BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN VÂN ANH MÃ SINH VIÊN 1101031 NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM CỦA CÂY VIỄN CHÍ ĐUÔI VÀNG POLYGALA AUREOCAUDA (POLYGALACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SỸ HÀ NỘI – 2016 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN VÂN ANH MÃ SINH VIÊN 1101031 NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM CỦA CÂY VIỄN CHÍ ĐUÔI VÀNG POLYGALA AUREOCAUDA (POLYGALACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SỸ Người hướng dẫn : ThS Phạm Thái Hà Văn NCS Đoàn Thái Hưng Nơi thực : Viện Dược Liệu Bộ môn Dược lực HÀ NỘI – 2016 LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ThS Phạm Thái Hà Văn NCS Đoàn Thái Hƣng – ngƣời trực tiếp hƣớng dẫn để giúp em hoàn thành khóa luận Em xin bày tỏ lòng biết ơn đến TS Phƣơng Thiện Thƣơng cán Khoa Hóa phân tích - Tiêu chuẩn, Viện Dƣợc liệu Bộ môn Dƣợc lực, trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện cho em thời gian làm thực nghiệm nghiên cứu đề tài Nhân dịp em c ng xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu toàn thể th y cô Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội dạy d tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt thời gian em học tập trƣờng Do thời gian làm thực nghiệm c ng nhƣ kiến thức thân có hạn, khóa luận ch c ch n có nhiều thiếu sót Em mong nhận đƣợc góp th y cô, bạn b để khóa luận đƣợc hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 10 tháng năm 2016 Sinh viên Tr n Vân Anh DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT BuOH, Bu n - buthanol EtOAc Ethyl acetat Et Ethanol Hx n – hexan PA Polygala aureocada VC Viễn chí đuôi vàng VCTP Cao chiết Ethanol toàn ph n rễ Viễn chí đuôi vàng VCB Cao chiết phân đoạn Buthanol rễ Viễn chí đuôi vàng MeOH Methanol SKLM S c k lớp mỏng TLC Thin - layer chromatography (S c k lớp mỏng) DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng STT Bảng 3.1 Kết định tính nhóm chất rễ Viễn chí đuôi vàng (Polygala aureocauda) Trang 28 Bảng 3.2 Kết SKLM nhận biết xanthon 31 Bảng 3.3 Kết SKLM nhận biết polysaccarid 32 Bảng 3.4 Kết SKLM nhận biết acid amin 33 Bảng 3.5.Tác dụng chống viêm cấp cao Viễn chí đuôi vàngtrên mô hình gây phù bàn chân chuột carrageenan 35 DANH MỤC CÁC HÌNH Tên hình STT Trang Hình 1.1: Hình ảnh Viễn chí đuôi vàng Hình 1.2: Các xanthon đƣợc phân lập từ Viễn chí đuôi vàng 8 10 11 12 Hình 1.3: Hai hợp chất phenolic phân lập từ Viễn chí đuôi vàng Hình 1.4: Công thức cấu tạo hợp chất reiniosid C Hình 1.5: Công thức cấu tạo hợp chất oligo-polyester saccharid phân lập đƣợc từ Viễn chí đuôi vàng Hình 2.1: Hình ảnh dƣợc liệu Viễn chí đuôi vàng Hình 2.2: Sơ đồ chuẩn bị mẫu thử tác dụng chống viêm cấp Viễn chí đuôi vàng Hình 2.3: Quy trình thí nghiệm tác dụng chống viêm cấp mô hình gây phù bàn chân chuột carrageenan Hình 3.1: Kết định tính xanthon Viễn chí đuôi vàng Hình 3.2: Kết định tính polysaccharid Viễn chí đuôi vàng Hình 3.3: Kết định tính acid amin Viễn chí đuôi vàng Hình 3.4: Mức độ phù chân chuột trung bình theo thời gian mô hình gây viêm cấp carrageenan 10 14 17 18 31 32 33 36 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Polygala 1.2 Tổng quan Viễn chí đuôi vàng CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG, PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 14 2.2 Phƣơng tiện nghiên cứu 14 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 15 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 20 3.1 Nghiên cứu thành ph n hóa học 20 3.2 Kết đánh giá tác dụng chống viêm cấp dƣợc liệu Viễn chí đuôi vàng 34 CHƢƠNG BÀN LUẬN 38 4.1 Về thành ph n hóa học 38 4.2 Về tác dụng chống viêm cấp 38 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 41 5.1 Kết luận 41 5.2 Kiến nghị 41 ĐẶT VẤN ĐỀ Viễn chí đuôi vàng có tên khoa học Polygala aureocauda Dunn (tên đồng nghĩa Polygala fallax Hemsl.) hay gọi bổ béo tía mọc rải rác rừng thƣa, tập trung Sa Pa (Lào Cai) nƣớc ta Trong y học cổ truyền, Viễn chí đuôi vàng đƣợc sử dụng giúp bồi bổ sức khỏe, chữa suy nhƣợc thể sau ốm dậy, lƣng đau, mỏi gối, kinh nguyệt không [11] Trên giới, chƣa có nhiều nghiên cứu thành ph n hóa học tác dụng dƣợc l Viễn chí đuôi vàng Ở Việt Nam, theo tra cứu có luận văn thạc sỹ Tr n Thị Hằng An, Đại học Dƣợc Hà Nội nghiên cứu thuốc Nghiên cứu tiến hành chiết xuất, phân lập đánh giá tác dụng chống oxy hóa xanthon phân lập đƣợc từ Viễn chí đuôi vàng [1] Viễn chí đuôi vàng (Polygala aureocauda Dunn.) Viễn chí tr ng (Polygala karensium Kurz.) từ lâu đƣợc đồng bào dân tộc Dao đỏ H’mông Sa Pa, Lào Cai sử dụng rễ nhƣ vị thuốc bổ để chữa đau nhức xƣơng khớp với tên gọi Bổ béo tía Bổ béo tr ng Do rễ loài giống với Ba kích nên ngƣời dân bán với tên Ba kích tr ng Ba kích tía, dễ gây nh m lẫn cho nhiều ngƣời Theo y học dân gian, rễ hai loài có tác dụng bồi bổ sức khỏe, lợi tiểu, kích thích tu n hoàn, điều hòa kinh nguyệt khác hẳn với dƣợc liệu Ba kích (Morinda officinalis) có tác dụng bổ dƣơng đƣợc dùng lƣng gối mỏi đau, liệt dƣơng, xuất tinh sớm Theo điều tra Viện Dƣợc liệu, Viễn chí đuôi vàng đƣợc ngƣời dân Sa Pa dùng tƣơi ngâm rƣợu để làm thuốc bổ, chữa sƣng viêm Tuy nhiên chƣa có nghiên cứu khoa học chứng minh tác dụng chống viêm loài Polygala aureocauda Việt Nam đƣợc công bố Nhằm cung cấp sở liệu khoa học tác dụng chống viêm c ng nhƣ làm phong phú thêm tri thức hóa thực vật học loài Viễn chí đuôi vàng (Polygala aureocauda) thu hái Việt Nam, thực đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng chống viêm Viễn chí đuôi vàng Polygala aureocauda (Polyganaceae)” với mục tiêu: - Định tính thành ph n hóa học rễ Viễn chí đuôi vàng (Polygala aureocauda) phản ứng hóa học s c k lớp mỏng - Đánh giá tác dụng chống viêm cấp cao rễ Viễn chí đuôi vàng (Polygala aureocauda) CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Polygala 1.1.1 Vị trí phân loại chi Polygala Theo hệ thống phân loại tác giả Takhtajan (1987) [2] Ngành (Division): Ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta) Lớp (Class): Lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida) Phân lớp Hoa hồng (Rosidae) Bộ (Order): Bộ Đậu (Fabales) Họ (Family): Họ Viễn chí (Polygalaceae) Chi (Genus): Polygala 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố chi Polygala Đặc điểm thực vật Cây cỏ, bụi thấp hay nhỡ Lá mọc so le, mọc đối hay mọc vòng Hoa không đều, xếp thành hay chùm Đài có đài khác xếp theo hình nanh sấu, đài lớn có màu Tràng có cánh hoa, dƣới lớn hơn, dạng giỏ hay dạng m , cánh sau nhỏ Nhị 8, bó B u hai ô Quả nang có cánh, ô, m i ô hạt Hạt có áo hạt, có lông nhung [10] Phân bố Chi Polygala có khoảng 500 loài, phân bố rải rác kh p vùng nhiệt đới, cận nhiệt đới ôn đới ấm trừ New Zealand [10], [15] Tuy nhiên, vùng TrungNam Mỹ, B c Mỹ Nam Phi nơi phân bố loài thuộc chi Trong tài liệu “Từ điển thực vật thông dụng”, tác giả Võ Văn Chi có Việt Nam có khoảng 24 loài thuộc chi Polygala, có nhiều loài đƣợc sử dụng làm thuốc [34] Các loài thuộc chi Polygala phân bố chủ yếu vùng núi cao từ B c vào Nam Tác giả Phạm Hoàng Hộ có liệt kê 26 loài thuộc chi Polygala với tên gọi Kích nh , phân bố từ phía Tây b c (Lào Cai, Tam Đảo, Ba Vì) tới Nam Trung Bộ (Đồng Nai) Tây Nguyên (Đà Lạt), đặc biệt có đảo Phú Quốc [13] Trong sách “Từ điển thuốc Việt Nam”, tác giả Võ Văn Chi có liệt kê 13 loài Polygala dùng làm thuốc y học dân gian với tên gọi Viễn chí [11] Tác giả Đ Tất Lợi c ng mô tả loài nƣớc ta 31 Hình 3.1 S c k đồ định tính xanthon Viễn chí đuôi vàng Ghi chú: EtOH: C n ethanol Hx: C n n-hexan EtOAc: C n ethyl acetat Hệ dung môi: n-hexan - ethyl acetat (1 : 1) Thuốc thử: dung dịch KOH 5% methanol Quan sát ánh sáng tử ngoại 365 nm sau phun thuốc thử Bảng 3.2 Kết SKLM nhận biết xanthon STT Rf Màu s c C n ethanol C n n-hexan C n ethyl aceatat 0,12 Xanh Xanh Xanh 0,24 Xanh Xanh Xanh 0,36 Xanh Xanh Xanh 0,44 xanh Xanh Xanh 0,54 Xanh Xanh 0,66 Xanh Đỏ 0,74 Tím 0,80 Đỏ Nhận xét: Kết hình 3.1 cho thấy c n ethanol, c n n-hexan, c n ethyl acetat Viễn chí đuôi vàng có vết phát quang màu xanh đến đỏ sau phun thuốc 32 thử KOH 5%/methanol Tham khảo tài liệu [29], [33], nhóm nghiên cứu xác định dƣợc liệu Viễn chí đuôi vàng có chứa nhóm hợp chất xanthon 3.1.2.2 Định tính polysaccharid Kết định tính polysaccharid dƣợc liệu Viễn chí đuôi vàng đƣợc thể hình 3.2 Hình 3.2 S c k đồ định tính polysaccharid Viễn chí đuôi vàng Ghi chú: EtOH: C nethanol Bu: C n n-buthanol EtOAc: C n ethyl acetat Hệ dung môi: n-propanol - ethyl acetat - acid acetic - H2O (4 : : : 2) Thuốc thử: α naphtol-acid sunfuric Quan sát ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử sấy 105oC 10 phút Bảng 3.3 Kết SKLM nhận biết polysaccharid STT Rf Màu s c C n ethanol C n n-buthanol C n ethyl aceatat 0,50 tím tím 0,56 tím tím tím 0,76 tím tím tím 0,90 tím 33 Nhận xét: Kết hình 3.2 cho thấy c n n-buthanol, c n ethyl acetat, c n ethanol Viễn chí đuôi vàng có vết màu tím ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử α naphtol-acid sunfuric [3] Nhƣ vậy, nhóm nghiên cứu xác định dƣợc liệu Viễn chí đuôi vàng có chứa polysaccharid 3.1.2.3 Định tính acid amin Kết định tính acid amin dƣợc liệu Viễn chí đuôi vàng đƣợc thể hình 3.3 Hình 3.3.S c k đồ định tínhacid amintrong Viễn chí đuôi vàng Ghi chú: Bu: C n n-buthanol EtOH: C n ethanol Hệ dung môi: n-propanol - ethyl acetat - acid formic - H2O (4 : : : 2) Thuốc thử: Ninhydrin Quan sát ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử sấy 105oC 10 phút Bảng 3.4 Kết SKLM nhận biết acid amin STT Rf Màu s c C n n-buthanol C n ethanol 0,29 Da cam Hồng 0,33 Hồng Hồng 0,40 Da cam 34 0,55 0,64 0,76 Hồng Hồng Hồng Hồng Nhận xét: Kết hình 3.3 cho thấy c n ethanol c n n-buthanol Viễn chí đuôi vàng có vết màu hồng ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử Ninhydrin [3] Nhƣ vậy, nhóm nghiên cứu xác định dƣợc liệu Viễn chí đuôi vàng có chứa acid amin 3.2 Kết đánh giá tác dụng chống viêm cấp dƣợc liệu Viễn chí đuôi vàng Mẫu nghiên cứu: chuẩn bị theo sơ đồ hình 2.2 Mẫu 1: C n chiết toàn ph n ethanol từ Viễn chí đuôi vàng (VCTP) Mẫu 2: C n phân đoạn n-buthanol (VCB) - Xác định độ ẩm mẫu nghiên cứu: Lấy 1,0 g mẫu nghiên cứu để xác định độ ẩm - Lấy lƣợng c n ethanol toàn ph n c n chiết phân đoạn n-buthanol (đã đƣợc quy đổi mức liều theo cao khô tuyệt đối dựa vào độ ẩm đƣợc xác định), hòa với nƣớc cất thành h n dịch đồng M i c n đƣợc pha nƣớc cất 02 nồng độ: * C n ethanol toàn ph n: 70mg/ml 140mg/ml * C n n-buthanol: 10mg/ml 20mg/ml - Tiến hành thí nghiệm nhƣ ghi ph n phƣơng pháp nghiên cứu mục 2.3.3 Sử dụng mô hình gây phù bàn chân chuột carrageenan với thuốc đối chiếu indomethacin để xác định tác dụng chống viêm cấp cao chiết Viễn chí đuôi vàng Thông số đánh giá mức độ phù bàn chân chuột thời điểm giờ, giờ, sau gây viêm Kết thể bảng 3.5 35 Bảng 3.5 Tác dụng chống viêm cấp cao Viễn chí đuôi vàng mô hình gây phù bàn chân chuột carrageenan Lô Chứng Indomethacin VCTP VCTP VCB VCB Liều (mg/kg) - 10 700 1400 80 160 Thời điểm Thô n 10 10 10 10 ng Sau số ∆V Sau Sau Sau 11,34 ± 25,44 ± 23,75 ± 20,84 ± (%) 1,95 2,16 2,22 2,48 ∆V 5,89 ± 10,23 ± 5,62 ± 4,65 ± (%) 1,72* 2,47** 2,33** 2,06** I% 48,07 59,79 76,95 80,64 ∆V 8,55 ± 16,48 ± 13,51 ± 9,04 ± (%) 1,45 2,30** 1,66** 1,63** I% 24,60 35,22 43,12 56,59 ∆V 7,25 ± 17,25 ± 15,16 ± 9,66 ± (%) 2,36 1,96** 3,60* 2,84** I% 36,09 32,20 36,19 53,65 ∆V 7,66 ± 16,30 ± 15,12 ± 9,93 ± (%) 1,21 1,65** 1,37* 1,49** I% 32,12 36,31 37,67 51,66 ∆V 4,85 ± 11,10 ± 8,54 ± 5,45 ± (%) 1,27** 2,06** 2,25** 1,54** I% 60,31 58,22 67,57 83,87 *: p < 0,05; **: p < 0,01 so sánh với lô chứng ∆V: Mức độ phù chân chuột thời điểm t sau gây viêm I (%): Ph n trăm ức chế phù lô thử so với lô chứng thời điểm 36 Chứng Indomethacin 10mg/kg VCTP 700mg/kg VCTP 1400mg/kg VCB 80mg/kg VCB 160mg/kg 40,0 Mức độ phù chân chuột (%) 35,0 30,0 25,4 25,0 23,8 20,8 20,0 17,2 16,5 16,2 15,0 11,3 10,0 5,0 10,6 8,5 7,7 7,2 5,9 4,5 10,2 giờ 15,2 14,8 13,5 7,7 5,5 10,1 9,7 9,0 4,0 3,4 0,0 giờ Thời gian sau gây viêm (giờ) Hình 3.4 Mức độ phù chân chuột trung bình theo thời gian mô hình gây viêm cấp carrageenan Kết bảng 3.2 hình 3.5 cho thấy cao ethanol toàn ph n rễ Viễn chí đuôi vàng mức liều 700 mg/kg có tác dụng ức chế phù bàn chân chuột thời điểm giờ, sau gây viêm với tỷ lệ ức chế phù bàn chân chuột so với chứng l n lƣợt 35,22% (p[...]... chữa thiếu máu: Viễn chí đuôi vàng, đảng sâm, kê huyết đằng đều 30g, s c uống - Đơn thuốc chữa viêm gan cấp và mạn tính: Rễ viễn chí đuôi vàng (10-15g) hay lá tƣơi (60-150g), s c uống Theo điều tra của Viện dƣợc liệu, rễ của cây Viễn chí đuôi vàng đƣợc các dân tộc ở Sa Pa dùng làm thuốc bổ, giảm đau, chữa sƣng viêm, mệt mỏi, phù hợp với công dụng của Võ Văn Chi miêu tả 1.2.6 Tác dụng sinh học Hiện nay... đã đƣợc phân lập từ cây Viễn chí đuôi vàng - Các hợp chất phenolic Năm 2003, Wenzhe Ma và các cộng sự đã phân lập đƣợc hai hợp chất phenolic từ rễ Viễn chí đuôi vàng là: Polygalolid A (1) and B (2) [36] Hình 1.3 Hai hợp chất phenolic đã phân lập từ cây Viễn chí đuôi vàng 9 - Saponin Năm 2006, Xu Kangping và cộng sự đã phân lập đƣợc bốn saponin triterpenoid từ rễ cây Viễn chí đuôi vàng [35], [38] Các... thái trơ của tim [19] - Tác dụng chống viêm Năm 2003, Kou Junping và cộng sự đã tiến hành các thí nghiệm để xác định tác dụng chống viêm của cao chiết rễ loài Polygala aureocauda trên mô hình gây tăng tính thấm thành mạch và sử dụng xylen gây phù tai chuột Kết quả nghiên cứu cho thấy, cao chiết Viễn chí đuôi vàng có khả năng ức chế sự tăng tính thấm thành mạch gây ra bởi histamine trên chuột, và giảm... một vài nghiên cứu về tác dụng sinh học của cây Viễn chí đuôi vàng đã đƣợc công bố - Tác dụng hạ mỡ máu, chống xơ vữa động mạch Nghiên cứu của Li và cộng sự cho biết hợp chất saponin là reiniosid C phân lập từ rễ loài P aureocauda có tác dụng hạ lipid máu khi thử nghiệm in vivo Chuột đƣợc uống renioside C các liều 4, 8, 16 mg/kg/ngày trong 30 ngày liên tục, kết quả cho thấy lƣợng lipid trong máu và. ..4 Các loài Viễn chí (Polygala sp.) đƣợc sử dụng để chữa ho, nhiều đờm Y học cổ truyền thƣờng sử dụng 2 loài Viễn chí là P tenuiflorum (Viễn chí lá nhỏ), P sibirica (Viễn chí Xeberi), để điều trị bệnh th n kinh suy nhƣợc, chữa hồi hộp, hay quên, sợ hãi, chữa ho nhiều đờm [11] Ngoài các loài Viễn chí đƣợc sử dụng với tác dụng chữa ho và tăng trí nhớ, thì hiện nay 2 loài Viễn chí đuôi vàng (Polygala fallax... Công dụng: Thƣờng dùng lá và thân s c uống trong trƣờng hợp sƣng huyết 1.2 Tổng quan về cây Viễn chí đuôi vàng 1.2.1 Tên gọi Tên khoa học: Polygala aureocauda Dunn – họ Viễn chí (Polygalaceae) Tên đồng nghĩa: Polygala fallax Hemsl., Polygala fallax Hayek ex Zahlbruckner, Polygala forbesii Chodat Tên thƣờng gọi: Bổ béo tía, Kích nh đuôi vàng [11] 6 1.2.2 Đặc điểm thực vật Cây nhỡ rụng lá hoặc cây bụi,... Giang Tây Viễn chí đuôi vàng mọc rải rác trong rừng thƣa, thu hái rễ và lá vào mùa h và mùa thu Rễ rửa sạch, phơi khô để dùng Lá dùng tƣơi hoặc phơi khô trong bóng râm [11] 1.2.4 Thành phần hóa học Theo các tài liệu đã đƣợc công bố trên thế giới, rễ Viễn chí đuôi vàng chứa bốn thành ph n chính bao gồm: saponin triterpen, polysaccharid, phenolic và các hợp chất xanthon - Xanthon Theo các nghiên cứu đã... đây là điều gây nh m lẫn với Ba kích Ph n đuôi rễ có màu vàng nên đƣợc gọi là Viễn chí đuôi vàng [11] A B C D Hình 1.1 Hình ảnh của Viễn chí đuôi vàng A: Cành cây; B: Hoa; C: Rễ; D: Quả 7 1.2.3 Phân bố và sinh thái Loài Polygala aureocauda tập trung phân bố ở rừng thƣa với độ cao 12001500m Ở Việt Nam cây gặp nhiều ở vùng núi SaPa của dãy Hoàng Liên Sơn Ngoài ra cây còn đƣợc tìm thấy ở Trung Quốc, chủ... type 1 (HSV-1) và virus B3 coxsackie 13 (Cox B3) Hai chủng virus trên là nguyên nhân gây bệnh mụn rột da và bệnh chân tay miệng Nghiên cứu còn chỉ ra rằng các dẫn chất của xanthon có nhóm chức 1,3dihydroxy c ng có tác dụng kháng cả 2 loại virus nêu trên [26] 14 CHƢƠNG 2 ĐỐI TƢỢNG, PHƢƠNG TIỆNVÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu Đối tƣợng nghiên cứu là rễ cây Viễn chí đuôi vàng đƣợc thu... dụng chống viêm cấp của Viễn chí đuôi vàng Các c n đƣợc hòa vào nƣớc cất thành các nồng độ khác nhau để phù hợp với yêu c u của thí nghiệm trƣớc khi cho chuột uống Sau khi cho chuột uống thuốc, gây viêm bằng cách tiêm dƣới da gan bàn chân sau phải chuột bằng chất gây viêm là carrageenan 1% Đo thể tích bàn chân trƣớc và sau khi gây viêm tại các thời điểm 1h, 3h, 5h, 7h So sánh tác dụng chống viêm của