Sau học chương này, SV phải trình bày được • Cấu trúc bản của nhóm Flavonoid • Các tính chất bản của Flavonoid • Nguyên tắc chiết xuất, định tính, định lượng Flavonoid • Các tác dụng & công dụng của Flavonoid • Các (10) dược liệu chứa Flavonoid chính - hoa Hòe - Diếp cá - Râu mèo - Artisô - Núc nác - Kim ngân - Hoàng cầm - Hồng hoa - Dây mật - Tô mộc Sắc tố thực vật Chlorophyll chlorophyll a, b, c Carotenoid β-caroten, lycopen Xanthon gentisin, maclurin Quinon purpurin, tanshinon Alkaloid palmatin, berberin Flavonoid sắc tố hoa … Cấu trúc chung nhóm / polyphenol (C6 – C3) phenyl-propanoid, coumarin (C6 – C3)2 lignan, neolignan (C6 – C3)n lignin (C6 – C3 – C6) flavonoid (eu-F, iso-F, neo-F) (C6 – C3 – C6)n tannin ngưng tụ (C6 – C4) naphthoquinon (C6 – C1)2 anthraquinon, stilben (C6 – C1 – C6) xanthon • Về mặt hóa học - 1664, R Boyle : hoa Viola tricolor → màu tím (màu xanh / kiềm, tím / trung tính, đỏ / acid) - 1814, Chevreul : gỗ Morus tinctoria → Morin - 1835, L.C Marquart : hoa Centaurea cyanus → anthocyanin (Δ’ 2-benzo pyrilium) Sau đó, đã phân lập : - phloridzin / Táo (1835), naringin / Bưởi (1857), - glycyphyllin / Smilax glycyphylla (1881) Sự liên quan về cấu tạo hóa học chưa được làm rõ, các nghiên cứu chưa hệ thống → tên không thống nhất anthoxanthin, anthoxanthidin, anthocyanin, anthochlor, chymochrome Năm 1952 : T.A Geissman : → Flavone (Δ’ 2-phenyl chromon) → những chất # Flavone được gọi là Flavonoid - từ-nguyên (flavus = màu vàng) - chất Flavone của T.A Geissman FLAVONOID • Về mặt dược lực học - Derris elliptica → thuốc cá, diệt côn trùng (rotenon) - 1928, S Györgyi I Rusznyak → yếu tố P → Citrin (hesperidin + eriodictyol) chống xuất huyết - 1954, Bradbury & White → Formononetin và Genistein từ cỏ Trifolium (làm cừu ↓ sinh sản) - 1970, Kupchan → eupatin, eupatoretin, centaureidin (kháng khối u) - từ Pueraria trilobata → Daidzein - từ Glycine max → Genistein và Daidzein diethyl stilboestrol HO HO O O OH estradiol HO HO HO O O estriol OH HO OH OH O OH O Formononetin OMe Daidzein OH Genistein OH Nhắc lại dihydro pyran pyran O O O benzopyran O dihydro benzopyran (chroman) dihydro γ-pyron pyrilium O O O O O γ-pyron O O O O benzo γ-pyron (chromon) benzo dihydro γ-pyron O benzo pyrilium (flavilium) B CẤU TRÚC là glycosid = đường + genin A (C6 - C3) - C6 O O O O eu-flavonoid iso-flavonoid B diphenyl propan O neo-flavonoid 10 flavon = 222 120 194 146 apigenin = 270 147 flavonol = 238 O OH O 148 139 catechin = 290 OH HO 123 152 O OH OH OH 290 272 149 So sánh cực đại hấp thu / UV của các Flavonoid 250 300 isoflavon 250-290 flavanon(ol) 250-300 LAC & catechin 350 400 450 500 550 280 330-375 flavon(ol) chalcon, auron 370-410 anthocyanidin 500-530 250 300 350 400 450 500 550 150 Anthocyanins Extraction The below method was modified from Tsuda et al., (1999a) ACs in human serum were extracted by SPE - C18 cartridge (Supelclean ENVI18, mL tube, 0.5 g loading, Sigma-Aldrich/Supelco, Bellefonte, PA) The cartridge was preconditioned using mL of MeOH containing 0.1 % TFA and then equilibrated with mL of 10 mM oxalic acid before use Human serum (1.5 mL) was acidified with a 1/40 volume of N HCl The acidified serum was diluted with 1.5 mL of 10 mM oxalic acid The mixture was then loaded on the cartridge The cartridge was washed with mL of 10 mM oxalic acid 151 Before eluting ACs, the remained aqueous was drained off using vacuum Finally, ACs were eluted with mL of methanol containing 0.1 % TFA The eluate was carefully evaporated using Speed-Vac Plus SC 110A and Universal vacuum system UVS 400 (Savant Instruments, Inc Holbrook, NY) at room temperature and finally taken to dryness under a stream of nitrogen The dry residue was redissolved in 200 μL of 4.5 % formic acid in water and methanol in a ratio of 90:10, and filtered through a 13 mm 0.45μ GHP Acrodisc filter (Pall-Gelman) into a 300 μl vial insert for HPLC 152 The reaction with vanillin/HCl was previously considered to be a specific test for flavanols (flavan-3-ol and flavan-3,4-diol = catechin and LAC) The specificity of the reaction was reexamined by testing the reactivity of 15 flavonoid and chromone compounds Flavanols, the DHCs (phloretin, phloridzin) gave significant color development Flavanone and flavanonol aglycones reacted weakly The structural requirements for a positive reaction have been deduced The vanillin-HCl test has been modified to prevent the possible occurrence of a false positive interpretation due to the presence of ACs in plant materials The ACs (cyanidin, pelargonidin, peonidin) were identified in Medicago sativa were examined for the presence of ACs The possibility of interference by DHCs or ACs should be considered when the vanillin-HCl reaction is used for the detection and quantitative analysis of flavanols in plant materials 153 154 155 156 157 1835, L.C Marquart : Centaurea cyanus 158 OH OH HO HO O bền / HCl O ++ O Al O HO O O O O Al ++ + Al O ortho → không bền / HCl O không bền / HCl 159 160