Header Page of 161 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA HÓA HỌC BỘ MÔN HÓA HỌC HỮU CƠ  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÂY CỎ THE CENTIPEDA MINIMA (L) GVHD: TS Bùi Xuân Hào Th.S Dương Thúc Huy SVTH: Vũ Thanh Hoài MSSV: K38.201.035 Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 05 năm 2016 Footer Page of 161 Header Page of 161 LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến với thầy Bùi Xuân Hào thầy Dương Thúc Huy thầy cô phòng hợp chất thiên nhiên Những người thầy, người cô đầy tâm huyết, thổi vào tâm hồn em niềm đam mê nghiên cứu khoa học truyền dạy lại cho em kinh nghiệm quý báu Những bước đầu gặp nhiều khó khăn, kiến thức chưa vững dẫn tận tình thầy cô, em hoàn thành tốt công việc Bên cạnh đó, phải kể đến giúp đỡ nhiệt tình bạn sinh viên nghiên cứu K38 K39 suốt thời gian qua Và cuối em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình bạn bè bên cạnh động viên, khích lệ tinh thần giúp em hoàn thành tốt khóa luận i Footer Page of 161 Header Page of 161 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC CHỮ KÍ HIỆU VÀ VIẾT TẮT iii DANH MỤC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ, BẢNG BIỂU iv DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC v LỜI MỞ ĐẦU vi CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 VÀI NÉT VỀ HỌ CÚC - ASTERACEAE 1.2 CÁC CHI TRONG HỌ CÚC – ASTERACEAE 1.3 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT CÂY CỎ THE 1.3.1 Mô tả thực vật cỏ the .3 1.3.2 Công dụng cỏ the .3 1.4 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÓ TRONG CÂY CỎ THE CHƯƠNG THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 HÓA CHẤT, THIẾT BỊ .9 2.1.1 Hóa chất 2.1.2 Thiết bị 2.2 NGUYÊN LIỆU VÀ ĐIỀU CHẾ CÁC LOẠI CAO 10 2.2.1 Thu hái nguyên liệu 10 2.2.2 Điều chế loại cao 10 2.2.3 Cô lập chất cao Ethyl acetate 12 2.2.4 Khảo sát phân đoạn A1 .13 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 14 3.1 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT 1A 14 3.2 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT 1B 16 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 18 TÀI LIỆU THAM KHẢO .19 PHỤ LỤC ii Footer Page of 161 Header Page of 161 DANH MỤC CÁC CHỮ KÍ HIỆU VÀ VIẾT TẮT Ký hiệu, Tiếng Anh Tiếng Việt Proton (1) Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance proton (1) Carbon (13) Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance carbon (13) Heteronuclear Multiple Bond Phổ tương tác dị hạt nhân qua Coherence nhiều liên kết s Singlet Mũi đơn d Doublet Mũi đôi dd Double of doublet Mũi đôi đôi ddd Double of doublet of doublet Mũi đôi đôi đôi δ Chemical shift Độ chuyển dịch hoá học J Coupling constant Hằng số ghép spin ppm Par per million Một phần triệu UV Ultra Violet Tia cực tím AcOH Acetic acid Axit axetic EA Ethyl Acetate Etyl acetat C Chloroform Cloroform H n-Hexane Hexan Me Methanol Metanol Bu Buthanol Butanol W Water Nước chữ viết tắt H-NMR 13 C-NMR HMBC SKC Sắc ký cột SKLM Sắc ký lớp mỏng iii Footer Page of 161 Header Page of 161 DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ, BẢNG BIỂU  HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cây cỏ the .3 Hình 1.2 Hoa cỏ the Hình 3.1 Cấu trúc hợp chất 1A 15 Hình 3.2 Tương quan HMBC hợp chất 1A 15 Hình 3.3 Cấu trúc hợp chất 1B 17  SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Quy trình điều chế loại cao 10 Sơ đồ 2.2 Quy trình sắc ký cột silica gel cao ethyl acetate 12 Sơ đồ 2.3 Quy trình sắc ký cột silica gel cao phân đoạn A1 .13  BẢNG BIỂU Bảng 2.1 Khối lượng loại cao hiệu suất so với bột mẫu nguyên liệu ban đầu Bảng 2.2 Kết sắc ký cột cao ethyl acetate (36,5 g) cỏ the .11 Bảng 3.1 So sánh phổ 1H-NMR 13C-NMR hợp chất 1A 3methoxyquercetin 15 Bảng 3.2 So sánh phổ 1H-NMR 13C-NMR hợp chất 1B quercetin 17 iv Footer Page of 161 Header Page of 161 DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC Phụ lục Phụ lục Phụ lục Phụ lục Phụ lục Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất 1A………… Phổ 13C-NMR hợp chất 1A Phổ HMBC hợp chất 1A Khối phổ phân giải cao hợp chất 1B Phổ 1H-NMR hợp chất 1B Phổ 13C-NMR hợp chất 1B …………… v Footer Page of 161 Header Page of 161 LỜI MỞ ĐẦU Thiên nhiên huyền bí diệu kì, nơi sinh sống người mà nguồn thực phẩm, kho tàng thuốc vô quý giá Vì vậy, từ ngàn xưa, người biết dùng cỏ để làm thuốc chữa bệnh, ban đầu loại thuốc đơn giản chữa trị da, mẫn ngứa, hay dùng để băng bó vết thương phát triển lên thành phương thuốc quý giá chữa bệnh nan y Cùng với phát triển khoa học, người chiết suất nhiều hợp chất hóa học dùng để chữa trị nhiều bệnh hiểm nghèo, hợp chất taxol cô lập từ thông đỏ, hợp chất vinblastin từ dừa cạn, dùng điều trị ung thư vú phụ nữ Từ ngành hóa học hợp chất thiên nhiên đời phát triển mạnh mẽ, kết hợp với y dược sinh học ngày cho đời nhiều hợp chất có giá trị cao, nâng cao giá trị thực vật sống người Trong y học cổ truyền Việt Nam, có nhiều loại cỏ sử dụng làm thuốc như: chùm ruột, cỏ sữa, cành giao, me rừng…trong có cỏ the hay gọi cóc mẳn sử dụng rộng rãi với nhiều công dụng như: điều trị viêm mũi dị ứng, viêm xoang, viêm họng, ung thư biểu mô Những năm gần giới có nhiều nghiên cứu sinh học y dược cỏ the cô lập số hợp chất có khung sườn sesquiterpen lacton có khả kháng khuẩn, kháng ung thư…Dựa tiền đề nghiên cứu có, tiến hành khảo sát thành phần hóa học cao Ethyl acetat cỏ the với mong muốn đóng góp vào việc nghiên cứu hợp chất tự nhiên, tìm hợp chất có hoạt tính sinh học góp phần nâng cao giá trị dược thảo Việt Nam Footer Page of 161 Header Page of 161 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 VÀI NÉT VỀ HỌ CÚC – ASTERACEAE [2] Họ Cúc (Asteraceae) gọi họ Hướng dương hay họ Cúc tây, họ thực vật có hai mầm Họ Cúc họ lớn ngành thực vật có hoa, với khoảng 25.000 loài, gồm phân họ: - Phân họ hoa ống (Tubuliforae hay Asteroideae): cụm hoa có hoa hình ống, hoa hình ống giữa, hoa hình lưỡi nhỏ xung quanh đầu - Phân họ hoa lưỡi nhỏ (Liguiiflorae hay Cichorioideae): tất hoa cụm hoa đầu hoa lưỡi nhỏ, hoa ống Cây có nhựa mủ Họ Cúc phân bố rộng khắp giới, phổ biến khu vực ôn đới miền núi nhiệt đới Ở Việt Nam, họ Cúc có khoảng 125 chi, 350 loài, chủ yếu cỏ dại, số trồng làm cảnh (các loại hoa cúc), rau ăn (ngải cứu, cải cúc, rau diếp), gia vị (cúc tần)… Họ Cúc họ có số loài dùng làm thuốc lớn giới thực vật Có khoảng 51 loài họ Cúc dùng làm thuốc, có 18 loài dùng công nghiệp dược loài: atisô, bạch truật, cỏ nhọ nồi, cỏ ngọt, cúc hoa, cúc tần, hồng hoa, hy thiêm, ké đầu ngựa, khoản đông hoa, mần tưới, mộc hương, ngải cứu, ngưu bàng, sài đất, thương truật, hao hoa vàng, tử uyển • Một số đặc điểm thực vật họ Cúc: Thân cỏ hay bụi, sống năm hay nhiều năm, dây leo hay gỗ Rễ phù lên thành củ, chất dự trữ tinh bột mà inulin (ví dụ thược dược) Lá có hình dạng biến thiên, kèm, thường mọc đối tụ thành hình hoa gốc, có loại có gai Thông thường phiến nguyên, xẻ sâu, hình dạng kép hình lông chim Cụm hoa: đầu, mang nhiều hoa hay hoa Đầu đứng riêng lẻ hay tụ thành chùm, gié, xim, thông thường tụ thành ngù Footer Page of 161 Header Page of 161 Hoa: lưỡng tính, mẫu năm, bầu dưới, bắc Các hoa đầu giống nhau, có cách cấu tạo, chức Bao hoa: đài thường giảm nhiệm vụ bảo vệ đảm nhiệm bắc tổng bao Đài biến mất, gờ nhỏ, nguyên hay có thùy, gờ mang vẩy vòng lông tơ Sau thụ tinh, đài phát triển thành mào lông, láng hay có gai, có nhiệm vụ phát tán Bộ nhị: năm nhị nhau, đính ống tràng xen kẽ với cánh hoa Bao phấn mở dọc, hướng trong, dính thành ống bao quanh vòi Bộ nhụy: hai noãn vị trí trước sau, tạo thành bầu ô, đựng noãn, đính đáy Đĩa mật bầu Ở hoa lưỡng tính hoa cái, vòi xuyên qua đĩa mật chia thành hai nhánh đầu nhụy Các nhánh đầu nhụy mang mặt lông để quét hạt phấn vòi mọc xuyên qua ống cấu tạo bao phấn Sự thụ phấn nhờ côn trùng Quả bế, thường mang mào lông đài biến đổi, có mào lông mang cuống dài hay ngắn Đôi trần có móc hay có gai Hạt nội nhũ, mầm to, nhiều chứa đầy dầu 1.2 CÁC CHI TRONG HỌ CÚC Ở Việt Nam, họ Cúc có khoảng 125 chi, có số chi tiêu biểu, thường gặp chi Gerbera, chi Helianthus L, chi Cynara Cây cỏ the loài thuộc chi Centipeda 1.3 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT CÂY CỎ THE[3] Cây cỏ the thuộc họ Cúc, chi Centipeda Tên khoa học: Centipeda minima (L) Tên thông thường: nga bất thực thảo, địa hồ tiêu, cầu tử thảo, cóc mẳn, cúc mẩn, thạch hồ tuy.[3] 1.3.1 Mô tả thực vật cỏ the Cỏ the loại cỏ mềm, mọc bò lan mặt đất ẩm, thân nhiều cành, có lông mịn trắng, toàn thân trông nhẵn bóng Lá đơn, mọc so le, hình Footer Page of 161 Header Page 10 of 161 ba cạnh, đầu tù, phía cuống hẹp lại, mép có một, hai ba cưa Lá dài khoảng 10-18 mm, rộng khoảng 6-10 mm, gân mặt lá, gân phụ không rõ, cuống Cụm hoa hình đầu mọc nách lá, hoa gồm nhiều lớp, cánh hoa hình ống màu trắng, có cưa Tràng hoa hình chuông, có bốn răng, hình trứng rộng, màu tím Quả bế bốn cạnh, cạnh có lông mịn nhỏ Mùa hoa khoảng tháng - 5, mùa khoảng tháng - Để dùng làm thuốc, thường hái toàn cây, gồm rễ, dùng tươi hay phơi sấy khô Cây mọc hoang khắp nơi vùng đồng ruộng ẩm thấp, ruộng bỏ hoang, bờ rãnh, ven đường… Hình 1.1 Cây cỏ the Hình 1.2 Hoa cỏ the 1.3.2 Công dụng cỏ the Cây cỏ the có vị cay, mùi hắc, tính ấm, có tác dụng tiêu thũng, tiêu viêm, tiêu sưng, giải độc Cỏ the dùng làm thuốc chữa ho, viêm phế quản, mắt đau đỏ sưng, chảy nước dãi, đau màng mộng mắt, viêm mũi dị ứng, hay dùng để chữa bệnh mẫn ngứa (eczema), trị rắn cắn, đắp bó gãy xương.[2] Phần thân, hoa cỏ the sử dụng phổ biến thuốc dân gian Ví dụ thuốc dân gian Trung Quốc, cỏ the dùng để chữa bệnh đau đầu, cảm lạnh, viêm kết mạc bệnh sốt rét Ở Đài Footer Page 10 of 161 Header Page 19 of 161 2.2.4 Khảo sát phân đoạn A1 Thực sắc ký cột phân đoạn A1 (8,60 g) silica gel pha thường, hệ dung môi giải ly chloroform-methanol, với độ phân cực tăng dần, dựa kết sắc ký mỏng, gộp năm phân đoạn kí hiệu: CT-I, CT-II, CT-III, CT-IV CT-V Phân đoạn CT-IV (1,38 g) chạy sắc ký cột silica gel pha thường với hệ dung môi chloroform-methanol có độ phân cực tăng dần (sơ đồ 2.3) thu phân đoạn phụ Dựa kết sắc ký lớp mỏng, phân đoạn CT-IV chọn để tách chất Thực sắc ký cột nhiều lần phân đoạn CT-IV (1,38 g) với hệ dung môi giải ly thích hợp, kết hợp với sắc ký lớp mỏng pha đảo điều chế (MeOH-H O 1:1), cô lập hai hợp chất, ký hiệu 1A; 1B Sơ đồ 2.3 Quy trình sắc ký cột silica gel phân đoạn A1 Phân đoạn A1 (8,60g) SKC silica gel, CHCl3:MeOH C-M (99:1) CT-I (2,56 g) C-M (98:2) CT-II (0,82 g) C-M (19:1) CT-III (1,79 g) 13 Footer Page 19 of 161 C-M (9:1) CT-IV (1,38 g) C-M (8:2) CT-V (1,49 g) Header Page 20 of 161 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT 1A Hợp chất 1A thu được từ phân đoạn A1 cao ethyl acetate với đặc điểm sau:  Chất bột vô định hình màu vàng nhạt  Hiện hình vết màu vàng soi UV, vết màu vàng với dung dịch H SO 20%, sấy nóng  Phổ 1H-NMR (DMSO- d ): Phụ lục  Phổ 13C-NMR (DMSO-d ): Phụ lục  Phổ HMBC (DMSO-d ): Phụ lục Biện luận cấu trúc Phổ 1H-NMR hợp chất 1A cho thấy có diện năm proton nhân thơm khoảng 6-8 ppm, proton nhân thơm δ H 6,18 (1H; d; J 2,0; H6) ghép cặp meta với proton δ H 6,39 (1H; d; J 2,0; H-8) xác nhận hợp chất có vòng benzene với bốn nhóm thế; proton nhân thơm δ H 7,44 (1H; dd; J 8,0; 2,5; H6′) ghép cặp ortho với proton nhân thơm δ H 6,90 (1H; d; J 8,5; H-5′) ghép cặp meta với proton nhân thơm δ H 7,54 (1H; d; J 2,0; H-2′) chứng tỏ ba proton vị trí 1,2,4 nhân thơm B Ngoài ra, phổ 1H-NMR cho thấy diện proton nhóm hydroxyl kiềm nối δ H 12,7 proton nhóm methoxyl δ H 3,77 Phổ 13C-NMR hợp chất 1A cho thấy có diện mười sáu carbon, carbon carbonyl cộng hưởng δ C 177,4 (C-4), năm carbon methine thơm cộng hưởng δ C 115,3 (C-2’); δ C 115,7 (C-5’); 120,5 (C-6’); 98,6 (C-6); 93,6 (C8) Ngoài ra, phổ 13 C-NMR cho thấy diện tín hiệu Csp3 gắn oxygen cộng hưởng δ C 59,6 14 Footer Page 20 of 161 Header Page 21 of 161 Các liệu phổ xác nhận hợp chất 1A có khung sườn flavonol Phổ HMBC cho thấy proton nhóm methoxyl (OCH ) tương quan với carbon δ C 137,6 xác nhận nhóm OCH gắn với carbon δ C 137,6 (C-3) Khi so sánh liệu phổ hợp chất 1A với 3-methoxyquercetin công bố nhận thấy có tương đồng, hợp chất 1A có cấu trúc hợp chất 3methoxyquercetin Hợp chất 1A lần tìm thấy cỏ the OH OH 3' OH 3' 4' 2' 1' O HO 2' 6' 5' HO 10 10 OH 6' OH O Hình 3.1 Cấu trúc hợp chất 1A 5' OCH3 OCH3 O Hình 3.2 Tương quan HMBC hợp chất 1A Bảng 3.1 So sánh phổ 1H-NMR 13C-NMR hợp chất 1A 3-methoxyquecetin[17] Hợp chất 1A 3-Methoxyquercetin 13 H - NMR (DMSO) δ H (ppm) J (Hz) 10 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 6′ OCH C - NMR (DMSO) δC 155,5 137,6 177,8 161,2 98,6 164, 93,6 156,3 104,0 120,7 115,3 145,2 148,7 115,7 120,5 6,18 (d; J 2,0) 6,39 (d; J 2,0) 7,54 (d; J 2,0) 6,90 (d; J 8,5) 7,44 (dd; J 8,0; 2,5) 3,77 (s) 15 Footer Page 21 of 161 OH B A 1' O 4' 13 C - NMR (C) δC 157,8 139,2 179,4 163,2 99,3 164,7 94,3 156,3 105,8 122,1 115,7 145,2 149,0 116,2 123,0 59,63 Header Page 22 of 161 3.2 KHẢO SÁT CẤU TRÚC 1B Hợp chất 1B thu được từ phân đoạn A1 cao ethyl acetate với đặc điểm sau:  Chất bột vô định hình màu vàng nhạt  Hiện hình vết màu vàng soi UV  Khối phổ phân giải cao: Phụ lục  Phổ 13C-NMR (CD OD): Phụ lục  Phổ 1H-NMR (CD OD): Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất 1B cho thấy có diện năm proton nhân thơm khoảng 6-8 ppm, proton nhân thơm δ H 6,23 (1H; d; J 2,0; H6) ghép cặp meta với proton δ H 6,43 (1H; d; J 2,0; H-8) xác nhận hợp chất có vòng benzene với bốn nhóm thế; proton nhân thơm δ H 7,68 (1H; dd; J 8,5; 2,5; H6′) ghép cặp ortho với proton nhân thơm δ H 6,93 (1H; d; J 8,5; H-5′) ghép cặp meta với proton nhân thơm δ H 7,78 (1H; d; J 2,0; H-2′) chứng tỏ ba proton vị trí 1,2,4 nhân thơm B Phổ C-NMR cho thấy tín hiệu cộng hưởng mười lăm carbon, 13 carbon carbonyl cộng hưởng δ C 177,4 (C-4), có năm carbon methine thơm cộng hưởng δ C 116,2 (C-2’); δ C 116,4 (C-5’); 121,8 (C-6’); 99,4 (C-6); 4,6 (C-8) Khi so sánh liệu phổ hợp chất 1B với quercetin công bố nhận thấy có tương đồng, hợp chất 1B có cấu trúc hợp chất quercetin OH 3' 2' HO 1' O OH 4' 5' 6' 10 OH OH O Hình 3.3: Cấu trúc hợp chất 1B 16 Footer Page 22 of 161 Header Page 23 of 161 Bảng 3.2 So sánh phổ 1H-NMR 13C-NMR hợp chất 1B quercetin Hợp chất 1B 10 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 6′ Quercetin H - NMR (CD OD) δ H (ppm); J (Hz) H – NMR (CD OD) δ H (ppm); J (Hz) 6,23(d; 2,0) 6,27 6,43 (d; 2,0) 6,47 7,78 (d; 2,0) 7,82 6,93 (d; 8,5) 7,68 (dd; 8,5; 2,5) 6,97 7,72 17 Footer Page 23 of 161 Hợp chất 1B 13 C - NMR (CD OD) δC 148,4 137,2 177,4 162,4 99,4 165,6 94,6 158,3 104,7 124,2 116,2 148,8 146,2 116,4 121,8 Quercetin 13 C - NMR (CD OD) δC 148,0 137,2 177,3 162,5 99,3 165,3 94,4 158,2 104,5 124,2 116,0 148,8 146,2 116,2 121,7 Header Page 24 of 161 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Từ mẫu cỏ the thu hái huyện Long Hồ, tỉnh Vĩnh Long, khảo sát thành phần hoá học cao etyl acetate cỏ the Bằng kỹ thuật sắc ký cột silica gel pha thường, sắc ký mỏng, cô lập hợp chất: 1A (3-methoxyquercetin) 1B (quercetin) OH 2' HO O 1' 2' 4' 5' 3' OH OH HO 6' 10 OH O 3' 1' OCH3 O (1A) 5' OH 4' 6' OH 10 OH O (1B) Cấu trúc hợp chất xác định dựa vào phương pháp phổ nghiệm đại 1H-NMR, 13C-NMR, HMBC Hướng nghiên cứu tiến hành thăm dò hoạt tính sinh học hợp chất cô lập tiếp tục khảo sát phân đoạn cao lại, góp phần làm sáng tỏ thành phần hóa học nâng cao giá trị sử dụng cỏ the 18 Footer Page 24 of 161 Header Page 25 of 161 TÀI LIỆU THAM KHẢO  Tiếng Việt [1] Phan Văn Cư (2010), “Phân lập flavonoid từ cao butanol diếp cá (Houttuynia cordata thumb) tỉnh Thừa Thiên Huế”,Tạp chí khoa học, Đại học Huế, 63,Trang 30-30 [2] Lê Đình Bích, Trần Văn Ơn (2007), Thực vật học, NXB Y học Hà Nội, Hà Nội, Trang 319-322 [3] Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học Hà Nội, Hà Nội, Trang 931- 933 [4] Nguyễn Kim Phi Phụng (2005), Phổ NMR sử dụng Hóa Phân Tích Hữu Cơ, Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP, Hồ Chí Minh [5] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Phương pháp cô lập hợp chất Hữu Cơ, Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP, Hồ Chí Minh [6] Trần Ngọc Hoàng (2011), Khảo sát thành phần hóa học An Điền Cửu Long Hedyotis uncinella Hook.F họ Cà phê (Rubiaceae), Luận văn thạc sĩ Khoa học Hóa học, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên, Đại Học Quốc Gia TP.HCM, Trang 51-54  Tiếng Anh [7] David Vargas, Xorge a Dominguez, Karim,p marcos gijtierrez, hostettmann (1988), “Orditerpenes and Norditerpene glycosides from Drymarla Areivarloldes”, Phytochemistry, 27(5), pp 1532-1534 [8] Dong-liang Cheng, Xiao-ping Cao, jie-kai Cheng, e Roeder(1993), “Diterpene glycosides from Seneclo Rufus”, Phyrochemistry, 32(1), pp 151-153 [9] Dipti Gupta and Singh J (1989), “Triterpenoid Saponins from Centipeda minima”, Phytochemistry, 28(4), pp 1197-1201 [10] Dipti Gupta and Singh J (1990), “Triterpenoid Saponins from Centipeda minima”, Phytochemistry, 29(6), pp 1945-1950 19 Footer Page 25 of 161 Header Page 26 of 161 [11] Liang H.x, Fukai Bao, Xiaoping Dong, Huajie Zhu, Xiaojia Lu, Ming Shi, Quing Lu and Yongxian Cheng (2007), “Two New Sesquiterpenoids from Centipeda minima”, Chemistry and Biodiversity, 4, pp 2810-2816 [12] Peng Wua, Miao-Xian Su, Ying Wang, Guo-Cai Wang, Wen-Cai Ye, HauYin Chung, Juan Li, Ren-Wang Jiang, Yao-Lan Li (2012), “Supercritical fluid extraction assisted isolation of sesquiterpene lactones with antiproliferative effects from Centipeda minima”, Phytochemistry, 76, pp 133–140 [13] Robin S L Taylor and G H Neil Towers (1998), “Antibacterial constituents of the nepalese medicinal Herb, Centipeda minima”, Phytochemistry, 47(4), pp 631-634 [14] Surjani Soetardjo, Jong Poh Chan, Ahmad Mohamad Noor, Yoga Latha Lachimanan and Sasidharan Sreenivasan (2007), “Chemical Composition and Biological Activity of the Centipeda minima (Asteracea)”, Mal J Nutr, 13(1), pp 81-87 [15] Torgils Fossen, Atle T Pedersen and Oyvind M Anderse (1998), “Flavonoids from Red Onion (Allium Cepa)”, Phytochemistry, 47(2), pp 281-285 [16] D K Obatomi, P H Bach, (1998), “Biochemistry and Toxicology of the Diterpenoid Glycoside Atractyloside”, Food and Chemical Toxicology, 36, pp 335-346 20 Footer Page 26 of 161 Header Page 27 of 161 PHỤ LỤC 21 Footer Page 27 of 161 Header Page 28 of 161 8.0 7.8 7.4 7.6 18 17 16 15 14 13 3.775 6.394 6.390 6.180 6.176 0.88 1.12 7.2 7.0 f1 (ppm) 6.8 6.6 6.4 H-6 6.2 6.0 5.8 5.6 1.12 1.12 1.12 0.88 1.12 8.2 1.12 1.12 8.4 1.00 8.6 H-8 H-5' H-6' 1.12 H-2' 6.908 6.891 7.543 7.539 7.451 7.447 7.435 7.430 7.543 7.539 7.451 7.447 7.435 7.430 6.908 6.891 6.394 6.390 6.180 6.176 12.698 1A-DMSO-1H 12 11 10 f1 (ppm) PHỤ LỤC 1: PHỔ 1H-NMR CỦA HỢP CHẤT 1A 22 Footer Page 28 of 161 -1 Header Page 29 of 161 180 170 92 4' 3' 160 150 f1 (ppm) 140 125 130 120 110 105 f1 (ppm) 100 95 90 85 80 70 60 50 6' 5'2' 220 210 200 190 180 170 160 150 140 130 120 8 10 1' 230 93.599 10 5'2' 115 59.637 104.064 98.598 93.599 120.759 120.553 115.741 115.369 6' 1' 98.598 190 104.064 120.759 120.553 115.741 115.369 164.403 161.249 156.340 155.543 148.749 145.251 137.625 177.837 177.837 164.403 161.249 156.340 155.543 148.749 145.251 137.625 1A-DMSO-13C 110 100 90 f1 (ppm) 40 30 PHỤ LỤC 2: PHỔ 13C-NMR CỦA HỢP CHẤT 1A 23 Footer Page 29 of 161 20 10 -10 -20 -30 Header Page 30 of 161 1A-DMSO-HMBC 70 80 90 100 120 130 140 150 160 170 180 11.5 11.0 10.5 10.0 9.5 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 f2 (ppm) 6.5 6.0 5.5 PHỤ LỤC 3: PHỔ HMBC CỦA HỢP CHẤT 1A 24 Footer Page 30 of 161 5.0 4.5 4.0 3.5 f1 (ppm) 110 Header Page 31 of 161 PHỤ LỤC 4: KHỐI PHỔ PHÂN GIẢI CAO CỦA HỢP CHẤT 1B 25 Footer Page 31 of 161 Header Page 32 of 161 OH 3' 2' HO O OH 4' 1' 5' 6' 10 OH OH O PHỤ LỤC 6: PHỔ 13C-NMR CỦA HỢP CHẤT 1B 26 Footer Page 32 of 161 Header Page 33 of 161 OH 3' 2' HO O 1' 5' 6' 10 OH O PHỤ LỤC 5: PHỔ 1H-NMR CỦA HỢP CHẤT 1B 27 Footer Page 33 of 161 OH OH 4' ... NÉT VỀ HỌ CÚC – ASTERACEAE [2] Họ Cúc (Asteraceae) gọi họ Hướng dương hay họ Cúc tây, họ thực vật có hai mầm Họ Cúc họ lớn ngành thực vật có hoa, với khoảng 25.000 loài, gồm phân họ: - Phân họ hoa... chứa đầy dầu 1.2 CÁC CHI TRONG HỌ CÚC Ở Việt Nam, họ Cúc có khoảng 125 chi, có số chi tiêu biểu, thường gặp chi Gerbera, chi Helianthus L, chi Cynara Cây cỏ the loài thuộc chi Centipeda 1.3 ĐẶC... nhiệt đới Ở Việt Nam, họ Cúc có khoảng 125 chi, 350 loài, chủ yếu cỏ dại, số trồng làm cảnh (các loại hoa cúc) , rau ăn (ngải cứu, cải cúc, rau diếp), gia vị (cúc tần)… Họ Cúc họ có số loài dùng