NHỮNG KHÓ KHĂN TRONG VIỆC XÁC ĐỊNH NHÓM MÁU HỆ ABO VÀ CÁCH GIẢI QUYẾT Nguyên tắc: Nhóm máu hệ ABO xác định nhờ có mặt kháng nguyên bề mặt hồng cầu kháng thể có huyết Người bình thường có huyết kháng thể tự nhiên chống lại kháng nguyên bề mặt hồng cầu thân Nhóm máu Kháng nguyên bề mặt hồng cầu A B AB A B A,B O Không có kháng nguyên A B Kháng thể có huyết Chống B Chống A Không có Chống A,B Có chống A chống B Dựa vào đặc tính mà người ta xác định nhóm máu hệ ABO phương pháp: Phương pháp huyết mẫu (Beth Vincent): Dùng kháng thể biết trước (Chống A, Chống B, chống AB) để phát kháng nguyên có bề mặt hồng cầu Phương pháp hồng cầu mẫu (Simonin): Dùng kháng nguyên biết trước (Hồng cầu mẫu A,B) để phát kháng thể có huyết Hai phương pháp phải tiến hành đồng thời phải cho kết phù hợp Tất trường hợp khó khăn xảy định nhóm máu hệ ABO có không phù hợp phuương pháp huyết mẫu hồng cầu mẫu Muốn biết nguyên nhân không phù hợp này, ta phải tiến hành sau: + Rửa hồng cầu bệnh nhân hồng cầu O có đầy đủ kháng nguyên nhóm máu hệ hồng cầu nước muối 0,9% lần Pha thành dịch treo hồng cầu 5% + Tiến hành chứng: 1) Chứng tự thân: Phản ứng huyết bệnh nhân hồng cầu bệnh nhân (Nhỏ vào ống nghiệm tan máu giọt huyết bệnh nhân giọt hồng cầu bệnh nhân rửa pha thành 5% Trộn đều, ly tâm 1000 vòng phút/ phút, đọc kết mắt thường kính hiển vi) 145 2) Chứng AB: Phản ứng huyết AB hồng cầu bệnh nhân (Nhỏ vào ống nghiệm tan máu giọt huyết AB giọt hồng cầu bệnh nhân rửa pha thành 5%.Trộn ly tâm 1000 vòng phút/ phút, đọc kết mắt thường kính hiển vi) Nếu phản ứng âm tính phương pháp định nhóm huyêt mẫu bảo đảm 2) Chứng đồng loài: Phản ứng huyết bệnh nhân hồng cầu O (Nhỏ vào ống nghiệm tan máu giọt huyết bệnh nhân giọt hồng cầu O rửa pha thành 5% Trộn đều, ly tâm 1000 vòng phút/ phút, đọc kết mắt thường kính hiển vi) Nếu phản ứng âm tính phương pháp định nhóm hồng cầu mẫu bảo đảm Dựa vào kết chứng tự thân, đồng loài, AB ta phân trường hợp khó khăn định nhóm máu hệ ABO thành nhóm để tìm nguyên nhân gây khó khăn việc xác định nhóm máu hệ ABO sau: A Những khó khăn xảy chứng nói âm tính: Trường hợp có tiêu huyết tố: Ví dụ: Chống A Chống B (-) (-) Chống AB Hồng cầu A Hồng cầu B (-) +++ (-) Chứng Allo (-) Chứng AB (-) Chứng Auto (-) Nhận xét: - Bệnh nhân có nhóm máu O phù hợp phương pháp huyết mẫu hồng cầu mẫu kháng thể chống A bệnh nhân yếu âm tính - Bệnh nhân có tiêu huyết tố chống A - Tiêu huyết tố xảy có mặt bổ thể Cách giải quyết: Khử bổ thể có huyết bệnh nhân 56°C / 30 phút Thử lại phương pháp hồng cầu mẫu, có tiêu huyết tố sau khử bổ thể phản ứng trở lại bình thường sau: Chống A Chống B Chống AB Hồng cầu A 146 Hồng cầu B Chứng Allo (-) (-) (-) (-) +++ +++ Chứng AB (-) Chứng Auto (-) Hồng cầu B Chứng Allo (-) Hai quần thể hồng cầu Ví dụ: Chống A Chống B (±) (-) Chống AB Hồng cầu A (±) (-) +++ Chứng AB (-) Chứng Auto (-) Nhận xét: Nhóm máu bệnh nhân nhóm A, hồng cầu bệnh nhân ngưng kết với huyết mẫu chống A, chống AB không hoàn toàn, nhiều hồng cầu tự Có thể gặp tượng quần thể hồng cầu nhứng trường hợp sau: + Những người truyền máu, truyền tuỷ khác nhóm hệ ABO + Những người có nhóm máu A yếu, B yếu + Bệnh nhân đa u tuỷ xương, Leucemie + Thể khảm ghép gen hệ nhóm máu ABO Cách giải quyết: + Hỏi triệu chứng lâm sàng bệnh nhân + Hỏi tiền sử truyền máu, truyền tuỷ bệnh nhân +Tìm chất ABH nước bọt + Xác định kiểu hình trường hợp khảm ghép gen nghiên cứu di truyền Kháng thể yếu: Ví dụ: Chống A Chống B +++ (-) Chống AB +++ Hồng cầu A Hồng cầu B Chứng Allo: (-) Chứng AB: (-) (-) Nhận xét: 147 (-) Chứng Auto: (-) + Bệnh nhân có nhóm máu A, có kháng thể B yếu âm tính + Những trường hợp gặp trẻ sơ sinh tháng tuổi kháng thể chống A, chống B chưa hình thành đầy đủ + Thiếu hụt miễn dịch bẩm sinh + Thiếu hụt miễn dịch mắc phải (Leucemie cấp, người già ) Cách giải quyết: + Điện di miễn dịch để khẳng định + Làm xét nghiệm để chẩn đoán lecemie B Những trường hợp khó khăn xác định nhóm máu hệ ABO mà chứng Allo, Auto, AB dương tính Kháng thể lạnh: Chống A Chống B +++ +++ Chống AB Hồng cầu A Hồng B +++ +++ cầu Chứng Allo: +++ Chứng AB: +++ +++ Chứng Auto: +++ Nhận xét: + Bệnh nhân có kháng thể lạnh + Khi để hồng cầu bệnh nhân vào bình cách thuỷ 37°C tượng ngưng kết dần Cách giải quyết: + Rửa hồng cầu bệnh nhân nước muối 0,9% để ấm 37° C + Định nhóm phiến kính nóng 37° C ống nghiệm 37° C Kháng thể tự miễn: Ví dụ: Chống A Chống B +++ +++ Chống AB Hồng cầu A Hồng cầu B +++ +++ +++ Chứng Allo: +++ Chứng AB: +++ Chứng Auto: +++ 148 Nhận xét: Bệnh nhân có kháng thể tự miễn Các kháng thể cố định bề mặt hồng cầu Cách giải quyết: + Xem lại chẩn đoán lâm sàng bệnh nhân + Rửa hồng cầu bệnh nhân nhiều lần nước muối ấm để 37°C, định lại nhóm máu cho bệnh nhân Hồng cầu chuỗi tiền: Ví dụ: Chống A Chống B Chống AB Hồng cầu A Hồng cầu B Chứng Allo: +++ +++ +++ +++ +++ +++ Chứng AB: +++ Chứng Auto: +++ Nhận xét: + Bệnh nhân có tăng bất thường Protein huyết thường gặp bệnh nhân đa u tuỷ xương, tăng sợi huyết + Có ngưng kết tầng nhanh hồng cầu giống ngưng kết phân tán nhanh ta nhỏ vào hồng cầu bệnh nhân giọt nước muối 1,5% Cách giải quyết: + Rửa hồng cầu bệnh nhân nước muối 0,9%, định lại phương pháp huyết mẫu + Với phương pháp hồng cầu mẫu pha loãng nhẹ nhàng huyết bệnh nhân nước muối sinh lý 0,9% nồng độ protein huyết không đủ để kết tầng hồng cầu mẫu thành hình chuỗi tiền định lại với phương pháp hồng cầu mẫu TÀI LIỆU THAM KHẢO Các kỹ thuật miễn dịch huyết học Hoàng thị Bạch Bích, 1982 Technical Manual 11th Edition 149 Safe Blood and Blood products Modul 3: Blood Group Serology 150