùi Quang Tề, 2007) Theo Bauer (1969, 1977) sán đơn chủ Dactylogyrus ký sinh nhiều loài cá nước Cá bị bệnh bơi lội chậm chạp, thể thiếu máu, cá gầy yếu, bệnh phát triển bể, ao nuôi mật độ dày, điều kiện môi trường bẩn (trích dẫn Nguyễn Thị Thu Hằng, 2009) Theo kết từ Bảng 4.2 sán đơn chủ Dactylogyrus tìm thấy 27 địa điểm thu mẫu vị trí ký sinh mang Ở trại thủy sản, sán đơn chủ xuất cá chình với TLN cao 89,66 % CĐN (1 - 25 trùng/lame) Còn Thới Lai sán đơn chủ xuất với TLN thấp 83,33% CĐN (1 - 22 trùng/lame) Cũng theo Bauer (1969, 1977) trích dẫn Nguyễn Thị Thu Hằng (2009) sán đơn chủ Dactylogyrus ký sinh với cường độ nhiễm 20 - 30 trùng/cá thể, làm cho cá chết Như với tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm sán đơn chủ gây chết cá khơng làm cá chết mức hàng loạt Nếu khơng có biện pháp phịng trị bệnh sán thích hợp gây ảnh hưởng lớn đến sức khỏe đàn cá chình ni bể 4.3.2 Trùng bánh xe Trichodina Theo Hà Ký Bùi Quang Tề (2007) trùng bánh xe có cấu tạo thể mặt bên giống chuông, mặt bụng giống đĩa Lúc vận động quay trịn lật qua lật lại giống bánh xe, dĩa có vịng đường phóng xa Các thể xếp khít chồng lên tạo thành đường vịng trịn Xung quanh thể có lơng tơ phân bố, lông tơ luôn rung động làm cho thể vận động linh hoạt Trùng bánh xe sống tự nước (ngồi ký chủ) từ - 1,5 ngày ký sinh chủ yếu da, mang, mũi, cá Trùng bánh xe thuộc Peritrichida, họ Trichodonidae, giống Trichodina (Hà Ký Bùi Quang Tề, 2007) Theo Lom and Dykova (1992), trùng bánh xe thường xuất quanh năm, chủ yếu phát triển mạnh vào mùa mưa, thời tiết ấm (trích dẫn Lư Trí Tài, 2010) Cá bệnh có nhiều nhớt màu trắng đục, da chuyển thành màu xám, cá ngứa ngáy, lên mặt nước, tách đàn, cá bơi lội không định hướng, cá bệnh nhẹ gầy yếu, không điều trị kịp thời cá chết Trichodina phát triển nhiều môi trường nước dơ bẩn mật độ nuôi dày (trích dẫn Nguyễn Thị Thu Hằng, 2009) Theo Bảng 4.2 trùng bánh xe Trichodina xuất cá chình địa điểm thu, tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm thấp so với sán đơn chủ Dactylogyrus Ở trại thủy sản trùng bánh xe Trichodina có TLN 24,56%, CĐN (1 - con/lame), cịn Thới Lai trùng bánh xe có TLN 27,08% , CĐN (1 con/lame) Theo Nguyễn Thị Thu Hằng (2009), TLN 90 - 100%, CĐN 20 30 trùng/10X gây nguy hiểm cho cá cá phát bệnh CĐN 50 - 100 trùng/10X Như với TLN CĐN trùng bánh xe Trichodina không gây ảnh hưởng lớn đến sức khỏe đàn cá chình ni bể 28 A B C D Hình 4.3: Hình ảnh lồi ký sinh trùng cá chình (A) Trùng bánh xe Trichodina mặt bên (10X); (B), (C) Sán đơn chủ Dactylogyrus (10X); (C) Trùng bánh xe Trichodina (40X) 4.4 Kết phân lập vi khuẩn Đề tài tiến hành phân lập vi khuẩn cá chình bị nhiễm bệnh địa điểm: trại cá khoa Thủy sản huyện Thới Lai Tổng cộng thu 20 chủng vi khuẩn từ 106 mẫu cá, chi tiết số chủng vi khuẩn điểm thể Bảng 4.3 Bảng 4.3 Số chủng vi khuẩn phân lập địa điểm Địa điểm Trại cá khoa Thủy sản Thới Lai Số chủng vi khuẩn 14 Số mẫu cá kiểm tra Thời gian 58 8/11 - 4/12 48 8/11 - 3/12 Các mẫu vi khuẩn phân lập từ cá chình bệnh với dấu hiệu bệnh lý như: cá lờ đờ, cọ thân vào thành bể, da, vây xuất huyết, cá bị nhớt, có dịch xoang bụng, gan, thận, tùy tạng nhợt nhạt Các chủng vi khuẩn phân lập từ gan, thận, tụy tạng môi trường TSA (tryptic soy agar) Sau 24h 28 oC thu khuẩn lạc to, trịn, vàng kem, mơi trường GSP thu khuẩn màu vàng, môi trường đặc trưng để phân lập nhóm vi khuẩn Aeromonas spp 29 Pseudomonas spp Vi khuẩn tách ròng nhiều lần để thu chủng làm nguyên liệu để thực thí nghiệm định danh vi khuẩn 4.5 Kết định danh vi khuẩn Các chủng vi khuẩn định danh theo phương pháp Frerichs and Millar (1993); Buller (2004) kít API 20E Kết kiểm tra tiêu sinh hóa thể chi tiết Bảng 4.4 Bảng 4.4: Kết kiểm tra tiêu sinh lý, sinh hóa Các đặc điểm sinh hóa 20 chủng vi khuẩn thu cho thấy Gram - Hình dạng que ngắn Oxidase Catalase + + O/F Hình dạng, màu sắc khuẩn lạc Di động O/129 +/+ lồi,tròn, vàng kem + Kháng chủng vi khuẩn Gram -, hình que ngắn, catalase oxidase dương tính, kháng với O/129, có khuẩn lạc màu vàng mơi trường GSP Những đặc điểm hồn tồn giống với mơ tả số tác giả trước nhóm vi khuẩn Aeromonas spp Buller (2004), Inglis et al (1993), Noga (2010) Hình 4.4: Khuẩn lạc vi khuẩn A.hydrophila mơi trường TSA 30 Hình 4.5: Khuẩn lạc vi khuẩn A.hydrophila mơi trường GSP Hình 4.6: Hình nhuộm Gram vi khuẩn A.hydrophila vật kính 100X Để định danh vi khuẩn tới lồi đề tài sử dụng kít API 20E Từ 20 chủng vi khuẩn phân lập ta chọn chủng vi khuẩn G6, G8, G5, G11 để định danh kít API 20E Kết kiểm tra kít API 20E trình qua Bảng 4.5 Bảng 4.5: Kết định danh vi khuẩn kít API 20E ONPG ADH LDC ODC CIT + + + + H2S URE TDA IND VP + + GEL GLU MAN INO SOR + + + - RHA SAC MEL AMY ARA - Ghi chú: (+) : Phản ứng dương tính (-) : Phản ứng âm tính Sau tra bảng định danh kít API 20E, kết cho thấy chủng vi khuẩn A.hydrophila 31 Hình 4.7: Kết định danh kít API 20E Vi khuẩn Aeromonas thuộc họ Aeromonadaceae, Aeromonas vi khuẩn Gram âm, có khuẩn lạc trịn, màu vàng nhạt, nhiệt độ phát triển thích hợp từ 28 30oC, di động, hình que, hiếu khí yếm khí khơng bắt buộc, khử nitrate, có khả lên men đường, oxidase catalase dương tính, kháng với O/129 bao gồm A.hydrophila, A.caviae, A.sorbia (Austin and Austin, 1993) Nguyên nhân gây nên bệnh xuất huyết gọi bệnh đốm đỏ hay bệnh nhiễm trùng máu vi khuẩn A.hydrophila gây (Từ Thanh Dung, 2011) Trong lồi vi khuẩn thuộc giống Aeromonas A.hydrophila xem loài gây bệnh cho cá nước quan trọng nhất, vi khuẩn gây bệnh nhiễm trùng máu, xuất huyết lồi cá ni cá tự nhiên (Lewis and Plumb, 1979) Cá bị nhiễm A.hydrophila có biểu chung da thường đổi màu sậm, cá nhớt, xuất đốm xuất huyết thân, vây, quanh miệng, hậu môn, mắt lồi, đục.(Bùi Quang Tề, 2006) Nhiều nghiên cứu giới ghi nhận vi khuẩn A.hydrophila tác nhân gây bệnh cá chình Điển hình dịch bệnh gây bệnh lở loét cá với dấu hiệu sau: mắt bị đục, bơi lờ đờ, mắt nhớt bụng, hậu môn, vây thường xuất chấm đỏ li ti., bệnh thường xuất vào mùa xuân, hè, nhiệt độ nước khoảng 17 - 22 oC, khoảng nhiệt độ cho khoảng nhiệt độ thích hợp cho vi khuẩn phát triển gây tỉ lệ chết từ 80 - 90% (Angka, 1990; Saitanu et al.,1982; Esteve et al., 1993) Vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá trê trắng giống, tác nhân gây bệnh xuất huyết cá basa nuôi bè gỗ (Tanasomwang and Saitanu, 1979) 32 Tóm lại sau quan sát đặc điểm sinh lý, sinh hóa, cộng thêm định danh kit API 20E, khẳng định chủng vi khuẩn G5, G6, G8, G11 gây bệnh cá chình q trình thu mẫu đề tài lồi vi khuẩn A.hydrophila, 16 chủng lại thuộc giống vi khuẩn Aeromonas spp Các dấu hiệu bệnh lý, đặc điểm sinh hóa chủng vi khuẩn có tương đồng với nhiều tác giả trước (Đặng Thị Hoàng Oanh, 2006; Buller, 2004, Ralman et al., 2000) Vì cho thấy kết định danh hồn toàn phù hợp 4.6 Kết kháng sinh đồ Nghiên cứu tiến hành kiểm tra khả kháng nhạy với 15 loại thuốc kháng sinh: doxycycline 30µg, florfenicol 30µg, ciprofloxacin 10µg, ampicillin 10µg, sulphamethoxazole/trimethoprim 25µg, Tetracycline 15µg, Gentamycin , amoxycillin/clavulanic acid 30µg, erythromycin 15µg, cephalexin 30µg, flumequine 30µg, rifampicin 5µg, enrofloxacine 5µg, cefotaxime 30µg, colistinsulphate 10µg với 20 chủng vi khuẩn Kết kháng sinh đồ thể Bảng 4.6 Bảng 4.6 Các chủng vi khuẩn thể tính nhạy, nhạy trung bình, kháng 15 loại thuốc kháng sinh STT 10 11 12 13 14 15 Kháng sinh Doxycycline (DO) Florfenicol (FFC) Ciprofloxacin (CIP) Amoxycillin/clavulanic acid (AMC) Ampicillin (AMP) Rifampicin (RD) Enrofloxacine (ENR) Cefotaxime (CTX) Colistinsulphate (CT) Erythromycin (E) Cephalexin (CL) Flumequine (UB) Sulphamethoxazole/trimethoprim (SXT) Tetracycline (TE) Gentamycin (GM) Số chủng kháng 0 20 20 0 15 20 20 Kháng (%) 0 100 100 0 75 20 100 100 Nhạy (%) 55 75 70 0 30 70 70 25 0 Nhạy TB (%) 45 25 30 0 70 30 30 25 55 0 13 65 35 13 65 65 35 30 Qua Bảng 4.6 cho ta thấy chủng vi khuẩn kháng hoàn toàn loại thuốc kháng sinh: amoxycillin/clavulanic acid, ampicillin cephalexin, flumequine,và kháng cao với sulphamethoxazole/trimethoprim (65%), colistinsulphate (75%), gentamycin (65%) kháng thấp erythromycin 33 20% Các chủng nhạy tương đối cao với loại thuốc kháng sinh: florfenicol (75%), ciprofloxacin (70%), cefotaxime (70%), tetracycline (65%) Ngoài chủng vi khuẩn cịn nhạy trung bình loại thuốc kháng sinh đây: doxycycline (45%), rifampicin (70%), erythromycin (55%) Tuy nhiên đặc tính kháng nhạy với kháng sinh chủng vi khuẩn địa điểm thu mẫu khác Chi tiết thể Hình 4.7 4.8 Nhạy Nhạy trung bình Kháng % chủng vi khuẩn 120 100 80 60 40 20 DO FFC CIP AMC AMP RD ENR CTX CT E CL UB SXT TE GM Loại kháng sinh Hình 4.8: Khả kháng thuốc chủng vi khuẩn thu trại Thủy Sản - ĐH Cần Thơ Nhạy Nhạy trung bình Kháng % chủng vi khuẩn 120 100 80 60 40 20 DO FFC CIP AMC AMP RD ENR CTX CT E CL UB SXT TE GM Loại kháng sinh Hình 4.9: Khả kháng thuốc chủng vi khuẩn thu huyện Thới Lai - Cần Thơ Đối với điểm thu mẫu khoa Thủy sản, tất chủng vi khuẩn kháng hoàn toàn loại kháng sinh sau đây: ampicillin amoxycillin/clavulanic acid, cephalexin, flumequine kháng tương đối cao loại kháng sinh sau: sulphamethoxazole/trimethoprim (71,4%), 34 colistinsulphate (64,3%), gentamycin (64,3%) Các chủng nhạy tương đối cao với loại thuốc kháng sinh sao: florfenicol (71,4%), ciprofloxacin (71,4%), cefotaxime (71,4%), tetracycline (64,3%), enrofloxacine (78,6%) Đối với điểm thu mẫu huyện Thới Lai, tất chủng vi khuẩn kháng hoàn toàn loại kháng sinh sau đây: ampicillin amoxycillin/clavulanic acid, cephalexin, flumequine, colistinsulphate Và nhạy tương đối cao loại kháng sinh: doxycycline (83,3%), florfenicol (83,3%), ciprofloxacin (66,7%), tetracycline (66,7%), cefotaxime (66,7%) Từ kết so sánh thấy đặc điểm kháng thuốc chủng vi khuẩn không giống điểm, điều nhiều tác giả ghi nhận, điển hình nghiên cứu Sarter et al., 2001 vi khuẩn Gram - môi trường nước, kết ghi nhận khác đặc tính kháng thuốc chủng vi khuẩn vùng nuôi khác đồng sông Cửu Long Vì cần thiết phải thực kháng sinh đồ điều trị bệnh động vật thủy sản nhằm đem lại hiểu tốt Nhạy Nhạy trung bình K háng 120 % chủng vi khuẩn 100 80 60 40 20 DO F FC CIP AMC AMP RD ENR CT X CT E CL UB SXT TE GM Loại khán g sinh Hình 4.10 : Khả kháng thuốc chủng vi khuẩn A.hydrophila Qua kết kháng sinh đồ Hình 4.10 đề tài thực cho thấy chủng vi khuẩn A.hydrophila gây bệnh cá chình địa điểm thu cịn nhạy cao với lồi kháng sinh: doxycycline, florfenicol, enrofloxacine, cefotaxime, tetracycline Vì sử dụng loại thuốc để điều trị bệnh vi khuẩn A.hydrophila gây trường hợp thật cần thiết CHƯƠNG 35 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 5.1 Kết luận Kết kiểm tra mật độ vi khuẩn tổng cộng bể ni cá chình trại cá khoa Thủy sản huyện Thới Lai - Cần Thơ dao động khoảng (0,024 -0,391x106 CFU/ml) nằm giới hạn cho phép không ảnh hưởng đến sức khỏe cá chình ni bể Kết phân tích ký sinh trùng cho thấy có nhóm: Trichodina, Dactylogyrus xuất cá chình ni bể hai địa điểm khác nhau: trại cá khoa Thủy sản huyện Thới Lai Tỷ lệ nhiễm nhóm ký sinh trùng không chênh lệch nhiều địa điểm thu Kết định danh vi khuẩn, định danh chủng G5, G6, G8, G11 kít API 20E vi khuẩn A.hydrophila, 16 chủng lại thuộc giống vi khuẩn Aeromonas spp Kết làm kháng sinh đồ cho ta thấy chủng vi khuẩn kháng hoàn toàn loại thuốc kháng sinh: ampicillin amoxycillin/clavulanic acid, cephalexin, flumequine Các chủng nhạy tương đối cao với loại thuốc kháng sinh sau: florfenicol (75%), ciprofloxacin (70%), cefotaxime (70%), tetracycline (65%) 5.2 Đề xuất  Nên tiến hành gây cảm nhiễm để xác định khả gây bệnh vi khuẩn phân lập cá Chình  Cần làm thêm mơ bệnh học để xác định tổn thương vi khuẩn gây cho cá chình mức độ tế bào  Cần khẳng định kết định danh vi khuẩn phương pháp PCR TÀI LIỆU THAM KHẢO Amoro C., Biosca E.G., 1996 Vibrio vulnificus biotyp 2, pathogenic for eels, is also an opportunistic pathogen for humans Applied and Environmental Microbiology, 62(4):1454-1457 36 ... triển nghề nuôi cá chình phát sinh vấn đề cấp thiết dịch bệnh, giống, thức ăn, quản lý ao Xuất phát từ thực tế nói đề tài ? ?Xác định số mầm bệnh cá chình bơng (Anguilla marmorata) nuôi bể? ?? thực... gây bệnh cá chình bơng ni bể, tạo sở khoa học để đưa biện pháp quản lý sức khỏe cá chình tốt 1.3 Nội dung đề tài - Xác định vi khuẩn tổng cộng môi trường nước bể nuôi - - Xác định mầm bệnh, định. .. có A B C D Hình 2.1: Một số hình ảnh cá chình Việt Nam (A) Cá chình bơng (A marmorata), (B) Cá chình Nhật Bản (A japonica), (C) Cá chình mun (A bicorlo pacifica), (D) Cá chình nhọn (A borneensis)