TRƯỜNG DHDL VĂN LANG KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC LỚP K11S Sau khi l y phôi kh i c th ấ ỏ ơ ể m , phôi đ c nuôi b o qu n và ẹ ượ ả ả c t gi đ ch c y chuy n. do ấ ữ ể ờ ấ ể đó ch t l ng c a dung d ch ấ ượ ủ ị gi i r a, nuôi và b o qu n ộ ử ả ả phôi, nh h ng r t l n đ n t l ả ưở ấ ớ ế ỷ ệ đ u thai sau khi c yậ ấ Chỉ tiêu Yêu cầu - pH - Áp suất thẩm thấu - Ẩm độ - Nhiệt độ - Dung dịch đệm - Khử trùng - Chất phân tử lớn 7,2 – 7,6 270 - 310 mOSM/kg 100% Nhiệt độ trong phòng từ 15 - 25 o C hoặc 37 o C trong tủ ấm Có ion phosphatase hoăc bicarbonate Lọc môi trường qua hệ thống màng lọc có kích thước 0,22µ, vô khuẩn, vô trùng bằng sự bổ sung các chất kháng sinh như penicillineG vá streptomycine sunphate Thêm vào môi trường huyết thanh thai bê(FCS) hoặc albumin huyết thanh bò BSA, tất cả đã được khừ trùng Các yêu c u v môi ầ ề tr ngườ Qui trình pha dung d ch PBSị  Hòa tan NaCl, KCl, NaHPO 4 , KH 2 PO 4 trong 8 lít nước cất 2 lần hoặc 3 lần  Hòa tan CaCl 2 , MgCl 2 hơặc MgSO 4 trong 2 lít nước cất theo thứ tự  Khử trùng trong Autoclace ở nhiệt độ 115 o C 1atm trong 10-15 phút để nguội đến 30-40 o C đổ hỗn hợp 2 lít vào 8 lít  Hỗn hợp được thanh trung và bổ sung thêm Na pyruvate, glucose, streptomycin sulphate, Na penicillin. Sau đó đóng gói bảo quản trong buồng lạnh  Khi sử dụng giội rửa phải bổ sung thêm 1% huyết thanh thai bê hoặc 1 – 2g BSA/1 lit dung dịch  Khi nuôi cấy, đông lạnh và cấy chuyển thì bổ sung thêm 10 – 20% FCS hoặc 4g BSA/1 lit dung dịch Thành phần dung dịch PBS trong 10 lít dung dịch Thành phần Thành phần Số lượng (gram) Số lượng (gram) Vlahov và Vlahov và ctv,1987 ctv,1987 HAFEZ, HAFEZ, 1987 1987 Seidel.E và Seidel.E và M. Seidel M. Seidel 1991 1991 Norio Saito Norio Saito 1994 1994 CaCl CaCl 2 2 CaCl CaCl 2 2 .2H .2H 2 2 O O MgSO MgSO 4 4 .7H .7H 2 2 O O MgCl MgCl 2 2 .6H .6H 2 2 O O - - 1,32 1,32 - - 1 1 - - 1,32 1,32 1,21 1,21 - - 1,32 1,32 1,21 1,21 - - - - 1 1 - - - - 1 1 NaCl NaCl KCl KCl Na Na 2 2 HPO HPO 4 4 KH KH 2 2 PO PO 4 4 Glucose Glucose Na pyruvate Na pyruvate Streptomycin Streptomycin sunfate sunfate Na penicillinG Na penicillinG 80 80 2 2 11,5 11,5 2 2 10 10 0,36 0,36 0,5 0,5 1.000.0 UI 1.000.0 UI 80 80 2 2 11,5 11,5 2 2 10 10 0,36 0,36 0,5 0,5 1.000.0 1.000.0 UI UI 80 80 2 2 11,5 11,5 2 2 10 10 0,36 0,36 0,5 0,5 1.000.0 UI 1.000.0 UI 80 80 2 2 11,5 11,5 2 2 10 10 0,36 0,36 1 1 1.000.0UI 1.000.0UI Foley catherter 2 đường Foley catherter 3 đường - Foley catherter 2 đường hoặc 3 đường, kích cỡ tùy thuộc vào phương pháp giội rửa và kích thước tử cung của bò cho phôi. - Lõi thép cho vào bên trong foley catherter (ruột của foley catherter - Lõi thép làm nới rộng lỗ cổ tử cung Khi giội rửa thu hoạch phôi cần có một số dụng cụ sau: . thông khi giội rửa, có các kẹp hoặc khóa đi cùng giúp cho việc đóng mở để dung dịch vào ra thu n tiện.  Các loại ống tiêm loại 5, 20, 50 ml.  Kim tiêm loại. cung, và từ ngày thứ 6 trở đi mới nằm ở chóp sừng tử cung THỜI GIAN, VỊ TRÍ PHÁT TRIỂN CỦA PHÔI SAU ĐỘNG DỤC, PHỐI GIỐNG 1. THU HOẠCH PHÔI QUA PHẪU THU T: