Header Page of 149 PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài Vấn đề an toàn thực phẩm, sức khỏe bảo vệ môi trường coi trọng tất quốc gia giới Để giải vấn đề thực phẩm giàu dinh dưỡng, việc tăng cường sử dụng nấm ăn phần ăn hàng ngày người giải pháp hữu hiệu Sản phẩm nấm ăn đặc biệt tốt với sức khoẻ người sử dụng, an toàn chứa đầy đủ chất dinh dưỡng cần thiết cho người Đặc biệt, nghề nuôi trồng nấm mang lại hiệu kinh tế cao cho người lao động, tận dụng lao động phổ thông lúc nông nhàn, sử dụng nguồn phế phụ phẩm nông lâm nghiệp góp phần bảo vệ môi trường sống, phế liệu sau nuôi trồng nấm có khả tái tạo đất, làm phân bón tốt cho trồng [4] Một nấm ăn nuôi trồng nhiều nước giới từ lâu nấm sò(Pleurotus ostreatus) Nấm sò chứa nhiều protein, vitamin axit amin có nguồn gốc thực vật, để hấp thụ cho thể người Đặc biệt với hàm lượng protein chiếm tới 33-43% Nấm sò hoàn toàn thay lượng đạm từ thịt, cá có nguồn gốc từ động vật Do đó, nấm sò gọi thịt chay hay thịt sử dụng nguồn cung cấp protein chủ yếu qua bữa ăn Ở Việt Nam, nghề nuôi trồng nấm sò chứng minh hiệu thực tiễn Hiện nay, nghề nuôi trồng nấm Sở Nông nghiệp, Trung tâm ứng dụng khoa học công nghệ tỉnh Thái Nguyên, Nam Định, Hải Phòng, Hưng Yên, Quảng Ninh, Lào Cai, Tuyên Quang, Phú Thọ…, số tỉnh phía nam trọng phát triển, phổ biến nhân rộng cho người dân từ khoảng 15 năm trở lại [3], [15] Tuy nhiên, công việc mà người nuôi trồng nấm sò chưa chủ động thực thực chưa hiệu công tác nhân giống nấm Vì vậy, để góp phần thuận lợi cho công tác nhân giống nấm sò cấp I Phòng thí nghiệm Công nghệ Sinh học, Khoa Nông Lâm Ngư, Trường Đại học Hùng Vương, đề tài: “Ảnh hưởng số nhân tố dinh dưỡng đến khả sinh trưởng phát triển hệ sợi giống nấm sò Pleurotus ostreatus” lựa chọn thực Footer Page of 149 Header Page of 149 1.2 Mục tiêu nghiên cứu Xác định ảnh hưởng số nhân tố dinh dưỡng nguồn cacbon, nguồn nitơ nguồn khoáng đến khả sinh trưởng phát triển hệ sợi giống nấm sò P ostreatus điều kiện PTN Công nghệ Sinh học, Khoa Nông Lâm Ngư, Trường Đại học Hùng Vương, từ lựa chọn điều kiện dinh dưỡng thích hợp sử dụng nhân giống nấm sò cấp I 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học Kết nghiên cứu đề tài tài liệu tham khảo có giá trị khoa học việc thực nhân giống nấm sò cấp I hệ sợi, giúp cho người dân sở sản xuất có nhu cầu sản xuất giống nấm sò cấp I có khoa học để thực công tác nhân giống nấm sò cấp I sở đạt hiệu cao 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn đề tài Kết nghiên cứu đề tài góp phần cung cấp chủ động nguồn giống nấm sò cấp I phục vụ cho việc nhân giống nấm sò cấp II cấp III, từ cung cấp chủ động nguồn giống nuôi trồng nấm sò đại trà Footer Page of 149 Header Page of 149 PHẦN II TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 Sơ lược nuôi trồng nấm ăn, nấm dược liệu nấm sò 2.1.1 Nghiên cứu nghề nuôi trồng nấm ăn, nấm dược liệu nấm sò giới Từ xa xưa, người biết dùng nấm làm thức ăn làm thuốc Từ thời hoàng đế La Mã cổ đại, nấm sử dụng buổi yến tiệc nhà vua Ở Châu Âu việc nuôi trồng nấm ăn mô tả từ kỷ thứ III Nấm phần lớn có ý nghĩa vai trò quan trọng đời sống, kinh tế nghiên cứu khoa học Trên giới xác định gần 2000 loài nấm ăn nấm dược liệu Trong số đó, 80 loài nấm nghiên cứu công nghệ nuôi trồng nhân tạo Nấm sò (P ostreatus) loài nấm ăn trồng lần đầu Đức để ăn chiến lần thứ Năm 1970, nấm sò nuôi trồng đại trà phổ biến giới Cho đến nay, nghề nuôi trồng nấm ăn nấm dược liệu lan rộng sang nhiều nước mang lại hiệu kinh tế cao, đóng góp tỷ lệ không nhỏ vào kinh tế nước như: Mỹ, Pháp, đặc biệt nước khu vực Bắc Mỹ Châu Á như: Nhật Bản, Hàn Quốc, Thái Lan, Ấn Độ Ngày nay, nhiều nước Nhật Bản, Hàn Quốc, Mỹ tự động hoá hầu hết khâu sản xuất nấm sản phẩm nấm tạo xuất nước khác giới hàng triệu nấm năm nấm hương, nấm linh chi, nấm mỡ, nấm bào ngư (nấm sò) Thông thường nấm xuất bảo quản tươi, dạng sản phẩm chế biến bào chế thành trà loại thuốc quý mang nguồn ngoại tệ khổng lồ cho nước Nấm sò mọc thân khô suy yếu tạo thành tai nấm xen kẽ hình bậc thang Nấm sò xem nấm dược liệu có chứa hoạt chất sinh học lovastatin có tác dụng giảm cholesterol Ngoài ra, có số đề tài nghiên cứu khả chống ung thư nấm sò có diện lovastatin tai nấm, tập trung phiến nấm đặc biệt bào tử nấm Nấm sò có hương thơm hồi diện benzaldehyde Nấm sò loài nấm hoang dã nuôi Footer Page of 149 Header Page of 149 trồng dễ dàng rơm rạ loại vật liệu khác Trong số loài nấm ăn, nấm sò nuôi trồng phổ biến, rộng rãi, sớm thường có nhiều loại Chúng thường mọc hoang thân gỗ, mọc đơn độc hay mọc chồng lên nhiều loại khác màu sắc, hình dạng, khả thích nghi với điều kiện nhiệt độ, bệnh dễ trồng Nấm có dạng phễu lệch, mọc đơn lẻ hay mọc thành cụm tập trung, bao gồm phần: mũ, phiến, cuống 2.1.2 Nghiên cứu nghề nuôi trồng nấm ăn, nấm dược liệu nấm sò Việt Nam Ở Việt Nam từ xưa nhân dân ta biết thu hái nấm tự nhiên mộc nhĩ, nấm hương,… để làm thức ăn Tuy nhiên đến năm 1970 việc nghiên cứu phát triển sản xuất nấm ăn bắt đầu thực Hơn 10 năm trở lại nghề trồng nấm phổ biến vùng nông thôn xem nghề mang lại hiệu kinh tế cao Một số tỉnh miền bắc Nam Định, Hà Nam, Hải Dương, Ninh Bình, Hà Nội, Bắc Giang, Thái Nguyên,… có nhiều trang trại sản xuất chế biến nhiều nơi hình thành hợp tác xã nấm, sản phẩm nấm tiêu thụ xuất có giá trị kinh tế cao [12], [14] Thái Nguyên tỉnh miền núi phía Bắc, việc sản xuất nấm ăn nấm dược liệu phát triển từ năm 2000 trở lại đây, sau triển khai dự án “Xây dựng mô hình sản xuất nấm hàng hóa” thuộc “Chương trình nông thôn miềm núi giai đoạn 2005-2010”, Bộ Khoa học Công nghệ đầu tư với tổng kinh phí tỷ đồng cho giai đoạn 2005-2007 [12] Thực chương trình phát triển sản xuất nông nghiệp hàng hóa, Bắc Giang xây dựng “Đề án phát triển sản xuất nấm giai đoạn 2007-2010” với tổng kinh phí 43,7 tỷ đồng , ngân sách tỉnh hỗ trợ tỷ đồng, lại vốn đối ứng nhân dân Riêng năm 2007, ngân sách tỉnh hỗ trợ địa phương vùng quy hoạch 1,35 tỷ đồng xây dựng 30 lán trại, sở chế biến nấm, đồng thời hỗ trợ giống cho 1500 nguyên liệu Đây đề án có quy mô, mức hỗ trợ lớn từ trước tới phát triển nghề trồng nấm địa bàn [6], [7], [15] Footer Page of 149 Header Page of 149 Hiện nay, nghề nuôi trồng nấm sò Tỉnh Phú Phọ phát triển mạnh Đặc biệt năm 2011 xã Đồng Cam - huyện Cẩm Khê - Tỉnh Phú Thọ thành lập nên hợp tác xã nuôi trồng nấm với quy mô lớn Theo chủ nhiệm hợp tác xã cho biết với diện tích 2000 𝑚2 quy hoạch nuôi trồng nấm sò nguồn nguyên liệu sẵn có địa phương thuận lợi cho nuôi trồng nấm sò, trung bình nguyên liệu cho thu từ 7-8 tạ nấm tươi cho thu nhập từ 20-25 triệu đồng Đây hướng phát triển mang lại hiệu kép Không tận dụng nguồn phế thải lớn từ nông nghiệp rơm rạ, mùn cưa… mà tạo nguồn thực phẩm sạch, giàu dinh dưỡng, mang lại lợi ích kinh tế cao, giải việc làm chỗ cho lao động nhàn rỗi nông thôn, góp phần giảm thiểu ô nhiễm môi trường Hiện việc phát triển sản xuất nấm Việt Nam nói riêng, giới nói chung phát triển ngày mạnh mẽ, đem lại nhiều lợi nhuận cho người sản xuất, đồng thời giữ vai trò quan trọng kinh tế quốc dân 2.2 Giá trị dinh dưỡng giá trị dược liệu nấm sò P ostrearus 2.2.1 Giá trị dinh dưỡng Nấm ăn nguồn thực phẩm quý, vừa thơm ngon vừa có giá trị dinh dưỡng cao, hàm lượng protein nấm nhiều sữa, chiếm 8,4147,42% trọng lượng khô với nhiều axit amin quan trọng, có 25-35% axit amin tự Protein nấm không giống protein động vật, không gây sơ cứng động mạch không làm tăng cholesterol máu [9] Footer Page of 149 Header Page of 149 Bảng 2.1 Giá trị dinh dưỡng số nấm ăn phổ biến nấm sò so với trứng gà (Tỷ lệ % so với chất khô) [15] Độ ẩm Protêin Lipit Hydratcacbon Tro Calo (W) Thành phần/ sản phẩm Trứng 72 13 11 156 Nấm mỡ 89 24 60 381 Nấm hương 92 13 78 392 Nấm sò 91 30 58 345 Nấm rơm 90 21 10 59 11 369 Bảng 2.2 Hàm lượng vitamin chất khoáng số nấm ăn phổ biến nấm sò so với trứng gà (mg/100g khô) [15] Thành phần/ sản phẩm Axit Rbofl nicotinic avin Thia Axit ascobic Iron Canxi Phosphorus Trứng 0,1 0,31 0,4 2,5 50 210 Nấm mỡ 42,5 3,7 8,9 26,5 8,8 71 912 Nấm hương 54,9 4,9 7,8 4,5 12 171 Nấm sò 108,7 4,7 4,8 15,2 33 1348 Nấm rơm 91,9 3,3 1,2 20,2 17,2 71 677 Bên cạnh nấm ăn chứa nhiều vitamin, axit amin, chất xơ, chất khoáng, không chứa chất béo, hàm lượng calo thấp Ngoài chất dinh dưỡng, số loài nấm chứa hàng loạt chất thơm có hoạt tính sinh học, chất tạo nên hương vị đặc biệt nấm, làm cho chúng không nguồn thực phẩm có giá trị dinh dưỡng cao, mà trở thành loại gia vị thiếu nghệ thuật ẩm thực [15], [12] Do đặc tính sinh học, chất dinh dưỡng vi chất có lợi cho sức khỏe người dễ dàng chuyển hóa thành lượng cho thể, phù hợp với giải pháp “ăn kiêng” dành cho bệnh nhân tiểu đường, gút, mỡ máu… người có thói quen ăn chay Đối với người suy nhược thể, ăn chế biến từ nấm giúp phục hồi sinh lực Footer Page of 149 Header Page of 149 nhanh chóng Việc chế biến ăn không đòi hỏi cầu kì mà ngon miệng nấu cháo, xào, nấu canh, luộc… vừa có tác dụng bổ dưỡng, vừa có tác dụng trị bệnh Cũng bữa ăn gia đình, nấm sò xuất nhiều khác mà không gây nhàm chán vị, phù hợp với người gia đình 2.2.2 Giá trị dược liệu Trước nhiều người nghi ngờ khả chữa bệnh nấm sợ độc tính chất gây chết người loài nấm độc, gần với phát triển khoa học kỹ thuật đại người ta chứng minh tác dụng thần kì loài nấm dược liệu Nấm Linh Chi tiếng biết đến với nhiều tác dụng chữ bệnh y học như: tăng cường khả miễn dịch, ngăn ngừa bệnh tim mạch, hô hấp, bệnh cao huyết áp, suy nhược thần kinh Linh Chi hỗ trợ việc điều trị ung thư, thấp khớp, đau thận, đau dày, tiểu đường…[12] Những người dùng Linh Chi chống lão hóa, kéo dài tuổi thọ, tăng trí nhớ, ngăn ngừa chống khối u [8] Nấm hương chứa chất Lentinan có tác dụng nâng cao tính miễn dịch thể, chống ung thư không tế bào chủ phát sinh mà chất ức chế phát sinh ung thư gây nên virut [6], [7] Gần người ta phát loại glycoprotein chiết từ nấm hương có hiệu chống virut HIV mạnh thuốc AZT [11] Ngoài nấm hương có tác dụng chống đông máu, bảo vệ gan, giảm lượng cholesterol máu… Qua nghiên cứu, nhà khoa học mộc nhĩ có khả chữa bệnh bướu cổ, máu xấu, nóng trong, tóc bạc sớm, có tác dụng chống ung thư tới 42% [12] Ngoài ba loại nấm điển hình có nhiều loại nấm có tính dược liệu cao nấm đầu khỉ, đông trùng hạ thảo, nấm đồng tiền, nấm búp, nấm sò… Trong y học, nhà khoa học phân tích thành phần có nấm sò tươi : Protein 4%, gluxit 3,4%, vitamin C, vitamin PP, axit fotoric, axit béo không no… Khi nấm sò dạng sinh khối khô, hàm lượng protein chiếm Footer Page of 149 Header Page of 149 tới 33–43%, thấy axit amin glutamic, valin, isoluxin… Các nghiên cứu khác có tác dụng làm giảm thiểu cholesterol đường máu cho kết khả quan Đối với Đông y, nấm sò có vị ngọt, tính ấm, công tán hàn thư cân… Nấm sò có nhiều đặc tính biệt dược: Có khả phòng chữa bệnh làm hạ huyết áp, chống béo phì, chữa bệnh đường ruột, tẩy máu xấu, hỗ trợ người bị bệnh gút chế độ dinh dưỡng Đặc biệt có số công trình nghiên cứu cho nấm sò có khả chống bệnh ung thư Tác dụng chống ung thư nấm sò diện lovastatin tai nấm, tập trung phiến nấm bào tử nấm, hạ huyết áp, làm tan cholesterol máu kể dạng kết tinh, có khả giảm nguy mắc bệnh tim mạch Bên cạnh đó, chất Pleurotin nấm sò có khả ức chế vi khuẩn gây bệnh Gram âm Gram dương, ức chế phát triển tế bào khối u [2], [9] 2.3 Phân loại đặc điểm sinh học hệ nấm sò P ostreatus 2.3.1 Phân loại học Nấm sò trắng tên khoa học Pleurotus ostreatus hay gọi nấm bào ngư, mặt phân loại học thuộc: Họ : Pleurotaceae Bộ : Agaricales Lớp phụ : Hymenomycetidae Lớp : Holobasidiomycetes Ngành phụ : Basidiomycotina Ngành : Nấm thật (Eumycota) [1] Giới : Nấm (Mycota hay Fungi) [1], [4] 2.3.2 Đặc điểm hình thái, cấu tạo hệ nấm sò P ostreatus Hệ sợi nấm gồm hệ sợi nguyên có vách ngăn sợi cứng không vách ngăn ngang, màng dày, đường kính sợi khoảng 3,5-6,5 nm [13] Quả thể vừa lớn, mũ nấm có đường kính khoảng 5-21 cm, nhiệt độ cao mũ nấm có màu gần trắng, nhiệt độ thấp mũ nấm có màu tro hay màu nâu tro Phiến nấm màu trắng, xếp khít nhau, men dài xuống cuống Footer Page of 149 Header Page of 149 dính lại thành dạng phân nhánh Cuống nấm màu trắng, có có sắc thái nâu nhạt [8] Khi nuôi nhiệt độ thích hợp thoáng khí, cuống nấm ngắn, gặp điều kiện lạnh thoáng khí, cuống nấm dài, phần gốc có phủ lông ngắn hay mọc dính liền với cuống khác, kích thước 1-3 x 2-3 cm Thịt nấm màu trắng, lúc đầu mềm, sau già dai Khi phơi khô có mùi rơm Bào tử hình elip dài, không màu, kích thước 3-4,5 x 7-9 nm 2.4 Đặc điểm nuôi cấy nhân giống nấm sò P ostreatus Nấm sò mọc tốt môi trường giàu xenlullo, ưa lạnh ưa ấm, sợi nấm sinh trưởng mạnh nhiệt độ tối ưu 20-25oC, giai đoạn thể nhiệt độ thích hợp từ 17-20oC Nuôi trồng nấm sò thích hợp điều kiện độ ẩm môi trường nguyên liệu nuôi cấy 60-65%, độ ẩm không khí nuôi sợi 70-80%, thể cần độ ẩm 85-95%, pH 5,0-7,5 cần có độ thông thoáng nhà nuôi nấm sò hiếu khí, ánh sáng 200-1000 lux [5,6] Trong kỹ thuật nhân giống nấm sò chia giống nấm cấp I, cấp II giống nấm cấp III Giống nấm cấp I giống tách từ giống ban đầu, nhân môi trường thạch ống nghiệm đĩa petri Giống nấm cấp II giống tiếp tục nhân lên từ giống nấm cấp I, thường nhân môi trường sử dụng nguyên liệu hạt phế phụ phẩm nông nghiệp Giống nấm cấp I, II thường lưu giữ phòng nhân giống sở nhân giống nấm để làm nguồn giống chủ động người có kỹ thuật phụ trách Giống nấm cấp III giống cấy chuyển tiếp từ giống nấm cấp II môi trường tương tự nguồn nguyên liệu nhằm cung cấp giống nấm cho thị trường người dân nuôi trồng sản xuất nấm phục vụ cho việc nuôi trồng nấm đại trà Trong nhân giống nấm sò, hai phương pháp thường sử dụng phương pháp nhân giống hệ sợi nhân giống dịch thể Mỗi phương pháp có ưu nhược điểm riêng Tuy nhiên phương pháp nhân giống nấm sò hệ sợi sử dụng phổ biến có ưu điểm nuôi cấy đơn giản, phù hợp với quy mô vừa nhỏ, chi phí thấp [10] Footer Page of 149 Header Page 10 of 149 PHẦN III ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI, NỘI DUNG, NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng nghiên cứu Chủng nấm sò P ostreatus chủng, thể màu trắng mua Trung tâm Công nghệ Sinh học Thực vật - Viện Di truyền Nông nghiệp Việt Nam, Hà Nội 3.2 Phạm vi nội dung nghiên cứu + Nghiên cứu ảnh hưởng ba nguồn cacbon tinh bột, saccaroza, maltoza đến khả sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm sò P ostreatus + Nghiên cứu ảnh hưởng ba nguồn nitơ pepton, (NH4)2SO4, NaNO3 đến khả sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm sò P ostreatus + Nghiên cứu ảnh hưởng ba nguồn khoáng CaCl2, FeSO4, MgCl2 đến khả sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm sò P ostreatus Lựa chọn nguồn dinh dưỡng phù hợp sử dụng nhân giống nấm sò cấp I 3.3 Nguyên vật liệu sử dụng nghiên cứu Nguyên vật liệu: Khoai tây, giá đỗ Hóa chất sử dụng: Glucoza, tinh bột, maltoza, saccaroza, cồn 70-95 độ, pepton, (NH4)2SO4, NaNO3, CaCl2, FeSO4, MgCl2, cao nấm men, thạch(Agar) Thiết bị: Tủ ấm, tủ lạnh, tủ sấy, nồi trùng, box cấy, lò vi sóng, máy đo pH Dụng cụ: Bình tam giác, ống nghiệm, đĩa petri, que cấy, ống đong, cốc đong, cân điện, bếp điện dụng cụ thông thường khác 3.4 Phương pháp nghiên cứu 3.4.1 Phương pháp giữ giống môi trường đối chứng Môi trường đối chứng(môi trường chuẩn nhân môi trường giữ giống nấm sò) gồm thành phần(g/l): + Khoai tây: 250 + Glucoza : 20 10 Footer Page 10 of 149 Header Page 14 of 149 Sự sinh trưởng hệ sợi nấm ( mm ) 90 80 70 60 50 40 30 20 10 MTC 1% 2% 3% 4% 5% Tinh bột Hình 4.1 Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus môi trường khác Kết bảng 4.1, hình 4.1 phụ lục 4.1 cho thấy nuôi cấy nấm P ostreatus môi trường chứa nguồn tinh bột nồng độ khác có ảnh hưởng rõ rệt đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm Các kết cho thấy nồng độ tinh bột tăng nấm sò phát triển mạnh Ở nồng độ tinh bột 5% nấm sò phát triển mạnh (77 mm), nấm phát triển tốt môi trường chuẩn phát triển dần nồng độ 4% trở xuống Ở nồng độ tinh bột 1% phát triển (59 mm) Nồng độ 5% hệ sợi dày, bện kết chặt chẽ với ăn sâu vào chất.Vì vậy, nhân giống nấm thay nguồn glucoza nguồn tinh bột từ 4, 5% vào môi trường 14 Footer Page 14 of 149 Header Page 15 of 149 4.1.2 Ảnh hưởng nồng độ saccaroza đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ saccaroza đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus thể bảng 4.2, hình 4.2 phụ lục 4.2: Bảng 4.2 Ảnh hưởng nồng độ saccaroza đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Saccaroza Ngày MTC 23 ± Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm ̅ ±m, mm) (𝑿 1% 2% 3% 4% 5% 31 ± 32 ± 22 ± 20 ± 21 ± 34 ± 41 ± 44 ± 32 ± 30 ± 31 ± 45 ± 52 ± 54 ± 44 ± 41 ± 40 ± 57 ± 62 ± 65 ± 54 ± 52 ± 50 ± 70 ± 73 ± 70 ± 65 ± 62 ± 59 ± Sự sinh trưởng hệ sợi nấm ( mm ) 80 70 60 50 40 30 20 10 MTC 1% 2% 3% 4% 5% Saccaroz a Hình 4.2 Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus môi trường khác Kết bảng 4.2, hình 4.2 phụ lục 4.2 cho thấy nuôi nấm môi trường chứa nồng độ saccaroza khác có ảnh hưởng khác đến phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Nồng độ saccaroza cao sợi 15 Footer Page 15 of 149 Header Page 16 of 149 nấm phát triển Sợi nấm P ostreatus phát triển mạnh môi trường chứa saccaroza 1% với (73 mm), tốt môi trường chuẩn (70 mm), nồng độ 1% hệ sợi dày, bện kết chặt chẽ với ăn sâu vào chất Hệ sợi phát triển dần nồng độ 5% (59 mm).Vì vậy, nhân giống nấm thay nguồn saccaroza 1% vào môi trường 4.1.3 Ảnh hưởng nồng độ maltoza đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ maltoza đến sinh trưởng phát triển hệ sơi nấm P ostreatus thể bảng 4.3, hình 4.3 phụ lục 4.3: Bảng 4.3 Ảnh hưởng nồng độ maltoza đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm ̅ ±m, mm) (𝑿 MTC 1% 2% 3% 4% 5% 23 ± 32 ± 31 ± 23 ± 20 ± 21 ± 34 ± 42 ± 41 ± 34 ± 32 ± 31 ± 45 ± 53 ± 52 ± 45 ± 43 ± 44 ± 57 ± 64 ± 63 ± 55 ± 53 ± 50 ± 70 ± 74 ± 73 ± 66 ± 65 ± 59 ± Maltoza Ngày 16 Footer Page 16 of 149 Header Page 17 of 149 80 Sự sinh trưởng 70 hệ 60 sợi 50 nấm (mm) 40 30 20 10 MTC 1% 2% 3% 4% 5% Maltoza Hình 4.3 Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus môi trường khác Kết bảng 4.3, hình 4.3 phụ lục 4.3 cho thấy nuôi nấm môi trường chứa nồng độ maltoza khác có ảnh hưởng rõ rệt đến phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Nồng độ maltoza cao sợi nấm phát triển Sợi nấm P ostreatus phát triển mạnh môi trường chứa maltoza 1% 2% với (74 mm) (73 mm), tốt môi trường chuẩn (70 mm), nồng độ sợi dày, bện kết chặt chẽ với ăn sâu vào chất Hệ sợi nấm phát triển dần nồng độ 5% (59 mm) Vì vậy, nhân giống nấm thay nguồn maltoza 1%, 2% vào môi trường Qua kết nghiên cứu ảnh hưởng nguồn cacbon gồm: tinh bột, saccaroza, maltoza cho thấy sử dụng nguồn tinh bột nồng độ 5% hệ sợi giống nấm sò cấp I có khả sinh trưởng phát triển mạnh đạt (77 mm) Vì vậy, nồng độ tinh bột 5% lựa chọn nguồn cacbon sử dụng nhân giống nấm sò cấp I 17 Footer Page 17 of 149 Header Page 18 of 149 4.2 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Nguồn nitơ chất có vai trò quan trọng định tốc độ phát triển hệ sợi nấm Các nguồn nitơ khác nồng độ khác có tác động khác đến phát triển sợi nấm Để xác định nguồn nitơ phù hợp cho giữ giống nhân giống nấm tiến hành nghiên cứu ba nguồn nitơ pepton, (NH4)2SO4, NaNO3 nồng độ 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5% thu kết sau: 4.2.1 Ảnh hưởng nguồn pepton đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Bảng 4.4 Ảnh hưởng nồng độ pepton đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Pepton Ngày Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm ̅ ±m, mm) (𝑿 MTC 0,1% 0,2% 0,3% 0,4% 0,5% 23 ± 30 ± 31 ± 22 ± 22 ± 15 ± 34 ± 41 ± 41 ± 31 ± 30 ± 24 ± 45 ± 51 ± 52 ± 41 ± 42 ± 35 ± 57 ± 62 ± 60 ± 52 ± 51 ± 46 ± 70 ± 72 ± 69 ± 63 ± 61 ± 56 ± 18 Footer Page 18 of 149 Header Page 19 of 149 Sự sinh trưởng hệ sợi nấm (mm) 80 70 60 50 40 30 20 10 MTC 0,1% 0,2% 0,3% 0,4% 0,5% Pepton Hình 4.4 Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus môi trường khác Kết bảng 4.4, hình 4.4 phụ lục 4.4 cho thấy nuôi nấm môi trường chứa nồng độ pepton khác có ảnh hưởng khác đến phát triển sợi nấm P ostreatus Nồng độ pepton cao sợi nấm phát triển Sợi nấm P ostreatus phát triển mạnh môi trường chứa pepton 0,1% (72 mm), tốt môi trường chuẩn (70 mm), nồng độ hệ sợi dày, bện kết chặt chẽ với ăn sâu vào chất Hệ sợi nấm phát triển dần nồng độ 0,5% (56 mm) Vì vậy, nhân giống nấm thay nguồn pepton 0,1% vào môi trường 19 Footer Page 19 of 149 Header Page 20 of 149 4.2.2 Ảnh hưởng nồng độ (NH4)2SO4 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Bảng 4.5 Ảnh hưởng nồng độ (NH4)2SO4 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm ̅ ±m, mm) (𝑿 0,1% 0,2% 0,3% 0,4% 0,5% MTC 23 ± 19 ± 28 ± 31 ± 25 ± 22 ± 34 ± 27 ± 38 ± 42 ± 35 ± 34 ± 45 ± 37 ± 49 ± 53 ± 47 ± 44 ± 57 ± 48 ± 59 ± 63 ± 57 ± 55 ± 70 ± 59 ± 68 ± 75 ± 68 ± 65 ± (NH4)2SO4 Ngày 80 Sự sinh 70 trưởng 60 hệ 50 sợi nấm 40 (mm) 30 20 10 MTC 0,1% 0,2% 0,3% 0,4% 0,5% (NH4)2SO4 Hình 4.5 Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus môi trường khác Kết bảng 4.5, hình 4.5 phụ lục 4.5 cho thấy nuôi nấm môi trường chứa nồng độ (NH4)2SO4 khác có ảnh hưởng khác đến phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Sợi nấm P ostreatus phát triển mạnh môi trường chứa (NH4)2SO4 0,3% với (75 mm), tốt môi trường chuẩn (70 mm), nồng độ hệ sợi dày, bện kết chặt chẽ với ăn sâu 20 Footer Page 20 of 149 Header Page 21 of 149 vào chất Hệ sợi nấm phát triển dần nồng độ 0,5% nồng độ 0,1% (65 mm) (59 mm) Nồng độ (NH4)2SO4 phát triển nồng độ 0,1% Vì vậy, nhân giống nấm thay nguồn (NH4)2SO4 0,3% vào môi trường 4.2.3 Ảnh hưởng nồng độ NaNO3 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Bảng 4.6 Ảnh hưởng nồng độ NaNO3 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm ̅ ±m, mm) (𝑿 0,1% 0,2% 0,3% 0,4% 0,5% MTC 23 ± 25 ± 30 ± 37 ± 41 ± 45 ± 2 34 ± 37 ± 41 ± 47 ± 51 ± 46 ± 45 ± 47 ± 51 ± 58 ± 62 ± 58 ± 57 ± 58 ± 60 ± 69 ± 72 ± 68 ± 70 ± 67 ± 70 ± 78 ± 83 ± 79 ± NaNO3 Ngày Sự sinh trưởng hệ sợi nấm (mm) 90 80 70 60 50 40 30 20 10 MTC 0,1% 0,2% 0,3% 0,4% 0,5% NaNO3 Hình 4.6 Sự sinh trưởng phát triển sợi nấm P ostreatus môi trường khác 21 Footer Page 21 of 149 Header Page 22 of 149 Kết bảng 4.6, hình 4.6 phụ lục 4.6 cho thấy nuôi nấm môi trường chứa nồng độ NaNO3 khác có ảnh hưởng khác đến phát triển sợi nấm P ostreatus Nồng độ NaNO3 cao sợi nấm phát triển mạnh nồng độ 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5% Sợi nấm P ostreatus phát triển mạnh môi trường chứa NaNO3 0,4% với (83 mm), tốt môi trường chuẩn (70 mm), nồng độ hệ sợi dày, bện kết chặt chẽ với ăn sâu vào chất Hệ sợi nấm phát triển dần nồng độ 0,1% (67 mm) Vì vậy, nhân giống nấm thay nguồn NaNO3 0,4%, 0,5% vào môi trường Qua kết nghiên cứu ảnh hưởng nguồn nitơ gồm: pepton, (NH4)2SO4, NaNO3 cho thấy sử dụng nguồn NaNO3 nồng độ 0,4% hệ sợi giống nấm sò cấp I có khả sinh trưởng phát triển mạnh đạt (78 mm) Vì vậy, nồng độ NaNO3 0,4% lựa chọn nguồn nitơ sử dụng nhân giống nấm sò cấp I 4.3 Ảnh hưởng nguồn khoáng đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Nguồn khoáng chất có vai trò quan trọng định tốc độ phát triển hệ sợi nấm Các nguồn khoáng khác nồng độ khác có tác động khác đến phát triển sợi nấm Để xác định nguồn khoáng phù hợp cho giữ giống nhân giống nấm tiến hành nghiên cứu ba nguồn khoáng CaCl2, FeSO4, MgCl2 nồng độ 0,05%, 0,1%, 0,15%, 0,2%, 0,25% thu kết sau: 4.3.1 Ảnh hưởng nồng độ CaCl2 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Kết bảng 4.7, hình 4.7 phụ lục 4.7 cho thấy nuôi nấm môi trường chứa nồng độ CaCl2 khác có ảnh hưởng khác đến phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Nồng độ CaCl2 cao sợi nấm phát triển mạnh Sợi nấm P ostreatus phát triển mạnh môi trường chứa CaCl2 0,25% (83 mm), tốt môi trường chuẩn (70 mm) Môi trường nồng độ 0,15%, 0,2% phát triển vượt qua môi trường chuẩn, nồng độ 22 Footer Page 22 of 149 Header Page 23 of 149 hệ sợi dày, bện kết chặt chẽ với ăn sâu vào chất Hệ sợi nấm phát triển dần nồng độ 0,05% 0,1% (58 mm) (69 mm) Vì vậy, nhân giống nấm thay nguồn CaCl2 0,25% 0,2% vào môi trường Bảng 4.7 Ảnh hưởng nồng độ CaCl2 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm ̅ ±m, mm) (𝑿 0,05% 0,1% 0,15% 0,2% 0,25% MTC 23 ± 17 ± 25 ± 32 ± 35 ± 47 ± 34 ± 27 ± 37 ± 42 ± 46 ± 50 ± 45 ± 36 ± 46 ± 51 ± 56 ± 61 ± 57 ± 47 ± 58 ± 61 ± 67 ± 71 ± 70 ± 58 ± 69 ± 72 ± 78 ± 83 ± CaCl2 Ngày Sự sinh trưởng hệ sợi nấm (mm) 90 80 70 60 50 40 30 20 10 MTC 0,05% 0,1% 0,15% 0,2% 0,25% CaCl2 Hình 4.7 Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus môi trường khác 23 Footer Page 23 of 149 Header Page 24 of 149 4.3.2 Ảnh hưởng nồng độ FeSO4 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Bảng 4.8 Ảnh hưởng nồng độ FeSO4 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm ̅ ±m, mm) (𝑿 0,05% 0,1% 0,15% 0,2% 0,25% MTC 23 ± 23 ± 15 ± 18 ± 19 ± 18 ± 34 ± 33 ± 21 ± 21 ± 25 ± 25 ± 45 ± 45 ± 31 ± 32 ± 31 ± 30 ± 57 ± 55 ± 42 ± 41 ± 39 ± 37 ± 70 ± 66 ± 52 ± 49 ± 46 ± 44 ± FeSO4 Ngày Sự sinh trưởng hệ sợi nấm (mm) 80 70 60 50 40 30 20 10 MTC 0,05% 0,1% 0,15% 0,2% 0,25% FeSO4 Hình 4.8 Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus môi trường khác Kết bảng 4.8, hình 4.8 phụ lục 4.8 cho thấy bổ sung FeSO4 nồng độ khác vào môi trường nuôi cấy nấm P ostreatus không kích thích thêm phát triển sợi nấm Tuy nhiên, nồng độ FeSO4 khác ảnh hưởng khác đến phát triển sợi nấm Ở nồng độ 0,05% phát triển tốt nồng độ không vượt qua môi trường chuẩn Ở 24 Footer Page 24 of 149 Header Page 25 of 149 nồng độ hệ sợi dày phát triển, không ăn sâu vào chất Nồng độ cao sợi nấm phát triển Vì vậy, nhân giống nấm P ostretus không cần bổ sung thêm FeSO4 vào môi trường 4.3.3 Ảnh hưởng nồng độ MgCl2 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Bảng 4.9 Ảnh hưởng nồng độ MgCl2 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm ̅ ±m, mm) (𝑿 0,05% 0,1% 0,15% 0,2% 0,25% MTC 23 ± 15 ± 20 ± 22 ± 28 ± 32 ± 2 34 ± 25 ± 31 ± 31 ± 39 ± 43 ± 45 ± 36 ± 41 ± 42 ± 51 ± 54 ± 57 ± 48 ± 52 ± 58 ± 62 ± 64 ± 70 ± 59 ± 62 ± 69 ± 73 ± 75 ± 0,2% 0,25% MgCl2 MgCl2 Ngày Sự sinh trưởng hệ sợi nấm (mm) 80 70 60 50 40 30 20 10 MTC 0,05% 0,1% 0,15% Hình 4.9 Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus môi trường khác Kết bảng 4.9, hình 4.9 phụ lục 4.9 cho thấy nuôi nấm môi trường chứa nồng độ MgCl2 khác có ảnh hưởng khác đến 25 Footer Page 25 of 149 Header Page 26 of 149 phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Nồng độ MgCl2 cao sợi nấm phát triển mạnh Sợi nấm P ostreatus phát triển mạnh môi trường chứa MgCl2 0,25% với (75 mm) 0,2% với (73 mm), tốt môi trường chuẩn (70 mm), nồng độ hệ sợi dày, bện kết chặt chẽ với ăn sâu vào chất Hệ sợi nấm phát triển dần nồng độ 0,15% trở xuống Vì vậy, nhân giống nấm thay nguồn MgCl2 0,25% 0,2% vào môi trường Qua kết nghiên cứu ảnh hưởng nguồn khoáng gồm: CaCl2, MgCl2, FeSO4 cho thấy sử dụng nguồn CaCl2 nồng độ 0,25% hệ sợi giống nấm sò cấp I có khả sinh trưởng phát triển mạnh đạt (83 mm) Vì vậy, nồng độ CaCl2 0,25% lựa chọn nguồn khoáng sử dụng nhân giống nấm sò cấp I 26 Footer Page 26 of 149 Header Page 27 of 149 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Qua nghiên cứu ảnh hưởng số nhân tố dinh dưỡng đến khả sinh trưởng phát triển hệ sợi giống nấm sò P ostreatus phòng thí nghiệm Công Nghệ Sinh học, Khoa Nông Lâm Ngư, Trường Đại học Hùng Vương cho thấy: - Nguồn cacbon tốt cho sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm sò P ostreatus tinh bột nồng độ 5% - Nguồn nitơ tốt cho sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm sò P ostreatus NaNO3 nồng độ 0,4% - Nguồn khoáng tốt cho sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm sò P ostreatus CaCl2 nồng độ 0,25% - Nói chung, sử dụng nguồn cacbon, nitơ, khoáng nói tốc độ sinh trưởng phát triển mạnh hệ sợi nấm nghiên cứu có mật độ dày, hệ sợi bện kết chặt ăn sâu vào chất Vì vậy, thuận lợi cho sử dụng nhân giống nấm sò P ostreatus cấp I 5.2 Kiến nghị - Cần nghiên cứu thêm ảnh hưởng nhân tố khác nhiệt độ, pH, đến khả sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm sò P ostreatus - Cần đưa kết thu vào nhân giống nấm sò P ostreatus cấp I thực tiễn để đạt kết cao 27 Footer Page 27 of 149 Header Page 28 of 149 Phú Thọ, ngày 12 tháng 04 năm 2015 Sinh viên thực Người hướng dẫn (Ký ghi rõ họ tên) (Ký ghi rõ họ tên) Vũ Thị Huyền Trang Nguyễn Thị Ngọc Liên 28 Footer Page 28 of 149 ... Ảnh hưởng nồng độ FeSO4 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Bảng 4.8 Ảnh hưởng nồng độ FeSO4 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm. .. 4.2.2 Ảnh hưởng nồng độ (NH4)2SO4 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Bảng 4.5 Ảnh hưởng nồng độ (NH4)2SO4 đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Sự sinh trưởng phát triển. .. 4.2.1 Ảnh hưởng nguồn pepton đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Bảng 4.4 Ảnh hưởng nồng độ pepton đến sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm P ostreatus Pepton Ngày Sự sinh trưởng phát triển