VIÊN NÉN PHYTOMENADION Tabellae Phytomenadionumi Là viên nén nhai hay ngậm phim chứa phytomenadion Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận “thuốc viên nén” (Phụ lục 1.20) yêu cầu sau đây: Hàm lượng phytomenadion, C31H46O2, từ 90,0 đến 110,0% so với hàm lượng ghi nhãn Tính chất Viên có màu đồng Định tính Lắc lượng bột thuốc tương ứng với 50 mg phytomenadion với 50 ml ethanol (TT), khoảng giờ, để lắng Láy dịch để thử Dung dịch A: Lấy ml dịch nói cho vào bình định mức 50 ml pha loãng ethanol (TT) đến định mức, lắc Phổ hấp thụ (Phụ lục 4.1) dung dịch A khoảng bước sóng từ 230 đến 350 nm, phải có cực đại bước sóng 328 nm cực tiểu bước sóng 292 nm Dung dịch B: Pha loãng thể tích thích hợp dung dịch A với lượng ethanol (TT) vừa đủ để dung dịch phytomenadion 0,001% Phổ hấp thụ (Phụ lục 4.1) dung dịch B khoảng bước sóng từ 230 đến 350 nm, phải có cực đại bước sóng 245 nm, 249 nm, 263 nm 271 nm, cực tiểu bước sóng 256 nm 266 nm Độ rã Yêu cầu độ rã không áp dụng cho viên phytomenadion Menadion Không 1,0% Tiến hành phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel GF254 Dung môi khai triển: Methanol - ether - cyclohexan (1 : 20 : 80) Dung dịch thử: Phân tán lượng bột viên tương ứng với 50 mg phytomenadion ml ethanol (TT) cách lắc siêu âm khoảng phút, thêm 15 ml 2,2,4-trimethylpentan (TT), lắc khoảng phút, ly tâm lấy lớp dung dịch Dung dịch đối chiếu: Dung dịch 0.0025% menadion 2,2,4-trimethylpentan (TT) Cách tiến hành: Chấm 50 µl dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm Lấy sắc ký để khô không khí Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Trên sắc ký đồ dung dịch thử vết phụ tương ứng với vết menadion không đậm vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Định lượng Tiến hành phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Hỗn hợp nước - ethanol 96% (5 : 95) Dung dịch chuẩn: Dung dịch phytomenadion chuẩn 0.01% pha động Dung dịch thử: Lấy 20 viên, loại bỏ lớp bao (nếu cần), cân tính khối lượng trung bình viên nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên tương ứng với khoảng 10 mg phytomenadion, thêm ml dung dịch amoniac 0,5 M (TT), lắc siêu âm khoảng phút Thêm 90 ml ethanol 96% (TT), lắc siêu âm khoảng 10 phút, lắc học khoảng 10 phút thêm ethanol 96% (TT) vừa đủ 100 ml, ly tâm lấy lớp dung dịch Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (20 cm x mm) nhồi pha tĩnh C (5 µm) Detector quang phổ hấp thụ tử ngoại đặt bước sóng 254 nm Tốc độ dòng: 1,5 ml/phút Thể tích tiêm 20 µl Cách tiến hành : Kiểm tra khả thích hợp hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn, độ lệch chuẩn tương đối diện tích đáp ứng từ lần tiêm lặp lại không lớn 2% Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượng phytomedion, C31H46O2, có đơn vị chế phẩm dựa vào diện tích pic thu dung dịch thử, dung dịch chuẩn hàm lượng C31H46O2 phytomedion chuẩn Bảo quản Đựng bao bì kín tránh ánh sáng Loại thuốc Vitamin (Thuộc nhóm K) Hàm lượng thường dùng mg, mg, 10 mg