Nghiên cứu tạo que thử để phát hiện nhanh một số độc tố ruột của tụ cầu khuẩn trong thực phẩm

24 428 0
Nghiên cứu tạo que thử để phát hiện nhanh một số độc tố ruột của tụ cầu khuẩn trong thực phẩm

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THỊ SAO MAI NGHIÊN CỨU TẠO QUE THỬ ĐỂ PHÁT HIỆN NHANH MỘT SỐ ĐỘC TỐ RUỘT CỦA TỤ CẦU KHUẨN TRONG THỰC PHẨM LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC HÀ NỘI, 2015 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THỊ SAO MAI NGHIÊN CỨU TẠO QUE THỬ ĐỂ PHÁT HIỆN NHANH MỘT SỐ ĐỘC TỐ RUỘT CỦA TỤ CẦU KHUẨN TRONG THỰC PHẨM Chuyên ngành : Vi sinh vật học Mã số : 62 42 01 07 LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Cán hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Thị Khánh Trâm TS Lê Quang Hòa HÀ NỘI, 2015 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng dƣới hƣớng dẫn tập thể nhà khoa học hƣớng dẫn luận án Các số liệu kết thí nghiệm trình bày luận án trung thực chƣa đƣợc công bố công trình khác Hà Nội, ngày tháng 05 năm 2015 NGHIÊN CỨU SINH Trần Thị Sao Mai LỜI CẢM ƠN Hoàn thành Luận án này, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới người thầy hướng dẫn: Thầy thuốc nhân dân, PGS.TS BS Nguyễn Thị Khánh Trâm, Cục An toàn Thực phẩm, Bộ Y tế, TS Lê Quang Hòa, Viện Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội, tận tình định hướng, dẫn tạo điều kiện cho trình nghiên cứu thực Luận án Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới PGS.TS Bùi Thị Việt Hà thầy cô giáo, cán Bộ môn Vi sinh vật học, thầy cô giáo Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tận tình trang bị kiến thức cho suốt năm qua Tôi xin cảm ơn tới thầy cô lãnh đạo cán bộ, nghiên cứu viên Viện Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội tạo điều kiện giúp sở vật chất để thực thí nghiệm cho Luận án Trong thời gian học tập nghiên cứu, nhận hỗ trợ động viên thầy cô giáo lãnh đạo cán viên chức Trường Đại học Kỹ thuật Y tế Hải Dương, tạo điều kiện cho thời gian vật chất, tinh thần để hoàn thành khóa học, xin cảm ơn giúp đỡ quí báu Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Ban Chủ nhiệm khoa Sinh học, Phòng Sau đại học Ban Giám hiệu Trường Đại học Khoa học Tự nhiên tận tình giúp hoàn thành hồ sơ suốt trình học tập bảo vệ luận án Trong suốt năm qua, nhận động viên, giúp đỡ vật chất tinh thần gia đình, người thân, đồng cảm bạn bè, đồng nghiệp, nguồn động lực lớn giúp hoàn thành khóa học Luận án Tôi xin trân trọng biết ơn giúp đỡ quí báu Hà Nội, ngày tháng 04 năm 2015 NGHIÊN CỨU SINH Trần Thị Sao Mai MỤC LỤC MỤC LỤC .1 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT .5 DANH MỤC HÌNH ẢNH Error! Bookmark not defined DANH MỤC BẢNG CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 1.1.TỤ CẦU KHUẨN Error! Bookmark not defined 1.1.1 Đặc điểm sinh học tụ cầu vàng Error! Bookmark not defined 1.1.2 Những yếu tố ảnh hƣởng tới sản sinh độc tố ruột tụ cầu Error! Bookmark not defined 1.1.3 Tình hình ngộ độc thực phẩm tụ cầu Error! Bookmark not defined 1.1.3.1 Tình hình ngộ độc thực phẩm độc tố ruột tụ cầu giới Error! Bookmark not defined 1.1.3.2 Tình hình ngộ độc thực phẩm Việt Nam Error! Bookmark not defined 1.2 ĐỘC TỐ RUỘT CỦA TỤ CẦU Error! Bookmark not defined 1.2.1 Đặc điểm sinh hóa, hóa lý di truyền độc tố ruột tụ cầu Error! Bookmark not defined 1.2.2 Cấu trúc phân tử độc tố ruột tụ cầu Error! Bookmark not defined 1.2.3 Hoạt tính sinh học độc tố ruột tụ cầu Error! Bookmark not defined 1.2.3.1 Hoạt tính siêu kháng nguyên Error! Bookmark not defined 1.2.3.2 Hoạt tính gây nôn Error! Bookmark not defined 1.2.3.3 Cơ chế gây viêm dày - ruột độc tố tụ cầuError! Bookmark not defined 1.3 CÁC PHƢƠNG PHÁP PHÁT HIỆN ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU Error! Bookmark not defined 1.3.1 Phép thử sinh học .Error! Bookmark not defined 1.3.2 Phƣơng pháp sinh học phân tử Error! Bookmark not defined 1.3.3 Phƣơng pháp miễn dịch Error! Bookmark not defined 1.3.3.1 Phương pháp khuếch tán gel (Microslide Double Diffusion ) Error! Bookmark not defined 1.3.3.2 Phương pháp miễn dịch phóng xạ - RIA (Radio Immunoassay) Error! Bookmark not defined 1.3.3.3 Ngưng kết hạt latex (Reversed Passive Latex Aggulutination - RPLA) Error! Bookmark not defined 1.3.3.4 Các phương pháp dựa kỹ thuật ELISA Error! Bookmark not defined 1.4 KỸ THUẬT SẮC KÝ MIỄN DỊCH VÀ ỨNG DỤNG Error! Bookmark not defined 1.4.1 Kỹ thuật sắc ký miễn dịch .Error! Bookmark not defined 1.4.1.1 Các hợp phần hệ thống sắc ký miễn dịchError! Bookmark not defined 1.4.1.2 Nguyên tắc phương pháp sắc ký miễn dịchError! Bookmark not defined 1.4.1.3 Phân loại que thử nhanh ứng dụng kỹ thuật sắc ký miễn dịch Error! Bookmark not defined 1.4.2 Một số nghiên cứu tạo que thử phát độc tố ruột tụ cầu thực phẩm Error! Bookmark not defined 1.5 CHẾ TẠO KHÁNG THỂ LÒNG ĐỎ TRỨNG VÀ ỨNG DỤNG CỦA IGY Error! Bookmark not defined 1.5.1 Kháng thể lòng đỏ trứng IgY Error! Bookmark not defined 1.5.2 Sản xuất kháng thể IgY .Error! Bookmark not defined 1.5.3 Các phƣơng pháp tinh chế kháng thể IgY Error! Bookmark not defined 1.5.4 Ứng dụng IgY chẩn đoán miễn dịch Error! Bookmark not defined 1.6 CÁC PHƢƠNG PHÁP SẢN XUẤT ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU Error! Bookmark not defined 1.6.1 Sản xuất độc tố ruột tụ cầu trực tiếp từ S aureus Error! Bookmark not defined 1.6.2 Sản xuất độc tố ruột tụ cầu phƣơng pháp tái tổ hợpError! Bookmark not defined CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU Error! Bookmark not defined 2.2 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU Error! Bookmark not defined 2.2.1 Vi sinh vật plasmid Error! Bookmark not defined 2.2.2 Hóa chất sinh phẩm Error! Bookmark not defined 2.2.3 Máy, thiết bị Error! Bookmark not defined 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Error! Bookmark not defined 2.3.1 Phƣơng pháp sản xuất độc tố ruột tụ cầu SEC1 tái tổ hợpError! Bookmark not defined 2.3.1.1 Tách chiết DNA tổng số từ vi khuẩn S aureus Error! Bookmark not defined 2.3.1.2 Khuế ch đại gen sec kỹ thuật PCR Error! Bookmark not defined 2.3.1.3 Tinh sản phẩm PCR Error! Bookmark not defined 2.3.1.4 Xây dựng vector biểu mang gen sec1 Error! Bookmark not defined 2.3.1.5 Biến nạp plasmid pGS-21a-sec1 vào tế bào E coli BL 21 Error! Bookmark not defined 2.3.1.6 Biểu protein SEC1 tái tổ hợp Error! Bookmark not defined 2.3.1.7 Tinh protein tái tổ hợp SEC1 Error! Bookmark not defined 2.3.1.8 Phương pháp điện di biến tính protein (SDS-PAGE) Error! Bookmark not defined 2.3.1.9 Phương pháp định lượng protein đo mật độ quang Error! Bookmark not defined 2.3.1.10 Kiểm tra tính kháng nguyên protein SEC1 tái tổ hợp kỹ thuật Western blot Error! Bookmark not defined 2.3.2 Phƣơng pháp sản xuất kháng thể IgY kháng BSA kháng thể IgY kháng loại độc tố SE (A+B+C1+D+E) .Error! Bookmark not defined 2.3.2.1 Gây miễn dịch Error! Bookmark not defined 2.3.2.2 Tinh kháng thể IgY từ lòng đỏ trứng Error! Bookmark not defined 2.3.3 Chế tạo que thử phát nhanh số độc tố ruột tụ cầu Error! Bookmark not defined 2.3.3.1 Thiết kế que thử nhanh phát số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) tụ cầu Error! Bookmark not defined 2.3.3.2 Xác định giới hạn phát tính ổn định que thửError! Bookmark not defined 2.3.4 Sử dụng que thử nhanh phát độc tố ruột tụ cầu số nhóm mẫu thực phẩm gây nhiễm độc tố SE Error! Bookmark not defined 2.3.5 PHƢƠNG PHÁP Xử LÝ Số LIệU Error! Bookmark not defined CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 3.1 SẢN XUẤT VÀ TINH CHẾ ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU SEC1 TÁI TỔ HỢP Error! Bookmark not defined 3.1.1 Tách chiết DNA tổng số từ S aureus .Error! Bookmark not defined 3.1.2 Khuếch đại gen sec1 kỹ thuật PCR Error! Bookmark not defined 3.1.3 Xây dựng vector biểu pGS-21a mang gen sec1Error! Bookmark not defined 3.1.4 Kết biểu gen mã hóa cho protein SEC1 tái tổ hợp Error! Bookmark not defined 3.1.5 Xác định điều kiện biểu gen sec1 thích hợp E.coli Error! Bookmark not defined 3.1.6 Tinh protein SEC1 tái tổ hợp Error! Bookmark not defined 3.1.7 Kiểm tra tính kháng nguyên protein SEC1 tái tổ hợp phản ứng Western Blot .Error! Bookmark not defined 3.2 CHẾ TẠO KHÁNG THỂ LÒNG ĐỎ TRỨNG IgY Error! Bookmark not defined 3.2.1 Lựa chọn loài gà cách chăm sóc gà .Error! Bookmark not defined 3.2.2 Cách gây miễn dịch thu hoạch trứng Error! Bookmark not defined 3.2.3 Kết tách chiết tinh kháng thể IgY Error! Bookmark not defined 3.3 CHẾ TẠO QUE THỬ Error! Bookmark not defined 3.3.1 Thiết kế que thử nhanh phát số độc tố ruột tụ cầu (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) Error! Bookmark not defined 3.3.3.1 Tối ưu hóa lượng kháng thể cần cố định lên vạch kiểm chứng Error! Bookmark not defined 3.3.3.2 Tối ưu hóa lượng kháng thể cần cố định lên vạch thử nghiệm Error! Bookmark not defined 3.3.3.3 Tối ưu hóa lượng kháng nguyên cộng hợp cần sử dụngError! Bookmark not defined 3.3.2 Xác định giới hạn phát tính ổn định que thử Error! Bookmark not defined 3.3.2.1 Xác định giới hạn phát que thử với độc tố ruột SEA, SEB, SEC1, SED SEE Error! Bookmark not defined 3.3.2.2 Xác định tính ổn định que thử Error! Bookmark not defined 3.4 SỬ DỤNG QUE THỬ ĐỂ PHÁT HIỆN MỘT SỐ ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU TRÊN THỰC PHẨM ĐƢỢC GÂY NHIỄM THỰC NGHIỆM Error! Bookmark not defined 3.4.1 Sử dụng que thử để phát số độc tố ruột tụ cầu (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) sữa đƣợc gây nhiễm thực nghiệm Error! Bookmark not defined 3.4.1.1 Xác định độ pha loãng sữa để thử nghiệm Error! Bookmark not defined 3.4.1.2 Sử dụng que thử để phát số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) sữa gây nhiễm thực nghiệm Error! Bookmark not defined 3.4.2 Sử dụng que thử để phát số độc tố ruột tụ cầu (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) thịt đƣợc gây nhiễm thực nghiệm Error! Bookmark not defined 3.4.2.1 Xác định độ pha loãng thịt để thử nghiệm Error! Bookmark not defined 3.4.2.2 Kết phát số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) thịt gây nhiễm thực nghiệm Error! Bookmark not defined KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED KẾT LUẬN ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Tên đầy đủ tiếng Anh Tên đầy đủ tiếng Việt - APC - Antigen Presenting Cell - Tế bào trình diện kháng nguyên - BSA - Bovine Serum Albumin - Albumin huyết bò - CFU - Colony forming unit - Đơn vị hình thành khuẩn lạc - CNS - Coagulase negative staphylococci - Tụ cầu không sinh coagulase - ELISA - Enzyme Linked Immunosorbent Assay - Phƣơng pháp miễn dịch hấp phụ gắn enzym - Fab - Fragment of antigen binding - Mảnh gắn kháng nguyên - Fc - Fragment crystalizable - Mảnh kết tinh - FCA - Freud’s Complete Adjuvant - Tá dƣợc Freud hoàn toàn - FIA - Freud’s Incomplete Adjuvant - Tá dƣợc Freud không hoàn toàn - GALT - Gut Associated Lymphoid Tisue - Mô limpho ruột - GI - Gastrointestinal - Dạ dày-ruột - GST - Glutathione-S-Transferase - HPLC - High-Performance Liquid - Sắc ký lỏng cao áp Chromatography - HLA-DR1 - Human Leukocyte Antigen serotype DR1 - Hệ Thống Sắc Ký Miễn Dịch - HTSKMD - IPTG -IsoPropyl-β-D-ThioGalactopyranoside - kDa - Kilo Dalton - MCP-1 - Monocyte Chemoattractant Protein - MHC-II - Major histocompatibility complex - NĐTP - Phức hợp tƣơng thích mô - Ngộ độc thực phẩm - Muối đệm phosphate - PBS - Phosphate Buffered Saline- - PCR - Polymerase Chain Reaction - PEG - Polyetylen Glycol - RNA - Ribonucleic acid - Axit ribonucleic - RPLA -Reversed Passive Latex Aggulutination - Kỹ thuật ngƣng kết hạt latex - SE - Staphylococcal Enterotoxin - Độc tố ruột tụ cầu - SPA - Staphylococcus aureus Protein A - Protein A tụ cầu - TCR - T-Cell antigen Receptor - Thụ thể tế bào T - TNF - Tumor Necrosis Factor - Yếu tố hoại tử khối u - TSST - Toxic Shock Syndrome Toxin - TSST-1 - Toxic Shock Syndrome Toxin-1 - Độc tố gây hội chứng sốc độc - Vệ Sinh An Toàn Thực Phẩm - VSATTP TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Lê Huy Chính (2007), Vi sinh vật y học, NXB Y học, Hà Nội Nguyễn Văn Dịp (1993), Ứng dụng nguyên lý vi sinh vật học di truyền học để xác định tính chất dich tễ Staphylococcus aureus, Luận án Tiến sĩ y học, Đại học Y khoa Hà Nội, Hà Nội Lê Quang Hòa, Trần Thị Sao Mai, Nguyễn Hồng Nhung, Nguyễn Thị Khánh Trâm, Tô Kim Anh (2012), “Sản xuất thử nghiệm sinh phẩm ELISA phát nhanh độc tố ruột dạng A tụ cầu”, Tạp chí Y học thực hành (842), tr.217- 220 Trần Thị Sao Mai, Nguyễn Hoàng Hải, Nguyễn Hồng Nhung, Nguyễn Thị Khánh Trâm, Lê Quang Hòa (2012), “Ứng dụng kỹ thuật sắc ký miễn dịch cạnh tranh để tạo que thử phát nhanh độc tố ruột A tụ cầu”, Tạp chí Y học thực hành (842), tr.213-217 Nguyễn Hoàng Minh, Lê Quang Hòa, Nguyễn Thị Huệ, Nguyễn Thị Khánh Trâm, Trần Hoa Cƣơng, Tô Kim Anh (2009), “Xây dựng quy trình phân tích phát nhanh độc tố tụ cầu vàng dạng A (SEA) sản phẩm thịt sử dụng Kit BK-SETA”, Kỷ yếu hội nghị khoa học An toàn vệ sinh thực phẩm lần thứ 5-2009, tr 469 – 474 Nghiêm Ngọc Minh (2011), “Biểu tinh protein nội độc tố Staphylococcal enterotoxin (SEB) chủng Staphylococcus aureus phân lập từ vụ ngộ độc thực phẩm”, Tạp chí Khoa học Công nghệ, 86 (10), pp 179-183 Đoàn Thị Nguyện (2009), Vi sinh vật học, NXB Giáo dục Việt Nam Nguyễn Đỗ Phúc, Trần Linh Thƣớc (2008), “Tạo kháng thể đa dòng xây dựng quy trình ELISA phát độc tố ruột nhóm A Staphylococcus aureus”, Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh (12), tr 272-277 Tim Sunnary (2013), Nghiên cứu chế tạo globulin miễn dịch từ trứng gà (IgY) kháng trực khuẩn mủ xanh, Luận án tiến sĩ Y học, Học viện Quân Y 103, Hà Nội 10 Đặng Đức Trạch (1984), Miễn dịch học, University of Amsterdam TIẾNG ANH 11 Agro-Bio (2011), Protocol for the production of chicken polyclonal antibodies specific IgY, Version 2011/01 12 Antonina A Votintseva, Rowena Fung, Ruth R Miller, Kyle Knox, Heather Godwin, David H Wyllie, Rory Bowden, Derrick W Crook, A Sarah Walker (2014), Prevalence of Staphylococcus aureus protein A (spa) mutants in the community and hospitals in Oxfordshire, BioMed Central, United Kingdom 13 Antonsson, P., Wingren, A.G., Hansson, J., Kalland, T., Varga, M., Dohlsten, M (1997), “Functional Characterization of the Interaction Between the Superantigen Staphylococcal Enterotoxin A and the TCR” Journal of Immunology 158, pp 4245–4251 14 Asao, T., Kumeda, Y., Kawai, T., Shibata, T., Oda, H., Haruki, K., Nakazawa, H., Kozaki, S (2003), “An extensive outbreak of staphylococcal food poisoning due to low-fat milk in Japan: Estimation of enterotoxin A in the incriminated milk and powdered skim milk’’, Journal of Epidemiology Infectionous 130, 33– 40 15 Asenjo, J.A and B.A Andrews (2009), “Protein purification using chromatology: selection of type, modelling and optimization of operating condition”, Journal of Molecular Recognit 22(2), pp 65-76 16 Atanmassova V, Meindl A Ring C (2001), “Prevalence of Staphylococcus aureus and staphylococci enterotoxin in raw pork and uncooked smoked ham – a comparison of classical culturing detection and RFLP-PCR”, International Journal of Food Microbiology 68: 105-113 17 Audrey W Jarvis, R C Lawrence, and G G Pritchard (1973), “Production of Staphylococcal enterotoxins A, B and C under conditions of controlled pH and aeration”, Journal of Infection and Immunity 7(6), pp 847-854 18 Balaban N, Rasooly A (2000), “Staphylococcal enterotoxins”, Internatinal Journal of Food Microbiology 61(1): 1-10.rnatio 19 Bergdoll, M.S., Crass, B.A., Reiser, R.F., Robbins, R.N., Davis, J.P (1981), “A New Staphylococcal Enterotoxin, Enterotoxin F, Associated with Toxic-ShockSyndrome Staphylococcus aureus Isolates”, Lancet 1, pp 1017–1021 20 Boyle T., Njoroge JM., Jones RL Jr., Principato M (2010), “Detection of staphylococcal enterotoxin B in milk and milk products using immunodiagnostic lateral flow devices”, Journal of AOAC International 93, pp 569-575 21 Cameron, S.B., Nawijn, M.C., Kum, W.W., Savelkoul, H.F., Chow, A.W (2001), “Regulation of Helper T Cell Responses to Staphylococcal Superantigens”, European Cytokine Netw (12), pp 210-222 22 Casman E.P., (1965), “Staphylococcal enterotoxin”, Annals of the New York Academy of Sciences 128, pp 124–131 23 Cha J.O., Lee J.K., JungY.H., Yoo J.I., Park Y.K., Kim B.S., Lee Y.S.(2006), “Molecular analysis of Staphylococcus aureus isolates associated with staphylococcal food poisoning in South Korea”, Journal of Applied Microbiology 101, pp 864–871 24 Chang HC, Bergdoll MS (1979), “Purification and some physicochemical properties of staphylococcal enterotoxin D”, Journal of Biochemistry 18 (10), pp 1937–1942 25 Chen T.R., Chiou, C.S., Tsen H.Y (2004), “Use of Novel PCR Primers Specific to the Genes of Staphylococcal Enterotoxin G, H, I for the Survey of Staphylococcus aureus Strains Isolated From Food-Poisoning Cases and Food Samples in Taiwan”, International Journal of Food Microbiology 92, pp 189– 197 26 Christopher Marcq, André Théwis, Daniel Portetelle, Yves Beckers (2013), “Refinement of the production of antigen-specific hen egg yolk antibodies (IgY) intended for passive dietary immunization in animals A review”, Biotechnology Agron Society Environment 17 (3), pp 483-493 10 27 Concordia R Borja , Merlin S Bergdoll (1967), “Purification and Partial Characterization of Enterotoxin C Produced by Staphylococcus aureus Strain 137”, Journal of Biochemistry (5), pp 1467–1473 28 Cook M.E and Trott D.L (2010), “IgY–immune component of eggs as a source of passive immunity for animals and humans”, world's poultry science journal 66, pp 215-225 29 Crowle A.J (1961), Immunodiffusion, New York: Academic Press 30 David F Capenter and Gerald J Silverman (1974), “Staphylococcal enterotoxin B and nuclease production under controlled dissolved oxygen conditions”, Journal of Applied Microbiology 28 (4), pp 628-637 31 De Buyser M.L., Dufour B., Maire M., Lafarge V (2001), “Implication of milk and milk products in food-borne diseases in France and in different industrialised countries”, International Journal of Food Microbiology 67, pp 1–17 32 Desouza I.A., Hyslop S., Franco-Penteado, C.F., Ribeiro-DaSilva, G (2001), “Mouse Macrophages Release a Neutrophil Chemotactic Mediator Following Stimulation by Staphylococcal Enterotoxin Type A”, Journal of Inflammation Research 50, pp 206– 212 33 Desouza I.A., Hyslop S., Franco-Penteado C.F., Ribeiro-DaSilva, G (2002), “Evidence for the Involvement of a Macrophage-Derived Chemotactic Mediator in the Neutrophil Recruitment Induced by Staphylococcal Enterotoxin B in Mice”, Toxicon 40, pp 1709-1717 34 Diana Pauly, Pablo A Chacana, Esteban G Calzado, Bjorn Brembs, Rudiger Schade (2011), “IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol (PEG) precipitation”, Journal of Visualized Experiments (51), pp 1-5 35 Dinges M.M., Orwin P.M., Schlievert P.M (2000), “Exotoxins of Staphylococcus aureus”, Clinical Microbiology Reviews 13, pp 16–34 36 Do Carmo, L S., Cummings, C., Linardi, V R., Dias, R S., De Souza, J M., Sena, M J., Dos Santos, D A., Shupp, J U., Poreira, R K., Jett, M (2004), A 11 case study of a massive staphylococcal food poisoning incident Foodborne Pathogens and Disease 1, pp 241-246 37 Edward J Schantz , William G Roessler , Jack Wagman , Leonard Spero , David A Dunnery , Merlin S Bergdoll (1965), “Purification of Staphylococcal Enterotoxin B*” , Journal of Biochemistry (6), pp 1011–1016 38 Evenson M.L., Hinds M.W., Bernstein R.S., Bergdoll M.S (1998), “Estimation of Human Dose of Staphylococcal Enterotoxin A From a Large Outbreak of Staphylococcal Food Poisoning Involving Chocolate Milk”, International Journal of Food Microbiology 7, pp 311–316 39 Evin K., Brunner G., My A and Wong C (1992), “Staphylococcus aureus growth and enterotoxin production in mushrooms”, Journal of Food Science 57(3), pp 700–703 40 Goshorn SC, Schlievert PM (1988), “Nucleotide sequence of streptococcal pyrogenic exotoxin type C”, Journal of Microbiology Immunology and Infection 56, pp 2518-2520 41 Hamal KR., Burgess SC., Pevzner IY., Erf GF (2006), “Maternal antibody transfer from dams to their egg yolks, egg whites, and chicks in meat lines of chickens”, Journal of Poultry Science 85(8), pp 1364- 1372 42 Haeghebaert S., Le Querrec F., Gallay A., Bouvet P., Gomez M., Vaillant V (2002), “Les toxi-infections alimentaires collectives en France en 1999 et 2000”, Bulletin Epidémiologique Hebdomadaire 23, pp 105-109 43 Harris TO, Grossman D, Kapp.ler JW, Marrack P, Rich RR, Betley MJ (1993), “Lack of complete correlation between emetic and T-cellstimulatory activities of staphylococcal enterotoxins”, Journal of Microbiology Immunology and Infection 61, pp 3175-3183 44 Hennekine Jacques-Antonie, Annick Ostyn, Florence Guillier, Sabine Herbin, AnneLaure Prufer and Sylviane Dragacc (2010), “How should Staphylococcal food poisoning outbreaks be characterized?”, Toxins (Basel) (2), pp 2106 – 2116 12 45 Hennekinne de Buyser and S Dragacci (2012), “Staphylococcus aureus and its food poisoning toxins: characterization and outbreak investigation”, FEMS Microbiology Reviews 36, pp 815–836 46 Le Quang Hoa, Tran Thi Sao Mai, Nguyen Thi Khanh Tram, To Kim Anh (2014), “Development of a Lateral Flow Immunoassay for the Rapid Detection of Staphylococcal Enterotoxin A in Milk”, VNU Journal of Science 30, pp 153-157 47 Hovde CJ, Marr JC, Hoffmann ML, Hackett SP, Chi YI, Crum KK, Stevens DL, Stauffacher CV, Bohach GA (1994), “Investigation of the role of the disulphide bond in the activity and structure of staphylococcal enterotoxin C1”, Journal of Molecular Microbiology 13, pp 897-909 48 Hu D.L., Omoe K., Shimoda Y., Nakane A., Shinagawa K (2003), “Induction of Emetic Response to Staphylococcal Enterotoxins in the House Musk Shrew (Suncus Murinus)”, Journal of Microbiology Immunology and Infection 71, pp 567–570 49 Hu D.L., Zhu G., Mori F., Omoe K., Okada M., Wakabayashi K., Kaneko S., Shinagawa K., Nakane A (2007), Enterotoxin Induces Emesis Through Increasing Serotonin Release in Intestine and It Is Downregulated by Cannabinoid Receptor 1, Cellular Microbiology 9, pp 2267–2277 50 Hu D.L., Omoe K., Sashinami H., Shinagawa K., Nakane A (2009), “Immunization with a Nontoxic Mutant of Staphylococcal Enterotoxin A, SEAD227A, Protects Against Enterotoxin-Induced Emesis in House Musk Shrews”, Journal of Infectious Diseases 199, pp 302–310 51 Jenny Schelin, Nina wallin-Carlquist, Marianne Thorup Cohn, Roland Lindqvist, Gary C Barker and Peter rådström (2011), “The formation of Staphylococcus aureus enterotoxin in food environments and advances in risk assessment”, Virulence Journal (6), pp 580-592 52 Jennifer Kovacs-Nolan and Yoshinori Mine (2012), “Egg Yolk Antibodies for Passvie Immunity”, Annual Review of Food Science and Technology 3, pp 163182 13 53 Jeremy M Berg, John L Tymoczko and Lubert Stryey (2002), Biochemistry, 5th edition, W.H Freeman, New York 54 Jhalka Kadariya, Tara C Smith and Dipendra Thapaliy (2014), Staphylococcus aureus and Staphylococcal Food-Borne Disease: An Ongoing Challenge in Public Health, BioMed Research International, Hindawi Publishing Corporation 55 Joseph F Metzger, Anna D Johnson, William S Collins II and Virginia McGann (1973), “Staphylococcusaureus Enterotoxin B release (excretion) under controlled condition of fermentation”, Journal of Applied Microbiology 25(5), pp 770-773 56 Kenneth Todar, Todar’s Online Textbook of Bacteriology University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology (Staphylococcus), Kenneth Todar University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology, 2005 57 Kerouanton A., Hennekinne J.A., Letertre C., Petit L., Chesneau O., Brisabois A., DeBuyser M.L (2007), “Characterization of Staphylococcus aureus strains associatedwith food poisoning outbreaks in France”, International Journal of Food Microbiology 115, pp 369–375 58 Koets M., Sander I., Bogdanovic J., Doekes G., Van Amerongen A.(2006), A rapid lateral flow immunoassay for the detection of fungal alpha-amylase at the workplace, Journal of Environmental Monitoring (2006) 942-6 59 Leenaars M and Hendriksen C.F (2005), “Criticalsteps intheproduction of polyclonaland monoclonal antibodies:evaluationand recommendations”, ILAR Journal 46, pp 269-279 60 Ler S.G., Lee F.K., Gopalakrishnakone P (2006), “Trends in Detection of Warfare Agents Detection Methods for Ricin, Staphylococcal Enterotoxin B and T-2”, Journal of Chromatography A1133, pp 1–12 61 Liben Chen, Shuang Li, Zhengfang Wang, Ruilong Chang, Jingliang Su and Bo Han (2012), “Protective effect of recombinant staphylococcal enterotoxin A entrapped in polylactic-co-glycolic acid microspheres against Staphylococcus aureus infection”, Veterinary Research 43 (20), pp 1-11 14 62 Lívia Silveira Munhoz, Gilberto D’Ávila Vargas, Geferson Fischer, Marcelo de Lima, Paulo Augusto Esteves, Silvia de Oliveira Hübner (2014), “Avian IgY antibodies: characteristics and applications in immunodiagnostic”, Ciência Rural 44 (1), pp 153-160 63 Marrack P., Kappler J (1990), “The staphylococcal enterotoxins and their relatives”, Science 248, pp 705-711 64 Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha (2010), “Staphylococcal enterotoxins: Molecular aspects and detection methods”, Journal of Public Health and Epidemiology 2, pp 29-42 65 María Ángeles Argudín, María Carmen Mendoza and María Rosario Rodicio (2010), “Food poisoning and Staphylococcus aureus enterotoxins”, Toxins 2, pp 1751-1773 66 McCormick JK, Yarwood JM, Schlievert PM (2001), “Toxic shock syndrome and bacterial superantigens: an update”, Annual Review of Microbiology 55, pp 77-104 67 Miethke T, Wahl C, Heeg K, Echtenacher B, Krammer PH, Wagner H (1992), “T cell-mediated lethal shock triggered in mice by the superantigen staphylococcal enterotoxin B”, Critical role of tumor necrosis factor Journal of Experimental Medicine 175, pp 91-98 68 Márta D, Wallin-Carlquist N, Schelin J, Borch E, Radstrom P (2011), “Extended staphylococcal enterotoxin D expression in ham products”, International Journal of Food Microbiology 28, pp 617–620 69 Mead PS, Slutsket L., Dietz V., McCaig LF., Bresee JS., Shapiro C., Griffin PM., Tauxe RV (1999), “Food-related illness and death in the United States”, Emerging Infectious Diseases Journal 5, pp 607-25 70 Merlin S Bergdoll and Amy C Lee Wong (2006), “Staphylococcal intoxication”, Foodborne Infection and Intoxications, pp 523-551 71 Mihai Sandaran, Valentin Ordori, Ioanna Sisu, Horea Sandaran, Victor Lorin Purcarea, Mircea Pennescu (2010), “Obtaining High Purity antibodies with 15 therapeutic potential”, FARMACIA 58 (6), pp 686-694 72 Nandita P Agnihotri, ManglaBhide (2014), “Cloning and expession of sec2 gene of Staphylococcus aureus for antibody production”, Journal Biology Innovation (1), pp 49-62 73 Notermans, S and Heuvelman, C.J (1983), “Combined effects of water activity, pH, and suboptimal temperature on growth and enterotoxin production”, Journal of Food Science 48, pp 1832-1835 74 Novick, R.P (2000), “Pathogenicity factors and their regulation” In: Gram Positive Pathogens (Fischetti, V.A., Novick, R.P., Feretti, J.J., Portnoy, D.A and Rood, J.I., eds.) ASM Press, Washington, D.C., USA, pp 392-407 75 Oakley C.L and Fulthorpe A.J (1953), “Antigenic analysis by diffusion”, Journal of Pathology and Bacteriology 65, pp 49-60 76 O’Farrell B and Bauer J (2006), “Developing highly sensitive, more reproducible lateral flow assays”, Part 1: New approaches to old problems IVD Technology June issue, pp 41 77 Onoue, Y and Mori, M (1997), “Amino acid requirement for growth and enterotoxin production by Staphylococcus aureus in chemically defined media”, International Journal of Food Microbiology 36, pp 77-82 78 Ostyn A, De Buyser ML, Guillier F, Groult J, Felix B, Salah S, Delmas G, Hennekinne JA.(2010), “First evidence of a food poisoning outbreak due to staphylococcal enterotoxin type E”, France, Euro Surveillance 15 (13), pp 528 79 Ouchterlony O (1948), “Antigen-antibody reactions in gels”, Archiv fur Kemi, Mineralogi, och Geology 26B, pp 1-9 80 Oudin J (1952), “Techniques and analysis of the quantitative precipitin reaction B Specific precipitation in gels and its application to immunochemical analysis”, Methods in Medical Research 5, pp 335-378 81 Otero, A., Garcia, M.C., Garcia, M.L and Moreno, B (1988), “Effect of a commercial starter culture on growth of Staphylococcus aureus and 16 thermonuclease and enterotoxins (C1 and C2) production in broth cultures”, International Journal of Food Microbiology 6: 107-114 82 Parma Y.R., Chacana P.A et al (2012), “Detection of Shiga toxin- producing Escherichia coli by sandwich enzym-linked immunosorbent assay using chicken egg yolk IgY antibodies”, Frontiers in Cellular and Infection Microbiology 2012, pp 8492 83 Petr Hodek and Marie (2003), “Chicken Antibodies – Superior Alternative for Conventional Immunoglobulins”, Proceedings of the Indian National Science Academy B69 4, pp 461-468 84 Petr Hodek, Pavel Trefil, Jiri Simunek, Jiri Hudecek, Marie Stiborova (2013), “Optimized protocol of chicken antibody (IgY) purification providing electrophoretically homogenous preparations”, International Journal of Electrochemical Science 8, pp 113-114 85 Pinchuk I.V., Beswick E.J., Saada J.I., Suarez G., Winston J., Mifflin R.C., Di Mari J.F., Powell D.W., Reyes V.E (2007), “Monocyte Chemoattractant Protein1 Production by Intestinal Myofibroblasts in Response to Staphylococcal Enterotoxin a: Relevance to Staphylococcal Enterotoxigenic Disease” Journal of Immunology 178, pp 8097- 8106 86 Proft T, Fraser JD (2003), “Bacterial superantigens”, Journal of Clinical and Experience Immunology 133, pp 299-306 87 Plotz C.M and Singer J.M (1956), “The latex fixation test”, Application to the serologicdiagnosis of rheumatoid arthritis, American Journal of Medicine 21 (6), pp 888–892 88 Raphael C Wong, Harley Y Tse (2009), Lateral Flow Immunoassay, Springer, Humana Press, Springer Science and Business Media, New York, NY 10013, USA 89 Regassa, L.B., Novick, R.P and Betley, M.J (1992), “Glucose and nonmaintained pH decrease expression of the accessory gene regulator (agr) in Staphylococcus aureus”, Journal of Infectious Immunology 60, pp 3381-3388 17 90 Reginald W Bennett and Jennifer M Hait (2011), Bacteriological Analytical Manual- Chapter 13A Staphylococcal Enterotoxins: Micro-slide Double Diffusion and ELISA-based Methods 91 Richman DD., Cleverland PH., Oxman MN, Johnson KM (1982), “The binding of Staphylococcal protein A by the sera of different animal species”, Journal of Immunology 128 (5), pp 2300-2305 92 Roberts T A., Baird-Parker A C and Tompkin R B (1996), Staphylococcus aureus Microbiological specifications of food pathogens, International Commission on Microbiological Specifications for Foods, Blackie Academic, London 93 Rüdiger Schade, Esteban Gutierrez Calzado, Rodolfo Sarmiento, Pablo Anibal Chacana, Joanna Porankiewicz-Asplund and Horacio Raul Terzolo (2005), “Chicken Egg Yolk Antibodies (IgY-technology): A Review of Progress in Production and Use in Research and Human and Veterinary Medicine”, ATLA 33, pp 1–26 94 Ruth Robbins, Sara Gould, and Merlin Bergdoll (1974), “Detecting the Enterotoxigenicity of Staphylococcus aureus Strains”, Journal of Applied Microbiology 28 (6), pp 946-950 95 Sameshima T., Magome C., Takeshita K., Itoh M and Kondo Y (1998), “Effect of intestinal Lactobacillus starter cultures on the behaviour of Staphylococcus aureus in fermented sausage”, International Journal of Food Microbiology 41, pp 1-7 96 SchwarzkopfC., StaakC., BehnI.and ErhardM (2001), Chicken egg yolk antibodies, production and application: IgY technology, pp 25-64, Springer Publishcation 97 Shinagawa K,Ono H K, Omoe K, Imanishi K, 2008 “Identification and characterization of two novel staphylococcal enterotoxins types S and T”, Journal of Infectionous Immunology 76, pp 4999–5005 98 Taylor S.L., Schlunz L.R., Beery J.T., Cliver D.O., Bergdoll M.S (1982), “Emetic Action of Staphylococcal Enterotoxin A on Weanling Pigs”, Journal of Infectionous Immunology 36, pp 1263–1266 18 99 Thermo Fisher Scientific (2010), Thermo Scientific Pierce Antibody Production and Purification, Technical Handbook 2, pp 1-77 100 Thomas H.Kent, M.D (1965), “Staphylococcal enterotoxin gastroenteritis in Rhesus Monkeys”, The American journal of pathology 48(3), pp 387- 407 101 T Diraviyam, T Jeevitha, P Saravanan, A Michael and S Meenatchisundaram (2011), “Preparation of Enteric Infections in Poultry”, Journal of Microbiology and Biotechnology Research (4), pp 95-103 102 Van Den Bussche RA, Lyon JD, Bohach GA (1993), “Molecular evolution of the staphylococcal and streptococcal pyrogenic toxin gene family”, Molecular Phylogenetics and Evolution (4), pp 281-292 103 Vaitukaitis J.L., Braunstein G.D and Ross G.T (1972), “A radioimmunoassay which specifically measures human chorionic gonadotropin in the presence of human luteinizing hormone”, Journal of Obstetrics and Gynaecology 15, pp 751–758 104 Victor E Reyes et al (2010), “Staphylococcal enterotoxins”, Toxins 2, pp 21772197 105 Veerasami M., Singanallur N.B., Thirumeni N., Rana S.K., Shanmugham R., Ponsekaran S., Muthukrishnan M., Villuppanoor S.A (2008), “Serotyping of foot-and-mouth disease virus by antigen capture-ELISA using monoclonal antibodies and chicken IgY”, Microbiology News 31(4), pp 549-554 106 Xiao Y., Gao X., Taratula O., Treado S., Urbas A., Holbrook R.D., Cavicchi R.E., Avedisian C.T., Mitra S., Savla R., Wagner P.D., Srivastava S., He H (2009), “Anti-HER2 IgY antibody- functionalized single-walled carbon nanotubes for detection and selective destruction of breast cancer cells”, BMC Cancer 9, pp 351 107 Yves Le Loir, Florence Baron and Michel Gautier (2003), “Staphylococcus aureus and food poisoning”, Genetic and Molecular Research 2, pp 63-76 108 Walk G (2002), Protein pruification and characterizatio, Proteins Biochemistry and biotechnology, John Wiley Sons LTD, pp 99-116 19 109 Wanchun Jin, Keiko Yamada, Mai Ikami (2013), “Application of IgY to sandwich enzym-linked immunosorbent assays, lateral flow devices, and immunopillar chips for detecting staphylococcal enterotoxins in milk and dairy products”, Journal of Microbiological Methods 92, pp 323-331 110 Wang RF., Cao WW and Cerniglia CE (1997), “A universal protocol for PCR detection of 13 species of foodborne pathogens in foods”, Journal of Applied Microbiology 83, pp 727-736 111 Wieneke A.A., Roberts, D Gilbert, R.J (1993), “Staphylococcal food poisoning in the United Kingdom”, Journal of Epidemiology and Infection 110, pp 519531 112 http://www.chongdoc.org.vn/LinkClick.aspx?fileticket=J691bNddmOQ%3D&ta bid=66&language=vi-VN 113 http://www.doc.edu.vn/tailieu/staphylococcus-aureus-va-benhvien-dostaphylococcus-11353 20 [...]... cạnh tranh để tạo que thử phát hiện nhanh độc tố ruột A của tụ cầu , Tạp chí Y học thực hành (842), tr.213-217 5 Nguyễn Hoàng Minh, Lê Quang Hòa, Nguyễn Thị Huệ, Nguyễn Thị Khánh Trâm, Trần Hoa Cƣơng, Tô Kim Anh (2009), “Xây dựng quy trình phân tích phát hiện nhanh độc tố tụ cầu vàng dạng A (SEA) trong sản phẩm thịt sử dụng bộ Kit BK-SETA”, Kỷ yếu hội nghị khoa học An toàn vệ sinh thực phẩm lần thứ... (2011), “Biểu hiện và tinh sạch protein nội độc tố Staphylococcal enterotoxin (SEB) trong các chủng Staphylococcus aureus phân lập từ các vụ ngộ độc thực phẩm , Tạp chí Khoa học và Công nghệ, 86 (10), pp 179-183 7 Đoàn Thị Nguyện (2009), Vi sinh vật học, NXB Giáo dục Việt Nam 8 Nguyễn Đỗ Phúc, Trần Linh Thƣớc (2008), Tạo kháng thể đa dòng và xây dựng quy trình ELISA phát hiện độc tố ruột nhóm A của Staphylococcus... sinh vật học và di truyền học để xác định tính chất dich tễ của Staphylococcus aureus, Luận án Tiến sĩ y học, Đại học Y khoa Hà Nội, Hà Nội 3 Lê Quang Hòa, Trần Thị Sao Mai, Nguyễn Hồng Nhung, Nguyễn Thị Khánh Trâm, Tô Kim Anh (2012), “Sản xuất và thử nghiệm bộ sinh phẩm ELISA phát hiện nhanh độc tố ruột dạng A của tụ cầu , Tạp chí Y học thực hành (842), tr.217- 220 4 Trần Thị Sao Mai, Nguyễn Hoàng... thích mô chính - Ngộ độc thực phẩm - Muối đệm phosphate - PBS - Phosphate Buffered Saline- - PCR - Polymerase Chain Reaction - PEG - Polyetylen Glycol - RNA - Ribonucleic acid - Axit ribonucleic - RPLA -Reversed Passive Latex Aggulutination - Kỹ thuật ngƣng kết hạt latex - SE - Staphylococcal Enterotoxin - Độc tố ruột tụ cầu - SPA - Staphylococcus aureus Protein A - Protein A của tụ cầu - TCR - T-Cell... thể của tế bào T - TNF - Tumor Necrosis Factor - Yếu tố hoại tử khối u - TSST - Toxic Shock Syndrome Toxin - TSST-1 - Toxic Shock Syndrome Toxin-1 - Độc tố gây hội chứng sốc do độc - Vệ Sinh An Toàn Thực Phẩm - VSATTP 7 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT 1 Lê Huy Chính (2007), Vi sinh vật y học, NXB Y học, Hà Nội 2 Nguyễn Văn Dịp (1993), Ứng dụng những nguyên lý về vi sinh vật học và di truyền học để xác... kháng thể đa dòng và xây dựng quy trình ELISA phát hiện độc tố ruột nhóm A của Staphylococcus aureus”, Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh (12), tr 272-277 9 Tim Sunnary (2013), Nghiên cứu chế tạo globulin miễn dịch từ trứng gà (IgY) kháng trực khuẩn mủ xanh, Luận án tiến sĩ Y học, Học viện Quân Y 103, Hà Nội 8 10 Đặng Đức Trạch (1984), Miễn dịch học, University of Amsterdam TIẾNG ANH 11 Agro-Bio (2011), Protocol... PM (1988), “Nucleotide sequence of streptococcal pyrogenic exotoxin type C”, Journal of Microbiology Immunology and Infection 56, pp 2518-2520 41 Hamal KR., Burgess SC., Pevzner IY., Erf GF (2006), “Maternal antibody transfer from dams to their egg yolks, egg whites, and chicks in meat lines of chickens”, Journal of Poultry Science 85(8), pp 1364- 1372 42 Haeghebaert S., Le Querrec F., Gallay A., Bouvet... en France en 1999 et 2000”, Bulletin Epidémiologique Hebdomadaire 23, pp 105-109 43 Harris TO, Grossman D, Kapp.ler JW, Marrack P, Rich RR, Betley MJ (1993), “Lack of complete correlation between emetic and T-cellstimulatory activities of staphylococcal enterotoxins”, Journal of Microbiology Immunology and Infection 61, pp 3175-3183 44 Hennekine Jacques-Antonie, Annick Ostyn, Florence Guillier, Sabine... enterotoxin type E”, France, Euro Surveillance 15 (13), pp 528 79 Ouchterlony O (1948), “Antigen-antibody reactions in gels”, Archiv fur Kemi, Mineralogi, och Geology 26B, pp 1-9 80 Oudin J (1952), “Techniques and analysis of the quantitative precipitin reaction B Specific precipitation in gels and its application to immunochemical analysis”, Methods in Medical Research 5, pp 335-378 81 Otero, A., Garcia,

Ngày đăng: 05/09/2016, 10:36

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan