ERYTHROMYCIN ETHYL SUCINAT Erythromycini ethyl succinas Erythromycin Công thức P.t.l C43H75NO16 P.t.l: 862,0 Erythromycin ethyl succinat chứa thành phần (3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)4-[(2,6-dideoxy-3-C-methyl-3-O-methyl-α-L-ribo-hexopyranosyl)oxy]-14-ethyl-7,12,13trihydroxy-3,5,7,9,11,13-hexamethyl-6-[[3,4,6-trideoxy-3-(dimethylamino)-2-O-(4-ethoxy-4oxobutanoyl)-β-D-xylo-hexopyranosyl]oxy]oxacyclotetradecan-2,10-dion (erythromycin A ethylsuccinat Hàm lượng: Tổng hàm lượng erythromycin A, erythromycin B erythromycin C không 78,0% tính theo chế phẩm khan Erythromycin B: Không 5,0% tính theo chế phẩm khan Erythromycin C: Không 5,0% tính theo chế phẩm khan Tính chất Bột kết tinh trắng, dễ hút ẩm Thực tế không tan nước, dễ tan aceton, ethanol methanol Định tính Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại erythromycin ethyl sucinat chuẩn (ĐC) Góc quay cực riêng Từ -70o đến -82o, tính theo chế phẩm khan (Phụ lục 6.4) Hòa tan 0,100 g chế phẩm aceton (TT) pha loãng thành 10,0 ml với dung môi, đo góc quay cực sau 30 phút kể từ chuẩn bị dung dịch thử Tạp chất liên quan Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Pha động: Lấy 50 ml dung dịch dikali hydrophosphat (TT) 3,5% điều chỉnh pH đến 8,0 dung dịch acid phosphoric 10% (TT), thêm 400 ml nước, 165 ml 2-methyl-2-propanol (TT) 30 ml acetonitril (TT), pha loãng thành 1000 ml nước Lọc đuổi khí Dung dịch thủy phân: Dung dịch dikali hydrophosphat 2,0% điều chỉnh pH đến 8,0 acid phosphoric (TT) Dung dịch thử: Hòa tan 0,115 g chế phẩm 25 ml methanol (TT), thêm 20 ml dung dịch thủy phân, trộn để yên nhiệt độ phòng 12 Pha loãng thành 50,0 ml dung dịch thủy phân Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 40,0 mg erythromycin A chuẩn (ĐC) 10 ml methanol (TT) pha loãng thành 20,0 ml với dung dịch thủy phân Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 10,0 mg erythromycin B chuẩn (ĐC) 10,0 mg erythromycin C chuẩn (ĐC) 50 ml methanol (TT) Thêm 5,0 ml dung dịch đối chiếu (1) pha loãng thành 100,0 ml dung dịch thủy phân Dung dịch đối chiếu (3): Hòa tan mg N-demethylerythromycin A chuẩn (ĐC) (tạp chất B) 20 ml dung dịch đối chiếu (2) Dung dịch đối chiếu (4): Pha loãng 3,0 ml dung dịch đối chiếu (1) thành 100,0 ml với hỗn hợp đồng thể tích methanol (TT) dung dịch thủy phân Dung dịch đối chiếu (5): Hòa tan 40 mg erythromycin A chuẩn (ĐC) sấy 130 oC trong 10 ml methanol (TT), pha loãng thành 20 ml với dung dịch thủy phân Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm x 4,6 mm) nhồi pha tĩnh styren-divinylbenzen copolyme (8 µm, kích thước lỗ 100 nm), trì nhiệt độ cột 70 oC cách thủy Detector quang phổ tử ngoại bước sóng 215 nm Tốc độ dòng: 2,0 ml/phút Thể tích tiêm: 200 µl Tiến hành: Tiêm dung dịch thử, dung dịch đối chiếu (1) dung dịch đối chiếu (3), dung dịch đối chiếu (4) dung dịch đối chiếu (5).Tiến hành sắc ký với thời gian rửa giải gấp lần thời gian lưu erythromycin A, lấy tích phân sau xuất pic dung dịch thủy phân Thời gian lưu tương đối: Thời gian lưu tương đối so với erythromycin A (thời gian lưu khoảng 15 phút) pic dung dịch thủy phân phải nhỏ 0,3, tạp chất B khoảng 0,45; erythromycin C khoảng 0,5; tạp chất C ( erythromycin E) khoảng 0,9; tạp chất G (erythromycin Nethyl sucinat) khoảng 1,3; tạp chất D (anhydroerythomycin A) khoảng 1,4; tạp chất F (pseudoerythromycin A enol ether) khoảng 1,5; erythromycin B khoảng 1,8 tạp chất E (erythromycin A enol ether) khoảng 4,3 Độ thích hợp hệ thống: Tiêm dung dịch đối chiếu (3) Độ phân giải pic tạp chất B pic erythromycin C phải 0,8; pic tạp chất B pic erythromycin A phải 5,5 Giới hạn: Hệ số hiệu chỉnh: Để tính toán hàm lượng tạp chất, nhân diện tích pic tạp chất với hệ số hiệu chỉnh tương ứng Tạp chất E hệ số hiệu chỉnh 0,09; tạp chất F 0,15 tạp chất G 0,14 Dùng dung dịch đối chiếu (5) để xác định pic tạp chất E F Từng tạp chất có diện tích pic không đựơc lớn diện tích pic dung dịch đối chiếu (4) (3,0%) Tổng diện tích pic tạp không lớn 1,67 lần diện tích pic dung dịch đối chiếu (4) (5,0%) Bỏ qua pic có diện tích nhỏ 0,02 lần diện tích pic dung dịch đối chiếu (4) (0,06%) Erythromycin tự Không 6,0% Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Pha động: Trộn 35 thể tích acetonitril (TT) với 65 thể tích dung dịch có chứa 3,4 g/l kali dihydrophosphat (TT) 2,0 g/l triethylamin (TT) điều chỉnh pH đến 3,0 dung dịch acid phosphoric 2M (TT) Lọc đuổi khí Dung dịch thử: Hòa tan 0,250 g chế phẩm acetonitril (TT), pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu: Hòa tan 75,0 mg erythromycin A chuẩn (ĐC) acetonitril (TT) pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Pha loãng 5,0 ml dung dịch thu thành 25,0 ml với dung môi Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm x 4,6 mm) nhồi pha tĩnh octylsilyl silica gel (5 µm) Detector quang phổ tử ngoại bước sóng 195 nm Tốc độ dòng: ml/phút Thể tích tiêm: 20 µl Tiến hành: Tiêm dung dịch thử, tiến hành sắc ký với thời gian rửa giải gấp lần thời gian lưu erythromycin ethyl sucinat (thời gian lưu khoảng 24 phút) Tiêm dung dịch đối chiếu, tiến hành sắc ký với thời gian rửa giải gấp lần thời gian lưu erythromycin A (thời gian lưu khoảng phút) Giới hạn: Diện tích pic erythromycin tự không lớn diện tích pic dung dịch đối chiếu Nước Không 3,0% (Phụ lục 10.3) Dùng 0,30 g chế phẩm dung dịch có chứa 100 g/l imidazol (TT) methanol khan (TT) làm dung môi Tro sulfat Không 0,3% (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phẩm Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Pha động, dung dịch thử, dung dịch đối chiếu (1) (2), điều kiện sắc ký theo dẫn phần thử Tạp chất liên quan Độ thích hợp hệ thống: Độ lệch chuẩn tương đối lần tiêm lặp lại dung dịch đối chiếu (1) không lớn 1,2% Tính toán hàm lượng erythromycin A dùng sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) Tính toán hàm lượng erythromycin B erythromycin C dùng sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) Bảo quản Đựng đồ bao gói kín, tránh ánh sáng Nhãn Phải quy định rõ thời hạn sử dụng điều kiện bảo quản Loại thuốc Kháng khuẩn Chế phẩm Hỗn dịch uống erythromycin ethyl sucinat Viên nén erythromycin ethyl sucinat