Header Page of 133 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA SINH HỌC ỨNG DỤNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN MÃ SỐ: 304 ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ SỬ DỤNG CHẾ PHẨM SINH HỌC TRONG SẢN XUẤT GIỐNG TÔM CÀNG XANH THEO QUI TRÌNH NƯỚC XANH CẢI TIẾN SV THỰC HIỆN CHÂU HỐT SEN MSSV: 06803033 LỚP: NTTS K1 Cần Thơ, 2010 Footer Page of 133 Header Page of 133 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA SINH HỌC ỨNG DỤNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN MÃ SỐ: 304 ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ SỬ DỤNG CHẾ PHẨM SINH HỌC TRONG SẢN XUẤT GIỐNG TÔM CÀNG XANH THEO QUI TRÌNH NƯỚC XANH CẢI TIẾN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Ths NGUYỄN LÊ HOÀNG YẾN Cần Thơ, 2010 Footer Page of 133 SV THỰC HIỆN CHÂU HỐT SEN MSSV: 06803033 LỚP: NTTS K1 Header Page of 133 XÁC NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Luận văn: Đánh giá hiệu sử dụng chế phẩm sinh học sản xuất giống tôm xanh (Macrobrachium rosenbergii) theo qui trình nước xanh cải tiến Sinh viên thực hiện: CHÂU HỐT SEN Lớp: Nuôi Trồng Thủy Sản K1 Đề tài hoàn thành theo yêu cầu cán hướng dẫn hội đồng bảo vệ luận văn đại học Khoa Sinh học ứng dụng ˗ Đại học Tây Đô Cần Thơ, ngày 22 tháng 07 năm 2010 Cán hướng dẫn Sinh viên thực Châu Hốt Sen Ths Nguyễn Lê Hoàng Yến CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG …………………………… Footer Page of 133 Header Page of 133 CHƯƠNG ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Giới thiệu Đồng Bằng Sông Cửu Long (ĐBSCL) nơi có tiềm lớn cho nuôi trồng thủy sản nước ngọt, diện tích nuôi tôm xanh (TCX) tỉnh (ĐBCL) tăng nhanh năm gần đạt gần 5.000 ha, tăng gấp 10 lần so với thời điểm năm trước (TTXVN, 11/1/2008) Diện tích tăng nhanh nhờ chủ động nguồn giống với kỹ thuật sinh sản nhân tạo chưa đáp ứng nhu cầu số lượng giống chất lượng Hiện nhu cầu phát triển nguồn lợi thủy sản đặc biệt nghề nuôi TCX đà phát triển mạnh nên nhu cầu giống tăng Do việc sản xuất giống tôm xanh nhân tạo chất lượng yếu tố cần thiết phù hợp với nhu cầu nuôi TCX Trong vài năm gần việc sản xuất giống TCX theo qui trình nước xanh cải tiến áp dụng phổ biến việc quản lý môi trường gặp khó khăn hàm lượng đạm nước tăng cao làm ảnh hưởng đến tỉ lệ sống ấu trùng hiệu sản xuất Do đó, việc sử dụng chế phẩm sinh học nhằm để trì chất lượng nước cho bể ương đạt hiệu cao vấn đề cần giải sản xuất giống tôm xanh ĐBSCL Hiện việc sử dụng chế phẩm sinh học (CPSH hay men vi sinh), nuôi trồng thủy sản hướng có ý nghĩa thực tiễn khía cạnh bảo vệ môi trường đảm bảo hiệu sản xuất, từ góp phần đưa nghề nuôi thủy sản phát triển bền vững Tuy nhiên việc sử dụng CPSH ương ấu trùng tôm xanh đến chưa quan tâm nghiên cứu nhiều nên việc sử dụng CPSH trại giống tôm xanh ĐBSCL hạn chế Theo nghiên cứu Lê Đình Duẩn ctv, (2007), việc nuôi thử nghiệm tôm sú chế phẩm sinh học cho kết khả quan, chế phẩm làm tăng khả phân giải chất hữu cơ, làm ổn định môi trường nước mà tăng suất gấp lần so với nghiệm thức đối chứng Vì vậy, đề tài "Đánh giá hiệu sử dụng chế phẩm sinh học sản xuất giống tôm xanh (Macrobrachium rosenbergii) theo qui trình nước xanh cải tiến" thực 1.2 Mục tiêu đề tài Đánh giá hiệu sử dụng chế phẩm sinh học quản lý môi trường bể ương, nhằm góp phần bước hoàn thiện qui trình sản xuất giống TCX đạt hiệu cao đưa vào thực tiễn sản xuất 1.3 Nội dung đề tài Đánh giá hiệu sử dụng loại chế phẩm sinh học sản xuất giống tôm xanh đến tỷ lệ sống tăng trưởng ấu trùng theo qui trình nước xanh cải tiến Footer Page of 133 Header Page of 133 CHƯƠNG LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược đặc điểm sinh học tôm xanh 2.1.1 Vị trí phân loại Theo Đặng Ngọc Thanh csv (2001), tôm xanh có vị trí phân loại sau: Ngành: ARTHOROPODA Lớp: CRUSTACAE Bộ: DECAPODA Phân bộ: CARIDEA Họ: PALAEMONIDAE Giống: Macrobrachium Loài: Macrobrachium rosenbergii De Man 1879 2.1.2 Phân bố Ở Việt Nam chúng phân bố tự nhiên vùng nước lợ (độ mặn – 20‰) phía Nam từ Nha Trang trở vào tới Đồng Bằng Nam Bộ; Trên giới, chúng phân bố tự nhiên vùng Ấn Độ, Tây Thái Bình Dương từ Ấn Độ đến Đông Dương, Philippine, New Guinea, Bắc Autralia (Đặng Ngọc Thanh csv, 2001) 2.1.3 Vòng đời tôm xanh Vòng đời tôm xanh có giai đoạn bao gồm trứng, ấu trùng, hậu ấu trùng tôm trưởng thành (Nguyễn Thanh Phương csv, 2003; Nandlal csv, 2005) Thời gian tốc độ tăng trưởng giai đoạn chịu ảnh hưởng môi trường, đặc biệt nhiệt độ nước thức ăn (Nandlal et al, 2005) Tôm xanh trưởng thành sống chủ yếu nước Khi thành thục tôm bắt cặp, để trứng dính vào chân bụng tôm mẹ, tôm mẹ ôm trứng di cư vùng cửa sông nước lợ (6 – 18‰) để nở Theo Nandlal et al (2005) Ấu trùng nở sống phù du trải qua 11 lần biến thái để trở thành hậu ấu trùng (postlarvae), (xem hình bảng 1) Postlarvae có xu hướng tiến vào vùng nước sông rạch, ruộng, ao hồ…, chúng sống lớn lên, trưởng thành chúng lại di cư vùng nước lợ nơi có độ mặn thích hợp để sinh sản vòng đời tiếp tục (Nguyễn Thanh Phương csv, 2003) Hình 2.1: Các giai đoạn phát triển ấu trùng tôm xanh (Nguồn: Takuji Fujimura, trích Nandlal et al 2005) Giai đoạn Footer Page of 133 Giai đoạn Giai đoạn Header Page of 133 Giai đoạn Giai đoạn Giai đoạn Giai đoạn Giai đoạn Giai đoạn Giai đoạn 10 Giai đoạn 11 Tôm bột (Postlarvae) Bảng 2.1: Đặc điểm giai đoạn ấu trùng tôm xanh (Uno Soo, 1969, trích dẫn Nguyễn Thanh Phương csv, 2003) Giai đoạn ấu trùng Ngày tuổi I Không có cuống mắt II Có cuống mắt III 3–4 Có diện Uropods IV 4–6 Có gai lưng Footer Page of 133 Đặc điểm nhận dạng Header Page of 133 V 5–8 Các telson hẹp có hình thon dài VI – 10 Có diện núm chân bụng VII 11 – 17 Các chân bụng chẻ đôi VIII 13 – 20 Các chân bụng có tơ cứng IX 15 – 22 Nhánh chân chân bụng xuất X 17 – 23 Có – chủy XI 23 – 35 Xuất chủy PL 23 – 35 Có tập tính giống tôm trưởng thành 2.1.4 Sức sinh sản tôm xanh Tôm xanh thành thục lần đầu từ 15 – 35g vòng – tháng Khi thành thục, tôm bắt cặp, đẻ trứng trứng dính vào cặp chân bụng đầu tôm mẹ Tôm mẹ ôm trứng di cư vùng cửa sông nước lợ (6-18‰) để trứng nở (Nguyễn Thanh Phương csv, 2003) Theo Nguyễn Thanh Phương csv, (2003) sau giao vỹ đẻ trứng, phải 17 – 23 ngày trứng tôm phát triển đầy đủ, trứng phát triển tốt nhiệt độ nước 28 – 30°C Trong thời gian này, chân bơi tôm mẹ hoạt động liên tục Những trứng ban đầu có dạng elip màu cam tươi sáng, sau chuyển sang màu nâu sậm vài ngày sau trứng nở Lượng trứng tôm mẹ phụ thuộc vào kích cỡ dao động từ 3.000 đến 80.000 trứng/tôm mẹ 2.1.5 Đặc điểm sinh trưởng yêu cầu môi trường sống 2.1.5.1 Đặc điểm sinh trưởng Trong trình lớn lên, tôm trải qua nhiều lần lột xác Chu kỳ lột xác tôm tùy thuộc vào nhiều yếu tố kích cỡ tôm, nhiệt độ, thức ăn, giới tính điều kiện sinh lý chúng Tôm nhỏ có tốc độ tăng trưởng nhanh tôm lớn tôm đực lớn nhanh tôm (Nguyễn Thanh Phương csv, 2003) 2.1.5.2 Nhu cầu dinh dưỡng TCX ăn tạp thiên động vật nguyên sinh động vật, giun nhiều tơ, giáp xác côn trùng, nhuyễn thể, mảnh cá vụn Nhu cầu chất đạm: tôm giống khoảng 27 – 35% tôm bố mẹ khoảng 40 – 45% Nhu cầu chất béo : hàm lượng lipid thích hợp cho tôm khoảng – 7,5% Nhu cầu chất bột đường: khoảng 40% Nhu cầu vitamin khoáng: Vitamin C khoảng 200 – 500 mg/kg thức ăn Các chất khoáng cần thiết Canxi, Phosphorus (Nguyễn Thanh Phương csv, 2003) Footer Page of 133 Header Page of 133 2.1.5.3 Yêu cầu môi trường sống Bảng 2.2: Điều kiện môi trường thích hợp cho phát triển ấu trùng tôm xanh (Boyd et al 2000) Các tiêu môi trường Phạm vi thích hợp Nhiệt độ (oC) 28 – 31 pH 7,0 – 8,5 DO (ppm) Độ mặn (‰) Độ (cm) Độ kiềm (ppm) Độ cứng tổng cộng (ppm) 3–7 < 12 25 – 40 20 – 60 30 – 150 NH3 – N (ppm) < 0,3 NO2 – N (ppm) NO3 – N (ppm) < 2,0 < 10 Phạm vi gây chết (L) gây sốc (S) cho ấu trùng < 12 (L) < 19 (S) > 35 (L) > 9,5 (S) (S) (L) > 0,5 pH 9,5 (S) > 1,0 pH 9,0 (S) > 2,0 pH 8,5 (S) - 2.2 Tình hình sản xuất giống tôm xanh nước Tôm xanh đối tượng nuôi quan trọng nhiều nước giới với nhiều hình thức nuôi khác Tuy nhiên, hình thức nuôi thâm canh phổ biến, suất trung bình từ 900 – 4.500 kg/ha/năm (New, 1995) Bảng 2.3: Năm nước dẫn đầu sản lượng tôm nước năm 2001, (Fao, 2003) STT Quốc gia Trung Quốc Việt Nam Ấn Độ Thái Lan Bangladesh Sản lượng (Tấn) 128.338 28.000 24.230 12.067 7.000 Ghi Chủ yếu tôm xanh Lịch sử nghề nuôi năm 1962 Ling lần thành công ương nuôi mô tả giai đoạn phát triển ấu trùng TCX Từ tình hình tôm xanh phát triển có qui trình áp dụng rộng rãi: nước hở Ling (1969), Aquacop (1977) đề xuất Nước kín Sandifer (1977), Menasveta (1980) Singholka (1982) nghiên cứu thành công Nước xanh bắt đầu nghiên cứu Fujimura (1966), nước xanh cải tiến Ang đề xuất từ năm 1986 (Trích dẫn Cù Văn Thành, 2009) Footer Page of 133 Header Page of 133 Theo Nguyễn Việt Thắng (1993), thí nghiệm qui trình, quy trình nước xanh, nước hở, nước kín, kết tỉ lệ sống ấu trùng đạt sau, 40%, 35% 38,8% (trích dẫn Trần Thị Thanh Hiền, 2003) Theo Singholka (1982), trước quy trình "nước xanh" sử dụng phổ biến Thái Lan để ương ấu trùng tôm xanh, đến năm đầu thập niên 80, trại sản xuất giống chuyển sang sử dụng quy trình "nước trong" nâng tổng sản lượng nước 85,8 triệu Postlarvae vào năm 1982 Nuôi TCX nghề nuôi truyền thống Việt Nam, đặc biệt vùng ĐBSCL Việc nghiên cứu sản xuất giống bắt đầu trừ năm đầu thập niên 80 với qui trình nước hở tuần hoàn (Nguyễn Thanh Phương Trần Ngọc Hải, 2004) Trại sản xuất giống Vũng Tàu Tổ chức Nông Lương Quốc tế (FAO) đầu tư xây dựng chưa hoàn thành Năm 1987 Chính phủ Úc thông qua Ủy ban Quốc tế sông Mê-Kông tài trợ khôi phục hoàn thành trại tôm Vũng Tàu (trích dẫn Trần Thị Cẩm Hồng, 2008) Năm 1998 Viện Hải Sản – Khoa Nông Nghiện - Trường Đại Học Cần Thơ tiến hành nghiên cứu ương ấu trùng TCX ứng dụng mô hình “nước xanh cải tiến” bước đầu cho kết tốt triển khai số tỉnh ĐBSCL (Nguyễn Thanh Phương Trần Ngọc Hải, 2004) Thực tế cho thấy phát triển số lượng trại giống sản lượng tôm xanh giống ĐBSCL thời gian gần chủ yếu từ qui trình nước xanh cải tiến Năm 2002, nước có 54 sở sinh sản nhân tạo TCX với sản lượng 115 triệu tôm giống, tỉnh ĐBSCL có 49 sở, sản xuất 76 triệu tôm giống Đến năm 2003, ĐBSCL có 70 trại sản xuất giống TCX sản xuất khoảng 92 triệu TCX giống Tỉnh Cần Thơ (cũ), sản xuất 40 triệu con, An Giang sản xuất 13 triệu giống, Hải Phòng 15 triệu con, Ninh Bình triệu (Bộ thủy sản, 2003) Theo Lê Xuân Sinh (2006), khảo sát 31 trại sản xuất giống ĐBSCL tập trung tỉnh Cần Thơ, Đồng Tháp, Hậu Giang, An Giang, Bến Tre, Trà Vinh, Vĩnh Long sản xuất giống tôm xanh ĐBSCL, có 21 trại sản xuất với qui trình nước xanh cải tiến (67,7%) 10 trại sản xuất với quy trình khác nước trong, nước hở (32,3%) Tuy nhiên, tỉ suất lợi nhuận mang lại từ qui trình nước xanh cải tiến thấp (0,6) so với quy trình khác (1,2), nên để nâng cao lợi nhuận, nhiều trại sản xuất chuyển sang áp dụng qui trình nước hở hay quy trình kết hợp khác (Lê Xuân Sinh, 2008) 2.3 Một số vấn đề liên quan đến ứng dụng vi sinh nuôi trồng thủy sản 2.3.1 Sơ lược chế phẩm sinh học Chế phẩm sinh học sản phẩm có nguồn gốc sinh vật, kể vi sinh vật, thực liệu lấy từ nấm, vi khuẩn, virus nguyên sinh động vật, độc tố có nguồn gốc động vật thực vật, với mục đích để chẩn đoán, phòng bệnh, chữa bệnh, tăng sức đề kháng tình trạng sức khỏe cho vật nuôi thủy sản, cải thiện chất lượng nước nuôi trồng thủy sản (Bộ Thủy sản, 2002) Sử dụng chế phẩm sinh học qui trình nuôi thủy sản xem tiến khoa học - kỹ thuật, có ý nghĩa sâu xa tạo an toàn môi trường thực phẩm cho người tiêu dùng, nhằm giúp cho nghề nuôi tôm, cá phát triển ổn định bền vững Do việc cải thiện chất lượng nước CPSH để phòng bệnh cho tôm cá việc làm thiết thực cần khuyến cáo để áp dụng thời gian Footer Page of 133 Header Page 10 of 133 tới nhằm giúp cho sản phẩm thủy sản đạt tiêu chuẩn an toàn vệ sinh thực phẩm theo mục tiêu ngành thủy sản đề (TT NCKH nông vận, 09/01/2009) Các lợi ích mang lại sử dụng chế phẩm sinh học gồm nhiều điểm sau đây: làm ổn định chất lượng nước, nâng cao sức khoẻ sức đề kháng tôm Giảm thiểu ô nhiễm môi trường, nâng cao hiệu sử dụng thức ăn Làm tăng hiệu sử dụng thức ăn, tôm mau lớn, rút ngắn thời gian ương, tăng tỉ lệ sống, giảm chi phí thay nước, giảm chi phí sử dụng thuốc kháng sinh hóa chất việc điều trị bệnh (Nguyễn Thành Phước, 2007) Theo FAO (2000) xác nhận việc sử dụng vi sinh vật hữu ích phương pháp để cải thiện chất lượng nuôi trồng thủy sản (Trích dẫn Nguyễn Hoàng 2009) Cải thiện chất lượng nước vai trò quan trọng vi sinh vật hữu ích nuôi trồng thủy sản Vì thế, Verschuere (2000), nghiên cứu công bố vi khuẩn Bacillus sp đóng vai trò quan trọng việc cải tiến chất lượng nước, vi khuẩn Bacillus sp đạt hiệu cao việc chuyển đổi vật chất hữu chất hòa tan Những lợi ích chất bổ sung gồm việc cải thiện dinh dưỡng thức ăn, bổ sung enzym tiêu hóa, ức chế vi sinh vật gây bệnh, hoạt hóa chất gây đột biến, yếu tố kích thích tăng trưởng, tăng cường đáp ứng miễn dịch (Trích dẫn Cù Văn Thành, 2009) Về hình thức, men vi sinh có dạng, dạng nước dạng bột (hay dạng viên) Thông thường, dạng bột có mật số vi khuẩn có lợi cao so với dạng nước Về chủng loại, men vi sinh có loại, loại dùng để xử lý môi trường (loài vi khuẩn chủ yếu Bacillus sp) loại trộn vào thức ăn cho tôm cá (loài vi khuẩn chủ yếu Lactobacillus) 2.3.2 Cơ chế tác động vi sinh vật môi trường nước đường ruột Sử dụng probiotic nuôi trồng thủy sản hạn chế sử dụng lượng lớn chất kháng sinh, vi sinh vật cạnh tranh mạnh mẽ chất dinh dưỡng, lượng nơi bám với loài vi khuẩn có hại tảo độc Chuyển hóa chất hữu thức ăn dư thừa, xác tảo, cặn bã thành CO2 nước; chuyển chất độc hại NH3, NO2thành chất không độc NO3-, NH4+ Hạn chế vi khuẩn có hại đường ruột giúp chuyển hóa hiệu thức ăn Tiết số chất kháng sinh, enzyme hay hóa chất để kìm hãm hay tiêu diệt mầm bệnh tảo độc (TT NCKH nông vận, 2009) 2.3.3 Tình hình sử dụng chế phẩm sinh học nuôi trồng thủy sản Ở nước ta, việc ứng dụng vi sinh mẻ xu hướng phát triển ngày nhanh với nhiều loại chế phẩm sinh học đời có nguồn gốc nước Tính đến tháng 6/2005, có 200 thương hiệu chế phẩm sinh học vitamin bán thị trường nước ta (Tăng Thị Chính csv, 2005) Hiện nay, mô hình nuôi tôm ứng dụng chế phẩm sinh học phát triển phổ biến ĐBSCL Nguyễn Thị Đẹp (2001), kết hợp tảo CPSH cho hiệu cao đến 94% sản xuất giống TCX Ở Đồng Tháp, việc sử dụng men Eco-tab sản xuất giống TCX mô hình nước ứng dụng tỉ lệ sống 30% (Trần Thị Cẩm Hồng, 2008) Đặng Thị Hoàng Oanh csv, (2000), tìm hiểu tác dụng men vi sinh Bio-Dream lên yếu tố vô sinh hữu sinh ương ấu trùng TCX Theo nghiên Footer Page 10 of 133 10 Header Page 16 of 133 3.3.5 Hàng ngày theo dõi hoạt động ấu trùng sau • Quan sát biến thái (LSI ) ấu trùng ngày/lần Số lượng mẫu 30 LSI = Σ(Ai)/i Trong : LSI : Là số biến thái (% giai đoạn ấu trùng tồn thời điểm thu mẫu quan sát) Ai : Giai đoạn ấu trùng thứ i • Đo chiều dài ấu trùng ngày/lần Số lượng mẫu 30 L = Σ(Li)/i Trong : L: Là chiều dài ấu trùng (mm) Li : Là chiều dài ấu trùng thứ i (từ mút chủy đến mút đốt đuôi) 3.3.6 Thu phân tích mẫu vi khuẩn 3.3.6.1 Phương pháp thu mẫu Mẫu nước thu ống nghiệm tuyệt trùng, cách mặt nước 20 – 30cm Sau sử dụng CPSH 24 Dùng phương pháp pha loãng cấy môi trường agar NA+ TCBS để xác định mật độ vi khuẩn tổng cộng vi khuẩn Vibrio spp 3.3.6.2 Phương pháp xác định mật độ vi khuẩn Chuẩn bị ống nghiệm chứa 9mL nước muối sinh lý (0,85%) tiệt trùng (1210C 15 – 20 phút) để pha loãng mẫu Dùng pipet hút mL mẫu nước cho vào ống nghiệm chứa mL nước muối sinh lý tiệt trùng, trộn đề máy Sau mẫu có độ pha loãng 10-1 Từ mẫu dùng pipet hút mL dung dịch cho vào ống nghiệm thứ chứa mL nước muối sinh lý tiệt trùng, ta độ pha loãng 10-2 Tiếp tục từ mẫu dùng pipet hút mL dung dịch cho vào ống nghiệm thứ chứa mL nước muối sinh lý tiệt trùng, ta độ pha loãng 10-3 mL Mẫu nước Footer Page 16 of 133 mL mL mL mL mL 10-1 10-2 10-3 16 Header Page 17 of 133 Sau dùng micropipet hút 0,1 mL dung dịch từ mẫu nước ban đầu cho vào đĩa môi trường NA+ TCBS dùng que thủy tinh tán đến mẫu khô đánh dấu Làm lại tương tự mẫu nước pha loãng Mẫu ủ tủ ấm 24 đem đọc kết “các thao tác thực điều kiện vô trùng” Những đĩa có số khuẩn lạc từ 25 – 250 chọn để tính kết theo công thức Số tế bào/mL (CFU/mL)= Số khuẩn lạc x độ pha loãng x 10 (CFU : Colony Forming Unit), (Berygey, 2000) 3.3.7 Thu hoạch Khi ấu trùng chuyển sang postlarvae 80% tiến hành thay nước hạ độ mặn, lần từ – 3‰ Đếm số lượng post larvae /bể, tính tỉ lệ chuyển postlarvae, tỉ lệ sống suất ương Số lượng postlarvae Tỉ lệ chuyển postlarvae(%) = x 100 Tổng số ấu trùng ban đầu Số lượng postlarvae + số ấu trùng lại Tỉ lệ sống(%) = x 100 Tổng số ấu trùng ban đầu Số lượng postlarvae thu Năng suất ương = Thể tích bể ương 3.3.8 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu xử lý chương trình Excell chương trình thống kê Anova nhân tố (phép thử Duncan SPSS) Footer Page 17 of 133 17 Header Page 18 of 133 CHƯƠNG KẾT QUẢ THẢO LUẬN 4.1 Các yếu tố môi trường 4.1.1 Nhiệt độ Nhiệt độ nước yếu tố quan trọng sản xuất giống tôm xanh (New and Valenti, 2000) Nhiệt độ ảnh hưởng đến trình trao đổi chất, khoảng cho phép nhiệt độ tăng trao đổi chất tăng Nhiệt độ ảnh hưởng đến dinh dưỡng hô hấp thủy sinh vật, nhiệt độ tăng hoạt tính enzyme tiêu hóa cường độ hô hấp tăng (Đỗ Thị Thanh Hương, 2006) Nhiệt độ có liên quan lớn đến lột xác phát triển ấu trùng tôm xanh (Nguyễn Thanh Phương csv, 2003) Trong khoảng thích hợp, nhiệt độ cao biến thái tốc độ tăng trưởng ấu trùng tôm xanh nhanh, phạm vi tối hảo cho phát triển ấu trùng tôm xanh 26-31oC Từ 24-26oC ấu trùng tôm xanh phát triển kém, thời gian biến thái dài, 33oC ấu trùng tôm xanh chết Sự thay đổi nhiệt độ gây nguy hiểm cho ấu trùng tôm xanh, nhiệt độ thay đổi đột ngột dù 1oC gây tình trạng bất ổn (New and Singholka, 1985) Bảng 4.1: Biến động nhiệt độ (oC) thí nghiệm Nghiệm thức Sáng Chiều NT1 (ĐC) 30,5 ± 0,2 32,5 ± 0,2 NT2 (Deocare®A ) 30,5 ± 0,0 32,5 ± 0,2 NT3 (Zimovac) 30,5 ± 0,0 32,5 ± 0,2 NT4 (EP-01) 30,4 ± 0,1 32,5 ± 0,2 Bảng 4.1 cho thấy nhiệt độ trung bình nghiệm thức ổn định, buổi sáng dao động từ 30,4oC-30,5oC buổi chiều ổn định 32,5oC, nghiệm thức biến động lớn nhiệt độ suốt thời gian ương Chứng tỏ thí nghiệm bố trí tương đối đồng Nhiệt độ nước nghiệm thức buổi sáng buổi chiều chênh lệch từ 2,0-2,1oC thời gian bố trí thí nghiệm vào tháng nắng nóng, với biến đổi khí hậu toàn cầu nên nhiệt độ nước nghiệm thức tương đối cao, nhiên nhiệt độ khoảng thích hợp Theo Nguyễn Thanh Phương csv, 2003), qui trình nước xanh cải tiến thường có nhiệt độ ổn định mức cao 1-2oC so với qui trình khác điều kiện trại ương Điều môi trường nước hệ thống có nhiều tảo vỏ Artemia giúp hấp thu nhiệt giữ nhiệt tốt so với hệ thống khác Như vậy, yếu tố nhiệt độ suốt thời gian ương tương đối thuận lợi cho phát triển ấu trùng tôm xanh 4.1.2 pH pH số đo đặc trưng độ axit (chua) độ kiềm (chát) nước Trong vùng pH cao thấp loài thủy động vật không sống được, tác động pH lên đời sống động vật thủy sinh có tính chất gián tiếp không theo phương thức trực tiếp (Lê Văn Cát csv, 2006) Theo Trương Quốc Phú (2006), pH cao hay thấp ảnh hưởng đến trình thẩm thấu tế bào, làm rối loạn trình trao đổi Footer Page 18 of 133 18 Header Page 19 of 133 muối - nước thể sinh vật với môi trường nước (trích dẫn Trần Thị Cẩm Hồng 2008) Theo Nguyễn Thanh Phương csv (2003) pH có ảnh hưởng lớn đến đời sống ấu trùng tôm xanh Theo William Robert (1997) pH thích hợp cho loài tôm, cá 6,5-9,0 New (1982) cho biết pH thích hợp cho ấu trùng tôm cang xanh 7,08,5, tác giả cho pH9,0 ảnh hưởng trực tiếp gián tiếp đến ấu trùng tôm xanh khí ammonia tăng (trích dẫn Trần Thị Cẩm Hồng 2008) Khi pH cao tính độc NH3 nhiều tăng tính hòa tan vào nước pH thấp làm mềm vỏ gây tổn thương đến mang tôm gây trở ngại cho việc lột xác (Nguyễn Việt Thắng, 1995) Điều quan trọng ngày, pH dao động không đơn vị (Nguyễn Thanh Phương csv, 2003) Bảng 4.2: Biến động trung bình pH thí nghiệm Nghiệm thức Sáng Chiều NT1 (ĐC) 8,0 ± 0,0 8,5 ± 0,0 NT2 (Deocare®A ) 8,0 ± 0,0 8,5 ± 0,0 NT3 (Zimovac) 8,0 ± 0,0 8,5 ± 0,0 NT4 (EP-01) 8,0 ± 0,0 8,5 ± 0,0 Trong thời gian thí nghiệm giá trị pH nghiệm thức có dao động, buổi sáng từ 7,5-8,0 buổi chiều từ 8,0-8,5 Kết ghi nhận (Bảng 4.2) cho thấy pH nằm khoảng thích hợp pH biến động ngày không đơn vị, điều kiện thuận lợi cho phát triển ấu trùng tôm cang xanh 4.1.3 Các yếu tố đạm a Đạm tổng số (TAN) Theo Nguyễn Việt Thắng (1993) lượng ammonia bể ương hình thành tăng lên phân hủy protein thức ăn dư thừa, sản phẩm thải Artemia, ấu trùng tôm Trong nước, ammonia phân chia thành dạng: NH3 NH4+, có dạng NH3 gây độc Sự phân chia phụ thuộc vào biến động pH Nếu tăng đơn vị pH tăng 10 lần tỉ lệ NH3 Theo ý kiến New Singholka (1982), mức độ gây độc NH3 1,8 mg/L mức độ ảnh hưởng 0,1 mg/L (Trích dẫn Dương Thị Diệu Hiền, 2000) Đối với qui trình không thay nước yếu tố đạm khó kiểm soát có ảnh hưởng lớn đến tỉ lệ sống ấu trùng tôm xanh TAN N-NO2Bảng 4.3: Hàm lượng đạm tổng số (TAN) Nitrite thí nghiệm Nghiệm thức NT1 (ĐC) Footer Page 19 of 133 TAN (mg/L) N-NO2- (mg/L) 1,04-2,08 0,7-1,13 19 Header Page 20 of 133 NT2 (Deocare®A ) NT3 (Zimovac) NT4 (EP-01) 0,83-1,42 0,33-0,49 0,5-1,0 0,15-0,33 0,75-1,25 0,24-0,58 Hàm lượng TAN trung bình nghiệm thức dao động từ 0,5 đến 2,08 mg/L Việc bổ sung chế phẩm sinh học vào bể ương ấu trùng tôm xanh có ảnh hưởng đến hàm lượng TAN Hàm lượng đạm tổng số nghiệm thức 2, 3, (bổ sung chế phẩm sinh học) dao động từ (0,15 đến 1,42mg/) thấp nhiều so với nghiệm thức (1,04 đến 2,08mg/), (không bổ sung chế phẩm sinh học) Kết cho thấy lợi ích việc bổ sung chế phẩm sinh học TAN thấp nghiệm thức (Zimovac 2g/m3) cao nghiệm thức (không bổ sung chế phẩm sinh học) Trong loại chế phẩm sinh học Zimovac chứa thành phần vi khuẩn chủ yếu Bacillus spp (phân giải vật chất hữu cơ) Nitrosomonas, Nitrobacter (chuyển hóa đạm), nên hàm lượng đạm tổng số thấp nhất, Deocare®A EP-01 có hàm lượng đạm tương đối nhau, Deocare®A chứa thành phần chủ yếu chiết xuất từ yuca shidigera (hấp thụ NH3) EP-01 chứa nhiều loại vi khuẩn, có vi khuẩn hỗ trợ đường ruột, vi khuẩn chuyển hóa đạm với mật độ thấp so với Zimovac b Nitrite (N-NO2-) Theo Trương Quốc Phú (2006) Nitrite khí độc thủy sinh vật, NO2- sinh từ NH4+ tác dụng vi khuẩn Nitrosomonas chuyển hóa thành NO3- tác dụng vi khuẩn Nitrobacter, (được trích dẫn Cù Văn Thành, 2009) Hàm lượng N-NO2- có khuynh hướng tăng dần cuối thí nghiệm, hàm lượng trung bình nghiệm thức dao động từ 0,15 đến 1,13mg/L Nghiệm thức không bổ sung chế phẩm sinh học có hàm lượng N-NO2- cao so với nghiệm thức lại Trong trình thí nghiệm theo qui trình nước xanh cải tiến, việc bổ sung loại chế phẩm sinh học khác nhằm góp phần kiểm soát hàm lượng N-NO2- tác dụng Nitrosomonas, Nitrobacter, chất chiết xuất từ yuca shidigera (hấp thụ NH3) loại vi khuẩn hỗ trợ đường ruột Lactobacillus spp, Bacillus spp Nhìn chung, yếu tố môi trường nghiệm thức có sử dụng chế phẩm sinh học ổn định tốt so với nghiệm thức không sử dụng chế phẩm sinh học Kết phù hợp với nghiêm cứu của, Trần Thị Cẩm Hồng, (2008) dao động từ 0,059 đến 0,429mg/L Cù Văn Thành, (2009) dao động từ 0,16 đến 0,47mg/L 4.2 Kết phân tích vi sinh Kiểm tra số lượng vi khuẩn môi trường nước ương, góp phần việc tìm hiểu khả chịu đựng nguyên nhân ảnh hưởng tỉ lệ sống ấu trùng (Nguyễn Lê Hoàng Yến, 1999) Theo Phạm Thị Tuyết Ngân (2007) hoạt động có lợi vi khuẩn thông qua số chế: cạnh tranh dinh dưỡng – lượng – nơi cưu trú, chuyển hóa vật chất hữu thành chất vô cơ, hạn chế vi khuẩn có lợi tiết số chất kháng thể hay enzyme (được trích dẫn Cù Văn Thành, 2009) Footer Page 20 of 133 20 Header Page 21 of 133 Theo khuyến cáo từ Bộ Thủy sản (2000) mật độ vi khuẩn tổng cộng môi trường nuôi thủy sản chấp nhận mức mật độ 106 CFU/mL nhằm hạn chế lây nhiễm vào động vật thủy sản trình ương nuôi Bảng 4.4: Mật độ vi khuẩn môi trường nước ương Trung bình Nghiệm thức Vk Tổng Cộng Vk Vibrio spp (CFU/mL) (CFU/mL) NT1 (ĐC) 0,2 x 105a 9,4 x 103 NT2 (Deocare®A ) 1,6 x 105b 0,73 x 103 NT3 (Zimovac) 4,1 x 105c 0,20 x 103 NT4 (EP-01) 1,9 x 105b 0,63 x 103 Mật độ vi khuẩn tổng cộng nghiệm thức thể qua Bảng (4.4) Kết phân tích mẫu nước ương ấu trùng tôm xanh cho thấy mật độ vi khuẩn tổng cộng cao nghiệm thức (bổ sung Zimovac) thấp nghiệm thức (không sử dụng chế phẩm sinh học) Mật số vi khuẩn tổng cộng nghiệm thức bổ sung chế phẩm sinh học có số lượng tăng cao khác biệt có ý nghĩa thống kê (p