ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGÔ ĐỨC TRỌNG NGHIÊN CỨU HOÁ HỌC VÀ NHẬN DẠNG MỘT SỐ NHÓM CHẤT CÓ TRONG CÂY CHÓ ĐẺ RĂNG CƯA (PHYLLANTHUS URINARIA L., EUPHORBIACEAE) LUẬN V ĂN THẠ C SĨ HOÁ HỌC THÁI NGUYÊN - 2008 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM - NGÔ ĐỨC TRỌNG NGHIÊN CỨU HOÁ HỌC VÀ NHẬN DẠNG MỘT SỐ NHÓM CHẤT CÓ TRONG CÂY CHÓ ĐẺ RĂNG CƯA (PHYLLANTHUS URINARIA L., EUPHORBIACEAE) Chuyên ngành : Hoá hữu Mã số : 60.44.27 LUẬN V ĂN THẠ C SĨ HOÁ HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS PHẠM VĂN THỈNH THÁI NGUYÊN - 2008 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Phạm Văn Thỉnh - Người thầy tận tình hướng dẫn, động viên giúp đỡ suốt trình học tập, nghiên cứu thực luận văn Tôi xin chân trân trọng cảm ơn TS Nguyễn Quyết Tiến, TS Phạm Thị Hồng Minh, Th.S Vũ Anh Tuấn, Th.S Hứa Văn Thao người thầy động viên giúp đỡ bước trình nghiên cứu thực luận văn Xin chân thành cảm ơn phòng hoạt chất sinh học trường Đại học Y Thái Nguyên sở sản xuất kinh doanh thuốc thành phẩm Bác sĩ Hoàng Sầm, phòng nghiên cứu cấu trúc - Viện Hóa học tận tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để hoàn thành kế hoạch nghiên cứu Nhân dịp này, xin chân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Ban lãnh đạo Khoa Hóa, Khoa Sau đại học - Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho hoàn thành luận văn Thái Nguyên, tháng năm 2008 Tác giả Ngô Đức Trọng LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả NGÔ ĐỨC TRỌNG DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN SKLM : Sắc kí lớp mỏng UV : Ultraviolet spectrocopy MS : Mass Spectroscopy EI-MS : Electron Impact Mass Spectroscopy LC-MS : Liqud chromatography - Mass Spectroscopy FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy NMR : Nuclear Magnetic Resonance : 1H-Nuclear Magnetic Resonance H-NMR 13 : 13C- Nuclear Magnetic Resonance DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer COSY : Correlated Spectroscopy HSQC : Heteronuclear Spectroscopy- Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation HIV : Human Immunodeficiency Virus đvC : Đơn vị Cacbon C-NMR DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1: Khối lƣợng chất tổng số đƣợc chiết phân đoạn chó đẻ cƣa (Phyllanthus urinaria L)………………………… ……….26 Bảng 2.2: Phát nhóm chất chó đẻ cƣa…………………27 Bảng 2.3: Kết thử hoạt tính sinh học dịch chiết thô từ chó đẻ cƣa (Phyllanthus urinaria L)………………… ……………… … 29 Bảng 2.4: Số liệu phổ 13C-NMR (CDCl3, 125Mhz) chất PH-1 chó đẻ cƣa (Phyllanthus urinaria L)………………… ……… ….30 Bảng 2.5: Phổ 1H-NMR 13C-NMR chất PE-3………… ……………….32 Bảng 3.1: Số liệu phổ 13 C-NMR (CDCl3, 125Mhz) PH-1 chó đẻ cƣa (Phyllanthus urinaria L) phổ  -sitosterol [15]….… 40 Bảng 3.2: Số liệu phổ NMR PE-1 số liệu phổ NMR phần mềm ACD/NMR 5-hidroxymetylfufural 44 Bảng 3.3: Số liệu phổ NMR PE-2 số liệu phổ NMR phần mềm ACD/NMR axit gallic 48 Bảng 3.4: Số liệu phổ NMR PE-3 số liệu phổ phần mềm ACD/NMR chất kampherol 52 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1: Cây chó đẻ cƣa (Phyllanthus urinaria L, Euphorbiaceae Hình 2.1: Đƣờng kính vùng ức chế xung quanh giếng thạch (mm) theo phƣơng phƣơng pháp khuyếch tán thạch 28 Hình 3.1: Phổ FT-IR -sitosterol (PH-1) .36 Hình 3.2: Phổ 1H-NMR -sitosterol (PH-1) 37 Hình 3.3: Phổ 13C-NMR ATP  -sitosterol (PH-1) 38 Hình 3.4: Phổ 1H-NMR-DMSO PE-1 42 Hình 3.5: Phổ 13C-NMR-DMSO PE-1 43 Hình 3.6: Phổ 1H-NMR-DMSO PE-2 46 Hình 3.7: Phổ 13C-NMR-DMSO PE-2 47 Hình 3.8: Phổ 1H-NMR-AcetoneD6 PE-3 50 Hình 3.9: Phổ 13C-NMR-AcetoneD6 PE-3 51 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1: Quy trình ngâm chiết mẫu 26 MỤC LỤC Lời cảm ơn Lời cam đoan Danh mục chữ viết tắt dùng luận văn Danh mục bảng Danh mục hình sơ đồ MỞ ĐẦU CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Mô tả thực vật 1.2 Tác dụng sinh học chi Phyllanthus 1.2.1 Một số công dụng chi Phyllanthus 1.2.2 Một số tác dụng dƣợc lý chi Phyllanthus .5 1.3 Tình hình nghiên cứu hoá học thực vật chi Phyllanthus 1.3.1 Một số đại diện nhóm tecpenoit 1.3.2 Một số đại diện khung axit 1.3.3 Một số đại diện Lignan .9 1.3.4 Một số đại diện khung flavonoit 11 1.3.5 Một số hợp chất phenolic khác 12 1.3.6 Một số hợp chất nhóm ankaloit .15 1.4 Tình hình nghiên cứu hóa học loài Phyllanthus urinaria L 16 CHƢƠNG II THỰC NGHIỆM 23 2.1 Đối tƣợng phƣơng pháp nghiên cứu 23 2.1.1 Thu mẫu cây, xác định tên khoa học phƣơng pháp xử lý mẫu 23 2.1.2 Phƣơng pháp phân lập hợp chất từ dịch chiết 23 2.1.3 Phƣơng pháp khảo sát xác định cấu trúc hoá học hợp chất 24 2.2 Dụng cụ, hoá chất thiết bị nghiên cứu 24 2.2.1 Dụng cụ hoá chất 24 2.2.2 Thiết bị nghiên cứu 25 2.3 Các dịch chiết từ chó đẻ cƣa (Phyllanthus urinaria L) 25 2.3.1 Các dịch chiết .25 2.3.2 Khảo sát định tính dịch chiết 27 2.3.3 Thử hoạt tính sinh học 27 2.4 Phân lập, tinh chế chất từ 29 2.4.1 Dịch chiết n-hexan 29 2.4.2 Dịch chiết etylaxetat (PE) .31 2.4.2.1 Chất PE-1 31 2.4.2.2 Chất PE-2 31 2.4.2.3 Chất PE-3 32 CHƢƠNG III THẢO LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 34 3.1 Nguyên tắc chung 34 3.2 Xác định định tính nhóm chất thiên nhiên 34 3.3 Phân lập nhận dạng hợp chất 35 3.3.1 -sitosterol (PH-1) .35 3.3.2 5-Hydroxymetylfufural (PE-1) .41 3.3.3 Axit gallic (PE-2) 45 3.3.4 Kampherol (PE-3) 49 3.4 Thử hoạt tính sinh học 53 KẾT LUẬN 55 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN .56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 PHỤ LỤC .62 MỞ ĐẦU Từ xưa đến nay, thuốc dân gian đóng vai trò quan trọng đời sống hàng ngày người Từ trước có đời thuốc tây, nhiều loài cỏ tự nhiên sử dụng dân gian để chữa bệnh có hiệu Rất nhiều loại bệnh tật chữa khỏi nhờ thảo dược Ngày hợp chất tự nhiên phân lập từ cỏ ứng dụng rộng rãi nhiều ngành công nghiệp, nông nghiệp, chúng dùng để sản xuất thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, làm nguyên liệu cho ngành công nghiệp thực phẩm mỹ phẩm v.v Mặc dù công nghệ tổng hợp hoá dược ngày phát triển mạnh mẽ, tạo biệt dược khác sử dụng công tác phòng, chữa bệnh Điều góp phần làm tăng tuổi thọ người, song nhu cầu sử dụng cỏ để làm thuốc ngày tăng lên, khoa học đại soi sáng, chúng có chứa biệt dược khó tổng hợp Mặt khác việc dùng thuốc nam không gây tác dụng phụ Có nhiều môn khoa học nghiên cứu thuốc đời Việc nghiên cứu thuốc giúp cho hiểu rõ thành phần cấu trúc hóa học, hoạt tính sinh học, tác dụng dược lí thuốc Trên sở nghiên cứu tạo chất có hoạt tính sinh học cao mong muốn để làm thuốc chữa bệnh Cây chó đẻ cưa thuốc sử dụng từ lâu giới Việt Nam Trong Y học dân tộc nhân dân dùng làm thuốc để chữa nhiều loại bệnh như: đau viêm họng, đinh râu, mụn nhọt, viêm da lở ngứa, sản hậu ứ huyết đau bụng, trẻ em tưa lưỡi, chàm má, bệnh viêm gan,… có hiệu Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Thực vật chó đẻ cưa có nhiều ứng dụng quan trọng gần nhà khoa học nước quan tâm chọn làm đối tượng nghiên cứu, nước ta có công trình nghiên cứu thành phần hóa học dược lí học chó đẻ cưa Với mục đích nghiên cứu tìm hiểu thành phần hóa học hợp chất có hoạt tính sinh học chó đẻ cưa, góp phần làm tăng thêm hiểu biết nguồn thực vật làm thuốc phong phú quý giá Việt Nam Chúng chọn chó đẻ cưa (Phyllanthus urinaria L.) làm đối tượng nghiên cứu cho công trình nghiên cứu Tên đề tài là: “Nghiên cứu hóa học nhận dạng số nhóm chất có chó đẻ cưa (Phyllanthus urinaria L., Euphorbiaceae)” Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Mô tả thực vật Cây chó đẻ cưa gọi diệp hạ châu, diệp hoè thái, lão nha châu, trân châu thảo, cam kiềm, rút đất, khao ham (Tày), prakphle (Campuchia) Tên khoa học là: Phyllanthus urinaria L, thuộc họ thầu dầu (Euphorbiaceae) Phân bố địa lý: Cây chó đẻ cưa phân bố rộng khắp vùng nhiệt đới cận nhiệt đới Ở Việt Nam, chó đẻ cưa thường thấy mọc tự nhiên hầu hết tỉnh thành nước, điển hình như: Thái Nguyên, Bắc Ninh, Nghệ An, Hà Giang,… Trên giới loại mọc nhiều nước Châu Á như: Trung Quốc, Ấn Độ, Malaysia, Philippin, Inđonexia, Myanma, Thái Lan,… Châu Mĩ như: Brazil, Argentina,…[5] Hình 1.1: Cây chó đẻ cưa (Phyllanthus urinaria L, Euphorbiaceae) Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Đặc điểm sinh trưởng phát triển: Cây chó đẻ cưa loại cỏ mọc hàng năm, cao chừng 30 cm, thân gần nhẵn, mọc thẳng đứng, mang cành, thường có màu đỏ tía Cây có vị Lá mọc so le lưỡng hệ hay có cuống ngắn Hoa mọc kẽ lá, đơn tính, màu đỏ nâu Hoa đực hoa gốc Hoa đực đầu cành, hoa cuối cành Hoa cuống có cuống ngắn Quả nang không cuống hình cầu dẹt Đường kính đạt tới 2mm Hạt ba cạnh hình trứng màu nâu nhạt có vân ngang [5] 1.2 Tác dụng sinh học chi Phyllanthus 1.2.1 Một số công dụng chi Phyllanthus Các loài thuộc chi Phyllanthus (Euphorbiaceae) sử dụng rộng rãi y học dân tộc nhiều nước để chữa bệnh thận, bệnh tiểu đường, bệnh viêm gan B…[7] Các loài dùng làm thuốc nhiều loài Phyllanthus urinaria L, Phyllanthus niruri L Phyllanthus amarus Schum et Thonn [4] Một số thuốc dùng chó đẻ đắng (Phyllanthus amarus Schum et Thonn) [6]: Chữa viêm gan virus: Chó đẻ đắng khô 20g, sắc nước lần Trộn chung nước sắc Thêm 50g đường, đun sôi cho tan đường Chia làm lần uống ngày Khi kết xét nghiệm HBsAg (-) ngừng thuốc Chữa xơ gan cổ trướng thể năng: Chó đẻ đắng khô 100g sắc nước lần Trộn chung nước sắc, thêm 150g đường, đun sôi cho tan đường, chia nhiều lần uống ngày (thuốc đắng), liệu trình 30-40 ngày Khẩu phần ăn hàng ngày phải hạn chế muối, tăng đạm (thịt, cá, trứng, đậu phụ) Riêng chó đẻ cưa (Phyllanthus urinaria L) y học dân tộc nhân dân dùng để chữa đau viêm họng, đinh râu, mụn nhọt, viêm da, lở ngứa, sản hậu ứ huyết đau bụng, trẻ em tưa lưỡi, chàm má, chữa bệnh gan, sốt, rắn rết cắn có hiệu Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Một số thuốc dùng chó đẻ cưa (Phyllanthus urinaria L) [5], [6]: Nhân dân ta thường dùng toàn hái làm thuốc, mùa thu hái quanh năm tốt vào mùa hạ Thường dùng tươi có phơi khô, ngày uống 20-40g tươi, khô, sắc đặc, uống thay nước Chữa suy gan (do sốt rét, sán lá, lỵ amip, ứ mật, nhiễm độc): Chó đẻ cưa khô 20g, cam thảo đất khô 20g Sắc nước uống hàng ngày Đối với bệnh da: Cây tươi dã nát với muối đắp da với liều lượng không hạn chế 1.2.2 Một số tác dụng dƣợc lý chi Phyllanthus Năm 1961, phòng Đông Y Viện Vi trùng Việt Nam, nghiên cứu tác dụng kháng sinh chó đẻ cưa thấy kết tác dụng kháng sinh sau: Tụ cầu trùng (0,5 cm), Typhi (0,9 cm), Flexneri (1,1cm), Sonnei (0 cm), Shiga (1cm), Subtilis (0,4 cm), Coli (0 cm) Năm 1977, nhóm bác sĩ Việt Nam, khoa Tiêu hoá, Gan, Mật sử dụng thuốc gia truyền Lương y Trần Xuân Thiện gồm vị chó đẻ đắng, xuyên tâm liên, dành dành để điều trị cho người có kết xét nghiệm HBsAg (+) Sau thời gian điều trị, kết xét nghiệm âm tính coi khỏi Tỷ lệ đạt 26/98 bệnh nhân Ngoài ra, thuốc giúp thể người dùng sản xuất kháng thể chống HBsAg (59/98 người) Liều điều trị trung bình 4-5 tháng [6] Năm 1988 tác giả Blunberg Thiogarajan công bố điều trị 37 bệnh nhân viêm gan siêu vi B chó đẻ cưa Phyllanthus amarus Phyllanthus niruri đạt kết âm tính 22/37 bệnh nhân sau 30 ngày Các tác giả chứng minh Phyllanthus amarus có chứa chất làm ức chế men pelymerase DNA virus viêm gan siêu vi B [5] Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Năm 2002, Nguyễn Bá Kinh cộng công bố kết nghiên cứu lâm sàng Bệnh viện Thanh Nhàn (Hà Nội), sử dụng chế phẩm LIV/94 (chó đẻ cưa thành phần thuốc) điều trị cho bệnh nhân viêm gan mãn tính năm (2001-2002) đạt kết tốt Thuốc có tác dụng làm giảm HBsAg bệnh nhân [6] Những công trình nghiên cứu hóa học gần loài Phyllanthus phát vài lignan, flavonoit tanin thủy phân có tác dụng bảo vệ gan, có khả làm phần lớn kháng nguyên HBsAg, ức chế mạnh HIV transcriptase ngược [21] Các thí nghiệm in vitro chó đẻ với kháng nguyên HBsAg với tổn thương gan cacbontetraclorit gây nên chứng minh chó đẻ có khả chống virus viêm gan B Cây chó đẻ cưa có tác dụng kháng khuẩn tụ cầu vàng, trực khuẩn mủ xanh, trực khuẩn Coli, Shigella dysenteriae, S flexneri, S shigae, Moraxella kháng nấm Aspergillus fumigatus [1] 1.3 Tình hình nghiên cứu hoá học thực vật chi Phyllanthus Cho đến người ta phát chi Phyllanthus L họ thầu dầu (Euphorbiaceae) có 700 loài, gồm từ thân thảo đến bụi hay gỗ nhỏ Thành phần hoá học chi phong phú đa dạng [11] Ở Việt Nam có 44 loài, loài đáng ý nhiều Phyllanthus urinaria L (chó đẻ cưa), Phyllanthus niruri L (chó đẻ thân xanh) Phyllanthus amarus Schum et Thonn (chó đẻ đắng hay diệp hạ châu đắng) 1.3.1 Một số đại diện nhóm tecpenoit Từ loài Phyllanthus flexuosus phân lập tritecpen mới, cấu trúc là: olean-12-en-3β,15α-diol; lup-20 (29)-en-3β,24-diol; olean-12-en-3β,24-diol; oleana-11:13(18)-dien-3β,24-diol olean-12-en3β,15α,24-triol hai chất biết là: tritecpen diol betulin [33]; lup-20(29)en-3β,15α-diol [41] Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Theo [39], từ loài Phyllanthus oxyphyllus tách được: 29-nor-3,4seco-friedelan tritecpen (axit 29-nor-3,4-seco-friedelan-4(23),20(30)-dien-3oic) secquitecpen guaiane secquitecpen (5-hydroxy-6,9epoxyguaiane) Những hợp chất đánh giá có khả chống oxi hóa tốt nồng độ thử nghiệm IC50 = 0.017 ± 0.001 mM O HOOC HO 29-nor-3,4-seco-friedelane tritecpen Guaiane secquitecpen Từ loài Phyllanthus reticulates phân lập hợp chất 21α-hydroxyfriedel-4(23)-en-3-one vài triterpenoit khác, biết là: friedelin, sitosterol, friedelan-3β-ol, glochidonol 21α-hydroxyfriedelan - - on [47] Theo tài liệu [46], từ loài Phyllanthus plyanthus Châu Phi tác giả tìm số tritecpenoit: phyllanthol, phyllanthone, (20S)-3βacetoxy-24-methylenedammaran-20-ol, δ-amyrin acetate, lupenone (20S)3α-acetoxy-24-methylenedammaran-20-ol HO H H H CH3OCO H (20S)-3β-acetoxy-24-methylenedammaran-20-ol Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Từ loài Phyllanthus acidus tách hai pentacyclic tritecpenoit, là: phyllanthol olean-12-en-3β-ol (β-amyrin) [35] Từ loài Phyllanthus niruri tách acyclic tritecpen, cấu trúc dự đoán dựa phương pháp phân tích phổ là: 3,7,11,15,19,23-hexamethyl-2Z,6Z,10Z,14E,18E,22E-tetracoshexen-1-ol [10] Từ loài Phyllanthus watsonii tách hợp chất tritecpen mới: 26Nor-D:A-friedooleanane tritecpen với lupenyl palmitate, friedelin, epifriedelanol, glochidone, glochidonol, lupeol, lup-20(2) [29] 1.3.2 Một số đại diện khung axit Từ loài Phyllanthus amarus phân lập axit thiobarbituric, axit ascorbic [42] Từ dịch chiết n-hexan loài Malaysia tách axit oleanolic axit ursolic [16], axit amariinic, axit repandusinic A, axit geraniinic B chất 1-O-galloyl-2,4-dehydrohexahydroxydiphe noyl -glucopyranozơ elaeocarpusin [26] Từ loài Phyllanthus emblica tách axit phyllaemblic [52], axit ascorbic [23] Từ loài Phyllanthus fraternus tách axit indole-3-butyric, axit 1naphthaleneacetic [31] axit trichadenic B có cấu trúc axit 3β-hydroxyD: A-friedooleanan-27-oic, xác định dựa vào phương pháp phân tích Xray [38] HOOC H HO Axit trichadenic B Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 1.3.3 Một số đại diện Lignan Trong loài Phyllanthus discoides người ta tách phyllanthin C14H17O2N, phyllantin C13H15O3N [27] phyllantidin C 13H15O2N [20] Trong loài Phyllanthus niruri L có phyllanthin C 24H34O6, hypophyllanthin C 24H30O7, niranthin C24H30O7 (cấu trúc niranthin (+)3,4,3′,4′,9,9′-hexamethoxy-8:8′-butyrolignan), nirtetralin C24H30O7 phyllteralin C24H34O6 [8] Dựa liệu phổ khối lượng phổ cộng hưởng từ hạt nhân, cấu trúc nirtetralin phyltetralin 1phenyl tetralins H H RO R1O CH2OCH3 H3CO CH2OCH3 H3CO CH2OCH3 CH2OCH3 H H H R2 OCH3 OCH3 O OCH3 O 5a Phyllanthin R= R =CH3, R2 =H Hypophyllantin 5b Niranthin R+R1= -CH2 -R2 = OCH3 H H CH2OCH3 CH2OCH3 O O CH2OCH3 H H H3CO CH2OCH3 H H OCH3 OCH3 OCH3 OCH3 Nirtetralin Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên OCH3 Phyllteralin http://www.lrc-tnu.edu.vn 10 Cũng từ phần dịch chiết n-hexan loài này, người ta tách triacontanal triacontanol [40] Các chất hypophyllanthin, phyllanthin phân lập cặn n-hexan phương pháp sắc kí lỏng trung áp (MPLC) từ loài Phyllanthus niruri L vùng Đình Bảng, Từ Sơn, Bắc Ninh nước ta [4], hai lignan chứng minh có hoạt tính bảo vệ gan mô hình gây độc tế bào gan CCl4 D- GalN/ TNF- [3], [45] Theo tài liệu [34], từ loài Phyllanthus niruri tách diarylbutane lignan mới, chúng coi sản phẩm chuyển hóa thuộc hệ thống 5′ -desmethoxy niranthin Trong hai chất (9a) (9b) sản phẩm chuyển hóa từ axit veratrylidene piperonylidene succinic, (10a) chuyển hóa từ axit veratrylidene 3,4,5-trimethoxy benzylidene succinic (10b) chuyển hoá từ (10a) O O CH2OR RO CH2OMe CH2OR RO CH2OMe OMe OMe OMe 9a R=H; 9b R=CH3 OMe OMe 10a R=H; 10b R=CH3 Từ loài Phyllanthus polyphyllus L tách lignan arylnaphthalide, phyllamyricin C, justicidin B diphyllin [51] Từ loài Phyllanthus anisolobus tách ichtyotoxic lignan justicidin B lignan-glucozit phyllanthostatin A [43] Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 11 1.3.4 Một số đại diện khung flavonoit Từ dịch chiết etanol loài Phyllanthus emblica L phân lập quecxetin catechin Đây hai chất có hoạt tính chống oxi hóa tốt [49] OH HO HO O O OH OH OH OH * * OH OH OH O 11 Quecxetin 12 Catechin Cũng vấn đề nghiên cứu khả chống oxi hóa, nhà khoa học khảo sát khả từ dịch chiết methanol loài phyllanthus đặc biệt từ Ấn Độ là: Phyllanthus debilis, Phyllanthus debilis, Phyllanthus urinaria, Phyllanthus virgatus, Phyllanthus maderaspatensis, Phyllanthus amarus Tất dịch chiết cho kết tốt [22] Từ loài Phyllanthus sellowianus phân lập rutin isoquercitrin hai flavonoit chiếm thành phần chủ yếu [19] OH HO O OH HO OH O OH O -Ramnozo -glucozo OH O 13 Rutin OH O 14 isoquercitrin Theo tài liệu [36], từ loài Phyllanthus niruri tách flavanon: 8-(3-metyl-but-2-enyl)-2-phenyl chroman-4-on (15) 2-(4-hydroxyphenyl)- Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn [...]... phú và quý giá của Việt Nam Chúng tôi chọn cây chó đẻ răng cưa (Phyllanthus urinaria L.) làm đối tượng nghiên cứu cho công trình nghiên cứu này Tên đề tài là: Nghiên cứu hóa học và nhận dạng một số nhóm chất có trong cây chó đẻ răng cưa (Phyllanthus urinaria L., Euphorbiaceae) Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 3 CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Mô tả thực vật Cây chó. ..2 Thực vật chó đẻ răng cưa có nhiều ứng dụng quan trọng nhưng gần đây mới được các nhà khoa học các nước quan tâm chọn làm đối tượng nghiên cứu, còn ở nước ta hiện có rất ít công trình nghiên cứu về thành phần hóa học và dược lí học của cây chó đẻ răng cưa Với mục đích nghiên cứu và tìm hiểu thành phần hóa học các hợp chất có hoạt tính sinh học của cây chó đẻ răng cưa, góp phần làm tăng... phụ) Riêng cây chó đẻ răng cưa (Phyllanthus urinaria L) trong y học dân tộc được nhân dân dùng để chữa đau viêm họng, đinh râu, mụn nhọt, viêm da, lở ngứa, sản hậu ứ huyết đau bụng, trẻ em tưa lưỡi, chàm má, chữa bệnh gan, sốt, rắn rết cắn rất có hiệu quả Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 5 Một số bài thuốc dùng cây chó đẻ răng cưa (Phyllanthus urinaria L)... thầu dầu (Euphorbiaceae) có 700 loài, gồm từ những cây thân thảo đến cây bụi hay cây gỗ nhỏ Thành phần hoá học của chi này rất phong phú và đa dạng [11] Ở Việt Nam có 44 loài, các loài đáng được chú ý nhiều hơn cả là Phyllanthus urinaria L (chó đẻ răng cưa) , Phyllanthus niruri L (chó đẻ thân xanh) và Phyllanthus amarus Schum et Thonn (chó đẻ đắng hay diệp hạ châu đắng) 1.3.1 Một số đại diện của nhóm tecpenoit... Giang,… Trên thế giới loại cây này mọc nhiều ở các nước Châu Á như: Trung Quốc, Ấn Độ, Malaysia, Philippin, Inđonexia, Myanma, Thái Lan,… Châu Mĩ như: Brazil, Argentina,…[5] Hình 1.1: Cây chó đẻ răng cưa (Phyllanthus urinaria L, Euphorbiaceae) Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 4 Đặc điểm sinh trưởng và phát triển: Cây chó đẻ răng cưa là một loại cỏ mọc hàng năm,... nghiệm in vitro của cây chó đẻ với kháng nguyên HBsAg và với tổn thương gan do cacbontetraclorit gây nên đã chứng minh cây chó đẻ có khả chống virus viêm gan B Cây chó đẻ răng cưa có tác dụng kháng khuẩn đối với tụ cầu vàng, trực khuẩn mủ xanh, trực khuẩn Coli, Shigella dysenteriae, S flexneri, S shigae, Moraxella và kháng nấm đối với Aspergillus fumigatus [1] 1.3 Tình hình nghiên cứu hoá học thực vật của... Cây chó đẻ răng cưa còn gọi là diệp hạ châu, diệp hoè thái, lão nha châu, trân châu thảo, cam kiềm, rút đất, khao ham (Tày), prakphle (Campuchia) Tên khoa học là: Phyllanthus urinaria L, thuộc họ thầu dầu (Euphorbiaceae) Phân bố địa lý: Cây chó đẻ răng cưa phân bố rộng khắp ở các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới Ở Việt Nam, cây chó đẻ răng cưa thường thấy mọc tự nhiên ở hầu hết các tỉnh thành trong cả... sử dụng chế phẩm LIV/94 (chó đẻ răng cưa là một trong 3 thành phần chính của thuốc) điều trị cho các bệnh nhân viêm gan mãn tính trong 2 năm (2001-2002) đạt kết quả tốt Thuốc có tác dụng làm giảm và sạch HBsAg của bệnh nhân [6] Những công trình nghiên cứu hóa học gần đây về các loài Phyllanthus đã phát hiện một vài lignan, flavonoit và tanin thủy phân có tác dụng bảo vệ gan, có khả năng làm sạch phần... Phyllanthus 1.2.1 Một số công dụng của chi Phyllanthus Các loài cây thuộc chi Phyllanthus (Euphorbiaceae) được sử dụng rộng rãi trong y học dân tộc của nhiều nước để chữa bệnh thận, bệnh tiểu đường, bệnh viêm gan B…[7] Các loài được dùng làm thuốc nhiều hơn cả là 3 loài Phyllanthus urinaria L, Phyllanthus niruri L và Phyllanthus amarus Schum et Thonn [4] Một số bài thuốc dùng cây chó đẻ đắng (Phyllanthus. .. gan siêu vi B bằng chó đẻ răng cưa Phyllanthus amarus và Phyllanthus niruri đạt kết quả âm tính 22/37 bệnh nhân sau 30 ngày Các tác giả còn chứng minh Phyllanthus amarus có chứa chất làm ức chế men pelymerase DNA của virus viêm gan siêu vi B [5] Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 6 Năm 2002, Nguyễn Bá Kinh và cộng sự đã công bố kết quả nghiên cứu lâm sàng tại