BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HÀ NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC CHỐNG VIÊM GIẢM ĐAU TRỘN LẪN TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƯỢC BẰNG SẮC KÝ LỚP MỎNG HIỆU NĂNG CAO VÀ SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Hà Nội - 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HÀ NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC CHỐNG VIÊM GIẢM ĐAU TRỘN LẪN TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƯỢC BẰNG SẮC KÝ LỚP MỎNG HIỆU NĂNG CAO VÀ SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC – ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 60720410 Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh TS.ThS Đào Thị Cẩm Minh Hà Nội - 2016 LỜI CẢM ƠN Lời tơi xin bày tỏ lịng cám ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh, người hướng dẫn bảo tơi tận tình suốt q trình nghiên cứu, hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn NCS.Ths Đào Thị Cẩm Minh – giảng viên khoa Dược trường đại học Y - Dược Huế, người động viên, giúp đỡ q trình thực luận văn Tơi xin gửi lời cám ơn đến Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau đại học, Bộ mơn Hóa Phân tích – Độc chất, Viện Công nghệ dược phẩm quốc gia tạo điều kiện cho tơi q trình học tập làm luận văn Cuối xin dành lời cám ơn đến gia đình, bạn bè, đồng nghiệp ln khích lệ, tạo động lực cho tơi q trình học tập nghiên cứu vừa qua Hà Nội, tháng năm 2016 Học viên Nguyễn Thị Hà MỤC LỤC Trang ĐẶT VẤN ĐỀ……………………………………………………………… CHƯƠNG TỔNG QUAN………………………………………………3 1.1 Tổng quan tình hình chất lượng sử dụng chế phẩm đơng dược, thuốc có nguồn gốc từ thảo dược nước giới 1.1.1 Trên giới 1.1.2 Tại Việt Nam 1.2 Tổng quan đối tượng nghiên cứu 1.2.1 Cấu trúc, tính chất lý hóa paracetamol, diclofenac 1.2.2 Tác dụng tác dụng không mong muốn thuốc thuộc nhóm chống viêm khơng steriod 1.3 Tổng quan phương pháp nghiên cứu 1.3.1 Sắc kí lớp mỏng 1.3.2 Sắc kí lớp mỏng hiệu cao 10 1.3.3 Sắc kí lỏng hiệu cao 11 1.4 Một số nghiên cứu định tính, định lượng nhóm thuốc chống viêm khơng steroid 15 1.5 Một số quy trình xử lý mẫu thuốc tân dược dạng viên nén, viên nang chiết từ thuốc đông dược 18 CHƯƠNG 2.1 ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU……… 19 Nguyên vật liệu, thiết bị đối tượng nghiên cứu 19 2.1.1 Nguyên vật liệu dùng nghiên cứu 19 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 20 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 20 2.2 Phương pháp nghiên cứu 21 2.2.1 Phương pháp HPTLC 21 2.2.2 Phương pháp HPLC 23 2.2.3 2.3 Ứng dụng phân tích mẫu chế phẩm đơng dược thị trường 24 Phương pháp xử lí số liệu 24 CHƯƠNG 3.1 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ…………………………25 Xây dựng thẩm định phương pháp HPTLC 25 3.1.1 Khảo sát lựa chọn điều kiện HPTLC 25 3.1.2 Khảo sát điều kiện xử lí mẫu HPTLC 30 3.1.3 Thẩm định phương pháp HPTLC 34 3.2 Xây dựng phương pháp HPLC 44 3.2.1 Khảo sát điều kiện sắc kí 44 3.2.2 Thẩm định quy trình 46 3.3 Ứng dụng phương pháp HPTLC HPLC để phân tích mẫu chế phẩm thuốc đơng dược thị trường 49 3.3.1 Kết phân tích mẫu phương pháp HPTLC 49 3.3.2 Kết phân tích mẫu phương pháp HPLC 52 CHƯƠNG 4.1 BÀN LUẬN………………………………………………55 Xây dựng quy trình kĩ thuật 55 4.1.1 Lựa chọn phương pháp phân tích 55 4.1.2 Lựa chọn xử lí mẫu 55 4.2 Xây dựng phương pháp định lượng 56 4.2.1 Xây dựng phương pháp định lượng HPTLC 56 4.2.2 Xây dựng phương pháp định lượng HPLC 57 4.3 Thẩm định phương pháp 58 4.4 Ứng dụng phương pháp HPTLC HPLC để phân tích mẫu chế phẩm thuốc đông dược thị trường 59 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ACN Acetonitril CTAB Cetyltrimethyl amoni bromid HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) HPTLC Sắc kí lớp mỏng hiệu cao (High Performance Thin Layer Chromatography) MeOH Methanol NSAIDs Nonsteroidal Anti-inflammatory Drugs ( thuốc chống viêm khơng steroid) A Diện tích pic TFA Acid trifloracetic TB Trung bình RSD Độ lệch chuẩn tương đối (Relative Standard Deviation) LOD Giới hạn phát (Limit of detection) LOQ Giới hạn định lượng (Limit of quantitation) AOAC Hiệp hội nhà hóa học phân tích thức (Association of Official Analytical Chemists) COX Cyclooxygenase DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 3.1 Kết khảo sát dung môi chiết paracetamol, diclofenac natri mẫu chế phẩm đông dược theo dung môi chiết 31 Bảng 3.2 Kết đánh giá độ thích hợp hệ thống phương pháp HPTLC 37 Bảng 3.3 Kết đánh giá độ tuyến tính paracetamol, diclofenac natri 39 Bảng 3.4 Kết xác định LOD paracetamol, diclofenac natri 42 Bảng 3.5 Kết đánh giá độ lặp lại, độ thu hồi paracetamol 43 Bảng 3.6 Kết đánh giá độ lặp lại, độ thu hồi diclofenac natri 44 Bảng 3.7 Kết phân tích giới hạn phát paracetamol, diclofenac natri 48 Bảng 3.8 Kết phân tích mẫu chế phẩm phương pháp HPLC 54 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 3.1 Kết khảo sát pha động sắc kí lớp mỏng hệ (cloroform : methanol : amoniac 25% (18 :15 :5) 25 Hình 3.2 Kết khảo sát pha động sắc kí lớp mỏng hệ (Toluen : npropanol : acid formic (5 : : 1)) 26 Hình 3.3 Kết khảo sát pha động sắc kí lớp mỏng hệ 26 Hình 3.4 Kết khảo sát pha động sắc kí lớp mỏng hệ 27 Hình 3.5 Kết khảo sát thành phần tỉ lệ pha động HPTLC 29 Hình 3.6 Kết khảo sát lựa chọn dung mơi chiết 32 Hình 3.7 Sơ đồ xử lí mẫu phân tích 33 Hình 3.8 Sắc kí đồ đánh giá độ chọn lọc HPTLC 34 Hình 3.9 Sắc kí đồ xác định tính chọn lọc phương pháp HPTLC với paracetamol 35 Hình 3.10 Sắc kí đồ xác định tính chọn lọc phương pháp HPTLC với diclofenac natri 36 Hình 3.11 Sắc kí đồ 3D khoảng tuyến tính 38 Hình 3.12 Đường biểu diễn mối tương quan nồng độ diện tích pic paracetamol (phương pháp HPTLC) 39 Hình 3.13 Đường biểu diễn mối tương quan nồng độ diện tích pic paracetamol (phương pháp HPTLC) 40 Hình 3.14 Sắc kí đồ LOD paracetamol mẫu 41 Hình 3.15 Sắc kí đồ analog xác định LOD paracetamol HC06 41 Hình 3.16 Sắc kí đồ xác định LOD diclofenac natri mẫu 41 Hình 3.17 Sắc kí đồ analog xác định LOD diclofenac natri HC0642 Hình 3.18 Sắc kí đồ đánh giá độ chọn lọc paracetamol, diclofenac natri 47 Hình 3.19 Sắc kí đồ kết mẫu chế phẩm đông dược thị trường HPTLC 50 Hình 3.20 Sắc kí đồ kết phân tích mẫu VN07, HC03, HC08 (phương pháp HPLC) 52 Hình 3.21 Hình ảnh chồng phổ chuẩn paracetamol mẫu thử HC03, HC08 53 ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay, tác dụng bất lợi sử dụng thuốc hóa dược, người có xu hướng quay tìm kiếm thuốc có nguồn gốc tự nhiên Do đó, thuốc đơng dược, thực phẩm chức có nguồn gốc tự nhiên mục tiêu mà nhà sản xuất người tiêu dùng nước giới quan tâm Thuốc đông dược, thực phẩm chức thuốc theo đơn lương y sử dụng để bổ trợ điều trị bệnh thần kinh-cơ, bệnh tiêu hóa-gan mật, hơ hấp, tiết niệu, tim mạch, ngồi cịn có tác dụng điều kinh, bổ dưỡng, bổ sung vitamin, khoáng chất Tuy nhiên, năm gần hệ thống Kiểm nghiệm quan công an, quản lý thị trường tra phát nhiều thuốc đơng dược, thực phẩm chức có nguồn gốc từ dược liệu trộn trái phép thuốc tân dược (thành phần có hoạt chất tân dược khơng cơng bố nhãn) Các tân dược trộn lẫn gồm nhiều nhóm hợp chất khác nhau, nhóm sử dụng nhiều nhóm thuốc glucocorticoid [9]; thuốc chống viêm không steroid (Nonsteroidal anti-inflammatory drugs: NSAIDs)[6][13]; thuốc hạ glucose máu [20], [31]; thuốc hạ huyết áp [16]; thuốc giảm béo [21]; thuốc ức chế phosphodiestarase-5 [8] Những tác hại thuốc đơng dược có trộn tân dược gây là: loét dày, gây xốp xương, phù, tăng huyết áp, rậm lơng (nếu thuốc có hoạt chất chống viêm corticoid), loét đường tiêu hoá, xuất huyết, dị ứng (thuốc có hoạt chất chống viêm khơng steroid), suy gan (thuốc có paracetamol) Hiện có số nghiên cứu phát thuốc tân dược trộn lẫn thuốc đông dược, thực phẩm chức triển khai sắc ký lớp mỏng [32]; sắc ký lỏng hiệu cao [7], [9]; sắc ký lỏng khối phổ [13]; Trong đó, phương pháp sắc kí lớp mỏng sử dụng để phát nhanh định lượng thuốc tân dược trộn đơng dược [19], cịn phương - Bước sóng phát hiện: 254nm Theo nghiên cứu [13], Akash.A Savaliya triển khai chương trình HPLC định lượng 25 hoạt chất có paracetamol diclofenac sử dụng pha động methanol : đệm amoni acetat theo gradient nồng độ, thể tích tiêm mẫu 10µl, tốc độ dịng 1ml/ phút Chúng thay đệm amoni acetat đệm phosphat PH 2,5; tốc độ dịng nhau, thể tích tiêm 20 µl, nhiều nghiên cứu paracetamol diclofenac natri dược liệu tách tốt Theo nghiên cứu [23], Kenichi Kumasaka tiến hành phát đồng thời paracetamol, indomethacin, diclofenac, ketoprofen, ibuprofen, aspirin Trong huyết tương người HPLC với hệ pha động methanol: dung dịch đệm phosphat pH 4,0 Chúng tiến hành pha động pic paracetamol diclofenac không gọn, bị chẻ đầu Do chúng tơi sử dụng đệm phosphat pH 2,5 chạy theo chương trình gradient để có hình dạng pic đẹp, tách tốt 4.3 Thẩm định phương pháp  Khoảng nồng độ tuyến tính Khoảng tuyến tính đủ rộng để ứng dụng phát chất phân tích chế phẩm đơng dược Với paracetamol, khoảng nồng độ tuyến tính 5004000µg/ml, hệ số hồi quy phương pháp HPTLC có r = 0,9983 Với diclofenac natri, khoảng nồng độ tuyến tính 500-4000µg/ml, hệ số hồi quy phương pháp HPTLC có r = 0,9971 Điều cho thấy có tương quan chặt chẽ diện tích pic với nồng độ chất phân tích Trong nghiên cứu Wisnuwardhani [32] tiến hành tối ưu hóa phương pháp TLC 05 chất paracetamol, dexamethason, prednisolon, acid mefenamic piroxicam thực pha tĩnh silicagel GF254 Dung dịch chuẩn có nồng độ từ 0,04-0,24mg/ml (40-240µg/ml) Nồng độ chuẩn 58 nghiên cứu nằm khoảng 500-4000 µg/ml, cao so với nghiên cứu [32] Theo thực nghiệm, khoảng nồng độ đáp ứng yêu cầu phát mẫu dương tính có nồng độ paracetamol nằm khoảng nồng độ xây dựng  Giới hạn phát giới hạn định lượng Giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp HPTLC chất phân tích cao LOD paracetamol 50µg/ml diclofenac natri 100µg/ml Giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp HPLC chất phân tích nhỏ nhiều so với phương pháp HPTLC LOD paracetamol khoảng 0,08µg/ml diclofenac natri khoảng 0,235µg/ml Vì vậy, phương pháp HPLC phát 2/7 mẫu thử có chứa Paracetamol, chứng tỏ độ nhạy phương pháp cao hẳn  Độ lặp lại phương pháp HPTLC Độ lặp lại phương pháp paracetamol diclofenac Na có RSD% < 5,3, đạt yêu cầu theo AOAC Điều cho thấy phương pháp phù hợp để phân tích chất chế phẩm đông dược  Độ thu hồi phương pháp HPTLC đạt từ 90-107% với hàm lượng hoạt chất nằm khoảng 0,01-0,1%, đạt yêu cầu AOAC 4.4 Ứng dụng phương pháp HPTLC HPLC để phân tích mẫu chế phẩm thuốc đơng dược thị trường Ứng dụng phương pháp HPTLC 29 mẫu chế phẩm đơng dược thị trường có 28 mẫu chế phẩm không phát paracetamol, diclofenac trộn lẫn chế phẩm 01 mẫu (HC08) phát có trộn lẫn paracetamol với hàm lượng 2,509 mg/ viên 59 Tuy nhiên, HPLC thực 05 mẫu nghi ngờ 01 mẫu dương tính, kết có 04 mẫu âm tính với chất phân tích, 01 mẫu dương tính với paracetamol tương tự HPTLC, 01 mẫu dương tính với paracetamol phân tích HPLC (âm tính phân tích HPTLC) Hàm lượng paracetamol phát HC03, HC08 phân tích HPLC 1,84mg/viên; 3,5mg/ viên Từ kết cho thấy hàm lượng paracetamol tìm mẫu HC08 HPLC cao so với HPTLC (2,509mg/viên) Phương pháp HPTLC không phát paracetamol mẫu HC03 Từ kết cho thấy HPTLC có độ nhạy so với HPLC nên ứng dụng để phát sàng lọc ứng dụng định lượng cho kết tương đối Nên kết hợp thêm phương pháp có độ nhạy cao để khẳng định lại kết Nguyên nhân HPTLC có độ nhạy thể tích chấm HPTLC nhỏ nhiều so với HPLC, khắc phục cách tăng thể tích chấm mẫu HPTLC để tăng độ nhạy Nồng độ paracetamol phát phương pháp HPTLC thấp so với phương pháp HPLC kỹ thuật bào chế chế phẩm viên hoàn cứng cịn nên mẫu khơng đồng 60 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Từ kết thực nghiệm thu được, chúng tơi có kết luận sau:  Đã xây dựng thẩm định phương pháp định tính, định lượng paracetamol, diclofenac natri trộn lẫn chế phẩm đông dược dạng rắn sắc ký lớp mỏng hiệu cao, cụ thể là: - Xử lí mẫu: Nghiền mẫu thành bột mịn, cân xác khoảng 0,50g bột, thêm 10ml ethanol, lắc xoáy, siêu âm 20 phút, ly tâm 6000 vòng 20 phút, gạn dịch đem lấy cắn, hịa cắn methanol, tiến hành sắc kí - Điều kiện HPTLC: mỏng silicagel F254 (20×10cm), pha động n-hexan : ethyl acetat : acid acetic (6 :2,5 :1,5), thể tích chấm: 1µl, phát 254nm So sánh vị trí, màu sắc vết tương ứng sắc kí đồ mẫu thử chuẩn để xác định có mặt paracetamol/diclofenac natri Dựa vào diện tích pic ứng với vết chất phân tích sắc kí đồ mẫu thử mẫu chuẩn, nồng độ chất phân tích mẫu chuẩn, lượng cân độ pha lỗng mẫu thử tính hàm lượng chất phân tích mẫu thử Phương pháp HPTLC xây dựng được thẩm định tiêu chí độ chọn lọc, khoảng nồng độ tuyến tính, LOD, LOQ, độ đúng, độ lặp lại đáp ứng yêu cầu AOAC  Đã lựa chọn điều kiện phân tích paracetamol, diclofenac natri trộn lẫn chế phẩm đông dược HPLC Kết thẩm định cho thấy phương pháp có độ chọn lọc đảm bảo, độ nhạy cao (LOD paracetamol natri diclofenac 0,08µg/ml 0,235µg/ml) 61  Ứng dụng phương pháp HPTLC phân tích nhanh 29 mẫu chế phẩm đơng dược lưu hành thị trường, phát thấy 01 mẫu thuốc dạng viên hồn cứng có paracetamol với hàm lượng 2,509 mg/viên Kết tương đồng phân tích HPLC 6/7 mẫu Tuy nhiên 1/7 mẫu khơng phát thấy có paracetamol phân tích HPTLC lại cho kết dương tính phân tích HPLC với hàm lượng thấp 1,84mg/viên Kết HPTLC có độ nhạy khơng cao HPLC KIẾN NGHỊ Phát triển phương pháp HPTLC mẫu khác chế phẩm đông dược (dạng dung dịch, nang mềm) mở rộng đối tượng nghiên cứu chống viêm giảm đau khác Ứng dụng phương pháp xây dựng xác định paracetamol diclofenac natri trộn lẫn chế phẩm đông dược nhiều mẫu thử khác nhau, góp phần kiểm sốt chất lượng chế phẩm đông dược lưu hành thị trường 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Trần Tử An, (2010), Kiểm nghiệm dược phẩm, Nhà xuất Y học, Hà Nội Bộ mơn Hóa Dược, trường Đại học Dược Hà Nội, (2004), Hóa Dược tập tập 2, Trung tâm thông tin-thư viện Đại học Dược Hà Nội Bộ Y tế (2010), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất Y học, Hà Nội Bộ Y tế (2007), Dược thư quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội PGS.TS Võ Thị Bạch Huệ - TS Vĩnh Định (2008), Hóa phân tích 2, Nhà xuất Y học, Hà Nội Cao Cơng Khánh, Nguyễn Tường Vy, Hồng Quỳnh Trang, (2013), “Nghiên cứu quy trình xác định đồng thời sibutramin, furosemid, dexamethson piroxicam thực phẩm chức kỹ thuật HPLC”, Tạp chí Dược học, số 445, tr.40-44 Phan Thanh Mậu, (2011), “Nghiên cứu định tính định lượng Sildenafil trộn trái phép thực phẩm chức LC-MS, HPLC”, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, trường Đại học Dược Hà Nội Lê Thị Quỳnh Nga, (2011), “Xây dựng phương pháp phân tích phát số chất ức chế men phosphodiesterase-5 trộn trái phép thuốc đông dược thực phẩm chức năng”, Luận văn thạc sĩ dược học, trường Đại học Dược Hà Nội Trịnh Thị Quy, (2012), “Nghiên cứu phát số Glucocorticoid trộn trái phép chế phẩm đông dược phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao”, Luận văn thạc sĩ dược học, trường Đại học Dược Hà Nội 10 Trần Cao Sơn, (2010), “Thẩm định phương pháp phân tích hóa học vi sinh vật”, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 11 Viện kiểm nghiệm thuốc TW, (2013),”Báo cáo tổng kết công tác kiểm tra, giám sát chất lượng thuốc mỹ phẩm năm 2013 kế hoạch công tác năm 2014”, Hà Nội Tiếng Anh 12 Ali Mohammad, Sudhanshu Sharma, Showkat Ahmad Bhawani, (2009), “Resersed phase thin layer chromatography of five coadministered drugs with surfactant modified solvent systems’’ Indian journal of chemical technology vol 16, pp 344-350 13 Akash.A Savaliya, B Prasad, D K Raijada, S Singh, (2009), “Detection and characterization of synthetic steroidal and non-steroidal anti-inflammotory drugs in Indian ayurvedic/herbal products using LCMS/TOF”, Drug teststing and Analysis, pp 372-375 14 Aik J Lau, M J Holmes, S O Woo, H L Koh, (2003), “Analysis of adulterants in a traditional herbal medicinal product using liquid chromatography- mass spectrometry- mass spectrometry”, J Pharm Biomed Anal, 31 (2), pp 401-405 15 E Ernst, (2002), “Adulteration of Chinese herbal medicines with synthetic drugs”, Journal of Internal Medicine, 252: 107-113 16 Gao Quing, Zhang Zhe, Dai Hong, Che Bao-quan, Guo Hong-Zhu, (2007), “Detection of antihypertensive agents illegally added in traditional chinese medicine and herbal products by LC-MS/MS”, Chinese journal of Pharmaceuticals 05 17 H M Ramsay, W Goddard, S Gill, C Moss, (2003), “Herbal creams used for atopic eczema in Birminghan, U.K Illegally contain potent corticosteroids”, Arch Dis Child 88(12), pp.1056-1061 18 Jamshed Haneef, Mohammad Shaharyar, Asif Husain, Mohd Rashi, Ravinesh Mishra, Nadeem A Siddique, Manoj Pa, (2013), “Analytical methods for the detection of undeclared synthetic drugs in traditional herbal medicines as adulterants”, Drug teststing and Analysis, 5, pp 607-613 19 Johannes Wiest, Curd Schollmayer, Gabriele Gresser, Ulrike Holzgrabe, (2014), “Identification and quantitation of the ingredients in a counterfeit vietnamese herbal medicine against rheumatic diseases”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 97, pp.24-28 20 Kenichi Kumasaka, Takashi Kojima, Hideo Honda, and Kayo Doi, (2005), “Screening and quantitative analysis for sulfonylurea-type oral antidiabetic agents in adulterated health food using thin-layer chromatography and high-performance liquid chromatography”, Journal of health science, 51(4), pp 453-460 21 Mathon C, Duret M, Ankli A, Reich E, Bieri S, Christen, (2010), “Screening and determination of silbutramine in adulterated herbal slimming supplements by HPTLC”, J Pharm Biomed Anal., 47, pp 545-551 22 Maciej J Bogusz, H Hassan, E Al-Enazi, Z Ibrahim, M.Al-Tulfail, (2006), “Application of LC-ESI-MS-MS for detection of synthetic adulterants in herbal remedies”, J Pharm Biomed Anal., 41, pp 554561 23 Nielsen-Kudsk F “HPLC-determination of some antiinflammatory, weak analgesic and uricosuric drugs in human blood plasma and its application to pharmacokinetics”, J Pharm Biomed Anal., 31, pp 504511 24 Ning Li, Mei Cui, X Lu, F Quin, K Jiang, F Li, (2010), “A rapid and reliable UPLC-MS/MS method for identification and quantification of fourteen synthetic and diabetic drugs in adulterated Chinese proprietary medicines and dietary supplements”, Chromatgoraphia , 70, pp.1353- 1358 25 Okumura T, Otsuka M, (2005), “Evaluation of the microcrystallinity of a drug substance, indomethacin, in a pharmaceutical model tablet by chemometric FT-Raman spectroscopy” Pharmaceutical Research, 22(8), pp 1350-1357 26 Qionglin Liang, J Qu, G Luo, Y Wang, (2006), “Rapid and reliable determination of illegal adulterant in herbal medicines and dietary supplements by LC/MS/MS”, J Pharm Biomed Anal (40), pp.305309 27 Rui Zhang, Lihui Yin and Shaohong Jin, (2014), “Detection of illegally added drugs in dietary supplements by near-infrared spectral imaging”, Journal of innovative optical health sciences, vol 7, no 6, pp.1450032 (7 pages) 28 S.Balayssac, S Trefia, V Gilard, M Malet-Martina, R Martino, M A Delsuc, (2009), “2D and 3D DOSY 1-HNMR, a useful tool for analysis of complex mixtures: Application to herbal drugs or dietary supplements for erectile dysfunction”, J Pharm Biomed Anal 50, pp 602-607 29 Szostak R, Mazurek S, (2002) “Quatitative determination of acetylsalicylic acid and acetaminophen in tablets by FT-Raman spectroscopy” Analyst, 127, pp.144-148 30 The United State Pharmacopeia 34 31 Wensheng Pang, H Yang, Z Wu, M Huang, J Hu, (2009), “LC-MSMS in MRM mode for detection and structural identification of synthetic hypoglycemic drugs added illegally to nutural anti-diabetic herbal products”, Chromatographia, 70, pp 1353-1359 32 Wisnuwardhani et al, (2013), “Method development for simultaneous analysis of steroid and non steroid antiinflamatory substancesin jamu pegal linu using TLC-spectrophotodensitometry”, Journal of Pharmacy and Pharmaceutical sciences, 5(4), pp.749-753 PHỤ LỤC Danh mục mẫu chế phẩm đông dược thị trường STT Mã Số lô, hạn dùng, nơi sản Tên thuốc Liều lượng SP xuất VN01 Phong tê thấp PV Số lô: 02.09.14 viên/ lần HD:11.09.17 3lần / ngày (viên nén) SĐK: V784-H12-10 Công ty cổ phần dược thảo Phúc Vinh HC01 Khu phong hóa Số lô: 050714.HD: 050716 15 viên/lần thấp Xuân Quang SĐK: V947-H12-10 ( hồn cứng) Cơng ty TNHH Đơng lần/ngày Dược Xuân Quang VN02 Gout ATK (viên nang) Số lô: 012014.HD: 260617 viên/ lần SĐK: 27004/2013/ATTP- lần / ngày XNCB Công ty TNHH thành viên 120 Armephaco VN03 Cảm xuyên hương Số lô: 15 HD: 270317 Yên Bái SĐK: VD-17597-12 ( viên nang) Công ty CPDP Yên Bái 3viên/ lần 3lần / ngày VN04 Viên dưỡng khớp Số lô: 020914.HD: 280917 viên/ lần Abipha SĐK: 9793/2012/IT- ( viên nang) CNTC lần/ ngày Công ty CPDP quốc tế Abipha TL01 Trà Xương khớp Số lô: 240615 HD: túi/ lần Traly 130818 ( túi trà) SĐK: 22206/2014/ATTP- lần/ ngày XNCB Công ty TNHH TM DP Trang ly VN05 Gout Abipha (viên nang) Số lô: 010314 HD: viên/ lần 260317 lần /ngày SĐK: 7314/2014/ATTPXNCB Công ty CPDP quốc tế Abipha VN06 Tê nhức chân tay Số lô: 051113.HD: 051116 viên/ lần Bảo Nguyên SĐK: 10033/2011/YT- ( viên nang) CNTC lần/ ngày Công ty TNHH DP Hoa Sen VN07 Giải cảm ( viên nang) Số lô: 0215 HD: 150917 3viên / lần SĐK: VĐ-14449-11 lần/ ngày Công ty CPDP Yên Bái 10 VN08 Cốt thống HP ( viên nang ) Số lô: 001 HD: 150118 viên/ lần GCN 8359/2012/ATTP- lần/ ngày XNCB Công ty TNHH DP Bích Huyền 11 VN09 Cảm xuyên hương Số lô: 012015 HD: Nam Hà 080417 ( Viên nang) SĐK:V1315-H12-10 Công ty CPDP Hà Nam 2viên/ lần 3lần/ ngày 12 VN10 Maustud Thanh Số lô: 011113 HD: nhiệt 181116 ( viên nang) SĐK:4622/2013/ATTP- viên/ lần 2lần/ ngày XNCB Công ty DP VTYT Hải Dương 13 14 VN11 Viên cảm cúm Số lô: 0115.HD: 030417 Foripharm SĐK: V1089-H12-10 ( viên nang) Công ty D TW3 HC02 Viên xương khớp Số lơ: 0001.HD: 231017 SHD SĐK: Số XNCB: ( hồn cứng) 3122/2014/ATTP-XNCB viên / lần lần/ ngày gói/ lần 2lần/ ngày Cơng ty Hóa Dược Việt Nam 15 HC03 Phong tê thấp Số lô: 032 HD: 190117 10 hoàn/ lần Hydan SĐK: VĐ-6434-08 lần/ ngày (viên hồn) Cơng ty CPD VTYT Thanh Hóa 16 HC04 Phong tê thấp Bà Số lô: 15/09/2015 Giằng HD: 09/2017 ( hoàn cứng) SĐK: V23- H12- 16 12viên/ lần lần/ ngày Cơ sở sản xuất thuốc YHCT Bà Giằng 17 HC05 Phong thấp Fido ( hồn cứng) Số lơ: 100714 viên/ lần HD: 23/07/17 lần/ ngày SĐK: V289- H12-10 CTCP DP Đông dược 18 VN12 Thấp diệu nang Số lơ: 24082015 viên/ lần Tâm Bình HD: 24082018 ( viên nang) SĐK: 19881/2013/ATTP- lần/ ngày XNCB Cơng ty DP Tâm Bình 19 VN13 Hồng thấp linh ( viên nang) Số lô: 010214 HD: viên/ lần 080217 lần/ ngày SĐK: 7259/2012/ATTPXNCB Công TNHH Tư vấn y dược quốc tế( IMC) 20 VN14 Cốt thoái vương ( viên nén) Số lô: 010715 viên/ lần HD:06072018 lần/ ngày SĐK: 25778/2014/ATTPXNCB Công ty TNHH Tư vấn Y Dược Quốc Tế (IMC) 21 VN15 Viên vai gáy Thái Số lô: 0915 HD: 050918 Dương SĐK: CB ( viên nang) 11882/2015/ATTP-XNCB viên/ lần lần / ngày Công ty cổ phần Sao Thái Dương 22 23 VN16 Xương khớp Nhất HD: 29072018 Nhất Công ty TNHH DP Nhất ( viên nén) Nhất TB01 Viêm thấp khớp 2viên/lần 2lần/ ngày Thuốc gia truyền gói/ ngày Số lơ: 061014 gói/ lần HD: 20/10/16 lần/ ngày ( bột) 24 HC06 Hỏa long ( hoàn cứng) SĐK: VNB-3170-05 Công ty TNHH Đông nam dược Bảo Long 25 26 HC07 Thuốc gia truyền Khơng có số lơ, hạn dùng Trị Viêm Mũi Đơng y Đỗ Thái Nam- ( hồn cứng) Thái Bình gói/ lần lần/ ngày VN17 Nhức khớp Nhân Số lô: 02K14 HD: 220917 viên/lần Hưng SĐK: 15368/2014/ATTP- (viên nén) XNCB lần/ngày Công ty TNHH Dược Nhân Hưng 27 VN18 Viên khớp Tâm Số lơ: 06112015 Bình HD: 06112018 ( viên nang) SĐK: 19879/2013/ATTP- viên/ lần lần/ ngày XNCB Công ty TNHH DP Tâm Bình 28 VN19 Viên khớp Bách Số lơ: 0244 HD: 040817 viên/lần SĐK: 22966/2013/ATTP- lần/ngày Xà (viên nang) XNCB Công ty TNHH Nam Dược 29 HC08 Nhức khớp hồn Cơ sở Hạnh Hịa NL:15 viên/ B12/29A, ấp 2, xã Vĩnh lần Lộc, huyện Bình Chánh, TP.Hồ Chí Minh