DUNG DỊCH GLYCERYL TRINITRAT Solutio glycerylis trinitras C3H5N3O9 P.t.l.: 227.1   Dung dịch glyceryl trinitrat dung dịch 1% (kl/kl) đến 10% (kl/kl) propan-1,2,3-triyl trinitrat ethanol 96% Phải chứa từ 96,5% đến 102,5% hàm lượng glyceryl trinitrat ghi nhãn Tính chất Dung dịch trong, không màu vàng Có thể trộn lẫn với aceton ethanol 96% Glyceryl trinitrat nguyên chất thực tế không tan nước, dễ tan ethanol 96%, trộn lẫn với aceton Định tính Nhóm I: A, C Nhóm II: B, C Khi pha loãng dung dịch glyceryl trinitrat phải sử dụng ethanol khan không giọt glyceryl trinitrat nguyên chất tách khỏi dung dịch Sau phép thử, phần cắn dung dịch lại phải đun nóng cách thủy với dung dịch natri hydroxyd loãng (TT) phút A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) Phổ hồng ngoại chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại glyceryl trinitrat chuẩn (ĐC) Chuẩn bị mẫu cách nhỏ 50 µl dung dịch chế phẩm [pha loãng ethanol (TT) để dung dịch 1% (kl/tt) glyceryl trinitrat, cần] lên viên nén dẹt kali bromid Bay dung môi chân không B Sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel G (TT) Dung môi khai triển: Ethyl acetat – toluen (20 : 80) Dung dịch thử: Pha loãng lượng chế phẩm tương đương với 50 mg glyceryl trinitrat thành 100 ml với aceton (TT) Dung dịch đối chiếu: Pha loãng 0,05 ml dung dịch glyceryl trinitrat (TT) thành ml với aceton (TT) Chấm riêng biệt µl dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 2/3 chiều dài mỏng Lấy mỏng ra, sấy khô không khí Phun mỏng dung dịch kali iodid - tinh bột (TT) Đặt mỏng ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm 15 phút quan sát ánh sáng ban ngày Vết sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu vị trí, màu sắc kích thước C Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu giới hạn hàm lượng Màu sắc dung dịch Pha loãng dung dịch chế phẩm đến nồng độ 1% với ethanol 96% (TT), cần Dung dịch phải màu đậm màu dung dịch màu mẫu V7 (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Nitrat vô Không 0,5% hàm lượng glyceryl trinitrat, tính theo kali nitrat Xác định phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel (TT) Dung môi khai triển: Toluen – aceton – acid acetic băng (60 : 30 : 15) Dung dịch thử: Dùng dung dịch chế phẩm Pha loãng đến nồng độ 1% với ethanol (TT), cần Dung dịch đối chiếu: Hòa tan mg kali nitrat (TT) ml nước pha loãng thành 100 ml ethanol (TT) Chấm riêng biệt lên mỏng 10 µl dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 2/3 chiều dài mỏng Lấy mỏng ra, sấy khô không khí đến hết acid acetic, phun dung dịch kali iodid – tinh bột (TT) Đặt mỏng ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm 15 phút quan sát ánh sáng ban ngày Bất kỳ vết tương ứng với nitrat sắc ký đồ dung dịch thử màu đậm màu vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Tạp chất liên quan Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Dung dịch thử: Hòa tan lượng chế phẩm thử tương ứng với mg glyceryl trinitrat pha động pha loãng thành 20,0 ml dung môi Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 0,10 g dung dịch glyceryl trinitrat chuẩn (ĐC) lượng pentaerythrityl tetranitrat loãng (ĐC) tương ứng với 1,0 mg pentaerythrityl tetranitrat pha động pha loãng thành 100,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng 1,0 ml dung dịch thử thành 100,0 ml pha động Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm x 4,6 mm) nhồi octadecylsilyl silica gel (5 µm) dùng cho sắc ký Detector quang phổ hấp thụ tử ngoại bước sóng 210 nm Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút Thể tích tiêm: 20 µl Pha động: Acetonitril - nước (50 : 50) Cách tiến hành: Tiêm dung dịch đối chiếu (1) Ghi sắc đồ khoảng thời gian lần thời gian lưu pic Phép thử có giá trị sắc đồ dung dịch đối chiếu (1) độ phân giải pic glyceryl trinitrat pic pentaerythrityl tetranitrat 2,0 Trên sắc đồ dung dịch thử, diện tích pic pic không lớn diện tích pic sắc đồ dung dịch đối chiếu (2) (1%, tính theo glyceryl trinitrat) tổng diện tích pic không lớn lần diện tích pic sắc đồ dung dịch đối chiếu (2) (3%, tính theo glyceryl trinitrat) Loại bỏ pic với diện tích nhỏ 0,1 lần diện tích pic sắc đồ dug dịch đối chiếu (2) (0,1%) Định lượng Dung dịch thử: Lấy xác lượng dung dịch chế phẩm tương ứng với khoảng 1,0 mg glyceryl trinitrat hòa vào methanol (TT) bình định mức 250,0 ml Thêm methanol (TT) tới vạch Dung dịch đối chiếu: Cân xác khoảng 70,0 mg natri nitrit (TT) hòa tan vào methanol (TT) bình định mức 250,0 ml Thêm methanol (TT) tới vạch Pha loãng 5,0 ml dung dịch thành 500,0 ml methanol (TT) Lần lượt lấy 10,0 ml dung dịch thử, 10,0 ml dung dịch đối chiếu 10,0 ml methanol (TT) vào bình định mức 50,0 ml Thêm vào bình ml dung dịch natri hydroxyd loãng (TT), đậy nắp, trộn để yên nhiệt độ phòng 30 phút Thêm 10 ml dung dịch acid sulphanilic (TT) 10 ml dung dịch acid hydrochloric loãng (TT), trộn Sau phút thêm 10 ml dung dịch naphthylethylendiamin dihydroclorid (TT), pha loãng nước đến vạch trộn Sau 10 phút đo độ hấp thụ dung dịch thử dung dịch mẫu 540 nm, sử dụng dung dịch bình định mức có chứa 10,0 ml methanol (TT) làm mẫu trắng Tính khối lượng glyceryl trinitrat (mg) dung dịch thử công thức: AT x mS x C AR x mT x 60,8 x 100 Trong đó: AT = độ hấp thụ dung dịch thử, mT = khối lượng (mg) glyceryl trinitrat dung dịch thử, C = hàm lượng natri nitrit pha dung dịch đối chiếu AR = độ hấp thụ dung dịch đối chiếu mT = khối lượng cân (mg) natri nitrit Bảo quản Bảo quản dung dịch loãng (1%) tránh ánh sáng nhiệt độ từ oC đến 15 oC Bảo quản dung dịch đậm đặc tránh ánh sáng nhiệt độ từ 15 oC đến 20 oC