Đang tải... (xem toàn văn)
ĐA DẠNG SINH HỌC CHỦ ĐỀ : ĐIỀU TRA, KHẢO SÁT THÂN MỀM CHÂN BỤNG TRÊN CẠN KỸ THUẬT ĐIỀU TRA ĐA DẠNG SINH HỌC 1. CHỌN ĐIỂM KHẢO SÁT THU MẪU Khu hệ Thân mềm Chân bụng ở cạn Việt Nam được nghiên cứu từ khoảng giữa thế kỷ XIX, các nghiên cứu tập trung chủ yếu ở phía Bắc, như khu vực vùng núi Đông Bắc (Lạng Sơn, Cao Bằng, Bắc Kạn, Hà Giang), Tây Bắc (Lai Châu, Lào Cai, Sơn La), một phần vùng đồng bằng (Ninh Bình, Thanh Hóa) và ven biển (Quảng Ninh, Hải Phòng). Các khu vực này có điều kiện phù hợp với sinh cảnh của chúng. Vị trí thu mẫu phải phân bố sao cho đảm bảo tính đại diện cho khu vực nghiên cứu 2. KỸ THUẬT THU MẪU 2.2 Phương pháp thu mẫu Thu mẫu định tính Mẫu định tính được thu ngẫu nhiên ở tất cả các sinh cảnh khác nhau, phạm vi thường rộng hơn so với mẫu định lượng với mục đích bổ sung thành phần loài cho mẫu định lượng. Vì vậy, khi thu mẫu phải thu tất cả các mẫu với mọi kích thước, từ con non đến con trưởng thành (kể cả mẫu đã chết chỉ còn lại vỏ) để không bỏ sót thành phần loài. Mẫu được thu trên mặt đất, trong tầng thảm mục, lớp đất mặt, trên thân hoặc lá cây. Các bước được tiến hành thu mẫu theo hướng dẫn của Vermeulen và Maassen, cụ thể như sau: + Đối với mẫu có kích thước lớn có thể nhặt bằng tay hoặc dùng panh kẹp để thu mẫu. Đối với các mẫu nhỏ dùng sàng có mắt lưới cỡ 3mm, 5mm, 8mm bằng kim loại để sàng các lá mục, bên dưới sàng được hứng bằng tấm nilon sáng màu hoặc giấy trắng. Nếu có ốc nhỏ bám dưới lá mục, khi sàng mẫu sẽ rơi xuống và có thể dùng kính lúp cầm tay hoặc nhìn bằng mắt nhặt mẫu. + Đối với các mẫu ốc nhỏ lẫn trong đất hoặc mùn ở các kẽ đá hoặc trong hang, có thể sử dụng phương pháp cho đất hoặc thảm mục vào chậu nước để mẫu nổi lên và vớt lấy mẫu. Tất cả các mẫu thu định tính đều được bảo quản trong các túi vải hoặc túi nylon riêng, có ghi ký hiệu cẩn thận theo từng sinh cảnh và các lưu ý cần thiết khác (nếu có).
ĐA DẠNG SINH HỌC CHỦ ĐỀ : ĐIỀU TRA, KHẢO SÁT THÂN MỀM CHÂN BỤNG TRÊN CẠN KỸ THUẬT ĐIỀU TRA ĐA DẠNG SINH HỌC CHỌN ĐIỂM KHẢO SÁT THU MẪU - Khu hệ Thân mềm Chân bụng cạn Việt Nam nghiên cứu từ khoảng kỷ XIX, nghiên cứu tập trung chủ yếu phía Bắc, khu vực vùng núi Đông Bắc (Lạng Sơn, Cao Bằng, Bắc Kạn, Hà Giang), Tây Bắc (Lai Châu, Lào Cai, Sơn La), phần vùng đồng (Ninh Bình, Thanh Hóa) ven biển (Quảng Ninh, Hải Phòng) Các khu vực có điều kiện phù hợp với sinh cảnh chúng - Vị trí thu mẫu phải phân bố cho đảm bảo tính đại diện cho khu vực nghiên cứu KỸ THUẬT THU MẪU 2.2 Phương pháp thu mẫu Thu mẫu định tính - Mẫu định tính thu ngẫu nhiên tất sinh cảnh khác nhau, phạm vi thường rộng so với mẫu định lượng với mục đích bổ sung thành phần loài cho mẫu định lượng Vì vậy, thu mẫu phải thu tất mẫu với kích thước, từ non đến trưởng thành (kể mẫu chết lại vỏ) để không bỏ sót thành phần loài Mẫu thu mặt đất, tầng thảm mục, lớp đất mặt, thân Các bước tiến hành thu mẫu theo hướng dẫn Vermeulen Maassen, cụ thể sau: + Đối với mẫu có kích thước lớn nhặt tay dùng panh kẹp để thu mẫu Đối với mẫu nhỏ dùng sàng có mắt lưới cỡ 3mm, 5mm, 8mm kim loại để sàng mục, bên sàng hứng nilon sáng màu giấy trắng Nếu có ốc nhỏ bám mục, sàng mẫu rơi xuống dùng kính lúp cầm tay nhìn mắt nhặt mẫu + Đối với mẫu ốc nhỏ lẫn đất mùn kẽ đá hang, sử dụng phương pháp cho đất thảm mục vào chậu nước để mẫu lên vớt lấy mẫu - Tất mẫu thu định tính bảo quản túi vải túi nylon riêng, có ghi ký hiệu cẩn thận theo sinh cảnh lưu ý cần thiết khác (nếu có) Thu mẫu định lượng - Thu mẫu định lượng thu toàn mẫu diện diện tích mặt đất có mẫu, diện tích thường sử dụng 1m Giá trị mẫu định lượng cho biết mật độ, phong phú số lượng đa dạng thành phần loài khu vực nghiên cứu Mỗi khu vực đại diện tiến hành lập - ô tiêu chuẩn với diện tích 1m2 - Sau xác định vị trí cần thu mẫu, dùng thước dây xác định ô tiêu chuẩn theo diện tích trên, thu tất mẫu có ô đó, có lẫn thảm mục phải dùng sàng để loại bỏ vụn tiến hành thu mẫu phương pháp thu định tính Số lượng ô tùy vào tình hình cụ thể mẫu thu thập sơ bước đầu, để định đến số lượng diện tích ô vuông Nếu số lượng mẫu ốc cạn ít, thưa thớt thu diện tích 1m2 được, thu với diện tích lớn Mẫu ốc cạn thu ô vuông cho vào túi nilon lọ đựng mẫu có đề nhãn Nhãn ghi thông tin: Địa điểm, thời gian, tọa độ, sinh cảnh, đặc điểm thảm thực vật Điều tra theo tuyến - Lập tuyến điều tra qua các kiểu sinh cảnh đại diện, kiểu địa hình (núi đất núi đá, nương rẫy, vườn nhà) - Quan sát mắt phạm vi quan sát chiều ngang chiều dọc Tìm kiếm loài cạn, mặt đất, vách đá, lá, cành Bắt tay, thu loài nhóm loài đại diện (vỏ sống), chụp ảnh loài đại diện thu thập Mẫu vật ảnh ghi thông tin kèm theo địa điểm, tọa độ, ngày tháng, sinh cảnh, độ cao, địa hình Phỏng vấn người dân Tiến hành vấn người dân địa phương, cán quản lý - bảo tồn tình trạng, giá trị sử dụng ốc cạn khu vực nghiên cứu Lựa chọn người dân địa phương cán xã để vấn tình hình khai thác, sử dụng, buôn bán, bảo tồn ốc cạn khu vực Thông tin vấn theo hai dạng thu thập thông tin qua điện thoại vấn trực tiếp Xử lý bảo quản mẫu - Đối với mẫu vật chết (vỏ ốc) tiến hành rửa sạch, phơi sấy bảo quản khô túi nylon hộp nhựa đựng mẫu - Đối với mẫu ốc cạn sống bao gồm sên trần ốc cạn ngâm vào nước đêm (khoảng 12 - 24 giờ) metanol loãng ốc chết từ từ, duỗi hết phần đầu, chân tua cảm giác, sau tiến hành định hình bảo quản dung dịch cồn 90o Phân tích định loại - Hầu hết loài ốc cạn định loại dựa vào đặc điểm hình thái vỏ như: Kích thước, hình dạng, màu sắc, số vòng xoắn, rãnh xoắn, đỉnh vỏ, miệng vỏ Được thể qua số đo hay tỷ lệ chúng Xử lý số liệu - Thông tin phân bố loài vào tần suất xuất mức độ phong phú loài tuyến điểm điều tra Sử dụng phần mềm ứng dụng để tính toán xử lý số liệu, sơ đồ, đổ, biểu đồ để mô phân bố chúng, diễn giải - Dựa vào số liệu thống kê thành phần loài khu vực nghiên cứu để so sánh, đánh giá mức độ đa dạng, phong phú chúng khu vực nghiên cứu với số khu vực lân cận - Các cách phân tích số liệu ô vuông : + Mật độ (số cá thể loài/m2): - Mật độ cá thể loài i: v (số cá thể loài thứ i/m ) = Σni/ΣS - Mật độ cá thể loài ô nghiên cứu: V (số cá thể /m2) = Σn/ΣS Trong đó: * ni: Là số lượng cá thể loài thứ i ô nghiên cứu * Σni: Là tổng số cá thể loài i ô nghiên cứu * Σn: Là tổng số cá thể ô nghiên cứu * ΣS: Là tổng diện tích ô nghiên cứu + Độ đa dạng loài (D‟): Được tính theo số đa dạng Simpson (Simpson‟s Index of Diversity) D‟ = 1- Σpi2 Trong đó: (D‟) số đa dạng Simpson D‟ khoảng từ - D‟ có giá trị lớn đa dạng pi: Tỉ lệ loài i tổng số cá thể (pi =(ni/Σn) + Độ phong phú loài: Được tính theo công thức Kreds (1989) P% = (ni/Σn) x 100 + Tần số xuất (độ thường gặp) tính công thức Sharma (2003): C‟ = p/P*100% Trong đó: C‟: Là tần số xuất (độ thường gặp) p: Là số lượng địa điểm thu mẫu có loài xuất P: Là tổng số địa điểm thu mẫu nghiên cứu Đánh giá tần số xuất theo giá trị tần số xuất hiện: Loài thường gặp C‟ > 50%, Loài gặp 25% < C‟ < 50%, Loài ngẫu nhiên C‟ < 25% CHỦ ĐỀ THỰC VẬT THÂN THẢO II KỸ THUẬT ĐIỀU TRA ĐA DẠNG SINH HỌC 2.1 Địa điểm khảo sát: - Thu mẫu rãi rác địa bàn tỉnh Vĩnh Phúc 2.2 Kỹ thuật thu mẫu 2.2.2 Các kỹ thuật , phương pháp: • Phương pháp nghiên cứu lí thuyết Thu thập số tài liệu liên quan đến vấn đề nghiên cứu thực vật để vận dụng vào việc phân tích, biện luận kết đạt • Phương pháp thực nghiệm Phương pháp nghiên cứu thực địa - Bố trí thu mẫu: Mẫu thu rải rác môi trường địa Vĩnh Phúc - Quan sát, mô tả đặc điểm hình thái: Quan sát mô tả đặc điểm hình thái quan sinh dưỡng loài thực vật nghiên cứu, ghi chép đặc điểm sinh thái môi trường nghiên cứu Chụp ảnh đối tượng nghiên cứu điều kiện tự nhiên Phương pháp cắt, nhuộm mẫu + Cắt trực tiếp tay với lưỡi dao lam + Mẫu cắt xong muốn nghiên cứu chi tiết, phải tiến hành nhuộm mẫu Sử dụng phương pháp nhuộm kép, gồm bước: ▫ Ngâm mẫu cắt vào nước javen 15-20 phút để tẩy nội chất tế bào, rửa nước cất ▫ Ngâm mẫu vào axit axetic 1% khoảng phút để loại hết javen dính lại, rửa nước cất ▫ Nhuộm xanh dung dịch xanh metylen loãng (1/1000-1/10.000 nước cất) từ 10 giây đến 1-2 phút, rửa nước cất ▫ Nhuộm đỏ dung dịch đỏ carmin 20-30 phút, rửa lại nước cất • Thu mẫu cố định mẫu Mỗi mẫu phải có đầy đủ phận , : cành , , hoa tốt (đối với lớn ) hay đối vơi thân thảo Mỗi thu từ 3-5 mẫu , mẫu thân thảo tìm mẫu giống thu vơi số lượng để vừa nghiên cứu biến dạng loại, vừa để trao đổi Việc thu hái mẫu thân thảo thường dễ tiến hành Tuy nhiên phải ý tuỳ loại mà thu thập phận quan trọng để việc làm tiêu đầy đủ việc giám định dễ dàng Với thân thảo , dùng kéo cắt , cắt đoạn thân cành cỏ đủ hoa , Đối với loại có củ dùng xẻng nhỏ đào , rũ đất để làm mẫu - Những loại thân thảo có kích thước lớn , mọng nước , không thu được, cần vao đặc điểm cần cho định loài để thu lái - Cũng thu hái thân thảo lơn , cắt thành đoạn , ghi số liệu có thích thêm để làm tiêu liên hoàn - Các mẫu rễ, thân, lấy đồng kích thước nhằm đảm bảo tính đồng bộ, xác nghiên cứu so sánh Cố định mẫu: - Cố định mẫu dung dịch FAC cải tiến với tỷ lệ thành phần chất: Cồn etylic 96o: 400ml; axit axetic 40%: 40ml; focmalin: 80ml; Nước cất: 280ml - Rượu etylic thấm nhanh vào mẫu vật làm cho chất tế bào chất nhân kết thành hạt dày đặc, làm tan chất dầu Tuy nhiên, rượu làm méo mó hình thái tế bào làm cho màng tế bào cứng dòn lại - Focmalin giữ cấu trúc chất tế bào, không làm tan lipit, không làm méo mó hình dạng tế bào Nhưng focmalin làm cứng dòn mẫu - Axit axetic có tác dụng chủ yếu giữ cho cấu tạo nhân không thay đổi không giữ cấu tạo chất tế bào thường gây phân hủy thể tơ Khác với rượu, axit axetic làm cho tế bào trương lên ngăn chặn tượng làm cứng màng tế bào 2.3 Xử lý bảo quản mẫu : - Xử lý mẫu : Sau ngày thu mẫu cần đeo nhãn cho mẫu Trên nhãn cần ghi chép : + Số liệu mẫu + Địa điểm nới lấy ( rải rác địa bàn tỉnh Vĩnh Phúc) + Ngày lấy mẫu:13/11/2016 + Đặc điểm quan trọng : thân thảo loại bạc hà ,cà rốt , khoa tây , chuối , củ cải vàng , cỏ gà…… + Người lấy mẫu: Đỗ Lê Thành Hưng , Đinh Thị Ngọc Giang + Nhãn ghi số hiệu mẫu thông tin khác ghi vào sổ riêng ghi phiếu mô tả, nhật ký + Sau đeo nhãn , mẫu cần xử lý Mẫu bỏ vào thùng tôn , thùng gỗ vận chuyển phòng thí nghiệm - Để bảo quản mẫu , có nhiều cách để bảo quản mẫu, thông thương nên dùng túi polyetylen để đựng mẫu mà không dùng cặp gỗ dán trước vừa cồng kềnh, vừa khó bảo quản , cần có sổ ghi chép riêng , dây buộc , kéo cắt , nhãn dán , bút chì 2B 2.4 Phân tích định loại Tài liệu định loại thực vật việt nam Nguyễn Tiến Bân, 1997 Cẩm nang tra cứu nhận biết họ thực vật hạt kín Việt N m, NXB Nông nghiệp, H Nội, 532 trang Lê Huy Bá, Lâm Minh Triết (2005), Sinh thái môi trường học bản, NXB Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh Nguyễn Bá (2006), Hình thái học thực vật, NXB Giáo dục, Hà Nội Nguyễn Như Đối, Nguyễn Khoa Lân (1995), Giáo trình giải phẫu hình thái thực vật, Đại học Huế Katherine Esau (1979), Giải phẫu thực vật, tập1, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Xử lý số liệu Phương pháp đo kính hiển vi: Sử dụng phương pháp đo gián tiếp cách so sánh kích thước vật cần đo với thước đo thị kính thước đo vật kính lắp thêm vào kính hiển vi Sử dụng phương pháp xác định kích thước thành phần cấu tạo nên tế bào Số liệu xử lí phương pháp toán thống kê: - CHỦ ĐỂ THỰC VẬT NẤM CỞ LỚN A KỸ THUẬT ĐIỀU TRA ĐA DẠNG SINH HỌC Chọn điểm khảo sát thu mẫu: + Thời gian thu mẫu: vào mùa xuân, hạ, thu, đông năm +Khảo sát tuyến : Theo đặc trưng phân hóa thảm thực vật theo đai độ cao, sinh cảnh: bãi gỗ, làng mạc, rừng núi, ven bờ sông, bờ suối, vườn cây, vùng cát ven biển, vùng đất ngập mặn…Trên sở nguồn lực,kinh phí mục tiêu chương trình điều tra cần xác định khu vực lập tuyến điều tra, số tuyến điều tra số lần lặp lại +Điều tra vấn: Phỏng vấn người dân qua phiếu điều tra vấn trực tiếp nhằm thu thập thông tin thành phần loài, số lượng, tên địa phương, nơi phân bố, đặc điểm sinh học, sinh thái học, tình hình khai thác giá trị sử dụng, giá trị kinh tế Kỹ thuật thu mẫu: 2.1 Phương pháp thu mẫu: + Đầu tiên quan sát, mô tả màu sắc, kích thước, hình dạng, sinh cảnh chụp lại máy ảnh + Để thu mẫu nấm lớn dùng dao nhọn lấy nguyên vẹn nấm khỏi giá thể (kể phần tiếp xúc: Đất, mùn gỗ) + Ghi chép kiểu gây mục nấm (trắng, nâu, hỗn hợp, mục vết thương, mục rễ, ), phần (cưa ngang để quan sát, ghi chép), tên địa phương tên khoa học mà nấm mọc + Thu mẫu giai đoạn phát triển khác (non, trưởng thành, già) quan sát ghi chép hình thành thể chúng, + Những mẫu già hỏng không thu thập lẫn vào để tránh lây lan, phá hỏng mẫu nấm khác Trường hợp mẫu loại hiếm, không mẫu khác, thu để riêng xử lý đặc biệt phòng thí nghiệm + Mẫu sau vừa thu phải ghi ký hiệu nhãn hiệu Số hiệu mẫu Tên mẫu Tên họ Ngày lấy Đặc điểm mẫu Người lấy mẫu mẫu +Ghi bút chì hay bút mực không bị nhoè nước Sau phải ý quan sát ghi chép đặc điểm dễ biến nấm vào phiếu điều tra như: màu sắc, mặt mũ nấm phần phụ (khô, nhầy dính, mụn, ), chụp ảnh nấm + Chụp ảnh mẫu: việc quan trọng, giúp lưu giữ lại hình ảnh mẫu phục vụ cho nghiên cứu phân loại bảo quản mẫu sau Bảo quản mẫu Bảo quản nơi thu mẫu: + Dùng giấy báo gói lại thành dạng phễu, đặt phần cuống nấm xuống đáy phễu mũ nấm phía + Mỗi mẫu nấm gói riêng, không để lẫn hay gói lẫn mẫu nấm, loài khác nhau, tránh bào tử nấm lẫn lộn + Những nấm có kích thước nhỏ, dễ gãy vỡ đựng riêng lọ nhỏ, hộp nhựa, hộp đựng phim + Không dùng túi ni lông để đựng mẫu không thoát khí nước, tạo điều kiện thuận lợi cho mốc vi khuẩn phát triển Bảo quản mẫu phòng thí nghiệm: + Phương pháp phơi khô, sấy khô : Nấm phơi khô tự nhiên ánh nắng mặt trời sấy khô từ từ đốt than củi, bếp điện hay tủ điện nhiệt độ 60 - 80oC để tránh bị biến dạng thay đổi màu sắc nhiều • Nấm xếp lên phên đan hay lưới thép mắt cáo có gờ xung quanh treo lên nguồn nhiệt • Đối với nấm có kích thước lớn chẻ đôi bổ làm nhiều lát mỏng để sấy cho chóng khô • Các mẫu nấm sau sấy khô, cần bọc giấy bóng mờ hay để túi polyetylen xếp mẫu vào hộp carton, hộp gỗ hay thùng kẽm đựng mẫu, đậy kín xếp theo thứ tự quy định + Phương pháp ngâm hóa chất: Nấm ngâm dung dịch formalin 4% hay cồn pha loãng 30 – 50% dung dịch hỗn hợp (1/3 cồn, 1/3 formalin 1/3 glyxerin) • Thông thường sau ngâm, dung dịch trở nên đục, nhiên sau 24 trình ngừng lại Lúc gặn lọc dung dịch hay thay để có dung dịch suốt • Để có mẫu đẹp vị trí ý muốn, dùng miếng kính cắt vừa bình thuỷ tinh, buộc toàn hay nửa nấm bổ đôi, ngâm dung dịch có nồng độ thích hợp, đậy kín nắp, gắn parafin nung chảy • Phương pháp ngâm hóa chất thường ứng dụng với nấm thể chất thịt Phân tích định loại: 4.1 Hình thái bên ngoài: Hình dạng, cấu trúc bên thường gặp nấm lớn: CHỦ ĐỀ NHÓM THỰC VẬT NGOẠI TẦNG QUY TRÌNH, KỸ THUẬT ĐIỀU TRA ĐA DẠNG SINH HỌC THỰC VẬT NGOẠI TẦNG I, Công tác chuẩn bị Lập kế hoạch a.Chuẩn bị tài liệu Bao gồm đồ, sơ đồ, thông tin chung khu vực dự định điều tra Đặc biệt cần thu thập loại đồ chuyên ngành đồ địa hình, đồ trạng rừng, đồ quy hoạch sử dụng đất phần mềm chuyên dụng để vẽ đồ xử lý ảnh số GIS như: Map/info; Micro/station; ILWIS; Are/View; Are/GIS; ERDAS/IMAGINE ảnh máy bay, ảnh vệ tinh có chất lượng cao khu vực điều tra b.Theo dõi dự báo thời tiết, tìm hiểu điều kiện khí hậu thủy văn, hải văn để đề phòng thời tiết xấu ảnh hưởng đến kết điều tra đa dạng sinh học trường c.Lên danh sách nhân danh mục dụng cụ, thiết bị điều tra, thu mẫu Cần thiết kiểm tra, vệ sinh hiệu chuẩn thiết bị dụng cụ quan sát, đo đạc, thử trước trường d.Chuẩn bị hóa chất, vật tư, dụng cụ phục vụ lấy mẫu bảo quản mẫu: - Các hóa chất bảo quản mẫu - Các dụng cụ chứa mẫu theo tiêu chuẩn - Hộp, thùng bảo quản mẫu phù hợp với điều tra đa dạng sinh học - Dụng cụ, thiết bị hỗ trợ khác: máy định vị vệ tinh ( GPS ), máy ảnh, máy quay phim - Văn phòng phẩm: giấy, bút, băng dính, sổ ghi chép e.Chuẩn bị nhãn mẫu f Chuẩn bị biểu mẫu, phiếu điều tra, vấn, nhật kí điều tra phân tích g.Chuẩn bị tài liệu có liên quan khác: - Bản đồ hành địa phương tiến hành điều tra sơ đồ điểm quan trắc địa phương - Giấy đường công văn cử đoàn điều tra đa dạng sinh học - Các tài liệu, biểu mẫu khác h.Chuẩn bị phương tiện phục vụ hoạt động lấy mẫu vận chuyển mẫu: ô tô, xe máy i Chuẩn bị thiết bị bảo hộ, an toàn lao động: quần áo bảo hộ lao động, mũ, áo mưa, áo phao, ủng cao su, găng tay, lều bạt, chăn màn, võng, túi cứu thương, dược phẩm j Chuẩn bị kinh phí k.Phân công người điều tra l Chuẩn bị sở lưu trữ cho người công tác dài ngày, lương thực thực phẩm đủ dùng thời gian dự kiến m.Liên hệ với quan địa bàn điều tra để việc thực điều tra thuận lợi 1.Thiết kế tuyến/ điểm điều tra Tính đa dạng thực vật điều tra, nghiên cứu thông qua tuyến điều tra ô nghiên cứu định vị Các tuyến điều tra khảo sát điểm, ô nghiên cứu định vị xác định dựa vào loại đồ chuyên ngành đồ địa hình, đồ trạng sử dụng đất, đồ tài nguyên rừng ( đồ thảm thực vật ), vầ phần quan trong, kinh nghiệm người điều tra, khảo sát a.Xác định tuyến điều tra khảo sát Dựa vào đồ địa hình, đồ trạng sử dụng đất, đồ tài nguyên rừng đồ thảm thực vật để xác định tuyến khảo sát qua tất sinh cảnh ( trạng thái thảm thực vật ) dạng địa hình khác khu vực nghiên cứu Để thiết kế tuyến điều tra cần vào đồ địa hình, đồ sử dụng đất, đồ trạng rừng, đồ trạng thảm thực vật để xác định dạng địa hình, trạng thái thảm thực vật lãnh thổ nghiên cứu để thiết kế hệ thống tuyến điều tra cho bao phủ hết dạng địa hình, trạng thái thảm thực vật có lãnh thổ nghiên cứu Nếu lãnh thổ nghiên cứu có đỉnh núi cao phải có tuyến điều tra từ chân núi lên đỉnh núi theo hướng Tây, Bắc, Đông Nam Cự ly tuyến: khoảng cách gần xa tuyến phụ thuộc vào mức độ chi tiết kế hoạch điều tra nghiên cứu nói chung điều tra đa dạng thực vật tuyến chọn lựa khoảng 100 – 500 m Hướng tuyến: điều tra thực vật, hướng tuyến phải vuông góc với đường đồng mức để ghi nhận thay đổi thành phần thực vật theo địa hình trạng thái thảm thực vật Xác định cự ly ghi chép hay điểm điều tra chi tiết: Trên tuyến điều tra lập cần đánh dấu chia đoạn để điều tra chi tiết, ghi chép, thu thập liệu Tùy theo mức độ chi tiết chương trình nghiên cứu, cự ly điểm nghiên cứu xác định với khoảng cách từ 100 – 500m b.Lựa chọn địa điểm, ô nghiên cứu định vị Điều tra theo ô tiêu chuẩn giúp cho người điều tra xác định diện tích điều tra, cấu trúc thảm thực vật, xác định thực vật cá thể loài ghi chép liệu cách cụ thể, chi tiết Có loại ô tiêu chuẩn: ô tiêu chuẩn tạm thời ô tiêu chuẩn cố định Việc lựa chọn ô tiêu chuẩn 10 định sinh trưởng, số lượng ô tiêu chuẩn giống trường hợp điều tra thực vật thân gỗ, đồng thời kết hợp với việc thu thập số liệu thực vật ngoại tầng có phân bố ô Thu thập liệu ô tiêu chuẩn thực vật ngoại tầng thường ghi nhận: tên loài, tầng phân bố, số lượng Mẫu biểu điều tra kháo sát thực vật ngoại tầng Ô tiêu chuẩn số: Ngày điều tra: Người/ nhóm điều tra Trạng thái rừng/ kiểu sinh thái: Vị trí: Chân/sườn/đỉnh Thứ tự Loài Tầng phân Số lượng bố Vật mẫu Chú ý: việc ghi nhận ký hiệu loài chưa thể xác định tên giống hình thức điều tra theo tuyến Đặc biêt, loài quan trọng, cần phải ghi nhận tất đặc điểm, tượng có liên quan đến cá thể, đo đếm số lượng cá thể ô tiêu chuẩn Điều tra vấn theo mẫu - Tiến hành vấn người dân, lãnh đạo quyền địa phương, cán quản lý vườn quốc gia, khu bảo tồn; lực lượng chức cán kiểm lâm, cán khoa học địa phương để thu thập thông tin số liệu cần thiết - Dựa vào cộng đồng dân cư địa phương để điều tra bổ sung đa dạng thực vật, điều kiện môi trường, sở hạ tầng kĩ thuật, đời sống, thu nhập khu vực nghiên cứu Phương pháp thực gồm bước tham vấn bước xác thực thông tin Một sô lưu ý điều tra, khảo sát thực vật Về mặt lý thuyết, điều tra thực vật dọc theo tuyến có thêt thực cách Cách thứ đánh dấu, đo định loại dọc theo tuyến lập lại tuyến lặp lại theo thời gian Phương pháp biết xác diện tích nghiên cứu đồng thời vấn đề nảy sinh số cá thể thực vật, đặc biệt to thường vượt khỏi phạm vi tuyến điều tra Vì vậy, tốt xác định khu cố định (ô khảo sát) nghiên cứu tất cả, xác định loài thực vật tìm thấy, số cá thể diện tích nghiên cứu Ô khảo sát có kích thước cố định, đánh dấu vĩnh cửu dọc theo tuyến lặp lại nghiên cứu cho năm mùa Phương pháp kế thừa 12 Kế thừa kết nghiên cứu trước làm sở cho việc so sánh, phân tích phục vụ cho việc viết tổng quan tài liệu Phương pháp nghiên cứu thực địa Vật liệu, vật dụng bao gồm: túi ni lông cỡ lớn không thủng, kéo cắt cây, cưa gỗ tay, dây buộc, nhãn, kim chỉ, máy định vị (GPS), máy ảnh, thước kẹp, thước dây, khung mẫu III Thu mẫu làm mẫu thực vật thực địa Chọn mẫu Chọn mẫu tiêu biểu đầy đủ phần thân, cành, lá, quan sinh sản hoa có đử trữ lượng theo yêu cầu Ưu tiên chọn mẫu loài có giá trị bảo tồn, loài có giá trị sử dụng cao Thu mẫu Mỗi mẫu phải thu đủ phận: cành, lá, hoa/quả dây, thân, rễ Đối với sống nhờ, sống bám( tầm gửi, phong lan ) dùng dao nhỏ tách cưa cắt lấy phần chủ Trong số trường hợp cần thu mẫu chủ để nghiên cứu sâu Xử lý bảo quản mẫu a Chụp ảnh mẫu: việc làm quan trọng, lưu giữ lại hình ảnh mẫu phục vụ cho nghiên cứu phân loại bảo quản mẫu sau b Ghi nhãn Số hiệu mẫu ( bắt buộc): số hiệu gắn liền với mẫu vật liên tục suốt trình thực bảo quản lưu giữ Tên người thu mẫu: ghi lại đầy đủ tên nhũng người tham gia thu thập mẫu Ngày, thán,g năm thu mẫu Đặc điểm hình thái mẫu: hình dạng, kích thước, màu sắc tự nhiên Cơ quan sinh sản có Địa điểm thu mẫu: vùng miền, xã, tỉnh, huyện, định vị tọa độ, độ cao địa điểm thu mẫu GPS c Ghi nhật kí mẫu: dùng bút chì bút bi mực ghi chép đầy đủ thông tin mẫu vật như: số hiệu mẫu, số lượng mẫu thu, địa điểm thu hái mẫu, đặc điểm sinh học, sinh thái điều kiện sống mẫu, ngày tháng thu hái mẫu, giới tính mẫu d Ép mẫu: mẫu tiêu đối chứng, tùy theo kích thước mẫu chọn cỡ giấy thích hợp để ép mẫu Mẫu sau thu nhúng qua cồn, sau ép mẫu khung ép giấy e Làm khô mẫu: mẫu sau thu được làm khô cách phơi nắng sấy Mẫu thường sấy tủ sấy nhiệt độ 13 40-500C Lưu ý suốt trình phơi sấy mẫu, 1-2 ngày phải kiểm tra, nhằm mục đích cho mẫu nhanh khô chỉnh sửa mẫu cần thiết Đóng mẫu vận chuyển mẫu Mẫu sau xử lý, bảo quản trường đóng gói hòm gỗ tôn, nhựa ghi rõ nhãn mác để chuyển phòng thí nghiệm IV Phân tích, định loại Phân tích định loại : dựa phương pháp hình thái so sánh phận 1.Phân loại sơ bộ: mẫu vật xử lý, phân loại sơ dựa vào đặc điểm hình thái đặc biệt quan sinh sản CHỦ ĐỀ VỀ LỚP THU III Kỹ thuật điều tra đa dạng sinh học Lập tuyến điều tra Lập tuyến điều tra cho chương trình giám sát tốn thòi gian quan trọng Sau chia khu bảo tổn thành dạng sinh cảnh chính, sở nguổn nhân lực kinh phí xác đính khu vực lập tuyến số tuyến điều tra giám sát cần lập số lần lặp lại cho đợtđiều tra Tuyến điêu tra nhằm mục đích: Giám sát diễn biến loài động vật Để dễ phát qua lần kiểm tra, tuyến điều tra phải nơi dễ dàng tiếp cận từ hệ thống đưòng lón hay đưòng mòn sẵn có sông, suối tuyến không trùng vói đưòng hay sông suối Các tuyến điều tra cách không Tốt tuyến điều tra đưòng thẳng có hưóng Khoảng cách tuyến điều tra tốt 1kmnhưng gần không dưói 500m Đầu tuyến phải đánh dấu vật liệu không bị sau nhiều năm (nilon màu, sơn) Lập tuyến điều tra trường địa bàn cọc tiêu phát dọn rõ ràng Trên tuyến điều tra lập, đánh dấu chia đoạn theo cự ly 100m để phục vụ hoạt động sau (như lập tuyến ngang, đặt bẫy thú nhỏ, đặt lưói mờ, ) Nếu tuyến qua nhiều dạng sinh cảnh khác dạng sinh cảnh cần xác định làm dấu mốc phân định 1.1 Điều tra giám sát loài thú Thú nhóm sinh vật quan trọng hoạt động bảo tổn Sự phát triển hay suy thoái loài thú nói lên tính hiệu hoạt động quản lý 1.2.1 Điều tra giám sát quần thể thú lớn Thường loài thú lón ý hàng đầu khu bảo tổn loài thị quan trọng Nhiều loài thú có sức thu hút lón nên 14 người dễ nhó dễ nhận dạng, ví dụ Voi, Tê giác, Voọc, Vượn Đó loài dễ dàng thuyết phục người ủng hộ việc bảo tổn loài nhỏ khó nhìn thấy Thường loài thú lón cần không gian sống rộng loài khác điều có nghĩa chúng bảo vệ tốt tất loài động vật khác sống sinh cảnh vói chúng bảo vệ Đôi khu bảo tổn xây dựng để bảo vệ loài thị loài thường có mặt sinh cảnh nguyên vẹn, nên bảo tổn chúng giúp bảo tổn sinh cảnh nguyên sinh Vì vậy, giám sát tình trạng loài thú chì thị, quần thể thú lón, thú Linh trưởng trở thành nhiệm vụ quan trọng Tuy nhiên nhiệm vụ khó khăn thực tế thú lón dễ bị săn bắn Giám sát loài thú lón cần phải kiên trì, điều tra kiểm kê ban đầu tính toán xác mật độ Tuy nhiên việc tính toán mật độ thú lón khó khăn Độ xác mật độ loài thú lón nằm đâu khoảng :thực tế , ưóc tính?, ưóc tính có sở , đoán 1.2.2 Các phương pháp điều tra giám sát quần thể thú lớn Có nhiều phương pháp giám sát quần thể thú lón gổm kiểm kê số loài, tính số (hay xu biến đổi) quần thể Các phương pháp khác độ phức tạp tính khả thi Các phương pháp kiểm kê tương đối dễ thực lại không cung cấp số liệu tình trạng quần thể Tính toán số quần thể có phức tạp cần đầu tư nhiều gian kinh phí lại cung cấp nhiều thông tin cho việc đề xuất định giải pháp quản lý • Điều tra kiểm kê Yêu cầu quan trọng điều tra động vật nói chung thú nói riêng phải sử dụng thành thạo đổ đánh dấu vị trí thông tin loài có Do thiếu thông tin có mặt loài nên phương pháp giám sát bắt đầu theo cách khác nhau: +Tổng hợp tài liệu có: báo cáo săn bắt, vận chuyển, sách hưóng dẫn, báo cáo khoa học công bố, báo cáo tài sưu tập mẫu vật liên quan đến khu bảo tổn thiên nhiên Khai thác chọn thông tin thích hợp để lập danh lục bưóc đầu tổ thành loài Danh lục cập nhật tư liệu phương pháp điều tra + Phỏng vấn dân địa phương: vấn người sống quanh khu bảo tổn thiên nhiên (đặc biệt thợ săn) Chọn lọc chuyển tải thông tin quan trọng có tính thực tế cao vào đổ, kể số lượng cá 15 thể trưóc loài thấy tin tưởng Tiến hành phân cấp độ phong phú theo mức đơn giản để phân biệt loài thường gặp, có gặp, gặp không gặp Kết vấn thợ săn hay dân địa phương phụ thuộc vào cách tiếp cận thái độ người vấn + Trong số trường hop loài điều tra (như Hổ, Bò xám, Voi) ápdụng phiếu điều tra thợ săn + Quan sát vũng nưóc, điểm muối - nơi mà động vật hay lui tói Các quan sát vậy^3 không cung cấp thông tin số lượng loài mà số thông tin sơ kích thước quần thể chúng Các quan sát nên tập trung vào khu vực hấp dẫn đặc biệt Sự hấp dẫn thường thay đổi theo năm, mùa chí hàng ngày Đa số trường hợp sử dụng số liệu để tính mật độ quần thể chí xu quần thể • Các số (hay xu thế) quần thể Chì số quần thể số thể tính phong phú tương đối loài vùng thờiđiểm đính (số lượng vật đếm được) Các số quần thể thu thập qua nhiều thời kỳ liên tiếp khác phương pháp tốt cho thấy xu phát triển suy giảm quần thể Có thể xác đính số quần thể ba cách đơn giản sau: + Quan sát tai điểm Quan sát tai vũng nước, điểm muối khu vực hấp dẫn thú lớn Hoat động quan sát điểm phải theo quy trình thống nhất: quan sát liên tục giờ/ngày phải lặp lai - lần tính mùa đính Các quan sát giúp ta thấy thay đổi theo ngày, theo mùa, việc sử dụng vũng nước điểm muối loài khác Để có kết tốt cần phải bố trí khoa học nhân lực, thời gian, ví trí quan sát ghi chép cẩn thận thông tin loài có mặt, thời gian, số lượng cá thể, giới tính tuổi ước tính + Điều tra theo đường Có thể dùng đèn pin quan sát ban đêm tính số lượng thú dọc theo đường Phương pháp cho ta số thông tin loài có mặt khu bảo tổn Nếu thực theo thời gian biểu nghiêm ngặt số liệu cho thấy số xu quần thể theo thời gian dùng số lượng động vật đếm để tính mật độ quần thể Điều tra theo đường phương pháp dễ làm, rẻ tiền yêu cầu nhân lực Đổng thời kết hợp với lích tuần tra thường xuyên kiểm lâm viên khu bảo tổn Tuy nhiên, khả nhìn thấy vật phụ thuộc vào nhiều yếu tố việc nhận biết loài phụ thuộc vào kinh nghiệm điều tra viên 16 Mẫu biểu ghi số liệu điều tra ven đường • Kiểm tra lưói mờ Lưói cần kiểm tra thường xuyên Nơi có bóng râm, cần kiểm tra lưói 1,5 - lần, nơi có mặttrời chiếu trực tiếp sau 0,5 - giờ/lần Trời mưa nhỏ kiểm tra 0,5 - lần, trời mưa to khôngnên giăng lưói Ánh sáng mờ làm cho lưói khó phát hiện, đầu cùa bình minh trướchoàng hỏn thòi gian bảy chim tốt Chúng ta tính giờ/bẫy từ thời điểm giăng bẫy thứ vào buổi sáng thời điểm thu bẫy thứ Vào cuối ngày bẫy ta cuộn để lưói treo vào buổi hôm sau ta mói mở lưói lại Cũng đối vói đặt bẫy thú, phải có số giờ/bẫy giống sinh cảnh nghiên cứu Nếu đặt lưói sinh cảnh lưói giăng giờ, ta có 25 giờ/lưói làm ngày ta khảo sát điểm nghiên cứu 100 giờ/lưói • Xử lý chim bắt được: + Gỡ chim khỏi lưói nhẹ nhàng, không gây thương tích không làm rách lưói + Xác định loài giói tính chim + Kiểm tra chim trưởng thành hay non Chim non thường có lông khác vói chim trưởng thành + Kiểm tra tình trạng sinh sản; Chim bị lông vùng ngực ấp trứng (thường có ấp trứng) Chim trống tích tinh dịch quanh khu hậu môn vào mùa sinh sản Chúng có vùng quanh hậu môn sưng lên, dấu hiệu sinh sản rõ ràng + Kiểm tra thay lông: Trong thời gian thay lông, lông cánh lông đuôi không dài + Đánh dấu chim: Nếu có vòng số đo đeo vào chân chim, cần có loại vòng có kích thưóc khác để chọn loại thích hợp cho loài bắt Nếu vòng cắt lông đuôi để đánh dấu chim bị bắt + Thả lại chim nơi mà bị bắt + Tránh cố bẫy bắt chim: - Chim bị chết lưói: thường xảy trường hợp nóng đặt lưói dưói ánh mặt trời bị ưót trời mưa to Trong trường hợp này, cần rút ngắn thời gian lần thăm lưói Nguyên tắc chung tỷ lệ chết phải nhỏ 5% Nếu tỷ lệ chim chết lón 5%, cần thiết phải xem xét lại phương pháp quy trình bẫy bắt - Lưói không bắt chim: số đợt đặt bẫy có số lưói bắt chim Trong trường hợp này, nên xem xét số 17 nguyên nhân như: chất lượng lưói, vị trí đặt bẫy, ánh sáng nơi đặt bẫy, thời gian mở lưói thời gian đặt lưói kéo dài (chim biết nơi đặt bẫy) • Phân tích kết bẫy bắt lưói mờ Bưóc trình phân tích số liệu lập bảng số liệu (như biểu dưói đây) Đối vói mùa năm bẫy bắt ta cần lập bảng Số liệu bẫy bắt mùa đầu năm đầu chưa cho ta khái niệm mùa năm sau cho thấy biến đổi thành phần loài, số lượng loài, phản ánh tình hình tài nguyên khu bảo tổn tăng hay giảm hiệu công tác quản lý .Phân loại thú lấy mẫu Để định loại đc mẫu vật cần phân tích đặc điểm hình thái mẫu đc só sánh với mô tả loài theo tài liệu công bố Một số tài liệu công bố Những loài gặm nhấm việt nam Cao Văn Sung, Đặng Huy Quỳnh, Bùi Kính 1980 Danh mục loài thú Việt nam Đặng Huy Huỳnh, Đào Văn Tiến, Cao Văn Sung, Phạm Trọng Ánh, Đặng Minh Khiêm, 2000 Khảo sát thú miền bắt việt nam, Đào Văn Tiến, 1985 CHỦ ĐỀ NHÓM ĐỘNG VẬT NỔI I Kỹ thuật điều tra đa dạng sinh học động vật Địa điểm thu mẫu Tại vùng nước điều tra ĐDSH thủy sinh vật nói chung, động vật nói riêng, cần tiến hành thiết kế điểm/mặt cắt phù hợp với điều kiện tự nhiên kiểu thủy vực đối tượng điều tra, thu mẫu - Các điểm/mặt cắt điều tra động vật phải đủ để bao quát toàn nơi cư trú quan trọng thủy vực, thí dụ HST sông, suối, hồ nước nội địa, lưu ý vùng nước ven bờ, xa bờ, sinh cảnh có bụi thủy sinh, rong,… - Thiết kế điểm/mặt cắt điều tra: Tại thủy vực điều tra, tùy thuộc vào kiểu HST, nơi cư trú đặc trưng riêng nhóm đối tượng điều tra, có thiết kế riêng điểm/mặt cắt điều tra, thí dụ sau: + Đối kiểu HST sông nhánh, lạch triều, lựa chọn điểm điều tra dọc sông + Với hệ sinh thái sông, suối, thiết kế số mặt cắt lòng sông rộng) với điểm thu mẫu bờ trái, bờ phải dòng Với lòng sông hẹp xác định điểm điều tra, thu mẫu dọc sông + Với hệ sinh thái sông, thiết kế số mặt cắt theo hình rẻ quạt từ 18 cửa sông hướng biển hai bên cửa sông, xác định điểm điều tra thu mẫu Trong đó, đặt 01 điểm/trạm thu mẫu liên tục ngày đêm theo mức nước triều (lặp lại lần/ngày, đêm ) + Đối với kiểu HST thuỷ vực nước đứng chảy chậm hồ , hồ chứa nước theo chế độ triều đầm phá, vũng vịnh ven biển: thiết kế mặt cắt ngang, có điểm điều tra cho đủ để phản ảnh hết giá trị số liệu thuỷ vực Đặc biệt, cần lưu ý điểm quan trắc thể theo chiều không gian từ thượng lưu tới hạ lưu hồ hồ chứa) vùng tiếp giáp với sông lục địa tới vùng cửa đầm, phá thông với biển + Đối với vùng biển, xác định mặt cắt điều tra, thu mẫu theo chiều ngang từ bờ khơi xu hướng gần vuông góc với đường bờ , xác định điểm thu mẫu - Vị trí điểm/mặt cắt điều tra xác định chuẩn xác tọa độ máy GPS - Số lượng mặt cắt số điểm điều tra động vật kiểu HST thủy vực tùy thuộc vào kinh phí cho phép Kỹ thuật thu mẫu a Dụng cụ Lưới thu mẫu động vật : loại lưới chuyên dụng mắt lưới từ 50 60µm có từ 15 lỗ đến 38 lỗ mắt lưới/ cm dùng để thu loại động vật Cấu tạo lưới gồm phần : phần miệng lưới, thân lưới ống đáy: • Phần miệng lưới: Gồm vòng đai miệng, tiếp đến vải bao hình chóp cụt Vòng đai miệng nối với dây kéo lưới, phần vải hình chóp nối với thân lưới • Phần lọc nước: thường có chiều dài gấp 2-3 lần đường kính miệng (Karl tangen, 1978) , làm từ loại vải đặc biệt có mắt lưới cực nhỏ, chí đạt đến 5-10 mm, khả thoát nước phải cao Thân lưới đầu nối với miệng lưới vòng đai lưới nối với ống đáy qua manset vải • Ống đáy: thường loại ống kim loại có khoá điều chỉnh đóng mở để lấy mẫu ra, sau kéo xong lưới Đôi người ta dùng ống đáy có khung kim loại, xung quanh bao kín loại lưới sử dụng làm thân lưới - Các loại lưới mắc vào khung lưới ống đáy, phần vải lọc ống phải loại với vải may lưới Phần cuối khung nối với dọi có khối lượng từ 10 – 20 kg 19 - Ngoài loại lưới vớt động vật tầng nước kể trên, sử dụng bẫy lưới hình phễu để thu mẫu động vật mặt rạn san hô Dụng cụ chứa mẫu - Dùng lọ nhựa để chứa vật mẫu tốt với dung tích 100ml, 500ml Nhãn hiệu mẫu Nhãn hiệu mẫu Etiket phải loại giấy bóng mờ, không bị hỏng ngâm nước, cồn formol Trên nhẫn cần thể nội dung sau: - Điểm quan trắc - Số lần thu mẫu - Địa điểm thu mẫu - Đỉnh triều hay chân triều - Thời gian thu mẫu - Độ sâu - Kinh độ, vĩ độ - Thể tích nước qua lưới, patomet Buồng đếm động vật Thường sử dụng buồng đếm kiểu Bogorov dung tích 10 ml để đếm số lượng động vật Dụng cụ quang học - Một số dụng cụ quang học sử dụng nghiên cứu động vật bao gồm kính hiển vi kính giải phẫu hay gọi kính hiển vi soi - Mỗi phòng phân tích nên trang bị hai loại kính để phục vụ cho việc phân tích cá thể nhỏ có kích thước Micromet cá thể lớn tới Centimet - Tùy mục đích nghiên cứu, trang bị thêm thiết bị hỗ trợ hình, máy chụp ảnh, máy vi tính nối với kính hiển vi Các dụng cụ thiết bị khác phục vụ cho đ ều tra, thu mẫu động vật trường Ngoài phương tiện vận chuyển dụng cụ hoá chất trình bày trên, cần có loạt dụng cụ, thiết bị kèm theo để sử dụng cho1 chuyến điều tra động vật thực địa, đặcc biệt điều tra biển - Máy bơm nước ống dẫn nước dài tới 30 m - Tời cáp kéo gắn lên tàu, thuyền: dùng tời có tốc độ 0,3 -0,5 1m/s Dây cáp có đường kính mm - Lưu tốc kế gắn với lưới định lượng - Các nặng để gắn với lưới, búa để ng lưới phân tầng - Các thước đo góc lệch thước đo độ dài dây cáp: để đo góc lệch dây cáp biết độ dài dây cáp cần thả kéo lưới ĐVN thẳng 20 đứng - Xô nhựa, gáo múc nước, ống nhựa hút mẫu thể tích 10 ml, ống hút hóa chất thể tích ml b Các hương pháp thu mẫu Phương pháp thu mẫu động vật - Tại điểm điều tra, quan trắc động vật xác định sẵn, thực thao tác thu mẫu động vật lưới: - Vớt nằm ngang (sử dụng để phân tích định tính): Quăng lưới xa kéo vào cho mặt lưới vuông góc với mặt nước cách mặt nước khoảng 20 cm kéo lưới với tốc độ ổn định Đối với lưới cỡ lớn tốc độ kéo lưới từ 0,5 đến 1m/s lưới cỡ vừa 0,5 m/s, lưới cỡ nhỏ từ 0,3 đến 0,5 m/s Khi kéo lưới tuyệt đối không dừng lại Có thể lặp lại vài lần kéo lưới Vớt thẳng đứng (sử dụng để phân tích định lượng): Nếu độ sâu nhỏ 30 m vớt thẳng đứng từ đáy tới mặt nước Tốc độ thả lưới gần 0,5 m/s Phải kéo lưới với tốc độ ổn định; với lưới cỡ lớn, tốc độ kéo lưới từ 0,5 đến1m/s; với lưới cỡ vừa 0,5m/s, lưới cỡ nhỏ từ 0,3 đến 0,5 m/s Khi kéo lưới tuyệt đối không dừng lại - Nếu vớt mẫu phân tầng phải theo phân tầng phận thủy văn: đến 10m, 10 đến 20m, 20 đến 35m, 35 đến 50m, 50 đến 100m, 100 đến 200m, 200 đến 500m - Miệng lưới tới giới hạn tầng nước phải dừng lại nhanh chóng thả búa phân tầng để lưới gập lại o - Nếu góc lệch dây cáp lớn 30 không vớt mẫu phân tầng Kết thu mẫu phân tầng ghi biểu - Lưới sau kéo lên khỏi mặt nước dùng vòi phun nước phun phía cho sinh vật trôi hết xuống ống đáy cho vào lọ Tùy theo lượng nước mà cho formon vào lọ mẫu cho để có nồng độ 5% Chú ý: thủy vực có độ sâu nhỏ khoảng 1m, thí dụ hồ , ao nước vùng nước ven bờ, sử dụng lưới vớt động vật theo chiều nằm ngang để định lượng Khi , lưu ý ghi chiều dài miệng lưới cắt nước thu mẫu, tốc độ kéo lưới, diện tích miệng lưới để tính tổng lượng nước qua miệng lưới Phương pháp thu mẫu động vật thủy vực nước - Thu mẫu động vật loại lưới vớt sinh vật hình chóp nón kiểu Juday cỡ nhỏ, có đường kính miệng 25 - 30cm, chiều dài lưới 90cm; chiều dài lỗ lưới vớt động vật cỡ 50-60m - Thu mẫu định tính: lưới kéo ngang mặt nước thẳng đứng 21 theo cột nước cho lượng mẫu thu đủ lớn số lượng loài - Thu mẫu định lượng lưới: Thu mẫu định lượng thẳng đứng theo cột nước: thả lưới uống đáy theo chiều thẳng đứng, tính độ dài dây kéo lưới Thả lưới kéo lưới phân tầng theo mức - 5m, - 10m, 10 - 15m, 15 20m, - Thu mẫu định lượng thu bathomet: Tại tầng nước, máy lấy mẫu với thể tích 10 lít, kéo 10 lần toàn lượng nước lọc qua lưới vớt sinh vật nổi, giữ lại lượng nước không 200 ml c ng với mẫu bảo quản lọ nhựa Phương pháp thu mẫu động vật vùng nước xa bờ (độ sâu 30m) - Thu mẫu định tính: dùng loại lưới hình chóp cỡ lớn đường kính miệng 80 cm chiều dài lưới khoảng 2,5 m, kích thước mắt lưới 50-60µm kéo ngang mặt nước thẳng đứng theo cột nước cho lượng mẫu thu đủ lớn số lượng loài - Thu mẫu định lượng: có vài cách thu mẫu định lượng ĐVN tù y theo thống hệ thống thu mẫu chung Thu mẫu định lượng thẳng đứng theo cột nước: thả lưới uống đáy theo chiều thẳng đứng, tính độ dài dây kéo lưới Thả lưới kéo lưới phân tầng theo mức -10 m, 10 - 20 m, 20 - 35 m, 35 - 50 m, 50 - 100 m 100 -200 m - Lưu ý: Tốc độ thả lưới gần 0,5m/s có tính đến góc lệch dây cáp Nếu góc lệch lớn 45o mẫu vật thu có giá trị mặt định tính, giá trị định lượng Có thể gắn lưu tốc kế miệng lưới để xác định xác thể tích nước qua Phương pháp thu mẫu động vật vùng nước ven bờ (độ sâu 10-30 m) - Thu mẫu định tính cột nước (thẳng đứng): tuỳ theo dòng chảy thả lưới mạnh hay yếu, móc vào lưới chì Thả dây chì thước đo xác định độ sâu cột nước Thả lưới từ từ xuống đáy đến độ sâu cách đáy 1m dừng lại đợi dây căng theo phương thẳng thẳng đứng từ từ kéo lưới lên với tốc độ 0,5m/s - Thu mẫu định tính tầng mặt: Buộc phao miệng lưới kéo lưới cho tàu chạy với tốc độ chậm 0,5 m/s để thu mẫu định tính mặt rộng khoảng cách 100-150m - Thu mẫu định lượng cột nước: Thả lưới xuống đáy kéo lên tương tự thu mẫu định tính Tuy nhiên cần ghi lại chiều dài dây kéo lưới độ sâu cột nước kéo lưới 22 Lưu ý: Tốc độ thả lưới gần 0,5m/s có tính đến góc lệch dây cáp Nếu góc lệch lớn 45o mẫu vật thu có giá trị mặt định tính, giá trị định lượng Có thể gắn lưu tốc kế miệng lưới để xác định x ác thể tích nước qua - Thu mẫu định lượng tầng mặt lưới: Dùng lưới có gắn lưu tốc kế kéo tầng mặt theo thuyền với tốc độ chậm 0,5 m/s - Thu mẫu định lượng theo tầng nước: Để thu mẫu định lượng theo tầng nước dùng loại dụng cụ với cách thu khác Ở vùng biển ven bờ cửa sông dùng Batomet lấy nước thể tích 10 lít để lấy nước tầng nước Lọc 20 lít nước qua lưới có mắt lưới 200 µ lấy 100 ml mẫu Phương pháp thu mẫu động vật HST rạn san hô ven bờ Chọn mặt rạn san hô tương đối phẳng, yêu cầu thợ lặn đặt bẫy lưới hình phễu úp lên bề mặt rạn, đặt dây phao cố định lưới cho lưới di chuyển dòng chảy đáy Thường đặt lưới vào lúc 18h ngày hôm trước nhấc lưới thu mẫu vào sáng hôm sau Nếu cần thu thập mẫu để đánh giá biến động ĐVN theo thời gian ngày đặt lưới trở lại từ 06h sáng lại thu lại mẫu vào lúc 18h tối Thu mẫu ĐVN phân bố tầng nước mặt rạn nguời ta dùng loại lưới thông thường kéo thẳng đứng từ đáy lên mặt nhiều lần cho mẫu định tính định lượng tương tự phương pháp nêu Phương pháp thu mẫu động vật HST thảm cỏ biển ven bờ Thu mẫu định tính định lượng ĐVN tầng nước thảm cỏ, dùng lưới kéo có miệng nhỏ hình chữ nhật 20 25 cm với chiều dài lưới hình phễu dài 1m Chóp lưới gắn với ống đáy Buộc phao vào miệng lưới ống đáy cho lưới chìm cách mặt thảm cỏ 20cm Kéo lưới theo chiều nằm ngang, sát bãi cỏ theo độ dài định Ngoài tương tự RSH, số loài ĐVN ấu trùng loại động vật không xương sống khác thường khỏi thảm cỏ vào đêm để thu đầy đủ thành phần ĐVN thảm cỏ biển dùng bẫy lưới tương tự với RSH Phương pháp thu mẫu động vật HST rừng ngập mặn (RNM) cửa sông ven bờ Việc thu mẫu động vật RNM thực loại lưới nhỏ kéo thuyền nhỏ kênh dẫn nước rừng 23 ngập nước; đẩy sát mặt đáy phẳng RNM nước vừa ngập Thực chất loại lưới dùng để bắt cá bột RNM Thu mẫu cách dùng thuyền nhỏ kéo lưới dọc mương ngập nước RNM hoăc nước ngập ngang ngập mặn tính toán tốc độ kéo lưới, hay chiều dài kéo lưới để định lượng Cũng cố định lưới đoạn dây căng qua thân hai bên mương, nước lên ta kéo lưới móc vào dây kéo qua mương nước theo kiểu tời Xử lý bảo quản mẫu a Xử lý - Dùng ống hút đầu bịt vải lưới số 38 (38 mắt lưới/1cm) để hút bớt nước lọ mẫu, đổ mẫu vật vào lọ đựng mẫu có kích thước thích hợp tùy theo lượng mẫu vật Các lọ mẫu phải có nhãn hiệu bên bên trong, nhãn phải viết bút chì mực không nhòe giấy can Trên nhãn ghi ký hiệu vù ng nước điều tra, loại lưới, năm thu thập số thứ tự mẫu vật từ ng đợt điều tra b.Bảo quản mẫu vật - Mẫu vật ngâm giữ dung dịch formalin có nồng độ 5%, pha từ 95% nước nước biển điểm thu mẫu 5% formalin đặc Trong số trường hợp để tránh ăn mòn vỏ động vật cần phải kiềm hoá dung dịch formalin với sodium borat carborat sodium Na2CO3) - Để bảo quản mẫu ĐVN cho phân tích phân tử , gen DNA, phân đoạn mtDNA dùng cồ n Ethyl Alcohol loại dung dịch khác nguyên chất c Tất mẫu vật thu thập phải ghi vào sổ đăng ký mẫu vật biểu đăng ký vật mẫu động vật Khi ghi xong phải có người đối chiếu Phân tích mẫu phòng thí nghiệm a Phân tích định loại (mẫu định tính) - Xác định thành phần loài ĐVN sở hình thái thể đặc trưng phần phụ giải phẫu kính giải phẫu kính hiển vi soi với độ phóng đại 20-40 lần, kính hiển vi độ phóng đại: 100 - 1000 lần Đo đạc kích thước, vẽ minh hoạ loài kính hiển vi có ống vẽ với độ phóng đại 40-400 lần - Rút nước đến thể tích khoảng 100 -150 ml Đưa toàn mẫu lên đĩa đếm 10 - 15 đĩa , xác định đến nhóm kính giải phẫu Chọn cá thể 24 phát triển đầy đủ đại diện cho nhóm để giải phẫu xác định loài kính hiển vi - Loại bỏ cặn, rác bẩn trước đếm mẫu - Lắc mẫu thể tích nước định ( 100 - 150 - 200 - 250 ml) tùy theo độ phong phú mẫu - Hút ống hút - lần lần ml đưa vào buồng đếm, đếm loài đến lúc số lượng thay đổi không đáng kể Tùy theo đặc điểm phân loại loài mà thực công đoạn như: tẩy mẫu, phá vỡ, tách, để dễ quan sát Trong quan sát, có điều kiện tiến hành chụp ảnh hiển vi mẫu tiêu biểu cho loài a Phân tích định lượng Phương pháp đếm số lượng Nếu số lượng mẫu vật phải đếm toàn Nếu mẫu vật nhiều, đếm toàn loài có kích thước lớn Sau , lấy thể tích định để đếm loài lại Kết đếm ghi vào biểu đếm số động vật Tính mật độ động vật Để xác định mật độ nhóm động vật Copepoda, Rotifera, Cladocera, từ mẫu định lượng thu thập trường xử lý phòng thí nghiệm theo bước sau: Bước Gạn mẫu lưới có kích cỡ với lưới vớt mẫu trường, xả nước cho hết formon ngâm mẫu Công việc hạn chế mùi độc hại cho người phân tích mẫu thời gian dài Bước Cho toàn mẫu vật vào cốc đong có chia vạch dung tích 100 ml Pha lỏng nước đến thể tích V1 ml tuỳ thuộc vào số lượng cá thể mẫu nhiều hay để ta pha lỏng đến thể tích cho phù hợp Hút V2 ml nhỏ 10ml V1 ml thường V2/V1 1/1, 1/5, 1/10, 1/50, 1/100 tuỳ vào số lượng cá thể mẫu nhiều hay cho vào buồng đếm Bogorov Tiến hành đếm số cá thể nhó m, hay loài tuỳ theo mục đích nghiên cứu Bước Tính toán Thể tích cột nước mà lưới vớt mẫu kéo qua tính theo công thức sau: (m3 ) Mật độ t ng nh m hay t ng loài mẫu tính theo công thức 25 ( con/ m3 ) Trong : r: bán kính miệng lưới vớt mẫu đơn vị (m) h: chiều dài chiều cao cột nước mà lưới vớt kéo qua đơn vị( m ) M: mật độ nhóm loài hay loài khảo sát (con/m3) a: Số cá thể nhóm loài hay loài buồng đếm V2 (ml) V1: Thể tích pha loãng mẫu ml V2: Thể tích hút t V1 ml vào buồng đếm ml 1000: h số quy đổi m3 Phương pháp cân khối lượng Phải chọn riêng loài động vật thức ăn cho cá để cân trọng lượng ẩm Cân phải có độ nhạy 0,01 mg Loại bỏ cặn, rác bẩn trước cân mẫu cân điện với độ xác 0,0001g + Lọc mẫu qua lưới lọc mắt lưới 315m) + Thấm mẫu giấy lọc đến độ ẩm tự nhiên + Cân mẫu Tính sản lượng Tính sinh lượng theo công thức: Sinh lượng = B/SD (mg gr/m3) Trong : B sinh lượng toàn lưới S diện tích miệng lưới D chiều dài cột nước miệng lưới cắt qua - Tính số đa dạng Shannon Weiner ( H’) Margaleft (d) phần mềm PRIMER 26 ... tiết xấu ảnh hưởng đến kết điều tra đa dạng sinh học trường c.Lên danh sách nhân danh mục dụng cụ, thiết bị điều tra, thu mẫu Cần thiết kiểm tra, vệ sinh hiệu chuẩn thiết bị dụng cụ quan sát,... động vật khác sống sinh cảnh vói chúng bảo vệ Đôi khu bảo tổn xây dựng để bảo vệ loài thị loài thường có mặt sinh cảnh nguyên vẹn, nên bảo tổn chúng giúp bảo tổn sinh cảnh nguyên sinh Vì vậy, giám... chuẩn Đối với nhóm thực vật ngoại tầng ( nhóm thân leo, phụ sinh, bì sinh ): xác định kích thước số lượng ô tiêu chuẩn Trên thực tế, trình sinh trưởng phát triển phần lớn loài thực vật ngoại tầng