TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG GIÁO TRÌNH THỰC TẬP KIỂM NGHIỆM DƯỢC PHẨM (DÙNG CHO SINH VIÊN ĐẠI HỌC DƯỢC) Cần Thơ, năm 2015 MỤC LỤC Trang Bài Kiểm nghiệm nguyên liệu Calci clorid Bài Kiểm nghiệm viên nang Paracetamol 10 Bài Kiểm nghiệm thuốc tiêm Vitamin B12 13 Bài Kiểm nghiệm thuốc nhỏ mắt Neodex 17 Bài Kiểm nghiệm thuốc bột Pabemin 21 Bài Kiểm nghiệm viên nén sulfaguanidin 500 mg 27 Bài Kiểm nghiệm siro Theralen 30 Bài Kiểm nghiệm viên nén aspirin 33 Bài Kiểm nghiệm viên mật nghệ 35 NỘI QUI PHÒNG THỰC TẬP KIỂM NGHIỆM Sinh viên phải có mặt phòng thí nghiệm suốt buổi thực tập Ra phải xin phép giảng viên hướng dẫn Sinh viên đến trễ 15 phút xem vắng mặt, có lí đáng phải làm đơn xin thực tập bù vào buổi khác Sinh viên vắng 01 buổi thực tập bị cấm thi Nếu nghỉ có lí đáng, sinh viên phải làm đơn xin phép ghi thật rõ ràng lí (việc gì? đâu? thời gian nào?) kèm giấy tờ xác minh lí phải trực tiếp đến gặp giảng viên học thực hành tổ khác để giải trình lí xin lịch học bù Mỗi sinh viên nghỉ/ đổi 01 buổi thực hành Nếu xếp học được, sinh viên xin làm đơn xin tạm dừng học bảo lưu kết học tập để giải công việc không bị cấm thi Những trường hợp sau không chấp nhận vắng có phép, không thực tập bù bị cấm thi: - Nghỉ học không viết đơn xin phép - Gọi điện thoại/ nhắn tin để xin phép nghỉ học/ học bù - Viết đơn xin phép với lí “bận việc gia đình” mà không ghi rõ việc gì? đâu? thời gian nào? lí “em bị bệnh” mà không ghi rõ bệnh gì? thời gian phát bệnh? thời gian điều trị? - Nghỉ học viết đơn xin phép (nếu bệnh đột xuất phải viết đơn nhờ bạn gởi hộ trước kết thúc buổi học) - Tự ý đổi buổi học mà không viết đơn xin phép trước - Lí không đáng: quê chơi, du lịch, dự tiệc, quê chưa lên kịp, giữ nhà, trông em, trông cháu,… - Lí gian dối, không thật, giấy tờ xác nhận Sinh viên phải mặc áo blouse có cầu vai màu xanh vào phòng thực tập, cặp sách để gọn gàng, nơi qui định Đầu buổi học sinh viên ký nhận dụng cụ Cuối buổi dụng cụ phải rửa sẽ, xếp qui định, kiểm tra ký trả vào sổ Tiểu nhóm thực tập phải chịu trách nhiệm mát, hư hỏng, bể vỡ dụng cụ tiểu nhóm Cấm hút thuốc, đùa giỡn, nghe điện thoại phòng thí nghiệm 10 Không cười nói ồn ào, làm việc riêng thực tập Không qua vị trí tiểu nhóm khác để gây trật tự 11 Không ăn uống phòng thực tập, nước uống phải để bên 12 Mỗi sinh viên phải mang theo 01 giáo trình thực tập Nếu không đem theo giáo trình không thực tập 13 Không tự ý sử dụng/ di chuyển dụng cụ, hóa chất, máy móc phạm vi bàn thực tập Không tự ý thực thí nghiệm thực hành 14 Trước thực tập, sinh viên phải đọc kỹ thực tập trước nhà, lý thuyết liên quan Chuẩn bị dụng cụ cá nhân hỗ trợ cho thực tập hôm bao tay, trang, khăn giấy,… 15 Cuối buổi thực tập, nhóm trưởng phân công tiểu nhóm thay trực vệ sinh phòng (dọn dẹp dụng cụ, hóa chất dùng chung, lau bàn, vệ sinh cân, quét nhà, lau nhà, vệ sinh máy móc có sử dụng, dọn lavabo, giặt khăn phơi lên cửa sổ, châm đầy bình nước cất, đổ rác, đóng cửa sổ) Nhóm trực bỏ không trực nhận điểm 16 Sinh viên nộp báo cáo vào đầu buổi thực tập vào 15 phút đầu Sau thời điểm không nhận sinh viên phải nhận 0đ cho báo cáo 17 Mỗi tiểu nhóm phải mang theo 01 đồ dùng cá nhân sau: - 01 khăn vải sạch, 01 bịt khăn giấy - Găng tay y tế, trang y tế - Viết mực, viết chì, thước, đồ bấm - 01 viết lông màu xanh (loại viết lên thủy tinh được) - 01 nhíp y tế, 01 muỗng nhựa - 01 bơm tiêm 1ml, 01 lưỡi lam Cần Thơ, ngày…… tháng … năm… … Sinh viên ký tên Họ tên:…………………… …… BÀI KIỂM NGHIỆM NGUYÊN LIỆU CALCICLORID DIHYRAT (XÁC ĐỊNH GIỚI HẠN TẠP CHẤT) MỤC TIÊU Trình bày cách xác định giới hạn tạp chất kiểm nghiệm nguyên liệu Thực phương pháp xác định giới hạn tạp chất NỘI DUNG YÊU CẦU KIỂM NGHIỆM 1.1 Hình thức: bột kết tinh trắng, dễ hút nước Dễ tan nước, tan ethanol 96% 1.2 Định tính: phải cho phản ứng đặc trưng ion calci clorid 1.3 Độ màu sắc dung dịch: có màu không đậm mẫu V6 (phụ lục 9.2 9.3) 1.4 Giới hạn acid – kiềm: dung dịch nguyên liệu không acid kiềm 1.5 Các giới hạn tạp chất: 1.5.1 Sulfat: không 0,03% (phụ lục 9.4.14) 1.5.2 Nhôm 1.5.3 Bari: không đục dung dịch gồm 10% dung dịch chuẩn + ml nước 1.5.4 Kim loại nặng: không 20ppm (phụ lục 9.4.8) 1.5.5 Sắt: không 10ppm (phụ lục 9.4.13) 1.5.6 Magnesi muối kiềm: cắn không 0,5% 1.6 Định lượng: hàm lượng CaCl2.2H2O từ 97,0-103,0% PHƯƠNG PHÁP THỬ 2.1 Hình thức: ghi yêu cầu kiểm nghiệm 2.2 Định tính - Dung dịch S: Hòa tan 10g CaCl2.2H2O nước carbon dioxyd (TT) thêm nước vừa đủ 100ml (nước cất dun sôi để nguội) A Lấy khoảng 2mg chế phẩm cho vào ống nghiệm, thêm 2ml nước để hòa tan, acid hóa dung dịch acid nitric 2M (TT), thêm 0,4ml dung dịch bạc nitrat 2% (TT), lắc để yên, tạo tủa trắng lổn nhổn Lọc lấy tủa, rửa tủa lần, lần với 1ml nước, phân tán tủa 2ml nước thêm 1,5ml dung dịch amoniac 10M, tủa tan dễ dàng B Lấy 20mg chế phẩm cho vào ống nghiệm, thêm 5ml dung dịch acid acetic 5M (TT) lắc cho tan, thêm 0,5ml dung dịch kali ferocyanid (TT), dung dịch trong, cho thêm khoảng 50mg amoni clorid (TT), tạo thành tủa kết tinh trắng C Lấy 2ml dung dịch S cho vào ống nghiệm, thêm vài giọt dung dịch amoni oxalat 4% (TT), tạo thành tủa trắng, tủa tan dung dịch acid acetic 6M (TT), tan acid hydrocloric (TT) 2.3 Độ tan màu sắc dung dịch: (bài thực tập 2) 2.4 Giới hạn acid – kiềm Lấy 10ml dung dịch S pha, thêm 0,1ml dung dịch phenolphtalein (TT) Nếu dung dịch có màu đỏ, thêm 0,2ml dung dịch acid hydrocloric 0,01M (CĐ), dung dịch phải màu Nếu dung dịch không màu, phải chuyển sang màu đỏ thêm không 0,2ml dung dịch natri hydroxyd 0,01M (CĐ) 2.5 Các giới hạn tạp chất 2.5.1 Sulfat: không 0,03% (phụ lục 9.4.14) Lấy 5ml dung dịch S, pha loãng với nước thành 15ml để thử Chuẩn bị đồng thời hai ống chuẩn thử theo bảng sau: Bảng 1.1 Quy định chuẩn bị ống thử ống chuẩn Ống thử Ống chuẩn Bari clorid 25% 1ml 1ml Dung dịch sulfat mẫu 10 phần triệu 1,5ml 1,5ml 15ml 0ml Lắc để yên phút Chế phẩm thử 5ml dd S + 10ml nước cất Dung dịch sulfat mẫu 10 phần triệu Dung dịch acid acetic 5M (TT) 15ml 0,5ml 0,5ml Lắc để yên phút Độ đục tạo thành ống thử không đậm ống chuẩn 2.5.2 Nhôm 10ml dd S, thêm 2ml dd amoniclorid 10,7% 1ml dd amoniac 10% (TT) đun nóng tới sôi, dd không vẩn đục hay tủa Nếu dùng chế phẩm dùng để pha dd thẩm tích phải đạt yêu cầu phép thử sau thay cho phép thử trên: Tối đa phần triệu (Phụ lục 9.4.9) Dung dịch thử: Hòa tan 4g chế phẩm 100ml nước, thêm 10ml dung dịch đệm acetat pH 6,0 Dung dịch đối chiếu: Trộn 2ml dung dịch nhôm mẫu (2 phần triệu), 10ml dung dịch đệm acetat pH 6,0 98ml nước Dung dịch mẫu trắng: Trộn 10ml dung dịch đệm acetat pH 6,0 với 100ml nước 2.5.3 Bari Lấy 10ml dung dịch S, thêm 1ml dung dịch calci sulfat (TT) Sau 15 phút, dung dịch không đục dung dịch gồm 10ml dung dịch S 1ml nước 2.5.4 Kim loại nặng: không 20 phần triệu (phụ lục 9.4.8) Dung dịch thử: lấy 12ml dung dịch S thử theo phương pháp phụ lục 9.4.8 DĐVN IV Dùng dung dịch chì mẫu phần triệu để pha ống mẫu đối chiếu Phương pháp 1: chuẩn bị đồng thời ống nghiệm Bảng 1.2 Quy trình chuẩn bị ống thử, ống chuẩn ống trắng Ống thử Ống Ống trắng chuẩn Chế phẩm S (ml) 12ml Dung dịch ion chì mẫu phần triệu (TT) 2ml 2ml 10ml (ml) Nước cất (ml) 10ml Dung dịch đệm acetat pH 3,5 (ml) 2ml 2ml 2ml Dung dịch thioacetamid (TT) (ml) 1,2ml 1,2ml 1,2ml Lắc để yên phút So sánh màu tạo ống thử ống chuẩn Màu nâu ống thử không đậm màu ống chuẩn Ống chuẩn có màu nâu nhạt so sánh với ống trắng 2.5.5 Sắt: không 10 phần triệu (phụ lục 9.4.13) Tiến hành đồng thời theo bảng sau: Bảng 1.3 Quy trình chuẩn bị ống thử ống chuẩn thử giới hạn sắt Ống thử (Nessler Ống Chế phẩm S (ml) chuẩn thử) (Nessler chuẩn) 10 Dung dịch sắt mẫu 1ppm (TT) (ml) 10 Acid citric (ml) ml 2ml Acid mercapto acetic 10M (ml) 0,1ml 0,1ml Dung dịch amoniac 10M (TT) (ml) Kiềm hóa Kiềm hóa Nước cất (ml) Vừa đủ 20ml Vừa đủ 20ml Lắc Màu hồng tạo thành dung dịch thử không đậm màu chuẩn 2.5.6 Magnesi muối kim loại kiềm: không 0,5% Lấy 20ml dung dịch S, thêm 80ml nước, 2g amoni clorid (TT) 2ml dung dịch amoniac 10% (TT) Đun sôi Rót vào dung dịch sôi dung dịch nóng gồm 5g amoni oxalat (TT) hòa tan 75ml nước Để yên Pha loãng thành 200ml nước lọc Lấy 100ml dịch lọc, thêm 0,5ml acid sulfuric (TT) Bốc cách thủy đến khô nung 600 0C đến khối lượng không đổi Lượng cặn không 5mg 2.6 Định lượng Cấn xác khoảng 0,735g CaCl2.2H2O (khoảng 0,05M) cho vào bình định mức 100ml Điền nước đến vạch Lắc Hút xác 10ml cho vào bình nón 250ml Thêm 90ml nước cất, 10ml NaOH 2N, thêm 0,1g thị Muretxit (khoảng hạt đậu xanh) Định lượng dung dịch EDTA 0,05M 1ml dung dịch EDTA 0,05M tương đương với 7,35mg CaCl2.2H2O Định lượng Calci clorid theo DĐVN IV (sinh viên tham khảo thêm) Hòa tan 0,280g chế phẩm 100ml nước tiến hành định lượng calci phương pháp chuẩn độ complexon (phụ lục 10.5) 1ml dung dịch Trilon B 0,1M (CĐ) tương đương với 14,70mg CaCl2.2H2O Lấy lượng dung dịch chế phẩm dẫn chuyên luận cho vào bình nón 500ml pha loãng với nước cất thành 300ml Thêm 6ml dung dịch natri hydroxyd 10M (TT) khoảng 15mg hổn hợp calcon (TT) chuẩn độ dung dịch trilon B 0,1M (CĐ) đến màu dung dịch chuyển từ tím sang xanh hoàn toàn 1ml dung dịch trilon B 0,1M tương đương với 14,70mg CaCl2.2H2O BÁO CÁO KẾT QUẢ: viết báo cáo theo phiếu kiểm nghiệm CÂU HỎI Tại phải xác định giới hạn acid- base kiểm nghiệm nguyên liệu ? Tại phải xác định giới hạn tạp chất nguyên liệu ? Định lượng Calci clorid theo nguyên tắc phép chuẩn độ thể tích 10 BÀI KIỂM NGHIỆM THUỐC VIÊN NANG DOPAGAN (PARACETAMOL 500 mg) (TCCS) MỤC TIÊU Thực yêu cầu kỹ thuật học phần lý thuyết KIỂM NGHIỆM THUỐC VIÊN NANG NỘI DUNG YÊU CẦU KIỂM NGHIỆM 1.1 Hình thức cảm quan: Viên nang cứng, đầu đỏ, đầu trắng Mặt nang khô, bóng, thuốc chứa nang màu trắng 1.2 Thời gian thử rã: không 15 phút (phụ lục 11.6 DĐVN IV) 1.3 Chênh lệch khối lượng: phép ±7,5% so với khối lượng trung bình bột thuốc nang (phụ lục 11.3 DĐVN IV) 1.4 Định tính: phải có phản ứng đặc trưng paracetamol phổ IR paracetamol nang phải giống với phổ IR paracetamol đối chiếu 1.5 Định lượng: chế phẩm phải chứa 475 – 525 mg paracetamol nang tính theo khối lượng trung bình bột thuốc chứa nang PHƯƠNG PHÁP THỬ 2.1 Hình thức cảm quan: thử cảm quan chế phẩm phải đạt yêu cẩu nêu 2.2 Độ đồng khối lượng: tiến hành với 20 nang Cân riêng nang (cả vỏ thuốc) Sau đó, dốc hết hoạt chất dùng gòn để lau cho thật nang cứng dùng ether hay dung mội thích hợp để rửa nang cho nang mềm Cân vỏ nang rỗng, khối lượng nang hiệu số hai lần cân Xác định khối lượng trung bình nang Mẫu thử đạt yêu cầu có khộng viên có khối lượng lệch độ lệch phần trăm khối lượng trung bình viên vượt lần độ lệch Bảng 3.1 Bảng quy định độ đồng khối lượng viên nang Khối lượng trung bình % chênh lệch so với khối lượng trung bình Nhỏ 300mg ±10 Lớn 300mg ±7,5 2.3 Định tính - Lắc 0,5 gam chế phẩm 10 ml nước, thêm vài giọt dung dịch sắt (III) clorid (TT) 23 không chuyển sang đỏ - Đo phổ IR: lấy cắn đo phổ IR, so sánh với phổ IR paracetamol chuẩn 2.5 Định lượng Định lượng đồng thời ba hợp chất phương pháp HPLC - Chuẩn bị mẫu: Dung dịch clorpheniramin maleat chuẩn gốc: Cân xác khoảng 20mg clorpheniramin maleat chuẩn, hòa tan khoảng 30ml đệm phosphat pH cho vào bình định mức dung tích 100ml, thêm đệm phosphat pH vừa đủ, lắc lọc qua màng lọc kích thước 0,45μm dung dịch chuẩn gốc có nồng độ clorpheniramin maleat khoảng 200μm/ml Dung dịch thiamin mononitrat chuẩn gốc: Cân xác khoảng 40mg thiamin mononitrat chuẩn, hòa tan khoảng 30ml đệm phosphat pH cho vào bình định mức dung tích 100ml, sau thêm đệm phosphat pH vừa đủ, lắc lọc qua màng lọc kích thước 0,45μm dung dịch chuẩn gốc có nồng độ clorpheniramin maleat khoảng 400μm/ml Dung dịch hỗn hợp chuẩn paracetamol, clorpheniramin maleat, thiamin mononitrat: Cân xác khoảng 32,5mg paracetamol chuẩn, hòa tan khoảng 20ml đệm phosphat pH cho vào bình định mức dung tích 50ml, sau thêm xác 1ml dung dịch clorpheniramin maleat chuẩn gốc xác 2,5ml dung dịch thiamin mononitrat chuẩn gốc vào bình Lắc thêm đệm pH vừa đủ Lắc lọc qua màng lọc kích thước 0,45μm dung dịch hỗn hợp chuẩn có nồng độ paracetamol khoảng 650μg/ml, clorpheniramin maleat khoảng 4μg/ml thiamin mononitrat khoảng 20μg/ml Mẫu thử từ chế phẩm Pabemin®: Cho gói Pabemin® vào cối, nghiền trộn Cân chỉnh khoảng 0,125g chế phẩm, hòa tan khoảng 10ml đệm phosphat pH cho vào bình định mức dung tích 25ml, sau thêm đệm phosphat pH vừa đủ, lắc lọc qua màng lọc kích thước 0,45μm dung dịch mẫu thử để tiêm sắc ký - Điều kiện sắc ký tối ưu khảo sát cho quy trình định lượng Pabemin®: + Hệ thống máy HPLC Hitachi L-2000, DAD L-2455 + Pha tĩnh: cột Phenomenex Gemini RP-C18 (150mm x 4,6mm, 5μm, + Thể tích tiêm mẫu: 20μl 110Å) 24 + Nhiệt độ cột: nhiệt độ phòng + Chương trình chạy: Bảng 7.2 Chương trình chạy mẫu tối ưu khảo sát Thời gian AcN (%) Nước (%) Methanol (phút) Đệm pH Tốc độ dòng (%) (ml/ phút) (%) 0,8 7,2 92 3,5 0,8 7,2 92 3,6 25 70 20 25 70 + Bước sóng phát paracetamol 300nm, clorpheniramin maleat 225nm, thiamin mononitrat 275nm - Tiêm mẫu dung dịch hỗn hợp chuẩn dung dịch thử vào hệ thống HPCL/PDA, xác định diện tích đỉnh paracetamol, clorpheniramin maleat thiamin mononitrat mẫu hỗn hợp chuẩn mẫu thử, tính toán hàm lượng paracetamol, clorpheniramin maleat 2,5g chế phẩm - Hàm lượng paracetamol (mg) 2,5g chế phẩm tính theo công thức: Xparacetamol = ST1 m a 2,5 (1) mPab SC1 1 Hàm lượng clorpheniramin maleat (mg) 2,5g chế phẩm tính theo công thức: Xclorpheniramin = ST2 m a 2,5 (2) mPab.50 SC2 2 Hàm lượng thiamin mononitrat (mg) 2,5g chế phẩm tính theo công thức: Xthiamin = 2.5 ST3 m a 2,5 (3) mPab SC3 3 Trong đó: mPab: khối lượng bột thuốc Pabemin® (g) ST1, ST2, ST3: diện tích đỉnh paracetamol, clorpheniramin maleat thiamin mononitrat mẫu thử SC1, SC2, SC3: diện tích đỉnh paracetamol, clorpheniramin maleat thiamin mononitrat mẫu chuẩn m1, m2, m3: khối lượng paracetamol chuẩn, clorpheniramin maleat chuẩn thiamin mononitrat chuẩn (mg) 25 a1, a2, a3: độ tinh khiết chất chuẩn paracetamol, clorpheniramin maleat thiamin mononitrat 2.6 Độ đồng hàm lượng (clopheniramin maleat) Chuẩn bị mẫu thử Lấy hết bột thuốc gói nghiền mịn, cân khoảng 0,125 g chế phẩm, hòa tan khoảng 10 ml đệm phosphat pH cho vào bình định mức dung tích 25 ml, sau thêm đệm phosphat pH vừa đủ, lắc lọc qua màng lọc kích thước 0,45 μm dung dịch mẫu thử để tiêm sắc ký Làm tương tự với gói Định lượng thành phần clorpheniramin maleat theo phương pháp định lượng Tính độ đồng hàm lượng clopheniramin theo DDVN IV (phương pháp phụ lục 11.2 trang PL-221): - Chế phẩm đem kiểm tra đạt yêu cầu phép thử không đơn vị có giá trị hàm lượng nằm giới hạn 85 – 115% hàm lượng trung bình không đơn vị nằm giới hạn 75 – 125% hàm lượng trung bình - Chế phẩm không đạt yêu cầu phép thử có đơn vị có giá trị hàm lượng nằm giới hạn 85 – 115% hàm lượng trung bình có hay nhiều đơn vị nằm giới hạn 75 – 125% hàm lượng trung bình - Nếu có đơn vị có giá trị hàm lượng nằm giới hạn 85 – 115% hàm lượng trung bình giới hạn 75 – 125% hàm lượng trung bình thử lại 20 đơn vị khác, lấy ngẫu nhiên Chế phẩm kiểm tra đạt yêu cầu phép thử không đơn vị tổng số 30 đơn vị đem thử có giá trị hàm lượng nằm giới hạn 85 – 115% hàm lượng trung bình đơn vị nằm giới hạn 75 – 125% hàm lượng trung bình BÁO CÁO KẾT QUẢ: theo phiểu kiểm nghiệm CÂU HỎI 1.Viết công thức khai triển paracetamol, thiamin hydroclorid, clorpheniramin maleat Có thể nhận xét thiamin hydroclorid clorpheniramin maleat có cấu trúc base hữu không? Tại sao? Giải thích chế định lượng? Theo DĐVN IV, để tính sai số khối lượng dang thuốc gói phải cần gói cách tính sao? Viết chế phản ứng định tính paracetamol, thiamin HCl? 26 Trong quy trình định lượng, thay helianin thuốc thử khác không? Có thể thay cloroform dung môi hữu khác có không? Ngoài hệ đệm phosphat sử dụng hệ đệm khác không? Tại sao? Giải thích công thức tính hàm lượng hoạt chất chế phẩm Pabemin? Chương trình chạy điều kiện sắc ký gradient, chạy chương trình đẳng dòng không? Loại dung môi dùng cho chạy gradient dùng cho chạy đẳng dòng không? Có thể phân tích hoạt chất bước sóng? Tại sao? 27 BÀI KIỂM NGHIỆM THUỐC VIÊN NÉN SULFAGUANIDIN 500 mg MỤC TIÊU Thực yêu cầu kỹ thuật học phần lý thuyết KIỂM NGHIỆM THUỐC VIÊN NÉN Thực phép chuẩn độ điện tự động Hiểu chế phản ứng định lượng phương pháp nitrit NỘI DUNG YÊU CẦU KIỂM NGHIỆM 1.1 Hình thức cảm quan: viên màu trắng 1.2 Độ đồng khối lượng: ± 5% so với khối lượng trung bình thuốc viên 1.3 Độ rã: thời gian rã không 15 phút 1.4 Định tính: phải có phản ứng sulfaguanidin 1.5 Định lượng: hàm lượng sulfaguanidin C7H10N4O2S từ 95,0 - 105,0% so với hàm lượng ghi nhãn PHƯƠNG PHÁP THỬ 2.1 Hình thức: nhận xét cảm quan, viên phải đạt yêu cầu nêu 2.2 Độ rã: thực theo chuyên luận “thuốc viên nén”, phụ lục 1.20 DĐVN IV (không thực hiện) 2.3 Độ đồng khối lượng: thực theo chuyên luận “Phép thử độ đồng khối lượng”, phụ lục 11.3, phương pháp 1, DĐVN IV Bảng 11.3.1 Bảng quy định độ đồng khối lượng cho chế phẩm đơn liều Dạng bào chế Khối lượng trung bình (KLTB) Viên nén Nhỏ 80 mg % chênh lệch so với KLTB 10 Lớn 80 mg nhỏ 250 mg 7,5 Bằng lớn 250 mg Cân riêng biệt 20 đơn vị lấy ngẫu nhiên, tính khối lượng trung bình Không có hai đơn vị có khối lượng nằm giới hạn chênh lệch so với khối lượng trung 28 bình quy định bảng 11.3.1 (phụ lục 11.3 DĐVN IV) đơn vị có khối lượng vượt gấp đôi giới hạn 2.4 Định tính A Lấy lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,2 g sulfaguanidin, thêm ml dung dịch natri hydroxyd 10% (TT), đun sôi, có amoniac bay lên B Lấy lượng bột viên tương ứng với khoảng 50 mg sulfaguanidin, thêm ml dung dịch acid hydrocloric 10% (TT), lắc kỹ, lọc Làm lạnh dịch lọc nước đá, thêm ml dung dịch natri nitrit 1% (TT), lắc Lấy ml dung dịch thu được, thêm ml dung dịch 2-naphtol kiềm (TT) xuất tủa đỏ thẫm C Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel F254 Dung môi khai triển: dicloromethan - methanol - acid formic khan (70 : 20 : 10) Dung dịch đối chiếu: hòa tan 10 mg sulfaguanidin chuẩn ml aceton (TT) Dung dịch thử: Lấy lượng bột viên tương đương với 20 mg sulfaguanidin, thêm 10 ml aceton (TT), lắc kỹ, lọc, dùng dịch lọc để chấm sắc ký Cách tiến hành: chấm riêng biệt lên mỏng 10 l dung dịch Triển khai sắc ký tới dung môi khoảng 15 cm, lấy mỏng để khô không khí Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Vết sắc ký đồ dung dịch thử phải phù hợp màu sắc, kích thước giá trị Rf với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu 2.5 Định lượng: Tiến hành chuẩn độ nitrit (Phụ lục 10.4 DĐVN IV) Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,200 g sulfaguanidin, thêm 15 ml dung dịch acid hydrocloric 25% (TT) 50 ml nước Lắc kỹ Cho thêm g kali bromid (TT), làm lạnh nước đá chuẩn độ dung dịch natri nitrit 0,1 M (CĐ) (phải để đầu nhỏ dung dịch chuẩn độ buret ngập mặt dung dịch cần chuẩn độ) Trong trình chuẩn độ phải lắc bình liên tục, nhẹ nhàng cho không tạo dòng xoáy không khí dung dịch (tốt dùng máy khuấy từ) Nhỏ dung dịch chuẩn độ với tốc độ lúc đầu chừng ml phút, đến trước điểm tương đương khoảng ml nhỏ 0,1 ml để yên phút sau lần thêm dung dịch Điểm kết thúc xác định chuẩn độ đo điên tự động: thực theo SOP “Định lượng Sulfaguanidin” môn HPTKN 29 Điểm kết thúc xác định thị màu: thêm giọt thị Tropeolin 00, giọt xanh methylene trước tiến hành chuẩn độ dung dịch NaNO2 0,1 M, khuấy liên tục suốt trình chuẩn độ Chuẩn độ kết thúc dung dịch từ bình định lượng chuyển từ màu tím sang xanh Thực song song với mẫu trắng điều kiện để đối chiếu thay đổi màu thị ml dung dịch natri nitrit 0,1 M (CĐ) tương đương với 21,42 mg C7H10N4O2S BÁO CÁO KẾT QUẢ: theo phiếu kiểm nghiệm CÂU HỎI Thiết lập công thức tính kết định lượng trường hợp xác định điểm tương đương phương pháp khác Nhận xét cách tính kết phương pháp chuẩn độ ? Trong 20 viên đem tính độ đồng khối lượng, có viên nằm khoảng cho phép - kết luận lô thuốc viên nén ? Viết chế phản ứng để định lượng sulfaguanidin ? Mục đích việc vẽ đường đạo hàm bậc E/ V theo V (ml) ? Viết công thức khai triển sulfaguanidin? Điện cực dùng phép chuẩn độ gì? 30 BÀI KIỂM NGHIỆM THUỐC SIRÔ THÉRALENE MỤC TIÊU Thực yêu cầu kỹ thuật học phần lý thuyết KIỂM NGHIỆM THUỐC DẠNG SIRÔ NỘI DUNG YÊU CẦU KIỂM NGHIỆM 1.1 Hình thức cảm quan: chất lỏng đặc sệt, trong, màu nâu nhạt, có ánh cam, mùi vị đặc biệt 1.2 Thể tích: Chai 90 ml +10% so với thể tích nhãn (90 -99ml) Chai 125ml + 8% so với thể tích nhãn (125 – 135 ml) 1.3 Tỷ trọng: 1,250 – 1,300 (200C) (phụ lục 6.5 trang PL – 148) 1.4 pH: 2,3 -5,5 (phụ lục 6.2 DĐVN IV, trang PL 144.) 1.5 Định lượng: sirô Théralene phải chứa 100ml sản phẩm 46,5 – 53,5mg alimemazin bazơ (C18H22N2S) 0,090 – 0,110mg acid ascorbic (C6H8O6) PHƯƠNG PHÁP THỬ 2.1 Hình thức cảm quan: chế phẩm phải đạt yêu cầu nêu 2.2 Chênh lệch thể tích: cho toàn thể tích sirô chứa chai vào ống lường tích tương đương Chênh lệch thể tích cho phép đọc theo bảng sau: Bảng 9.1 Bảng ghi giới hạn cho phép thể tích sirô Loại thuốc Thể tích ghi nhãn Giới hạn cho phép (% chênh lệch) Siro cao thuốc Tới 100 ml +10% (trừ cao động vật) Trên 100 ml – 250 ml +8% Trên 250 ml +6% 3.3 Tỉ trọng Đo 200C picnomet Cân xác picnomet rổng, khô Đổ vào picnomet mẫu thử chỉnh nhiệt độ thấp 20 0C, ý đừng để bọt khí Giữ picnomet 20 0C khoảng 30 phút, dùng giấy lọc để thấm hết chất lỏng thừa vạch mức, làm khô mặt picnomet Cân tính khối lượng chất lỏng chứa picnomet Tiếp đó, đổ mẫu thử đi, rửa picnomet, làm khô cách tráng EtOH, tráng aceton, sau thổi không khí nén không khí nóng để đuổi hết 31 aceton xác định khối lượng nước chứa picnomet nhiệt độ 20 0C Tỉ số khối lượng mẫu thử khối lượng nước cất thu tỉ trọng D20 cần xác định (Phụ lục 6.5 – DĐVN PL – 148) 2.4 pH: lấy 10ml sirô cho vào cốc có mỏ 50 ml thực theo phụ lục 6.2 DĐVN, trang PL 144 2.5 Định tính 2.5.1 Định tính alimemazin tartrat Pha chế dung dịch thử T: lấy 10 ml chế phẩm cho vào bình lắng, thêm vào bình 10 ml dung dịch acid hydroclorid 2N, thêm 20 ml cloroform, lắc Chuyển lớp cloroform qua bình lắng thứ chứa ml dung dịch NaOH 1N, lắc mạnh xoay vòng để tránh tạo nhũ, để yên Lọc phần cloroform qua gòn chia làm phần, cho vào bát sứ nhỏ Để bay đến cắn, làm phản ứng định tính sau: a Nhỏ từ từ vào cắn chén I 3-4 giọt acid suluric đậm đặc, xuất màu đỏ chuyển nhanh sang vàng b Nhỏ từ từ vào cắn chén II 3-4 giọt acid sulfuric đậm đặc, xuất màu đỏ bền vững 2.5.2 Định tính acid ascorbic Lấy ml chế phẩm cho vào cốc có mỏ 50 ml, thêm ml nước, lắc đều, thêm giọt dung dịch dicloro-2,6 phenol indophenol 0,05% nước: thuốc thử màu Thường phải điều chỉnh đến pH=4 dung dịch NaOH 0,1N) 2.6 Định lượng Phương pháp quang phổ UV-Vis Lấy xác thể tích siro Théralène tương ứng với khoảng mg alimemazin base cho vào bình lắng 125 ml, thêm 50 ml nước 10 ml NaOH 2,5 N, trộn lẫn chiết với cyclohexan lần , lần 10 ml Rửa toàn dịch chiết cyclohexan thu với 10 ml nước cất, loại bỏ nước rửa Chiết xuất dịch cyclohexan với acid hydrocloric 0,1 N lần, lần 20 ml Tập hợp toàn dịch chiết acid cho vào bình định mức 100 ml, thêm acid hydrocloric 0,1 N đến vạch Hút xác 25 ml (hoặc 50 ml) dịch từ bình cho vào bình định mức 50 ml (hoặc 100 ml), thêm dung dịch acid hydrocloric 0,1 N vừa đủ đến vạch, lắc Xác định độ hấp thu bước sóng 251 nm, 276 nm dung dịch cần đo lúc với 32 dung dịch chuẩn alimemazin tartrat chuẩn môi trường có nồng độ biết khoảng mcg/ml Dùng acid hydrocloric 0,1 N làm mẫu trắng Tính toán hàm lượng C18H22N2S (mg) 100 ml siro theo công thức: ( At 251  At 276  0,005 50   102 Ac 251  Ac 276 At251; At276: độ hấp thu mẫu thử Ac251; Ac276: độ hấp thu mẫu chuẩn BÁO CÁO KẾT QUẢ: theo phiếu kiểm nghiệm CÂU HỎI 1.Viết công thức hoạt chất có sirô Theralene dạng? Trong thực phần định tính, giai đoạn lắc CHCl3 với NaOH hay gặp tượng tạo nhũ, làm cách để phá nhũ? Có cách? giải thích? Nhận xét quy trình định tính quy trình định lượng Có mâu thuẫn không? Từ rút kết luận gì? Tại quy trình định lượng không dùng dung môi chiết cloroform mà dùng cyclohexan? Giải thích? Tại quy trình định lượng dùng bước sóng, dùng bướcc sóng có không? Giải thích công thức tính kết quả? 33 Bài KIỂM NGHIỆM VIÊN NÉN ASPIRIN (TC DĐVN IV) MỤC TIÊU Thực yêu cầu kỹ thuật học “Kiểm nghiệm viên nén” Thực phương pháp chuẩn độ acid base NỘI DUNG YÊU CẦU KỸ THUẬT 1.1 Hình thức: Viên màu trắng, mặt viên nhẵn, cạnh thành viên nguyên vẹn, mặt có chữ aspirin, mặt có rãnh 1.2 Độ đồng khối lượng:  5% so với khối lượng trung bình viên 1.3 Định tính: phải có phản ứng acid acetylsalicylic 1.4 Định lượng: hàm lượng acid acetylsalicylic C9H8O4 phải chứa từ 90,0% đến 110,0% hàm lượng ghi nhãn PHƯƠNG PHÁP THỬ 2.1 Hình thức: Nhận xét cảm quan, viên phải đạt yêu cầu nêu 2.2 Độ đồng khối lượng (phụ lục 11.3) Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên (KLTB) Cân riêng viên, so sánh với KLTB viên Không có 02 đơn vị có khối lượng nằm giới hạn chênh lệch so với KLTB qui định đơn vị có khối lượng vượt gấp đôi giới hạn 2.3 Định tính Đun sôi khoảng 0,3g bột viên 2-3 phút với 10 ml dung dịch NaOH 10% (TT) Để nguội, thêm dung dịch H2SO4 10% (TT) thừa acid, có tủa kết tinh mùi acid acetic Lọc lấy tủa, hòa tan tủa vài ml nước, thêm giọt dung dịch FeCl3 0,5% (TT) có màu tím 2.4 Định lượng Cân 20 viên, loại bỏ lớp bao, xác định khối lượng trung bình viên nhân, nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên tương ứng với 0,25g acid acetylsalicylic, thêm xác 15 ml dung dịch NaOH 0,5N (CĐ), đun sôi nhẹ 10 phút, chuẩn độ 34 lượng NaOH dung dịch HCl 0,5N (CĐ), dùng dung dịch đỏ phenol (TT) làm thị Song song làm mẫu trắng ml dung dịch NaOH 0,5N (CĐ) tương đương với 45,04 mg C9H8O4 Hàm lượng % acid acetylsalicylic so với lượng ghi nhãn tính theo KLTB viên tính theo công thức: X (%)  Với: (Vtrang  Vthu ).K HCl 45,04 mthu mTBV 100 81 K : hệ số hiệu chuẩn dung dịch HCl 0,5N Vtrắng : thể tích dung dịch HCl 0,5N dùng cho mẫu trắng (ml) Vthử : thể tích dung dịch HCl 0,5N dùng cho mẫu thử (ml) mthử : khối lượng mẫu cân (g) mTBV : khối lượng trung bình viên (g) BÁO CÁO KẾT QUẢ Theo phiếu kiểm nghiệm phiếu phân tích Trả lời câu hỏi CÂU HỎI Giải thích chế định tính acid acetylsalicylic Viết phương trình phản ứng Giải thích chế định lượng acid acetylsalicylic Viết phương trình phản ứng Tại HCl lại có hệ số K? Nếu pha từ hóa chất gốc có hệ số K không? Nêu phương pháp khác định lượng acid acetylsalicylic Vẽ công thức cấu tạo aspirin Tên IUPAC chất gì? Kể tên số thuốc có chứa hoạt chất aspirin Kỹ thuật chuẩn độ gì? (trực tiếp/ thừa trừ/ thế) Trình bày nguyên tắc kỹ thuật Tại định lượng aspirin phải cho xác 15ml dung dịch NaOH 0,5N? Chứng minh công thức tính hàm lượng % aspirin Tại định lượng phải loại bỏ lớp bao? 35 Bài KIỂM NGHIỆM THUỐC VIÊN HOÀN Viên hoàn mật ong nghệ MỤC TIÊU Trình bày tiêu kiểm nghiệm thuốc viên hoàn Thực phương pháp thử tiêu kiểm nghiệm thuốc viên hoàn nghệ NỘI DUNG YÊU CẦU KỸ THUẬT 1.1 Tính chất: Viên hoàn phải tròn, đều, đồng hình dạng, màu sắc bảo quản, có mùi đặc trưng dược liệu 1.2 Độ đồng khối lượng: Quy định theo bảng sau: Khối lượng trung bình hoàn Giới hạn sai số cho phép Từ 0,05g đến 1,5g ± 12% Trên 1,5g đến 5,0g ± 10% Trên 5,0g đến 9,0g ± 7% Trên 9,0g ± 5% 1.3 Độ rã: Không 1.4 Định tính: Chế phẩm phải cho phản ứng đặc trưng nghệ PHƯƠNG PHÁP THỬ 2.1 Tính chất: Bằng cảm quan chế phẩm phải đạt yêu cầu nêu: hoàn phải tròn đều, đồng hình dạng, màu sắc, có mùi đặc trưng dược liệu 2.2 Độ đồng khối lượng: Cân 10 viên, xác định khối lượng trung bình Cân riêng rẽ viên so sánh khối lượng viên với khoảng chênh lệch so với khối lượng trung bình Trong viên vượt giới hạn cho phép viên gấp đôi giới hạn cho phép 2.4 Độ rã: áp dụng cho viên hoàn cứng - Tiến hành thử viên hoàn máy thử độ rã - Nhiệt độ thử: 360C ± 10C 36 - Môi trường thử: nước, không đạt thử lại lần môi trường HCl 0,1N - Thời gian rã viên: không 2.5 Định tính: Nghệ Nghiền viên hoàn thành bột, cho vào cốc, thêm 20ml ethanol 96%, lọc qua giấy lọc Nhỏ 3-4 giọt dịch chiết ethanol lên giấy lọc Để khô, giấy lọc lại vết màu vàng Tiếp tục nhỏ giọt dung dịch acid boric 5% (TT) dung dịch acid hydrochloric loãng (TT), hơ nóng nhẹ cho khô, vết vàng chuyển thành màu đỏ Sau thêm giọt dung dịch aminiac (TT), tiếp tục chuyển sang màu xanh đen 37 Tài liệu tham khảo Đặng Văn Hòa, Vĩnh Định (2014), Kiểm Nghiệm thuốc, Nhà xuất Giáo dục Việt Nam Bộ Y Tế (2009), Dược Điển Việt Nam IV, Nhà xuất Y học, Hà Nội Giáo trình “Thực hành Kiểm nghiệm thuốc” (2014), Bộ môn HPT-KN, Đại Học Y Dược Cần Thơ ... 33 Bài Kiểm nghiệm viên mật nghệ 35 NỘI QUI PHÒNG THỰC TẬP KIỂM NGHIỆM Sinh viên phải có mặt phòng thí nghiệm suốt buổi thực tập Ra phải xin phép giảng viên hướng dẫn Sinh viên đến... gặp giảng viên học thực hành tổ khác để giải trình lí xin lịch học bù Mỗi sinh viên nghỉ/ đổi 01 buổi thực hành Nếu xếp học được, sinh viên xin làm đơn xin tạm dừng học bảo lưu kết học tập để giải... phạm vi bàn thực tập Không tự ý thực thí nghiệm thực hành 14 Trước thực tập, sinh viên phải đọc kỹ thực tập trước nhà, lý thuyết liên quan Chuẩn bị dụng cụ cá nhân hỗ trợ cho thực tập hôm bao