BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN VIỆN DI TRUYỀN NÔNG NGHIỆP BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHẢO NGHIỆM ĐÁNH GIÁ RỦI RO NGÔ BIẾN ĐỔI GEN (EVENT TC1507) ĐỐI VỚI ĐA DẠNG SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG SINH THÁI VIỆT NAM Đơn vị đăng kí: Công ty TNHH Pioneer Hi-Bred Việt Nam Đơn vị khảo nghiệm: Viện Di truyền Nông nghiệp Hà nội, tháng năm 2012 Science with Service Delivering Success™ BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN VIỆN DI TRUYỀN NÔNG NGHIỆP BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHẢO NGHIỆM ĐÁNH GIÁ RỦI RO NGÔ BIẾN ĐỔI GEN (EVENT TC1507) ĐỐI VỚI ĐA DẠNG SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG SINH THÁI VIỆT NAM (Theo Nghị định số 69/2010/NĐ-CP ngày 21 tháng năm 2010 Chính phủ) Hà nội, tháng năm 2012 MỤC LỤC THÔNG TIN CHUNG 1.1 Đơn vị đăng ký khảo nghiệm 1.2 Đơn vị thực khảo nghiệm 1.3 Tên giống trồng biến đổi gen khảo nghiệm 1.4 Các văn pháp lý liên quan 1.5 Các văn kèm theo báo cáo TỔNG QUAN VỀ NGÔ BIẾN ĐỔI GEN EVENT TC1507 2.1 Thông tin chung ngô event TC1507 2.2 Thông tin sinh vật cho gen 2.3 Thông tin sinh vật nhận 2.4 Phương pháp chuyển nạp gen tạo dòng ngô Event TC1507 2.4.1 Kích thước, trình tự, chức đoạn gene đưa vào 2.4.2 Phương pháp xác định, phát gen, đặc trưng gen 2.5 Đặc tính trạng sử dụng ngô event TC1507 11 2.5.1 Protein CRY1F kháng côn trùng, sâu hại 11 2.5.2 Protein PAT kháng glufosinate-ammonium đánh dấu chọn lọc 15 2.5.3 Thông tin liên quan đến biểu tính trạng gen chuyển nạp vào ngô chuyển gen TC1507 15 2.5.4 Thông tin khác biệt dòng ngô chuyển gene TC1507 so với bố mẹ ………………………………………………………………………… 16 2.5.5 Phương pháp phát ngô chuyển gene TC1507 17 2.5.6 Thông tin việc thương mại hoá (phóng thích sử dụng) ngô chuyển gene TC1507 giới 17 2.5.7 Mô tả nguy cơ, khả xảy nguy để xác định rủi ro xảy phóng thích sinh vật chuyển gene 19 Xác ĐỊNH VẤN ĐỀ CẦN KHẢO NGHIỆM TẠI VIỆT NAM 27 3.1 Thông tin sản xuất sử dụng ngô 27 3.2 Tình hình sử dụng trồng BĐG Đông Nam Á 28 3.3 Cơ sở khoa học nghiên cứu tính an toàn đa dạng sinh học môi trường trồng ngô TC1507 giới 29 3.3.1 Nguy trôi gen môi trường 29 3.3.2 Nguy trở thành cỏ dại, dich hại 30 3.3.3 Nguy ảnh hưởng tới sinh vật không chủ đích 30 i 3.4 Tiêu chí đánh giá khảo nghiệm đồng ruộng Việt Nam ngô biến đổi gen event TC1507 34 MỤC TIÊU, NỘI DUNG, VẬT LIỆU, PHƯƠNG PHÁP KN 36 4.1 Mục tiêu nội dung khảo nghiệm 36 4.1.1 Mục tiêu 36 4.1.2 Nội dung khảo nghiệm 37 4.2 Vật liệu phương pháp nghiên cứu KNHC 38 4.2.1 Giống Ngô đăng ký KNHC 38 4.2.2 Thời gian, địa điểm KNHC 38 4.2.3 Phương pháp KNHC (áp dụng cho hai vụ) 39 4.2.4 Ghi nhận thông tin, phân tích xử lý số liệu 49 4.3 Vật liệu, phương pháp KNDR 51 4.3.1 Giống đăng ký KNDR 51 4.3.2 Thời gian địa điểm KNDR 52 4.3.3 Phương pháp KNDR (áp dụng chung cho địa điểm) 53 4.3.4 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 60 4.3.5 Phương pháp thực chung cho tất nội dung KNDR 60 KẾT QUẢ KHẢO NGHIỆM NGÔ CHUYỂN GEN EVENT TC1507 ĐỐI VỚI ĐA DẠNG SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG SINH THÁI VIỆT NAM 62 5.1 Kết KNHC ngô event TC1507 (2 vụ lên tiếp) 62 5.1.1 Kết kiểm tra diện protein Cry1F (giai đoạn V4) 62 5.1.2 Kết đa dạng quần thể NTOs ruộng KNHC 63 5.1.3 Thành phần loài động vật chân khớp (côn trùng nhện) 66 5.1.4 Kết đánh giá đa dạng sinh vật đất 77 5.1.5 Đánh giá xuất gây hại bệnh hại ngô KNHC 93 5.1.6 Kết đánh giá mức độ gây hại sâu hại ngô không chủ đích 98 5.1.7 Kết luận sơ kết KNHC (2 vụ lên tiếp) 100 5.2 Kết KNDR ngô BĐG event TC1507 101 5.2.1 Kiểm tra diện protein Cry1F protein CP4 EPSPS 101 5.2.2 Kết đánh giá tính ổn định tính thích ứng ngô event TC1507 vùng sinh thái Việt Nam 103 5.2.3 Kết đánh giá đa dạng quần thể côn trùng không chủ đích ruộng KNDR ngô chuyển gene TC1507 vùng sinh thái Việt Nam 116 5.2.4 Kết luận sơ kết KNDR 173 ii DỮ LIỆU KHÍ HẬU CHÍNH TẠI CÁC ĐỊA ĐIỂM VÀ BIỆN PHÁP QUẢN LÍ KHẢO NGHIỆM 175 6.1 Dữ liệu thời tiết khí hậu thời gian khảo nghiệm 175 6.1.1 Dữ liệu thời tiết khí hậu thời gian KNHC(tại Văn Giang) 175 6.1.2 Dữ liệu thời tiết khí hậu thời gian KNDR (tại địa điểm) 177 6.2 Quản lý khảo nghiệm (ảnh minh họa Phụ lục 3) 180 6.2.1 Quản lý khảo nghiệm KNHC 180 6.3 Quản lý rủi ro KNDR 182 6.3.1 Vật liệu hạt giống chuyển gene sử dụng khảo nghiệm 182 6.3.2 Quản lý cách ly 182 6.3.3 Thu hoạch quản lý đồng ruộng sau thu hoạch 183 6.3.4 Quản lý xử lý trường hợp phát tán ngẫu nhiên 183 6.3.5 Quản lý, ghi chép hồ sơ tư liệu 184 6.3.6 Tiêu hủy sản phẩm vật liệu di truyền biến đổi gen 185 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 193 7.1 Kết luận 193 7.2 Đề nghị 195 iii MỤC LỤC BẢNG Bảng 2-1: Các yếu tố di truyền có plasmid PHP8999 11 Bảng 2-2: So sánh hiệu ngô TC1507 ngô không chuyển gen 14 Bảng 2-3: Mức độ biểu protein Cry1F đo mô ngô TC1507 16 Bảng 2-4: Danh sách nước cho phép trồng và/hoặc sử dụng ngô TC1507 18 Bảng 3-1: Nghiên cứu phòng TN, nhà lưới, đồng ruộng nhằm tìm hiểu ảnh hưởng protein Cry1F NTOs 33 Bảng 4-1: Thời gian tiến hành KNHC 38 Bảng 4-2:Thời gian điều tra thành phần quần thể NTO ruộng KNHC 42 Bảng 4-3: Thời gian thu mẫu Collembola ruộng KNHC 46 Bảng 4-4: Tên giống công thức KNDR 51 Bảng 4-5: Thời gian gieo thu hoạch địa điểm KNDR 52 Bảng 4-6: Chỉ tiêu đánh giá đặc tính nông sinh học 54 Bảng 4-7: Thang điểm đánh giá mức độ gây hại số loại sâu hại 56 Bảng 4-8: Các loài động vật chân khớp theo dõi nghiên cứu NTOs 58 Bảng 4-9: Các đợt thu mẫu côn trùng GĐST ngô KNDR 59 Bảng 4-10: Các đợt thu mẫu Collembola GĐST ngô điểm KNDR 60 Bảng 4-1: Thời gian gieo thu hoạch 61 Bảng 5-1: Tổng số cá thể, số loài chân khớp bắt gặp giống ngô KNHC 64 Bảng 5-2: Chỉ số ưu số đa dạng loài chân khớp giống ngô KNHC 65 Bảng 5-3: Số loài chân khớp ghi nhận qua điều tra trực tiếp ngô KNHC 61 Bảng 5-4: Tần suất bắt gặp loài chân khớp qua điều tra trực tiếp ngô KNHC 62 Bảng 5-5: Số loài chân khớp vào bẫy dính vàng giống ngô KNHC 66 Bảng 5-6: Thành phần loài chân khớp vào bẫy dính vàng giống ngô KNHC 67 Bảng 5-7: Tần suất bắt gặp loài chân khớp qua điều tra trực tiếp bẫy dính vàng ruộng ngô KNHC (Văn Giang, 2010 - 2011) 71 Bảng 5-8: Mật độ bọ rùa đỏ Nhật Bản giống ngô (con/cây) KNHC 74 Bảng 5-9: Mật độ bọ xít mù xanh giống ngô (con/cây) KNHC 75 Bảng 5-10: Mật độ nhện lớn giống ngô (con/cây) KNHC 76 Bảng 5-11: Mật độ Bọ cứng cánh ngắn giống ngô (con/cây) KNHC 76 Bảng 5-12: Thành phần loài bọ đuôi bật (Collembola) đất trồng ngô KNHC 79 iv Bảng 5-13: So sánh số số định lượng bọ đuôi bật đất trồng ngô KNHC 81 Bảng 5-14: Đa dạng thành phần loài phân bố bọ đuôi bật (Collembola) lô thí nghiệm thu phương pháp pitfall trap KNHC 84 Bảng 5-15: So sánh số lượng loài, số cá thể bọ đuôi bật (Collembola) giống ngô khảo nghiệm theo đợt thu mẫu KNHC 87 Bảng 5-16: Giá trị số đa dạng H’ số đồng (J’) bọ đuôi bật (Collembola) giống ngô KNHC 89 Bảng 5-17: Các loài bọ đuôi bật (Collembola) phổ biến (%) đất trồng ngô KNHC 91 Bảng 5-18: Các loài bọ đuôi bật (Collembola) ưu (%) đất ngô KNHC 92 Bảng 5-19: Mức độ nhiễm bệnh đốm lớn giống ngô KNHC 93 Bảng 5-20: Mức độ nhiễm bệnh đốm nhỏ giống ngô KNHC 94 Bảng 5-21: Mức độ nhiễm bệnh rỉ sắt giống ngô KNHC 95 Bảng 5-22: Mức độ bị bệnh khô vằn giồng ngô KNHC 96 Bảng 5-23: Mức độ nhiễm bệnh đốm nâu giống ngô KNHC 97 Bảng 5-24: Cấp nhiễm trung bình rệp muội ngô giống ngô KNHC 98 Bảng 5-25: Cấp nhiễm trung bình nhện đỏ giống ngô KNHC 99 Bảng 5-26: Cấp nhiễm trung bình sâu cắn ngô giống ngô KNHC 100 Bảng 5-27: Tỷ lệ mọc sức sống giống ngô KNDR 106 Bảng 5-28: Một số đặc điểm hình thái giống ngô KNDR 107 Bảng 5-29: Trạng thái tỷ lệ đổ gẫy giống ngô KNDR 108 Bảng 5-30: Năng suất yếu tố cấu thành suất giống ngô KNDR 109 Bảng 5-31: Mức độ nhiễm bệnh Đốm lớn giống ngô điểm KN 111 Bảng 5-32: Mức độ nhiễm bệnh Khô vằn giống ngô điểm KN 112 Bảng 5-33: Mức độ bị hại số loại sâu giống ngô điểm KN 115 Bảng 5-34: Mức độ bị hại sâu xám, rệp muội ngô giống ngô điểm KN 116 Bảng 5-35: Số lượng loài chân khớp phân theo ghi nhận ruộng ngô KNDR địa điểm 118 Bảng 5-36: Thành phần loài chân khớp bắt gặp ruộng ngô KNDR địa điểm 120 Bảng 5-37: Thành phần, mức độ diện loài chân khớp điều tra điều tra trực tiếp giống ngô KNDR địa điểm(vụ Hè – Thu, 2011) 128 Bảng 5-38: Thành phần, mức độ diện loài chân khớp điều tra bẫy dính vàng giống ngô KNDR địa điểm (vụ Hè - Thu, 2011) 136 v Bảng 5-39: Thành phần, mức độ diện loài chân khớp điều tra trực tiếp bẫy dính vàng giống ngô KNDR địa điểm (vụ Hè - Thu, 2011) 143 Bảng 5-40: Chỉ số đa dạng số ưu loài chân khớp bắt gặp giống ngô KNDR địa điểm (vụ Hè -Thu, 2011) 150 Bảng 5-41: Chỉ số đa dạng loài sâu hại bắt gặp giống ngô KNDR địa điểm 152 Bảng 5-42: Chỉ số đa dạng loài bọ rùa bắt mồi ngô KNDR địa điểm 153 Bảng 5-43: Thành phần loài phân bố Collembola đất ngô KNDR địa điểm 160 Bảng 5-44: Số lượng loài, số cá thể Collembola giống ngô KNDR theo đợt thu mẫu địa điểm 170 Bảng 5-45: So sánh số số định lượng Collembola đất trồng ngô KNDR địa điểm (vụ Hè – Thu, 2011) 171 Bảng 5-46: Giá trị số đa dạng H’ số đồng J’ theo đợt điều tra đất trồng ngô KNDR địa điểm (vụ Hè – Thu, 2011) 172 Bảng 5-47: Tên loài Collembola phổ biến ưu đất trồng ngô KNDR địa điểm (vụ Hè –Thu, 2011) 175 Bảng 5-48: Các loài Collembola phổ biến, ưu đất ngô KNDR địa điểm 173 Bảng 6-1: Nhiệt độ, ẩm độ cường độ ánh sáng trung bình tháng KNHC ngô Văn Giang (2010 – 2011) 175 Bảng 6-2: Nhiệt độ trung bình tháng KNDR địa điểm (oC) 177 Bảng 6-3: Ẩm độ trung bình tháng khảo nghiệm địa điểm (%) 177 Bảng 6-4: Cây trồng vụ trước đất KNDR 179 Bảng 6-5: Phương pháp tiêu hủy vật liệu khu vực KNDR địa điểm KN 186 Bảng 6-6: Lịch trình đoàn thuộc quan quản lý tham gia kiểm tra giám sát 191 vi MỤC LỤC HÌNH Hình 2-1: Sơ đồ yếu tố di truyền đoạn DNA thẳng Pmei PHP8999A chuyển nạp qui trình tạo dòng ngô Event TC1507 10 Hình 2-2: Plasmid PHP8999 10 Hình 2-3: Mô hình hoạt động protein Cry gây độc côn trùng 13 Hình 2-4: Tình hình sử dụng ngô TC1507 giới 19 Hình 3-1: Diện tích trồng ngô khu vực trồng ngô Việt Nam 27 Hình 4-1: Sơ đồ bố trí KNHC vụ 40 Hình 4-2:Sơ đồ bố trí KNHC vụ 40 Hình 4-3: QuickStix™ Kit dùng phát nhanh protein Cry1F 41 Hình 4-4: Điểm lấy mẫu đánh giá mắt thường 43 Hình 4-5: Chỉ số bệnh hại 49 Hình 4-6: Sơ đồ KNDR 53 Hình 4-7: Các dụng cụ kiểm tra diện protein Cry1F CP4 EPSPS 53 Hình 4-8: Bẫy dính vàng đặt ruộng ngô 59 Hình 5-1: Kết kiểm tra diện protein Cry1F giống ngô 62 Hình 5-2: Trung bình tổng số loài bắt gặp kỳ điều tra ngô KNHC 64 Hình 5-3: Trung bình số loài chân khớp bắt gặp kỳ điều tra ngô KNHC 64 Hình 5-4: Giá trị số ưu Simpson's D giống ngô KNHC 66 Hình 5-5: Chỉ số đa dạng Shannon H' giống ngô KNHC 66 Hình 5-6: Kiểm tra protein Cry1F giống ngô KNDR 102 Hình 6-1: Độ ẩm, Nhiệt độ Cường độ ánh sáng trung bình tháng khảo nghiệm ngô Văn Giang 176 Hình 6-2: Nhiệt độ trung bình địa điểm KNDR 178 Hình 6-3: Ẩm độ trung bình tháng tai địa điểm KNDR 178 vii Chữ viết tắt sử dụng báo cáo BĐG Biến đổi gen CNSH Công nghệ Sinh học Đ/C Đối chứng ĐT Điều tra GCT Giống trồng GĐST Giai đoạn sinh trưởng HTX Hợp tác xã KN Khảo nghiệm KNDR Khảo nghiệm diện rộng KNHC Khảo nghiệm hạn chế KT Kiểm tra N/C Nghiên cứu NTO Sinh vật không chủ đích SX Sản xuất TG Thời gian TT Trung tâm VST Vùng sinh thái viii Bảng 6-5: Phương pháp tiêu hủy vật liệu khu vực KNDR địa điểm khảo nghiệm (vụ Hè – Thu, 2011) Lượng hạt tiêu hủy (tấn) Địa điểm khảo nghiệm Phương pháp tiêu hủy Trại Sản xuất Giống trồng Vũ Di, Vĩnh Phúc - Bắp: nghiền nhỏ, rắc ruộng - Cây: đốt với hạt, sau cày vùi, lấp - Các vật liệu khác: đốt 6,2 HTX Phong Thinh, huyện Thanh Chương, Nghệ An - Bắp: trộn với vôi bột, chôn - Cây :đốt - Các vật liệu khác: đốt - Bắp: nghiền nhỏ, chôn - Cây: đốt với hạt, sau cày vùi, lấp - Các vật liệu khác: đốt 5,3 Nông trường Thống Nhất, Krong Pak, Đắk Lắk TT Nghiên cứu thực nghiệm Nông nghiệp Hưng Lộc, Trảng Bom, Đồng Nai - Bắp: trộn với vôi bột, chôn - Cây :đốt - Các vật liệu khác: đốt 186 10,5 7,1 Bảng 6-6: Lịch trình đoàn thuộc quan quản lý tham gia kiểm tra giám sát khảo nghiệm TT Nội dung Thời gian Địa điểm Giám sát gieo hạt vụ 31/7/2010 Trạm Giám sát thu hoạch tiêu hủy vật liệu biến đổi gen 31/10/2010 Trạm Văn Giang Giám sát gieo hạt vụ 3/11/2010 Giám sát thu hoạch tiêu hủy vật liệu biến đổi gen 24/3/2011 Trạm Văn Giang Trạm Văn Giang Giám sát gieo hạt Vĩnh Phúc 7/5/2011 Vĩnh Phúc Giám sát gieo hạt Nghệ An 13/5/2011 Nghệ An Văn Giang Thành phần (tên cụ thể cán tham dự) Loại hình khảo nghiệm Ông: Nguyễn Văn Tuất - CT HĐATSH Bà: Kiều Anh - Cục BTĐDSH - Bộ TNMT Ông: Nguyễn Văn Cần - phòng TNMT huyện VG Ông: Nguyễn Văn Tuất- CT HĐATSH Ông: Lê Huy Hàm - PCT HĐATSH Bà: Kiều Anh - Cục BTĐDSH - Bộ TNMT Ông: Nguyễn Văn Cần - phòng TNMT huyện VG Ông Phạm Văn Toản - HĐATSH Bà: Kiều Anh - Cục BTĐDSH - Bộ TNMT Ông: Nguyễn Văn Cần - Phòng TNMT huyện VG Ông Nguyễn Văn Tuất - CT HĐATSH Bà: Kiều Anh - Cục BTĐDSH - Bộ TNMT Ông: Nguyễn Văn Cần - Phòng TNMT huyện VG Ông: Phạm Văn Toản - HĐATSH Ông: Nguyễn Hữu Khang -Vụ KHCN&MT Bộ NN&PTNT Bà: Kiều Anh - Cục BTĐDSH - Bộ TNMT Ông: Nguyễn Văn Dũng - PGĐ sở NN Vĩnh Phúc Bà Trần Bích Thủy - Sở Tài nguyên MT VP Ông: Phạm Văn Toản - HĐATSH Ông: Nguyễn Kim - Sở NN tỉnh Nghệ An Ông: Nguyễn Sơn - Sở TNMT Nghệ An Hạn chế, vụ 191 Hạn chế, vụ Diện rộng, vùng sinh Thái Thành phần (tên cụ thể cán tham dự) Nội dung Giám sát gieo hạt Đăk lăc Giám sát gieo hạt Đồng Nai Thời gian 17/5/2011 Địa điểm Đắk Lắk 20/5/2011 Đồng Nai Ông: Dương Hoa Xô - HĐATSH Ông: Trần Hoài Ân - Sở NN tỉnh Đồng Nai Ông: Mai Thanh Lâm - phòng TNMT huyện Trảng Bom Giám sát thu hoạch tiêu hủy vật liệu biến đổi gen Vĩnh Phúc 13/8/2011 Vĩnh Phúc 10 Giám sát thu hoạch tiêu hủy vật liệu biến đổi gen Nghệ An 22/8/2011 Nghệ An 11 Giám sát thu hoạch tiêu hủy vật liệu biến đổi gen Đắk Lắk 26/8/2011 Đắk Lắk 12 Giám sát thu hoạch tiêu hủy vật liệu biến đổi gen Đồng Nai 29/8/2011 Đồng Nai Ông: Nguyễn Hữu Khang -Vụ KHCN&MT, Bộ NN&PTNN Ông: Phạm Văn Toản - HĐATSH Bà: Kiều Anh - Cục BTĐDSH - Bộ TNMT Ông: Nguyễn Văn Dũng - PGĐ sở NN Vĩnh Phúc Bà: Trần Bích Thủy - Sở Tài nguyên MT VP Ông: Nguyễn Hữu Khang -Vụ KHCN&MT, Bộ NN&PTNN Ông: Nguyễn Kim - Sở NN tỉnh Nghệ An Ông: Nguyễn Sơn - Sở TNMT Nghệ An Ông: Phạm Văn Toản - HĐATSH Ông: Nguyễn Hữu Khang -Vụ KHCN&MT, Bộ NN&PTNN Bà: Nguyễn Thị Thanh Hương - Sở TNMT Đắk Lắk Ông: Nguyễn Hoàng Anh - Sở NN tỉnh Đắk Lắk Ông: Dương Hoa Xô - HĐATSH Ông: Phạm Văn Toản - HĐATSH Ông: Nguyễn Hữu Khang -Vụ KHCN&MT, Bộ NN&PTNN Ông: Trần Hoài Ân - Sở NN tỉnh Đồng Nai Ông: Mai Thanh Lâm - Phòng TNMT huyện Trảng Bom TT Bà: Nguyễn Thị Thanh Hương - Sở TNMT Đắk Lắk Ông: Nguyễn Hoàng Anh - Sở NN tỉnh Đắk Lắk 192 Loại hình khảo nghiệm KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 7.1 Kết luận Trên sở k ết khảo nghiệm ngô biến đổi gen event TC1507 khảo nghiệm hạn chế vụ liên tiếp Văn Giang - Hưng Yên, khảo nghiệm diện rộng ngô chuyển gen event TC1507 triển khai địa điểm khác nhau, đại diện vùng trồng ngô Việt Nam (Vĩnh Phúc, Nghệ An, Đắk Lắk Đồng Nai) Kết khảo nghiệm cho phép đưa kết luận sau: Toàn trình thực KNHC KNDR triển khai theo qui trình phê duyệt Hội đồng An toàn Sinh học – Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn Tuân thủ chặt chẽ đầy đủ qui định hành yêu cầu điều kiện khảo nghiệm địa điểm, thời gian, qui mô khảo nghiệm , đơn vị thực khảo nghiệm vv… Toàn trình thực KNHC KNDR tuyệt đối tuân thủ theo hướng dẫn Thông tư 69/2009/TT-BNNPTNT ngày 27/10/2009 Quy định khảo nghiệm đánh giá rủi ro đa dạng sinh học môi trường giống trồng biến đổi gen ; Nghị định số 69/2010/NĐ-CP ngày 21/6/2010 Về an toàn sinh học sinh vật biến đổi gen, mẫu vật di truyền sản phẩm sinh vật biến đổi gen; quy định hành khác có liên quan yêu cầu giám sát, quản lý rủi ro khảo ngh iệm giống trồng BĐG Việt Nam Các phương pháp, kĩ thuật thực KNHC KNDR đảm bảo tính khoa học, minh bạch, xác công bố, sử dụng rộng rãi Việt Nam và/hoặc giới Các số liệ u thu thập từ KNHC KNDR công bố báo cáo khách quan, trung thực, xác, minh bạch hoàn toàn đáng tin cậy Dựa ghi nhận số đa dạng quần thể sinh vật không chủ đích; số liệu thành phần, số lượng loài, phân bố mức độ phong phú bọ đuôi bật Collembola (trong đất lớp đất mặt); số liệu mật độ, đa dạng loài chân khớp đại diện cho nhóm côn trùng thị đóng vai trò quan 193 trọng chuỗi thức ăn (các loài sâu hại NTOs, loài bọ rùa ăn thịt vv…) kết luận ngô event TC1507 không gây ảnh hưởng bất lợi tới sinh vật không chủ đích điều kiện khảo nghiệm Việt Nam Không có nguy trôi/phát tán gen từ ngô TC1507 sang sinh vật khác Lí do: (1) Việt Nam loài ngô hoang để có ng uy xảy lai khác loài; (2) kết âm tính tất mẫu từ lô Đ/C (giống nền) tất vụ/vùng khảo nghiệm Trên sở tương đồng đặc tính nông sinh học, mức độ mẫn/kháng loại bệnh, sâu hại không chủ đích ngô giống ngô BĐG ngô đối ng KNHC KNDR Kết luận ngô event TC1507 nguy trở thành cỏ dại hay nguy lan tràn xâm lấn môi trường tự nhiên Việt Nam Ngô event TC1507 cấp phép sử dụng làm thực phẩm/thức ăn gia súc 16 nước; trồng thương mại nước; chứng minh an toàn môi trường nước khác giới (Bảng 2-4) Quá trình KNHC KNDR ạt i Việt Nam không ghi nhận dấu hiệu bất thường, hay khác biệt giống ngô BĐG ngô Đ/C Chứng tỏ ngô TC1507 không gây nguy trở thành dịch hại, không nguyên nhân ảnh hưởng tiêu cực môi trường hệ sinh thái Việt Nam 194 7.2 Đề nghị Từ kết khảo nghiệm hạn chế vụ liên tiếp khảo nghiệm diện rộng địa điểm đại diện vùng sinh thái trồng ngô Việt Nam để đánh giá rủi ro an toàn sinh học môi trường ngô chuyển gen event TC1507, không nhận thấy có rủi ro nguy ảnh hưởng bất lợi đến đa dạng sinh học trở thành cỏ dại hay dịch hại điều kiện canh tác Việt Nam Kính đề nghị Hội đồng An toàn Sinh học – Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn công nhận kết khảo nghiệm ngô chuyển gen event TC1507 an toàn với đa dạng sinh học môi trường sinh thái Việt Nam Hà nội, ngày tháng năm 2012 Xác nhận quan khảo nghiệm Xác nhận đơn vị đăng kí khảo nghiệm Phụ trách khảo nghiệm TS Phạm Thị Liên 195 TÀI LIỆU THAM KHẢO CHÍNH Tài liệu tham khảo tiếng Anh Ahmad, A., G.E Wilde, and K.Y Zhu 2005 Detectability of coleopteranspecific Cry3Bb1 protein in soil and its effect on nontarget surface and belowground arthropods Environ Entomol 34:385-394 Al-Deeb A Mohammad, G E Wilde, 2003 Effect of Bt corn expressing the Cryp3Bb1 toxin for corn rootworm control on aboveground nontarget arthropods Environ Entomol., 32: 1164-1170 Al-Deeb A Mohammad, G E Wilde, J M Blair, T C Todd 2003 Effect of Bt Corn for corn rootworm control on nontarget soil microarthropods and nematodes Environ Entomol., 32(4): 859-865 Al-Deeb M.A., Wilde G.E., Higgins R.H., 2001 No effect of Bacillus thuringiensis corn and Bacillus thuringiensis on the predator Orius insidiosus (Hemiptera: Anthocoridae) Environmental Entomology 30: 625-629 Babrikova T., Kuzmanova I., 1984 The toxicity of biological preparations based on Bacillus thuringiensis to some stages of Chrysopa septempunctata Wesm., Chrysopa formosa Br and Chrysopa perla L Gradinarska i Lozarska Nauka, 21: 55-59 Babrikova T., Kuzmanova I., Lai N.T., 1982 The effect of biological preparations of Bacillus thuringiensis on some stages of the lacewing Chrysopa carnea Steph Gradinarska i Lozarska Nauka, 19: 40-45 Bai Y Y., R H Yan, G Y Ye, F N Huang, J A Cheng 2010 Effects of transgenic rice expressing Bacillus thuringiensis Cry1Ab protein on grounddwelling Collembolan community in postharvest seasons Environmental Entomology, 39(1): 243-251 Bakonyi G., F Szira, I Kiss, I Villanyi, A Seres, A Szekacs 2006 Preference tests with collembolas on isogenic and Bt-maize European Journal of Soil Biology, 42: 132-135 Bitzer, R.J., M.E Rice, C.D Pilcher, C.L Pilcher, and W.-K.F Lam 2005 Biodiversity and community structure of epedaphic and euedaphic springtails (Collembola) in transgenic rootworm Bt corn Environ Entomol 34:13461376 10 Blair J.M., P J Bohlen; D W Freckman, 1996 Soil invertebrates as indicators of soil quality SSSA Special Publication No 49, Soil Science Society, Madison, WI: 283-301 196 11 12 13 Boyce L Richard, 2005 Life Under Your Feet: Measuring Soil Invertebrate Diversity, Teaching Issues and Experiments in Ecology, Vol 3: http://tiee.ecoed.net/vol/v3/experiments/soil/abstract.html Bravo A, Gill SS, Soberón M (2007) Mode of action of Bacillus thuringiensis Cry and Cyt toxins and their potential for insect control Toxicon 49: 423-435 Brookes G., P Barfoot, 2006 GM crops: The first ten years – Global socioeconomic and environmental impacts Brief No 36, ISAAA, Ithaca, NY 14 Candolfi M.P., Brown K., Grimm C., Reber B., Schmidli H., 2004 A faunistic approach to assess potential side-effects of genetically modified Bt-corn om non-target arthropods under field conditions Biocontrol Sci and Tech., 14(2): 129-170 15 CFIA (1994) The Biology of Zea mays (L.) (Maize) Canadian Food Inspection Agency, BIO1994-11 16 Colwell R., 2000 EstimateS: Statistical estimation of specÝe richness and shared species from samples Version In User's Guide and application published at: http://viceroy.eeb.uconn.edu/estimates 17 Cortet J., B S Griffiths, M Bohanec, D Demsar, M N Andersen, S Caul, A N E Birch, C Pernin, E Tabone, A de Vaufleury, X Ke, P H Krogh 2005 Impact of transgenic VIP3AxCry1Ab Lepidopteran-resistant field corn on the nontarget arthropod community Environmental Entomology, 34(5): 12671291 18 Cortet J., B S Griffiths, M Bohanec, D Demsar, M N Andersen, S Caul, A N E Birch, C Pernin, E Tabone, A de Vaufleury, X Ke, P H Krogh 2007 Evaluation of effects of transgenic Bt maize on microarthropods in a European multi-site experiment Pedobiologia, 51: 207-218 CRL, EU validation report (2005) Event-specific method for the quantitation of maize line TC1507 using real-time PCR Dale P J., B Clarke, E M G Fontes 2002 Potential for the environmental impact of transgenic crops Nature Biotechnology, 20: 567-574 De Maagd RA, Bravo A, Berry C, Crickmore N, Schnepf HE (2003) Structure, Diversity, and Evolution of Protein Toxins from Spore-Forming Entomopathogenic Bacteria Annual Review of Genetics 37: 409-433 Dively G and R Rose, 2002 Effects of Bt transgenic and conventional insecticide control strategies on the natural enemy community in sweet corn In: R Van Driesche (ed.), First International Symposium on Biological Control 19 20 21 22 197 23 24 of Arthropods U.S Department of Agriculture, Forest Service, Morgantown, WV.: 265-274 Dutton A., Klein H., Romeis J., Bigler F., 2002 Uptake of Bt-toxin by herbivors feeding on transgenic maize and consequences for the predator Chrysoperla carnea Ecological Entomology, 27:441-447 Dutton A., Romeis J., Bigler F., 2003 Assessing the risks of insect resistant transgenic plants on entomophagous arthropods: Bt-maize expressing Cry1A as a case study Biocontrol, 48: 611-636 25 Eckes P, Uijtewaal B, Donn G (1989) A synthetic gene confers resistance to the broad spectrum herbicide L-phosphinothricin in plants Journal of Cellular Bioechemistry Supplement 13D: 334, Abstract M516 26 Effect of transgenic brinjal expressing cry1Ac gene on soil microflora, collembola, nematodes, and earthworms, and assessment of Br protein in soil 2009 Maharashtra Hybrid Seeds Company Ltd 27 EFSA, 2005 Opinion of the Scientific Panel on Genetically Modified Organisms on a request from the Commission related to the notification (Reference C/ES/01/01) for the placing on the market of insect-tolerant genetically modified maize 1507, for import, feed and industrial processing and cultivation, under Part C of Directive 2001/18/EC from Pioneer Hi-Bred International/Mycogen Seeds The EFSA Journal 181, 1-33 28 EFSA, 2010 Minutes of the 61st plenary meeting of the Scientific Panel on Genetically Modified Organisms held on 20-21 October 2010 in Parma, Italy; request from the European Commission to review scientific studies related to the Testbiotech report on the cultivation of maize 1507, http://www.efsa.europa.eu/en/events/event/gmo101020-m.pdf 29 EPA, 2005 Biopesticides Registration Action Document Bacillus thuringiensis Cry1F Corn, http://www.epa.gov/opp00001/biopesticides/ingredients/tech_docs/brad_00648 1.pdf 30 31 Frampton G K., 1997 The potential of Collembola as indicators of pesticide usage; evidence and methods from the UK arable ecosystem Pedobiologia, 41: 179-184 Frouz J., D Elhottova, M Helingerova, F Kocourek 2008 Effect of bt-corn on soil invertebrates, soil microbial community and decomposition rates of corn post-harvest residues under field and laboratory conditions Journal of Sustainable Agriculture, 32(4): 645-655 198 32 33 34 35 36 37 38 39 Gormy C., Grum L., 1993 Methods in Soil Zoology PWN- Polish Scientife publisher, Warszawa, 518-620 Greenslade P., 1997 Are Collembola useful as indicators of the conservation value of native grasslands? Pedobiologia, 41: 215-220 Gisin H., 1960 Collembolenfauna Europas Museum D’histoire Naturelle Geneve: 1-300 Head G., J B Surber, J A Watson, J W Martin, J J Duan, 2002 No detection of Cryp1Ac protein in soil after multiple years of transgenic Bt cotton (Bollgard) use Environ Entomol., 31: 30-36 Heckmann L.H., B S Griffiths, S Caul, J Thompson, M Pusztai-Carey, W J Moar, M N Andersen, P H Krogh 2006 Consequences for Protaphorura armata (Collembola: Onychiuridae) following exposure to genetically modified Bacillus thuringiensis (Bt) maize and non-Bt maize Environmental Pollution, 142: 212-216 Hérouet C, Esdaile DJ, Mallyon BA, Debruyne E, Schulz A, Currier T, Hendrickx K, vander Klis R-J, Rouan D (2005) Safety evaluation of the phosphinothricin acetyltransferase proteins encoded by the pat and bar sequences that confer tolerance to glufosinate-ammonium herbicide in transgenic plants Regulatory Toxicology and Pharmacology 41: 134-149 Hilbeck A., Baumgartner M., Fried P.M., Bigler F., 1998 Effect of transgenic Bacillus thuringiensis corn-fed prey on mortality and development time of immature Chrysoperla carnea (Neuroptera: Chrysopidae) Environmental Entomology 27: 480-487 Hilbeck A., Moar W.J., Pusztai-Carey, Filippini A., Bigler F., 1999 Preymedialed effects of Cry1Ab toxin and protoxin and Cry2A protoxin on the predator Chrysoperla carnea Entomol.Exp Appl 91: 305-316 40 Honemann L., C Zurbrugg, W Nentwig 2008 Effects of Bt-corn decomposition on the composition of the soil meso- and macrofauna Applied Soil Ecology, 40(2): 203-209 41 Hopkins D W and E G Gregorich, 2003 Detection and decay of the Bt endotoxin in soil from a field trial with genetically modified maize Eur J Soil Sci., 54: 793-800 42 IBC No PION-19-1111 Application for Commercialization of Genetically Engineered Organisms and Products Thereof 43 James C., 2009 Global status of commercialized biotech/GM crops: 2009 Brief No 41, ISAAA, Ithaca, NY 199 44 45 46 Lee S.H., Park Y.H., Kim J.k., Park K.W., KIM Y.M., (2004) Qualitative PCR Method for Detection of Genetically Modified Maize Lines NK603 and TC1507 Agric Chem Biotechnol 47(4), 185-188 Mertens J., L Beladjal, F Janssens, P Matthys 2007 Pitfall trapping in flooding habitats: a new technique reveals Archisotoma pulchella (Collembola: Isotomidae) as new to the Belgian fauna Belg J Zool., 137(2): 177-181 Naranjo S E 2009 Impacts of Bt crops on non-target invertebrates and insecticide use patterns http://www.cababstractsplus.org/cabreviews 47 Naranjo S E., G Head, G P Dively 2005 Field studies assessing arthropod nontarget effects in Bt transgenic crops Environmental Entomology, 34(5): 1178-1180 48 O’Callaghan M., T R Glare, E P J Burgess, L A Malone 2005 Effects of plants genetically modified for insect resistance on nontarget organisms Annu Rev Entomol., 50: 271-292 Odum E.P., 1971 Fundamentals of ecology Third edition, W.B Saunders Company Philadelphia, London, Toronto 49 50 OECD (1999a) Consensus document on general information concerning the genes and their enzymes that confer tolerance to phosphinothricin herbicide Organisation for Economic Co-operation and Development, ENV/JM/MONO(99)13 51 OECD (2002a) Series on Harmonisation of Regulatory Oversight in Biotechnology, No 25 Module II: Phosphinothricin Organisation for Economic Co-operation and Development, ENV/JM/MONO(2002)14 52 OECD, 2007 Consensus Document on the biology of Zea mays subsp Mays (maize) Series on Harmonisation of Regulatory Oversight in Biotechnology (ENV/JM/MONO(2007)14), No 42: 1-10, http://www.oecd.org/dataoecd/36/61/46815888.pdf 53 Orr D.B., Landis D.A., 1997 Oviposition of european corn born borer (Lepidoptera: Pyralidae) and impact of natural enemy populations in transgenic versus isogenic corn Jour Of Economic Entomology, 90: 905-909 54 Palm C J., K K Donegan and R J Sieddler, 1996 Persistence in soil of transgenic plant produced Bacillus thuringensis var kurstaki δ-endotoxin Can J Microbiol., 42: 1258-1262 200 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 Pilcher C D., M E Rice, J J Obrycki 2005 Impact of transgenic Bacillus thuringiensis corn and crop phenology on five nontarget arthropods Environmental Entomology, 34(5): 1302-1316 Powell R Jeff, D J Levy-Booth, R H Gulden, W L Asbil, R G Campbell, K E Dunfield, A S Hamill, M M Hart, S Lerat, R E Nurse, K P Pauls, P H Sikkema, C J Swanton, J T Trevors, J N Klironomos 2009 Effects of genetically modified, herbicide-tolerant crops and their management on soil food web properties and crop litter decomposition Journal of Applied Ecology, 46: 388-396 Priestley AL., Brownbridge M 2009 Field trials to evaluate effects of Bttransgenic silage corn expressing the Cry1Ab insecticidal toxin on non-target soil arthropods in northern New England, USA Transgenic Res., 18(3): 425443 Prieto-Samsónov DL, Vázquez-Padrón RI, Ayra-Pardo C, González-Cabrera J, de la Riva GA (1997) Bacillus thuringiensis: from biodiversity to biotechnology Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology 19: 202219 Romeis J., M Battini, F Bigler 2003 Transgenic wheat with enhanced fungal resistance causes no effects on Folsomia candida (Collembola: Isotomidae) Pedobiologia, 47(2): 141-147 Rosel R., G P Dively 2007 Effects of insecticide- treated and Lepidopteranactive Bt transgenic sweet corn on the abundance and diversity of arthropods Environmental Entomology, 36(5): 1254-1268 Saxena D and G Stotzky, 2000 Insecticidal toxin from Bacillus thuringensis is released from roots of transgenic Bt corn in vitro and in situ FEMS Microbiol Ecol., 33: 35-39 Saxena D., S Flores and G Stotzky, 1999 Insecticidal toxin in root exudates from Bt corn Nature (Lond.): 402-480 Sayaboc A S.,R S Raros and L C Raros,1975 The abundance of predatory and saprophagous acarines associated with decomposing rice stubble with a consideration of the effects of insecticide residues Philippine Entomologisst, 2: 375-383 Siegel JP (2001) The Mammalian Safety of Bacillus thuringiensis- Based Insecticides Journal of Invertebrate Pathology 77: 13-21 Sims S R and Holden L R., 1996 Insect bioassay for determining soil degradation of Bacillus thuringensis subsp kurstaki Cry1a(b) protein in corn tissue Environ Entomol., 25: 659-664 201 66 Sims S R and J W Martin, 1997 Effect of Bacillus thuringensis insecticidal proteins Cryp1Ab, Cry1Ac, Cry2A and Cry3a on Folsomia candida and Xenylla grisea (Insecta: Collembola), Pedobiologia, 41: 412-416 67 Stach J., 1965 On some Collembola of north Vietnam Acta Zoo Cracoviensia, T.X No 4: 345-372 Sterzynska Maria, 1990 Fragmenta faunistica, Tom 34(11), Warszawska Drukarnia Naukowa: 262p Straalen Nico M van, 2002 Assessment of soil contamination – a functional perspective Biogdegradation, 13: 41-52 Tapp H and G Stotzky, 1998 Persistence of the insecticidal toxin from Bacillus thuringensis subsp Kurstaki in soil Soil Biol Biochem., 30: 471-476 Wandeler H., Bahylova J Nebtwig W., 2002 Comsumption of two Bt and six non-Bt corn varieties by the woodlouse Porcellio scaber Basic Applied Ecology, 3:357-365 Yu L., Berry RE, Croft BA, 1997 Effects of Bacillus thuringensis toxins in transgenic cotton and potato on Folsomia candida (Collembola: Isotomidae) and Oppia nitens (Acari: Oribatidae) J Econ Entomol., 90: 113-118 Zimmer M., Topp W., 2000 Species-specific ultilization of food sources by sympatric woodlice (Isopoda: Oniscidea) Journal of Animal Ecology, 69: 1071-1082 68 69 70 71 72 73 202 Tài liệu tham khảo tiếng Việt Dương Thị Thanh, Nguyễn Trí Tiến, Nguyễn Thị Thu Anh, 2010 Khu hệ Collembola (Insecta) số đô thị vùng đồng sông Hồng Tạp chí Công nghệ sinh học 8(3A): 1021-1030 Nguyễn Thị Thu Anh, Nguyễn Trí Tiến, 2000 Nghiên cứu ảnh hưởng phân hữu vi sinh đến nhóm bọ nhảy (Insecta: Collembola) đất chuyên canh rau xã Gia Xuyên, huyện Gia Lộc, Hải Dương Kỷ yếu HNCTH TQ lần thứ Nxb Nông nghiệp, Hà Nội: 447-454 Nguyễn Thị Thu Anh, Nguyễn Trí Tiến, 2009 Nghiên cứu bọ nhảy (Collembola) đất ô nhiễm chì Văn Lâm, Hưng Yên Kỷ yếu HNKHTQ lần thứ Sinh thái Tài nguyên sinh vật Nxb Nông nghiệp, Hà Nội: 11681173 Nguyễn Thị Thu Anh, Nguyễn Trí Tiến, Lê Thị Hoa, 2008 Ảnh hưởng hiệu lực bón kali khác đến số định lượng Collembola đất trồng màu huyện Gia Lâm, Hà Nội Kỷ yếu HNCTH TQ lần thứ Nxb Nông nghiệp, Hà Nội: 440-446 Nguyễn Thị Thu Anh, Nguyễn Trí Tiến, Mai Phú Quý, Lê Quốc Doanh, 2005 Đặc điểm cư trú bọ nhảy (Collembola) hệ sinh thái nông nghiệp đất dốc miền núi phía Bắc Việt Nam Hội nghị môi trường toàn quốc lần thứ Nxb Nông nghiệp, Hà Nội: 279-284 Nguyễn Thị Thu Anh, Nguyễn Trí Tiến, Phan Thị Thu Hiền, 2008 Nghiên cứu ảnh hưởng số liều lượng bón phân lân đến động vật chân khớp bé ruộng trồng lạc huyện Gia Lâm, Hà Nội Kỷ yếu HNCTH TQ lần thứ Nxb Nông nghiệp, Hà Nội: 432-439 Nguyễn Trí Tiến, Nguyễn Thị Bích Ngọc, Thái Trần Bái, 2009 Khu hệ bọ nhảy (Insecta: Collembola) khu bảo tồn thiên nhiên Thượng Tiến, huyện Kim Bôi, tỉnh Hòa Bình Kỷ yếu HNKHTQ lần thứ Sinh thái Tài nguyên sinh vật Nxb Nông nghiệp, Hà Nội: 847-852 Nguyễn Trí Tiến, Nguyễn Thị Định, Nguyễn Thị Thu Anh, Nhữ Thị Hoài, 2009 Nghiên cứu ảnh hưởng phân hữu kỹ thuật vùi phụ phẩm nông nghiệp đất trồng mía đến Collembola (Insecta) nông trường Hà Trung, Thanh Hóa Kỷ yếu HNKHTQ lần thứ Sinh thái Tài nguyên sinh vật Nxb Nông nghiệp, Hà Nội: 1705-1710 Nguyễn Trí Tiến, Nguyễn Văn Quảng, Lê Thị Quyên, 2008 Khu hệ Collembola vườn quốc gia Xuân Sơn Kỷ yếu HNTQ 2007, nghiên cứu khoa học sống Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội: 195-198 203 10 11 12 13 Phạm Văn Lầm, 2002 Tài nguyên thiên địch sâu hại: nghiên cứu ứng dụng Quyển I Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, 7-57 Phạm Văn Lầm, 2006 Nhện lớn bắt mồi đồng lúa Việt Nam Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Phạm Văn Lầm, Bùi Hải Sơn, Trần Thị Hường, 1993 Nhận xét bước đầu bước đầu diễn biến số lượng số loài ăn thịt rầy nâu Tạp chí Bảo vệ thực vật, 2: 30-34 Phạm Văn Lầm, Nguyễn Kim Hoa, Trương Thị Lan, 2003 Nhện lớn bắt mồi ruộng lúa yếu tố ảnh hưởng đến số lượng chúng Những vấn đề nghiên cứu khoa học sống Báo cáo Khoa học Hội nghị toàn quốc lần thứ hai, Huế 25-26/7/2003 Nxb Khoa học Kĩ thuật, Hà Néộ, 646 649 204