ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - NÔNG MINH TUẤN NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN THIẾT BỊ PIN NHIÊN LIỆU VI SINH VẬT (MICROBIAL FUEL CELL) SỬ DỤNG LÀM CẢM BIẾN SINH HỌC ĐÁNH GIÁ CHẤT LƢỢNG NƢỚC THẢI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2014 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - NÔNG MINH TUẤN NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN THIẾT BỊ PIN NHIÊN LIỆU VI SINH VẬT (MICROBIAL FUEL CELL) SỬ DỤNG LÀM CẢM BIẾN SINH HỌC ĐÁNH GIÁ CHẤT LƢỢNG NƢỚC THẢI Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 60420107 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS PHẠM THẾ HẢI Hà Nội – 2014 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, Em xin chân thành cảm ơn TS Phạm Thế Hải, giảng viên môn Vi sinh vật học, trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên-Đại Học Quốc Gia Hà Nội tận tình hướng dẫn, bảo, giúp đỡ em hoàn thành luận văn tốt nghiệp Đồng thời em xin cảm ơn Ths Nguyễn Thu Thủy, phịng Vi sinh vật học mơi trường, KTV Đỗ Minh Phương, phịng thí nghiệm mơn Vi sinh vật học giúp đỡ thời gian em làm luận văn phòng Em xin bày tỏ biết ơn sâu sắc tới Thầy, Cô Khoa sinh họcTrường Đại học Khoa Học Tự Nhiên-Đại Học Quốc Gia Hà Nội, tận tình giảng dạy, truyền đạt kiến thức chun mơn, bổ ích cho em suốt thời gian học tập Trường Tôi vô cảm ơn bạn lớp em sinh viên phịng Vi sinh vật học mơi trường động viên, hỗ trợ thời gian học tập làm đề tài Cuối cùng, với tất lòng kính trọng biết ơn vơ hạn, xin gửi lời cảm ơn tới Bố, Mẹ người thân gia đình ni nấng, dậy dỗ, ln ủng hộ, động viên suốt trình học làm người Luận văn thực khuôn khổ đề tài nghiên cứu mã số 08/HĐ ĐT.08.14/CNMT thuộc “Chương trình nghiên cứu khoa học, ứng dụng chuyển giao công nghệ phát triển ngành công nghiệp môi trường” Bộ Công thương Hà Nội, ngày….tháng….năm 2014 Học Viên Nông Minh Tuấn MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC HÌNH ẢNH MỞ ĐẦU .1 Chƣơng – TỔNG QUAN 1.1 Ô NHIỄM NƢỚC TẠI VIỆT NAM 1.2 PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ CHẤT LƢỢNG NƢỚC THẢI SAU XỬ LÝ 1.3 CẢM BIẾN SINH HỌC ĐÁNH GIÁ CHẤT LƢỢNG NƢỚC THẢI SAU XỬ LÝ 1.3.1 Cảm biến sinh học dựa hành vi sinh vật 1.3.2 Cảm biến sinh học vi sinh vật 1.4 PIN NHIÊN LIỆU VI SINH VẬT 12 1.4.1 Các loại Thiết kế MFC 15 1.4.2 Vật liệu cấu tạo MFC 17 1.4.2.1 Vật liệu cho điện cực 17 1.4.2.2 Màng trao đổi ion 19 1.4.3 Vật liệu tạo khung cho MFC 22 1.4.4 Ứng dụng MFC 23 1.5 HỆ VI SINH VẬT TRONG MFC 24 1.6 CÁC PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VI SINH VẬT TRONG MFC 27 Chƣơng – VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 29 2.1.1 Hóa chất, thiết bị dụng cụ 29 2.1.2 Nguồn vi sinh vật sử dụng nghiên cứu .30 2.2 CÁC THIẾT KẾ THÍ NGHIỆM VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .31 2.2.1 Lựa chọn thiết kế tối ƣu cho MFC .31 2.2.2 Thiết kế, lắp đặt hệ thống MFC 31 2.2.3 Quy trình làm giầu vi sinh vật MFC: 32 2.2.4 Vận Hành Hệ Thống MFC 33 2.2.5 Đo đạc xử lý số liệu 35 2.2.7 Phƣơng pháp DGGE 38 Chƣơng – KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 43 3.1 LỰA CHỌN THIẾT KẾ MFC PHÙ HỢP 43 3.1.1 Lựa chọn vật liệu cho MFC 43 3.1.2 Lựa chọn thiết kế MFC nhằm phát triển cảm biến sinh học 44 3.1.3 Thử nghiệm để chọn lựa thiết kế thiết kế ƣu việt 47 3.1.3.1 Kết làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa MFC .47 3.1.3.2 So sánh MFC với dạng thiết kế khác 48 3.2 LỰA CHỌN NGUỒN VI SINH VẬT PHÙ HỢP ĐỂ LÀM GIÀU HỆ VI SINH VẬT ĐIỆN HÓA TRONG CÁC MFC 53 3.2.1 Dòng điện phát sinh MFC giai đoạn làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa 53 3.2.2 Độ ổn định dòng điện phát sinh MFC sau làm giàu thành cơng hệ vi sinh vật điện hóa 55 3.2.3 Kết phân lập hệ vi sinh vật điện cực anode MFC sau làm giàu thành công .57 3.2.4 Kết phân tích quần xã vi khuẩn phƣơng pháp DGGE 60 3.2.5 Kết phân tích trình tự băng DNA thu đƣợc từ quần xã DGGE 63 3.3 BƢỚC ĐẦU THỬ NGHIỆM HỆ THỐNG MFC VỚI DUNG DỊCH MÔ PHỎNG NƢỚC THẢI SAU XỬ LÝ TRONG PHÕNG THÍ NGHIỆM .66 KẾT LUẬN 68 KIẾN NGHỊ 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO 70 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Từ Tên tiếng anh Tên tiếng việt AEM Anion exchange membrane Màng anion BH - Nguồn quần xã từ bùn hoạt tính Biochemical oxigen demand Nhu cầu oxy sinh hóa BPM Bipolar membrane Màng phân cực BT - Nguồn quần xã từ bùn tự nhiên CEM Cation exchange membrane Màng cation COD Chemical oxigen demand Nhu cầu oxy hóa học DGGE Denaturing gradient gel Điện di gradient gel biến tính BOD electrophoresis ĐT - Nguồn quần xã từ đất tự nhiên HH - Nguồn quần xã từ hỗn Hợp MFC Microbial fuel cell Pin nhiên liệu vi sinh vật NT - Nguồn quần xã từ nƣớc thải PCR Polymerase Chain Reaction Phản ứng chuỗi trùng hợp Rint Internal resistance Điện trở DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình Ngun lý hoạt động MFC 12 Hình 2: (a) Thiết kế MFC sử dụng chổi than chì điện cực anode nhƣ bề mặt cho vi sinh vật phát triển với điện cực cathode sử dụng vải carbon (b) Biểu diễn phƣơng thức truyền điện tử màng biofilm: sản sinh nanowires, chất truyền điện tử trung gian, tiếp xúc qua bề mặt tế bào 13 Hình 3: Hai dạng thiết kế MFC 14 Hình 4: Vật liệu carbon sử dụng cho điện cực anodes: (A) giấy carbon, (B) vải bon, (C) lƣới carbon 18 Hình 5: Một vài vật liệu dùng làm điện cực cho MFC (A) Thanh than chì (B; C; D) Tấm than chì .18 Hình 6: (A) Hạt than chì, (B; C) Chổi than chì (D) Sợ than chì 19 Hình 7: Các loại màng đƣợc sử dụng MFC 21 Hình 8: Cơ chế hoạt động loại màng phân tách 21 Hình 9: MFC hai khoang-khung thủy tinh .22 Hình 10: MFC khoang-khung thủy tinh 22 Hình 11: MFC khoang- khung polyacrylic .23 Hình 12: MFC hai khoang- khung polyacrylic 23 Hình 13: MFC dạng ống- khung polypropylen 23 Hình 14: MFC khoang- khung Plexiglas 23 Hình 15 : MFC khoang chữ nhật .32 Hình 16 : MFC khoang trụ 32 Hình 17: Sơ đồ hoạt động hệ thống MFC 34 Hình 18: Hệ thống MFC vận hành phịng thí nghiệm .34 Hình 19: Biểu đồ hiệu điện MFC trình làm giàu (BOD 50 ppm) .47 Hình 20: Hiệu điện MFC khoang hình hộp chữ nhật sau trình làm giàu (BOD 50 ppm) 49 Hình 21: Hiệu điện MFCs khoang hình trụ sau trình làm giàu 49 Hình 22: MFC khoang hình hộp chữ 51 Hình 23: MFC khoang hình trụ 51 Hình 24: MFC khoang hình hộp chữ 52 Hình 25: MFC khoang hình trụ 52 Hình 26: Quá trình làm giàu MFC với nguồn quần xã khác 54 Hình 27: So sánh dịng điện sau trình làm MFC hai thời điểm có khoảng cách 20 ngày 56 Hình 28: Ảnh phân lập mẫu điện cực anode từ MFC đƣợc làm giàu thành cơng 57 Hình 29: Tỷ lệ phần trăm số chủng vi khuẩn phân lập đƣợc từ điện cực anode MFC 59 Hình 30: Kết kiểm tra sản phẩm PCR gen 16s rRNA vùng V3 60 Hình 31: Kết phân tích gen 16S rRNA DGGE mẫu quần xã vi khuẩn nguồn khác mẫu quần xã vi khuẩn từ điện cực anode MFC làm giàu từ nguồn 62 Hình 32: Kết phân tích tƣơng quan quần xã vi khuẩn đƣợc nghiên cứu dựa kêt DGGE (bằng cách sử dụng phần mềm NTSYSpc 2.0) 63 Hình 33: Biểu đồ dịng điện trung bình MFC thử nghiệm với nồng độ BOD khác dung dịch nƣớc thải mô anode 67 Hình 34: Vị trí băng DNA DGGE đƣợc thơi gel đem giải trình tự DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1: Đặc trƣng thành phần nƣớc thải số ngành công nghiệp Bảng 2: Tổng lƣợng nƣớc thải lƣợng thải chất ô nhiễm nƣớc thải từ số khu công nghiệp đồng sông hồng Bảng 3: Một số thông số ô nhiễm nƣớc thải công nghiệp theo tiêu chuẩn .5 Bảng 4: Theo dõi thay đổi hành vi cá liên kết với điều kiện stress Bảng 5: Tổng hợp nghiên cứu cảm biến sinh học vi sinh vật quang học .10 Bảng 6: Các chủng vi khuẩn điện hóa MFC không sử dụng chất truyền điện tử trung gian 26 Bảng 7: Môi trƣờng LB .35 Bảng 8: Môi trƣờng C .36 Bảng 9: Môi trƣờng PDA 36 Bảng 10: Môi trƣờng Hansen 37 Bảng 11: Môi trƣờng BG 11 .37 Bảng 12: Thành phần dung dịch Trace metal mix A5 38 Bảng 13: Thành phần chu trình nhiệt phản ứng PCR nhân gen16s rRNA 39 Bảng 14: Thành phần chu trình nhiệt phản ứng PCR nhân vùng V3 thuộc gen16s rRNA 40 Bảng 15: Thành phần dung dịch biến tính 0% 60% 41 Bảng 16: Thành phần “Working solution” 41 Bảng 17: Phân tích ƣu nhƣợc điểm vật liệu cấu tạo MFC 43 Bảng 18: Phân tích ƣu nhƣợc điểm vật liệu cấu tạo khung MFC .44 Bảng 19: Phân tích ƣu nhƣợc điểm loại màng phân tách .44 Bảng 20: Phân tích ƣu nhƣợc điểm loại thiết kế MFC .45 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Tổng Cục Đo Lƣờng Chất Lƣợng Việt Nam Bộ khoa học công nghệ (1988) TIÊU CHUẨN VIỆT NAM TCVN 4566:1988 Về nước thải Trung tâm quan trắc môi trƣờng Tổng cục môi trƣờng Việt Nam (2009) Báo cáo môi trường quốc gia-Báo cáo môi trường khu công nghiệp Việt Nam Tổng Cục Đo Lƣờng Chất Lƣợng Việt Nam Bộ khoa học công nghệ (2011) QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ NƯỚC THẢI CƠNG NGHIỆP QCVN 40:2011/BTNMT Trung tâm quan trắc mơi trƣờng Tổng cục môi trƣờng Việt Nam (2012) Báo cáo môi trường nước mặt Việt Nam TÀI LIỆU TIẾNG ANH Aelterman, P., cộng (2008), “The anode potential regulates bacterial activity in microbial fuel cells” Applied Microbiology and Biotechnology 78(3): pp 409-418 Afkar, E., cộng (2005), “A novel Geobacteraceae-specific outer membrane protein J (OmpJ) is essential for electron transport to Fe (III) and Mn (IV) oxides in Geobacter sulfurreducens” Bmc Microbiology Amann, R.I., W Ludwig, K.H Schleifer (1995), “Phylogenetic identification and in situ detection of individual microbial cells without cultivation” Microbiol Reviews 59(1): pp 143-69 Andrew, S.K., D.S James, K.B Sandra (2005), “Fish models in behavioral toxicology” Techniques in Aquatic Toxicology, Volume 2, CRC Press Bae, M.-J Y.-S Park (2014), “Biological early warning system based on the responses of aquatic organisms to disturbances: A review” Science of The Total Environment 466–467(0):p p 635-649 10 Beveridge, T.J (2004), “Composition, Reactivity and Regulation of Extracellular Metal-Reducing Structures (Bacterial Nanowires) Produced by Dissimilatory Metal - Reducing Bacteria” pp Medium: ED 11 Bond, D.R D.R Lovley (2005), “Evidence for involvement of an electron shuttle in electricity generation by Geothrix fermentans” Applied and Environmental Microbiology 71(4): p 2186-2189 12 Chakravorty, S., cộng (2007), “A detailed analysis of 16S ribosomal RNA gene segments for the diagnosis of pathogenic bacteria” Journal Microbiol Methods 69(2): pp 330-9 70 13 Chang, I.S., cộng (2004), “Continuous determination of biochemical oxygen demand using microbial fuel cell type biosensor” Biosensors & Bioelectronics 19(6): pp 607-613 14 Chang, I.S., cộng (2006), “Electrochemically active bacteria (EAB) and mediator-less microbial fuel cells” Journal of Microbiology and Biotechnology 16(2): pp 163-177 15 Cheng, S., B.A Dempsey, B.E Logan (2007), “Electricity generation from synthetic acid-mine drainage (AMD) water using fuel cell technologies” Environmental Science & Technology 41(23): pp 8149-8153 16 Choo, Y.F., Lee, J., Chang, I S Kim, B H., (2006), “Bacteria Communities in microbial fuel cells enriched with high concentrations of glucose and glutamate” Journal of Microbiology and Biotechnology 16(9): pp 14811484 17 Di Lorenzo, M., cộng (2009), “A single-chamber microbial fuel cell as a biosensor for wastewaters” Water Research 43(13): pp 3145-3154 18 Du, Z., H Li, T Gu (2007), “A state of the art review on microbial fuel cells: A promising technology for wastewater treatment and bioenergy” Biotechnology Advances 25(5): pp 464-482 19 Fantroussi, E.S., cộng (1999), “Effect of phenylurea herbicides on soil microbial communities estimated by analysis of 16S rRNA gene fingerprints and community-level physiological profiles” Applied and Environmental Microbiology 65(3): pp 982-8 20 Gorby, Y.A., cộng (2006), “Electrically conductive bacterial nanowires produced by Shewanella oneidensis strain MR-1 and other microorganisms” Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 103(30): pp 11358-63 21 Heijne ter, A., cộng (2006), “A Bipolar Membrane Combined with Ferric Iron Reduction as an Efficient Cathode System in Microbial Fuel Cells” Environmental Science & Technology 40(17): pp 5200-5205 22 Huang, J.S., cộng (2014), “Performance evaluation and bacteria analysis of AFB-MFC enriched with high-strength synthetic wastewater” Water Science Technol 69(1): pp 9-14 23 Kang, K.H., cộng (2003), “A microbial fuel cell with improved cathode reaction as a low biochemical oxygen demand sensor” Biotechnology Letters 25(16): pp 1357-1361 71 24 Kim, B.H., I.S Chang, G.M Gadd (2007), “Challenges in microbial fuel cell development and operation” Applied Microbiology and Biotechnology 76(3): pp 485-494 25 Kim, B.H., cộng (2003), “Novel BOD (biological oxygen demand) sensor using mediator-less microbial fuel cell” Biotechnology Letters 25(7): pp 541-545 26 Kim, B.H.C H I S Moon (2006), “Microbial fuel cell-type biochemical oxygen demand sensor” Encylopedia of Sensors X: pp 1-12 27 Kim, G.T., cộng (2006), “Bacterial community structure, compartmentalization and activity in a microbial fuel cell” Applied and Environmental Microbiology 101(3): pp 698-710 28 Kim, J.R., cộng (2011), “Spatiotemporal development of the bacterial community in a tubular longitudinal microbial fuel cell” Applied Microbiology and Biotechnology 90(3): pp 1179-91 29 Kim, M., cộng (2007), “A novel biomonitoring system using microbial fuel cells” Journal of Environmental Monitoring 9(12): pp 1323-1328 30 Kozdrój, J J.D van Elsas (2000), “Application of polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis for comparison of direct and indirect extraction methods of soil DNA used for microbial community fingerprinting” Biology and Fertility of Soils 31(5): pp 372378 31 Lee, S.W., B.Y Jeon, D.H Park (2010), “Effect of bacterial cell size on electricity generation in a single-compartmented microbial fuel cell” Biotechnol Letter 32(4): pp 483-7 32 Lei, Y., W Chen, A Mulchandani (2006), “Microbial biosensors” Analytica Chimica Acta 568(1–2): pp 200-210 33 Liu, H., S.A Cheng, B.E Logan (2005), “Power generation in fed-batch microbial fuel cells as a function of ionic strength, temperature, and reactor configuration” Environmental Science & Technology 39(14): pp 5488-5493 34 Liu, H., R Ramnarayanan, B.E Logan (2004), “Production of electricity during wastewater treatment using a single chamber microbial fuel cell” Environmental Science & Technology 38(7): pp 2281-2285 35 Liu, J., G Olsson, B Mattiasson (2004), “Short-term BOD (BODst) as a parameter for on-line monitoring of biological treatment process: Part I A novel design of BOD biosensor for easy renewal of bio-receptor” Biosensors and Bioelectronics 20(3): pp 562-570 36 Liu, J., G Olsson, B Mattiasson (2004), “Short-term BOD (BODst) as a parameter for on-line monitoring of biological treatment process: Part II: 72 Instrumentation of integrated flow injection analysis (FIA) system for BODst estimation” Biosensors and Bioelectronics 20(3): pp 571-578 37 Logan, B.E (2006), “Microbial fuel cells: methodology and technology” Environmental Science & Technology 40: pp 5181-5192 38 Logan, B.E (2008), Microbial Fuel Cells Nature Publishing Group 39 Logan, B.E (2009), “Exoelectrogenic bacteria that power microbial fuel cells” Nature Reviews Microbiology 7(5): pp 375-381 40 Logan, B.E., cộng (2004), “ A state of the art review on microbial fuel cells: Methodology and technology” Environmental Science & Technology 27(28): pp 1456-1462 41 Logan, B.E J.M Regan (2006), “Electricity-producing bacterial communities in microbial fuel cells” Trends in Microbiology 14(12): pp 512-518 42 Lower, S.K., M.F Hochella, Jr., T.J Beveridge (2001), “Bacterial recognition of mineral surfaces: nanoscale interactions between Shewanella and alpha-FeOOH” Science 292(5520): pp 1360-3 43 Luo, J., cộng (2013), “A new electrochemically active bacterium phylogenetically related to Tolumonas osonensis and power performance in MFCs” Bioresource Technology 139: pp 141-8 44 Madigan, M.T (2012), Brock biology of microorganisms San Francisco: Benjamin Cummings 45 Moon, H., cộng (2004), “Improving the dynamic response of a mediatorless microbial fuel cell as a biochemical oxygen demand (BOD) sensor” Biotechnology Letters 26(22): pp 1717-1721 46 Muyzer, G (1999), “DGGE/TGGE a method for identifying genes from natural ecosystems” Current Opinion in Microbiology 2(3): pp 317-322 47 Muyzer, G., E.C de Waal, A.G Uitterlinden (1993), “Profiling of complex microbial populations by denaturing gradient gel electrophoresis analysis of polymerase chain reaction-amplified genes coding for 16S rRNA” Apply Environment Microbiology 59(3): pp 695-700 48 Muyzer, G K Smalla (1998), “Application of denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) and temperature gradient gel electrophoresis (TGGE) in microbial ecology” Antonie Van Leeuwenhoek 73(1): pp 127-41 49 Nimje, V.R., cộng (2012), “A Single-Chamber Microbial Fuel Cell without an Air Cathode” International Journal Molecular Sciences 13(3): pp 3933-48 73 50 Nimje, V.R., cộng (2009), “Stable and high energy generation by a strain of Bacillus subtilis in a microbial fuel cell” Journal of Power Sources 190(2): pp 258-263 51 Oh, S.E B.E Logan (2006), “Proton exchange membrane and electrode surface areas as factors that affect power generation in microbial fuel cells” Applied Microbiology and Biotechnology 70(2): pp 162-169 52 Pant, D., cộng (2010), “A review of the substrates used in microbial fuel cells (MFCs) for sustainable energy production” Bioresource Technology 101(6): pp 1533-1543 53 Park, H.I., cộng (2008), “Bacterial communities on electron-beam Ptdeposited electrodes in a mediator-less microbial fuel cell” Environmental Science & Technology 42(16): p 6243-9 54 Pawlowski, L (1994), Standard methods for the examination of water and wastewater, 18th edition Science of The Total Environment, 1994 55 Peixoto, L., cộng (2011), “In situ microbial fuel cell-based biosensor for organic carbon” Bioelectrochemistry 81(2): pp 99-103 56 Pham, C.A., cộng (2003), “A novel electrochemically active and Fe(III)reducing bacterium phylogenetically related to Aeromonas hydrophila, isolated from a microbial fuel cell” FEMS Microbiol Lett 223(1): pp 129-34 57 Pham, T.H., cộng (2008), “Metabolites produced by Pseudomonas sp enable a Gram-positive bacterium to achieve extracellular electron transfer” Applied Microbiology and Biotechnology 77(5): pp 1119-1129 58 Pham, T.H., cộng (2008), “Use of Pseudomonas species producing phenazine-based metabolites in the anodes of microbial fuel cells to improve electricity generation” Applied Microbiology and Biotechnology 80(6): pp 985-93 59 Rabaey, K., cộng (2005), “Microbial phenazine production enhances electron transfer in biofuel cells” Environmental Science & Technology 39: pp 3401-3408 60 Rabaey, K., cộng (2005), “Tubular microbial fuel cells for efficient electricity generation” Environmental Science & Technology, 2005 39(20): pp 8077-8082 61 Reguera, G., cộng (2005), “Extracellular electron transfer via microbial nanowires” Nature 435(7045): pp 1098-1101 62 Ronald, M.A (2005), Contents, in Handbook of Media for Environmental Microbiology, Second Edition CRC Press 74 63 Rozendal, R.A., cộng (2008), “Effect of the type of ion exchange membarane on performance, ion transport, and pH in biocatalyzed electrolysis of wastewater” Water Science & Technology 57 11: pp 1757-1762 64 Sofia Duarte, F.C.a.C.P., Gel Electrophoresis - Principles and Basics ISBN: 978-953-51-0458-2, ed S Magdeldin 2012, InTech 65 Stein, N.E., H.V.M Hamelers, C.N.J Buisman (2012), “The effect of different control mechanisms on the sensitivity and recovery time of a microbial fuel cell based biosensor” Sensors and Actuators B: Chemical 171–172(0): pp 816-821 66 Van der Schalie, W.H., cộng (2001), “Using higher organisms in biological early warning systems for real-time toxicity detection” Biosensors and Bioelectronics 16(7–8): pp 457-465 67 Vázquez-Larios, A.L., cộng (2011), “Effects of architectural changes and inoculum type on internal resistance of a microbial fuel cell designed for the treatment of leachates from the dark hydrogenogenic fermentation of organic solid wastes” International Journal of Hydrogen Energy 36(10): pp 6199-6209 68 White, H.K., cộng (2009), “Quantitative population dynamics of microbial communities in plankton-fed microbial fuel cells” International Journal of Hydrogen Energy 3(6): pp 635-46 69 Xu, S H Liu (2011), “New exoelectrogen Citrobacter sp SX-1 isolated from a microbial fuel cell” Journal Apply Microbiology 111(5): pp 1108-15 70 Yang, H (2011), “Biological Early Warning System for Prawn Aquiculture” Procedia Environmental Sciences 10, Part A(0): pp 660-665 71 Yi Zuo, S.C., Bruce E Logan (2008), “Ion exchange membrane cathodes for scalable microbial fuel cells” Environmental Science & Technology 42: pp 6967-6972 72 You, S.J., cộng (2006), “Sustainable approach for leachate treatment: Electricity generation in microbial fuel cell” Journal of Environmental Science and Health Part a-Toxic/Hazardous Substances & Environmental Engineering 41(12): pp 2721-2734 73 Zeng, Y., X.e Fu, Z Ren (2012), “The Effects of Residual Chlorine on the Behavioural Responses of Daphnia magna in the Early Warning of Drinking Water Accidental Events” Procedia Environmental Sciences 13(0): p 71-79 75 74 Zhang, X., cộng (2010), “Improved performance of single-chamber microbial fuel cells through control of membrane deformation” Biosensors and Bioelectronics 25(7): p 1825-1828 76