1 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM o0o TRẦN TRUNG MỸ Tên đề tài: “PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH VAI TRÒ CỦA E.COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON DƢỚI THÁNG TUỔI TẠI MỘT SỐ HUYỆN CỦA TỈNH THÁI NGUYÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ” Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 62 50 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Hướng dẫn khoa học: TS Đỗ Ngọc Thúy (Bộ môn vi trùng - Viện Thú y quốc gia) GS-TS Nguyễn Quang Tuyên (Viện Khoa học sống – ĐHTN) THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng cá nhân Các số liệu, kết luận văn hoàn toàn trung thực chưa công bố công trình nghiên cứu khác Tôi xin đảm bảo thông tin, trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 Tác giả luận văn Trần Trung Mỹ Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu thầy cô giáo khoa Sau Đại học, khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y Quốc gia dành nhiều thời gian công sức giúp đỡ trình học tập tiến hành đề tài nghiên cứu Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn TS Đỗ Ngọc Thúy phó trưởng Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y Quốc gia, GS.TS Nguyễn Quang Tuyên - Viện Khoa học sống - Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện, giúp đỡ tận tình hướng dẫn để hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn cán bộ, công nhân viên chức Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y Quốc gia, cán công nhân viên Chi cục Thú y tỉnh Thái Nguyên, cán công nhân viên Trạm Thú y huyện Định Hóa, Phú Lương Đồng Hỷ giúp đỡ trình nghiên cứu khoa học Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới người thân gia đình, bạn bè, đồng nghiệp động viên giúp đỡ trình học tập trình thực luận văn Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 Tác giả luận văn Trần Trung Mỹ Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn i MỤC LỤC Trang PHẦN MỞ ĐẦU Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số biểu bệnh lý nguyên nhân chủ yếu hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi 1.1.1 Bệnh lý tiêu chảy lợn tháng tuổi 1.1.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy lợn tháng tuổi 1.2 Vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn 15 1.2.1 Vi khuẩn Escherichia coli (E coli) 15 1.3 Biện pháp phòng trị tiêu chảy lợn tháng tuổi vi khuẩn 26 1.3.1 Phòng bệnh 26 1.3.2 Điều trị bệnh 29 Chƣơng 2: NỘI DUNG - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Nội dung nghiên cứu 34 2.2 Nguyên liệu 35 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 35 2.2.2 Địa điểm nghiên cứu 35 2.2.3 Mẫu bệnh phẩm 35 2.2.4 Môi trường, hóa chất, dụng cụ, động vật thí nghiệm 35 2.2.5 Thời gian nghiên cứu 36 2.3 Phương pháp nghiên cứu 36 2.3.1 Phương pháp điều tra dịch tễ học 36 2.3.2 Thu thập mẫu phân lập vi khuẩn 37 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 46 3.1 Kết nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến tháng tuổi Thái Nguyên 46 3.1.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện thuộc tỉnh Thái Nguyên 46 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ii 3.1.2 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 49 3.1.3 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo ph-ơng thức chăn nuôi 53 3.2 Biến động số lượng vi khuẩn hiếu khí vi khuẩn E coli phân lợn tháng tuổi 55 3.2.1 Biến động số lượng vi khuẩn hiếu khí 56 3.2.2 Biến động số lượng vi khuẩn E coli 57 3.3 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu bệnh phẩm 59 3.3.1 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu phân 59 3.3.2 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu phủ tạng 62 3.4 Kết giám định số đặc tính sinh hóa chủng vi khuẩn E coli phân lập 63 3.5 Kết xác định số yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn E coli phân lập 65 3.6 Kết xác định serotyp kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập 66 3.7 Kết xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli phân lập chuột bạch 69 3.8 Kết xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập 71 3.9 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn tháng tuổi 74 3.10 Một số biện pháp phòng bệnh 77 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 78 Kết luận 78 Đề nghị 79 TÀI LIỆU THAM KHẢO 80 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu, từ viết tắt APEC BHI CS ColV Cl perfringens CFU DHL DNA E coli EDTA ETEC FAO KL LD50 LT MR NCCLS NXB OMPs PBW PCR ST Tr UV VP VTEC WTO Ý nghĩa : Asia-Pacific Economic Cooperation : Brain Heart Infusion : Cộng : Colicin V : Clostridium perfringens : Colony Forming Unit : Deoxycholate Hydrogensulfide Lactose : Deoxyribonucleic Acid : Escherichia coli : Ethylene Diamine Tetraacetic Acid : Enterotoxigenic Escherichia coli : Food and Argriculture Oganization : Khuẩn lạc : Lethal Dose 50 : Heat Labile Toxin : Methyl Red : National Committee of Clinical Laboratory : Standards : Nhà xuất : Outer Memberance Proteins : Buffered Pepton Water : Polymera Chain Reaction : Heat Stable Toxin : Trang : Ultraviolet : Voges Proskauer : Verotoxin Producing E coli : World Trade Organization Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iv DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1: Tiêu chuẩn đánh giá mức độ mẫn cảm kháng kháng sinh theo NCCLS (1999) 45 Bảng 3.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện 47 Bảng 3.2: Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết theo mùa vụ 50 Bảng 3.3 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 53 Bảng 3.4: Số lượng vi khuẩn hiếu khí lợn tháng tuổi 56 Bảng 3.5: Biến động số lượng vi khuẩn E coli phân lợn tháng tuổi 57 Bảng 3.6: Kết phân lập vi khuẩn E coli phân lợn tháng tuổi trạng thái 59 Bảng 3.7: Kết phân lập vi khuẩn E coli từ phủ tạng lợn tháng tuổi chết tiêu chảy 62 Bảng 3.8: Đặc tính sinh hóa số chủng E coli phân lập 63 Bảng 3.9: Tỷ lệ chủng vi khuẩn E coli mang yếu tố gây bệnh 65 Bảng 3.10: Kết xác định serotyp kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập từ lợn bệnh 67 Bảng 3.11: Kết xác định độc lực chuột bạch số chủng E coli phân lập 69 Bảng 3.12: Kết xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli 72 Bảng 3.13: Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi 76 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn v DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1: Quy trình phân lập vi khuẩn đường ruột (Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y Quốc gia) 39 Hình 3.1: Biểu đồ tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện 49 Hình 3.2: Biểu đổ tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết theo mùa vụ 52 Hình 3.3: Biểu đồ tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 54 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn PHẦN MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Đã từ lâu chăn nuôi ngành cung cấp thực phẩm chủ yếu phục vụ đời sống người Cùng với nhu cầu thực phẩm người ngày cao, chăn nuôi đạt nhiều thành tựu nhằm đáp ứng nhu cầu Đặc biệt thời kỳ hội nhập APEC, WTO… nay, ngành chăn nuôi nước ta phải chuyển cho phù hợp với yêu cầu thời đại, ngành chăn nuôi, nghề chăn nuôi lợn chiếm vị trí quan trọng Theo thống kê FAO (2006) tổng sản lượng thịt toàn giới 232,1 triệu tấn, thịt lợn 103 triệu (chiếm gần 44%); thịt bò 52,9 triệu (chiếm 22,79%) , thịt gà 48,6 triệu (chiếm 20,93%) Ở nước ta, nghề chăn nuôi lợn có từ lâu đời ngày phát triển, đạt nhiều thành tựu quan trọng hầu hết lĩnh vực chọn tạo giống, dinh dưỡng, kỹ thuật chăn nuôi quy trình vệ sinh thú y… Do vậy, suất chất lượng sản phẩm chăn nuôi lợn không ngừng nâng cao, số lượng đầu lợn tăng ngày nhanh Theo số liệu Cục thống kê năm 2007, tổng đàn lợn Việt Nam năm 2005 đạt 27,434 triệu con, năm 2006 đạt 26,85 triệu con, sớm đạt vượt mục tiêu phấn đấu đến năm 2010 đạt 25 triệu Thực mục tiêu nâng cao chất lượng nạc hoá đàn lợn chuyển sang hướng chăn nuôi tập trung, Đảng Nhà nước ta thực nhiều dự án, chương trình nhằm cải tạo đàn lợn, tăng dần tỉ lệ đàn nái ngoại nái lai cấu đàn nhằm đáp ứng nhu cầu sản phẩm có chất lượng cao nước, hướng tới xuất Cùng với xu nước, tỉnh Thái Nguyên thực dự án nạc hoá đàn lợn, đưa nái ngoại vào chăn nuôi nông hộ từ năm 90 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn kỷ XX Đến nay, có nhiều sở chăn nuôi lợn nái ngoại quy mô từ 50 - 100 - 150 nái/trại Đây thực bước tiến chăn nuôi lợn tỉnh Thái Nguyên, góp phần cung cấp thực phẩm với tỷ lệ nạc cao cho người tiêu dùng Tuy nhiên, với phát triển chăn nuôi tình hình dịch bệnh diễn biến phức tạp (dịch tai xanh, dịch lở mồm long móng…) hàng năm làm chết nhiều đầu lợn Một bệnh gây thiệt hại lớn kinh tế, hay gặp phổ biến lợn tháng tuổi bệnh tiêu chảy Bệnh gọi hội chứng tiêu chảy nhiều nguyên nhân gây nên nhiều yếu tố bất lợi khác tác động thay đổi đột ngột thời tiết, khí hậu, kết hợp với sai sót chăm sóc, nuôi dưỡng, quản lý với điều kiện môi trường chăn nuôi bị ô nhiễm, vệ sinh kém, tạo điều kiện cho vi sinh vật gây bệnh phát triển Hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi nhiều tác giả nước nghiên cứu đề cập tới nhiều khía cạnh khác Vi khuẩn E coli vi khuẩn thường gây tiêu chảy cho lợn tháng tuổi Việc nghiên cứu vi khuẩn giúp có hiểu biết sâu hơn, từ đưa biện pháp phòng điều trị bệnh phác đồ thích hợp hiệu quả, làm giảm thiểu thiệt hại bệnh Xuất phát từ lý trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Phân lập xác định vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi số huyện tỉnh Thái Nguyên biện pháp phòng trị” Mục tiêu nghiên cứu Phân lập xác định số đặc tính gây bệnh chủng vi khuẩn E coli phân lập từ lợn tiêu chảy lợn tháng tuổi số huyện tỉnh Thái Nguyên, làm sở cho việc tuyển chọn chủng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read ... Ph n lập xác định vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi số huyện tỉnh Thái Nguyên biện ph p ph ng trị” Mục tiêu nghiên cứu Ph n lập xác định số đặc tính gây bệnh chủng vi. .. 1.1 .2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy lợn tháng tuổi 1 .2 Vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn 15 1 .2. 1 Vi khuẩn Escherichia coli (E coli) 15 1.3 Biện ph p ph ng trị tiêu chảy. .. 3 .2. 2 Biến động số lượng vi khuẩn E coli 57 3.3 Kết ph n lập vi khuẩn E coli từ mẫu bệnh ph m 59 3.3.1 Kết ph n lập vi khuẩn E coli từ mẫu ph n 59 3.3 .2 Kết ph n lập vi khuẩn E coli