ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHÙNG THU HƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI GÂY TIÊU CHẢY Ở BÊ, NGHÉ TẠI HUYỆN CAO LỘC, TỈNH LẠNG SƠN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y THÁI NGUYÊN - 2016 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHÙNG THU HƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI GÂY TIÊU CHẢY Ở BÊ, NGHÉ TẠI HUYỆN CAO LỘC, TỈNH LẠNG SƠN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: THÚ Y Mã số: 60 64 01 01 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN VĂN SỬU GS TS NGUYỄN QUANG TUYÊN THÁI NGUYÊN - 2016 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Tác giả Phùng Thu Hương Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ii LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực tập thực đề tài này, nhận quan tâm, bảo, hướng dẫn, giúp đỡ tận tình thầy cô giáo, đồng nghiệp, bạn bè động viên khích lệ gia đình Nhân dịp xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: Tập thể giảng viên hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Văn Sửu GS TS Nguyễn Quang Tuyên trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình suốt trình nghiên cứu hoàn thành Luận văn Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Quản lý Đào tạo, Ban chủ nhiệm khoa thầy cô giáo Khoa Chăn nuôi Thú y- Trường Đại học Nông lâm Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện giúp đỡ suốt trình học tập Tôi xin trân trọng cảm ơn hộ gia đình nuôi bê, nghé thú y viên số xã thuộc huyện Cao Lộc, tỉnh Lạng Sơn đồng nghiệp ngành giúp trình thực đề tài Cuối xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ủng hộ, động viên, giúp đỡ gia đình, bạn bè đồng nghiệp suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành tốt luận văn Lạng Sơn, tháng năm 2016 Tác giả Phùng Thu Hương Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN .ii MỤC LỤC iii DANH MỤC TỪ VÀ CỤM TỪ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH viii MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số hiểu biết chung hội chứng tiêu chảy 1.1.1 Khái niệm hội chứng tiêu chảy 1.1.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy gia súc 1.1.3 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy gia súc 1.1.4 Bệnh lý, lâm sàng hội chứng tiêu chảy 1.1.5 Chẩn đoán bệnh tiêu chảy E coli bê, nghé 10 1.1.6 Biện pháp phòng trị bệnh tiêu chảy cho gia súc 10 1.2 Vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy 11 1.2.1 Đặc điểm hình thái 11 1.2.2 Đặc điểm cấu trúc 11 1.2.3 Đặc tính sinh vật học vi khuẩn E coli 13 1.2.4 Đặc tính gây bệnh vi khuẩn E coli 14 1.2.5 Khả mẫn cảm với kháng sinh vi khuẩn E coli 17 1.3 Tình hình nghiên cứu nước 18 1.3.1 Tình hình nghiên cứu nước 18 1.3.2 Tình hình nghiên cứu giới 20 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn iv Chương ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 25 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 25 2.1.2 Nguyên vật liệu dùng nghiên cứu 25 2.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 26 2.2.1 Địa điểm nghiên cứu 26 2.2.2 Thời gian nghiên cứu 26 2.3 Nội dung nghiên cứu 26 2.3.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy bê, nghé từ sơ sinh đến 12 tháng tuổi số xã thuộc huyện Cao Lộc, tỉnh Lạng Sơn 26 2.3.2 Phân lập, xác định số đặc tính sinh học chủng E coli phân lập 26 2.3.3 Xây dựng thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy bê, nghé vi khuân E coli gây huyện Cao Lộc, tỉnh Lạng Sơn 27 2.4 Phương pháp nghiên cứu 27 2.4.1 Phương pháp điều tra dịch tễ học 27 2.4.2 Thu thập mẫu phân lập vi khuẩn 27 2.4.3 Phương pháp xác định đặc tính sinh hoá vi khuẩn E coli 30 2.4.4 Phương pháp xác định serotype kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập 30 2.4.5 Phương pháp xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn E coli phân lập 31 2.4.6 Phương pháp xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli 32 2.4.7 Phương pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập 33 2.4.8 Xây dựng phác đồ điều trị tiêu chảy bê, nghé 33 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 33 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 34 3.1 Kết điều tra số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy bê, nghé từ sơ sinh đến 12 tháng tuổi số xã thuộc huyện Cao Lộc, tỉnh Lạng Sơn từ 8/2015 - 6/2016 34 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn v 3.1.1 Tỷ lệ bê, nghé tiêu chảy chết tiêu chảy số xã thuộc huyện Cao Lộc, tỉnh Lạng Sơn từ 8/2015 - 6/2016 34 3.1.2 Tỷ lệ bê, nghé tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 37 3.1.3 Tỷ lệ bê, nghé mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 40 3.1.4 Triệu chứng lâm sàng bê, nghé mắc tiêu chảy 42 3.1.5 Bệnh tích đại thể bê, nghé bị chết tiêu chảy 44 3.2 Kết phân lập xác định số đặc tính sinh học chủng E coli phân lập 46 3.2.1 Kết phân lập vi khuẩn E coli bê, nghé bị tiêu chảy bình thường 46 3.2.2 Kết phân lập E coli từ bệnh phẩm bê, nghé chết mắc tiêu chảy từ mẫu bệnh phẩm bê, nghé chết mắc tiêu chảy 49 3.2.3 Kết xác định số đặc tính sinh học chủng vi khuẩn E coli phân lập 50 3.2.4 Kết xác định serotype chủng E coli phân lập 52 3.2.5 Kết xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn E coli phân lập 54 3.2.6 Kết xác định độc lực chủng E coli phân lập động vật thí nghiệm 56 3.2.7 Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập 58 3.3 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy bê, nghé vi khuân E coli gây huyện Cao Lộc, tỉnh Lạng Sơn 60 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 65 Kết luận 65 Đề nghị 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO 67 PHỤ LỤC ẢNH 76 PHỤ LỤC THỐNG KÊ 79 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn vi DANH MỤC TỪ VÀ CỤM TỪ VIẾT TẮT EPEC : Enteropathogenic Escherichia coli ETEC : Enterotoxigenic Escherichia coli BHI : Brain-heart infusion PBS : Phosphate buffer saline DHL : Deoxycholate Hydrogen sulfide Lactose agar MR : Methyl Red cs : Cộng Nxb : Nhà xuất PCR : Polymerase Chain Reaction SLT : Shiga-like toxin SLT1 : Shiga-like toxin SLT2 : Shiga-like toxin ST (a,b) : Heat- Slable toxin (a,b) LT : Heat-Labile toxin NCCLS : National Committee for Clinical Laboratory Standards tr : trang pg : page TT : Thể trọng VP : Voges Pros Kaver VT2e : Verotoxin 2e VTEC : Verotoxigenic Escherichia coli SS : Sơ sinh Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Tỷ lệ bê, nghé tiêu chảy chết tiêu chảy số xã thuộc huyện Cao Lộc 34 Bảng 3.2 Tỷ lệ bê, nghé tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 37 Bảng 3.3 Tỷ lệ bê, nghé mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 40 Bảng 3.4 Triệu chứng lâm sàng bê, nghé bị tiêu chảy 43 Bảng 3.5 Bệnh tích đại thể bê, nghé bị chết tiêu chảy 44 Bảng 3.6 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ phân bê, nghé bị tiêu chảy bình thường 46 Bảng 3.7 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu bệnh phẩm bê, nghé chết mắc tiêu chảy 49 Bảng 3.8 Kết giám định số đặc tính sinh học chủng E coli phân lập 51 Bảng 3.9 Kết xác định serotype kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập 52 Bảng 3.10 Kết xác định tỷ lệ chủng vi khuẩn E coli mang gen quy định sinh tổng hợp yếu tố gây bệnh 54 Bảng 3.11 Kết xác định độc lực số chủng vi khuẩn E coli chuột bạch 57 Bảng 3.12 Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập 59 Bảng 3.13 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị cho bê, nghé mắc tiêu chảy huyện Cao Lộc, tỉnh Lạng Sơn 61 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn viii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1: Biểu đồ tỷ lệ bê, nghé tiêu chảy chết tiêu chảy số xã thuộc huyện Cao Lộc 36 Hình 3.2: Biểu đồ tỷ lệ bê, nghé mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 39 Hình 3.3: Biểu đồ tỷ lệ bê, nghé mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 41 Hình 3.4: Biểu đồ tỷ lệ quan có bệnh tích bê, nghé bị mắc tiêu chảy 45 Hình 3.5: Biểu đồ tỷ lệ phân lập vi khuẩn E coli từ phân bê, nghé bị tiêu chảy bình thường 47 Hình 3.6: Biều đồ tỷ lệ mẫu bệnh phẩm dương tính với E coli 49 Hình 3.7 Biểu đồ tỷ lệ serotype kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập 53 Hình 3.8 Biểu đồ tỷ lệ chủng vi khuẩn E coli mang gen quy định sinh tổng hợp yếu tố gây bệnh 56 Hình 3.9 Biểu đồ tỷ lệ mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập 60 Hình 3.10 Biểu đồ tỷ lệ bê, nghé khỏi bệnh sau điều trị thử nghiệm 63 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO * TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Archie H (2000), Sổ tay dịch bệnh động vật, (Phạm Gia Ninh Nguyễn Đức Tân dịch), Nxb Bản đồ, Hà Nội, tr 53, 207 - 214 Bùi Thị Ba, Đào Hoài Thu, Võ Thành Thìn, Đặng Văn Tuấn, Đỗ Văn Tấn, Vũ Khắc Hùng (2012), “Xác định số gen kháng kháng sinh vi khuẩn Escherichia coli O157:H7 phân lập từ trâu bò khỏe mạnh số tỉnh Nam trung bộ”, Tạp chí Khoa học Việt Nam Lê Minh Chí (1995), Bệnh tiêu chảy gia súc, Hội thảo khoa học Nông nghiệp công nghiệp thực phẩm, Hà Nội, tr 20 - 22 Lê Huy Chính (2007), Vi sinh vật y học, Nhà xuất Y học Đoàn Kim Dung (2003), Sự biến động số vi khuẩn hiếu khí đường ruột, vai trò E coli hội chứng tiêu chảy lợn phác đồ điều trị, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú Y quốc gia, Hà Nội Nguyễn Cảnh Dũng Cù Hữu Phú (2011), “xác định vai trò gây bệnh E coli, salmonella hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa số địa phương tỉnh Lâm Đồng”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, 18 (1), tr 56 - 64 Nguyễn Chí Dũng (2013), Nghiên cứu vai trò gây bệnh vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn nuôi tỉnh Vĩnh Phúc biện pháp phòng trị, Luận Văn thạc sĩ Thú y, Trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên Nguyễn Việt Dũng (2011), Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ, đặc tính gây bệnh vi khuẩn Escherichia coli hội chứng tiêu chảy thỏ tỉnh Bắc Giang biện pháp phòng trị, Luận Văn thạc sĩ khoa học Nông nghiệp, Trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên Lê Văn Dương (2010), Phân lập, xác định vai trò gây bệnh Escherichia coli hội chứng tiêu chảy lợn số huyện tỉnh Bắc Giang biện pháp phòng trị, Luận Văn thạc sĩ khoa học Nông nghiệp, Trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 68 10 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng, Lê Ngọc Mỹ (1995), Bệnh đường tiêu hoá lợn con, Nxb Nông nghiệp 11 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (1996), Bệnh lợn nái lợn con, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 44 - 81 12 Bùi Xuân Đồng (2002), “Bệnh phù đầu Escherichia coli gây lợn Hải Phòng biện pháp phòng chống”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, tập 9, tr 98 - 99 13 Trần Đức Hạnh (2013), Nghiên cứu vai trò E coli, Salmonella Clostridium perfringens gây tiêu chảy lợn tỉnh miền núi phía Bắc biện pháp phòng trị, Luận án Tiến sĩ Thú y, Đại học Thái Nguyên 14 Phạm Khắc Hiếu, Trần Thị Lộc (1998), Stress đời sống người vật nuôi, Nxb nông nghiệp Hà Nội 15 Phạm Khắc Hiếu Bùi Thị Tho (1999), “Một số kết nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn gây bệnh thú y” Kết nghiên cứu KHKT khoa CNTY (1996 - 1998), Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 134 - 138 16 Hoàng Phú Hiệp (2014), Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát chủng vi khuẩn Escherichia coli O157:H7 tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu, Luận án Tiến sĩ sinh học, Đại học Thái Nguyên 17 Nguyễn Xuân Hòa, Đặng Công Tin, Nguyễn Thị Hiền, Lê Văn Phước (2011), “Xác định độc lực tính mẫn cảm kháng sinh vi khuẩn E coli phân lập từ bệnh phẩm lợn sau cai sữa bị bệnh tiêu chảy”, Tạp chí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, kỳ 1, số tháng 9, tr 52 - 56 18 Vũ Khắc Hùng, Lê Văn Tạo, Pilipcinec (2005), “Xác định loại kháng nguyên bám dính thường gặp vi khuẩn E coli phân lập từ lợn bị tiêu chảy phản ứng PCR”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y,(3), tr 22 - 28 19 Bùi Quý Huy (2003), Sổ tay phòng chống bệnh từ động vật lây sang người - Bệnh E coli, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 30 - 34 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 69 20 Lâm Thị Thu Hương Đường Chi Mai (2011), “Tỷ lệ nhiễm Rotavirus Escherichia coli K88 heo tiêu chảy”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, 18(6), tr 31 - 35 21 Vũ Thị Ánh Huyền (2012), Xác định số đặc tính sinh học vi khuẩn Escherichia coli hội chứng tiêu chảy ngựa bạch nuôi huyện Phú Bình, tỉnh Thái Nguyên biện pháp điều trị, Luận Văn thạc sĩ Nông nghiệp, Trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên 22 Phạm Hà Giang (2015), Phân lập, xác định số đặc tính sinh vật học vi khuẩn Escherichia coli hội chứng tiêu chảy lợn khu vực thành phố Cẩm Phả, tỉnh Quảng Ninh biện pháp phòng trị, Luận Văn thạc sĩ Nông nghiệp, Trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên 23 Đặng Bá Khánh (2010), Nghiên cứu tính mẫn cảm, tính kháng thuốc E coli Salmonella spp phân lập từ bệnh lợn phân trắng, ứng dụng điều trị, Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp, trường ĐH Nông nghiệp Hà Nội 24 Phạm Văn Khuê, Phan Văn Lục (1996), Giáo trình ký sinh trùng thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 25 Nguyễn Thị Kim Lan (2012), Ký sinh trùng bệnh ký sinh trùng thú y (giáo trình dùng cho đào tạo bậc đại học), Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 246 - 251 26 Phạm Sĩ Lăng, Phan Địch Lân (1997), Bệnh trâu bò việt nam biện pháp phòng trị, Nxb Nông nghiệp 27 Phạm Sĩ Lăng, Lê Văn Tạo, Bạch Đằng Phong (2002), Bệnh phổ biến bò sữa, Nxb Nông nghiệp 28 Vũ Hoàng Lân (2008), Nghiên cứu, xác định số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy nhiễm khuẩn E coli trâu nuôi Bảo Yên - Lào Cai biện pháp phòng bệnh, Luận Văn thạc sĩ Nông nghiệp, Trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên 29 Trần Trung Mỹ (2010), Phân lập xác định vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi số huyện tỉnh Thái Nguyên biện pháp phòng trị, Luận Văn thạc sĩ Nông nghiệp, Trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 70 30 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trương Quang, Phùng Quốc Chướng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thanh (1997), “Bệnh viêm ruột ỉa chảy lợn”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, số 2, tr 39 - 45 31 Hồ Văn Nam, Nguyễn Huy Thông Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trương Quang, Phạm Văn Khẩn, Phạm Ngọc Thạch, Nguyễn Bá Hiên, Đặng Như Phả (1997), "Bệnh viêm ruột trâu" Tạp chí KHKT thú y, số 2, tr 32 Nguyễn Ngã, Nguyễn Thiên Thu, Lê Lập, Lê Thị Thi, Vũ Khắc Hùng (2000), "Điều tra nghiên cứu hệ vi khuẩn hội chứng tiêu chảy bê, nghé khu vực miền Trung", Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, 7(2), tr 36 - 40 33 Phạm Hồng Ngân (2007), "Phân lập, xác định serotype số yếu tố gây bệnh Salmonella từ bê tháng tuổi", Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, (2), tr 44 34 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thúy, Văn Thị Hường, Phạm Quang Phúc (2002), “Kết xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli gây tiêu chảy bê, nghé Thái Nguyên”, Tạp chí Nông nghiệp Phát triển Nông thôn, số 8, tr 690 - 691 35 Phạm Quang Phúc (2003), Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ học, vai trò E.coli gây tiêu chảy bê, nghé tỉnh Thái Nguyên biện pháp phòng trị, Luận án Tiến sĩ nông nghiệp, Hà Nội 36 Nguyễn Văn Quang (2004), Vai trò Salmonella E.coli hội chứng tiêu chảy bò, bê tỉnh Nam trung bước đầu chế tạo thử kháng thể phòng trị bệnh, Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp, Hà Nội 37 Trương Văn Quang, Phạm Hồng Ngân, Trương Hà Thái (2006), "Kết nghiên cứu vai trò gây bệnh E coli bệnh tiêu chảy bê, nghé", Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, (8) 38 Phạm Thế Sơn, Phạm Khắc Hiếu (2008), “Tác dụng kháng khuẩn chế phẩm EM - TK21 với vi khuẩn E coli, Salmonella, Cl perfringens (in vitro) khả phòng trị tiêu chảy chế phẩm EM - TK21 lợn - 60 ngày tuổi”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, 15 (1), tr.69 - 72 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 71 39 Nguyễn Văn Sửu (2005), Nghiên cứu tình hình tiêu chảy bê, nghé tháng tuổi tỉnh miền núi phía Bắc xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli , Salmonella Clostridium perfringens phân lập được, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Hà Nội 40 Lê Văn Tạo (1996), “Cấu trúc fimbriae, kháng nguyên bám dính K88 vi khuẩn E coli vai trò trình gây bệnh phân trắng lợn con” Tạp chí nông nghiệp, công nghê thực phẩm - số 2, Hà Nội, tr 62 - 63 41 Lê Văn Tạo (1997), Bệnh Escherichia coli gây Những thành tựu nghiên cứu phòng chống bệnh vật nuôi, tài liệu giảng dạy Sau đại học, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội, tr 207- 210 42 Phạm Ngọc Thạch (1996), Một số tiêu phi lâm sàng trâu viêm ruột ỉa chảy biện pháp phòng trị, Luận án tiến sĩ Nông Nghiệp, tr 20 - 32 43 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1997), Vi sinh vật thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 81 - 84 44 Nguyễn Như Thanh, Bùi Quanh Anh, Trương Quang (2001), Dịch tễ học Thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 45 Trịnh Văn Thịnh (1985), Bệnh lợn Việt Nam, Nxb Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 90 - 95 46 Nguyễn Anh Tuấn, Nguyễn Bá Tiếp (2013), “Vai trò Escherichia coli Samonella spp hội chứng tiêu chảy lợn trước sau sai sữa: nghiên cứu mô hình trại nuôi công nghiệp”, Tạp chí Khoa học Phát triển, 11 (3), tr 318 - 327 47 Nguyễn Quang Tuyên (2008), Giáo trình vi sinh vật Thú y, Nxb Nông nghiệp, tr 72- 81 48 Lừ Văn Trường (2008), Nghiên cứu số dặcđiểm dịch tễ, yếu tố gây bệnh vi khuẩn E colitrong hội chứng tiêu chảy bê, nghé Sơn La thử nghiệm phác đồ điều trị, Luận văn Thạc sĩ khoa học Nông nghiệp, trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 72 49 Nguyễn Hữu Vũ, Hoàng Bùi Tiến, Trần Thị Thu Hiền (2010) “Kháng thể HANVET KTEHI phòng trị bệnh tiêu chảy E coli gây lợn”, Tạp chí Khoa học kĩ thuật Thú y, 17 (3), tr 94-95 II TÀI LIỆU TIẾNG NƯỚC NGOÀI 50 Abdul-rudha G S., Hassan F K., Sharma V K (1984), "Charaterisation of Escherichia coil from diarrhoeic calves", Veterinary Record, 114 (20), pp 39 51 Acres S D (1985), "Enterotoxingenic Escherichia coli infections in newborn calves", A review, Journal of dairy science, 68 (1), pp 229 - 256 52 Adenipekun E O., Jackson C R., Oluwadun A., Iwalokun B A., Frye J G., Barrett J B., Hiott L M., Woodley T A (2015), “Prevalence and Antimicrobial Resistance in Escherichia coli from Food Animals in Lagos, Nigeria”, Microb Drug Resist 53 Al-Dabbas A H M., Willinger H (1986),"Properties of Escherichia coli Strains from calves with diarrhoea before weaning", Wiener Tiararztliche Monatsschrif, pp 217 - 222 54 Baljer G., Wieler L., Buaerfeind R., Ludwig S W., Mayr A (1990), "Demonstration of verotoxin production by Escherichia coli by a cell culture test and DNA hybridization applied to faeces from calves with diarrhoea", Tierartliche-Umschau, 45(2), pp 71-78 55 Blanco M., Blanco J., Blanco J E Ramos J (1993), "Enterotoxingenic, verotoxigenic, and necrotoxigenic Escherichia coli isolated from cattle in Spain", American Journal of veterinary reseach, 54(9), pp 1446 - 1451 56 Borriello G., Lucibelli M G., De Carlo E., Auriemma C., Cozza D., Ascione G., Scognamiglio F., Iovane G., Galiero G (2012), “Characterization of enterotoxigenic E coli (ETEC), Shiga-toxin producing E coli (STEC) and necrotoxigenic E coli (NTEC) isolated from diarrhoeic Mediterranean water buffalo calves (Bubalus bubalis)”, Res Vet Sci., 93(1), pp 18 - 22 57 Cray W C., Moon H W (1995), "Experimental infection of calves and adult cattle with Escherichia coli O157:H7", Applied and Environmental Microbiology (USA), 61(4), pp 1586-1590 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 73 58 Dho-Moulin M., Fairbrother J M (1999), “Avian pathogenic Escherichia coli (APEC)”, Vet Res., 30(2-3), pp 299 - 316 59 Elsinghorst E A., Weitz J A (1994), “Epithelial cell invasion and adherence directed by the enterotoxigenic Escherichia coli tib locus is associated with a 104-kilodalton outer membrane protein”, Infect Immun., 62, pp 3463 - 3471 60 Evan D G., Evans D J., Gorbach S L (1981), "Production of vascular permeability factor by enterotoxigenic Escherichie coli isolated from man", Infect Immun., V8, pp 725- 730 61 Fairbrother J M (1992), Enteric colibacillosis Diseases of swine, IOWA State University Press/AMES, IOWA U.S.A 7th Edition, pp 489 - 496 62 Falkow S (1975), Plasmid which contribute to pathogenity In infection multile drug resistance Pion Ltd London 63 Fialova J (1989), "Survey of the results of serotyping Escherichia coli strains isolated from intestinal infections of piglets and calves in 1986 and 1987", Veterinarstvi, 39 (1), pp 23 - 26 64 Giannella R A., Rout W R., Formal S B., and Collins H (1976), “Role of plasma filtration in the intestinal fluid secretion mediated by infection with Salmonella typhimurium”, Infect Immun., 13, pp 470 - 474 65 Gunther H., Schulze F (1985), "Influence of age on ther resistance of calves to Echerichia coli diarrhoea", Monatsshefte fur Veterina medzin, 40(12), pp 419 - 422 66 Ho W S., Tan L K., Ooi P T., Yeo C C., Thong K L (2013), “Prevalence and characterization of verotoxigenic - Escherichia coli isolates from pigs in Malaysia”, BMC Vet Res 67 Janke B H., Francis D H., Collins J E., Libal M C., Zeman D H., Johson D D (1989), "Attaching and effacing Escherichia coli infections in calves, pigs, lambs, and dogs", Journal of Veterinary Diagnostic, 19(9), pp - 11 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 74 68 Janke B H., Francis D H., Collins J E., Libal M C., Zeman D H., Johnson D D., Neiger R D (1990), "Attaching and effacing Escherichia coli infections as a cause of diarrhoea in young calvesa", Journal of the Americal Veterinary Medical Association, 196(6), pp 897 - 901 69 Jones G W., Rutter J M (1974), “Contribution of the K88 antigen of Escherichia coli to enteropathogenicity; protection against disease by neutralizing the adhesive properties of K88 antigen”, Am J Clin Nutr., 27(12), pp 1441 - 1449 70 Kempf I., Fleury M A., Drider D., Bruneau M., Sanders P., Chauvin C., Madec J Y., Jouy E (2013), “What we know about resistance to colistin in Enterobacteriaceae in avian and pig production in Europe?”, Int J Antimicrob Agents, pp 379 - 383 71 Koláčková I., Házová K., Skočková A., Karpíšková R (2014), “Occurrence of Shiga toxigenic Escherichia coli strains in pigs and cattle at slaughterhouses in the Czech Republic in 2013”, Klin Mikrobiol Infekc Lek., 20(2), pp 36 - 39 72 Kolenda R., Burdukiewicz M., Schierack P (2015), “A systematic review and meta-analysis of the epidemiology of pathogenic Escherichia coli ofcalves and the role of calves as reservoirs for human pathogenic E coli”, Front Cell Infect Microbiol, 12(5), pp 23 73 Minhew (1978), Development of a Universal Intimin Antiserum and PCR Primers American Society for Microbiology, pp 3822 74 Nimri L., Abu Al-Dahab F., Batchoun R (2014), “Foodborne bacterial pathogens recovered from contaminated shawarma meat in northern Jordan”, J Infect Dev Ctries., (11), pp 1407 - 1414 75 Odwar J A., Kikuvi G., Kariuki J N., Kariuki S (2014), “A cross-sectional study on the microbiological quality and safety of raw chicken meats sold in Nairobi, Kenya”, BMC Res Notes., 10, pp 507:627 76 Orskov F (1978), Vilurence Factor of the baterial cell surface, J Infect., pg 630 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 75 77 Otoi T., Toujou H., Hasimoto M (1990), "Outbreak of K99 + Escherichia coli infection in calves and a serogolical survey", Journal of the Japan Veterinary Medical Associaction, 43(3), pp 193 - 196 78 Picco N Y., Alustiza F E., Bellingeri R V., Grosso M C., Motta C E., Larriestra A J., Vissio C., Tiranti K I., Terzolo H R., Moreira A R., Vivas A B (2015), “Molecular screening of pathogenic Escherichia coli strains isolated from dairy neonatal calvesin Cordoba province, Argentina”, Rev Arqent Microbiol, 47(2), pp 95 - 102 79 Rajkhowa S., Sarma D K (2014), “Prevalence and antimicrobial resistance of porcine O157 and non-O157 Shiga toxin-producing Escherichia coli from India”, Trop Anim Health Prod., 46(6), pp 931 - 937 80 Sokol A., Mikula I., Sova C (1981), Neonatal Coli Infencie, ich Laboratorina doanostina aprevencia UOLV-Kosice, pp 40 - 45 81 Staji H., Tonelli A., Javaheri-Vayeghan A., Changizi E., Salimi-Bejestani M R (2015), "Distribution of Shiga toxin genes subtypes in B1 phylotypes of Escherichia coli isolated fromcalves suffering from diarrhea in Tehran suburb using DNA oligonucleotide arrays”, Iran J Microbiol, 7(4), pp 191 - 197 82 Sydney M., Finegold, Elen jo Baron (1986), "Bailey and Scotts, Diagnostic Microbiology", Seventh edition, pp 398 - 421 83 Tominaga K, Nakazawa M, Haritani H (1989), "Biochemical characteristics and pathogenicity of attaching and effacing Escherichia coli (AEEC) isolated from calves with diarrhoea", Journal of the Japan Veterinary Medical Association, 42 (11), pp 775 - 779 84 Zarfel G., Galler H., Luxner J., Petternel C., Reinthaler F F., Haas D., Kittinger C., Grisold A J., Pless P., Feierl G (2014), “Multiresistant bacteria isolated from chicken meat in Austria”, Int J Environ Res Public Health, 11(12), pp 12582 - 12593 85 Zhang S H., Lv X., Han B., Gu X., Wang P F., Wang C., He Z (2015), “Prevalence of antibiotic resistance genes in antibiotic-resistant Escherichia coli isolates in surface water of Taihu Lake Basin, China”, Environ Sci Pollut Res Int Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 76 PHỤ LỤC ẢNH Nghé bị tiêu chảy xã Tân Liên, Cao Lộc, Lạng Sơn Nghé bị tiêu chảy xã Bình Trung, Cao Lộc, Lạng Sơn Nghé bị tiêu chảy xã Gia Cát, Cao Lộc, Lạng Sơn Nghé bị tiêu chảy xã Song Giáp, Cao Lộc, Lạng Sơn Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 77 Thu thập mẫu phân bê, nghé tiêu chảy Mẫu phân bê, nghé bảo quản để xét nghiệm thùng đá Vi khuẩn E coli môi trường thạch MacConkey Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 78 Khuẩn lạc E coli phân lập môi trường thạch MacConkey Phản ứng Indol dương tính vi khuẩn E coli Kết thử kháng sinh đồ vi khuẩn E coli Vi khuẩn E coli lên men đường glucoza môi trường thạch TSI (ống nghiệm số 2, 3, 41, ) Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 79 PHỤ LỤC THỐNG KÊ Bảng 3.2 Tỷ lệ bê, nghé tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi Chi-Square Test: Mắc tiêu chảy Không mắc tiêu chảy Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Mắc tiêu chảy 41 26,24 8,300 Không mắc tiêu chảy 129 143,76 1,515 36 37,51 0,061 207 205,49 0,011 243 15 28,25 6,213 168 154,75 1,134 183 Total 92 504 596 Total 170 Chi-Sq = 17,235 DF = P-Value = 0,000 Two-Sample T-Test and CI: Chết tiêu chảy Mắc tiêu chảy không chết Two-sample T for Chết tiêu chảy vs Mắc tiêu chảy không chết Chết tiêu chả Mắc tiêu chảy kh N 3 Mean 2,67 28,0 StDev 3,06 11,3 SE Mean 1,8 6,5 Difference = mu (Chết tiêu chảy) - mu (Mắc tiêu chảy không chết) Estimate for difference: -25,3333 95% CI for difference: (-44,0500 -6,6166) Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 80 T-Test of difference = (vs not =): T-Value = -3,76 Value = 0,020 DF = Both use Pooled StDev = 8,2563 Bảng 3.3 Tỷ lệ bê, nghé mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ Chi-Square Test: Mắc tiêu chảy Không mắc tiêu chảy Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Mắc tiêu chảy 31 20,34 5,583 Không mắc tiêu chảy 103 113,66 0,999 22 24,29 0,216 138 135,71 0,039 160 13 17,76 1,277 104 99,24 0,229 117 26 29,60 0,439 169 165,40 0,079 195 Total 92 514 606 Total 134 Chi-Sq = 8,859 DF = P-Value = 0,031 Two-Sample T-Test and CI: Chết tiêu chảy Mắc tiêu chảy không chết Two-sample T for Chết tiêu chảy vs Mắc tiêu chảy không chết N Mean Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN StDev SE Mean http://www.lrc.tnu.edu.vn P- 81 Chết tiêu chả Mắc tiêu chảy kh 4 2,00 21,00 1,83 6,16 0,91 3,1 Difference = mu (Chết tiêu chảy) - mu (Mắc tiêu chảy không chết) Estimate for difference: -19,0000 95% CI for difference: (-26,8657 -11,1343) T-Test of difference = (vs not =): T-Value = -5,91 PValue = 0,001 DF = Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ...ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHÙNG THU HƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI GÂY TIÊU CHẢY Ở BÊ, NGHÉ TẠI HUYỆN CAO LỘC, TỈNH LẠNG... vi khuẩn E coli gây tiêu chảy bê, nghé huyện Cao Lộc, tỉnh Lạng Sơn biện pháp phòng trị Mục tiêu nghiên cứu - Xác định số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy bê, nghé nuôi số xã thuộc huyện Cao. .. gây bệnh E coli hội chứng tiêu chảy bê, nghé nuôi số xã thuộc huyện Cao Lộc, tỉnh Lạng Sơn - Kết nghiên cứu đề tài sở khoa học phục vụ cho nghiên cứu hội chứng tiêu chảy bê, nghé, biện pháp phòng