Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA CHƯƠNG : TỔNG QUAN VỀ BỆNH VIÊM GAN SIÊU VI B Hepatitis B virus : 1.1 Lịch sử việc phát virus viêm gan B : Hepatitis B virus ( HBV ) nguyên nhân gây bệnh viêm gan B Năm 1963 Blumberg phát kháng nguyên Autralia Năm 1967, phát liên quan kháng nguyên viêm gan kiểu B Năm 1970, phát hạt virus tòan vẹn ( virion hạt Dane ) Năm 1979, nhân dòng HBV DNA xác định chuỗi mã nuclêiotid DNA tòan phần Năm 1983, khuếch đại DNA virus phương pháp PCR Mullis phát minh 1.2 Phân loại Hepatitis B virus: HBV lọai siêu vi DNA thuộc họ Hepadna – viridae Tất thành viên họ Hepadnaviridae virus hướng gan có gen mạch kép Ngày nay, người ta biết gia đình virus giống virus viêm gan B thuộc họ Hepadaeviridae gồm : Virus viêm gan B người (human hepatitis B virus) : HBV Bs: Hồng Xn Thế Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Virus viêm gan Macmot - Sóc (Woochuck hepatitis virus) : WBV Virus viêm gan B Vịt (Duck hepatitis B virus) : DHBV HBV gây nhiễm cho loài linh trưởng bậc cao hắc tinh tinh vượn WHV không gây nhiễm cho loaị gậm nhấm khác DHBV gây nhiễm tự nhiên số bầy vịt nuôi nhiễm truyền thưc nghiệm vào ngỗng thành công 1.2 Cấu trúc HBV: Virus ngun vẹn (virion) có hình cầu hình sợi, đường kính 42 nm, virion hiệh rõ cấu trúc hai vỏ: Vỏ protein bên ngòai ( màng bao ) tạo thành protein bề mặt (HBsAg) Vỏ protein bên hạt lõi ( HBcAg) có đường kính 34 nm.Muốn phát kháng nguyên phải phá vỡ hạt virus dung môi lipit Kháng nguyên thấy làm sinh thiết gan Trong số loại kháng ngun HBcAg có loại kháng ngun hòa tan có nguồn gốc từ nuclêocapsid gọi HBeAg Bs: Hồng Xn Thế Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Hình : Cấu trúc HBV 1.2.1 Cấu trúc HBs: kháng nguyên bề mặt HBV lưu hành huyết người nhiễm virus Đa số hạt hình cầu đường kính 17 – 25 nm, thường có số lượng khoảng 1013/ml Các hạt hình sợi hình ống hơn, đường kính thay đổi, có nồng độ khoảng 1011/ml 1µ/ml Các sợi HBs chứa polipeptid khác : protein lớn ( LHBs ), protein trung bình ( MHBs ), protein nhỏ ( SHBs ).SHBs thành phần nhiều tất hạt protein vỏ HBV MHBs 1.2.2 Cấu trúc HBc : HBcAg protein tổng hợp dịch bào tan tạo thành dimmer ổn định nồng độ thấp Bs: Hồng Xn Thế Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Các HBc bao gen HBV DNA dài 3.2kb qua men primerase ( pr ) DNA polymerase gắn kết đồng hóa trị, protein kinase C protein sốc nhiệt hcs90 bao 1.3.3 Cấu trúc HBe : Tất hepadnavirus có dạng protein HBc tiết gọi HBeAg (e : enigma ) Các hepadnavirus tạo HBeAg phần đầu tận 5’ khung đọc mở lõi, gọi chuỗi mã tiền lõi Chuỗi mã tiền lõi mã hố vòng xoắn kỵ nước, tín hiệu tiết giúp chuyển vị protein HBe vào khoang lưới nội bào tương Đột biến vùng tiền lõi không sản xuất HBeAg Bệnh viêm gan B: 2.1 Lịch sử phát triển viêm gan B giới : Trên giới hàng năm có 50 triệu người nhiễm HBV vf khảng triệu người chết liên quan đsên tác động bệnh Trên giới, HBV chia làm vùng dịch, ước tính có 45% dân số sống vùng dịch địa phương cao, 43% dân số sống vùng dịch địa phương trung bình, 12% dân số sống vùng dịch địa phương thấp Hiện nay, dân số tăng nhanh, đến cuối năm 2000, số người mang HBV mạn ước tính khỏang 400 triệu người ( độ 5% dân số tòan cầu ) Phân bố tần suất nhiễm HBV giới khơng đòng xếp loại từ dịch địa phương cao trẻ em hầu phát triển đến dịch địa phương Bs: Hồng Xn Thế Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA thấp nước phát triển, chủ yếu người lớn số yếu tố nguy cách sống, chăm sóc y tế,… 2.2 Dịch tễ học nhiễm HBV : 2.2.1 Vùng dịch HBV địa phương cao : Trong vùng dịch địa phương cao có – 20% người nhiễm HBV mạn huyết đa số người lớn chứng tỏ có nhiễm virus trước Những vùng gồm đa số nước Châu Á, có Viêt Nam ( trừ Nhật Ấn Độ ), Châu Phi, hầu hết vùng Trung Đông, vùng châu thổ Amazon Nam Mỹ, hầu hết nhóm quần đảo Thái Bình Dương số sắc dân địa phương khác đan Ết – Ki – mô, thổ dân Châu Úc dân Maori Trong số vùng dịch địa phương cao, tỉ lệ người mang HBV từ 8% đến 25% tần suất anti – HBs từ 60% đến 85% vùng địa phương cao, đa số nhiễm virus xảy trẻ em tuổi trẻ nhỏ, nhiễm tuổi lớn Sự truyền nhiễm HBV thường xảy thời kỳ chu sinh ( truyền nhiễm theo chiều dọc ) từ người mẹ nhiễm virus mạn đến cái, thời kỳ sau sinh ( truyền nhiễm theo chiều ngang ) từ người mẹ bị nhiễm virus, anh chị em cá nhân nhiễm virus mạn khác ngồi gia đình Những trẻ khả nhiễm virus đến tuổi trưởng thànhdo họat động tình dục 2.2.2 Vùng dịch HBV địa phương trung bình : Bs: Hồng Xn Thế Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Trong vùng dịch địa phương trung bình, tàn suất người nhiễm HBsAg mạn từ – 7% 20 – 50% người lớn nhiễm HBV Những vùng gồm Ấn Độ, phần trung đông, Nam Mỹ Cách truyền bệnh phức tạp truyền nhiễm xảy tất nhóm tuổi ( trẻ sơ sinh, trẻ em người lớn ), thời kỳ nhiễm bệnh chủ yếu có lẽ xảy trẻ nhỏ, tuổi thiếu niên niên Trong vùng này, nguy sống trung bình người nhiễm HBV ước tính từ 20 – 60% Những vùng bao gồm 43% dân số tòan cầu 2.2.3 Vùng dịch HBV địa phương thấp : Tần suất người mang HBV mạn 2% tần suất người lớn nhiễm virus 20% Những vùng bao gồm Mỹ, Canada, Tây Âu, Úc, New Zealand Nhiễm bệnh chủ yếu người lớn Tuy nhiên, truyền bệnh xảy thời kỳ chu sinh thời thơ ấu góp phần quan vào tần suất người nhiễm HBV mạn Tại Tây Âu, tỷ lệ mắc hàng năm viêm gan B cấp khỏang 100 000 người Tần suất HBsAg có biên độ từ 0.1% Bắc Âu từ – 5% Nam Châu Âu Bs: Hồng Xn Thế Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Hình : Sơ đồ dịch tễ HBsAg 2.3 Cách truyền đường truyền nhiễm HBV : 2.3.1 Máu dịch thể nhiễm HBV : Truyền nhiễm virus chủ yếu từ máu từ huyết người nhiễm HBV Định lượng nồng độ HBV – DNA cho thấy độ 1010/ml người HBeAg (+) 101 – 107 người anti – Hbe (+) Dịch thể có nguồn gốc từ máu, dịch màng phổi, màng bụng, chứa virus cao nồng độ virus máu Tinh dịch nước bọt chứa HBV, nồng độ 10 lần thấp huyết HBsAg HBV – DNA phát Bs: Hồng Xn Thế Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA nước tiểu, phân sữa, trừ dịch bị nhiễm máu Nồng độ virus thấp dịch thể cho thấy khả nhiễm bệnh thấp, trừ tiếp xúc nhiều lần 2.3.2 Lây nhiễm HBV qua tiếp xúc tình dục : Tần suất nhiễm HBV người đồng tính cao, yếu tố nguy lớn gồm có giao hợp qua đường hậu mơn số lượng nhiều bạn tình, bệnh khác gây tổn thương hậu môn tổn thương niêm mạc Những người hành nghề mại dâm, nguy nhiễm HBV thường tỉ lệ với số lường người bạn tình với tình trạng nhiễm giang mai Các vết loét giang mai giúp nhiễm hiệu HBV dấu ấn đại diện cho bệnh loét đường sinh dục mạn tính khác 2.3.3 Truyền nhiễm HBV chu sinh : Truyền nhiễm chu sinh từ người mẹ mang HBsAg mạn người mẹ viêm gan B cấp tháng cuối thai kỳ, hoăc tháng đầu sau sanh Trẻ sinh từ người mẹ có HBsAg (+), HBeAg (+) có khảng 90% nguy nhễm HBV tháng sau sanh 90% số thành người mang HBV 2.4 Các đường truyền nhiễm HBV khác: 2.4.1 Vai trò nước bọt truyền nhiễm HBV : Bs: Hồng Xn Thế Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Nước bọt gây nhiễm có máu nhiễm HBV, không truyền nhiễm nước bọt nhiễm HBV khí dung vào mũi, uống nước, hay dùng bàn chải nhiễm HBV Truyền nhiễm qua vết cắn hay nhai kẹo cao su Hơn hít khơng truyền nhiễm HBv có ý nghĩa, truyền nhiễm bị cắn 2.4.2 Vai trò tinh dịch dịch tiết âm đạo truyền nhiễm HBV: Tinh dịch tiết âm đạo, chứa nồng độ virus giống với nồng độ nước bọt, giữ vai trò quan trọng nhiễm HBV 2.4.3 Đường lây nhiễm HBV qua da : Tai nạn kim tiêm làm truyền HBV qua da trực tiếp xảy với kim nhiễm máu, thảm thách máu,… Những vất liệu tíếp xúc với da hở, màng niêm mắt xem lây nhiễm virus Vì HBV ổn định, truyền nhiễm qua bề mặt môi trường tiếp xúc với màng niêm mạc da bị tổn thương kem đánh răng, chai sữa, đồ chơi, dụng cụ ăn, máy hơ hấp nhân tạo, nội soi xảy 2.4.4 Côn trùng truyền nhiễm HBV : Vai trò trùn truyền nhiễm HBV nghĩ đến dịch tễ học viêm gan B thường phân bố nước nhiệt đới nghèo trùng với phát triển côn trùng Truyền nhiễm HBV côn trùng, xảy ra, hai cách sau : Truyền nhiễm chủ động : Bs: Hoàng Xuân Thế Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Khi virus chép côn trùng truyền nhiễm qua qua vết cắn Tuy nhiên virus chép nhười lòai linh trưởng lớn, không chép côn trùng Truyền nhiễm thụ động : Truyền nhiễm học HBV chuyển từ ruột lên miệng côn trùng Cách truyền nhiễm chưa có chứng Nếu có khơng hiệu 2.4.5 Nhiễm HBV bệnh viện : Nhân viên chăm sóc sức khỏe có nguy nhiễm cộng đòng chung : phơi nhiễm thường xuyên với bệnh nhân nhiễm virus Nhân viên y tế nhiễm HBV từ đến 10 lần so với cộng đồng theo chứng minh Hadler 2.4.6 Truyền nhiễm HBV anh em nhà : Truyền nhiễm HBv anh em nhà xảy qua tổn thương da chàm, chốc lở tiếp xúc với vật nhiễm máu bàn chải đánh răng, dao cạo râu,… Diễn tiến tự nhiên bệnh viêm gan siêu vi B : Bs: Hồng Xn Thế 10 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA coi Bs: Hồng Xn Thế 56 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA lao leu Bs: Hồng Xn Thế 57 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA nsk Bs: Hồng Xn Thế 58 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA sdsdsss Bs: Hồng Xn Thế 59 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA dsfcdsfdgfdg Bs: Hồng Xn Thế 60 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA deefefe Bs: Hoàng Xuân Thế 61 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA khuyydfjh Bs: Hoàng Xuân Thế 62 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA n Bs: Hoàng Xuân Thế 63 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA ghgh Bs: Hoàng Xuân Thế 64 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA s Bs: Hồng Xn Thế 65 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA sdwdw Bs: Hồng Xn Thế 66 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA dswdsd Bs: Hồng Xn Thế 67 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Bs: Hồng Xn Thế 68 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA ấSẤ Bs: Hồng Xn Thế 69 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA DSDS Bs: Hoàng Xuân Thế 70 .. .Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Virus viêm gan Macmot - Sóc (Woochuck hepatitis virus) : WBV Virus viêm gan B Vịt (Duck hepatitis B virus) : DHBV HBV gây nhiễm... số b nh nhân khác kéo dài b nh mạn tính chuyển sang b xơ gan, chai gan, chí tiến đến ung thư gan Bs: Hồng Xn Thế 12 Tìm hiểu quy trình xét ngiệm viêm gan B phương pháp ELISA Diễn tiến b nh viêm. .. viêm gan siêu vi B phụ thuộc vào thể trạng b nh nhân Hình : Chu trình xâm nhập virus viêm gan siêu vi B Biểu lâm sàng b nh viêm gan B : 4.1 Viêm gan B cấp tính : Bs: Hồng Xn Thế 13 Tìm hiểu quy trình