BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***00*** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ỨNG DỤNG KỸ THUẬT RT - PCR ĐỂ PHÁT HIỆN VIRUS GÂY HỘI CHỨNG RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2001 – 2005 Sinh viên thực hiện: NGUYỄN NHẤT BẢO QUỐC Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9 - 2005 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***00*** ỨNG DỤNG KỸ THUẬT RT - PCR ĐỂ PHÁT HIỆN VIRUS GÂY HỘI CHỨNG RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN Giáo viên hƣớng dẫn: TS. NGUYỄN NGỌC HẢI PGS.TS TRẦN THỊ DÂN Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9 - 2005 Sinh viên thực hiện: NGUYỄN NHẤT BẢO QUỐC LỜI CẢM TẠ Chân thành cảm ơn: Ban giám hiệu Trường Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học cùng tất cả quý Thầy Cô đã truyền đạt kiến thức cho tôi trong suốt quá trình học tập tại trường. Các Thầy Cô và anh chị tại Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm Trường Đại Học Nông Lâm TP.Hồ Chí Minh đã tận tình chỉ bảo và tạo mọi điều kiện tốt nhất cho tôi trong suốt quá trình thực tập tốt nghiệp. Cô Bích Liên, Thầy Ngọc, chị Trang và các Thầy Cô khoa Chăn Nuôi Thú Y đã tận tình giúp đỡ và chỉ bảo tôi trong suốt quá trình thực tập tốt nghiệp Các bạn lớp Công Nghệ Sinh học 27 đã động viên và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập. Đặc biệt xin chân thành cảm ơn: TS. Nguyễn Ngọc Hải và PGS.TS Trần Thị Dân đã tận tình dạy bảo, hướng dẫn, giúp đỡ và động viên tôi trong suốt quá trình nghiên cứu và thực hiện khóa luận. Con xin gửi lòng biết ơn sâu sắc đến bố mẹ, những người đã sinh thành, nuôi dưỡng, dạy dỗ và luôn bên con trong mọi thời điểm. Thủ Đức, ngày 25 tháng 08 năm 2005 Đứng khỏa thân trước gương phát bệnh Hãy thử đứng khỏa thân trước gương quan sát thật kỹ biến đổi thể Nếu có biểu bất thường bạn mắc phải bệnh lạ cực nguy hiểm Mọi người nên dành chút thời gian trước sau tắm để ngắm nhìn gương Công việc tưởng chừng vô ích lại đem nhiều lợi ích bất ngờ Theo chuyên gia, ngắm nhìn thể để phát điều bất thường giúp bạn tầm soát bệnh tật Nếu bạn quan sát thể phát điều bất thường tương tự dấu hiệu bạn mắc bệnh nguy hiểm, cần điều trị Xuất u cục bẹn Đây dấu hiệu chứng thoát vị - tình trạng phần thể bị đẩy thông qua điểm yếu mô xung quanh, tạo khối u bên nhìn thấy Các hình thức phổ biến chứng thoát vị thoát vị bẹn "Bạn nhìn thấy khối u lạ xuất bạn đứng lên trọng lực VnDoc - Tải tài liệu, văn pháp luật, biểu mẫu miễn phí áp lực bụng làm cho khối u xuất bên ngoài", bác sĩ Anton Emmanuel, bác sĩ tư vấn Bệnh viện Đại học London cho biết Thoát vị bẹn chứng thoát vị phổ biến nam giới, đa số nguyên nhân mang vác vật nặng so với sức Phẫu thuật giúp đẩy phần nhô trở vị trí Mảng da tối màu nách Theo bác sĩ nội tiết Nida Chammas, Bệnh viện Churchill Clementine, Middlesex, mảng da tối màu nách biết đến dấu hiệu kháng insulin (acanthosis nigricans) Đây dấu hiệu sớm bệnh tiểu đường tuýp Thông thường mảng da tối màu to bàn tay, có xu hướng bị khô gây ngứa "Mảng da tối màu có liên quan đến bệnh béo phì, gây kháng insulin, tiền thân bệnh tiểu đường thể sử dụng nội tiết tố insulin để điều tiết lượng đường máu làm cho tuyến tụy phải sản xuất ngày nhiều insulin Lượng insulin cao máu cho gây thay đổi tế bào da dẫn đến hình thành mảng da màu tối vậy", bác sĩ Chammas nói VnDoc - Tải tài liệu, văn pháp luật, biểu mẫu miễn phí Hiện chuyên gia chưa giải thích rõ ràng mảng da tối này, song chúng thường xuất nách, cổ bẹn Bạn đừng chủ quan màu sắc da vùng mà kiểm tra thường xuyên để nhận biết tình trạng sức khỏe Nếu phát có dấu hiệu này, tốt đến bác sĩ, đồng thời thay đổi lối sống cách giảm cân, giảm lượng carbohydrate tập thể dục nhiều để giúp khôi phục lại màu da ban đầu Lệch vai Nếu bạn nhìn toàn thể qua gương phát vai cao so với vai lại, bả vai nhô lên khác thường so với vai người khác, bạn bị vẹo cột sống Bác sĩ Tony Kochhar, bác sĩ phẫu thuật chỉnh hình tư vấn Bệnh viện London Bridge cho biết: "Cột sống bình thường có đường cong tự nhiên tạo thành hình chữ S: Ở cổ, lưng lưng Nhìn từ phía sau, cột sống khỏe mạnh nằm đường thẳng Những người bị vẹo cột sống, nhìn từ phía sau bị nghiêng bất thường sang bên Tình trạng ảnh hưởng đến xương sườn chí ảnh hưởng tới liên kết tới vai" Vẹo cột sống nhẹ không cần điều trị, nặng phải phẫu thuật VnDoc - Tải tài liệu, văn pháp luật, biểu mẫu miễn phí Ngoài ra, lệch vai dấu hiệu bệnh đa xơ cứng (MS), chứng rối loạn não tủy sống làm suy giảm chức thần kinh Bệnh đa xơ cứng có giai đoạn viêm lặp lặp lại phá hủy màng bọc myelin, lớp bọc sợi thần kinh, để lại nhiều vùng mô sẹo (sự hóa cứng) dọc theo lớp phủ tế bào thần kinh Tình trạng dẫn đến việc làm chậm tắc đường truyền xung nhịp thần kinh vùng "Nếu không điều trị, ảnh hưởng đến chức bắp", bác sĩ Kochhar nói Do vậy, để yên tâm với sức khỏe mình, bạn nên tới sở y tế gần để kiểm tra để tư vấn có phương pháp điều trị phù hợp Nốt ruồi chân lưng Hầu hết nốt ruồi khối vô hại tế bào gọi melanocytes, sản xuất sắc tố da Trong số trường hợp, chúng khối u ác tính - dấu hiệu bệnh ung thư da Ở phụ nữ, nốt ruồi thường hình thành chân vị trí thấp, đàn ông nốt ruồi xuất phổ biến mặt sau thể Đó lý bạn cần phải kiểm tra gương bỏ lỡ chúng VnDoc - Tải tài liệu, văn pháp luật, biểu mẫu miễn phí Theo tiến sĩ da liễu John Ashworth, nốt ruồi khối u hắc tố Nếu phát sớm, khối u hắc tố điều trị chữa khỏi Vì vậy, người nên quan sát kiểm tra nốt ruồi thể để tầm soát bệnh tật Phụ nữ nên đặc biệt quan sát nốt ruồi chân, nam giới cần ý đến nốt ruồi vùng lưng Tiến sĩ nhấn mạnh, quan sát nốt ruồi cần ý đến hình dạng, kích thước, màu sắc, đường viền để xác định nốt ruồi lành tính hay ác tính Những nốt ruồi nguy hiểm mang đặc điểm có nửa bất đối xứng, có viền bất thường, có nhiều màu, đường kính lớn phát triển theo thời gian Vết nhăn bầu ngực Khi nâng cánh tay lên nhìn vào gương, phát có nếp nhăn vị trí ngực, bạn cần phải đến bác sĩ để kiểm tra Bởi khối u xuất ngực, phá vỡ cấu trúc da tạo nếp nhăn bên Nếp nhăn người bệnh hạ tay xuống Tony Howell, giáo sư khoa ung thư Đại học Manchester cho biết, có dấu hiệu bệnh ung thư vú, tế bào khối u gây mô xung quanh tạo thành collagen - protein cung cấp sức mạnh cấu trúc da, sản xuất thể phản ứng để thay đổi gây chấn thương Collagen giúp tế bào da bên lý tạo vết nhăn VnDoc - Tải tài liệu, văn pháp luật, biểu mẫu miễn phí Tuy nhiên, vết nhăn dấu hiệu bệnh khác nên tốt bạn nên tới gặp bác sĩ để kịp thời kiểm tra Ung thư vú phát sớm khả chữa khỏi bệnh cao Phình tĩnh mạch cổ Nếu đứng trước gương phát vùng cổ bạn có dấu hiệu phình tĩnh mạch, đừng chủ quan dấu hiệu suy tim Khi tim bơm đủ máu khắp nơi thể, máu tích tụ dẫn đến tình trạng phình tĩnh mạch "Bất chứng liên quan tới tĩnh mạch có nghĩa biểu suy tim, chẳng hạn thở ... nghiên cứu - trao đổi tạp chí luật học số 3/2010 11 PGS.TS. Nguyễn Văn Động * 1. Quan h gia s phỏt trin bn vng vi hot ng xõy dng phỏp lut Trờn th gii, khỏi nim "phỏt trin bn vng" c hiu l s phỏt trin va ỏp ng c nhng nhu cu ca hin ti, va khụng cn tr vic ỏp ng nhu cu ca cỏc th h tng lai. (1) Vn dng vo Vit Nam, khỏi nim "phỏt trin bn vng" c nhn thc l s phỏt trin, trong ú kt hp cht ch, hi ho gia phỏt trin kinh t (m ch yu l tng trng kinh t) vi phỏt trin xó hi (trong ú c bn l bo m tin b xó hi, cụng bng xó hi, xoỏ úi nghốo, gii quyt vic lm cho ngi lao ng) v bo v mụi trng (m nhim v chớnh l x lớ, khc phc ụ nhim; phc hi v khụng ngng ci thin, nõng cao cht lng; phũng chng chỏy v cht phỏ rng; khai thỏc hp lớ v s dng tit kim ti nguyờn thiờn nhiờn). (2) Phỏt trin bn vng ó tr thnh ũi hi khỏch quan, xu th tt yu ca s phỏt trin ca nc ta v ca tt c cỏc quc gia trờn th gii trong thi i hin nay. Nhm bo m cho xó hi phỏt trin bn vng thỡ Nh nc v xó hi s dng ng b v ng thi cỏc loi quy phm xó hi iu chnh, trong ú phỏp lut l ch yu v quan trng nht, do phỏp lut cú nhng u th riờng m cỏc loi quy phm xó hi khỏc khụng cú (ch do nh nc ban hnh hoc tha nhn, cha ng v th hin ý chớ chung ca xó hi, cú tớnh bt buc chung i vi xó hi hay i vi phn ln cỏc thnh viờn xó hi, c nh nc bo m thc hin bng bin phỏp cng ch). Phỏp lut ch cú th c to ra thụng qua hot ng xõy dng phỏp lut ca Nh nc vi s tr giỳp ca xó hi. Xõy dng phỏp lut l lnh vc hot ng ca Nh nc vi s giỳp sc ca xó hi nhm to ra h thng phỏp lut ngy cng hon thin phc v s nghip xõy dng v bo v T quc. H thng phỏp lut, xột t cu trỳc bờn trong ca nú l tng th cỏc quy phm phỏp lut c chia thnh cỏc ngnh lut m mi ngnh lut c to nờn bi cỏc ch nh lut, mi ch nh lut c hỡnh thnh t cỏc quy phm phỏp lut, mi quy phm phỏp lut l mt quy tc do Nh nc t ra (hoc tha nhn) v bo m thc hin nhm iu chnh cỏc quan h xó hi c bn. Xột t gúc nhng biu hin bờn ngoi ca h thng phỏp lut thỡ h thng phỏp lut l ton b cỏc vn bn quy phm phỏp lut do cỏc c quan nh nc cú thm quyn v cỏc cỏ nhõn cú thm quyn trung ng v a phng ban hnh theo trỡnh t, th tc c quy nh trong Lut * Ging viờn chớnh Khoa hnh chớnh-nh nc Trng i hc Lut H Ni nghiên cứu - trao đổi 12 tạp chí luật học số 3/2010 ban hnh vn bn quy phm phỏp lut nm 2008 v Lut ban hnh vn bn quy phm phỏp lut ca hi ng nhõn dõn v u ban nhõn dõn nm 2004. Nh vy, nu núi v hot ng xõy dng phỏp lut thỡ v thc cht l cp vic xõy dng v ban hnh cỏc loi vn bn quy phm phỏp lut ca cỏc c quan nh nc cú thm quyn v cỏ nhõn cú thm quyn trung ng v a phng. Gia s phỏt trin bn vng ca xó hi vi hot ng xõy dng phỏp lut cú mi quan h cht ch, tỏc ng qua li ln nhau; chỳng va l iu kin, tin cho nhau, va l h qu ca nhau, cựng song song tn ti v phỏt trin trong s phỏt trin chung ca t nc. S phỏt trin bn vng ca xó hi l c s thc tin vng chc Nh nc tip tc xõy dng v thc hin thnh cụng cỏc chin lc, k hoch, chng trỡnh xõy dng phỏp lut phc v s nghip xõy dng v bo v T quc trong iu kin i mi v hi nhp quc t; l ngun cung cp cỏc phng tin vt cht-k thut cn thit cho hot ng xõy dng phỏp lut, bo m cho hot ng xõy dng phỏp lut ngy cng t cht lng v hiu qu cao; l bo m vt cht v tinh thn chc chn cho xó hi luụn luụn n nh, phỏt trin hi ho, tin b, gúp phn quan trng vo vic cng c, phỏt trin lũng tin ca nhõn dõn vo ch chớnh tr-xó hi, khuyn khớch h tham gia ngy cng tớch cc v ụng o hn vo hot ng xõy dng phỏp lut ca Nh nc. Hot ng xõy dng phỏp lut to ra h thng phỏp lut ngy cng hon thin, t c bn tiờu chun: ton din, ng b, khoa hc, thc tin, cú kh nng iu chnh hiu qu cỏc mi quan h xó hi c bn theo hng phỏt trin nhanh, liờn tc, n nh, vng chc, em li ngy cng nhiu li ớch vt cht, tinh thn cho xó hi v cỏc thnh viờn xó hi. Nh cú s tỏc ng ca h thng phỏp lut ngy cng hon thin thụng qua hot ng xõy dng phỏp lut ngy cng cú cht lng v hiu qu cao m s phỏt trin bn vng ca xó hi mi c bo m thc hin mt cỏch liờn tc, thng nht trờn phm vi ton xó hi v Sử dụng công cụ Process Monitor để phát hiện những thay đổi do malware Trong phần ba và cũng là phần cuối cùng của loạt bài này, chúng tôi sẽ giới thiệu cho các bạn cách sử dụng công cụ Process Monitor để phát hiện những thay đổi do malware đối với registry và hệ thống file. Trong phần một và phần hai của loạt bài gồm ba phần này, chúng tôi đã giới thiệu cho các bạn cách sử dụng Process Explorer và Autoruns để nhận dạng phần mềm mã độc trên hệ thống Windows. Lúc này phiên bản mới của Process Explorer (v15.01) đã được phát hành trong tháng này, bạn có thể download để sử dụng phiên bản mới nhất của nó tại đây. Phiên bản mới này sử dụng ít bộ nhớ hơn, nó hiển thị hiệu quả sử dụng GPU và cho phép bạn khởi động lại các dịch vụ. Ngoài ra các biểu đồ hiệu suất cũng có giao diện đẹp mắt hơn. Cài đặt và sử dụng Process Monitor Process Monitor thay thế cho công cụ FileMon và RegMon cũ, nó kết hợp cũng như nâng cấp các chức năng của cả hai công cụ này. Phiên bản hiện hành của Process Monitor là v2.95 và bạn có thể download nó tại đây. Vậy bạn có thể thực hiện những gì với Process Monitor? Công cụ này được sử dụng để capture tất cả dữ liệu thời gian thực về các quá trình (process) trên máy tính, gồm có đường dẫn ảnh, dòng lệnh, người dùng, session ID và các mối quan hệ của process. Với tính năng lọc tuyệt vời, bạn sẽ không phải lo lắng về việc mất thông tin khi thiết lập các bộ lọc. Với các thông tin thu được, bạn có thể phân tích malware được tìm thấy và xác định nó là loại gì cũng như loại bỏ nó như thế nào. Bạn có thể download và cài đặt Process Monitor trên máy tính (khoảng 1.26 MB). Process Monitor sẽ cài đặt một driver thiết bị để capture thông tin, sau đó hiển thị nó trong giao diện đồ họa thân thiện người dùng. Như những gì thể hiện trong hình 1, Process Monitor hiển thị một dòng thông tin cho mỗi hoạt động xảy ra trên hệ thống. Mặc định, các cột hiển thị ở đây gồm có thời gian, tên quá trình và PID, hoạt động nó chỉ đạo, đường dẫn, kết quả của hoạt động và các chi tiết về hoạt động (trong hình, chúng tôi đã ẩn thông tin đường dẫn vì nó chứa các thông tin nhận dạng về tài khoản người dùng, tên máy tính và tên miền). Hình 1 Bạn có thể bổ sung thêm nhiều cột khác để có thêm thông tin về ứng dụng, sự kiện và quá trình, xem thể hiện trong hình 2. Hình 2 Số lượng thông tin mà Process Monitor cung cấp là rất nhiều vì có quá nhiều quá trình chạy ở chế độ background trên một hệ thống Windows. Điều đó có nghĩa rằng chúng ta cần phải lọc nếu muốn capture thông tin có liên quan đến nhiệm vụ tìm kiếm malware. Một điều thú vị ở đây là, các bộ lọc của Process Monitor sẽ hạn chế những gì sẽ được hiển thị chứ không phải những gì được capture. Vì vậy tất cả dữ liệu sẽ vẫn được capture nhưng bạn chỉ thấy những gì mình cần. Vì vậy bạn có thể hiển thị các entry khớp với tên quá trình, người dùng, thời gian cụ thể trong ngày,… Nhiều lựa chọn được thể hiện ngay trong hình 3. Hình 3 Có thể tạo nhiều bộ lọc để tìm ra các entry, ví dụ như entry được GIÁO D C VÀ ÀO T O VI N KHOA B NÔNG NGHI P VÀ PHÁT TRI N NÔNG THÔN C NÔNG NGHI P VI T NAM - BÙI TH D NG KHUY U D NG D U CHU N PHÂN T PHÁT HI N GEN KHÁNG B NH O ÔN A CÁC GI NG LÚA (Oryza sativa L.) VÀ PH NGPHÁP CH NG GEN T O GI NG KHÁNG N LU N ÁN TI N S NÔNG NGHI P C N TH - 2012 NH i GIÁO D C VÀ ÀO T O VI N KHOA B NÔNG NGHI P VÀ PHÁT TRI N NÔNG THÔN C NÔNG NGHI P VI T NAM - BÙI TH D NG KHUY U D NG D U CHU N PHÂN T PHÁT HI N GEN KHÁNG B NH O ÔN A CÁC GI NG LÚA (Oryza sativa L.) VÀ PH NGPHÁP CH NG GEN T O GI NG KHÁNG N NH Chuyên ngành: Di truy n ch n gi ng tr ng Mã s : 62 62 05 01 LU N ÁN TI N S NÔNG NGHI P Ng ih ng d n khoa h c: GS TS Nguy n Th Lang C N TH - 2012 ii NG HÒA XÃ H I CH NGH A VI T NAM c l p – T – H nh phúc - I CAM OAN Tôi xin cam oan công trình nghiên c u “ phát hi n gen kháng b nh d ng d u chu n phân t o ôn c a gi ng lúa (Oryza sativa L.) ph pháp ch ng gen t o gi ng kháng n ng nh” c a riêng Các s li u, k t qu nêu lu n án trung th c ch a t ng c công b b t k công trình khác Tác gi lu n án Bùi Th D ng Khuy u iii L IC MT - Tôi xin chân thành g i l i c m n, l i tri ân sâu s c n GS.TS Nguy n Th Lang GS.TS Bùi Chí B u ã t n tình ch d n ki n th c, n i dung, ph ngu n ng viên l n - Tôi xin chân thành c hoàn thi n lu n án m n: + Các th y cô tham gia gi ng Vi n Lúa y l p nghiên c u sinh khóa ac s o ng b ng sông C u Long + Vi n Lúa ng b ng sông C u Long ã giúp su t th i gian + Phòng Khoa Ban t o sau giúp ng pháp c t p, th c hi n t o i u ki n thu n l i cho tài hoàn thi n lu n án c H p tác qu c t Vi n Lúa i ng b ng sông C u Long c Vi n Khoa h c Nông nghi p Vi t Nam ã h t n tình th i gian + Các th y cô h i ng d n c t p, nghiên c u b o v lu n án ng c p c s , c p vi n ã t n tình góp ý giúp ch nh a hoàn thi n lu n án + Các nhà khoa h c ã g i nh n xét ánh giá ch nh ng m b sung a ch a lu n án + Các ng nghi p b môn Di truy n Ch n gi ng-Vi n Lúa C u Long ã t n tính giúp hi n ng viên su t th i gian ng b ng sông c t p, th c tài hoàn thi n lu n án + Gia ình cho su t th i gian n bè thân h u, ng nghi p ã c t p, th c hi n - Kính dâng lên ba má l i c m n su t ng viên, giúp tài hoàn thi n lu n án i ã nuôi d y ng viên h c t p Tác gi lu n án Bùi Th D ng Khuy u iv CL C c N i dung Trang Trang ph bìa i L i cam oan ii L ic mt iii M cl c iv Danh sách b ng vii Danh sách hình ix Danh sách bi u xi Danh sách gi n xii Danh sách s xiii Danh m c ch vi t t t xiv M U Tính c p thi t c a M c tiêu nghiên c u c a Ý ngh a khoa h c th c ti n c a CH it tài tài tài ng nghiên c u ph m vi nghiên c u c a NG I: T NG QUAN TÀI LI U VÀ C A S tài KHOA C TÀI 1.1 C s khoa c a tài 1.1.1 M t s gen kháng b nh o ôn ch y u lúa 1.1.2 Ngu n gen kháng b nh o ôn t gi ng lúa mùa a ph ng BSCL 1.1.3 ng d ng c i ti n gi ng lúa có tính kháng b nh 1.2 Tình hình nghiên c u n 1.2.1 S phát tri n c a b nh 1.2.2 Gen kháng b nh o ôn lúa o ôn lúa c o ôn n nh 9 15 v 1.2.3 M i quan h gi a kí sinh kí ch c a b nh 1.2.4 Nghiên c u v tính kháng b n v ng b nh 1.2.5 o ôn 16 o ôn lúa 20 ng d ng d u chu n phân t ch n gi ng lúa kháng b nh 1.2.6 Di truy n tính kháng QTLs i v i b nh CH NG II: V T LI U, N I DUNG VÀ PH o ôn o ôn 26 33 36 NG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 V t li u nghiên c u 2.1.1 Các gi ng lúa, ch ng n m d u chu n phân t 2.1.2 kháng b nh o ôn Th i gian a 2.1.3 ng 36 ánh giá tính m nghiên c u 37 hóa ch t s d ng 2.1.4 Phân bón thu c 2.2 N i dung nghiên c u 2.2.1 Xác nh v t li u kh i lúa BSCL 37 o v th c v t 38 38 u mang gen kháng 2.2.2 T o qu n th ch ng gen kháng b nh 2.3 Ph o ôn c a gi ng o ôn b n v ng 39 ánh giá ki u hình kháng, nhi m c a gi ng lúa v i b nh 2.3.2 ánh giá ki u gen kháng b nh 2.3.4 o ôn o ôn 39 42 Lai ch ng gen t o qu n th ch ng nhi u gen kháng ánh giá m t s 38 38 ng pháp nghiên c u 2.3.1 2.3.3 36 46 c tính nông h c, thành ph n n ng su t n ng su t c a dòng lúa tri n v ng mang ch ng gen kháng b nh 47 o ôn 2.3.5 Phân tích s li u 53 CH NG III: K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N 54 3.1 Xác nh v t li u kh i u t o gi ng lúa kháng b nh 3.1.1 ánh giá ki u hình ph n ng b nh 3.1.2 ánh GIÁO D C VÀ ÀO T O B NÔNG NGHI P VÀ PHÁT TRI N NÔNG THÔN VI N KHOA H C NÔNG NGHI P VI T NAM HÙYNH V N NGHI P D NG D U CHU N PHÂN T PHÁT HI N GEN KHÁNG B NH B C LÁ (Xanthomonas oryzae pv oryzae) H T C A M T S GI NG LÚA TR NG NG B NG SÔNG C U LONG Chuyên ngành: Di truy n ch n gi ng Mã s : 62 62 05 01 LU N ÁN TI N S NÔNG NGHI P n Th - 2012 i GIÁO D C VÀ ÀO T O B VI N KHOA NÔNG NGHI P VÀ PHÁT TRI N NÔNG THÔN C NÔNG NGHI P VI T NAM HÙYNH V N NGHI P D NG D U CHU N PHÂN T PHÁT HI N GEN KHÁNG B NH B C LÁ (Xanthomonas oryzae pv oryzae) H T C A M T S GI NG LÚA TR NG NG B NG SÔNG C U LONG Chuyên ngành: Di truy n ch n gi ng Mã s : 62 62 05 01 LU N ÁN TI N S NÔNG NGHI P Ng ih ng d n khoa h c: GS TS Bùi Chí B u n Th - 2012 ii IC MT Xin chân thành m n: - GS.TS Bùi Chí B u GS.TS Nguy n Th Lang ã t n tình ch b o h n n i dung, ph ng ng pháp k ho ch tri n khai thành công môn h c, th c hi n thí nghi m hoàn thi n lu n án - Các th y cô tham gia gi ng Vi n Lúa y l p nghiên c u sinh khóa o Vi n Lúa ng b ng sông C u Long ã giúp thu n l i cho su t th i gian - Phòng Khoa giúp o sau c t p, th c hi n c H p tác qu c t Vi n Lúa i c Vi n Khoa t n tình th i gian - Các o ng B ng Sông C u Long - Ban lãnh Ban ac s t o i u ki n tài hoàn thi n lu n án ng b ng sông C u Long c Nông Nghi p Vi t Nam ã h ng d n c t p, nghiên c u b o v lu n án ng nghi p B môn Công ngh H t gi ng Phòng Hành T ch c - Gia ình n bè thân h u, cho su t th i gian ng nghi p ã c t p, th c hi n ng viên, giúp tài hoàn thi n lu n án Tác gi lu n án Hu nh V n Nghi p iii ng Hòa Xã H i Ch Ngh a Vi t Nam c L p – T Do – H nh Phúc - I CAM OAN Tôi xin cam oan công trình nghiên c u “ d ng d u chu n phân t phát hi n gen kháng b nh b c (Xanthomonas oryzae pv oryzae) t h t c a t s gi ng lúa tr ng ng b ng sông C u Long” c a riêng Các s li u, k t qu nêu lu n án trung th c ch a t ng c công b b t công trình khác Tác gi lu n án Hu nh V n Nghi p iv M CL C TT I 1.1 1.1.1 1.1.2 1.2 1.2.1 1.2.2 1.2.3 II 2.1 2.1.1 2.1.2 2.1.3 2.1.4 2.1.5 2.1.6 2.2 2.2.1 2.2.2 2.2.3 2.3 2.3.1 2.3.2 I DUNG M U Tính c p thi t c a tài ……………………………………… M c tiêu c a tài …………………………………………… Ý ngh a khoa h c th c ti n c a tài ………………… i t ng nghiên c u ……………………………………… Ph m vi nghiên c u ………………………………………… CH NG I: C S KHOA H C C A TÀI VÀ T NG QUAN TÀI LI U C s khoa h c c a tài …………………………………… C s v gen kháng b nh b c …………………………… C s d a xây d ng b n gen kháng b nh b c …… Tình hình nghiên c u n c Gi i thi u chung v b nh b c lúa ………………………… ánh giá ki u hình tính kháng b nh b c c a gi ng lúa ng d ng MAS ch n t o gi ng lúa …………………… CH NG II: V T LI U, N I DUNG VÀ PH NG PHÁP NGHIÊN C U t li u nghiên c u B gi ng lúa chu n kháng nhi m b gi ng th nghi m … Các nòi vi khu n b c Xoo ………………………………… Ph ng ti n hoá ch t nuôi c y vi khu n ………………… Ph ng ti n hoá ch t ly trích DNA ……………………… Ph ng ti n hoá ch t cho n di agarose gel …………… Ph ng ti n hoá ch t cho PCR …………………………… N i dung nghiên c u ánh giá ki u hình gi ng lúa th nghi m i v i b nh c ánh giá ki u gen kháng b nh b c lúa c a gi ng lúa th nghi m T o qu n th h i giao chuy n gen kháng b nh b c …… Ph ng pháp nghiên c u ánh giá ki u hình gi ng lúa th nghi m i v i b nh c ánh giá ki u gen kháng b nh b c lúa c a gi ng lúa th nghi m v TRANG 1 3 4 9 14 20 40 40 40 40 41 41 42 43 45 45 45 45 46 46 47 2.3.3 2.3.4 III 3.1 3.1.1 3.1.2 3.1.3 3.2 3.2.1 3.2.2 3.3 3.3.1 3.3.2 3.3.3 IV 4.1 4.1.1 4.1.2 4.1.3 4.2 T o qu n th h i giao chuy n gen kháng b nh b c …… Phân tích s li u ……………………………………………… CH NG III: K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N ánh giá tính kháng b nh b c c a b gi ng lúa th nghi m ……………………………………………………… ánh giá gi ng ch th kháng v i nòi b nh b c t i BSCL ……………………………………………………… ánh giá tính kháng b nh b c c a b gi ng lúa mùa …… ánh giá tính kháng b nh b c c a b gi ng lúa cao s n ng n ngày…………………………………………………… ng ngàyki u gen kháng b nh b c c a gi ng lúa th ánhn giá nghi m ……………………………………………………… Phân tích m u b ng ph ng pháp SSR ……………………… Phân tích m u b ng ph ng pháp STS ……………………… o qu n th h i giao