MỘT SỐ VẤN ĐỀ VỀ XÉT NGHIỆM CÁC TÁC NHÂN VI KHUẨN PHỔ BIẾN GÂY BỆNH TIÊU CHẢY ThS Nguyễn Hoàng Vu PTN Vi Khuẩn Đường Ruột Cục Y tế dự phòng Các tác nhân vi sinh gây tiêu chảy BACTERIA VIRUS E coli: EPEC, ETEC, EAEC, EIEC, STEC Rotavirus Shigella spp Adenovirus Salmonella spp Norovirus GI, GII Vibrio cholerae O1 O139 Sapovirus V cholerae non O1 non O139 (VC NAG) Astrovirus Vibrio parahaemolyticus … Campylobacter jejuni, C coli, C fetus Aeromonas spp Clostridium difficile 10 Bacteroides fragilis 11 … PARASITES Cryptosporidium Entamoeba histolytica Giardia lamblia … CÁC TÁC NHÂN VI KHUẨN GÂY BỆNH Tả Lỵ trực trùng (dysenteria) (cholera) Thương hàn Tiêu chảy E coli Ngộc độc thực phẩm (Typhoid) Vibrio cholerae Shigella dysenteriae/ - Salmonella enterica subsp Diarrheagenic E coli Salmonella non Typhi, S O1/O139 flexneri/ boydii/ sonnei enterica Typhi (S Typhi) (EPEC, ETEC, EAEC, aureus, … - Salmonella Paratyphi A/B EIEC, STEC) Các tác nhân vi khuẩn khác? PHÂN NHÓM VIBRIO VIBRIO (phẩy khuẩn) VIBRIO CHOLERAE V para, V fluvialis, VC O1 VC O139 CLASSICAL ELTOR típ sinh học INABA OGAWA HIKOJIMA (factor AC) (factor AB) (factor ABC) típ HT VC NAG LỴ TRỰC TRÙNG Hội chứng lỵ • Là một bệnh tiêu chảy thấy có máu phân (WHO)  Entamoeba histolytica : 10 – 20%  E.coli (EHEC, EIEC) … : – 2%  Shigella Lỵ trực trùng : 60% SALMONELLA Hơn 2.500 serotype -Salmonella enterica subsp enterica Typhi (S Typhi)  thương hàn (typhoid fever) - Salmonella Paratyphi A, B  phó thương hàn (paratyphoid) - Salmonella Typhimurium, Salmonella Enteritidis,…: gây ngộ độc thực phẩm E coli • • • • Nhiễm khuẩn đường tiểu : 90% NKĐT lần đầu phụ nữ là E.coli Nhiễm khuẩn huyết: gặp trẻ sơ sinh bệnh nhân sau NKĐT Viêm màng não: 40% trẻ sơ sinh Tiêu chảy: gồm nhóm E Coli gây tiêu chảy o o o o o o ETEC : trẻ em quốc gia phát triển, khách du lịch EPEC : thường gặp trẻ em tuổi EHEC : gây ngộ độc thực phẩm cho người / O157 : H7 EaggEC :trên bệnh nhân nhập viện và trẻ em EIEC : người lớn DAEC : bệnh nhân nhập viện và trẻ em từ - tuổi CÁC VẤN ĐỀ ẢNH HƯỞNG ĐẾN ĐỘ TIN CẬY KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM? CÁC PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM ƯU NHƯỢC ĐIỂM? NUÔI CẤY MẪU XN + THÔNG TIN LƯU MẪU ĐỊNH HƯỚNG TÁC NHÂN NHUỘM GRAM, SOI TƯƠI NUÔI CẤY MT tăng sinh MT thạch MT thạch chọn lọc chọn lọc không chọn lọc THỬ NGHIỆM SINH HÓA (KHÁNG HUYẾT THANH) XÁC ĐỊNH TÁC NHÂN ĐỊNH HƯỚNG TÁC NHÂN GÂY BỆNH - Triệu chứng lâm sàng - Thông tin dịch tê NUÔI CẤY VI KHUẨN EC EMB EC môi trường Mac Conkey SINH HÓA ĐỊNH DANH VI KHUẨN NGƯNG KẾT KHÁNG HUYẾT THANH Khuẩn lạc (MEA, GO) Kháng huyết đa giá (Ogawa+ Inaba+ O139) (Thực hiện Ogawa Inaba) Đơn giá Ogawa VC Ogawa Đơn giá Inaba VC Hikojima VC Inaba Đơn giá O139 VC O139 ĐỊNH DANH BẰNG KÍT SINH HÓA THƯƠNG MẠI Máy định danh vi khuẩn tự động PHƯƠNG PHÁP SINH HÓA TÊN VI KHUẨN Máy định danh vi khuẩn tự động PHƯƠNG PHÁP QUANG HỌC TÊN VI KHUẨN D1 - Un D1 - Par D1 - Per 90 10 60 10 -1 10 -2 10 30 -3 Laser beam Relative Intensity 10 -4 10 -5 10 -6 10 330 210 300 240 270 QUE THỬ NHANH PHÁT HIỆN KHÁNG NGUYÊN V cholerae Shigella THỬ NHANH PHÁT HIỆN KHÁNG THỂ S Typhi PCR phát gene đặc hiệu Ví dụ PCR phát hiện ta - VC O1 - VC O139 - ctxA (độc tố tả) thang chuẩn gen ctxA gen O1 CÁC PHƯƠNG PHÁP KHÁC? - ELISA Giải trình tự rDNA 16S Bacteriophage … KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG - Nhân sự - Quy trình chuẩn - Kiểm soát sinh phẩm hóa chất - Hiệu chuẩn thiết bị - Chủng vi khuẩn chuẩn - … Trân trọng cảm ơn! 31 ... phòng Các tác nhân vi sinh gây tiêu chảy BACTERIA VIRUS E coli: EPEC, ETEC, EAEC, EIEC, STEC Rotavirus Shigella spp Adenovirus Salmonella spp Norovirus GI, GII Vibrio cholerae O1 O139 Sapovirus... lớn DAEC : bệnh nhân nhập vi n và trẻ em từ - tuổi CÁC VẤN ĐỀ ẢNH HƯỞNG ĐẾN ĐỘ TIN CẬY KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM? ĐẶC ĐIỂM GÂY BỆNH Tả Lỵ trực trùng (dysenteria) Thương hàn (cholera) Tiêu chảy nước... aureus, … - Salmonella Paratyphi A/B EIEC, STEC) Các tác nhân vi khuẩn khác? PHÂN NHÓM VIBRIO VIBRIO (phẩy khuẩn) VIBRIO CHOLERAE V para, V fluvialis, VC O1 VC O139 CLASSICAL ELTOR típ sinh