đại học thái nguyên Tr-ờng đại học khoa học đào thị thủy Xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn salmonella số đặc điểm salmonella thịt lợn t-ơi khu vực thành phố thái nguyên luận văn thạc sĩ công nghệ sinh học thái nguyên 2012 1S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn đại học thái nguyên Tr-ờng đại học khoa học đào thị thủy Xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn salmonella số đặc điểm salmonella thịt lợn t-ơi khu vực thành phố thái nguyên Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60 42 02 01 luận văn thạc sĩ công nghệ sinh học Ng-ời h-ớng dẫn khoa học: pgs.ts nghiêm ngọc minh thái nguyên 2012 2S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn M U Lý chn ti Trong nhng nm gn õy Bo m cht lng v an ton thc phm ang l mi quan tõm c bit nc ta v nhiu ni trờn th gii S phỏt trin kinh t mnh m, cựng vi quỏ trỡnh ụ th hoỏ ngy cng nhanh cng nh s m rng giao lu quc t ũi hi mi nc khụng nhng phi tng s lng sn phm m cũn phi m bo cht lng v sinh an ton v giỏ tr dinh dng ca thc phm Hin ng c thc phm ang l mt nghiờm trng i vi sc khe ngi Theo bỏo cỏo ca B Y t cho bit nhng nm gn õy ng c thc phm ó xy khỏ ph bin trờn a bn c nc, nm 2006 cú 165 v ng c thc phm vi 7.000 ngi mc v cú 57 ngi t vong Thc t hin nay, thc phm cú ngun gc t ng vt c bit l tht ln bỏn mt s ch, ca hng li khụng m bo cht lng (tht b nhim bi bn, vi khun quỏ trỡnh git m, chuyn v by bỏn ch) iu ú cng lý gii vỡ m hng nm cú rt nhiu v ng c thc phm xy Mt nhng nguyờn nhõn gõy ng c thc phm l vi sinh vt v cỏc c t ca chỳng nhim tht, ú cú vi khun Salmonella v c t ng rut Enterotoxin l mt nhng nguyờn nhõn hng u gõy ng c thc phm Khi i sng ca nhõn dõn ngy cng c nõng cao, an ton thc phm ú cú ln v tht ln sch bnh, khụng b nhim Salmonella l mt yờu cu cp thit Cú rt nhiu tỏc gi ó cụng b rng s nhim Salmonella vo thõn tht ln quỏ trỡnh git m ch yu liờn quan n s nhim trựng Salmonella rut [30], [32] 3S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Theo Bryan (1988); Nielsen v Wegener (1997); Berends B.R., Van Knapen F., Mossel D.A.A., Burt S.A and Snij J.M.A (1998); Schwartz (1999): Cỏc n ln b nhim Salmonella khụng nhng gõy thit hi kinh t cho ngi chn nuụi m cũn l ngun tng tr mm bnh gõy hi i vi ngi Bi vy m mi bin phỏp ngn chn cú hiu qu gia sỳc u cn thit v l iu kin tiờn quyt gúp phn gim thiu dch bnh, tng thu nhp cho ngi chn nuụi, chng ụ nhim mụi trng v bo v sc kho cng ng [31], [33], [35], [37] Xut phỏt t nhng lớ trờn v t thc t i sng, chỳng tụi ó tin hnh thc hin ti: Xỏc nh t l nhim vi khun Salmonella v mt s c im ca Salmonella tht ln ti ti khu vc thnh ph Thỏi Nguyờn Mc tiờu nghiờn cu - Xỏc nh t l nhim vi khun Salmonella trờn tht ln ti - Tỡm hiu mt s c tớnh sinh hoỏ, c tớnh gõy bnh v serotype ca cỏc chng Salmonella phõn lp c Ni dung nghiờn cu 3.1 Kho sỏt tỡnh hỡnh git m v tiờu th tht ln trờn a bn thnh ph Thỏi Nguyờn 3.2 ỏnh giỏ t l nhim vi khun Salmonella trờn tht ln ti: - Ly mu, phõn lp vi khun Salmonella - Xỏc nh ch tiờu tng s vi khun Salmonella tht ln ti - Bin phỏp khng ch tỡnh trng thi tr Salmonella trờn tht ln, gúp phn bo v sc kho ngi tiờu dựng 4S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 3.3 Nghiờn cu c tớnh sinh hc, húa hc: - Nghiờn cu c tớnh sinh hc, húa hc ca vi khun Salmonella phõn lp c - nh type bng khỏng huyt 3.4 Xỏc nh c t ng rut Enterotoxin: - Xỏc nh c lc ca chng vi khun Salmonella phõn lp c - Phõn lp gen c t ng rut Enterotoxin 3.5 Xỏc nh tớnh mn cm vi mt s loi khỏng sinh v húa dc ca cỏc chng vi khun khun Salmonella phõn lp c 5S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Chng TNG QUAN TI LIU 1.1 NG C THC PHM DO VI KHUN SALMONELLA 1.1.1 Ng c thc phm Ng c thc phm (Intoxincation) hay cũn gi l trỳng c thc n n phi nhng thc n cú cha cht c, thng xy mt cỏch t ngt hng lot (nhng khụng phi l cỏc bnh dch nhim khun), cú nhng triu chng ca mt bnh cp tớnh, biu hin bng nụn ma, a chy (tr nhim c t ca vi khun c tht thỡ li b tỏo bún) v cỏc triu chng khỏc c hiu cho mi loi ng c Trong o cú ng c thc phm nhim vi khuõn Salmonella 1.1.2 Ng c thc phm vi khun Salmonella Vi khun Salmonella sng ph tng ca gia cm, gia sỳc v vy nhim vo tht git m Chỳng cng cú mt phõn v d dng xõm nhp vo trng gia cm qua nhng l nh li ti v Salmonella l mt nhng th phm chớnh gõy ng c thc phm vo hố Nhng thc n giu cht dinh dng nh tht, cỏ, trng, sa rt d b nhim Salmonella quỏ trỡnh ch bin, bo qun, chuyn nu khụng bo m v sinh Cỏc thng kờ dch t hc cho thy, cỏc ca ng c thc n nhim khun Salmonella xy l t quanh nm v tng mnh t thỏng n thỏng hng nm õy l lỳc tit tri núng bc, vi khun sinh sụi ny n rt nhanh, rui nhng, giỏn cng hot ng mnh; sc khỏng ca c th li gim sỳt, rt d nhim bnh Thụng thng, 12-24 gi sau n phi thc phm nhim khun (cú nhanh hoc chm hn), bnh nhõn thy au bng, bun nụn, nụn ma, i 6S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn ngoi phõn lng, nhc u, nụn nao, khú chu, m hụi, mt tỏi nht, st 38 -400 C 2- ngy (cú trng hp st lõu hn) Nhng trng hp nh cú th t sau nụn ht thc n hoc sau vi ba ln tiờu chy, ch cn bự nc v cht in gii i vi nhng trng hp nng (nht l vi cỏc em nh, cỏc c gi), cn dựng thờm khỏng sinh theo ch dn ca thy thuc Do nụn nhiu, tiờu chy nhiu, bnh nhõn b mt nc, mt mui nghiờm trng nờn cú th thy mt, mt trng, chõn tay lnh, vt vó, li bỡ, mờ sng Khi ú, cn nhanh chúng chuyn n bnh vin iu tr 1.1.3 Tỡnh hỡnh ng c thc phm Salmonella trờn th gii Nm 2003 ti B cú ti 12.849 trng hp ng c vi khun Salmonella v 6.556 trng hp nhim vi khun Campylobacter v mt s vi khun khỏc m nguyờn nhõn ch yu l ch bin thc phm cha k ú tht nhim bn chim ti 20% (B Y t, 2005) Ngy 1/1/2006 ti Allanta ó xy mt t truyn nhim, vi khun Salmonella cú liờn quan ti thc phm ó lm ngó bnh 172 ngi 18 tiu bang, 11 ngi phi vo bnh vin v khụng cú cht i tng b tỡnh nghi nhim Salmonella gm: rau dip v c chua cỏc tim n v siờu th [13] Ngy 26/12/2007 Ban kim dch v an ton thc phm ca B Nụng nghip M (FSIS) phỏt hin vi khun Salmonella tht bũ ti cỏc ca hng v cỏc kho cha ti cỏc siờu th Arinoza, California, Hawaii, Nevada v New Mexico ó lm 38 trng hp b mc bnh [15] Ngy 9/7/2008 ti M ó cú trờn 1.000 ngi b ngó bnh vỡ vi khun Salmonella, c xem l s ln nht t 10 nm qua ti Hoa K vỡ ng c thc phm Th phm chớnh b nghi ng l c chua, t v ngũ ti 7S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Tc nhim trung bỡnh l 25-40 ca mi ngy, lan trn 41 tiu bang Ti Canada cng cú trng hp [13] 1.1.4 Tỡnh hỡnh ng c thc phm Salmonella Vit Nam Vit Nam v sinh an ton thc phm l mt ó v ang c ng v Nh nc quan tõm Tuy nhiờn, ny trờn thc t li khụng hon ton d dng quỏ trỡnh thc hin Tỡnh trng ng c ó xy hu ht cỏc a phng, nguyờn nhõn ng c rt a dng: ng c thc n b nhim vi khun, hoa qu phun thuc tr sõu, bỏnh ph cú hn the Nhng nguyờn nhõn vi sinh vt chim t l cao t 32,8-55,8 %, c bit l vi khun Salmonella ó gõy nhiu v ng c thc phm Ng c thc n Vit Nam t nm 1983 -1989, tng s 269 v ng c theo dừi, cú 5756 ngi mc, t vong 156 (2,7%) m nguyờn nhõn ch yu l Salmonella (Cc qun lý cht lng v sinh an ton thc phm, 2002) V ng c thc phm n nem thớnh cú nhim Salmonella Thỏi Bỡnh V ng c thc phm n h tiu nhim Salmonella enteritidis Ngy 16/5/2005 v ng c kem Trng Tin lm 13 ngi gia ỡnh ch Ngụ Mai Lan phi vo vin Bch Mai Nguyờn nhõn chớnh l kem nhim vi khun Salmonella [15] Ngy 9/5/2008 theo ụng Trn ỏng - Cc trng Cc an ton v sinh thc phm (B Y t) va thụng bỏo qua kim tra 100 nh hng, quỏn n, c quan chc nng ó úng ca, tm ỡnh ch hot ng 60 c s vi phm v sinh an ton thc phm, ú cú 23 quỏn tht Qua xột nghim mu tht v mu di chớn ó phỏt hin vi khun thng hn (Salmonella) Cú vi khun t mu rau dip cỏ v tht mt s nh hng trờn ph Cu Giy, Trng Chinh ó gõy dch tiờu chy cp ti a bn thnh ph H Ni 8S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 1.2 TèNH HèNH NGHIấN CU VI KHUN SALMONELLA TRấN TH GII V VIT NAM 1.2.1 Tỡnh hỡnh nghiờn cu trờn th gii: Nm 1885, Daniel E Salmon nh bỏc hc thỳ y M ln u tiờn phỏt hin Salmonella t rut ca mt ln v t tờn l Salmonella cholerae suis Vi khun Salmonella sau ny mi c bit l nguyờn nhõn gõy bnh ngi [38] Nm 1933, Hụi nghi cac nha vi sinh võt hoc quục tờ chi nh thc t tờn cho vi khuõn la Salmonella Vo nm 1934, hai nha khoa hoc a thiờt lõp bng cu trỳc khỏng nguyờn u tiờn t tờn l bng phõn loi Kauffmann - White T o ờn bang cõu truc khang nguyờn cua Salmonella luụn c bụ su ng Ngy nay, cỏc nh khoa hc ó xỏc nh c khong trờn 2.500 serotype Salmonella v chia lm 67 nhúm huyt da vo cu trỳc khỏng nguyờn O [25] Nhng nm gn õy, hai serotype Salmonella typhimurium v Salmonella enteritidis c quan tõm nht M, Salmonella khỏng li thuc khỏng sinh thụng thng iu tr bnh cho ngi v gia sỳc Ngy nay, nh danh vi khun Salmonella, ngi ta s dng s ca Kauffmann - White White thit lp, sau ú c Kauffmann b sung v phỏt trin Trờn h thng phõn loi ca Ewing, da vo kh nng gõy bnh v thớch nghi vi vt ch l ngi hay ng vt m Salmonella cú th chia lm nhúm chớnh: Nhúm 1: Salmonella gõy bnh cho ngi gm Salmonella typhi v Salmonella paratyphi A, B v C Chỳng cú th lõy nhim trc tip hoc giỏn tip qua thc n, nc ung, t ngi ny sang ngi khỏc [25] 9S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Nhúm 2: Gõy bnh trờn ng vt, nh Salmonella dublin trõu bũ, Salmonella cholerae suis ln Nhúm 3: Gõy bnh cho nhiu loi ng vt, l nguyờn nhõn gõy nờn nhng v ng c nghiờm trng ngi v ng vt, ú in hỡnh l Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Salmonella spp la tac nhõn gõy ngụ ục thc phõm trờn pham vi toan thờ gii , bờnh chung gõy ang e doa sc kh e cng ng hu ht cỏc quc gia phỏt tri n va ang phat triờn Theo Laval (2000) thỡ nguy c bnh Salmonella ln luụn e da thi ky vụ beo ờn giờt mụ Lũ m cng l ni tng tr v lõy lan mõm bờnh quan cho cac trang trai chn nuụi cung nh ngi tiờu dung Salmonella typhimurium gõy bờnh viờm ruụ t i a chay man ti nh ln , ch cn ln an ln 100 bi i a chay Salmonella, 24 gi sau ca an s b lõy nhim iu ang chu y la phng thc lõy truyờn ngang cua loai vi khuõn t ln sang ln khac an sau chung c ba i thai ngoi mụi trng [1] 1.2.2 Tỡnh hỡnh nghiờn cu tai Vit Nam õy l nhng nghiờn cu cú liờn quan n ti v gn õy nht: Lờ To v cng s (1994) tin hnh phõn lp, xỏc nh serotype ca vi khun Salmonella gõy bnh ln cho bit: 50% l Salmonella cholerae suis; 12,5% Salmonella enteritidis; 6,5% Salmonella typhimurium v cũn li l cỏc serotype khỏc[18] Trn Xuõn Hnh (1995) nghiờn cu trờn ln 2-4 thỏng tui ó xỏc nh c serotype Salmonella vi t l nhim nh sau: Salmonella cholerae suis 35,9%, S derby 17,9, Salmonella typhimurium v Salmonella london 10,2 v thp nht l Salmonella newport 7,6% [5] 10S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read ...đại học thái nguyên Tr-ờng đại học khoa học đào thị thủy Xác định tỷ lệ nhiễm vi khu n salmonella số đặc điểm salmonella thịt lợn t-ơi khu vực thành phố thái nguyên Chuyên ngành:... nhim c t ca vi khun c tht thỡ li b tỏo bún) v cỏc triu chng khỏc c hiu cho mi loi ng c Trong o cú ng c thc phm nhim vi khu n Salmonella 1.1.2 Ng c thc phm vi khun Salmonella Vi khun Salmonella. .. chuyn n bnh vin iu tr 1.1.3 Tỡnh hỡnh ng c thc phm Salmonella trờn th gii Nm 2003 ti B cú ti 12.849 trng hp ng c vi khun Salmonella v 6.556 trng hp nhim vi khun Campylobacter v mt s vi khun khỏc