Đang tải... (xem toàn văn)
KHẢO SÁT MỘT SỐ YẾU TỐ HOÁ HỌC TRONG TẠO CHỒI THÔNG NHỰA (PINUS MERKUSII) IN VITRO LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP MỤC LỤC Trang Lý lịch cá nhân ............................................................................................................ 1 Lời cam đoan ............................................................................................................. iii Cảm tạ ....................................................................................................................... iv Tóm tắt ........................................................................................................................ v Summary ................................................................................................................. viii Mục lục...................................................................................................................... ix Danh sách các chữ viết tắt ........................................................................................... x Danh sách các bảng ................................................................................................... xi Danh sách các hình ................................................................................................... xii Chương 1 ĐẶT VẤN ĐỀ .......................................................................................... 1 1.1 Đặt vấn đề ............................................................................................................. 1 1.2 Mục tiêu ............................................................................................................... 2 1.3 Giới hạn ................................................................................................................. 2 Chương 2 TỔNG QUAN .......................................................................................... 3 2.1 Giới thiệu về thông nhựa (Pinus merkusii) ........................................................... 3 2.1.1 Phân loại ............................................................................................................. 3 2.1.2 Đặc điểm thực vật học........................................................................................ 3 2.1.3 Đặc điểm phân bố và đặc tính sinh thái của thông nhựa.................................... 5 2.1.3.1 Trên thế giới .................................................................................................... 5 2.1.3.2 Ở Việt Nam ..................................................................................................... 5 2.2 Giá trị kinh tế cây thông nhựa ............................................................................... 7 2.3. Tóm lược những kết quả nghiên cứu về nuôi cấy in vitro chi Pinus. .................. 8 2.3.1 Trên thế giới ....................................................................................................... 8 2.3.2 Ở Việt Nam ...................................................................................................... 10 2.4 Một số yếu tố ảnh hưởng đến nuôi cấy mô tế bào thực vật ................................ 11 2.4.1 Auxin ................................................................................................................ 11 x 2.4.2 Cytokinin .......................................................................................................... 11 2.4.3 Amino acids ..................................................................................................... 13 2.4.4 Than hoạt tính .................................................................................................. 13 Chương 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ............................. 15 3.1 Vật liệu nghiên cứu ............................................................................................. 15 3.2 Thời gian và địa điểm.......................................................................................... 15 3.2.1 Thời gian .......................................................................................................... 15 3.2.2 Địa điểm ........................................................................................................... 16 3.3 Phương pháp nghiên cứu ..................................................................................... 16 3.3.1 Các thí nghiệm ................................................................................................. 16 3.3.2 Xử lý số liệu ..................................................................................................... 23 Chương 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .............................................................. 24 4.1 Xác định yếu tố hoá học hiệu quả nhất cho việc tạo chồi thông nhựa in vitro. ....... 24 4.2 Nghiên cứu tạo cây thông nhựa in vitro hoàn chỉnh. .......................................... 31 Chương 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ................................................................... 50 5.1 Kết luận ............................................................................................................... 50 5.2 Đề nghị ................................................................................................................ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO ...................................................................................... 51 PHỤ LỤC xi DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BA N6 – benzyladenine ctv Cộng tác viên DCR Môi trường Gupta và Durzan, 1985 IBA β – indole butyric acid Javel Hypochlorite – Na LV Môi trường Litvay và ctv, 1985 MS Môi trường Murashige và Skoog, 1962 NAA α naphthalene acetic acid TE môi trường Tang và ctv, 1998 xii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 1.1: Danh mục các loài cây ưu tiên cho lấy lâm sản ngoài gỗ ......................... 8 Bảng 4.1: Ảnh hưởng nồng độ javel lên tỷ lệ mẫu sống và vô trùng của 6 dòng thông nhựa sau 4 tuần nuôi cấy trong thời gian 10 phút ....................... 24 Bảng 4.2: Ảnh hưởng của thời gian khử trùng lên tỷ lệ mẫu sống và vô trùng 6 dòng thông nhựa sau 4 tuần nuôi cấy ở nồng độ javel 60% .................. 25 Bảng 4.3: Ảnh hưởng của một số môi trường dinh dưỡng lên tỷ lệ tạo chồi của 6 dòng thông nhựa sau 8 tuần nuôi cấy có BA (4 mgl) .......................... 27 Bảng 4.4: Ảnh hưởng của một số môi trường dinh dưỡng lên số chồi của 6 dòng thông nhựa sau 8 tuần nuôi cấy có BA (4 mgl) .................................... 28 Bảng 4.5: Ảnh hưởng của một số môi trường dinh dưỡng lên chiều cao chồi của 6 dòng thông nhựa sau 8 tuần nuôi cấy có BA (4 mgl) ........................ 29 Bảng 4.6: Ảnh hưởng của một số nồng độ glutamin lên tỷ lệ tạo chồi của 6 dòng thông nhựa sau 8 tuần nuôi cấy trên môi trường TE có BA (4 mgl) .... 32 Bảng 4.7: Ảnh hưởng của một số nồng độ glutamin lên số chồi của 6 dòng thông nhựa sau 8 tuần nuôi cấy trên môi trường TE có BA (4 mgl) .............. 33 Bảng 4.8: Ảnh hưởng của nồng độ BA lên tỷ lệ tạo chồi của 6 dòng thông nhựa sau 8 tuần nuôi cấy trên môi trường TE ................................................ 36 Bảng 4.9: Ảnh hưởng của nồng độ BA lên số chồi của 6 dòng thông nhựa sau 8 tuần nuôi cấy trên môi trường TE .......................................................... 38 Bảng 4.10: Ảnh hưởng của nồng độ NAA lên tỷ lệ tạo chồi của 6 dòng thông nhựa sau 8 tuần nuôi cấy trong môi trường TE có BA (5 mgl) ............ 42 Bảng 4.11: Ảnh hưởng của nồng độ NAA lên số chồi của 6 dòng thông nhựa sau 8 tuần nuôi cấy trong môi trường TE có BA (5 mgl) ........................... 43 Bảng 4.12: Ảnh hưởng của NAA đến tạo rễ thông nhựa dòng 54 sau 4 tuần nuôi cấy trong môi trường ½ TE ................................................................... 46 Bảng 4.13: Ảnh hưởng của IBA đến tạo rễ thông nhựa dòng 54 sau 4 tuần nuôi cấy trong môi trường ½ TE ................................................................... 47 xiii DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.1: Quả, hạt thông nhựa ................................................................................... 4 Hình 2.2: Vị trí phân bố của thông nhựa trên thế giới và tại Việt Nam ..................... 6 Hình 4.1: Ảnh hưởng của các môi trường dinh dưỡng lên tạo chồi thông nhựa ..... 31 Hình 4.2: Ảnh hưởng của glutamine lên tạo chồi thông nhựa. ................................ 35 Hình 4.3: Ảnh hưởng của BA lên tạo chồi thông nhựa............................................ 41 Hình 4.4: Phôi thông nhựa trưởng thành qua từng giai đoạn. ..................................... 41 Hình 4.5: Ảnh hưởng của NAA lên tạo chồi thông nhựa. ....................................... 45 Hình 4.6: Biểu đồ ảnh hưởng của NAA đến tạo rễ thông nhựa dòng 54. ................ 48 Hình 4.7: Biểu đồ ảnh hưởng của IBA đến tạo rễ thông nhựa dòng 54 ................... 48 Hình 4.8: Ảnh hưởng của NAA lên tạo rễ thông nhựa dòng 54 . ............................ 49 Hình 4.9: Ảnh hưởng của IBA lên tạo rễ thông nhựa dòng 54 . .............................. 49 1 Chương 1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Đặt vấn đề Thông nhựa (Pinus merkusii) là cây có giá trị công nghiệp toàn diện cả về hai mặt gỗ và nhựa. Gỗ thông có vân đẹp, mùi thơm, sợi dài, có nhiều đặc tính cơ lý tốt, tỷ trọng 0,55 0,9, gỗ bền, chống chịu được mối mọt (đặc điểm này hơn gỗ thông ba lá). Cây có nhiều nhựa thì gỗ càng nặng và bền (Lâm Công Định, 1977).. Bên cạnh đó nhựa thông là mặt hàng xuất khẩu có giá trị. Phytoxit của thông nhựa tiêu diệt được một số loại vi trùng, làm trong sạch môi trường. Trong nhựa thông có dầu terpentin và colophan là sản phẩm được dùng trong nhiều ngành công nghiệp: xây dựng, sản xuất sơn, kỹ thuật điện, luyện kim, chất tẩy rửa…(Lâm Công Định, 1977). Tuy nhiên, hiện nay cây thông ở Việt Nam nói chung và cây thông nhựa nói riêng đang bị sâu róm (Dendrolimus punctatus) phá hoại với mức độ ngày càng nhiều (Bộ Tài nguyên môi trường, 2007). Vì thế một yêu cầu bức xúc của ngành lâm nghiệp là tạo được giống thông nhựa có khả năng chống chịu cao với sâu hại nói chung và sâu róm nói riêng. Các nhà chọn giống đang sử dụng kỹ thuật lai tạo, chọn giống truyền thống để tạo giống thông mới, tuy nhiên cách này tốn nhiều thời gian và công sức. Trong khi đó kỹ thuật vi nhân giống đã được nuôi cấy thành công trên nhiều loại cây rừng, đặc biệt một vài loài trong chi Pinus (palustris, pinaster, radiata, strobus, sylvestris và teada) đã được nuôi cấy in vitro thành công (Sommer và ctv, 1975). Do vậy để rút ngắn được thời gian tạo giống cây mang đặc tính mong muốn thì ứng dụng công nghệ gen là một sự lựa chọn hợp lý, trong đó kỹ thuật chuyển gen đã và đang được áp dụng trên cây lâm nghiệp. Tuy nhiên một trong giới hạn chính đối với chuyển gen cây lâm nghiệp là việc tái sinh một cây hoàn chỉnh từ tế bào mục 2 tiêu. Để tạo được giống
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH ….W U X… DƯƠNG MINH THẠNH KHẢO SÁT MỘT SỐ YẾU TỐ HOÁ HỌC TRONG TẠO CHỒI THÔNG NHỰA (PINUS MERKUSII) IN VITRO LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NƠNG NGHIỆP Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2010 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH ….W U X… DƯƠNG MINH THẠNH KHẢO SÁT MỘT SỐ YẾU TỐ HỐ HỌC TRONG TẠO CHỒI THƠNG NHỰA (PINUS MERKUSII) IN VITRO Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Mã số : 60.42.80 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Hướng dẫn khoa học: TS VƯƠNG ĐÌNH TUẤN Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2010 i LÝ LỊCH CÁ NHÂN Tơi tên Dương Minh Thạnh sinh ngày 21 tháng 06 năm 1981 huyện Long Điền, tỉnh Bà Rịa Vũng Tàu Con ông Dương Văn Minh Bà Nguyễn Thị Thẳng Tốt nghiệp Tú tài Trường Phổ thông trung học Trần Văn Quan, tỉnh Bà Rịa Vũng Tàu năm 1999 Tốt nghiệp Đại học ngành Nơng học, hệ quy Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh Sau làm việc Trung tâm Ứng dụng tiến Khoa học Công nghệ tỉnh Bà Rịa Vũng Tàu tháng 07 năm 2010, chức vụ chuyên viên Tháng 08 năm 2010 làm việc Văn phòng đại diện cơng ty Mappacific Singapore, chức vụ Giám sát đăng ký kỹ thuật Tháng 09 năm 2006 theo học Cao học ngành Công nghệ Sinh học Đại học Nơng Lâm, thành phố Hồ Chí Minh Tình trạng gia đình: Vợ Đỗ Huỳnh Anh Thy, sinh năm 1983, kết hôn năm 2010 Địa liên lạc: 3A khu phố Long Tân, thị trấn Long Điền, huyện Long Điền, tỉnh Bà Rịa Vũng Tàu Điện thoại: 0908 696107 Email: minhthanhmt@yahoo.com ii LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Dương Minh Thạnh iii CẢM TẠ Tác giả xin chân thành cảm ơn: - Ban giám hiệu trường Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh - Ban lãnh đạo Phân viện Khoa học Lâm nghiệp Nam Bộ - Phòng Đào tạo sau Đại học trường Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh - Bộ mơn Công nghệ Sinh học quý thầy, cô tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho chúng tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn - Chân thành cảm ơn TS Vương Đình Tuấn, Phó Phân Viện trưởng Phân viện nghiên cứu Khoa học Lâm nghiệp Nam Bộ tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện giúp đỡ kinh phí trực tiếp hướng dẫn cho tơi suốt q trình nghiên cứu hồn thiện luận văn - Chân thành cảm ơn toàn thể ban Giám đốc, nhân viên Phân viện nghiên cứu Khoa học Lâm nghiệp Nam Bộ tạo phương tiện cho tơi suốt q trình nghiên cứu hoàn thành luận văn - Chân thành cảm ơn bạn Nguyễn Xuân Cường, Phân viện Khoa học Lâm nghiệp Nam Bộ nhiệt tình giúp đỡ cho tơi suốt trình thực luận văn iv TÓM TẮT Đề tài “ Khảo sát số yếu tố hóa học tạo chồi thơng nhựa (Pinus merkusii) in vitro” tiến hành phòng ni cấy mô thực vật thuộc Phân viện nghiên cứu Khoa học Lâm nghiệp Nam Bộ từ tháng 08/2008 đến tháng 5/2010 Các thí nghiệm bố trí theo kiểu hồn toàn ngẫu nhiên, lần lặp lại Kết nghiên cứu cho thấy: Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng javel thương mại đến vô trùng vật liệu nuôi cấy nồng độ khoảng thời gian khác Kết thu được: vô trùng hạt thông nhựa Javel thương mại có nồng độ 60% thời gian 15 phút hiệu (98,33%) Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng số môi trường dinh dưỡng đến khả tạo chồi thông nhựa Phôi trưởng thành thông nhựa sử dụng làm vật liệu nuôi cấy môi trường dinh dưỡng MS, DCR, MLV, TE bổ sung BA (4 mg/l) để khảo sát tạo chồi trực tiếp Kết thu sau tuần ni cấy, mơi trường dinh dưỡng thích hợp cho ni cấy tạo chồi từ phôi hạt thông nhựa trưởng thành môi trường TE (tỷ lệ tạo chồi 73,67 %, số chồi 3,47 chồi/cụm, chiều cao chồi 2,33 cm) Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng glutamine đến khả tạo chồi thông nhựa với nồng độ Kết thu được: mơi trường TE có bổ sung glutamine (500 mg/l) thích hợp cho ni cấy tạo chồi thơng nhựa in vitro Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng BA đến khả tạo chồi thông nhựa với nồng độ Kết thu được: môi trường TE có bổ sung chất điều hòa sinh trưởng BA (5 mg/l) thích hợp cho ni cấy tạo chồi thơng nhựa in vitro Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng NAA đến khả tạo chồi thông nhựa với nồng độ Kết thu được: diện NAA làm giảm khả tạo chồi số chồi v Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng NAA, IBA lên hình thành rễ in vitro với nồng độ Kết thu chồi in vitro cao từ cm trở lên rễ tốt ni cấy mơi trường ½ TE, bổ sung IBA (5 mg/l), sucrose (20 g/l), than hoạt tính (0,5 g/l) vi SUMMARY The thesis “ Study of some chemical factors in in vitro shoots induction of Pinus merkusi was carried out from August 2008 to February 2010 at the Forest Science Sub – Institute of South Vietnam Experiments was designed in Completely Randomized Design with three replications The research showed that: Experiment 1: Effect of commercial javel on explants at concentrations and periods of time Mature seeds from open-pollinated Pinus merkusii were treated with javel at 60% commercial solution for 15 gave the best result (98,33%) of sterilization Experiment 2: Effect of culture media on in vitro of Pinus merkusii with media MS, DCR, MLV, TE Mature zygotic embryos of Pinus merkusi were cultured as initial explant to investigate the process of direct organogenesis Adventitous buds were initiated on TE medium supplemented with mg/l N6 – benzyladenine (BA), buds induction Pinus merkusii seen profusedly on this medium Experiment 3: Effect of glutamine on in vitro buds induction of Pinus merkusii with concentrations Medium TE supplemented glutamine at 500 mg/l was the most suitable organic factors for buds induction Experiment 4: Effect of BA on in vitro buds induction of Pinus merkusii with concentrations Medium supplemented BA (5 mg/l) was the most suitable for buds induction Experiment 5: Effect of NAA on in vitro buds induction of Pinus merkusii with concentrations Presence of NAA decreased buds induction and numbers of buds per embryo Experiment 6: Effects of NAA and IBA on in vitro roots induction of Pinus merkusii with concentrations In vitro induced shoots at cm above are well rooted when cultured in ½ TE medium Medium ½ TE supplemented IBA (5 mg/l), vii sucrose (20 g/l) and active charcoal (0,5 g/l) was the most suitable for roots induction viii MỤC LỤC Trang Lý lịch cá nhân Lời cam đoan iii Cảm tạ iv Tóm tắt v Summary viii Mục lục ix Danh sách chữ viết tắt x Danh sách bảng xi Danh sách hình xii Chương ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục tiêu .2 1.3 Giới hạn Chương TỔNG QUAN 2.1 Giới thiệu thông nhựa (Pinus merkusii) 2.1.1 Phân loại .3 2.1.2 Đặc điểm thực vật học 2.1.3 Đặc điểm phân bố đặc tính sinh thái thơng nhựa 2.1.3.1 Trên giới 2.1.3.2 Ở Việt Nam .5 2.2 Giá trị kinh tế thông nhựa .7 2.3 Tóm lược kết nghiên cứu nuôi cấy in vitro chi Pinus 2.3.1 Trên giới .8 2.3.2 Ở Việt Nam 10 2.4 Một số yếu tố ảnh hưởng đến nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 2.4.1 Auxin 11 ix dong54 Subset for alpha = 0.05 Nongdo a Duncan a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 N 0mg/l 46.67 700mg/l 50.00 100mg/l 56.67 300mg/l 56.67 500mg/l 60.00 Sig .164 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 ANOVA Sum of Squares dong2 Between Groups (Combined) Mean Square F Sig .257 064 3.217 061 Contrast 048 048 2.400 152 Deviation 209 070 3.489 058 Within Groups 200 10 020 Total 457 14 5.116 1.279 34.259 000 Contrast 2.465 2.465 66.036 000 Deviation 2.651 884 23.667 000 373 10 037 5.489 14 3.051 763 6.769 007 Contrast 2.241 2.241 19.893 001 Deviation 809 270 2.394 129 Within Groups 1.127 10 113 Total 4.177 14 3.029 757 18.623 000 Contrast 1.200 1.200 29.508 000 Deviation 1.829 610 14.995 000 407 10 041 3.436 14 4.056 1.014 46.091 000 Contrast 1.281 1.281 58.242 000 Deviation 2.775 925 42.040 000 220 10 022 4.276 14 Linear Term dong6 df Between Groups (Combined) Linear Term Within Groups Total dong29 Between Groups (Combined) Linear Term dong31 Between Groups (Combined) Linear Term Within Groups Total dong44 Between Groups (Combined) Linear Term Within Groups Total 73 dong54 Between Groups (Combined) Linear Term 6.037 1.509 94.333 000 Contrast 3.201 3.201 200.083 000 Deviation 2.836 945 160 10 016 6.197 14 Within Groups Total 74 59.083 000 dong6 dong2 Subset for alpha = 0.05 Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncana N Nongdo Duncan 2.2667 300mg/l 2.3000 2.2333 100mg/l 2.3667 2.3667 500mg/l 700mg/l 2.0667 100mg/l 2.1000 2.1000 300mg/l 2.2333 500mg/l 1.000 Duncan 559 061 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 dong31 Subset for alpha = 0.05 Subset for alpha = 0.05 N 2.3667 2.7000 Sig .052 dong29 Nongdo 700mg/l 2.0000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 a 1.0000 089 N 0mg/l 0mg/l Sig a Nongdo N a Duncan 0mg/l 0mg/l 2.0000 100mg/l 2.4667 2.4667 700mg/l 1.8667 300mg/l 2.5333 2.5333 300mg/l 1.9333 700mg/l 2.9333 100mg/l 2.0667 2.0667 500mg/l 3.3333 500mg/l 2.3333 2.9333 Sig .092 135 1.0000 Sig .175 1.000 dong44 dong54 Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncan 0mg/l N 136 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 a 273 Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncana 1.0000 N 0mg/l 100mg/l 2.4000 1.0000 700mg/l 100mg/l 2.1333 700mg/l 2.4667 300mg/l 2.2000 300mg/l 2.6333 2.6333 500mg/l 500mg/l 2.7333 Sig 1.8333 2.5333 1.000 1.000 594 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Sig 1.000 056 356 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 75 - Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng BA đến tạo chồi trực tiếp từ phôi hạt thông nhựa trưởng thành ANOVA Sum of Squares dong2 Between Groups 1818.889 15.590 000 Linear Term Contrast 8678.571 8678.571 74.388 000 415.873 103.968 891 499 1400.000 12 116.667 10494.444 17 11000.000 2200.000 18.857 000 9068.571 9068.571 77.731 000 1931.429 482.857 4.139 025 1400.000 12 116.667 12400.000 17 (Combined) 10494.444 25.187 000 Linear Term Contrast 10011.905 10011.905 120.143 000 482.540 120.635 1000.000 12 83.333 11494.444 17 (Combined) 9177.778 1835.556 Linear Term Contrast 8550.476 627.302 156.825 533.333 12 44.444 9711.111 17 (Combined) 5961.111 1192.222 Linear Term Contrast 5051.905 909.206 227.302 600.000 12 50.000 6561.111 17 11627.778 11440.476 187.302 46.825 933.333 12 77.778 12561.111 17 (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total Deviation Within Groups Total dong31 Between Groups Deviation Within Groups Total dong44 Between Groups Deviation Within Groups Total dong54 Between Groups Sig Total dong29 Between Groups F 9094.444 Within Groups Between Groups Mean Square (Combined) Deviation dong6 df (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total 76 2098.889 1.448 278 41.300 000 8550.476 192.386 000 3.529 040 23.844 000 5051.905 101.038 000 4.546 018 29.900 000 11440.476 147.092 000 2325.556 602 668 dong2 Nongd o Duncan a dong6 Subset for alpha = 0.05 N Nongdo Duncan 0mg/l 1mg/l 36.67 2mg/l 50.00 3mg/l 50.00 4mg/l 5mg/l Sig Subset for alpha = 0.05 N 50.00 50.00 2mg/l 56.67 56.67 50.00 3mg/l 70.00 70.00 70.00 70.00 4mg/l 76.67 76.67 83.33 5mg/l 70.00 Duncan 175 051 80.00 Sig .156 1.000 3 1mg/l 2mg/l 3mg/l 70.00 4mg/l 80.00 5mg/l Nongdo Duncan a N Duncana 1mg/l 46.67 53.33 2mg/l 53.33 3mg/l 56.67 80.00 4mg/l 83.33 90.00 5mg/l 86.67 389 205 Sig .205 20.00 1.000 105 3 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 1mg/l 36.67 2mg/l 43.33 43.33 3mg/l 50.00 4mg/l 5mg/l Subset for alpha = 0.05 Nongdo 6.67 a N Duncan 0mg/l 1mg/l 3 40.00 3mg/l 53.33 60.00 4mg/l 3 60.00 5mg/l 271 125 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Sig 53.33 60.00 80.00 1.000 1.000 089 373 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 77 20.00 2mg/l 271 3.33 50.00 1.000 552 dong54 0mg/l Sig 46.67 Subset for alpha = 0.05 dong44 N 302 0mg/l Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Nongdo 051 Subset for alpha = 0.05 16.67 1.000 051 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 dong31 0mg/l Sig 6.67 Subset for alpha = 0.05 N 1mg/l dong29 a Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Nongd o 0mg/l 13.33 1.000 a ANOVA Sum of Squares dong2 Between Groups (Combined) Linear Term 26.931 000 10.076 10.076 126.833 000 622 155 1.956 166 953 12 079 11.651 17 17.058 3.412 39.364 000 16.464 16.464 189.969 000 594 148 1.713 212 1.040 12 087 18.098 17 14.592 2.918 202.038 000 13.937 13.937 964.882 000 654 164 11.327 000 173 12 014 14.765 17 13.173 2.635 42.343 000 12.386 12.386 199.056 000 788 197 3.165 054 747 12 062 13.920 17 9.503 1.901 22.960 000 Contrast 9.011 9.011 108.854 000 Deviation 492 123 1.486 267 993 12 083 10.496 17 9.531 1.906 27.017 000 Contrast 9.303 9.303 131.854 000 Deviation 228 057 808 543 847 12 071 10.378 17 Contrast (Combined) Contrast Deviation Within Groups Total dong29 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total dong31 Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total dong44 Between Groups (Combined) Linear Term Within Groups Total dong54 Between Groups (Combined) Linear Term Sig 2.140 Total Linear Term F Within Groups Between Groups Mean Square 10.698 Deviation dong6 df Within Groups Total 78 ong6 dong2 Subset for alpha = 0.05 Subset for alpha = 0.05 nongdo N Duncana 0mg/l 1mg/l 2mg/l 3mg/l 4mg/l 5mg/l 3 nongdo Duncana 6667 1.2333 1mg/l 1.4333 1.6667 1.6667 2mg/l 1.8667 3mg/l 2.7333 2.4333 2.4333 4mg/l 3.2333 3.2333 2.6000 5mg/l 3.3333 3333 2.0667 2.0667 Sig N 0mg/l 1.000 084 108 137 Sig .483 1.000 097 060 685 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 dong29 dong31 Subset for alpha = 0.05 nongdo a Duncan 0mg/l N 3 1.000 nongdo Duncan 1mg/l 2mg/l 3mg/l 4mg/l 3.4667 5mg/l 3.5667 Sig 1.9333 2.3667 2.9667 1.000 1.000 1.000 1.000 328 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 dong44 N Duncana 0mg/l 1mg/l 1.5000 2mg/l 1.6000 3mg/l 2.0000 4mg/l 2.7000 5mg/l 2.7667 Sig .6667 1.000 065 a N 0mg/l 1mg/l 1.7000 2mg/l 2.0333 3mg/l 2.6333 4mg/l 3.0000 5mg/l Sig 6667 3.0000 3.1667 1.000 128 097 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Subset for alpha = 0.05 nongdo Subset for alpha = 0.05 781 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 79 429 dong54 Subset for alpha = 0.05 nongdo a Duncan 0mg/l N 3333 1mg/l 1.0000 - Thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng 2mg/l 1.3333 NAA đến việc tạo chồi trực tiếp từ phôi hạt thông nhựa trưởng thành 3mg/l 4mg/l 2.2333 5mg/l 2.5000 Sig 1.3333 1.5333 1.000 150 375 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 ANOVA Sum of Squares dong2 Between Groups 1273.333 31.833 000 Linear Term Contrast 4563.333 4563.333 114.083 000 530.000 176.667 4.417 032 400.000 10 40.000 5493.333 14 (Combined) 2306.667 576.667 43.250 000 Linear Term Contrast 2083.333 2083.333 156.250 000 223.333 74.444 5.583 016 133.333 10 13.333 2440.000 14 (Combined) 4226.667 1056.667 15.850 000 Linear Term Contrast 3630.000 3630.000 54.450 000 596.667 198.889 2.983 083 666.667 10 66.667 4893.333 14 (Combined) 4973.333 1243.333 31.083 000 Linear Term Contrast 3630.000 3630.000 90.750 000 1343.333 447.778 11.194 002 400.000 10 40.000 5373.333 14 (Combined) 2200.000 550.000 6.875 006 Linear Term Contrast 2083.333 2083.333 26.042 000 116.667 38.889 486 699 800.000 10 80.000 3000.000 14 (Combined) 6240.000 1560.000 29.250 000 Linear Term Contrast 5880.000 5880.000 110.250 000 360.000 120.000 2.250 145 Deviation Within Groups Total Deviation Within Groups Total dong31 Between Groups Deviation Within Groups Total dong44 Between Groups Deviation Within Groups Total dong54 Between Groups Sig Total dong29 Between Groups F 5093.333 Within Groups Between Groups Mean Square (Combined) Deviation dong6 df Deviation 80 242 Within Groups 533.333 10 53.333 dong6 Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncana N 0.7mg/l 43.33 0.5mg/l 0.3mg/l 56.67 0.1mg/l 60.00 0mg/l Sig 50.00 80.00 1.000 1.000 290 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Total 6773.333 dong2 Subset for alpha = 0.05 Nongdo N Duncana 0.7mg/l 30.00 0.5mg/l 40.00 40.00 0.3mg/l 43.33 0.1mg/l 0mg/l Sig 56.67 83.33 082 533 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 dong29 Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncana N 0.7mg/l 43.33 0.5mg/l 46.67 0.3mg/l 53.33 53.33 0.1mg/l 63.33 0mg/l 3 90.00 81 14 dong31 Subset for alpha = 0.05 Nongdo N Duncana 0.7mg/l 36.67 0.5mg/l 40.00 40.00 1.000 0.3mg/l 43.33 43.33 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 0.1mg/l 0mg/l Sig .182 165 50.00 86.67 Sig Subset for alpha = 0.05 Nongdo N a Duncan 0.7mg/l 23.33 0.5mg/l 33.33 0.3mg/l 40.00 0.1mg/l 0mg/l Sig .054 246 094 Nongdo Duncan a N 0.7mg/l 20.00 33.33 0.5mg/l 33.33 40.00 0.3mg/l 40.00 43.33 0.1mg/l 60.00 0mg/l 1.000 Sig .220 1.000 Means for groups in homogeneous dong54subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Subset for alpha = 0.05 dong44 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 53.33 80.00 1.000 290 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 ANOVA Sum of Squares dong2 Between Groups (Combined) Linear Term 67.886 000 Contrast 3.960 3.960 270.023 000 Deviation 022 007 508 686 147 10 015 4.129 14 3.253 813 36.970 000 Contrast 3.201 3.201 145.515 000 Deviation 052 017 788 528 220 10 022 3.473 14 5.153 1.288 101.711 000 Contrast 5.125 5.125 404.632 000 Deviation 028 009 737 554 127 10 013 5.280 14 4.251 72.455 000 Within Groups Total dong29 Between Groups (Combined) Linear Term Within Groups Total dong31 Between Groups Sig .996 (Combined) Linear Term F Total Between Groups Mean Square 3.983 Within Groups dong6 df (Combined) 82 1.063 Linear Term Contrast 4.181 4.181 285.091 000 Deviation 069 023 1.576 256 147 10 015 4.397 14 2.971 743 39.786 000 Contrast 2.945 2.945 157.786 000 Deviation 025 008 452 721 187 10 019 3.157 14 3.956 989 54.944 000 Contrast 3.888 3.888 216.000 000 Deviation 068 023 1.259 340 180 10 018 4.136 14 Within Groups Total dong44 Between Groups (Combined) Linear Term Within Groups Total dong54 Between Groups (Combined) Linear Term Within Groups Total dong2 Subset for alpha = 0.05 Nongdo a Duncan 0.7mg/l 0.5mg/l 0.3mg/l N 1.1667 1.5667 1.966 0.1mg/l 0mg/l Sig 2.3333 2.6000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 83 dong6 Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncana dong29 Nongdo Duncan 0.7mg/l N 1.9333 0.5mg/l 0.3mg/l 0.1mg/l 0mg/l Sig 2.2333 0.5mg/l 0.3mg/l 3.1000 3.5667 2.8000 dong31 2.5667 0.1mg/l 2.7667 0mg/l 3.1667 1.000 N 1.000 071 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 dong54 Subset for alpha = 0.05 Nongdo 0.3mg/l dong44 Duncana 0.7mg/l 2.4667 Sig 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 3.0667 3.0667 Subset for alpha = 0.05 0mg/l 3.3333 Nongdo N Sig 1.000 1.000 052 052 a Duncan 0.7mg/l 1.6333 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample 0.5mg/l Size = 3.000 2.1000 2.6667 1.000 2.0000 0.1mg/l Subset for alpha = 0.05 a N 0.7mg/l Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncana 1.5000 N 0.7mg/l 1.1000 0.5mg/l 3 0.5mg/l 0.3mg/l 2.2333 0.3mg/l 0.1mg/l 2.4333 0.1mg/l 2.3333 0mg/l 0mg/l 2.5000 Sig 1.8333 2.7667 1.000 1.000 103 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Sig 1.5333 1.8333 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 84 159 - Thí nghiệm 6: Khảo sát ảnh hưởng NAA, IBA lên hình thành rễ thơng nhựa in vitro ANOVA Sum of Squares NAA Between Groups (Combined) Mean Square F Sig 3161.111 632.222 4.693 013 Contrast 347.143 347.143 2.577 134 Deviation 2813.968 703.492 5.222 011 Within Groups 1616.667 12 134.722 Total 4777.778 17 Linear Term IBA df Between Groups (Combined) 6145.833 1229.167 11.645 000 Contrast 5300.119 5300.119 50.212 000 Deviation 845.714 211.429 2.003 158 Within Groups 1266.667 12 105.556 Total 7412.500 17 Linear Term NAA Subset for alpha = 0.05 Nongdo N Duncana 0mg/l 0000 5mg/l 0000 7mg/l 0000 3mg/l 10.0000 0.5mg/l 21.6667 1mg/l Sig 21.6667 35.0000 059 185 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 85 IBA Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncana 0mg/l N 3 0000 0.5mg/l 0000 3mg/l 21.6667 1mg/l 23.3333 7mg/l 41.6667 5mg/l 48.3333 Sig 1.000 846 442 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 ANOVA Sum of Squares NAA Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total IBA Between Groups (Combined) Linear Term df Mean Square 26.225 5.245 80.692 000 947 947 14.565 002 25.278 6.320 97.224 000 780 12 065 27.005 17 10.821 2.164 43.774 000 1.694 423 8.565 002 Unweighted 8.187 8.187 165.597 000 Weighted 9.127 9.127 184.609 000 544 11 049 11.365 16 Total NAA Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncan N 0mg/l 0000 5mg/l 0000 7mg/l 0000 0.5mg/l 1mg/l 2.6667 3mg/l 2.6667 Sig 1.5667 1.000 Sig Deviation Within Groups a F 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 86 IBA Subset for alpha = 0.05 Nongdo N Duncana 0mg/l 3 0000 0.5mg/l 0000 1mg/l 1.3333 3mg/l 1.6333 1.6333 5mg/l 1.7767 7mg/l 1.8750 Sig 1.000 141 248 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 2.769 ANOVA Sum of Squares A Between Groups (Combined) Mean Square F Sig 173 27.756 000 Contrast 074 074 11.888 005 Deviation 793 198 31.723 000 Within Groups 075 12 006 Total 942 17 Linear Term IBA df 867 Between Groups (Combined) 6.217 1.243 6.577 004 Contrast 4.021 4.021 21.271 001 Deviation 2.196 549 2.903 068 Within Groups 2.269 12 189 Total 8.486 17 Linear Term IBA NAA Subset for alpha = 0.05 Subset for alpha = 0.05 Nongdo Duncana N omg/l 0000 5mg/l 0000 7mg/l 0000 3mg/l 2667 0.5mg/l 3333 1mg/l Sig Nongdo Duncana 5833 1.000 322 0000 0.5mg/l 0000 5mg/l 7067 1mg/l 1.0333 3mg/l 1.3667 7mg/l 1.4467 Sig 1.000 N omg/l 082 7067 077 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 87 ... ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH ….W U X… DƯƠNG MINH THẠNH KHẢO SÁT MỘT SỐ YẾU TỐ HOÁ HỌC TRONG TẠO CHỒI THÔNG NHỰA (PINUS MERKUSII) IN VITRO Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Mã số. .. trình thực luận văn iv TĨM TẮT Đề tài “ Khảo sát số yếu tố hóa học tạo chồi thông nhựa (Pinus merkusii) in vitro tiến hành phòng ni cấy mơ thực vật thuộc Phân viện nghiên cứu Khoa học Lâm nghiệp. .. nuôi cấy tạo chồi thông nhựa in vitro Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng NAA đến khả tạo chồi thông nhựa với nồng độ Kết thu được: diện NAA làm giảm khả tạo chồi số chồi v Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng