BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH PHÙNG CHẤT NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC VIÊN PHÓNG THÍCH KÉO DÀI CHỨA ACID VALPROIC VÀ NATRI VALPROAT LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – Năm 2017 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH PHÙNG CHẤT NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC VIÊN PHÓNG THÍCH KÉO DÀI CHỨA NATRI VALPROAT VÀ ACID VALPROIC Chuyên ngành: Công nghệ dược phẩm bào chế thuốc Mã số : 62720402 LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC Người hướng dẫn khoa học : PGS.TS LÊ HẬU Thành phố Hồ Chí Minh - 2017 ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết luận án trung thực chưa công bố công trình khác Phùng Chất iii MỤC LỤC Trang phụ bìa i Lời cam đoan ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt iv Danh mục bảng .v Danh mục hình sơ đồ .x Danh mục biểu đồ xi ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Hệ thống trị liệu phóng thích kéo dài đường uống 1.2 Thuốc phóng thích kéo dài dạng khung matrix 1.3 Acid valproic natri valproat 13 1.4 Đánh giá sinh khả dụng tương đương sinh học .24 CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị & đối tượng nghiên cứu .29 2.2 Phương pháp nghiên cứu 33 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 68 3.1 XÂY DỰNG CÔNG THỨC, QUY TRÌNH BÀO CHẾ VIÊN PTKD CHỨA AV VÀ NV Ở QUI MÔ PHÒNG THÍ NGHIỆM 68 3.2 Nghiên cứu nâng cấp cỡ lô, xây dựng tiêu chuẩn theo dõi độ ổn định 91 3.3 Nghiên cứu tương đương sinh học in vivo 118 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 133 4.1 Xây dựng tiêu chuẩn thẩm định 133 4.2 Kỹ thuật bào chế 135 4.3 Sinh khả dụng tương đương sinh học 141 4.4 Độ ổn định tuổi thọ 145 KẾT LUẬN………………………………………………………………………147 KIẾN NGHỊ………………………………………………………………… …149 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN CỦA TÁC GIẢ TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT TỪ VIẾT TẮT AUC TIẾNG ANH Area under the curve AV CV Coefficient of variation Hệ số phân tán Dược điển Việt Nam IV European Medicines Agency Cơ quan thuốc Châu Âu Giải phóng hoạt chất GPHC HPLC Diện tích đường cong Acid valproic DĐVN IV EMA NGHĨA TIẾNG VIỆT High-Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao Chromatography HPMC Hydroxypropyl methylcellulose IS Internal standard Nội chuẩn LLOQ Lower limit of quantification Giới hạn định lượng LOD Limit of detection Giới hạn phát LQC Low quantity concentration Mẫu nồng độ thấp Người tình nguyện NTN NV Natri valproat PDA Photodiode array Đầu dò dãy diod quang Phóng thích kéo dài PTKD PVP Polyvinyl pyrrolidone QC The quality control samples Mẫu kiểm tra RSD Reletive standrad deviation Sai số tương đối SD Standard deviation Độ lệch chuẩn tương đối TB Trung bình TN Thí nghiệm UHPLC-MS/MS Ultra high pressure liquid Sắc ký lỏng siêu hiệu - Chromatography - mass spectronometry /mass spectronometry khối phổ lần v ULOQ Upper Limit Giới hạn định lượng of Quantification FDA USP Food and Drug Cơ quan thực phẩm Administration dược phẩm Mỹ The United States Dược điển Mỹ Pharmacopoeia vi DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1 Độ nhớt dung dịch 2% (kl/kl) 20oC số HPMC 11 Bảng Các phương pháp LC-MS dùng định lượng AV dịch sinh học .21 Bảng Các phương pháp HPLC dùng định lượng AV dịch sinh học 22 Bảng Danh sách nguyên liệu dùng nghiên cứu bào chế 29 Bảng 2 Các chất chuẩn, hóa chất tinh khiết dùng kiểm nghiệm thành phẩm 30 Bảng Các mẫu huyết tương trắng dùng thẩm định phương pháp phân tích hoạt chất dịch sinh học………………………………………………………… 30 Bảng Các dung môi dùng thẩm định phương pháp phân tích hoạt chất chế phẩm 30 Bảng 2.5 Các chất chuẩn dùng thẩm định phương pháp phân tích hoạt chất huyết tương 30 Bảng Danh sách thiết bị dùng bào chế kiểm nghiệm 32 Bảng Các thiết bị sử dụng để đánh giá tương đương sinh học…………….…32 Bảng Mẫu thử nghiệm độ 36 Bảng Thành phần công thức 40 Bảng 10 Tiêu chuẩn đánh giá độ trơn chảy góc nghỉ 45 Bảng 12 Thành phần công thức dịch bao chống ẩm 50 Bảng 13 Các thông số bao phim theo polyme khác 51 Bảng 14 Chuẩn bị mẫu xác định giới hạn định lượng (LLOQ) 55 Bảng 15 Chuẩn bị mẫu kiểm tra huyết tương .56 Bảng 16 Điều kiện sắc ký khối phổ dùng định lượng mẫu huyết tương 57 Bảng 17 Phân tích phương sai đánh giá yếu tố ảnh hưởng đến Cmax & AUC Bảng Thông tin lô thuốc đối chiếu 69 Bảng Độ hòa tan viên đối chiếu Depakine Chrono 500 mg 69 Bảng 3 Các công thức viên nhân nghiên cứu sàng lọc…………… …….71 Bảng Các thông số kỹ thuật viên nhân chứa NV AV ………… ……71 Bảng Thành phần công thức nghiên cứu sử dụng polyme phối hợp… 73 vii Bảng Thành phần công thức sơ bộ………………………………………… 75 Bảng Các mức khảo sát biến độc lập (Xi) bố trí thực nghiệm… …75 Bảng Phân bố thực nghiệm theo biến số độc lập (Xi)……………………… 76 Bảng Độ hòa tan thời điểm thực nghiệm khảo sát ……… 76 Bảng 10 Công thức thực nghiệm kiểm chứng ý nghĩa hệ số bi .78 Bảng 11 Độ hòa tan thời điểm thực nghiệm kiểm chứng hệ số bi 78 Bảng 12 Kết tính toán giá trị thống kê theo trắc nghiệm t .78 Bảng 13 Bước nhảy tiến đến vùng tối ưu thực nghiệm …………… 79 Bảng 14 Công thức bào chế thực nghiệm tiến đến vùng tối ưu .80 Bảng 15 Bố trí thực nghiệm tiến đến vùng tối ưu theo Gradient 80 Bảng 16 Độ hòa tan tương ứng thực nghiệm tiến đến vùng tối ưu 81 Bảng 17 Công thức thực nghiệm kiểm chứng công thức tối ưu (TN 11) … 82 Bảng 18 Độ hòa tan thực nghiệm kiểm chứng công thức tối ưu 83 Bảng 19 Kết đo hàm ẩm cốm thời điểm khảo sát 86 Bảng 20 Độ phân tán hàm lượng bột nguyên liệu thời điểm khảo sát 87 Bảng 21 Độ phân tán hàm lượng bột kép thời điểm khảo sát 87 Bảng 22 Kết hàm ẩm cốm thời điểm khảo sát 88 Bảng 23 Kết độ phân tán hàm lượng cốm thời điểm khảo sát 88 Bảng 24 Độ trơn chảy cốm thời điểm khảo sát 89 Bảng 25 Tỷ trọng biểu kiến hạt trước sau gõ 89 Bảng 26 Kết độ hòa tan viên nhân qui mô PTN so viên đối chiếu 90 Bảng 27 Độ cứng viên nhân khảo sát ảnh hưởng lên độ GPHC 92 Bảng 28 Kết độ hòa tan viên nhân có độ cứng khác 92 Bảng 29 Công thức bào chế viên nhân qui mô nâng cấp 92 Bảng 30 Kết đo độ ẩm hỗn hợp bột nguyên liệu thời điểm khảo sát .93 Bảng 31 Độ phân tán hàm lượng bột nguyên liệu theo thời gian trộn 94 Bảng 32 Độ phân tán hàm lượng hỗn hợp bột kép theo thời gian trộn 94 Bảng 33 Kết đo hàm ẩm (%) cốm theo thời gian sấy 95 Bảng 34 Hàm lượng % (theo natri valproat) cốm theo thời gian trộn 96 Bảng 35 Độ đồng trơn chảy cốm thời điểm khảo sát 96 viii Bảng 36 Các giới hạn biểu đồ R X ước tính từ lô thăm dò 97 Bảng 37 Kết hàm ẩm (%) bột nguyên liệu sau sấy 98 Bảng 38 Kết độ phân tán hàm lượng mẫu bột nguyên liệu 98 Bảng 39 Độ phân tán hàm lượng lô nâng cấp theo thời gian trộn 99 Bảng 40 Kết hàm ẩm (%) cốm sau sấy 100 Bảng 41 Kết hàm lượng hoạt chất lô nâng cấp sau thời gian trộn 100 Bảng 42 Tỷ trọng biểu kiến trung bình hạt trước sau gõ (n=3) 101 Bảng 43 Độ trơn chảy trung bình cốm trộn hoàn tất (n=3) 101 Bảng 44 Phân bố kích thước hạt lô nâng cấp 101 Bảng 45 Kết kiểm tra độ mài mòn viên nhân lô nâng cấp 106 Bảng 46 Kết kiểm tra độ cứng viên nhân lô nâng cấp 106 Bảng 47 Kế t quả định lượng viên nhân lô P010214, P020214 P030614 106 Bảng 48 Kế t quả thử độ hòa tan viên nhân lô nâng cấp 107 Bảng 49 Kế t quả so sánh độ hòa tan viên nhân của lô nâng cấp 107 Bảng 50 Các thông số qui trình bao phim qui mô 14 kg 108 Bảng 51 Tỉ lệ (%) trung bình dược chất hòa tan theo thời gian 110 Bảng 52 Kết so sánh độ hòa tan mẫu viên bao phim lô nâng cấp 110 Bảng 53 So sánh độ hòa tan viên bao phim với viên nhân lô nâng cấp 111 Bảng 54 Thông tin lô sản phẩm đưa vào theo dõi độ ổn định 112 Bảng 55 Sự thay đổi hình thức cảm quan hàm lượng hoạt chất điều kiện bảo quản lão hóa cấp tốc 113 Bảng 56 Sự thay đổi độ hòa tan điều kiện bảo quản lão hóa cấp tốc 115 Bảng 57 Kết theo dõi điều kiện thực lô 18 tháng 116 Bảng 58 Độ hòa tan sau 18 tháng theo dõi điều kiện thực lô 117 Bảng 59 Kết đánh giá phù hợp hệ thống 118 Bảng 60 Kết đánh giá độ nhiễm chéo 119 Bảng 61 Kết đánh giá ảnh hưởng mẫu 119 Bảng 62 Kết khảo sát đường chuẩn với hệ số weighting 1/x2 120 ix Bảng 63 Kết khảo sát độ đúng, độ lặp lại, thực ngày khác 121 Bảng 64 Kết khảo sát độ đúng, độ lặp lại ngày 121 Bảng 65 Các thông số dược động học trung bình 12 NTN dùng thuốc thử thuốc đối chiếu tình trạng đói 126 Bảng 3.66 Phân tích phương sai giá trị Cmax tình trạng đói 126 Bảng 67 Phân tích phương sai giá trị AUC0-72 tình trạng đói 127 Bảng 68 Phân tích phương sai giá trị AUC0-∞ tình trạng đói 127 Bảng 3.69 Tóm tắt Cmax, AUC thuốc thử thuốc đối chiếu tình trạng đói 128 Bảng 70 Các thông số Dược động học trung bình 12 NTN dùng thuốc thử thuốc đối chiếu tình trạng no 130 Bảng 71 Phân tích phương sai giá trị Cmax tình trạng no 130 Bảng 72 Phân tích phương sai giá trị AUC0-72 tình trạng no 131 Bảng 73 Phân tích phương sai giá trị AUC0-∞ tình trạng no 131 Bảng 3.74 Số liệu so sánh Cmax, AUC thuốc thử thuốc đối chiếu tình trạng no 132