BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI  PHẠ TH NGỌC AI ĐỀ TÀI: NGHI N C U THÀNH PH N HOÁ HỌC VÀ HOẠT T NH CH NG O HOÁ C A CÁC A IT B O VÀ D N U T TOCOPHERO C A ỘT S THUỘC CHI CITRUS UẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC CHU N NGÀNH CÔNG NGHỆ THỰC PHẨ NGƯỜI HƯỚNG D N KHOA HỌC TS ĐOÀN AN PHƯ NG PGS TS NGU Hà Nội, năm 2012 N TH INH T OÀI Ph m Th Ng M i Luận văn th ỜI CA Tôi xin n oxy o m đo n đề tài “N xit ĐOAN i n o sĩ kho h u t àn p n xu t to op n o rol o t t n s loài t uộc chi Citrus” ông trình thự Tất ả số liệu, kết luận văn trung thự M i giúp đỡ ủ á nhân tập thể đượ ghi nhận lời ám ơn Tôi xin h u hoàn toàn trá h nhiệm m đo n Hà Nội, ngày 30 tháng năm 2012 Tá giả Ph m Th Ng Trường Đ i h M i Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h Lời ảm ơn - Trong thời gi n thự luận văn tốt nghiệp, em nhận đượ nhiều giúp đỡ từ thầy ô giáo, gi đình b n bè Đầu tiên, em xin bày tỏ lòng kính tr ng biết ơn sâu sắ tới TS Đoàn L n Phương PGS.TS Nguy n Th Minh Tú tận tình trự tiếp hướng dẫn giúp đỡ em hoàn thành luận văn Em xin chân tr ng ảm ơn PGS.TS Ph m Quố Long – Viện trưởng Viện Hó h Hợp hất thiên nhiên t o điều kiện, giúp đỡ em Trong trình thự luận văn th phòng Hoá sinh hữu ơ- Viện Hoá h sĩ, em thự tập làm việ t i Hợp hất thiên nhiên- Viện Kho h ông nghệ Việt N m phòng Thí nghiệm Phân tí h kiểm tr thự phẩm – Viện ông nghệ sinh h ông nghệ thự phẩm, Đ i h kho Hà Nội Em xin bày tỏ lòng ảm ơn sâu sắ tới Viện Hoá h hất lượng Bá h án đ ng nghiệp t i Hợp hất thiên nhiên thầy ô môn, án phòng thí nghiệm thường xuyên giúp đỡ, hướng dẫn, t o điều kiện thuận lợi động viên em thời gi n thự luận văn th sĩ uối ùng, em xin hân thành ảm ơn gi đình b n bè thường xuyên động viên, giúp đỡ hỗ dự vững hắ ho em suốt trình h tập nghiên ứu vừ qu Một lần nữ em xin hân thành ảm ơn! Trân tr ng H viên Ph m Th Ng Trường Đ i h M i Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h ỤC ỤC LỜI CAM ĐOAN DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH LỜI MỞ ĐẦU 10 CHƢƠNG 1-TỔNG QUAN 12 S Ư C V CHI CITRUS 12 1.1.1 Giới thiệu vài n t đ điểm thự vật h Rutaceae 12 1.1.2 Giới thiệu vài n t đ điểm thự vật thành phần hoá h số loài thuộ ủ hi Citrus 13 CÁC A IT B O VÀ D N U T TOCOPHERO 19 1.2.1 xit b o: Khái niệm phân lo i 20 1.2.2 Các tocopherol to otrienol: Khái niệm phân lo i 28 HOẠT T NH CH NG O HOÁ C A CÁC A IT B O VÀ D N U T TOCOPHERO 32 NG DỤNG C A D U HẠT CITRUS TRONG NGHIỆP THỰC PHẨ VÀ PHẨ HỌC CÔNG 36 CHƢƠNG 2-ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 39 Đ I TƯ NG NGHI N C U 39 2.1.1 Mẫu thự vật 39 2.1.2 Đ điểm thự vật h 39 PHƯ NG PHÁP NGHI N C U 40 2.2.1 Phương pháp hiết xuất- phân tích lipid, tocopherol axit béo 40 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th 2.2.2 Phương pháp nghiên ứu ho t tính sinh h 2.2.3 Phương pháp phân lập, nhận d ng 2.2.4 Phương pháp làm giàu sĩ kho h 41 xit b o ó ho t tính sinh h 43 xit b o không no từ dầu h t quất Citrus japonica Thunb 43 2.2.5 Nghiên ứu độ tính ấp ủ hế phẩm 44 CHƢƠNG 3-TH C NGHI M 45 KH O SÁT HÀ Ư NG THÀNH PH N IPIT A IT B O VÀ D N U T TOCOPHERO 45 3.1.1 Khảo sát hàm lượng lipit 45 3.1.2 Khảo sát thành phần hàm lượng to opherol 45 3.1.3 Khảo sát thành phần hàm lượng KH O SÁT HOẠT T NH CH NG O xit b o 45 HOÁ IN VITRO C A CÁC D U HẠT THỰC VẬT THUỘC CHI CITRUS 46 3.2.1 Đánh giá ho t tính hống oxy hó in vitro hệ PPH 2,2-diphenyl1-picryldydrazyl) 46 3.2.2 Đánh giá ho t tính hống oxi hó in vitro thử nghiệm tế bào g n phân lập 48 3.2.3 Đánh giá ho t tính hống oxy hoá thông qu khả thu gom gố tự phương pháp TOS – Total Oxyradical Scavenging Capacity Assay) 49 PH N ẬP VÀ NHẬN DẠNG D U HẠT QU T C ỘT S T A IT B O KHÔNG NO T 51 3.3.1 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất trình thủy phân dầu h t quất 51 3.3.2 Phân lập xit b o không no từ dầu h t quất itrus j poni Thunb 52 NGHI N C U NG DỤNG CH PHẨ T PUFA 54 3.4.1 Nghiên ứu t o hế phẩm OF27 54 3.4.2 Nghiên ứu độ tính ấp ủ hế phẩm OF27 56 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h CHƢƠNG 4-KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 57 K T QU KH O SÁT HÀ Ư NG THÀNH PH N IPIT A IT B O VÀ D N U T TOCOPHERO 57 K T QU KH O SÁT HOẠT T NH CH NG O TRONG D CH CHI T HOÁ IN VITRO ETANO T NG C A CÁC HẠT THUỘC CHI CITRUS 60 4.2.1 Kết khảo sát ho t tính hống oxy hoá in vitro hệ PPH 60 4.2.2 Kết khảo sát ho t tính hống oxi hó in vitro thử nghiệm tế bào g n phân lập 62 K T QU PH N ẬP VÀ À T GIÀU CÁC A IT B O KHÔNG NO U HẠT QU T C T 65 4.3.1 Kết khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất trình thủy phân dầu quất 65 4.3.2 Kết tối ưu hó trình làm giàu xit olei linolei phương pháp qui ho h thự nghiệm 69 4.3.3 Kết phân lập làm giàu xit linolei olei mẫu h t quất76 4.4 K T QU NGHI N C U NG DỤNG CH PHẨ T PUFA 80 4.4.1 Kết nghiên ứu t o hế phẩm OF27 80 4.4.2 Kết nghiên ứu độ tính ấp ủ hế phẩm OF27 80 KẾT LUẬN 81 TÀI LI U THAM KHẢO 83 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th DANH ỤC CÁC T sĩ kho h VI T TẮT PUFA Polyunsaturated fatty acids POL Peroxy hóa lipid AND Acid Deoxyribo Nucleic HPLC High-performance liquid chromatography GC Gas chromatography ELC Equivalent Chain- lengths DPPH 2,2-diphenyl-1-picryldydrazyl ABAP 2,2’-Azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride KMBA α-Keto-γ-(methylthio)butyric acid TLC Thin layer chromatography TOSCA Total Oxyradical Scavenging Capacity Assay DMSO Dimethyl sulfoxide SC50 Scavenging capacity – 50% LD50 Lethal dose – 50% ED50 Effective dose – 50% eTOSC Experimental TOSC sTOSC Specific TOSC Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th DANH sĩ kho h ỤC B NG Bảng 1.1 - Các axit béo no 21 Bảng 1.2 - Một số xit b o nối đôi qu n tr ng 23 Bảng 1.3 - xit 18:3 18:4 tự nhiên 25 Bảng1.4 - Một số xit b o đ nối đôi phân h nhóm metylen xếp theo h 26 Bảng 1.5 - Các axit acetylenic 27 Bảng 2.1 - Danh sá h 10 mẫu h t thự vật nghiên ứu 39 Bảng 3.1 - Hàm lượng xit omeg omeg hế phẩm .55 Bảng 4.1 - Hàm lượng dầu b o tocopherol 58 10 mẫu dầu h t nghiên ứu 58 Bảng 4.2 - Hàm lượng thành phần xit b o 10 mẫu dầu h t 59 nghiên ứu 59 Bảng 4.3 - nh sá h 10 mẫu h t nghiên ứu thuộ hi itrus .60 Bảng 4.4 - Kết thử ho t tính hống oxy hoá ủ 10 mẫu hi itrus 61 hệ PPH 61 Bảng 4.5 - Kết thử nghiệm tế bào g n phân lập 62 Bảng 4.6 - Giá tr TOS ủ mẫu thí nghiệm so với mẫu Trolox 64 n ng độ nghiên ứu 64 Bảng 4.7 - Ảnh hưởng ủ n ng độ n đến hỉ số xit hiệu suất thủy phân 65 Bảng 4.8 - Ảnh hưởng ủ thời gi n đến hiệu suất thủy phân dầu 66 Bảng 4.9 - Ảnh hưởng ủ nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân dầu 66 Bảng 4.10 - Khoảng biến đổi ủ yếu tố ảnh hưởng 69 Bảng 4.11 - M trận thự nghiệm 70 Bảng 4.12 - Phân tí h phương s i 73 Bảng 4.13 - Xá đ nh giá tr h i qui 73 Bảng 4.14 - Hàm lượng thành phần xit b o dầu h t quất Fotunell j poni (Thunb.) Swingle trướ s u làm giàu xit không no 79 Bảng 4.15 - Kết nghiên ứu độ tính ấp ủ OF27 theo đường uống 80 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th DANH sĩ kho h ỤC HÌNH Hình 1.1 - H Rut e e 12 Hình 1.2 - ây quất hi itrus 13 Hình 1.3 - ấu trú ủ Flavonoit 18 Hình 1.4 - Quá trình huyển hoá ủ -tocopherol 31 Hình 3.1 - Đ th biểu di n ho t tính hống oxy hoá d h hiết meth nol ủ mẫu dầu quất n ng độ nh u 47 Hình 4.1 - Đ th biểu di n th y đổi hiều o pe k ủ khí ethylen 63 theo thời gi n phản ứng mẫu Quất Hưng Yên 63 Hình 4.2 - Đ th biểu di n th y đổi hiều o pe k ủ khí ethylen 63 theo thời gi n phản ứng mẫu Trolox 63 Hình 4.3 - Ảnh hưởng ủ n ng độ n đến hiệu suất phản ứng 65 Hình 4.4 – Ảnh hưởng ủ thời gi n đến hiệu suất phản ứng 66 Hình 4.5 – Ảnh hưởng ủ nhiệt độ đến hiệu suất phản ứng 67 Hình 4.6 - Phổ G ủ xit b o tổng dầu quất 68 Hình 4.7 - Ảnh hưởng ủ tỉ lệ n/ xit b o tổng đến hiệu suất phản ứng 71 Hình 4.8 - Ảnh hưởng ủ tỉ lệ urê/ xit b o tổng đến hiệu suất phản ứng 72 Hình 4.9 - Ảnh hưởng ủ nhiệt độ đến hiệu suất phản ứng 72 Hình 4.10 - Biểu đ m t đáp ứng giữ hiệu suất t o phứ với 75 Hình 4.11 - Phổ G ủ xit b o dầu quất s u làm giàu 76 Hình 4.12 - Sơ đ trình làm giàu xit b o 77 Hình 4.13 - Phổ G ủ tổng xit b o dầu quất s u làm giàu 78 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th ỜI sĩ kho h ỞĐ U  -Vào đầu năm 1950, lĩnh vự Hoá h giới xuất ngành nghiên ứu hoá h á Hợp hất thiên nhiên hất b o lipit Từ đến n y, nghiên ứu liên qu n đến hất b o ngày phát triển tăng nh nh không hỉ số lượng ông trình nghiên ứu kho h mà òn l n rộng ả đối tượng lĩnh vự nghiên ứu liên qu n Hiện n y, hàng năm giới xuất nhiều ông trình nghiên ứu kho h lo t t p hí kho h ó uy tín hàng đầu lĩnh vự như: Journal of Russian Academy for Sciencs, Lipids, Biochemica et Biophysia Acta, Journal of Lipid Research, Advances in Lipids research, Progress in the chemistry of Fats and other lipids, Journal of the Americal Oil Chemists Society - JAOCS, Prostaglandin Riêng lĩnh vự nghiên ứu thành phần dầu h t thự vật, từ năm 1975 t i Mỹ, Trung tâm Quố gi nghiên ứu ứng dụng nông nghiệp tiến hành xây dựng sở liệu m ng ho thành phần dầu h t ủ 225 h thự vật tr ng đượ Database for New Crop Seeds) T i HLB Đứ , từ 1996 Viện Hó -Lí hất b o ũng xây dựng đư lên m ng số liệu thành phần dầu b o 500 d ng xit b o ủ 7000 loài h t thự vật nh u Database for Seed Oil of Fatty Acid / SOFA số liệu liên tụ đượ ập nhật hàng năm Tuy nhiên, ho đến có số liệu thành phần dầu h t thự vật Việt N m [59] Nằm khu vự nhiệt đới gió mù , Việt N m ó thảm thự vật đ d ng phong phú ả số lượng ũng hất lượng Trong số 10400 loài thự vật bậ đượ phát ó khoảng 564 loài o ây ó dầu [72], [60] húng ó v i trò qu n tr ng toàn ảnh bứ tr nh tài nguyên thự vật nướ t uộ sống ộng đ ng, không hỉ nguyên liệu thiết yếu ho ông nghiệp hế biến sơn, xà 10 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th Hình 4.11 - P ổ GC xit o tron sĩ kho h u qu t s u k i làm iàu Trên sở số liệu khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trình làm giàu xit b o, ó thể xá đ nh mứ dưới, mứ giữ mứ ủ yếu tố ho việ tiến hành qui ho h hó thự nghiệm, tìm điều kiện tối ưu cho trình làm giàu Thông qu tính toán từ mô hình phương trình h i quy, xá đ nh điều kiện ho trình làm giàu xit olei linolei s u: tỉ lệ eth nol/tổng 4.3.3 Kế q ả xit b o: 1/15; tỉ lệ urê/tổng ậ g xit b o: 3/1; nhiệt độ 50oC axit linoleic oleic g ẫ q Làm giàu phân lập axit linoleic oleic từ 4,78 kg axit béo tổng thu sau trình thủy phân dầu quất vào hỗn hợp urê c n theo tỉ lệ tối ưu Sơ đ hình 4.12) 76 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th Hình 4.12 - Sơ qu tr n làm iàu xit Khuấy gia nhiệt 500 sĩ kho h o ho đến hỗn hợp t n hoàn toàn, s u làm l nh sâu 12 L c bỏ phần kết tủa, phần dung d h thu đượ đem ất lo i dung môi đến thể tích l i 1/3 thể tí h b n đầu Trung hoà axit H2SO4 10 pH=4 , s u hiết n-hexan Cuối làm khan Na2SO4, thu hỗn hợp xit không no, đem phân tí h G , kết phân tí h trình bày bảng 4.14, hình 4.13 Hiệu suất trình làm giàu xit b o tính theo công thức: Trong đó: m: Khối lượng tổng xit b o g ; m1: Khối lượng xit b o thu đượ s u làm giàu g 77 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Hình 4.13 - P ổ GC Luận văn th tổn xit o tron axit o không no sĩ kho h u qu t s u k i làm iàu Kết phân tí h hàm lượng xit b o dầu quất trướ s u làm giàu xit không no đượ thể bảng giàu, h i xit olei xit linolei ó thể thấy s u trình làm hàm lượng lớn với tỉ lệ 40,62% 48,29% mẫu dầu 78 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th Bản 4.14 - Hàm lƣợn t àn p otun ll j poni T T un ) Swin l trƣ Tê ườ g axit béo H n xit o tron u sĩ kho h t qu t s u k i làm iàu xit k ôn no g % giàu axit không no H g (%) sau làm giàu axit không no C14:0 Axit myristic 0.04 C15:0 - 0.02 C16:0 Axit Palmitic 20.07 0,89 Axit Palmitoleic 3.25 0,24 Axit margnic 0.09 - 0.05 C18:0 Axit stearic 4.46 C18:1n-9 Axit Oleic 18.90 40,62 C18:1n-7 - 9.34 9,10-cpe-19:1 - 0.05 Axit Linoleic 33.9 48,29 C20:0 - 0.5 C20:1n-9 - 0.03 C18:3n-3 - 8.60 9.96 C22:0 - 0.15 C24:0 - 0.2 74.07 99.11 C16:1n-7 C17:0 7,8-cpa-17:0 C18:2n-6 ΣA không no 79 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th 4.4 K T QU NGHI N C U 4.4.1 Kế q ả g ê NG DỤNG CH PHẨ ứ ế PUFA OF Liệu ó thể t o hế phẩm từ PUF để điều tiết dinh dưỡng? Từ T sĩ kho h sử dụng thự phẩm tưởng húng tiến hành khảo sát ho t tính sơ ủ tất ả mẫu dầu d ng nguyên hất số d ng ông thứ phối hỗn hợp giữ lo i dầu nh u, nhằm tìm r d ng hế phẩm tối ưu ó ho t tính khả qu n là: dầu 3 từ mỡ biển + dầu 6 từ dầu h t thự vật với tỉ lệ thí h hợp 6/3= 10/1 đ t tên hế phẩm nghiên ứu OF27 trình bầy phần 3.4.1) S u nghiên ứu toàn diện độ tính ấp ủ thí nghiệm đượ tiến hành kho 4.4.2 Kế q ả g ê ứ ượ , h hế phẩm OF27, viện quân Y í ế OF Kết áp dụng phương pháp xử l số liệu nêu mụ 3.4.2 ho thấy giá tr LD50 = 19,00  2,01 g/kg thể tr ng ủ huột nhắt trắng theo đường uống bảng 4.15) Từ kết húng ó thể kết luận hế phẩm OF27 không gây độ tính ấp ngưỡng 2g/kg thể tr ng theo tiêu huẩn quố tế Bản 15 - Kết n K =6 xi ( g/kg ) 2,40 4,80 9,60 14,40 19,20 24,00 i n u ộ tn mi n - mi  = 19 11 mi n - mi 0/12 11/11 4/8 6/6 8/4 - 80 p O 27 t o ƣờn u n mi ( n-mi ) zi mi - zi 11 32 36 32  = 111 - 20 18  = 53 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h K T UẬN Mười loài ây Việt N m thuộ hi Citrus h thự vật Rutaceae (cam) đượ nghiên ứu hệ thống hàm lượng lipit, thành phần to opherol xit b o h t húng ó hàm lượng dầu o 35 hàm lượng to ols tổng d o động khoảng từ 14,79mg/100g đến 34,70mg/100g hủ yếu h i d ng α-tocopherol, γ-tocopherol) Nhìn chung 10 mẫu dầu h t thự vật nghiên ứu ó xit b o phổ biến thường g p: xit b o no xit palmitic C16:0, axit stearic C18:0), axit béo không no (axit oleic C18:1, axit linoneic C18:2) Tuy nhiên 10 mẫu dầu h t hi Citrus ó hàm lượng xit b o đ nối đôi polyenoic fatty acid xit b o không no với hàm lượng nhân lo i h t đ hính o tới 65 , việ óm t o nói lên giá tr ho t tính sinh h biệt y h , dượ h xit b o đ nối đôi ó ho t tính sinh h o ủ dầu ông nghiệp thự phẩm, giá tr đ dụng ủ dầu Kết khảo sát ho t tính hống oxy hó thuộ ủ dầu h t 10 loài thự vật hi Citrus ho thấy mẫu quất Hưng Yên (Citrus japonica Thunb.) có ho t tính hống oxy hoá tốt Thông qu thí nghiệm khảo sát trên, húng ó thể rút r điều kiện thí h hợp ho phản ứng thủy phân dầu h t quất nhằm thu đượ s u: thời gi n phản ứng: 120 phút, n ng độ xit b o n : 70%, nhiệt độ phản ứng : 750C Thông qu tính toán từ mô hình phương trình h i quy, xá đ nh ác điều kiện ho trình làm giàu xit olei linolei s u: tỉ lệ eth nol/tổng xit b o: 1/15; tỉ lệ urê/tổng xit b o: 3/1; nhiệt độ 50oC Từ tiến hành xây dựng đượ quy trình làm giàu h i xit b o không no sau trình làm giàu, h i xit olei xit linolei 40,62 48,29 hàm lượng lớn với tỉ lệ mẫu dầu Đã t o đượ hế phẩm OF27 từ số xit b o đ nối đôi thiết yếu thuộ h ω-6 GL , R ω-3 L , EP , H nghiên ứu dượ lí ho thấy hế phẩm OF27 độ theo đường uống ó giá tr LD50 = 19,00  81 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h 2,01 g/kg thể tr ng Kết mở r triển v ng ứng dụng hế phẩm OF27 thự phẩm ứng dụng uộ sống KI N NGH Tiếp tụ nghiên ứu sâu dượ l hế phẩm OF27 nhằm xây dựng h sơ t o sở kho h ho r sản phẩm ó giá tr ứng dụng thự ti n 82 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th TÀI IỆU THA sĩ kho h KH O Abraham W.B (1978), “Techniques of animal and clinical toxicology”, Med Pud Chicago, pp 55-68 Aitzetmuller, K (1998), “Tocopherol and tocotrienol composition of the seed lipids of a number of species representing the Bulgarian flora”, Lipids, 7, pp 308-312 Alessandra Bocco, Marie-Elisabeth Cuvelier, Hubert Richard, and Claudette Berset (1998), “ ntioxid nt tivity nd Phenoli omposition of itrus Peel nd Seed Extr ts”, J Agric Food Chem., 46 (6), pp 21232129 Andrew L Stoll (2002), Omega-3 Connection, Ed Simon & Schuster, Aviacom Company, pp 203-224 Armen Takhatajan (1997), “Diversity and classification of flowering plants”, Columbia University press, NewYork, pp 307-308 Attaway, J.A (1994), “ itrus jui e fl vonoids with nti r inogeni nd ntitumor properties”, Food Phytochemicals for Cancer Prevention I, Maple press: York, PA, 546, pp 240-248 Benavente-Garcia O., Castillo J., Marin F.R., Ortuno A., Del Rio J.A (1997), “Use and properties of Citrus fl vonoids”, J Agric Food Chem., 45, pp 4506-4515 Bennett R.D and Hasegawa S (1981), “Limonoids of l mondin seeds”, Tetrahedron, 37, pp 17-24 Bohlmann F.F., Burkhardt T and Zdero C (1973), “Natural Acetylenic and Olefinic Compounds excluding Marine Natural Products, Naturally Occurring Acetylenes”, Academic, New York, pp 155 83 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th 10 Bruckner G., Goswami S and Kinsella J.E., sĩ kho h (1984), “Dietary trilinoelaidate: effects and organ fatty acids compostion, prostanoid biosynthesis and platelet function in rats”, Journal of Nutrion, pp 58-114 11 Bùi Kim nh (2005), Nghi n c u thành ph n hoá h c khảo sát hoạt tính g y ngán ăn côn tr ng c a hạt số loài thuộc chi Citrus c y t ch ba, h Rutaceae, Luận án Tiến sĩ hoá h 12 Burdge G.C., Calder P.C (2005), “ onversion of α-linolenic acid to longchain polyunsaturated f tty ids in hum n dults”, Reprod Nutr Dev., 45, pp 581-597 13 Cai Q.Y., Rahn R.O.Z., Hang R.W (1997), “Dietary flavonoids, quercetin, luteolin and genisterin, reduce oxidative DNA MDA age and lipid peroxidation and quench free radicals”, The Cancer Letter Archiver, 119 (1), pp 99-107 14 Cecilia A Meintosh and Richard L Mansell (1997), “Three-dimentional distribution of limonin, limonoate A-ring monolacton, and naringin in the fruit tissues of the three v rieties of itrus P r disi”, J Agric Food Chem., 45, pp 2876-2883 15 Chavalit N (1991), Citrus maxima (Burm) Merr., Plants resources of South-East Asia -2 Edible fruits and nuts, Pudoc wageningen, pp 128 16 Chen J., Montanari A.M., Widner W.W (1997), “Two new polymethoxylated flavones, a class of compounds with potential anticancer tivity, isol ted from old pressed n y T ngerine peel oil solids”, J Agric Food Chem., 45, pp 364-368 17 Christie W.W (1970), “Fatty acid in foods and their health in aplication”, third edition, Top Lipid Research., 1, pp 18 Davidson B.C and Cantrill R.C (1985), “Fatty acid nomenclature: a short review”, South Africal Medical Journal, 67, pp 633-634 19 Đỗ Đình Rãng (2003), Nghi n c u tinh d u c a vài phận c y bư i Hội ngh Hoá h toàn quố lần thứ IV, Hà Nội, pp 290 84 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h 20 ương nh Tuấn ộng (1998), Antifeedant effects of limonin isolated from Vietnamese lemon seeds against Plutella xylostela, ASOMPS IX Hanoi-Vietnam 24-28 sep 1998, SO3B, 100 21 ương nh Tuấn ộng (1998), Nghi n c u ph n lập limonin t hạt chanh, cam, quýt i t Nam thăm d tác dụng tr s u b c a nó, Tuyển tập báo áo Hội ngh Hoá h toàn quố lần thứ III, tập 1, pp 52-55 22 Duthie G.G., Duthie S.J and Kyle J.A.M (2000), “Plant polyphenols in cancer and heart disease: implications nutritional antioxidants”, Nutrion Research Review, 13, pp 79-106 23 Emken E.A and Dutton H.J (1979), “Geometrical and Positional fatty acid isomers”, Journal of American oil chemists’ Socierty, Champaign, 3, pp 164 24 Farooq Anwar, Rehana Naseer, M.I Bhanger, Samia Ashraf, Farah Naz Talpur, Felix Adekunle Aladedunye (2008), “Physi o-Chemical h r teristi s of itrus Seeds nd Sees Oils from P kist n”, Journal of the American Oil Chemists’ Society, 85, pp 321-330 25 Francesco Castelli, Natascia Giuffrida, Corrado Tringali, and Giuseppe Ruberto (2000), “ lorimetri eviden e of differenti ted tr nsport of limonin nd nomilin through biomembr nes”, J Agric Food Chem., 48 (9), pp 4123-4127 26 Hà Việt Bảo (2007), Nghiên c u hợp ch t có tác dụng chống oxy hoá t diếp cá Houttuynia cordata Thunb (Saururaceae) bùm bụp Mallotus apelta (Lour.) Muell.-Arg (Euphorbiaceae) hoá h c số c y dược li u có hoạt tính antioxydant cao, Luận án tiến sĩ hó h c 27 Haimin C., Xiaojun Y., Peng Z., Jing L (2006), “Antioxidant activity and hepatoprotective potential of agaro-oligosaccharides in vitro and in vivo”, Nutrition Journal, 5, pp 31 28 Halliwell B., Gutteridge J.M.C (1990), “Role of free radicals and catalytic metal ions in human disease”, Methods in enzymology, 186, pp 1-85 85 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h 29 Harborn J.B (1964), “Phenolic glycosides and their natural distribution”, Biochemistry of phenolic compounds, Academic press, London and New york, pp 129-169 30 Heiduschka A., Luft K (1919), The fat and oil in seeds of Oenotheria biennis and one new linoleic acid, Archiv Der Pharmazie, 257, pp 33-69 31 Hess J.L., R.G Alscher (1993), “Vit E: α-To opherol”, Antioxidants in Higher Plants, pp 111-134 32 Hilditch T.P and Williams P.N (1964), The chemiscal Constitution of Natural Fats, 4th Edition, Chapman and Hall (Publishers) Ltd, London 33 Holman, R.T (1966), “Analysis and characterization of polyunsaturated fatty acids”, Progress in the Chemistry of Fats and other Lipids, Pergamon, New York , 4, pp 13- 29 34 Holman, R.T (1970), “Biological activities of and requirements for polyunsaturated fatty acids”, Progress in the Chemistry of Fats and Other Lipids, pp 611 35 Hopkins C.Y (1972), “Fatty acids with conjugated unsaturation”, Top Lipid Chem., 3, pp 37 36 Hopkins C.Y and Chisholm M.J (1986), “A survey of the conjugated fatty acids of seed oils”, Journal of American oil chemists Socierty, 45, pp 176 37 Housley G., Born G.V., Conroy D.M., Belin J and Smith A.D (1986), “Influence of dietary lipids on the effect of chlorpromazine on membrane properties of rabbit red cells”, Proceeding Royal Society, pp 227-243 38 http://vi.wikipedi org/wiki/H ửu l hương 39 Igarashi M., Schaumburg H.H., Power J., Kishimoto Y., Koladny E and Suzuki K (1976), “Fatty acids abnormality in adrenoleukody-strophy”, Journal of Neurochemistry, pp 26-851 40 ISO/9936:1997, Germany 41 ISO/DIS 659:1988, Germany 42 ISO/FDIS 5590:1998, Germany 86 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h 43 Iwashima M., Mori J., Ting X., Matsunaga T., Hayashi K., Shinoda D., Satio H., Sankawa U., and Hayashi T (2005), “Antioxidant and Antiviral Activities of Plastoquinones from the Brown Alga Sargassun micracanthum, and a New Chromene Derivative Converted from the Plastoquinones”, Biological Pharmcaceutical Bulletin, 28(2), pp 374-377 44 Kamal-Eldin A and L.A Appelqvist (1996), “The Chemistry and Antioxydant Properties of the To opherols nd To otrienols”, Lipids, 31, pp 671-701 45 Kang K.W., Oh S.J., Ryu S.Y., Song G.Y., Kim B.H., Kang J.S and Kim S.K 2010 , “Evaluation of the total oxy-radical scavenging capacity of catechins isolated from green tea”, Food Chemistry, 121, pp 1089-1094 46 Lã Đình Mỡi 2001 , Tài nguy n thực vật có tinh d u i t Nam, tập I, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, pp 83-108 47 Lê Ng Tú (2000), Hoá sinh công nghi p, Nhà xuất kho h kỹ thuật, Hà Nội, pp 175-176 48 Meade, E.M (1957), “The naturally occurring acetylenic acids", Progress in the Chemistry of Fats and Other Lipids, New York, 4, pp 45-60 49 Meller M.E., Anagnostou A., Ley B., Marshall P and Steiner (1987), “Effect of fish oil concentrte on hemorheologial and homostalic aspects of diabetes mellitus: a preliminary study”, Thromb Res, pp 47-201 50 Miller M.E and Riceevans C.A (1997), “The relative contributions of ascorbic acid and phenolic antioxidants to the total antioxidant antivity of orange fruit juices and blanckecurrant drink”, Food chemistry, 60(3), pp 331-337 51 Muhamad Bin Zakaria (2001), “The phyto hemistry of Rut e e spe ies with spe i l referen e to Meli ope”, Malayan Nature Journal, 55 (1&2), pp 241-250 52 Nguy n M nh Ph (1991), “Thành phần hoá h tinh dầu vỏ bưởi”, Tạp chí dược h c, (5), pp 87 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h 53 Nguy n Th Thảo Trân (2003), hảo sát tinh d u vỏ chanh Hội ngh Hoá h toàn quố lần thứ IV, Hà Nội, pp 332 54 Nguy n Thiện Luân, Lê Doãn Diên, Phan Quốc Kinh (1999), Các loại thực phẩm thuốc thực phẩm ch c Vi t Nam, Nhà xuất nông nghiệp, tr 31-50 55 Nguy n Tiến Bân (1997), Cẩm nang tra c u nhận biết h thực vật hạt kín i t Nam, Nhà xuất nông nghiệp, Hà Nội, tr 41 56 Obchinnikov, Y.A (1987) Bio-organic chemistry, Moskva Publishing 57 OECD (Organization for Economic Cooperation and Development) (2008), “ ute Or l Toxi ity : Up-and- own Pro edure”, OECD Guidelines for Testing of Chemicals, Section 4: Health Effects, Test No 425 58 Ph m Hoàng Hộ (2000), C y cỏ i t Nam, II, Nhà xuất trẻ, pp 430-434 59 Ph m Quố Long, hâu Văn Minh (2005), Lipit axit béo hoạt tính sinh h c có nguồn gốc thi n nhi n, Nhà xuất kho h kỹ thuật, Hà Nội 60 Ph m Văn Nguyên (1981), Những c y có d u béo kho h i t Nam, Nhà xuất kĩ thuật, Hà Nội 61 Pohl P and Wagner H (1972), “Fatty acids in plant and animal kingdom (an overview) II: Trans-unsaturated, alkynes, hydroxy, epoxy, oxo-, cyclopropane-fatty-cyclopropen and procedures”, Fette Seifen Anstrichm., 74, pp 541 62 Pryor, W.A (1984), “ hemistry of lipid peroxyd tion” Methods in enzymmology, Academic Press, New York, 105, pp 2335-2348 63 Richard B Silverman (1995), “The organic chemistry of drug design and drug action”, Academic Press, Inc London, pp 289 64 Sato A Shindo, Kasanuki N and Hasegawa K (1989), “Antioxidant metabolies from the tunicate Amaroucium multiplicatum”, Journal of Natural Product, 52(5), pp 975-981 88 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h 65 Satoru Kawaii, Yasuhiko Tomono, Eriko Katase, Kazunori Ogawa, Masanichi Yano, Meisaku Koizumi, Chihiro Ito and Hiroshi Furukawa (2000), “Qu ntit tive study of fl vonoids in le ves of itrus pl nts”, J Agric Food Chem., 48 (9), pp 3865-3871 66 Shela G., Olga M.B., Elena K., Antonin L., Milan C., Nuria G M., Ratiporn H., Yong- Seo P., Soon- Teck J., Simon T (2003), “Comparison of the contents of the main biochemical compounds and the antioxidant activity of some Spanish olive oils as determined by four different radical scavenging tests”, Journal of Nutritional Biochemistry, 14, pp 154- 159 67 Sies, H (1991), “Oxidative Stress II, Oxidant and Antioxidant”, Academic Press, London 68 Smith, C.R (1979), “Unusual seed oil and their fatty acids”, Journal of the Americal oil Chemists Society, Champaign, pp 29-47 69 Swingle W.T., Reece P.C (1967), The Botany of Citrus and its Wild Relatives In the Citrus Industry Voll (rev) Reuther W., Webbe H.J and Batchelor L.D (eds), University of California press, pp 180-223 70 Tanaka Tyozaburo (1932), Memoirs of the Tanaka Citrus Experiment station, (2), pp 46-66 71 Tian-shung Wu, Shiow-Chyn Huang and Jeng-Shiow Lai (1994), “Stem back courmarins of citrus grandis”, Phytochemistry, 36 (1), pp 217-219 72 Trần Đình Đ i (1998), Đứ hoá h hái quát h thực vật i t Nam, Hội thảo Việt- hợp hất thiên nhiên, Hà Nội, tr 17-27 73 Trần Kim Liên (2003), Danh mục loài thực vật i t Nam, tập II, mụ 134, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, pp 965-968 74 Vergroesen, A.J (1976), “Early signs of polyunsaturated fatty acid deficieny”, Bibliotheca Nutritio et Dieta, 23, pp 19 75 Võ Văn hi (1999), T điển thuốc Vi t Nam, Nhà xuất Y h c, tr 969 89 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội Ph m Th Ng M i Luận văn th sĩ kho h 76 Winston G.W., Francesco R., Alton J.D., Jessica H.F and Kristie A.B (1998), “ r pid g s hrom togr phi ss y for determining oxyr di l scavenging capacity of antioxid nts nd biologi l fluids” Free Radical Biology & Medicine, 24 (3), pp 480-493 90 Trường Đ i h Bá h Kho Hà Nội ... V CHI CITRUS 12 1.1.1 Giới thiệu vài n t đ điểm thự vật h Rutaceae 12 1.1.2 Giới thiệu vài n t đ điểm thự vật thành phần hoá h số loài thuộ ủ hi Citrus 13 CÁC A IT B O VÀ... từ thành phần nh u ủ loài ây thuộ hi Citrus ó ho t tính sinh h o Đã ó nhiều ông trình nghiên ứu hàm lượng, thành phần tinh dầu vỏ, quả, ủ loài ây thuộ hi Citrus, nhiên, phận h t ủ hư đượ nghiên. .. dung nghiên ứu s u: hiết xuất phân tí h hàm lượng lipit, thành phần hàm lượng béo dẫn xuất to opherol ủ dầu h t thự vật thuộ  Khảo sát ho t tính hống oxy hó  Phân lập làm giàu ủ xit hi Citrus