TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH BM.CÔNG NGHỆ HÓA HỌC BÀI BÁO CÁO PHÂN TÍCH HÀM LƯỢNG MELANINE TRONG SỮA MÔN HÓA PHÂN TÍCH DỤNG CỤ Giáo viên hướng dẫn: Phùng Thị Cẩm Hồng Họ tên • • • • Đặng Đoàn Công Liêm Trần Lê Gia Linh Nguyễn Thị Minh Phương Trần Thị Như Phương MSSV • • • • 15139062 15139066 15139100 15139101 I.MỞ ĐẦU Có lẽ uống sữa biết lợi ích mà việc uống sữa mang lại cho sức khỏe người Sữa chứa nhiều thành phần khác nhau, bao gồm protein, lipid, đường lactose, chất khoáng, men hoạt chất sinh học khác Sữa bổ dưỡng mà có tác dụng giải độc Trong số thức ăn tự nhiên người sản phẩm mà chất cần thiết cho thể lại phối hợp cách hiệu sữa I.MỞ ĐẦU Chính nhờ giá trị dinh dưỡng mà sữa mang lại, với tiện lợi nên người ưa chuộng sử dụng ngày Nhưng gần việc tìm thấy Melamine, chất có hại cho sức khoẻ có sữa sản phẩm sữa bánh, kẹo… gây nhiều lo lắng cho người dân nhà quản lý Kiểm soát hàm lượng Melamine sữa sản phẩm từ sữa việc cần thiết để bảo vệ sức khoẻ người dân II.Tổng quan Melanine 1.Công thức Công thức cấu tạo Cấu trúc không gian II.Tổng quan Melanine Melanine gì? Melamine chất hữu cơ, màu trắng pha lê, khó hòa tan nước Tên khoa học melamine 1,3,5-triazine-2,4,6-triamine, với cấu trúc hóa học gồm nguyên tử carbone, nguyên tử hydrogen nguyên tử nitrogen Trọng lượng phân tử melamine 126; đó, 66% nitrogen Công thức tổng quát: C3H6N6 II.Tổng quan Melanine Trong công nghiệp, melanine dùng để sản xuất: • • • • Nhựa melanine (kết hợp với formaldehyde), bền với nhiệt Bọt melanine, chất trùng hợp dùng để tẩy rửa, làm Chất chống cháy Là thành phần sắt chất vàng 150, chất màu mực in chất dẻo • Sử dụng sản xuát bêtông nhằm làm giảm hàm lượng nước, tăng khả chịu lực II.Tổng quan Melanine Trong nông nghiệp, melanine dùng để chế tạo phân bón, thươc trừ sâu cyromazine; melanine có mặt thuốc có gốc asrenic dùng điều trị xoắn trùng châu Phi (trypanosomiasis) Melanine dùng nguồn nitơ phi protein cho bò từ năm 1958, nhiên đến 1078 không dùng thủy phân chậm không hoàn toàn II.Tổng quan Melanine Sự đời melanine phương pháp tổng hợp melanine Melamin Liebig tổng hợp lần vào năm 1834 Đầu tiên canxi cyanamid chuyển thành dicyandiamid sau đun nóng đến nhiệt độ nóng chảy để tạo thành melamin Tuy nhiên, quy trình sản xuất melamin công nghiệp dùng urê theo phương trình phản ứng sau: (NH2)2CO → C3H6N6 + NH3 + 3CO2 II.Tổng quan Melanine Phản ứng diễn giải theo hai bước sau: Đầu tiên urê phân hủy tạo thành axit cyanic ammoni, phản ứng thu nhiệt: (NH2)2CO → HCNO + NH3 Sau axit cyanic polyme hóa tạo thành melamin khí carbon dioxit: HCNO → C3H6N6 + CO2 Phản ứng sau tỏa nhiệt, xét toàn trình phản ứng thu nhiệt II PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MELAMINE TRONG SỮA Phương pháp xác định hàm lượng melamine sữa 1.1 Định tính Ban đầu họ cho acid hydrochloric vào sữa để đạm sữa kết tủa nhằm phòng ngừa gây ảnh hưởng đến trình giám định melamine Sau đó, thêm hạt nano vàng vào dung dịch sữa Khi khoảng cách hạt nano vàng dung dịch sữa tương đối xa, dung dịch có màu vàng chuyển thành màu xanh da trời hạt nano vàng đến gần Do melamine thay đổi khoảng cách hạt nano, tức khiến màu sắc dung dịch sữa thay đổi từ vàng sang xanh ngược lại Bởi ta cần nhìn xem sữa có đổi màu hay không để phán đoán xem có chứa chất độc hại không Bước cuối, thêm acid cyanuric vào dung dịch sữa để phản ứng hóa học xảy tạo nên chất kết tủa mà mắt thường thấy melamine Với phương pháp này, 15 phút hoàn toàn kiểm định melamine sữa Công thức Melamine acid cyanuaric II PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MELAMINE TRONG SỮA 1.2 Định lượng •Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC •Phương pháp xác định melamine sữa hệ LC-MSD lon trap •Phương pháp Kjedahl •Phương pháp DUMAS •Phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ •Trong phương pháp phương pháp sắc ký hiệu cao HPLC II PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MELAMINE TRONG SỮA Xác định Melamine sữa phương pháp sắc kí lỏng cao áp HPLC II PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MELAMINE TRONG SỮA 2.1 Hóa chất thuốc thử để nhận biết Melamine • • • • Chất chuẩn: Melamine (99,0% ) Dung môi: Methanol Dung môi rửa giải: Triluoroacetic Methanol Mẫu thử: sữa dạng bột dạng lỏng Nước sử dụng cho việc chuẩn bị pha động pha loãng lọc hệ thống Q-pod Millipore II PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MELAMINE TRONG SỮA 2.2 Hệ thống sắc kí- detector Đầu dò UV, cột C18 ( 150mm x 3.2mm ID, kích thước µm) Máy sắc kí lỏng cao áp II PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MELAMINE TRONG SỮA 2.3 Pha dung dịch • Dung môi: dung môi 50% methanol (về thể tích) chuẩn bị cách pha thể tích methanol nước • Dung dịch chuẩn Melamine: cân xác 100mg melamine vào bình định mức 100mL, hòa tan với methanol 50% cách rung bể rung siêu âm 30 phút Lên thể tích 100mL thu dung dịch có nông độ melamine 1000µgmL-1 Pha loãng 5mL melamine (1000 µgmL-1) 50 ml 50% methanol để nồng độ melamine 100 µgmL-1 Pha loãng tiếp 5mL melamine 100 µgmL-1 50 ml methanol 50% để nồng độ melamine 10 µgmL II PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MELAMINE TRONG SỮA 2.4 Chuẩn bị mẫu • Cho 10 ml (mẫu dạng lỏng) 1,0 g (mẫu khô) vào bình định mức 100 ml Mẫu pha với 10 ml dung dịch melamine 1000 µgmL-1, pha loãng với 50 ml dung dịch methanol 50% rung siêu âm 30 phút Sau làm lạnh nhiệt độ phòng, lên thể tích 100 ml dung dịch methanol 50% thu dung dịch hỗn hợp với nồng độ melamine 100 µgmL -1 • Cho dung dịch mẫu thu vào ống li tâm ly tâm ( ≥ 3200 rpm) lấy phần dung dịch phía ống (5 ml) chuyển sang bình định mức 50ml, lên thể tích 50 ml dung dịch methanol 50% Mẫu lọc qua lọc 0.45 µm (Acrodisc, 25mm, màng Nylon) Nghiên cứu dịch lọc lọc hấp thụ melamine mức sau: 22% (cho 1ml ban đầu), 10% (2 mL),