DẤU ẤN BIỆT HÓA CỦA TẾ BÀO MÁU I ĐẠI CƯƠNG Khái niệm Cụm biệt hoá (Cluster of Differentiation - CD) dấu ấn tế bào, xuất giai đoạn biệt hoá thực chức tế bào Các dấu ấn thường nằm màng tế bào; nhiên bào tương chứa số dấu ấn, giai đoạn non tế bào, dấu ấn tạo bào tương chưa kịp vận chuyển gắn màng tế bào Sử dụng kháng thể đơn dòng kháng dấu ấn tế bào giúp xác định tế bào giai đoạn biệt hoá khác Phbiệt cụm bhoá KN màng TB khác Cụm biệt hoá xuất qtrình biệt hoá chức TB Các hệ thống kháng nguyên khác xuất tồn suốt đời sống TB Cùng cá thể, cụm biệt hoá TB gđoạn biệt hoá khác Các knguyên HLA tế bào thể giống Cụm biệt hoá dòng TB không khác cá thể loài Ngược lại, kháng nguyên HLA kháng nguyên hồng cầu khác cá thể  Phần lớn cụm biệt hoá tham gia vào hoạt động chức tế bào, hệ thống KN khác chủ yếu giữ vai trò kháng nguyên Vai trò sinh lý Cụm biệt hoá xuất đặc hiệu tương đối theo dòng tế bào giai đoạn biệt hoá, phần lớn có vai trò sinh lý định Một số cụm biệt hoá tham gia truyền dẫn thông tin từ màng tế bào, thụ thể cho yếu tố đặc hiệu, tham gia vào hoạt động chức tế bào thực bào, tiêu tế bào đích Một số cụm biệt hoá khác chưa xác định rõ vai trò sinh lý Đặc điểm phân bố cụm biệt hoá Cụm biệt hoá protein màng, tế bào tạo theo giai đoạn biệt hoá Vì vậy, chúng bất biến tế bào Các cụm biệt hoá có xu hướng đặc trưng theo dòng tế bào Tuy nhiên, cụm biệt hoá xuất nhiều dòng tế bào, mật độ tế bào nhiều có khác Ngược lại, dòng tế bào giai đoạn biệt hoá có nhiều cụm biệt hoá khác Để xác định xác loại tế bào, cần dựa cụm biệt hoá đặc trưng cho tế bào cụm biệt hoá mà tế bào khác (điều kiện cần đủ) Ví dụ: CD3 đặc trưng cho dòng lympho T, CD4 có lympho Th lẫn monocyte Vậy xác định xác lympho Th CD3(+)CD4(+) Phần lớn cụm biệt hoá phát màng tế bào Tuy nhiên vài giai đoạn biệt hoá, phát cụm biệt hoá bào tương (ví dụ lympho tiền B có Ig bào tương) II CỤM BIỆT HOÁ CHÍNH CỦA TẾ BÀO MÁU Tế bào gốc - CD đặc trưng tế bào gốc CD34 Các CD khác chưa có - Khi mật độ CD34 giảm dần xuất thêm vài CD khác (như CD38, HLADR) dấu hiệu tế bào chuyển hướng biệt hóa thành dòng tế bào (tế bào gốc đa định hướng) Tế bào dòng tuỷ Các CD đặc trưng tế bào dòng tuỷ CD13 CD33 Các CD tồn phần lớn giai đoạn biệt hoá tế bào dòng tuỷ Dòng lympho CD Hóa mô MD lách: CD3 (nâu), CD 20 (hồng) Hóa mô MD hạch lympho: CD3 (nâu), CD 20 (hồng) Nghiên cứu tạo máu Mỗi giai doạn biệt hoá hệ thống tạo máu, từ tế bào gốc vạn đến tận tế bào máu trưởng thành, biểu lộ CD khác Sử dụng CD để nghiên cứu giai đoạn tạo máu (đặc biệt tuỷ xương) có giá trị phối hợp với kỹ thuật khác nuôi cấy tạo cụm, hình thái học hoá học tế bào để tìm hiểu đầy đủ khía cạnh tạo máu Trong điều trị 4.1 Điều trị đặc hiệu kinh điển Các phác đồ hoá trị liệu (hoặc xạ trị) kinh điển có hiệu khác thể bệnh ung thư theo dòng khác Ở đây, đóng góp CD cho điều trị xác định dòng tế bào biến đổi ác tính hoá qua có định điều trị đặc hiệu phù hợp 4.2 Trị liệu sử dụng kháng thể đơn dòng kháng CD - Đối với điều trị kinh diển, nhiều phác đồ áp dụng cho nhiều thể bệnh, ung thư nhiều dòng tế bào khác Ngược lại, việc ứng dụng kháng thể đơn dòng loại thuốc đặc hiệu điều trị ung thư mở hướng điều trị đặc hiệu khả quan Phương pháp điều trị tác động vào dòng tế bào, cụ thể dòng tế bào ung thư có mang dấu ấn tương ứng kháng thể Tumor-specific passive immunotherapy registered monoclonal antibodies  Lymphoid malignancies (lymphoma/CLL)  anti-CD20 Rituximab Mabthera®  anti-CD52 Alemtuzumab MabCampath®  131I anti-CD20 Tositumomab Bexxar® (USA)  90 Y anti-CD20 Ibritumomab tiuxetan Zevalin® CD20 Expression in B-Cell Development Bone marrow Pluripotent stem cell Lymphoid stem cell Blood, lymph Pre-B cell B cell CD 20 Activated B cell Plasma cell Press Semin Oncol 1999;26(5 suppl 14):58 Steps in the Maturation of B Cells Cell surface Stem antigens Plasma Memory CD10 CD19 CD20 CD24 CD38 CD39 Pro B Pre B Immature Activated Rituximab (Mabthera®) : a mouse/ human chimeric anti- CD20 monoclonal antibody Murine variable regions bind specifically to CD20 on normal/ malignant B-cells Human K constant regions Human IgG1 Fc domain • interacts with human effector mechanisms (ADCC, CDC) • low immunogenicity Anti- CD20 (Rituximab; Mabthera®) mechanism of action CD20 Malignant B-cell Complement Killer Leukocyte CD20 Direct induction of apoptosis Adapted from Male D, et al., Advanced Immunology 1996: 1.1–1.16 Rituximab: B cell depletion by complement-dependent cytotoxicity    Rituximab bound to CD20 interacts with C1q This activates the complement system Ultimately this leads to B cell lysis via formation of pores in the membrane (Reff et al, 1994; Cartron et al, 2004) Rituximab: B cell depletion by antibody-dependent cellular cytotoxicity    Attraction and binding of macrophages, natural killer cells and cytotoxic T cells Release of granules containing perforins and other mediators by effector cells Lysis of the B cell (Cartron et al, 2004; Clynes et al, 2000) Rituximab: B cell depletion by apoptosis When rituximab binds to CD20 it causes a signal to be sent into the B cell, which induces death by apoptosis Cartron et al, 2004; Demidem et al, 1995) KT đơn dòng - Đích huyết (serum target) Eculizumab, Infliximab, Adalimumab, Certolizumab, Afelimomab, Golimumab , Mepolizumab , Omalizumab , Nerelimomab, Faralimomab Elsilimomab,Lebrikizumab, Ustekinumab - Đích tế bào (Cellular target) Muromonab, Otelixizumab, Teplizumab, Visilizumab · Clenoliximab, Keliximab, Zanolimumab · Efalizumab · Erlizumab · Afutuzumab, Ocrelizumab, Pascolizumab · Lumiliximab · Teneliximab, Toralizumab · Aselizumab · Galiximab · Gavilimomab · Ruplizumab,Belimumab · Ipilimumab, Tremelimumab · Bertilimumab, Lerdelimumab , Metelimumab · Natalizumab · Tocilizumab · Odulimomab Basiliximab, Daclizumab, Inolimomab, Zolimomab - Không xếp loại (Unsorted) Atorolimumab, Cedelizumab, , Dorlixizumab, Fontolizumab, Gantenerumab, Gomiliximab, Maslimomab, Morolimumab, Pexelizumab, Reslizumab, Rovelizumab, Siplizumab, Talizumab, Telimomab aritox, Vapaliximab, Vepalimomab 4.3 Ghép tuỷ xương Trong ghép tuỷ xương, có nhiều khía cạnh trị liệu liên quan đến CD dùng máy tách tế bào để tách tế bào gốc (CD34) cho ghép, loại bỏ quần thể lympho (đặc biệt lympho T) để hạn chế nguy mảnh ghép chống túc chủ truyền lại (add back) quần thể tế bào giàu lympho TCD8/CD56 để tăng cao hiệu mảnh ghép chống leukemia (GvL, Graft versus Leukemia)