ĐAI HOC QUÔC GIA HA NÔI ̣ ̣ ́ ̀ ̣ TRƢƠNG ĐAI HOC KHOA HOC TƢ NHIÊN ̀ ̣ ̣ ̣ ̣  VƢƠNG VĂN TRƢỜNG NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ CHUYỂN HOÁ ZERUMBONE TRONG MỘT SỐ CÂY THUỐC THUỘC HỌ GỪNG (ZINGIBERACEAE) VIỆT NAM VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƢ LUẬN ÁN TIẾN SĨ HOÁ HỌC Hà Nôi - 2016 ̣ ĐAI HOC QUÔC GIA HA NÔI ̣ ̣ ́ ̀ ̣ TRƢƠNG ĐAI HOC KHOA HOC TƢ NHIÊN ̀ ̣ ̣ ̣ ̣  VƢƠNG VĂN TRƢỜNG NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ CHUYỂN HOÁ ZERUMBONE TRONG MỘT SỐ CÂY THUỐC THUỘC HỌ GỪNG (ZINGIBERACEAE) VIỆT NAM VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƢ LUẬN ÁN TIẾN SĨ HOÁ HỌC Chuyên ngành : Hóa hữu Mã số: 62440114 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Văn Ngọc Hƣớng GS.TS Nguyễn Đình Thành Hà Nội - 2016 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu kết đƣợc nêu luận án trung thực chƣa đƣợc công bố công trình khác Hà Nội, ngày 10 tháng năm 2016 Ký tên Vƣơng Văn Trƣờng LỜI CẢM ƠN! Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Văn Ngọc Hướng GS.TS Nguyễn Đình Thành giao đề tài, tạo điều kiện tận tình hướng dẫn em hoàn thành luận án Tôi xin chân thành cảm ơn TS Lưu Văn Chính nhiệt tình giúp đỡ trình làm luận án Tôi xin bày tỏ lòng cảm ơn đến thầy, cô Bộ môn Hoá Hữu thầy, cô Khoa Hoá học đóng góp nhiều ý kiến quý báu để hoàn thành luận án Xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia Hà Nội phòng, ban chức tạo điều kiện tốt để học tập, nghiên cứu hoàn thành luận án Tôi xin bày tỏ lòng cảm ơn đến Đảng uỷ, Ban Tổng giám đốc Trung tâm Nhiệt đới Việt Nga tạo điều kiện, quan tâm, giúp đỡ trình học tập thực công trình Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến tập thể Phòng Vật liệu, tập thể Viện Độ bền Nhiệt đới, Trung tâm Nhiệt đới Việt Nga nơi công tác tiến hành thực nghiệm luận án Tập thể Phòng giúp đỡ, động viên chia sẻ nhiều khó khăn với thời gian qua Hà Nội, ngày 05 tháng năm 2016 Tác giả luận án Vương Văn Trường MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1-TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Zingiber 1.1.1 Vài nét thực vật học chi Zingiber 1.1.2 Thành phần hóa học tinh dầu chi Zingiber 1.2 Tổng quan Gừng gió (Zingiber zerumbet Smith) 1.2.1 Đặc điểm thực vật 1.2.2 Nguồn gốc phân bố 1.2.3 Thành phần hoá học Gừng gió 1.2.4 Y học dân tộc Gừng gió 14 1.3 Tổng quan zerumbone 16 1.3.1 Nguồn gốc, cấu trúc tính chất vật lý zerumbone 16 1.3.2 Nguồn nguyên liệu cho zerumbone 16 1.3.3 Các phƣơng pháp phân lập zerumbone 18 1.3.4 Hoạt tính sinh học zerumbone 19 1.3.5 Hoạt tính phòng ngừa chống tái phát ung thƣ zerumbone 23 1.3.6 Chuyển hóa hóa học zerumbone dẫn xuất 25 CHƢƠNG - THỰC NGHIỆM 37 2.1 Hoá chất phƣơng tiện nghiên cứu 37 2.1.1 Nguyên liệu hoá chất 37 2.1.2 Các thiết bị dùng cho nghiên cứu 37 2.2 Các phƣơng pháp thực nghiệm 38 2.3 Phân tích tinh dầu zerumbone củ thuốc thuộc họ Gừng 38 2.3.1 Lý lịch mẫu 38 2.3.2 Xử lý mẫu 39 2.3.3 Điều chế tinh dầu 39 2.3.4 Phân lập zerumbone qua tinh dầu kết tinh phân đoạn 44 2.3.5 Phân lập zerumbone phƣơng pháp chiết sắc ký cột 44 2.3.6 Phân lập zerumbone phƣơng pháp ép thuỷ lực, chiết kết tinh phân đoạn 45 2.4 Tổng hợp số hydrazide (1a-l) 45 2.5 Chuyển hoá zerumbone với hydrazide 48 2.6 Chuyển hoá zerumbone oxide với hydrazide 51 2.7 Chuyển hoá zerumbone với số amine 55 2.8 Tổng hợp dẫn xuất zerumbone với chalcone thông qua cầu liên kết 1-ethylen-4-methylen-1,2,3-triazol 57 2.9 Tổng hợp dẫn xuất zerumbone với chalcone thông qua cầu liên kết trimethylen 62 CHƢƠNG - KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 66 3.1 Nguyên liệu zerumbone 66 3.2 Phân lập zerumbone 67 3.3 Chuyển hoá zerumbone thành hợp chất 69 3.3.1 Tổng hợp acid hydrazide 73 3.3.2 Chuyển hoá zerumbone với hydrazide 77 3.3.3 Chuyển hoá zerumbone oxide với hydrazide 90 3.3.4 Chuyển hoá zerumbone với số amine 101 3.3.5 Tổng hợp dẫn xuất zerumbone với chalcone thông qua cầu liên kết 1-ethylen-4-methylen-1,2,3-triazol 105 3.3.6 Tổng hợp dẫn xuất zerumbone với chalcone qua cầu liên kết trimethylen 128 3.4 Nghiên cứu hoạt tính sinh học hợp chất tổng hợp đƣợc 145 3.4.1 Hoạt tính sinh học dẫn xuất zerumbone với hydrazide 145 3.4.2 Hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ sản phẩm lai hoá zerumbone với chalcone 147 KẾT LUẬN 151 KIẾN NGHỊ NHỮNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO 153 CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ CÓ LIÊN QUAN 154 TÀI LIỆU THAM KHẢO 155 PHỤ LỤC 169 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT CTPT Công thức phân tử DMSO Dimetyl sunphoxit Đnc Điểm nóng chảy Đs Điểm sôi EI-MS Phổ khối va chạm electron ESI-MS Phổ khối bụi phân tử FT-IR Phổ hồng ngoại GC-MS Sắc ký khí ghép nối khối phổ HR-MS Phổ khối phân giải cao KLPT Khối lƣợng phân tử NMR Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân SKBM Sắc ký mỏng SKC Sắc ký cột THF Tetrahydrofuran TMAS Trimetylallylsilan TMS Trimetylsilan WHO Tổ chức Y tế giới DANH MỤC BẢNG Bảng Trang 1.1 Một số số hóa học tinh dầu củ Gừng gió vùng BTT ĐL-Việt Nam 1.2 Thành phần hóa học tinh dầu củ Gừng gió vùng BTT-VN 1.3 Thành phần hóa học tinh dầu thân, Gừng gió vùng BTT-VN 10 1.4 Thành phần hóa học tinh dầu hoa Gừng gió vùng BTT-VN 11 1.5 Thành phần hoá học tinh dầu củ Gừng gió sau tách 12 zerumbone kết tinh 1.6 Hàm lƣợng zerumbone tinh dầu Z zerumbet số vùng 17 giới 1.7 Một số phát có chứa zerumbone 18 1.8 Cƣờng độ gây độc tế bào ung thƣ zerumbone in vitro 20 2.1 Hiệu suất tinh dầu tính theo nguyên liệu tƣơi số nghiên 40 cứu 2.2 Thành phần hoá học tinh dầu Gừng gió sau lọc tinh thể 41 zerumbone (Zingiber zerumbet) 2.3 Thành phần hoá học tinh dầu Gừng tía (Zingiber purpureum) 41 2.4 Thành phần hoá học tinh dầu Ngải xanh (Zingiber ottensii) 42 2.5 Thành phần hoá học tinh dầu Nghệ đen (Curcuma zedoaria) 43 2.6 Hàm lƣợng zerumbone tinh dầu thuốc thuộc họ Gừng 44 3.1 Dữ liệu phổ NMR zerumbone 69 3.2 Kết tổng hợp hydrazide (1a-l) 72 3.3 Dữ liệu phổ 1H-NMR hydrazide béo (1a-f) 73 3.4 Các liệu phổ 13C-NMR hydrazide béo (1a-f) 74 3.5 Phổ 1H-NMR hydrazide thơm (1g-l) 75 3.6 Dữ liệu phổ MS hydrazide thơm (1g-l) 76 3.7 Kết tổng hợp sản phẩm ngƣng tụ zerumbone với hydrazide 78 3.8 Các tín hiệu phổ 1H-NMR sản phẩm ngƣng tụ 84 zerumbone với hydrazide béo (2a-f) 3.9 Các tín hiệu phổ 13C-NMR sản phẩm ngƣng tụ zerumbone với hydrazide béo (2a-f) 85 3.10 Các tín hiệu phổ 1H-NMR sản phẩm ngƣng tụ zerumbone với hydrazide thơm (2g-l) 86 3.11 Các tín hiệu phổ 13C-NMR sản phẩm ngƣng tụ zerumbone với hydrazide thơm (2g-l) 87 3.12 Phổ HR-MS hợp chất 2a-f 89 3.13 Phổ MS hợp chất 2g-l 89 3.14 Kết tổng hợp sản phẩm ngƣng tụ zerumbone oxide với hydrazide 93 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Trịnh Đình Chính (1995), Nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu số thuộc họ Gừng (Zingiberaceae) Việt Nam, Luận án PTS Khoa học Hóa học, Trƣờng ĐH Sƣ phạm Hà nội I Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr 536 Võ Văn Chi, Dƣơng Đức Tiến (1987), Phân loại thực vật Thực vật bậc cao, tr 461-464, NXB Đại học Trung học chuyên nghiệp, Hà Nội Lê Trần Đức (1997), Cây thuốc Việt Nam Trồng hái chế biến trị bệnh ban đầu, NXB nông nghiệp, Hà Nội tr 291-292 Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cỏ Việt nam, 3, NXB Trẻ Hà Nội, tr 553 Văn Ngọc Hƣớng (2011), Nghiên cứu công nghệ chiết tách zerumbone từ Gừng gió (Zingiber zerumbet Sm.) làm thuốc chống ung thư, Báo cáo tổng kết kết nghiên cứu khoa học công nghệ, Trƣờng Đại học KHTN, ĐHQGHN Văn Ngoc Hƣơng , Đỗ Thị Thanh Thúy CS (2004), “Cƣờng độ gây độc tế ̣ ́ bào ung thƣ hoạt tính kháng vi sinh vật zerumbone phân lập từ củ gừng Zingiber zerumbet vùng Tam Đảo”, Tạp chí Dược học, 34, tr 15-17 Văn Ngọc Hƣớng, Đỗ Thị Thanh Thuý, “Gừng dại (zingiber zerumbet sm.) vùng Tam Đảo - nguyên liệu quý cho điều chế zerumbone”, Tạp chí Khoa học Công nghệ, tập 44, số 3, 2006, tr 65-69 Lê Thị Thùy (2011), Nghiên cứu phương pháp phân lập zerumbone có chất lượng cao từ thân rễ Gừng gió (Zingiber zerumbet Sm.) chuyển hoá zerumbone thành hợp chất có hoạt tính sinh học, Luận văn ThS Hóa học, ĐHKHTN, ĐHQGHN, Hà Nội 10 Văn Ngọc Hƣớng , Nguyễn Công Yên CS (2005), “Hiệu ứng chống ung thƣ zerumbone chuột nhắt trắng dòng Swiss mang báng sarcoma 180”, Đặc san Ung thư học quý III, 3, tr 305-308 11 Văn Ngọc Hƣớng, Vƣơng Văn Trƣờng (2012), “Các hợp chất có hoạt tính sinh học Gừng gió (Zingiber zerumbet Sm.)”,Tạp chí Dược học, số 438, tr 10-13 12 Văn Ngọc Hƣớng, Nguyễn Thị Minh Thƣ, Nguyễn Thị Hƣơng, Lê Thị Minh Nguyệt, Nguyễn Mạnh Cƣờng, Nguyễn Quốc Bình (2011), “Khảo sát hàm lƣợng tinh dầu zerumbone củ Gừng gió (Zingiber zerumbet Sm.) số tỉnh Miền Bắc Việt Nam”, Tạp chí Hoá học & Ứng dụng, số 3(7), tr 23 13 Đỗ Tất Lợi (2005), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, in lần thứ mƣời ba, NXB Y học Hà Nội, tr 368-369 14 Lã Đình Mỡi, Lƣu Đàm Củ, Trần Minh Hợi, Trần Huy Thái, Ninh Khắc Bản (2002), Tài nguyên thực vật có tinh dầu Việt Nam, tập 2, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, tr 94-119 15 Đặng Nhƣ Tại, Ngô Thị Thuận (2010), Hoá học hữu tập 1, Nhà xuất giáo dục Việt Nam, Hà Nội, tr 582-590 16 Nguyễn Đình Thành (2011), Cơ sở phương pháp phổ ứng dụng hoá học, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 17 Nguyên Quang Thach va cs (2009), Cơ sơ công nghê sinh hoc , tâp III, Công ̃ ̣ ̀ ̉ ̣ ̣ ̣ nghê sinh hoc tê bao, NXB Giáo Dục, tr 341-450 ̣ ̣ ́ ̀ Tiếng Anh 18 Abdelwahab S I., Abdul A B., Mohan S Elhassan Taha M M., Syam S., Ibrahim M Y., Mariod A A., “Zerumbone induces apoptosis in T-acute lymphoblastic leukemia cells”, Leukemia Research, vol 35, no 2, pp 268– 271, 2011 19 Abdul A B., Abdullah M N H., Lajis M N., Tailan N D., Zain Z N M., Wahab S I A., Al-Zubairi A S (2009), Use of an anti-cancer compound, US Pat 0239953 A1 20 Adbul A B H., Al-Zubairi A S., Tailan N D., Wahab S I A., Zain Z N M., Ruslay S., Syam M M., (2008), “Anticancer activity of natural compound (Zerumbone) extracted from Zingiber zerumbet in human HeLa cervical cancer cells”, International Journal of Pharmacology, 4(3), pp.160– 168 21 Al-Zubairi A S., Abdul A B H., and Syam M M (2010), “Evaluation of the genotoxicity of zerumbone in cultured human peripheral blood lymphocytes”, Toxicology in vitro, vol 24, no 3, pp 707–712 22 Al-Zubairi A S., Abdul A B., Yousif M., Abdelwahab S I., Elhassan M M., Mohan S (2010), “In vivo and in vitro genotoxic effects of zerumbone”, Caryologia, vol 63, no 1, pp 11–17 23 Belsare D P., Pal S C., Kazi A A., Kankate R S., Vanjari S S (2010), “Evaluation of Antioxidant Activity of Chalcones and Flavonoids”, International Journal of ChemTech Research, 2(2), pp 1080-1089 24 Bhuiyan M N I., Chowdhury J U., Begum J (2009), “Chemical Investigation of the Leaf and Rhizome Essential Oil of Zingiber zerumbet (L) Smith from Bangladesh”, Bangladesh Juornal of Pharmacology, 4(1), pp 9-12 25 Bisset N G and Wichtl M., (1994), Herbal Drugs and Phytopharmaceuticals Stuttgart, Medpharm Scientific Publishers Ginger (Zingiber officinade), by Steven Foster © 2009, www.stevenfoster.com/ginger.html 26 Bui Van Thanh, Do N Dai, Tran D Thang, Nguyen Q Binh, Luu D Ngoc Anh, Isiaka A Ogunwande (2014), “Composition of essential oils of fourHedychium species from Vietnam”, Chemistry Central Journal, 8(1), pp 54-59 27 Chang-Ming J., Vera R., Chalchat J C., (2003), “Chemical Composition of the Essential Oil from Rhizomes, Leaves and Flowers of Zingiber zerumbet Smith from Reunion Island”, Journal of Essential Oil Reseach, 15(3), pp.202-205 28 Damodaran N P., Dev S., (1965), “Stereochemistry of zerumbone”, Tetrahedron Letters, 6(24), pp 1977-1981 29 Dev S (1960), “Studies of sesquiterpenes-XVI Zerumbone, amonocyclicsesquiterpene ketone”, Tetrahedron, 8, pp.171–180 30 Dev S., Anderson J E., Cormer V., Damodaran N P., Roberts J D (1968), “Nuclear magnetic resonance spectroscopy The conformational mobility of humulene and zerumbone”, Journal of the American Chemical Society, 90(5),pp 1246- 1248 31 Eguchi A., Kaneko Y., Murakami A., and Ohigashi H., (2007), “Zerumbone suppresses phorbol ester-induced expression of multiples cavenger receptor genes in THP-1 human monocytic cells”, Bioscience Biotechnology and Biochemistry, 71 (4), pp 935–945 32 Gul H I., Yerdelen K O., Das U., Gul M., Pandit B., Li P K., Mimmock J R (2008), “Synthesis and cytotoxicity of novel 3-aryl-1-(3- dibenzylaminomethyl-4-hydroxyphenyl)-propenones and related compound”, Chem Pharm Bull 56(12) pp.1657-1681 33 Gurib-Fakim A., Maudarbaccus N., Leach D N., Doimo L., Wohlmuth H (2002), “Essential oil composition of Zingiberaceae species from Mauritius”, Journal of Essential Oil Research, 12(4), pp 271-273 34 Hall S R., Nimgirawath S., Raston C L., Sittatrakul A., Thadaniti S., Thirasasana N., White A H A., (1981), “Crystal structure of zerumbone [(E, E, E)-2, 6, 9, 9-Tetramethylcycloundeca- 2, 6, 10- trien -1-one]”, Australian Journal of Chemistry, 34(10), pp 2243- 2247 35 Hasnah M Sirat, Aziz B Nordin (1994), “Essential Oil of Zingiber ottenii Valeton”, Journal of Essential Oil Reseach, 6(6), pp 635-636 36 Hoffman A., Spetner L M., Burke M (2002), “Redox-regulated mechanism may account for zerumbone's ability to suppress cancer-cell proliferation”, Carcinogenesis, 23 (11), pp 1961-1972 37 Huang G C., Chien T Y., Chen L G., Wang C C (2005), “Antitumor effects of zerumbone from Zingiber zerumbet in P-388D1 cells in vitro and in vivo”, Planta Medica, 71(3), pp 219–224 38 Ibrahim M Y., Abdul A B., Ibrahim T A T., Abdelwahab S I., Elhassan M M., Syam M M., (2010), “Evaluation of acute toxicity and the effect of single injected doses of zerumbone on the kidney and liver functions in Sprague Dawley rats”, African Journal of Biotechnology, 9(28), pp 44424450 39 Indu Sasidharan, A Nirmala Menon, (2010), “Comparative chemical composition and antimicrobial activity fresh & dry ginger oils (Zingiber officinale Roscoe)”, International Journal Of Current Pharmaceutical Research, 2(4), pp 40-43 40 Isabelle Lechat-Vahirua, Patrice Francois, Chantal Menut, Gérard Lamaty, Jean Marie Bessiere (1993), “Aromatic Plants of French Polynesia I Constituents of the essential oils of zhizomes of three Zingiberaceae: Zingiber zerumbet Smith, Hedychium coronarium Koenig and Etlingera Cevuga Smith”, Journal of Essential Oil Research, 5(1), pp 55-59 41 Isiaka A Ogunwande, Nureni O Olawore, Kasali A Adeleke (2005), “Contribution to the Study of Essential Oil of Xylopia Aethiopia (DUNAL) A RICH: Isolation and Characterization of Zerumbone”, Journal of Essential Oil Bearing Plants, 8(2), pp 159-164 42 Jiang J J., Chang T C., Hsu W L., Hwang J M., Hsu L Y (2003), “Synthesis and biological activity of sulfur-containing aryl- aldehyde Schiff bazơ” Chem Phar Bull Tokyo, 51, pp 1307-1310 43 Joseph R (1998), Karyomorphometrical Analysis and Exploration of Major Essential Oil Constituents in Zingiberaceae, Thesis of Doctor of Philosophy, Mahatma Gandhi University Kottayam, India 44 Jun-Wan Shin, Kohta Ohnishi, Akira Murakami, Jeong-Sang Lee, Joydeb Kumar Kundu, Hye-Kyung Na, Hajime Ohigashi, and Young-Joon Surh (2011), “Zerumbone Induces Heme Oxygenase-1 Expression in Mouse Skin and Cultured Murine Epidermal Cells through Activation of Nrf2”, Cancer Prevention Research, 4(6), pp 860-870 45 Kim M., Miyamoto S., Yasui Y., Oyama T., Murakami A., Tanaka T (2009), “Zerumbone, a tropical ginger sesquiterpene, inhibits colon and lung carcinogenesis in mice”, International Journal of Cancer, 124(2), pp 264– 271 46 Keong Y S., Alitheen N B., Mustafa S., Aziz S A., Rahman M A., and Ali A M (2010) “Immunomodulatory effects of zerumbone isolated from roots of Zingiber zerumbet”, Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences, 23 (1) pp 75–82 47 Kitayama, T., Awata, Y., Kawai, Y., Tsuji, A., Yoshida, Y (2008), “Asymmetric synthesis of versatile monoepoxyzerumbone and monoepoxyzerumbol”, Tetrahedron: Asymmetry, 19, pp 2367–2373 48 Kitayama T., Furuya A., Moriyama C., Masuda T., Fushimi S., Kubo H., Kawai Y., Sawada S (2006), “Elucidation of the Sharpless epoxideation of zerumbone”, Tetrahedron: Asymmetry, 17, pp 2311–2316 49 Kitayama T., Iwabuchi R., Minagawa S., Shiomi F., Cappiello J., Sawada S., Utsumi R., Okamoto T (2004), “Unprecedented olefin-dependent histidine–kinase inhibitory of zerumbone ring-opening material”, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 14, pp 5943-5946 50 Kitayama T., Masuda T., Kawai Y., Hill R K., Takatani M., Sawada S., Okamoto T (2001), “The chemistry of zerumbone Part 3: Stereospecific creation of five stereogenic centers by double Sharpless reaction”, Tetrahedron: Asymmetry, 12, pp 2805–2810 51 Kitayama T., Masuda T., Sakai K., Imada C., Yonekura Y., Kawai Y (2006), “Remarkable synthesis and structure of allenen type zerumbone”, Tetrahedron, 62, pp 10859–10864 52 Kitayama T., Nagao, R., Masuda T., Hill R K., Morita M., Takatani M., Sawada S., Okamoto T (2002), “The chemistry of zerumbone IV Asymmetric synthesis of zerumbol”, Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 17, pp 75–79 53 Kitayama T., Ohta S., Kawai Y., Nakayama T., Awata M (2010), “Synthesis of optically active tetrahydrozerumbone”, Tetrahedron: Asymmetry, 21, pp 11–15 54 Kitayama T., Okamoto T., Hill R K., Kawai Y., Takahashi S.,Yonemori S., Yamamoto Y., Ohe K., Uemura S., Sawada, S (1999), “Chemistry of zerumbone Simplified Isolation, Conjugate Addition Reactions, and a Unique Ring Contracting Transannular Reaction of Its Dibromide”, J Org Chem., 64, pp 2667–2672 55 Kitayama T., Yamamoto K., Utsumi R., Takatani M., Okamoto T., Hill R K., Kawai Y., Sawada S (2001), “Chemistry of zerumbone Regulation of ring bond cleavage and unique antibacterial activities of zerumbone derivatives”, Biosci Biotechnol Biochem, 65(10), pp 2193–2199 56 Kitayama T., Yokoi T., Kawai Y., Hill R K., Morita M., Okamoto T., Yamamoto Y., Fokin V V., Sharpless K B., Sawada S (2003), “Chemistry of zerumbone Part 5: Structural transformation of the dimethylamine derivatives”, Tetrahedron, 59(26), pp 4857–4866 57 Kitayama T., Yoshida Y., Furukawa J., Kawai Y., Sawada S (2007), “Asymmetric synthesis of triepoxyzerumbol”, Tetrahedron:Asymmetry, 18, pp 1676–1681 58 Komada M., Shiobara Y., Sumitomo H., Mitani K., Ueno K (1987), “Synthesis of Macrocycli”, Chem Pharm Bull., 35(10), pp 4039-4042 59 Lakshmi S.R.Arambewela, Menuka Arawwawala (2007), “Volatile Oil of Alpinia galanga Willd of Sri Lanka”, Journal of Essential Oil Reseach, 19, pp 455-456 60 Lide D R., (2009), CRC Handbook of Chemistry and Physics; Physical Constants of Organic Compounds, 89th Edition, CRC Press/Taylor and Francis, Boca Raton, Florida, pp 374-390 61 M.V.Jyothi, Y Rajendra Prasad, P Venkatesh and M Sureshreddy (2012), “Synthesis and Antimicrobial Activity of Some Novel Chalcones of 3-Acetyl Pyrpidine and their Pyrimidine Derivatives”, Chemical Science Transactions, 1(3), pp 716-722 62 Masuda.T., Jitoe A., Kato S., Nakatani N (1991), “Acetylated flavonol glycosides from Zingiber zerumbet”, Phytochemistry, 30, pp 2391-1392 63 Matthes H W D., Luu B., Ourisson G (1982), “Transannular cyclizations of zerumbone epoxide”, Tetrahedron, 38(21), pp 3129-3135 64 MoÈllenbeck S., KoÈnig T., Schreier P., Schwab W., Rajaonarivony J., Ranarivelo L (1997), “Chemical Composition and Analyses of Enantiomers of Essential Oils from Madagascar”, Flavour And Fragrance Journal, 12, pp 63-69 65 Mohamad S B A., (2006), Kajian kimia zerumbone daripada Zingiber zerumbet, Smith, Tesis ini dikemukakan sebagai memenuhi syarat penganugerahan ijazah Sarjana Sains (Kimia), Fakulti Sains, Universiti Teknologi Malaysia 66 Murakami A., Takahashi D., Kinoshita T., Koshimizu K., Kim H W., Yoshihiro A., Nakamura Y., Jiwajinda S., Terao J., Ohigashi H (2002), “Zerumbone, a Southeast Asian ginger sesquiterpene, markedly suppresses free radical generation, proinflammatory protein production, and cancer cell proliferation accompanied by apoptosis: the α,β-unsaturated carbonyl group is a prerequisite”, Carcinogenesis,23, pp.795–802 67 Murakami A., Takahashi M., Jiwajinda S., Koshimizu K., Ohigashi H (1999), “Identification of zerumbone in Zingiber zerumbet Smith as a potent inhibitor of 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate-induced Epstein-Barr virus activation”, Biosci Biotechnol Biochem., 63(10), pp 1811–1812 68 Murakami A, Tanaka T, Lee J.Y, Surh Y J, Kim H W, Kawabata K, Nakamura Y, Jiwajinda S, Ohigashi H (2004), “Zerumbone, a sesquiterpene in subtropical ginger, suppresses skin tumor initiation and promotion stages in ICR mice”, International Journal of Cancer, 110(4), pp 481–490 69 Nakamura Y., Yoshida C., Murakami A., Ohigashi H., Osawa T., and Uchida K., (2004) “Zerumbone, atropical ginger sesquiterpene, activates phase II drug metabolizing enzymes”, FEBS Letters, 572 (1-3), pp 245–250 70 N X Dung, T D Chinh, D D Rang, P A Leclereq (1993), “The constituents of the rhizome oil of Zingiber zerumbet (L.) Sm From Vietnam”, Journal of Essential Oil Research, 5(5), pp 553-555 71 N X Dung, T D Chinh, P A Leclereq (1995), “Chemical investigation of the acrial part of Zingiber zerumbet (L.) Sm from Vietnam”, Jour Essent Oil Res.(USA), 7(2), pp 153-157 72 Normant H (1965), French Patent Fr 1,411,091 73 Nguyen Hai Nam, Young-Jae You, Dong Ho Hong, Hwan Muk Kim, Byungzun Ahn (2003), “Cytotoxic 2',5'-dihydrochalcones with unexpected antiangiogenic activity”, European Journal of Medicinal Chemistry, 38(2), pp 179-187 74 Ohnishi K., Irie K., and Murakami A., (2013) “Modulation of protein quality control systems as novel mechanisms underlying functionality of food phytochemicals”, Functional Food in Health and Disease, (10), pp 400– 415 75 Ohnishi K., Nakahata E., Irie K., and Murakami A., (2013) “Zerumbone, an electrophilic sesquiterpene, induces cellular proteostress leading to activation of ubiquitin-proteasome system and autophagy”, Biochemical and Biophysical Research Communications, 430 (2), pp 616–622 76 Ohnishi K., Ohkura S., Nakahata E (2013) “Non-speciic protein modifications by a phytochemical induce heat shock response for selfdefense”, PloS ONE, 8(3), Article ID e58641 77 Pitchuanchom S., Yenjai C Weerapreeyakul N (2009), “Synthesis of Bioreductive Esters of Zerumbone Derivatives”, PACCON2009 (Pure and Applied Chemistry International Conference, pp 394-396 78 Pitchuanchom S., Songsiang U., Weerapreeyakul N., and Yenjai C (2011) “Anticancer activity of the bioreductive and nonbioreductive zerumbone derivatives”, Letters in Drug Design and Discovery, 8(6), pp 536–543 79 Popp F D., Kirsch W (1961), “Synthesis of potential anticancer agents V Schiff bases and related compounds” J Org Chem., 26 (10), pp 3858-3860 80 Pragadheesh V S, Yadav A, Singh M, Chanotiya C S (2013), “Characterization of Volatile Components of Zingiber roseum Essential Oil Using Capillary GC on Modified Cyclodextrins”, Natural Product Communications, 8(2), pp 221 – 224 81 Pusapati Madan Ranjit, Shaik Abdul Rahaman, Kola Phani Kumar, Yalamanchali Rajendra Prasad, Thotakura Santhipriya, Gurram Chinna Venkata Sai Manikanta, Nissankara rao Lakshmi Sudeepthi (2013), “Synthesis, Screening and in vitro anticancer activity of piperazine nucleus containing novel chalcones on different cell lines”, International Journal of Pharm Tech Research, 5(1), pp 284-293 82 Phan M Giang, Phan T Son, Hui Z Jin, Jeong H Lee, Jung J Lee (2009), “Comparative Study on Inhibitory Activity of Zerumbone and Zerumbone 2,3-Epoxide on NF-κB Activation and NO Production”, Sciential Pharmaceutica, 77, pp 589-595 83 Rahman H S., Rasedee A., Yeap S K., Othman H H., Chartrand M S., Namvar F., Abdul A B., How C W “ReviewArticle: Biomedical Properties of a Natural Dietary Plant Metabolite, Zerumbone, in Cancer Therapy and Chemoprevention Trials”, BioMed Research International, Vol 2014, Article ID 920742, 20 pages 84 Rahman H S., Rasedee A., How C W., Abdul A B., Zeenathul N A., Othman H H., Saeed M I., Yeap S K (2013) “Zerumbone-loaded nanostructured lipid carriers: preparation, characterization, and antileukemic effect”, International Journal of Nano medicine, vol 8, pp 2769–2781 85 Rahman H S., Rasedee A., Abdul A B., Zeenathul N A., Othman H H., Yeap S K., How C W., Hafiza W A (2014 ), “Zerumbone-loaded nanostructured lipid carrier induces G2/M cell cycle arrest and apoptosis via mitochondrial pathway in human lymphoblastic leukemia cellline” International Journal Nano medicine, vol 9, pp 527–538 86 Rodriguez A M., Enriz R D., Santagata L N., Jauregui E A., Pestchanker M J., Giordano O S (1997), “Structure cytoprotective activity relationship of simple molecules containing an alpha,beta-unsaturated carbonyl system”, J Med Chem., 40, pp 1827-1834 87 Sabulal Baby, Mathew Dan, Abdul R M Thaha, Anil J Johnson, Rajani Kurup, Prasanth Balakrishnapillai, Chong Keat Lim (2009), “High content of zerumbone in volatile oils of Zingiber zerumbet from southern India and Malaysia”, Flavour and Fragrance Journal, 24(6), pp 301-308 88 Saha A., Kumar R., Kumar R., Devakumar C (2010), “Development and assessment of green synthesis of hydrazide”, Indian Journal Chemistry, 49, pp 526-531 89 Sakinah S A S., Handayani S T., and Hawariah L P A., (2007) “Zerumbone induced apoptosis in liver cancer cells via modulation of Bax/Bcl-2 ratio”, Cancer Cell International, 7( 4), pp 1–11 90 Samir Kumar Sadhu, Amina Khatun, Takashi Ohtsuki, Masami Ishibashi (2007), “First isolation of sesquiterpenes and flavonoids from Zingiber spectabile and identification of zerumbone as the major cell growth inhibitory component”, Natural Product Reseach, 21, pp 1242-1247 91 Santosh Kumar S C., Srinivas P., Negi P S., Bettadaiah B K (2013), “Antibacterial and antimutagenic activities of novel zerumbone Analogues”, Food Chemistry, 141, pp 1097–1103 92 Sharifah Sakinah S A., Tri Handayani S., Azimahtol Hawariah L P (2007), “Zerumbone induced apoptosis in liver cancer cells via modulation of Bax/Bcl-2 ratio”, Cancer cell International, 7(4), pp 1186-1192 93 Shirahama H, Chhabra B R, Matsumoto T (1981), “ Conversion of humulene to zerumbone”, Chem Lett., pp.717-718 94 Sivasothy Y., Awang K., Ibrahim H., Thong K L., Fitrah N., Koh X P., Tan L K (2012), “Chemical Composition and antibacterial activities of essential oils from Zingiber spectabile Griff”, Journal of Essential Oil Reseach, 24 (3), pp 305-313 95 Sogawa S., Yasunori N., Hiroki U., Akihiro I., Tokutaro M., Hitoshi M and Toshio S (1993), “3,4-dihydroxychalcones as potent 5-lipoxygenase and cyclooxygenase inhibirors”, Journal of Medicinal Chemistry, 36(24), pp 3904-3909 96 Songsiang U., Pitchuanchom S., Boonyarat C., Hahnvajanawong C., Yenjai C (2010), “Cytotoxicity against cholangiocarcinoma cell lines of zerumbone derivatives”, European Journal of Medicinal Chemistry, 45, pp 3794-3802 97 Srivastasa A K., Srivastasa S K., Shah N C (2000), “Essential Oil of Composition of Zingiber zerumbet (L.) Sm from India”, Journal of Essential Oil Reseach, 12(5), pp.595-597 98 Srivastasa A K., Srivastasa S K., Shah N C (2001), “Constituents of the Rhizome Essential Oil of Curcuma amada Roxb from India”, Journal of Essential Oil Reseach, 13(1), pp 63-64 99 Sukari M A., Mohd Sharif N W., Yap A L C., Tang S W., Neoh B K., Rahmani M., Ee G C L., TaufiqYap Y H., Yusof U K (2008), “Chemical constituents variations of essential oils from rhizomes of four zingiberaceae species”, The Malaysian Journal of Analytical Sciences, 12(3), pp 638 – 644 100 Sukatta U., Rugthaworn P., Punjee P., Chidchenchey S., Keeratinijakal V (2009), “Chemical Composition and Physical Properties of Oil from Plai (Zingiber cassumunar Roxb.) Obtained by Hydro Distillation and Hexane Extraction”, Nat Sci., 43, pp 212 – 217 101 Sung B., Jhurani S., Ahn K., Mastuo Y., Yi T., Guha S., Liu M., Aggarwal B (2008), “Zerumbone down-regulates chemokine receptor CXCR4 expression leading to inhibition of CXCL12-induced invasion of breast and pancreatic tumor cells”, Cancer Research, 68, pp 8938–8944 102 Sung B., Murakami A., Oyajobi B O., and Aggarwal B B., (2009) “Zerumbone abolishes RaNKL-induced NF-κB activation, inhibits osteoclastogenesis, and suppresses human breast cancer-induced bone loss in athymic nude mice”, Cancer Research, 69 (4), pp 1477–1484 103 Takada Y., Murakami A., Aggarwal B B (2005), “Zerumbone abolishes NFkappaB and IkappaBalpha kinase activation leading to suppression of antiapoptotic and metastatic gene expression, upregulation of apoptosis, and downregulation of invasion”, Oncogene, 24, pp 6957–6969 104 Vasudeva Rao Avupati and Rajendra Prasad Yejella (2014), “Chacoles: A mini review”, World journal of pharmacy and pharmaceutical sciences, (10), pp 1713-1742 105 Thubthimthed S., Limsiliwong P., Rerk-am U., Suntorntanasat T (2003), “Chemical composition and cytotoxic activity of the essential oil of Zingiber ottensii”, in Proceedings of the III WOCMAP Congress on Medicinal and Aromatic Plants - Volume 1: Bioprospecting and Ethnopharmacology, 675, pp 107-109 106 Songsiang U., Pitchuanchom S., Boonyarat C., Hahnvajanawong C., Yenjai C (2010), “Cytotoxicities against cholagiocarcinoma cell lines of Zerumbone derivatives”, European Journal of Medicinal Chemistry, 45, pp 3794-3802 107 Xian M., Ito K., Nakazato T., Shimizu T., Chen C K., Yamato K., Murakami A., Ohigashi H., Ikeda Y., Kizaki M (2007), “Zerumbone, a bioactive sesquiterpene, induces G2/M cell cycle arrest and apoptosis in leukemia cells via a Fas- and mitochondria-mediated pathway”, Cancer Science, 98(1), pp 118–126 108 Yannai S., (2003), Dictionary of Food Compounds with CD-ROM: Additives, Flavors, and Ingredients, Chapman and Hall/CRC Press, USA, pp 862-863 109 Yasodha Sivasothy, Wong Keng Chong, Abdul Hamid, Ibrahim M Eldeen, Shaida Fariza Sulaiman, Khalijah Awang (2011), “Essential oils of Zingiber officinale var rubrum Theiladeand their antibacterial activities”, Food Chemistry, 124, pp 514–517 110 Yodkeeree S., Sung B., Limtrakul P., and Aggarwal B B., (2009) “Zerumbone enhances TRAIL-induced apoptosis through the induction of death receptors in human colon cancer cells: evidence for an essential role of reactive oxygen species”, Cancer Research, 69(16), pp 6581–6589 111 Yu F., Okamoto S., Harada H., Yamazaki K., Misawa N., Utsumi R (2011), “Zingiber zerumbet CYPA7BA1 catalyzes the conversion of αhumulene to 8-hydroxy-α-humulene in zerumbone biosynthesis”, Cell Mol Life Sci, 68, pp 1033-1040 112 Zdzislawa Nowakowska (2007), “A review of anti-infective and antiinflammatory chalcones”, European Journal of Medicinal Chemistry, 42(2), pp 125-137