Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu khả năng nhân giống Gừng Núi Đá Zingiber purpureum Roscoe bằng phương pháp in vitro. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống Gừng Núi Đá Zingiber purpureum Roscoe bằng phương pháp in vitro. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống Gừng Núi Đá Zingiber purpureum Roscoe bằng phương pháp in vitro. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống Gừng Núi Đá Zingiber purpureum Roscoe bằng phương pháp in vitro. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống Gừng Núi Đá Zingiber purpureum Roscoe bằng phương pháp in vitro. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống Gừng Núi Đá Zingiber purpureum Roscoe bằng phương pháp in vitro. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống Gừng Núi Đá Zingiber purpureum Roscoe bằng phương pháp in vitro. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống Gừng Núi Đá Zingiber purpureum Roscoe bằng phương pháp in vitro. (Khóa luận tốt nghiệp)
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NÔNG THỊ NHỊ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CÂY GỪNG NÚI ĐÁ (Zingiber purpureum Roscoe) BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo Chun ngành Khoa Khóa học : Chính quy : Công nghệ Sinh học : CNSH - CNTP : 2012 - 2016 Thái Nguyên, năm 2016 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NÔNG THỊ NHỊ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CÂY GỪNG NÚI ĐÁ (Zingiber purpureum Roscoe) BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP Lớp : K44 - CNSH Khóa học : 2012 - 2016 Giảng viên hƣớng dẫn: 1.Th.S Nguyễn Thị Tình Th.S Nguyễn Xuân Vũ Khoa CNSH-CNTP- Trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Thái Nguyên, năm 2016 i LỜI CẢM ƠN Kết thúc thời gian tháng thực tập phòng thí nghiệm ni cấy mơ Tế Bào Thực Vật, Khoa Công nghệ Sinh học & Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Nông Lâm đến em hoàn thành đề tài thực tập tốt nghiệp Để hồn thành khóa luận này, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tri ân sâu sắc đến Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa tồn thể thầy giáo khoa tạo điều kiện tốt giúp đỡ em thời gian qua để em hồn thành đề tài tốt nghiệp Đại học đạt kết hơm Và đặc biệt Em xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Th.S Nguyễn Thị Tình Th.S Ma Thị Hồn tận tình hướng dẫn, dạy bảo suốt q trình thực hồn thành tốt đề tài tốt nghiệp: “Nghiên cứu khả nhân giống Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) phương pháp in vitro” đến em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến tồn thể gia đình, người thân, bạn bè, người bên cạnh em, cổ vũ tinh thần lớn lao ủng hộ em suốt thời gian học tập nghiên cứu Trong trình thực tập, q trình làm báo cáo thực tập thời gian có hạn, trình độ, kỹ thân nhiều hạn chế nên khó tránh sai sót, em mong thầy cô bỏ qua Em mong nhận ý kiến đóng góp quý báu, bảo Thầy Cô bạn để em học thêm nhiều kinh nghiệm lĩnh vực đề tài đầy đủ hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày 28 thán 05 năm 2016 Sinh viên thực Nông Thị Nhị ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Các loài thuộc chi Zingiber Mill Việt Nam [4] Bảng 4.1: Kết ảnh hưởng loại hóa chất khử trùng đến khả tạo vật liệu vô trùng (sau ngày nuôi cấy) 38 Bảng 4.2: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 đến khả tạo vật liệu bệnh (sau ngày) 40 Bảng 4.3: Ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (MS, B5, WPM *) 43 Bảng 4.4: Kết ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh Gừng Núi Đá (sau 30 ngày) 45 Bảng 4.5: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ kinitin kết hợp BA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá (sau 30 ngày nuôi cấy) 47 Bảng 4.6: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ kinetin BA kết hợp NAA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá (sau 30 ngày nuôi cấy) .50 Bảng 4.7: Kết nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng nước dừa đến khả sinh trưởng phát triển Gừng Núi Đá (sau 30 ngày nuôi cấy) 53 Bảng 4.8: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ Gừng Núi Đá sau 40 ngày nuôi cấy 56 Bảng 4.9: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA kết hợp với than hoạt tính đến khả rễ Gừng Núi Đá sau 40 ngày nuôi cấy .59 iii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1: Sự phân hóa phản phân hóa tế bào .13 Hình 3.1: Ảnh Củ Gừng Núi Đá (Zingber purpureum Roscoe) đưa vào nuôi cấy mô 26 Hình 4.1: Biểu đồ thể tỷ lệ mẫu với loại hóa chất khử trùng đến tỷ lệ sống mẫu tạo vật liệu vô trùng mẫu Gừng Núi Đá (sau ngày nuôi cấy) 38 Hình 4.2: Biểu đồ thể tỷ lệ mẫu không nhiễm với nồng độ thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 đến tỷ lệ sống mẫu tạo vật liệu vô trùng (sau ngày nuôi cấy) 41 Hình 4.3: Chồi Gừng Núi Đá tái sinh loại mơi trường (sau 40 ngày ni cấy) 43 Hình 4.4: Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe.) bổ sung Kinetin nồng độ khác (30 ngày ni cấy) 45 Hình 4.5: Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe.) bổ sung Kinetin kết hợp BA nồng độ khác (30 ngày ni cấy) .47 Hình 4.6: Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe.) bổ sung Kinetin kết hợp BA nồng độ khác (30 ngày ni cấy) .50 Hình 4.7: Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe.) bổ sung nước dừa nồng độ khác (30 ngày ni cấy) 54 Hình 4.8: Ảnh rễ Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) môi trường rễ bổ sung NAA (Sau 40 ngày ni cấy) .57 Hình 4.9: Ảnh rễ Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) môi trường rễ bổ sung NAA kết hợp với than hoạt tính (Sau 40 ngày ni cấy) 59 iv DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT B1 : Thiamin B3 : Nicotinic acid BA : 6-Benzylaminopurine CT : Công thức CTTN : Cơng thức thí nghiệm CV% : Hệ số biến động Coeficcinent of Variation ĐC : Đối chứng GA3 : Gibberellic acid IAA : Indole-3-acetic acid Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : So sánh theo giá trị khác biệt có nghĩa nhỏ mức 0,05 (Least Singnificant Difference Test) MS : Murashige and Skoog’s NAA : -Naphlene axetic acid Kin : Kinetin (6-furfuryl-aminopurien) TB : Trung bình TLTK : Tài liệu tham khảo Tn : Thí nghiệm WPM : Woody Plant Medium v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC BẢNG ii DANH MỤC CÁC HÌNH iii DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT iv MỤC LỤC v PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu yêu cầu đề tài .2 1.2.1 Mục tiêu đề tài 1.2.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn .3 PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan chi Gừng (Zingiber) 2.1.1 Họ gừng chi Gừng 2.1.2 Vị trí phân loại Gừng núi đá (Zingiber) 2.1.3 Đặc điểm thực vật phân bố Họ Gừng (Zingiberraceae) 2.1.3.1 Đặc điểm thực vật chung họ Gừng 2.1.3.2 Phân bố sinh thái 2.1.4 Giới thiệu Gừng Núi Đá .9 2.1.4.1 Thân 2.1.4.2 Lá 10 2.1.4.3 Hoa .10 2.1.4.4 Củ 10 2.1.4.5 Phân bố sinh thái 10 2.1.4.6 Thành phần hóa học .10 vi 2.1.4.7 Giá trị dược liệu 11 2.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật .12 2.2.1 Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật 12 2.2.2 Tính tồn tế bào thực vật 12 2.2.3 Sự phân hóa phản phân hóa tế bào .13 2.3 Các nhân tố ảnh hưởng tới trình nhân giống nuôi cấy mô tế bào thực vật 14 2.3.1 Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật 14 2.3.1.1 Nguồn Cacbon 14 2.3.1.2 Các nguyên tố khoáng đa lượng, vi lượng 15 2.3.1.3 Vitamin 15 2.3.1.4 Các chất hữu tự nhiên 16 2.3.1.5 Các thành phần khác 16 2.3.1.6 pH môi trường .16 2.3.1.7 Các chất điều hòa sinh trưởng 17 2.3.2 Môi trường vật lý 18 2.3.2.1 Ánh sáng .18 2.3.2.2 Nhiệt độ 19 2.3.2.3 Độ ẩm 19 2.3.3 Vật liệu nuôi cấy .19 2.3.4 Điều kiện vô trùng 20 2.4 Tình hình nghiên cứu số thuộc Họ Gừng(Zingiber) giới Việt Nam 21 2.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 21 2.4.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 23 PHẦN VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu, hóa chất thiết bị 26 3.1.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 26 3.1.2 Hóa chất thiết bị 26 vii 3.2 Phạm vi, địa điểm thời gian nghiên cứu 27 3.3 Nội dung nghiên cứu 27 3.3.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng hóa chất khử trùng, nồng độ hóa chất khử trùng thời gian khử trùng đến đến tỷ lệ sống mẫu đế tạo vật liệu bệnh 27 3.3.2 Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá .27 3.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng chất kích thích sinh trưởng Kinetin, BA, NAA tới khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 27 3.3.4 Nội dung 4: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ nước dừa đến khả sinh trưởng phát triển Gừng Núi Đá .28 3.3.5 Nội dung 5: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ chất kích thích sinh trưởng NAA, than hoạt tính đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Gừng Núi Đá .28 3.4 Phương pháp nghiên cứu 28 3.4.1 Điều kiện bố trí thí nghiệm .28 3.4.2 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy in vitro 28 3.4.3 Phương pháp nghiên cứu .28 3.4.3.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng hóa chất khử trùng chất khử trùng, nồng độ hóa chất khử trùng thời gian khử trùng đến đến tỷ lệ sống mẫu đế tạo vật liệu bệnh 28 3.4.3.2 Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá .30 3.4.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ chất kích thích sinh trưởng Kinitin, BA, NAA tới khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá .31 3.4.3.4 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng nước dừa đến khả sinh trưởng phát triển Gừng Núi Đá .33 3.4.3.5 Nội dung 4: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ kích thích sinh trưởng NAA than hoạt tính đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Gừng Núi Đá 33 viii 3.6 Phương pháp thu thập, xử lý số liệu tiêu đánh giá 35 3.6.1 Thu thập số liệu .35 3.6.2 Các tiêu theo dõi 35 3.6.3 Phương pháp xử lý số liệu .36 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN .37 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng hóa chất khử trùng chất khử trùng, nồng độ hóa chất khử trùng thời gian khử trùng đến khả tạo vật liệu bệnh .37 4.1.1 Nghiên cứu ảnh hưởng số hóa chất khử trùng đến tỷ lệ sống mẫu tạo vật liệu bệnh 37 4.1.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 đến tỷ lệ sống mẫu tạo vật liệu bệnh 39 4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá .42 4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng chất kích thích sinh trưởng Kinetin, BA, NAA tới khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 44 4.3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 45 4.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin kết hợp với nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 46 4.3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ kinetin BA kết hợp NAA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 49 4.4 Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng nước dừa đến khả sinh trưởng phát triển Gừng Núi Đá 52 4.5 Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng chất kích thích sinh trưởng đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Gừng Núi Đá 55 4.5.1 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA than hoạt tính đến khả rễ Gừng Núi Đá 56 4.5.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA kết hợp than hoạt tính đến khả rễ Gừng Núi Đá .59 ... thực hoàn thành tốt đề tài tốt nghiệp: Nghiên cứu khả nhân giống Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) phương pháp in vitro” đến em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, Em xin gửi lời cảm... đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CÂY GỪNG NÚI ĐÁ (Zingiber purpureum Roscoe) BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ Sinh học... Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe. ) bổ sung Kinetin kết hợp BA nồng độ khác (30 ngày nuôi cấy) .47 Hình 4.6: Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe. ) bổ sung Kinetin kết hợp