MỘT SỐ KHÁI NIỆM VÀ KỸ THUẬT TRONG CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÁNG SINH  Kháng sinh chất có khả tiêu diệt vi khuẩn hay kìm hãm phát triển vi khuẩn cách đặc hiệu Nó có tác dụng lên vi khuẩn cấp độ phân tử, thường vị trí quan trọng vi khuẩn hay phản ứng trình phát triển vi khuẩn    Một số nhóm kháng sinh quan trọng Penicillin:Là nhóm kháng sinh phát Ban đầu penicillin chiết xuất từ nấm penicillin Bây penicillin tổng hợp nhiều từ số loại hóa chất khác Các dòng penicillin gồm có : Penicillin G penicillin V : loại tổng hợp lần    Aminopenicillin : penicillin bán tổng hợp gồm có ampicillin, amoxillin Các penicillin kháng enzyme penicillinase : oxacillin, methicillin, chloxacillin Penicilin chuyên dùng để điều trị vi khuẩn nhóm seudomonas : piperacillin , cacbercillin, ticarcillin  Các cephalosporin Gồm hệ I, II, III, IV Thế hệ I, II chủ yếu để điều trị vi khuẩn Gram(+); hệ III, IV chủ yếu để điều trị vi khuẩn Gram(-)    Các Aminosid Có từ nguồn gốc vi sinh, có phổ tác dụng rộng, chủ yếu vi khuẩn Gram(-), theo nguồn gốc vi sinh chia ra: Thuốc chiết xuất từ nấm Streptomyces: Streptomicin, Dihydrostreptomycin, Kanamycin, Neomycin, Paromomycin,   Thuốc chiết xuất từ Microspora: Gentamicin, Sisimicin, Sau này, thay đổi cấu trúc hợp chất tự nhiên nói trên, người ta thu thuốc bán tổng hợp như: Amikacin, Netilmicin, Dibekacin,    Các Chloramphenicol (hay Phenicol) Nhóm bao gồm 02 kháng sinh: Chloramphenicol: thường gọi Chlorocid, phân lập từ nấm Streptomyces Venezaclae, sản xuất phương pháp tổng hợp toàn phần Có tác dụng điều trị bệnh thương hàn sốt phát ban Rickettsia (là tác nhân truyền bệnh rận, chấy) Thiamphenicol: dẫn chất Chloramphenicol, thay gốc Nitro gốc Metylsulfon, dung nạp tốt Chloramphenicol  Các Tetracyclin Các Tetracyclin có hoạt phổ rộng (các vi khuẩn Gram(+) Gram(-), Rickettsia, Xoắn khuẩn, ) Chỉ định điều trị cách kết hợp với kháng sinh khác để điều trị bệnh: Brucella, tả, sốt định kỳ, lậu cầu, giang mai, viêm đường tiêu hoá, sốt rét,   Các Marcolid Erythromycine, Rovamycine… Các Lincosamid Lincomycine   Trong tinh protein, có bốn phương pháp ứng dụng nhiều là: Sắc ký lọc gel dựa vào kích thước phân tử (size exclusion chromagraphy) Sắc ký trao đổi ion dựa vào điện tích phân tử (ion exchange chromagraphy)   Sắc ký lực dựa vào lực phân tử với loại phân tử khác (affinity chromagraphy) Sắc ký lỏng cao áp dựa vào kích thước phân tử có độ phân giải cao nhờ vào áp suất (high pressure liquid chromagraphy)    Sắc ký lọc gel Phương pháp dựa vào kích thước phân tử Mẫu nạp vào đầu cột chứa nhiều hạt có lỗ làm từ polymer không tan có tính hydrate hóa cao dextran, agarose (những dạng cabohydrate) hay polyacrylamide Sephadex, Sepharose, Bio-gel loại gel phổ biến thị trường có sẵn hạt có lỗ với đường kính chuẩn 100µm (0.1mm)    Những phân tử nhỏ bên lẫn hạt, phân tử lớn bên hạt Vì vậy, phân tử có kích thước lớn cột chảy nhanh trước Phân tử có kích thước trung bình, vào bên hạt rời khỏi cột vị trí giữa; phân tử nhỏ phải qua đoạn đường dài hơn, quanh co nên sau   Sắc ký trao đổi ion Tại điểm pH trừ điểm đẳng điện, protein có mang điện tích tương ứng với điểm pH Dựa vào điện tích thực chúng điểm pH định, ta phân tách hỗn hợp protein  Trong phương pháp này, pha tĩnh hạt mang sẵn điện tích định, hạt tương tác với phân tử (protein) mang điện tích trái dấu với chúng Cụ thể, hạt mang điện âm (như cột carboxymethyl-cellulose (CM-cellulose)), tiến trình gọi sắc ký trao đổi ion dương, tương tác với phân tử mang điện tích dương Ngược lại, hạt mang điện tích dương (như cột diethylaminoethyl-cellulose (DEAE-cellulose)), gọi sắc ký trao đổi ion âm, tương tác với phân tử mang điện tích âm   Vì thế, protein dấu với cột chạy khỏi cột protein trái dấu bị giữ lại cột Để phóng thích protein này, ta tăng nồng độ ion pha động, ion phân tử protein tương tác với hạt mang điện tích  Ví dụ, sắc ký trao đổi ion dương, ta thêm muối natri clorua hay muối khác dung dịch tách giải ion natri tranh bám vào cột với protein có điện tích dương, đó, protein mang điện tích dương phóng thích cột theo độ lớn điện tích    Sắc ký lực Đây phương pháp hiệu ứng dụng rộng rãi việc tinh protein Kỹ thuật dựa lực cao nhiều protein với nhóm hóa học chuyên biệt  Ví dụ: Concanavalin A, loại protein thực vật, tinh cho qua cột mang phân tử glucose liên kết cộng hóa trị Concanavalin A gắn vào cột có lực cao với glucose, protein khác không   Concanavalin A tách giải khỏi cột ta cho thêm dung dịch glucose đậm đặc vào Phân tử đường dung dịch gắn với Concanavalin A thay phân tử glucose nối với cột   Sắc ký lỏng cao áp Kỹ thuật sắc ký lỏng cao áp dạng mở rộng kỹ thuật sắc ký cột có khả phân tách protein cải thiện đáng kể    Bản thân vật liệu tạo cột vốn có phân chia rõ ràng có nhiều vị trí tương tác dẫn đến khả phân tách tăng lên đáng kể Bởi cột làm từ vật liệu mịn nên phải có áp lực tác động lên cột để có tốc độ chảy thích hợp Kết thực có phân giải cao phân tách nhanh ... triển vi khuẩn    Một số nhóm kháng sinh quan trọng Penicillin:Là nhóm kháng sinh phát Ban đầu penicillin chiết xuất từ nấm penicillin Bây penicillin tổng hợp nhiều từ số loại hóa chất khác Các... trị cách kết hợp với kháng sinh khác để điều trị bệnh: Brucella, tả, sốt định kỳ, lậu cầu, giang mai, viêm đường tiêu hố, sốt rét,   Các Marcolid Erythromycine, Rovamycine… Các Lincosamid... Streptomyces Venezaclae, sản xuất phương pháp tổng hợp tồn phần Có tác dụng điều trị bệnh thương hàn sốt phát ban Rickettsia (là tác nhân truyền bệnh rận, chấy) Thiamphenicol: dẫn chất Chloramphenicol,