BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGÂN MÃ SINH VIÊN: 1201401 NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN HỆ GEL CHỨA EUTECTI ĐỂ TĂNG TÍNH THẤM QUA DA CỦA PROGESTERON KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2017 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGÂN MÃ SINH VIÊN: 1201401 NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN HỆ GEL CHỨA EUTECTI ĐỂ TĂNG TÍNH THẤM QUA DA CỦA PROGESTERON KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn TS Nguyễn Thạch Tùng Nơi thực Bộ môn Bào chế Viện KNDPQG HÀ NỘI – 2017 LỜI CẢM ƠN Trước tiên, em xin gửi lời biết ơn sâu sắc đến thầy giáo TS Nguyễn Thạch Tùng luôn tận tâm hướng dẫn, động viên giúp đỡ em trình học tập nghiên cứu hoàn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn tới toàn thể thầy cô giáo, anh chị kỹ thuật viên môn Bào chế, hết lòng quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện tốt suốt trình làm thực nghiệm môn Em xin cảm ơn anh chị làm việc Viện Công Nghệ Dược Phẩm Quốc Gia anh chị kỹ thuật viên môn Dược lực hỗ trợ em để hoàn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn tới Ban giám hiệu, thầy cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội với tri thức tâm huyết, truyền đạt cho em kiến thức quý báu suốt thời gian học tập trường Cuối cùng, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, cảm ơn người bạn, người anh, chị, em – người bên, quan tâm, giúp đỡ động viên em vượt qua khó khăn sống học tập, động lực để em học tập, rèn luyện nghiên cứu Trường Đại học Dược Hà Nội Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Sinh viên Nguyễn Thị Ngân MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tính chất vật lý .2 1.1.1 Công thức hóa học 1.1.2 Tính chất lý, hóa 1.1.3 Tác dụng dược lý 1.1.4 Chỉ định 1.1.5 Chống định 1.1.6 Một số chế phẩm thị trường PGT 1.1.7 Một số nghiên cứu progesteron .4 1.2 Hệ eutecti 1.2.1 Định nghĩa 1.2.2 Đặc điểm hệ eutecti 1.2.3 Phương pháp bào chế hệ eutecti 1.2.4 Cơ chế tăng tính thấm qua màng sinh học (da) 1.2.5 Một số nghiên cứu hệ eutecti .10 1.2.6 Đánh giá chế tương tác thành phần hệ eutecti .11 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Nguyên liệu, thiết bị 17 2.1.1 Nguyên vật liệu 17 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 17 2.2 Nội dung nghiên cứu .18 2.2.1 Nghiên cứu bào chế đánh giá tương tác hệ eutecti chứa PGT menthol .18 2.2.2 Nghiên cứu đánh giá tính thấm khả lưu giữ da hệ eutecti 18 2.2.3 Nghiên cứu cải thiện tính thấm PGT so với sản phẩm đối chiếu thị trường 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu .18 2.3.1 Phương pháp nghiên cứu tiền công thức 18 2.3.2 Phương pháp bào chế hệ eutecti - hydrogel PGT tá dược A 20 2.3.3 Phương pháp đánh giá tương tác PGT A hệ eutecti 21 2.3.4 Phương pháp đánh giá hydrogel chứa eutecti gồm PGT A 22 2.3.5 Xử lý kết tính toán 24 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 25 3.1 Nghiên cứu tiền công thức 25 3.1.1 Phương pháp định lượng PGT sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 25 3.1.2 Xác định số tính chất vật lý PGT 26 3.1.3 Đánh giá khả thấm qua da PGT 27 3.2 Nghiên cứu bào chế hệ eutecti chứa PGT A 28 3.2.1 Nghiên cứu sàng lọc chất hình thành hệ eutecti với PGT 28 3.2.2 Xác định điểm eutecti quét phổ nhiệt vi sai (DSC) 29 3.2.3 Đánh giá tương tác PGT A hệ eutecti 32 3.2.4 Đánh giá khả giải phóng lưu giữ da sau 24h từ hệ eutecti đặt trực tiếp da lưng chuột 36 3.2.5 Sàng lọc môi trường khuếch tán .37 3.3 Nghiên cứu bào chế hydrogel chứa euteci gồm PGT A 38 3.3.1 Đánh giá ảnh hưởng hệ eutecti đến khả giải phóng PGT lưu giữ da PGT 38 3.3.2 Đánh giá ảnh hưởng lượng đồng dung môi đến khả giải phóng lưu giữ PGT da từ hệ gel khác 40 3.3.3 Đánh giá ảnh hưởng loại đồng dung môi đến lượng PGT giải phóng lưu giữ da từ dung dịch gel chứa eutecti 43 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT Borneol B Camphor C Cloroform CDCl3 Dược điển Việt Nam IV DĐVN IV Hydroxypropyl methylcellulose HPMC Khối lượng/khối lượng kl/kl Polyethylen glycol PEG Progesteron PGT, P Propylen glycol PG Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Tiêu chuẩn nhà sản xuất TCNSX Thể tích/thể tích tt/tt Tá dược A A Tá dược B B Tá dược C C Tá dược D D Tá dược E E DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Các nghiên cứu progesteron Bảng 1.2: Nguyên tắc, ưu – nhược điểm phương pháp bào chế hệ eutecti [10] Bảng 2.1: Nguyên liệu hóa chất nghiên cứu 17 Bảng 2.2 : Thiết bị sử dụng trình nghiên cứu 17 Bảng 3.1: Khảo sát độ lặp lại phương pháp .25 Bảng 3.2: Phương pháp xác định tính chất vật lý PGT 26 Bảng 3.3: Hình ảnh minh họa trạng thái hỗn hợp PGT với terpen khác đun nóng từ điều kiện phòng .28 Bảng 3.4: Thiết kế thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng hệ eutecti đến khả giải phóng lưu giữ da PGT 39 Bảng 3.5: Thiết kế thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng lượng Transcutol P đến khả giải phóng lưu giữ da từ loại gel khác 41 Bảng 3.6: Thiết kế thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng loại đồng dung môi đến khả giải phóng lưu giữ da từ gel 43 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Hình 1.1: Giản đồ pha hệ eutecti ibuprofen L- menthol có kèm theo đường giản đồ phân tích nhiệt DSC [28] .12 Hình 2.1: Sơ đồ bào chế hệ eutecti – hydrogel chứa PGT A 21 Hình 3.1: Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ diện tích pic sắc ký PGT phương pháp HPLC 26 Hình 3.2: Lượng PGT giải phóng từ dung dịch 1% PGT Transcutol P từ sản phẩm đối chiếu .27 Hình 3.3: Giản đồ phân tích nhiệt DSC hệ eutecti chứa 30% PGT với tốc độ gia nhiệt khác 29 Hình 3.4: Giản đồ pha hệ eutecti chứa PGT A 30 Hình 3.5: Giản đồ phân tích nhiệt PGT, A hỗn hợp eutecti tỷ lệ khác 32 Hình 3.6: Phổ FT – IR PGT, A hệ eutecti tỷ lệ khác 33 Hình 3.7: Hình ảnh phổ 1H – NMR A, hệ eutecti chứa 15% PGT hệ eutecti chứa 50% PGT .34 Hình 3.8: Phổ Raman PGT hệ eutecti mẫu gia nhiệt 65oC 35 Hình 3.9: Phổ nhiễu xạ tia X PGT, A hỗn hợp PGT : A = 15:85 .36 Hình 3.10: Ảnh hưởng hệ eutecti đặt trực tiếp bề mặt da lưng chuột 37 Hình 3.11: Ảnh hưởng môi trường khuếch tán đến khả giải phóng PGT qua da 38 Hình 3.12: Ảnh hưởng hệ eutecti – hydrogel chứa tỷ lệ eutecti khác đến khả giải phóng PGT qua da .39 Hình 3.13: Lượng PGT lưu giữ da sau 24h hỗn dịch gel chứa hệ eutecti 40 Hình 3.14: Ảnh hưởng lượng Transcutol P đến khả giải phóng PGT từ loại gel khác 41 Hình 3.15: Tốc độ thấm qua da từ hệ gel ứng với tỷ lệ Transcutol P 42 Hình 3.16: Lượng PGT giải phóng qua da từ dung dịch gel với loại đồng dung môi khác 44 Hình 3.17: Ảnh hưởng loại đồng dung môi đến tốc độ thấm PGT qua da 44 Hình 3.18: Lượng PGT lưu giữ da sau 24h hệ gel chứa đồng dung môi khác 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Bộ môn Vật lý - Hóa lý (2012), Giáo trình hóa lý dược, Đại học Dược Hà Nội, pp 42 - 45 Bộ Y Tế (2015), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất Y học, Hà Nội Bộ Y Tế (2009), Dược thư quốc gia Việt Nam, NXB Y học, pp 2748-2754 Chi Sang - Cheol - (2012), "Xây dựng công thức bào chế vi nhũ tương chứa lidocain prilocain", Tạp chí dược học, 438, pp 18 - 22 Nguyễn Lan Phương (2015), Nghiên cứu bào chế hydrogel chứa hệ nano betamethason acetat, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Vũ Huyền Thu (2014), Nghiên cứu bào chế hydrogel chứa tiểu phân nano lipid dexamethason acetat, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Tài liệu Tiếng Anh Biruss Babette, Valenta Claudia (2008), "The advantage of polymer addition to a non-ionic oil in water microemulsion for the dermal delivery of progesterone", International journal of pharmaceutics, 349(1), pp 269-273 Biruss Babette, Valenta Claudia (2006), "Skin permeation of different steroid hormones from polymeric coated liposomal formulations", European journal of pharmaceutics and biopharmaceutics, 62(2), pp 210-219 Chiou Win Loung (1971), "Mechanism of increased rates of dissolution and oral absorption of chloramphenicol from chloramphenicol‐urea solid dispersion system", Journal of pharmaceutical sciences, 60(9), pp 14061408 10 Chiou Win Loung, Riegelman Sidney (1971), "Pharmaceutical applications of solid dispersion systems", Journal of pharmaceutical sciences, 60(9), pp 1281-1302 11 Coleman Nichola J, Craig Duncan QM (1996), "Modulated temperature differential scanning calorimetry: a novel approach to pharmaceutical thermal analysis", International journal of pharmaceutics, 135(1-2), pp 1329 12 El‐Banna Hany M (1978), "Solid dispersion of pharmaceutical ternary systems I: Phase diagram of aspirin‐acetaminophen‐urea system", Journal of pharmaceutical sciences, 67(8), pp 1109-1111 13 Ferraro John R (2003), Introductory raman spectroscopy, Academic press 14 Han Fei, Yin Ran, et al (2012), "Nanostructured lipid carriers (NLC) based topical gel of flurbiprofen: design, characterization and in vivo evaluation", International journal of pharmaceutics, 439(1), pp 349-357 15 Hou Yawei, Gu Yingying, et al (2008), "Novel binary eutectic mixtures based on imidazole", Journal of Molecular Liquids, 143(2), pp 154-159 16 Kaplun‐Frischoff Yael, Touitou Elka (1997), "Testosterone skin permeation enhancement by menthol through formation of eutectic with drug and interaction with skin lipids", Journal of pharmaceutical Sciences, 86(12), pp 1394-1399 17 Law D., Wang W., et al (2003), "Properties of rapidly dissolving eutectic mixtures of poly(ethylene glycol) and fenofibrate: the eutectic microstructure", J Pharm Sci, 92(3), pp 505-15 18 Lewis R.J Sr, Hawley's Condensed Chemical Dictionary 15th Edition 2007: New York p 1043 19 Lewis R.J Sr (2004), Sax's Dangerous Properties of Industrial Materials, pp 3056 20 Lopes Luciana B, Murphy Neal, et al (2009), "Enhancement of transdermal delivery of progesterone using medium-chain mono and diglycerides as skin penetration enhancers", Pharmaceutical development and technology, 14(5), pp 524-529 21 Mackay Kirsty MB, Williams Adrian C, et al (2001), "Effect of melting point of chiral terpenes on human stratum corneum uptake", International journal of pharmaceutics, 228(1), pp 89-97 22 Maliwal D, Jain P, et al (2009), "Determination of progesterone in capsules by high-performance liquid chromatography and UV-spectrophotometry", Journal of Young Pharmacists, 1(4), pp 371 23 Moeck Peter (2012), "Yoshio Waseda, Eiichiro Matsubara, Kozo Shinoda, X‐ray Diffraction Crystallography", Crystal Research and Technology, 47(11), pp 1210-1211 24 Okonogi STESK, Oguchi T, et al (1997), "Improved dissolution of ofloxacin via solid dispersion", International journal of pharmaceutics, 156(2), pp 175-180 25 Pubchem (19/05/2017), www.pubchem.com 26 Sitruk-Ware Régine (1989), "Transdermal delivery of steroids", Contraception, 39(1), pp 1-20 27 Socrates George (2004), Infrared and Raman characteristic group frequencies: tables and charts, John Wiley & Sons 28 Stott Paul W., Williams Adrian C., et al (1998), "Transdermal delivery from eutectic systems: enhanced permeation of a model drug, ibuprofen", Journal of Controlled Release, 50(1–3), pp 297-308 29 Tung Nguyen-Thach, Tran Cao-Son, et al (2017), "Formulation and biopharmaceutical evaluation of bitter taste masking microparticles containing azithromycin loaded in dispersible tablets", European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 30 Weber Ursula, Thiele Herbert (2008), NMR-spectroscopy: modern spectral analysis, John Wiley & Sons 31 Yalkowsky Samuel H, Valvani Shri C (1980), "Solubility and partitioning I: solubility of nonelectrolytes in water", Journal of pharmaceutical sciences, 69(8), pp 912-922 32 Park C W., Kim J Y., et al (2012), "Preparation and valuation of a topical solution containing eutectic mixture of itraconazole and phenol", Arch Pharm Res, 35(11), pp 1935-43 33 Park C W., Mansour H M., et al (2012), "Phase behavior of itraconazolephenol mixtures and its pharmaceutical applications", Int J Pharm, 436(1-2), pp 652-8 PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: Hình ảnh sắc ký đồ PHỤ LỤC 2: Hình vẽ thể lượng PGT lưu giữ da sau 24h gel chứa lượng Transcutol P khác PHỤ LỤC 3: Giản đồ phân tích nhiệt DSC mẫu có tỷ lệ 50% PGT chạy với tốc độ gia nhiệt 2oC/phút 10oC/phút PHỤ LỤC 4: Giản đồ phân tích nhiệt DSC mẫu có tỷ lệ PGT : A 30:70; 50:50; 70:30 PHỤ LỤC 5: Hình ảnh phổ hồng ngoại tỷ lệ eutecti PHỤ LỤC : Hình ảnh đồ thị phân bố kích thước tiểu phần PGT đo máy Mastersizer 3000E PHỤ LỤC Hình ảnh sắc ký đồ Hình PL 1.1 Sắc ký đồ mẫu chuẩn PGT nồng độ 18µg/ml Hình PL 1.1: Sắc ký đồ mẫu gel Carbopol 934 5% chứa 43,3% Transcutol P PHỤ LỤC Lượng PGT lưu giữ da sau 24h gel chứa lượng Transcutol P khác Hình PL 2.1: Lượng PGT lưu giữ da sau 24h loại gel chứa lượng Transcutol P khác PHỤ LỤC Giản đồ phân tích nhiệt DSC mẫu chứa 50% PGT chạy với tốc độ gia nhiệt khác Phụ lục PL 3.1: Giản đồ phân tích nhiệt DSC mẫu 50% PGT với tốc độ gia nhiệt 2oC/phút Phụ lục PL 3.2: Giản đồ phân tích nhiệt DSC mẫu 50% PGT với tốc độ gia nhiệt 10oC/phút PHỤ LỤC Giản đồ phân tích nhiệt DSC mẫu eutecti với tỷ lệ PGT : A 30:70; 50:50; 70:30 Hình PL 4.1: Giản đồ phân tích nhiệt DSC mẫu eutecti có tỷ lệ PGT : A 30:70 Hình PL 4.2: Giản đồ phân tích nhiệt DSC mẫu eutecti có tỷ lệ PGT : A 50 : 50 Hình PL 4.3: Giản đồ phân tích nhiệt DSC mẫu eutecti có tỷ lệ PGT : A 70 : 30 PHỤ LỤC Hình ảnh phổ hồng ngoại (IR) tỷ lệ eutecti Hình PL 5.1: Phổ hồng ngoại PGT Hình PL 5.2: Phổ hồng ngoại hỗn hợp P : A = : 99 Hình PL 5.3: Phổ hồng ngoại hỗn hợp P : A = : 95 Hình PL 5.4: Phổ hồng ngoại hỗn hợp P : A = 15 : 85 Hình PL 5.5: Phổ hồng ngoại hỗn hợp P : A = 30 : 70 Hình PL 5.6: Phổ hồng ngoại hỗn hợp P : A = 50 : 50 Hình PL 5.7: Phổ hồng ngoại hỗn hợp P : A = 70 : 30 Hình PL 5.8: Phổ hồng ngoại A PHỤ LỤC Đồ thị phân bố kích thước tiểu phân PGT Hình PL 6.1: Đồ thị phân bố kích thước tiểu phân PGT ... nhiên, tính đến nay, phát triển hệ eutecti chứa progesteron chưa nghiên cứu nước Do đó, nhóm nghiên cứu thực đề tài Nghiên cứu phát triển hệ gel chứa eutecti để tăng tính thấm qua da progesteron ... nghiên cứu đại khác như: vi nhũ tương, niosome, liposome để cải thiện tính thấm PGT Tuy nhiên, tính đến nay, chưa có nghiên cứu phát triển hệ eutecti chứa PGT ảnh hưởng hệ đến tính thấm qua da. .. ưu điểm tăng tính thấm hệ eutecti qua màng sinh học (da) mà có nhiều nghiên cứu bào chế hệ eutecti chứa thành phần khác Một số nghiên cứu giới nhóm nghiên cứu tổng hợp lại sau:  Nghiên cứu Devalina