1 TC GI: Trng Cụng Phỏt TểM TT Hin nay, vic s dng phõn hu c ngy cng c chỳ trng Nc ta cú iu kin thun li phỏt trin nn nụng nghip hu c nh: ngun enzyme thc vt phong phỳ v lng ph phm nụng nghip di Trờn c s ú, ti Nghiờn cu s dng m u thụ (enzyme papain) thy phõn cỏ tra cht sn xut phõn hu c sinh hc v kho sỏt hiu lc trờn rau n lỏ c thc hin Chỳng tụi tin hnh kho sỏt cỏc yu t nh hng n quỏ trỡnh thy phõn nh: t l enzyme v c cht, lng nc b sung, nhit v thi gian thy phõn Sau ú, sn phm phõn hu c dng lng c sn xut v em th nghim ngoi ng rung kim tra hiu qu ca phõn trờn cõy ci xanh iu kin ti u sn xut phõn hu c c xỏc nh l t l m u : c cht cỏ tra l 0,18 g m : 30 g c cht (0,6 %), b sung 100 % nc, nhit thy phõn 55c 20 gi cho sn phm phõn tt nht Sau xõy dng qui trỡnh thy phõn, chỳng tụi tin hnh sn xut phõn hu c dng lng Kt qu th nghim trờn cõy ci xanh cho thy nng s dng phõn thớch hp l %, cõy ci xanh phỏt trin tt v hm lng nitrate an ton cho ngi tiờu dựng Ngoi ra, nh s dng ngun nguyờn liu ph phm nờn giỏ thnh ca phõn thp hn cỏc sn phm cựng loi hn th trng Nh vy, vic s dng papain t m u thy phõn cỏ tra cht va gii quyt c mụi trng va mang li li ớch kinh t cho ngi nuụi cỏ Bờn cnh ú, ti l c s cho cỏc nghiờn cu khỏc v s dng ph phm nụng nghip lm giu cho t nc t Cựng vi s gia tng dõn s nhanh chúng, ngi ang ng trc thỏch thc to ln v lng thc thc phm S tng nng sut cng em n cho ngi nhiu v ti nguyờn v mụi trng Vic s dng phõn bún vụ c, thuc bo v thc vt vụ ti v ang lm nh hng n mụi trng v gõy lóng phớ ngun ti nguyờn Vic s dng phõn hu c ang dn thỏo g cỏc khú khn trờn Hin nay, th trng phõn hu c ang phỏt trin rm r v cú kh nng thay th dn ngun phõn vụ c ang dn b cn kit tng lai Trong ú, phõn hu c sinh hc cú trin vng rt ln Lnh vc ny ang c rt nhiu c quan v cụng ty v ngoi nc quan tõm v u t nghiờn cu Bờn cnh ú, nc ta l nc cú khớ hu nhit i v cú th mnh v nụng nghip Ngun enzyme thc vt phong phỳ v sn cú l iu kin thun li cho chỳng ta phỏt trin lnh vc phõn hu c sinh hc Cõy u l loi cõy rt ph bin, d trng v cho nng sut cao Trung bỡnh kg m cha khong 200 g papain, cõy u cho khong 0,45 kg m u (Nguyn Tin Thng, 2004) Hot tớnh ca papain li cao (91,12 TU/mg - Nguyn Th Xuõn Dung, 2005) nờn õy l ngun enzyme phong phỳ v r tin Hin nay, ti ng bng sụng Cu Long, sn lng cỏ tra c nuụi trng rt ln Nm 2008, nc ta xut khu 640.000 tn cỏ tra cỏ basa t giỏ tr 1,45 t USD Vit Nam ang nhm n sn xut khong 1,5 triu tn cỏ tra, cỏ basa nm 2009 (Helga Josupeit, 2009) Tuy nhiờn, thnh tu trờn ang t cho ng bng sụng Cu Long nn v mụi trng Th lm mt phộp tớnh, vi triu tn cỏ tra, t l phi lờ ca cỏ ch chim 30%, nh vy cú khong 700.000 tn ph phm t cỏc nh mỏy ch bin, y l cha k t l nuụi sng n lỳc khai thỏc thng ch t 70% tng ng vi 428.500 tn cỏ cht Nu bit tn dng hp lý nú s em li ngun thu rt ln t lng ph ph phm ny, c t 4.000 tng/nm (Phng Uyờn, 2007) Hin nay, cụng ty c phn Nụng Nghip Mekong ó sn xut thnh cụng phõn hu c sinh hc t xỏc cỏ da trn Cỏc ph ph phm cỏc nh mỏy ch bin thy sn nh võy, vy, mỏu cỏ v.v v xỏc cỏ tra, cỏ basa nguyờn c xay nhuyn v phõn hy bng men chuyờn dng Cỏc c cht trờn c phi trn theo t l thớch hp to nờn cỏc dũng sn phm chuyờn dng cho tng nhúm cõy trng nh cõy lỳa, cõy rau mu, cõy cụng nghip, cõy n trỏi v.v Tuy nhiờn, vi quy trỡnh ym khớ, thi gian thy phõn lõu nờn nng sut cha cao Nm 2005, Nguyn Th Xuõn Dung ó thc hin ti S dng enzyme papain thy phõn bỏnh du u nnh v kho sỏt cỏc yu t nh hng lờn quỏ trỡnh thy phõn Qua ú, cỏc iu kin nh hng ti papain ó c xỏc nh v õy l c s s dng papain thy phõn ngun c cht sn cú sn xut phõn hu c Da trờn iu kin thc t ú, chng tụi tin hnh nghiờn cu ti: Nghiờn cu s dng m u thụ (enzyme papain) thy phõn cỏ tra cht sn xut phõn hu c sinh hc v kho sỏt hiu lc trờn rau n lỏ ti u húa quỏ trỡnh sn xut phõn hu c, chỳng tụi tin hnh kho sỏt cỏc yu t nh hng n quỏ trỡnh thy phõn nh: t l enzyme v c cht, lng nc b sung, nhit v thi gian thy phõn Sau ú, sn phm phõn hu c dng lng c sn xut v em th nghim ngoi ng rung kim tra hiu qu ca phõn trờn rau iu kin ti u sn xut phõn hu c c xỏc nh l t l m u : c cht cỏ tra l 0,18 g m : 30 g c cht (0,6 %), b sung 100 % nc, nhit thy phõn 55 c 20 gi cho sn phm phõn tt nht Vi cỏc iu kin ny, vic sn xut phõn hu c khụng nhng cho sn phm cht lng cao m cũn tit kim nguyờn liu, t ú h giỏ thnh sn xut Sn phm s cú tớnh cnh tranh hn trờn th trng Sau xõy dng qui trỡnh thy phõn, chng tụi tin hnh sn xut phõn hu c dng lng Kt qu th nghim trờn cõy ci xanh cho thy nng s dng phõn thớch hp l %, cõy ci xanh phỏt trin tt v hm lng nitrate an ton cho ngi tiờu dựng Mc tiờu Phng phỏp 2.1 Mc tiờu ca ti - Xõy dng quy trỡnh ti u cho vic sn xut ch phm phõn hu c sinh hc s dng enzyme papain thụ thy phõn cỏ tra cht - Xỏc nh hiu lc ca loi phõn ny thụng qua th nghim trờn cõy ci xanh 2.2 Phng phỏp nghiờn cu 2.2.1 Vt liu s dng nghiờn cu Cỏ tra cht thu ti ch Linh Trung, Th c, cỏ nguyờn xay nh, cho vo cỏc tỳi ni lụng nh cho vo t lnh tr t -20c, no cn dựng em ró ụng mt lng va dựng Enzyme papain thụ t m u c thu nhn bng cỏch dựng dao vch t - rnh, chiu sõu 1-2 mm lờn b mt dc trỏi u xanh, m s chy ra, thu m vo ng nha, tr lnh Sau ú sy khụ t sy 55c n m ca nha khụ t < %, nghin mn, ri tr mu - 20c Ht ging ci xanh Cụng ty Trang Nụng cung cp Mt s loi phõn hu c trờn th trng nh: - Phõn bún lỏ Toponsu ca Cụng ty TNHH sn xut Hng Quc Bo Thnh phn dinh dng: N: 15 %; P: 15 %, cỏc nguyờn t trung v vi lng % - Phõn Jumb Start dng lng 500 ml Thnh phn dinh dng: N: 0,1 %; P2O5: 0,025 %; K20: 0,1 %; Mg: 0,05 %; Zn: 0,05 %, Fe: 0,1 % a ch cung cp: 67, Phm Thnh H, Q.6, TP H Chớ Minh - Phõn HPRC ca Vin Sinh Hc Nhit i - Xng sn xut sinh hc Phng Thnh Lc, Q.12, TP H Chớ Minh Thnh phn dinh dng: N: 30 %; p205: 10 %; K20: 10 % 2.2.2 Cỏc phng phỏp nghiờn cu Trong quỏ trỡnh thc hin ti, chỳng tụi s dng cỏc phng phỏp: - Xỏc nh m, lõn, kali tng s, m formol, m amoniac xỏc nh thnh phn ca nguyờn liu v hiu qu ca quỏ trỡnh thy phõn - Xỏc nh hot tớnh enzyme ỏnh giỏ kh nng thy phõn ca enzyme - Xỏc nh NO3" ỏnh giỏ d lng NO3" cũn cõy - Xỏc nh NH4+ xỏc nh hm lng NH4+ sn phm phõn hu c cõy cú th s dng c - Phng phỏp ly mu phõn tớch: giỳp quỏ trỡnh ly mu cõy trng chớnh xỏc, hn ch sai s quỏ trỡnh phõn tớch mu 2.2.2.1 nh lng nit tng s bng phng phỏp Kjeldhal Nguyờn tc Tiờu chun ny tin hnh da theo phng phỏp Kjeldhal Chuyn ton b nit mu thnh dng amon sulfat, gii phúng NH3 bng kim, hp thu NH3 bng axit boric v xỏc nh N bng phng phỏp trung hũa dung dch chun HC1 hoc H2S04 Cỏch tin hnh Cõn g (hoc ml dung dch) mu cho vo ng t, thờm g hn hp mui v 25 ml H2S04 m c git parafin, cho vo mỏy phỏ mu, tin hnh phỏ mu cho n dung dch cú mu sut, ngui v thờm khong 50 ml nc Tin hnh ct m: lp ng t vo mỏy ct m khong 350 giõy, NH= c hp thu bng 50 ml dung dch axit boric % ó cho thuc th bromocresol nh lng NH3 bng cỏch chun vi HC1 0,25 N n chuyn t mu xanh sang mu tớa nht Cỏch tớnh % lng N mu ( a-b) X N X 0,01401 X 100 N % = - -m Trong ú: a: th tớch dung dch axit chun s dng cho mu th (ml) b: th tớch dung dch axit chun s dng cho mu trng (ml) N:nng ng lng axit chun, m: lng mu (g) 0,01401 : mili ng lng gam N (g) 2.2.2.2 Phng phỏp xỏc nh nitrogen formol theo phng phỏp Sorensen Nguyờn tc Trong phõn t amino axit, peptite, protein cú mt u chc l carboxylic (COOH) xem nh l mt axit, cũn u l chc amin ( -NH2) xem nh l mt baz; cỏc amin t cng nh ammoniac hũa tan thng dng ammonium (NH4+) kt hp vi mt aniún thng lclorua, sulfate, phosphate v.v Nh vy cho tỏc dng cỏc phõn t phi protein ny vi formol, formol s tỏc dng lờn nhm -NH2 to thnh phc cht metylen HOOC - ầH - NH2 + HCHO I R HCOO - ỗ = CH2 + H20 I R - CH4C1 + HCHO R R - N = CH2 + H20 + HC1 Do vy sn phm l mt hp cht metylen v mt chc -COO t hoc HC1 cú tớnh axit, nờn ta cú th nh phõn bng NaOH xỏc nh mt cỏch giỏn tip lng -NH2 (Nf) Cỏch tin hnh Trung hũa formol l: ly 500 ml formol V2, thờm vo ú vi git thuc th phenolphtalein, cho NaOH 0,1 N tng git cho ti dung dch chuyn mu hng nht (pH = 9), ta c formol V2 ó trung hũa Hỳt 10 ml dung dch nguyờn liu ó pha loóng 10 ln, thờm vo ú 10 ml dung dch formol Vi ó trung hũa v vi git phenolphtalein, lc u phn ng xy hon ton, sau ú nh phõn bng NaOH 0,1 N cho n dung dch chuyn sang mu hng Cỏch tớnh s gam N cú lớt nguyờn liu l: Np = 1,4 X X X (Vt - Vo) Trong ú: Vo: th tớch NaOH trung bỡnh ca ln th khụng Vt: th tớchNaOH trung bỡnh ca ln th tht, x: l h s hiu chinh ca dung dch NaOH 0,1 N 2.2.2.3 Phong phỏp xỏc nh NH3 bng h thng mỏy Kjeldhal Nguyờn tc Nitrogen NH3 thng cú tớnh kim yu, vỡ vy cho tỏc dng vi Magie oxit (MgO) thỡ nhng loi nitrogen ny s b ui dung dch, nờn chng s b lụi cun theo hi nc qua mt bỡnh ng lng tha axit Sau ú, em nh phõn lng axit d cho phộp ta xỏc nh c loi m ny (N-NH3) 2NH4+ + Mg(OH)2 2NH3 + 2H2 + Mg2+ 2NH3 + H2S04 - * (NH4)2S04 Cỏch tin hnh: Cõn chớnh xỏc g ( ml) nguyờn liu cho vo ng thy tinh ri cho 20 ml nc ct v vi git phenolphtalein, thờm MgO y np lc u n cú mu hụng nht, cho ng thy tinh vo mỏy ct m, hi nc c chng ct sang mt bỡnh tam giỏc cha lOml dung dch H2S04 0,1N v vi git thuc th Tashiro (0,1 g methyl red + 0,2g methylen blue pha 100 ml ethanol 96%) Chng ct khong 350 giõy, dng giy qu th xem cũn NH3 khụng.nh phõn lng axit d bng NaOH ó c hiu chnh X X 0,1 t mu tớm sang mu xanh ve chai Cỏch tớnh: s gam ammoniac lớt nguyờn liu: N-NH3 = 1,4 x AV x x/m (g/1) Trong ú: AV = (Vt - Vo) l lng NaOH tng ng vi lng m phúng thớch ó c hp thu H2S04 Vo: l th tớchNaOH trung bỡnh ca ln th khụng Vt: l th tớch NaOH trung bỡnh ca ln th tht, m: lng nguyờn liu em phõn tớch, x: h s hiu chnh ca dung dch NaOH 0,1N 2.2.2.4 Xỏc nh hot tớnh protease bng phong phỏp Anson Nguyờn tc Casein b phõn gii mụi trng kim di tỏc dng ca protease to sn phm l cỏc on peptide ngn hũa tan tricloroacetic acid (TCA), xỏc nh lng tyrosine v tryptophan hũa tan bi thuc th Folin Húa cht: Dung dch m Sorensen pH 7,6: trn chung dung dch Na2HP04 1/15 M vi dung dch KH2P04 1/15 M n pH t 7,6 Dung dch casein 1%, TCA 5%, NaOH 0,5 N, HC1 0,2 N, tyrosine 20 mM Thuc th Folin ( pha loóng vi nc ct theo t l 1:4) Cỏch tin hnh Bng 2.1 Xõy dng ng chun tyrosine Dung dch húa cht ng nghim _ !_ Dung dch tyrosine chun (ml) 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Lng tyrosine tng ng (pM) 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 5,0 Dung dch HC1 0,2 N (ml) Dung dch NaOH 0,5 N (ml) 4,8 10 4,6 10 4,4 10 4,2 10 4,0 10 5,0 10 Thuc th Folin (ml) 3 3 3 Lc mnh, sau 10 phỳt o OD bc súng 660 nm ng s l ng kim chng (KC), cỏc ng cũn li l ng thớ nghim (TN) V ng chun tyrosine tng quan tng quan gia lng tyrosine (pM) v OD (AOD = ODTN ODKC ) Bng 2.2 Xỏc nh lng tyrosine dung dch nghiờn cu Dung di ch húa cht Ong nghim Th tht Th khụng Dung dch casein 1% (ml) 5 Dung dch TCA 5% (ml) Dung dch enzyme mu (ml) 10 1 10 Lc u v gi 35,5c 20 phỳt Dung dch TCA 5% (ml) yờn 30 phỳt, lc ly dch bờn di Ly ng nghim mi khỏc,cho vo ng th nht 5ml dch lc ca ng th tht v cho vo ng th hai 5ml dch lc cựa ng th khụng Tip tc thờm v mi ng 10ml NaOH 0,5 N v ml thuc th Folin, lc mnh, sau 10 phỳt o OD bc súng 660 nm OD = ODTT - ODTK, sau ú da vo th chun suy c pM tyrosine Cỏch tớnh nh ngha n v Anson: mt n v Anson l lng enzyme ti thiu iu kin thớ nghim ( 35,5c, pH 7,6 v.v) thy phõn casein phỳt to thnh sn phm hũa tan TCA, phn ng vi thuc th Folin cho ta hp thu OD bc súng 660 nm tng ng vi pM tyrosine ng chun pM Tyrosine* V * L H= t *m*v (UI/g ) Trong ú: V : tng th tớch hn hp ng th tht hoc ng th khụng (ml) V : th tớch dch lc em phõn tớch (ml) t : thi gian thy phõn (phỳt) m : lng mu enzyme em i xỏc nh hot tớnh (g) L: pha loóng enzyme pM tyrosine: lng pM tyrosine V (ml) suy t ng chun 2.2.2.5 Phng phỏp xỏc nh kali tng s (10 TCN 360-99) Nguyờn tc Hũa tan cỏc dng Kali hu hiu phõn bng dung dch HC1 0,05 N Xỏc nh hm lng kali dung dch bng mỏy quang k ngn la Cỏch tin hnh Cõn chớnh xỏc lng mu ó chun b ging nh phng phỏp xỏc nh lõn tng s cho vo bỡnh tam giỏc cú dung tớch 200-250 ml Cho thờm 50 ml dung dch HC1 0,05 N, lc 30 phỳt sau ú lc Ra cn trờn phu ln, mi ln 10ml dung dch HC1 0,05 N Gom dung dch lc v dung dch vo bỡnh nh mc 200 ml v thờm dung dch HC1 0,05 N n vch nh mc Lm tng t vi mu trng Lp thang tiờu chun kali: S dng cỏc bỡnh nh mc 200 ml, ln lt cho vo cỏc bỡnh nh mc s ml dung dch tiờu chun 1000 ppm K v s ml dung dch HC1 IN theo bng sau, ri cho nc n vch nh mc Bng 2.3 Xõy dng ng chun Kali Nng K (ppm) dung S ml dung dch tiờu chun S ml dung dch HCl dch tiờu chun 1000 ppm K N 0 10 10 10 10 40 10 50 10 10 60 12 10 20 30 10 Pha loóng dung dch chit mu bng dung dch HC1 0,05 N theo h s thớch hp t cỏc dung dch dóy tiờu chun, dung dch mu trng v cỏc dung dch mu trờn quang k ngn la ti bc súng 768 nm Lp th ng chun tng quan gia nng kali dung dch tiờu chun v s o trờn mỏy, cn c vo ũ th chun tớnh nng kali mu Cỏch tớnh % lng kali mu c X f X V X 1,025 X 100 K2 ( % ) = - - 1000 X 1000 x m Trong ú: C: Nng K dung dch tng ng s o trờn mỏy (ppm) f: H s pha loóng, m: lng mu (g) V: th tớch (ml) 2.2.2 ể PhoTig phỏp xỏc nh lõn tng s (10 TCN 306-97) Nguyờn tc Nguyờn tc chung l un t mu vi hn hp cng thy v xỏc nh hm lng pht bng phng phỏp o mu s dng molypdovadanat to mu vng Cỏch tin hnh Cõn 0,5 g mu cho vo bỡnh t, thờm 15 ml HN03 c, un sụi nh khong 30- 45 phỳt cho oxy húa ton b cỏc cht cú th oxy húa 10 e ngui bỡnh v cho thờm 10-20 ml hn hp cng thy, un nh mt cỏch cn thn cho n dung dch khụng cú mu hoc gn nh ht mu v bỡnh xut hin khúi trng m c Sau t xong, hi ngui thờm vo 50 ml nc ct v un sụi ớt phỳt Chuyn ton b dung dch v cn bỡnh cụng phỏ sang bỡnh nh mc 200ml, thờm nc ct n vch 200 ml, lc u hoc lc lng Chun b cỏc dung dch tiờu chun cú nng 0,4 mg/ml - 1,0 mg P205/ml Chun b bỡnh tam giỏc 100 ml v ln lt cho vo mi bỡnh s ml dung dch tiờu chun mg p205/ml nh bng 2.4 Bng 2.4 Xõy dng ng chun p205 S th t dung Nng dung dch sau pha Th tớch dung dch tiờu chun dch (mg p205/ml) mg P2Os/ml (ml) 0,4 10,0 0,5 12,5 0,6 15,0 0,7 17,5 0,8 0,9 20,0 22,5 1,0 25 Sau ú thờm nc n vch v lc u Xõy dng thang tiờu chun: chun b bỡnh nh mc 100 ml Dng pipet ln lt ly ml dung dch ca dung dch tiờu chun b cho vo bỡnh nh mc theo th t Thờm vo mi bỡnh 45 ml nc ct v vũng phỳt thờm 20 ml dung dch molypdovanadat v thờm nc ct n vch, lc u, yờn 10 phỳt o mu trờn quang ph ti bc súng 400-420 nm Lp th chun tng quan gia s o trờn mỏy vi lng cha P205 cỏc bỡnh tiờu chun Hỳt VI dung dch mu cú tin hnh to mu v o trờn mỏy cho lng P205 th chun Bng 1.22 Sụ liu vờ trng lng cõy dựng chờ phõm cỏc nụng khỏc Nng d ch phm (%) i chng Trung bỡnh Ln lp li 54,2 53 64,3 67 55,6 58,82 63,6 60 55 68,6 59,4 61,32 Trung bỡnh 58,9 56,5 59,7 67,8 57,5 60,08 58,9 56,5 59,67 67,8 57,5 60,07 Bng 1.23 Bng ANOVA v trng lng t s liu bng 1.22 N s A L I S Y OF V A N Degrees of Freedom Source R c I E A Sum of Squares T A B L E Mean Square F-value 111 nt 15.63 241.90 7.813 60.476 0.60 4.62 Error Non-additivity Residual 104.80 5.46 99.34 13.100 5.461 14.191 0.38 Total 14 362.33 901.100 Total Count= Grand Mean= 60.073 Grand Sum= Prob 0.5736 0.0316 15 Coefficient of Variation= 6.02% Means for variable (tluong) for each level of variable (nt): Var Value Var Mean 58.900 56.500 59.667 67.800 57.500 Bng 1.24 Bng trc nghim phõn hng v chiu cao t s liu bng 1.22 LSD value = 6.815 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean = = = 58.90 56.50 59.67 B B B Mean Mean Mean = = = 67.80 A 59.67 B 58.90 B Mean Mean = = 67.80 A 57.50 B Mean Mean = = 57.50 56.50 B B Bng 1.25 S liu v s lỏ dựng ch phm cỏc nng pha loóng khỏc Nng d ch phm (%) 8,8 7,2 9,4 9,2 8,6 8,64 i chng Trung bỡnh Ln lp li 8,4 Trung bỡnh 7,4 9,2 8,8 8,56 8,6 7,3 9,2 9,3 8,7 8,6 7,3 9,2 9,23 8,7 8,62 8,61 Bng 1.26 Bng ANOVA v s lỏ t s liu bng 1.25 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E Source Degrees of Sum of Freedom Squares T A B L E Mean Square F-value 111 nt 0.02 7.38 0.009 1.846 0.37 77 99 Error Non-additivity Residual 0.19 0.05 0.14 0.024 0.047 2.28 Total 14 7.59 Grand Mean= 8.607 Grand Sum= 129.100 Total Count= Means for variable (sola) for each level of variable (nt): Var Mean 8.600 7.300 9.200 9.233 8.700 Bng 1.27 Bng trc nghim phõn hng v s lỏ t s liu bng 1.25 LSD value = 0.2917 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean = = = 8.600 7.300 9.200 A Mean Mean = = 9.233 A 8.700 Ranked Order B c B 0.7044 0.0000 0.020 Coefficient of Variation= 1.79% Var Value Prob Mean Mean Mean = = = 9.233 A 9.200 A 8.700 Mean Mean = = 8.600 7.300 B B c 15 Bng 1.28 Sụ liu vờ NSTT dựng chờ phõm cỏc nụng khỏc Ln lp li Nng d ch phm (%) 29,5 26,5 23,5 33,4 28,6 28,3 i chng Trung bỡnh Trung bỡnh 25,4 25,3 31,21 30,2 26,4 27,702 24,6 24,6 27,25 31,4 27,54 27,078 26,5 25,47 27,32 31,67 27,51 27,69 Bng 1.29 Bng ANOVA v NSTT t s liu bng 1.28 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Freedom Squares Source 111 nt Error Non-additivity Residual 3.73 67.02 49.31 Total 14 120.07 Grand Mean= 27.693 Mean Square F-value 1.867 16.756 6.164 0.024 7.041 0.30 2.72 0.02 49.29 Grand Sum= 415.400 Total Coefficient of Variation= 8.96% Means for variable (nsuattt) for each level of variable (nt): Var Value Var Mean 26.500 25.467 27.320 31.667 27.513 Bng 1.30 Trc nghim phõn hng v NSTT t s liu bng 1.28 LSD value = 4.675 at alpha = 0.050 Ranked Order Original Order Mean Mean Mean = = = 26.50 25.47 7.32 B B AB Mean Mean Mean = = = 31.67 A 27.51 AB 27.32 AB Mean Mean = = 31.67 A 27.51 AB Mean Mean = = 26.50 25.47 B B Prob 0.7468 0.1067 0.00 Count= 15 Thớ nghim So sỏnh ch phm vi cỏc sn phm cú trờn th trng Bng 1.31 S liu v lng N03' ca cỏc sn phm Ln lp li 1109,6 1040,4 577,2 1418,8 1135,8 1056,4 Sn phm 1182,6 975,2 605,8 1927,8 1342 1206,68 i chng Ch phm HPRC Jumb start Toponsu Trung bỡnh Trung bỡnh 1146,2 1014,4 591,6 1666,8 1238,8 1131,56 1146,13 1010 591,53 1671,13 1238,87 1131,53 Bng 1.32 Bng ANOVA v lng NO3 t s liu bng 1.31 A N A L Y S I S F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Freedom Squares Mean Square F-value Prob Source 111 nt Error Non-additivity Residual 56490.25 1827816.53 99565.69 69175.26 30390.43 Total 14 1983872.47 28245.124 456954.134 12445.711 69175.255 4341.490 2.27 36.72 15.93 Grand Mean= 1131.533 Grand Sum= 16973.000 Total Coefficient of Variation= 9.86% Means for variable (no3) for each level of variable (nt) Var Var Value Mean 1146.133 1010.000 591.533 1671.133 1238.867 Count= 15 Bng 1.33 Bng trc nghim phõn hng v lng N03' t s liu bng 1.31 LSD value = 210.1 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 1146 BC 1010 c 591.5 D 1671 A 1239 B Ranked Order Mean Mean = = 1671 A 1239 B Mean Mean Mean = = = 1146 1010 591.5 BC c D 0.1657 0.0000 Bng 1.34 S liu v NSLT ca cỏc sn phm Ln lp li 27,8 33,5 30,1 41,3 25 31,54 Sn phm 29,7 34,3 23,5 25,2 27,9 i chng Ch phm HPRC Jumb start Toponsu Trung bỡnh 28,12 Trung bỡnh 28,75 33,9 26,8 33,25 26,45 29,83 28,75 33,9 26,8 33,25 26,45 29,83 Bng 1.35 Bng ANOVA v NSLT ca cỏc sn phm t s liu bng 1.34 N A L Y s OF V I S A R I A N Degrees of Freedom Source c T A B L E E Sum of Squares Mean Square F-value 14.620 37.525 16.059 19.051 15.632 0.91 2.34 447.450 Total Count= LLL NT Error Non-additivity Residual 29.24 150.10 128.47 19.05 109.42 Total 14 307.81 Grand Mean= 29.830 Grand Sum= Coefficient of Variation= 13.43% Prob 0.4403 0.1427 1.22 15 Means for variable (NSLT) for each level of variable (NT): Var Value Var Mean 28.750 33.900 26.800 33.250 26.450 Bng 1.36 S liu v NSTT ca cỏc sn phm Sn phm i chng Ch phm HPRC Jumb start Toponsu Trung bỡnh 28,6 33,4 23,1 30,5 28,7 28,86 Ln lp li 26,4 30,2 29,4 37,8 26,2 30 27,54 31,4 27,6 32,3 25,3 28,828 Trung bỡnh 27,51 31,67 26,7 33,53 26,73 29,23 Bngl 37 Bng ANOVA v NSTT ca cỏc sn phm t s liu bng 1.36 N s A L I S Y OF V A N Degrees of Freedom Source R I A c E Sum of Squares Mean Square F-value 2.229 30.028 7.423 4.677 7.815 0.30 4.05 438.440 Total Count= LLL NT Error Non-additivity Residual 4.46 120.11 59.38 4.68 54.71 Total 14 183.95 Grand Mean= 29.229 T A B L E Grand Sum= Prob 0.7487 0.0440 0.60 15 Coefficient of Variation= 9.32% Means for variable (NSTT) for each level of variable (NT): Var Value Var Mean 27.513 31.667 26.700 33.533 26.733 Bng 1.38 Trc nghim phõn hng v NSTT ca cỏc sn phm t s liu bng 1.36 LSD value = 5.130 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean = = 27.51 31.67 B AB Mean Mean = = 33.53 A 31.67 AB Mean Mean Mean = = = 26.70 B 33.53 A 26.73 B Mean Mean Mean = = = 27.51 26.73 26.70 B B B r Bng 1.39 S liu v chiu cao ca cõy dựng cỏc sn phm Sn phm i chng Ch phm HPRC Jumb start Toponsu Trung bỡnh 32,6 39,04 34,8 35,2 31,24 34,576 Ln lp li 32,88 36,34 35,62 37,56 33,44 35,168 32,74 37,69 35,21 36,38 32,34 34,872 Trung bỡnh 32,74 37,69 35,21 36,38 32,34 34,87 Bng 1.40 Bng ANOVA v chiu cao ca cõy t s liu bng 1.39 A N A L Y S I S F V A R I A N C E Degrees of Freedom Source Sum of Squares Mean LLL NT Error Non-additivity Residual 0.88 63.86 8.35 2.32 6.03 Total 14 73.08 Grand Mean= 34.872 T A B L E Square F-value 0.438 15.964 1.044 2.321 Prob 0.42 15.30 0.6709 0.0008 2.69 0.861 Grand Sum= 523 080 Total Count= 15 Coefficient of Variation= 2.93% Means for variable (CHIEUCAO) for each level of variable (NT): Var Value Var Mean 32.740 37.690 35.210 36.380 32.340 Bng 1.41 Trc nghim phõn hng v chiu cao ca cõy t s liu bng 1.39 LSD value = 1.924 at alpha = 0.050 Original Order Mean Mean Mean = = = 32.74 37.69 A 35.21 Mean Mean = = Ranked Order C B Mean Mean Mean = = = 37.69 A 36.38 AB 35.21 B 36.38 AB 32.34 C Mean Mean = = 32.74 32.34 c c Bng 1.42 S liu v s lỏ ca cõy dựng cỏc sn phm khỏc Sn phm Ch phm HPRC 8,6 9,2 Jumb start Toponsu Trung bỡnh 8,8 8,72 i chng Ln lp li 8,8 9,2 8,7 Trung bỡnh 8,7 9,3 9,23 8,8 8,6 8,4 8,7 8,4 8,7 8,88 8,82 8,81 Bng 1.43 Bng ANOVA s lỏ ca cõy dựng cỏc sn phm khỏc N s A L I S Y OF V A N R I A c E Degrees of Freedom Source LLL NT Error Non-additivity Residual Total Grand Mean= T A B L E Sum of Squares Mean Square F-value 0.07 1.22 0.30 0.033 0.306 0.038 0.87 8.12 0.12 0.18 0.122 0.026 4.74 14 1.59 132.100 Total Count= 8.807 Grand Sum= Prob 0.4561 0.0064 15 Coefficient of Variation= 2.20% Means for variable (SOLA) for each level of variable (NT): Var Value Var Mean 8.700 9.233 9.000 8.400 8.700 Bng 1.44 Bng trc nghim phõn hng s lỏ ca cõy t s liu bng 42 LSD value = 3670 at alpha = 0, 050 Original Order Ranked Order Mean Mean = = 8.700 BC 9.233 A Mean Mean = = 9.233 A 9.000 AB Mean Mean Mean = = = 9.000 AB 8.400 c 8.700 BC Mean Mean Mean = = = 8.700 8.700 8.400 BC BC c Bng 1.45 S liu v trng lng ca cõy dng cỏc sn phm khỏc Sn phm i chng Ch phm HPRC Jumb start Toponsu Trung bỡnh 59,4 68,6 47 50,4 55,8 56,24 Ln lp li 55,6 67 60,2 82,6 50 63,08 Trung bỡnh 57,5 67,8 57,5 67,8 53,6 66,5 52,9 59,66 53,6 66,5 52,9 59,66 Bang 1.46 Bang ANOVA vờ luang cõy tir sụ liờubõngl 45 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E Degrees of Sum of Freedom Squares Source LLL NT Error Non-additivity Residual Total Grand Mean= 58.482 150.099 64.237 0.91 2.34 76.20 437.69 76.204 62.527 1.22 14 1231.26 Grand Sum= Means for variable (CHIEUCAO) for each level of variable (NT): 57.500 67.800 53.600 66.500 52.900 F-value 116.96 600.40 513.90 59.660 Var Mean Mean Square Coefficient of Variation= 13.43% Var Value T A B L E 894 900 Total Count= Prob 0.4403 0.1427 15 PH LC K THUT TRNG CI NGT, CI XANH Ci ngt, ci xanh l rau ngn ngy cú th trng quanh nm, khụng cn nhiu m tiờu th li d dng vỡ th c trng khỏ ph bin Tp H Chớ Minh Tuy nhiờn, ci ngt, ci xanh li d gõy ng c nht cho ngi tiờu dng bi l b nhiu sõu bnh hi khú tr, thi gian sinh trng ngn m phn ln cỏc phõn, thuc húa hc cú thi gian cỏch ly di, thuc vi sinh v iu hũa sinh trng kộm tỏc dng vi mt s sõu nh b nhy, nụng dõn thng ti phõn m nhiu ln cõy sinh trng nhanh Do ú d lng thuc tr sõu v d lng nitrat thng cao chng loi rau ny v dn n tỡnh trng ng c cho ngi tiờu dng khc phc tỡnh trng trờn nht thit phi theo qui trỡnh sn xut mc 3.1 2.1 K THUT TRNG CI 2.1.1 Ging v chun b cõy Hin nay, ngi nụng ca Hp tỏc xó sn xut rau an ton Tróng Di, Thnh ph Biờn Ho, chuyờn cung cp rau cho siờu th Co.op Mark, ang s dng ht ging ci ngt S ca Cụng ty Ging cõy trng Min Nam, c x lý bng thuc Appencard Super 50FL vi lng dựng 2-3 cc/1 lớt nc 15 phỳt vt rỏo nc, ml ờm ri em gieo, Carbenzim, Ht Vng, Bendazol Sau gieo ri lp t mng ph ht v rc thuc tr cụn trựng hi nh: kin, b nhy, sựng, ng thi ph lp rm mng chng ma v gi m khụ Khi cõy t 18-19 ngy tui em i trng, trc nh ngy cn ti phõn DAP pha loóng 30 g/10 lớt nc 2.1.2 Chun b t Ci ngt, ci xanh cú th trng trờn nhiu loi t nhng cn thoỏt nc tt Cn chun b t k: phi i t khong 3-4 ngy Trc lờn lip cn lm t ti xp, sch c di cựng cỏc tn d thc vt, sau ú bún vụi bt kg/20 m2 t Lờn lip rng 80 - 100 cm, nu khụ lờn lip cao 10-15 cm; ma lờn lip cao 20 cm 2.1.3 Thi v Ci ngt, ci xanh cú th trng quanh nm Nu trng thỏng 12, thỏng 01 nng sut cao nhng thng b nhiu sõu hi Mựa ma khú trng nhng thng bỏn c giỏ cao hn 2.1.4 Mt trng trng cho 100 m2 nu gieo trờn lip m cn 20 g ht ging; nu gieo trc tip tng hng ri ta dn cn 40 g ht ging; cũn nu gieo vói thỡ cn ti 60 g ht ging Trng khong cỏch 10x10 cm 2.1.5 Bún phõn 2.1.5.1 Bún lút Vn m, trng: lút phõn chung hoai mc (phõn Cỳt) 15 kg/10 m2 + 0,25 kg NPK /10m2 2.1.5.2 Bún thỳc Rung trng: X lý t trc trng bng vụi bt 2,5 kg/10m2 Sau trng ngy l thi k cõy phc hi phõn ln 1, phỏt trin thõn lỏ mnh cn phun phõn ln 2, ln 3, ln 4, c cỏch ngy/ln 2.2 Phũng tr dch hi 2.2.1 Thuc tr sõu B thuc s dng tr sõu bnh cho cõy ci ngt, ci xanh chỳ ý s dng cỏc thuc ớt c v thi gian cỏch ly ngn: Nhúm thuc tr sõu thi gian cỏch ly 14 - 15 ngy: Cyperan 25EC, Forsan 50EC, Polytrin P440ND, SecSaigon, Sherpa Nhúm thuc tr sõu thi gian cỏch ly - 10 ngy: Peran 50EC, Alphan 5EC, Match 50ND, Bassan 50ND, Bascide 50EC Nhúm thuc tr sõu thi gian cỏch ly di ngy: Forvin 85WP, Vertimex 1,8ND, Succes 25SC, Actara 25WG, cỏc thuc iu hũa tng trng v vi sinh 3.2.2 Thuc tr bnh: Appencard super 50FL, Appencard super 75DF, Carban 50SC, Score 250ND, Topan 70WP, Validan 3DD - 5DD, Zinacol 80WP, Zineb Bui 80WP, Manzat 200 80WP, Carbenzim, Mexyl MZ, Thio-M, Vanicide, Dipomate 2.2.3 Phũng tr B nhy (Phyllotetra striolata) Sõu non B nhy sng r cn ri Basudin 10H, Sago super 3G vi lng kg/1000 m2 trng Trong vũng 10 ngy sau trng nu B nhy xut hin cú th s dng thuc Sherpa, G Nũi, Sec Saigon, Polytrin P440ND, Forwathion 50EC, Cyperan 25EC hoc Alphan 50EC Sau trng 10 ngy nu B nhy xut hin nhiu cú th s dng thuc Alphan 50EC, Match 50ND, Peran 5EC hoc Alphan 50EC Nu ngy trc thu hoch m b B nhy phỏ cú th s dng cỏc thuc Forvin 85WP, Vertimex 1,8EC v Success 25SC 2.2.4 Phũng tr sõu n Thng xuyờn thm ng nu thy trng sõu n thu gom tiờu hy, phỏt hin sm sõu non mi n cũn cha phõn tỏn cú th dựng cỏc thuc Cyperan 25EC, peran 5EC, Biocin luõn phiờn vi SecSaigon, Sherzol, Netoxin hoc Alphan 50EC tr Nu trc thu hoch chng 4-5 ngy sõu n phỏt trin nhiu cú th dng mt cỏc thuc sau: Forvin 85WP, Vertimex 1,8EC v Success 25SC 2.2.5 Phũng tr bnh cht cõy (Pythium sp, Rhizoctonia solani) Nu thy bnh xut hin nhiu trờn m cn phũng tr trc nh cy rung bng cỏc thuc Validan 3DD - 5DD, Carban 50SC, Topan 70WP, Score 250ND, Vanicide, Hexin, Luster, Carbenzim 2.2.6 Phũng tr bnh thi b (Sclerotium sp) Thng xuyờn thm ng phỏt hin sm bnh chm xut hin cú th s dng thuc Carban 50SC, Score 250ND Thio-M, Bendazol, Carbenzim, Ht Vng tr PH LC Mc gii hn ti a cho phộp ca hm lng nitrat (N03) mt s sn phm rau ti (mg/ kg) (Theo Quyt nh s 867/ 1998/ Q-BYT ca B Y t) STT TấN RAU (mg/ kg) Bp ci