Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống cây Đinh lăng lá nhỏ Polycias fruticosa L. Harm. bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật. (Khóa luận tốt nghiệp)
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - NGUYỄN VĂN THANH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY ĐINH LĂNG LÁ NHỎ (Polycias fruticosa L Harm.) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NI CẤY MƠ TẾ BÀO THỰC VẬT KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2012 - 2016 Thái Nguyên, năm 2016 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - NGUYỄN VĂN THANH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY ĐINH LĂNG LÁ NHỎ (Polycias fruticosa L Harms.) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ Sinh học Lớp : K44 - CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2012 - 2016 Giảng viên hƣớng dẫn : PGS.TS Ngơ Xn Bình ThS Nguyễn Thị Tình Thái Nguyên, năm 2016 i LỜI CẢM ƠN Đƣợc trí ban giám hiệu nhà trƣờng, ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ sinh học Và công nghệ thực phẩm thời gian thực tập tốt nghiệp em thực đề tài: “Nghiên cứu nhân giống Đinh lăng nhỏ (Polycias fruticosa L Harm.) phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật” Qua tháng thực tập viện nghiên cứu phát triển lâm nghiệp phía bắc đến em hồn thành đề tài Để đạt kết nhƣ ngày hôm em xin chân thành cảm ơn ban giám hiệu nhà trƣờng, ban chủ nhiệm khoa thầy cô giáo môn công nghệ sinh học, anh chị phịng cơng nghệ sinh học viện nghiên cứu phát triển lâm nghiệp tạo điều kiện giúp đỡ em suốt thời gian thực đề tài Em xin bày tỏ long biết ơn sâu sắc tới Cơ giáo Ths Nguyễn Thị Tình chị Phạm Thị Thảo tận tình bảo, hƣớng dẫn em thời gian thực đề tài Cuối em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè hết lòng động viên, giúp đỡ tạo điều kiện vật chất tinh thần cho em trình học tập nghiên cứu Do thời gian thực tập đề tài có giới hạn nên đề tài khơng thể tránh khỏi sai sót Em mong nhận đƣợc đóng góp ý kiến thầy bạn để đề tài em đƣợc hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn ! Thái nguyên, ngày tháng năm 2016 Sinh viên thực Nguyễn Văn Thanh ii DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Trang Ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 0.1% đến kết khử trùng 27 Bảng 4.2 Kết ảnh hƣởng số môi trƣờng đến khả tái sinh chồi Đinh lăng nhỏ sau 45 ngày 29 Bảng 4.3 Kết ảnh hƣởng nồng độ kinetine BA đến khả nhân nhanh chồi Đinh lănglá nhỏ sau tháng 31 Bảng 4.4 Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng loại cytokine thích hợp kết hợp với NAA đến khả nhân nhanh chồi Đinh lăng sau tuần tiến hành thí nghiệm 34 Bảng 4.5 Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng Auxin (NAA, IBA) đến khả rễ chồi Đinh lăng nhỏ 30 ngày 36 Bảng 4.6 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số loại giá thể đến khả sinh trƣởng phát triển in vitro vƣờn ƣơm sau tuần 38 iii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Trang Cây Đinh lăng nhỏ Hình 2.1: Vƣờn đinh lăng trồng hộ gia đình 12 Hình 4.1: Biểu đồ thể ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 0.1%đến hiệu khử trùng mẫu 28 Hình 4.2: Biểu đồ thể ảnh hƣởng số môi trƣờng đến khả tái sinh chồi Đinh lăng nhỏ 30 Hình 4.3: Thể ảnh hƣởng nồng độ kinetine BA đến khả nhân nhanh chồi Đinh lănglá nhỏ sau tháng 32 Hình 4.4: Thể ảnh hƣởng hàm lƣợng loại cytokine thích hợp kết hợp với NAA đến khả nhân nhanh chồi Đinh lăng nhỏ sau tuần thí nghiệm 34 Hình 4.5: Thể hiên ảnh hƣởng hàm lƣợng Auxin (NAA, IBA) đến khả rễ chồi Đinh lăng nhỏ 30 ngày 36 Hình 4.6: Biểu đồ thể ảnh hƣởng số loại giá thể đến khả sinh trƣởng phát triển in vitro vƣờn ƣơm i iv DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT 2,4D : 2,4 Diclorophenoxy axetic axit BAP : 6-benzin- aminopurin CT : Công thức ĐC : Đối chứng GA3 : Axit giberilic IBA : Indol butylic acid MS : Murashige & Skoog TB : Trung bình v MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa đề tài PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sơ lƣợc Đinh lăng 2.1.1 Nguồn gốc vị trí phân loại 2.1.2 Đặc điểm sinh thái 2.1.3 Đặc điểm hình thái 2.1.4 Cách trồng 2.1.5 Thu hái chế biến 2.1.6 Thành phần hóa học 2.1.7 Tác dụng dƣợc lý 2.2 Tình hình sử dụng Đinh lăng Việt Nam giới .11 2.2.1 Trên giới .11 2.2.2 Ở Việt Nam 11 2.3 Cơ sở khoa học 13 2.3.1 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào 13 2.3.2 Kỹ thuật nuôi cấy đỉnh sinh trƣởng tạo giống bệnh nhân nhanh giống 14 2.3.3 Ảnh hƣởng chất điều tiết sinh trƣởng tới q trình ni cấy mơ tế bào thực vật 14 PHẦN 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Vật liệu phạm vi nghiên cứu 18 vi 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu .18 3.3 Hóa chất thiết bị sử dụng 18 3.3.1 Hóa chất .18 3.3.2 Thiết bị sử dụng 18 3.4 Nội dung nghiên cứu 19 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.5.1 Điều kiện bố trí thí nghiệm 19 3.5.2 Chuẩn bị môi trƣờng nuôi cấy mô tế bào thực vật 19 3.5.3 Nội dung 1: 20 3.5.4 Phƣơng pháp nghiên cứu nội dung .21 3.5.5 Phƣơng pháp nghiên cứu nội dung .22 3.5.6 Phƣơng pháp nghiên cứu nội dung .24 3.5.7 Phƣơng pháp xử lý số liệu .26 PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 4.1 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 0.1% đến đến kết khử trùng mẫu Đinh lăng .27 4.2 Kết ảnh hƣởng số môi trƣờng đến khả tái sinh chồi Đinh lăng .29 4.3 Kết ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng tới khả nhân nhanh chồi Đinh lăng .31 4.3.1 Kết ảnh hƣởng nồng độ loại cytokine đến khả nhân nhanh chồi Đinh lăng 31 4.3.2 Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng NAA thích hợp đến khả nhân nhanh chồi Đinh lăng .34 4.4 Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng Auxin than hoạt tính đến khả rễ chồi Đinh lăng 36 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số loại giá thể đến khả sinh trƣởng phát triển in vitro vƣờn ƣơm 37 vii PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 40 5.1 Kết luận 40 5.2 Kiến nghị .41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 I Tài liệu tiếng Việt .42 II Tài liệu nƣớc 44 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Nguồn tài nguyên thuốc Việt Nam phong phú, đa dạng có nhiều thuốc quý Trong số có Đinh lăng Đinh lăng (Polycias fruticosa L Harms.) loại dƣợc liệu có giá trị cao ngành y học cổ truyền Việt Nam số nƣớc giới Nhiều cơng trình nghiên cứu chứng minh tác dụng dƣợc lý Đinh lăng tƣơng tự nhƣ nhân sâm độc nhân sâm Vỏ, rễ Đinh lăng chứa saponin, alkaloit, vitamin B1, B2, B6, C, 20 axit amin, glycosit, phytosterol, tanin, axit hữu cơ, tinh dầu, nhiều nguyên tố vi lƣợng: K, Mn, Ca, Mg, Fe, Lo, Zw 21,10 % đƣờng Hai hợp chất quan trọng Đinh lăng polyacetylen saponin tripterpen Trong đó, hợp chất polyetylen tách chiết đƣợc có tính kháng khuẩn mạnh kháng số dạng ung thƣ, cịn hợp chất saponin tripterpen có tác dụng chống stress, chống trầm cảm, chống oxi hóa tốt [13], [14], [20] Dựa nghiên cứu dƣợc tính Đinh lăng, số chế phẩm từ Đinh lăng đƣợc sử dụng nhƣ cao đặc Đinh lăng, tinh sâm PANA, rƣợu thuốc ngọt, viên ngậm DINLAN Điều cho thấy nhu cầu nguồn nguyên liệu Đinh lăng để làm thuốc chữa bệnh ngày tăng Tuy nhiên, nguồn nguyên liệu khai thác tự nhiên thƣờng phân tán, cho chất lƣợng không đồng số lƣợng hạn chế Vì vậy, nhân giống in vitro phƣơng pháp ƣu việt nhằm thu nhận nguồn nguyên liệu ổn định, giống đồng đều, bệnh, làm tăng hoạt chất sinh học so với nguyên liệu ban đầu Cây đinh lăng mang giá trị dƣợc liệu cao nhƣng chế phẩm chứa Đinh lăng thị trƣờng, nguyên nhân nguồn nguyên liệu hạn chế, trồng theo phƣơng pháp tự nhiên cần phải - năm thu hoạch đƣợc rễ ... nghệ thực phẩm thời gian thực tập tốt nghiệp em thực đề tài: ? ?Nghiên cứu nhân giống Đinh lăng nhỏ (Polycias fruticosa L Harm.) phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật” Qua tháng thực tập viện nghiên. .. - NGUYỄN VĂN THANH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY ĐINH LĂNG LÁ NHỎ (Polycias fruticosa L Harms.) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NI CẤY MƠ TẾ BÀO THỰC VẬT KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính... 18 3.4 Nội dung nghiên cứu 19 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.5.1 Điều kiện bố trí thí nghiệm 19 3.5.2 Chuẩn bị môi trƣờng nuôi cấy mô tế bào thực vật 19