LACTOSE Lactosum C12H22O11 H2O P.t.l: 360,3 Lactose O - β - D - galactopyranosyl - (1 → 4) - α - D - glucopyranose monohydrat Nó bị thay đổi tính chất vật lý chứa tỷ lệ khác lactose vô định hình Tính chất Bột kết tinh trắng gần trắng Dễ tan tan chậm nước, thực tế không tan ethanol 96% Định tính Có thể chọn hai nhóm định tính sau: Nhóm I: B, C, D Nhóm II: A, D A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại lactose chuẩn (ĐC) B Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel G (TT) Dung môi khai triển: Nước - methanol - acid acetic khan - ethylen clorid (10 : 15 : 25 : 50) (cần đong xác thừa lượng nhỏ nước gây đục) Dung dịch thử: Hoà tan 10 mg chế phẩm hỗn hợp nước - methanol (2 : 3) pha loãng thành 20 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (1): Hoà tan 10 mg lactose chuẩn (ĐC) hỗn hợp nước - methanol (2 : 3) pha loãng thành 20 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (2): Hoà tan 10 mg chất chuẩn sau đây: fructose, glucose, lactose sucrose hỗn hợp nước - methanol (2 : 3) pha loãng thành 20 ml với dung môi Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng µl dung dịch sấy khô điểm chấm đường xuất phát Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm Sấy khô mỏng luồng khí ấm Thay pha động mới, chạy nhắc lại mỏng Sấy mỏng luồng khí ấm phun lên mỏng dung dịch có chứa 0,5 g thymol (TT) hỗn hợp gồm ml acid sulfuric (TT) 95 ml ethanol 96% (TT) Sấy mỏng 130 oC 10 phút Vết sắc ký đồ dung dịch thử phải giống vị trí, màu sắc kích thước với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) Phép thử có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) cho vết tách rõ ràng C Hoà tan 0,25 g chế phẩm ml nước Thêm ml amoniac (TT) đun nóng nồi cách thuỷ 80 oC 10 phút, màu đỏ xuất D Phép thử phải đáp ứng yêu cầu giới hạn nước (xem mục Nước) Độ màu sắc dung dịch Hoà tan 1,0 g chế phẩm nước cách đun nóng đến 50 oC pha loãng thành 10 ml với dung môi, để nguội Dung dịch phải (Phụ lục 9.2) màu không đậm màu mẫu NV7 (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Giới hạn acid - kiềm Hoà tan 6,0 g chế phẩm cách đun sôi 25 ml nước carbon dioxyd (TT), để nguội thêm 0,3 ml dung dịch phenolphtalein (TT), dung dịch không màu Không dùng 0,4 ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 M (CĐ) để làm chuyển màu thị thành màu hồng Góc quay cực riêng Từ + 54,4 đến + 55,9o, tính theo chế phẩm khan (Phụ lục 6.4) Hoà tan 10,0 g chế phẩm 80 ml nước cách đun nóng đến 50 oC Để nguội thêm 0,2 ml dung dịch amoniac loãng (TT) Để yên 30 phút pha loãng đến 100,0 ml nước để đo Độ hấp thụ Hoà tan 1,0 g chế phẩm nước sôi pha loãng thành 10,0 ml nước (dung dịch A) Độ hấp thụ (Phụ lục 4.1) dung dịch A đo bước sóng 400 nm không lớn 0,04 Pha loãng 1,0 ml dung dịch A thành 10,0 ml nước Đo độ hấp thụ dung dịch từ 210 nm đến 300 nm Tại bước sóng từ 210 đến 220 nm, độ hấp thụ không lớn 0,25 Tại bước sóng từ 270 nm đến 300 nm, độ hấp thụ không lớn 0,07 Kim loại nặng Không phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Hoà tan 4,0 g chế phẩm nước nóng, thêm ml dung dịch acid hydrocloric 0,1 M thêm nước vừa đủ 20 ml Lấy 12 ml dung dịch thử theo phương pháp Dùng dung dịch chì mẫu phần triệu (TT) để chuẩn bị mẫu đối chiếu Nước Từ 4,5 đến 5,5% (Phụ lục 10.3) Dùng 0,500 g chế phẩm hỗn hợp formamid - methanol (1 : 2) làm dung môi Tro sulfat Không 0,1% (Phụ lục 9.9) Thêm ml acid sulfuric (TT) vào 1,0 g chế phẩm, bốc đến khô cách thuỷ nung đến khối lượng không đổi Độ nhiễm khuẩn Tổng số vi khuẩn hiếu khí sống lại không lớn 100 g, xác định phương pháp đĩa thạch E.coli (Phụ lục 13.6) Bảo quản Đựng lọ kín