Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân LỜI NÓI ĐẦU Theo tổ chức Y tế Thế giới (WHO), hàng năm giới có khoảng 10,1 triệu trường hợp mắc ung thư Cũng theo tổ chức cho biết, năm có khoảng 6,7 triệu người chết ung thư Tỷ lệ chết ung thư chiếm tới 12% tổng số nguyên nhân gây tử vong người Các loại ung thư hàng đầu tổng kết nam giới ung thư phổi, dày, đại trực tràng, tiền liệt tuyến, gan; nữ giới ung thư vú, đại trực tràng, cổ tử cung, dày phổi [30] Trong thập niên trở lại đây, tỷ lệ mắc ung thư có xu hướng gia tăng hầu hết quốc gia giới Qua kết thống kê cho biết, toàn cầu có khoảng 25 triệu người sống chung với bệnh ung thư Con số ước tính lên tới 30 triệu người vào năm 2020 không tìm liệu pháp can thiệp chữa trị kịp thời Riêng Việt Nam, năm có 150.000 người mắc ung thư Trong đó, khoảng 100.000 người chết bệnh quái ác Riêng số ca tử vong ung thư đại trực tràng ước tính khoảng 55.000 trường hợp Đây xem số đáng báo động thách thức lớn lao Y học nước nhà Hiện nay, giới ung thư đại trực tràng chiếm khoảng 11,5% tổng số trường hợp ung thư chiếm tới 15,2% tổng số trường hợp tử vong có nguyên nhân từ ung thư Loại ung thư nhận định liên quan đến chế độ ăn uống lối sống, thường gặp nước phát triển có xu hướng tăng nhanh nước phát triển Căn bệnh thường xuất người có độ tuổi 50 có xu hướng dần “trẻ hóa” thập niên trở lại Đặc biệt, người có tiền sử viêm đại trực tràng gia đình, dòng họ có người bị ung thư đại trực tràng nguy mắc ung thư đại trực tràng xảy cao Nhiều nghiên cứu rằng, phận ung thư đại trực tràng có xu hướng chung di truyền theo dòng họ liên quan đến gen gây đột biến (mutator gene) [4] Học viên Khóa 2010 – 2012 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân Trong ung thư đại trực tràng, hội chứng HNPCC – ung thư ruột kết không polyp di truyền gọi hội chứng Lynch chiếm khoảng 15% Hội chứng xem bệnh di truyền tương đối phổ biến gần biết đến bệnh riêng biệt [30] Bên cạnh đó, HNPCC hội chứng có khuynh hướng ung thư không đại trực tràng mà liên quan đến bệnh ung thư quan khác dày, ruột non, não, tụy, buồng trứng, cổ tử cung da HNPCC hội chứng có tính chất di truyền, có liên quan mật thiết đến sai hỏng gen thuộc hệ thống gen sửa chữa bắt cặp sai MMR Hệ thống gồm gen MLH1, MSH2, MSH3, MSH6, PMS2, PMS6 Trong đó, MLH1 MSH2 cho hai gen có liên kết chặt đến hình thành HNPCC Bởi vì, MLH1 tham gia vào trình sửa chữa sai hỏng MSH2 lại đóng vai trò nhận diện lỗi sai hỏng tái ADN Khoảng 40% trường hợp mắc hội chứng Lynch với đột biến xác định có liên quan đến đột biến gen MSH2 Hàng trăm đột biến gen có khả dẫn đến ung thư đại trực tràng loại ung thư khác liên quan đến HNPCC [22] Mặc dù ung thư đại trực tràng, có ung thư đại trực tràng mang khuynh hướng di truyền dạng ung thư có tỷ lệ mắc phải Việt Nam cao nghiên cứu gen liên quan đến bệnh chưa nhiều, đặc biệt nghiên cứu gen MSH2 Chính thế, tiến hành “Phân tích di truyền gen sửa chữa bắt cặp sai MSH2 từ bệnh nhân ung thư đại trực tràng” nhằm đưa kết nghiên cứu bước đầu gen MSH2 bệnh nhân ung thư đại trực tràng Việt Nam, nghiên cứu gen MMR khác nhằm phục vụ có hiệu việc chẩn đoán phát sớm bệnh ung thư đại trực tràng có xu hướng ngày gia tăng Việt Nam Học viên Khóa 2010 – 2012 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 NHỮNG NÉT KHÁI QUÁT VỀ UNG THƯ, BỆNH UNG THƯ VÀ GEN UNG THƯ 1.1.1 Ung thư bệnh ung thư Ung thư phân chia cách bất thường nhóm tế bào tạo thành khối u Các khối u tập hợp tế bào có quan hệ di truyền với nhau, chúng có khả phân chia không kiểm soát Chính thế, thuật ngữ “ung thư” theo nghĩa hẹp dùng để khối u có khả xâm lấn tổ chức mô xung quanh gồm tế bào bình thường [4] Để phân biệt khối u lành khối u ác tính ta dựa vào khả xâm lấn tế bào bất thường tế bào xung quanh Nếu khối u lành, hình thành nên tổ chức tế bào có khả sinh sản bất thường, tiếp xúc với mạch máu hay mạch bạch huyết khả di chuyển tới vị trí, mô hay quan khác [4] Ngược lại, khối u ác tính di chuyển (di căn) tới vị trí tiếp tục tăng sinh mạnh vị trí mà chúng chuyển tới Các u di có khả gây rối loạn cục chức mô, chí mô liên đới dẫn đến tử vong Các khối u thường phát sinh từ tế bào ban đầu bị biến đổi di truyền định khiến chúng có khả tăng sinh mạnh, gọi trình phát sinh ung thư hay phát sinh ung thư Các khối u thường bắt nguồn từ u nhỏ lành tính sau chuyển sang trạng thái ác tính di Các khối u có xu hướng tích lũy biến đổi di truyền tạo nên đặc tính Sự tích lũy gen ung thư tế bào khối u nguồn gốc phát sinh ung thư [4] Bệnh ung thư dùng để nhóm bệnh đa dạng người Và số đó, vài bệnh đơn gây nên biến đổi nhỏ sinh lí, phần lớn gây rối loạn sinh lí nghiêm trọng Các bệnh ung thư phổ biến Học viên Khóa 2010 – 2012 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân người trưởng thành bệnh ung thư biểu mô (caxinôm), ung thư mô liên kết (sacôm), ung thư bạch huyết bạch cầu gọi khối u dạng lỏng [4] Các bệnh ung thư phát sinh biến đổi gen tạo nên alen đột biến Trong thực tế, phát sinh bệnh ung thư lại liên quan đến nhiều nhân tố Nhờ tiến khoa học kĩ thuật với công cụ nghiên cứu phân tích di truyền đại dần làm sáng tỏ chế phát sinh ung thư Đặc biệt, nghiên cứu khoảng 20 năm trở lại mang lại kiến thức thiết thực quán Những nghiên cứu hình thành nên nguyên lý di truyền học ung thư Tuy nhiên, tới đầu kỉ XIX ung thư thật ghi nhận [4] 1.1.2 Gen ung thư (oncogene) Gen ung thư dạng đột biến làm tăng nguy ung thư làm thúc đẩy trình phát sinh ung thư Ngoài ra, gen ung thư coi dạng alen đặc biệt gen bình thường xuất đột biến [4] Còn gen gây ung thư coi dạng đặc biệt gen ung thư Nếu gen ung thư sinh đột biến, gen gây ung thư làm thay đổi không làm chức sản phẩm protein mà gen tạo Trong trình tăng trưởng, khối u tích lũy dần gen ung thư Sự tích lũy chủ yếu theo ba đường sau: Sự tích lũy truyền qua tế bào dòng sinh dục Sự tích lũy đột biến tự phát tế bào sôma Sự tích lũy đột biến lây nhiễm virut Trong đó, gen ung thư dòng sinh dục chiếm tỉ lệ nhỏ (từ 0,1 – 10%) lại đáng kể trường hợp gây ung thư người [4] Còn gen ung thư dòng tế bào sôma đươc gọi đột biến sôma Đột biến sôma dùng để trình phát sinh đột biến sản phẩm trình đột biến tạo Học viên Khóa 2010 – 2012 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân Cả hai loại đột biến dòng sinh dục đột biến sôma làm biến đổi gen bình thường tạo nên dạng alen đột biến Nhưng tất đột biến gen dẫn đến phát sinh ung thư Riêng dạng tích lũy gen ung thư thể nhiễm virut phổ biến thường giới hạn số bệnh định (ví dụ virut viêm gan B, C gây ung thư gan, virut HPV gây ung thư cổ tử cung ) Ở dạng phát sinh ung thư này, virut đóng vai trò quan trọng Nó không nhân tố truyền gen ung thư mà trực tiếp làm biến đổi môi trường mà gen ung thư nhân lên nhanh chóng phát tán rộng rãi 1.2 NHỮNG HIỂU BIẾT VỀ UNG THƯ ĐẠI TRỰC TRÀNG 1.2.1 Lịch sử nghiên cứu ung thư đại trực tràng Ung thư đại trực tràng bệnh lý phổ biến bệnh ung thư có liên quan đến hệ tiêu hóa Trong đó, ung thư đại trực tràng không polyp di truyền xem hội chứng thường gặp nhắc đến ung thư đại trực tràng Vào cuối kỉ XIX (năm 1895), ung thư đại trực tràng phát Aldred Warthin Theo quan sát ông gia đình làm thợ may, có nhiều người bị chết ung thư đại trực tràng ung thư nội mạc tử cung [34] Tuy nhiên, ông dừng lại việc quan sát mà chưa sâu vào nghiên cứu ghi chép nên đặc tính di truyền hội chứng biết đến sau công bố bác sĩ Henry Lynch Theo kết ông cho biết, hệ đầu, ung thư dày chiếm ưu Càng sau, ung thư đại tràng xuất nhiều Sự thay đổi phản ánh biến đổi môi trường có liên quan đến giai đoạn phát triển bệnh ung thư loại ung thư, đồng thời khẳng định, biến đổi môi trường nhân tố quan trọng dẫn đến ung thư đại tràng [4] Học viên Khóa 2010 – 2012 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân Hội chứng Lynch chia thành hội chứng Lynch I hội chứng Lynch II để phân biệt gia đình có ung thư đại tràng với gia đình có ung thư đại tràng lẫn loại ung thư khác Ngày nay, người ta cho rằng, gia đình có bệnh ung thư liên quan tới ung thư ruột kết coi HNPCC [17] Đến năm 1993, sai hỏng gặp hệ thống gen MMR bệnh nhân mắc ung thư ruột kết phát cung cấp đầu mối quan trọng trình nghiên cứu ung thư đại trực tràng di truyền Nghiên cứu tiến hành đột biến đoạn đột biến khuếch đại gen nhằm gen ung thư gen áp chế khối u Kết quả, tìm thấy biến đổi sôma độ dài trình tự lặp lại biết đến vi vệ tinh [19], [36] Một nghiên cứu khác tìm thấy biến đổi liên quan đến hình thành khối u đoạn đầu ruột kết Gần nhất, người ta nỗ lực lập đồ cho vùng bị tính dị hợp tử LOH phát đột biến trình tự vi vệ tinh Nhờ người ta khám phá chất di truyền ung thư đại trực tràng khẳng định, hội chứng số gen xảy đột biến khác nhau, di truyền qua hệ biểu rõ rệt số dòng họ Ngoài ra, tính hỗn tạp gen gây ung thư bệnh nhân ung thư ruột kết di truyền biết đến tác nhân gây khó khăn chẩn đoán phát bệnh [20] 1.2.2 Sơ lược bệnh ung thư đại trực tràng Ung thư đại trực tràng loại ung thư biểu mô, chiếm 11,5% tổng số ca ung thư chiếm tới 15,2% tổng số trường hợp tử vong ung thư Loại ung thư thường liên quan đến chế độ ăn uống lối sống, gặp nhiều nước phát triển, đặc biệt nước phương Tây có xu hướng gia tăng nước phát triển [4] Riêng Việt Nam, ung thư đại trực tràng ba loại ung thư phổ biến hay gặp hệ tiêu hóa Do đó, ngày có nhiều dự án tập trung nghiên cứu nhằm tìm nguyên nhân chủ yếu dẫn đến tình trạng Theo thống kê Học viên Khóa 2010 – 2012 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân Hội Ung thư Thành phố Hồ Chí Minh, ung thư đại trực tràng nằm số bệnh ung thư có số người mắc cao Một khảo sát tình trạng ung thư Thành phố Hồ Chí Minh cho thấy, ung thư đại trực tràng xếp thứ nam giới (sau ung thư gan, phổi, dày) xếp thứ nữ giới (sau ung thư cổ tử cung ung thư vú) Hiện nay, y học chưa biết xác nguyên nhân gây ung thư đại trực tràng Tuy nhiên, có yếu tố dẫn đến nguy chắn làm dễ mắc bệnh tuổi tác Vì 9% bệnh nhân ung thư đại trực tràng 50 tuổi, có tiền sử bị polyp, viêm loét đại tràng bệnh Crohn (một loại bệnh hồi tràng – đoạn cuối ruột non bị tổn thương) gia đình có người mắc ung thư đại tràng hay đường ruột Ung thư đại trực tràng hội chứng phổ biến phân chia thành loại chính, gồm: hội chứng u tuyến polyp theo dòng họ (FAP) (Hình 1), hội chứng HNPCC bệnh ung thư khác có liên quan đến hệ tiêu hóa Trong đó, hội chứng u tuyến polyp theo dòng họ đặc trưng bệnh nhân mang hội chứng hình thành nhiều polyp ruột già từ trẻ Các khối u quan sát chiếm tỷ lệ nhỏ, số có khả hình thành u ác tính Hội chứng HNPCC đặc trưng không xuất polyp mà thay vào xuất u tuyến Chính u tuyến có nguy tiến triển thành ung thư cao nhiều [4] 80% người mắc ung thư ruột già dạng HNPCC có nguy mắc ung thư đại trực tràng Tuổi trung bình người mắc bệnh ung thư ruột già đơn phát 61, Học viên Khóa 2010 – 2012 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân bệnh nhân HNPCC phát triển ung thư độ tuổi trung bình 42, tức sớm 20 năm Đối với phụ nữ, có khoảng 20 – 60% bệnh nhân HNPCC có nguy mắc ung thư nội mạc tử cung Tuổi trung bình cho chẩn đoán ung thư nội mạc tử cung 46 – 62 Trong số phụ nữ mắc HNPCC phát triển thành ung thư ruột kết ung thư nội mạc tử cung, khoảng 50% xuất ung thư nội mạc tử cung từ trước [17] Có thể xem xét tỷ lệ mắc bệnh ung thư khác có liên quan đến HNPCC Bảng Bảng 1: Thống kê bệnh ung thư liên quan đến HNPCC [17] Ung thư liên quan đến Tỷ lệ mắc Nguy mắc Tuổi phát HNPCC HNPCC bệnh bệnh Đại trực tràng 5.5% 80% 44 Nội mạc tử cung 2.7% 20-60% 46 Dạ dày T (p.Glu859X), c.2579 C>A (p.Ser860X) [18] Trong năm 2009, Salehi phát hai đột biến vị trí khung đọc 2556 2586 [28] Những đột biến nằm cách xa vị trí đột biến tìm thấy bệnh nhân 62 tuổi Việt Nam tương ứng khoảng 13 đến 43 nucleotide Học viên Khóa 2010 – 2012 65 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu thu được, tới số kết luận sau: Đã nhân thành công 09 tổng số 16 exon gen MSH2 nhờ kỹ thuật PCR, bao gồm: thiết kế cặp mồi đặc hiệu, tối ưu thành phần phản ứng nhiệt độ gắn mồi cho exon 2, 3, 6, 7, 8, 12, 13, 14 15 Sử dụng kỹ thuật PCR-SSCP phân tích đột biến exon lựa chọn, phát mô hình điện di sai khác bệnh nhân Trong đó, mô hình thuộc exon 2, mô hình thuộc exon 3, mô hình thuộc exon 7, mô hình thuộc exon mô hình thuộc exon 15 Giải trình ADN exon gen MSH2 từ mẫu có mô hình PCR-SSCP sai khác, phát đột biến bao gồm: đột biến nucleotide A vị trí 5193 (vùng intron nằm trước exon gen MSH2); đột biến thay nucleotide vị trí codon 199 nucleotide G bị thay T (c.199 G>T) exon dẫn tới thay đổi axit amin prolin (CCG) thành axit amin glutamin (CAG) chuỗi polypeptide gen MSH2 tạo đột biến thay C>A vị trí 77942 (tương ứng codon 848 exon 15) thuộc gen MSH2 KIẾN NGHỊ Trên sở kết trên, có số kiến nghị sau: Tiếp tục phân tích di truyền exon lại gen MSH2 để có kết luận chung di truyền ung thư đại trực tràng đột biến gen MSH2 gây Học viên Khóa 2010 – 2012 66 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân Mở rộng hướng nghiên cứu với gen lại thuộc hệ thống MMR để có sở liệu chung chẩn đoán sớm ung thư đại trực tràng Áp dụng vài phương pháp khác HET DGGE nhằm làm tăng hiệu phân tích tính di truyền sàng lọc đột biến Học viên Khóa 2010 – 2012 67 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Trịnh Đình Đạt (2009), Công nghệ sinh học, Tập 4, NXB Giáo Dục, Hà Nội Võ Thị Thương Lan (2009), Giáo trình sinh học phân tử tế bào ứng dụng, NXB Giáo dục Đinh Đoàn Long, Đỗ Lê Thăng (2009), Cơ sở Di truyền học Phân tử Tế bào, NXB Đại học Quốc gia Hà Nội, Hà Nội Đinh Đoàn Long, Nguyễn Thị Hồng Vân, “Cơ sở Di truyền học Ung thư” (Tài liệu in) Hoàng Thị Sèn (2005), Giáo trình giải phẫu người, Đại học Thái Nguyên Lê Duy Thành (2006), Cơ sở di truyền chọn giống thực vật, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Đỗ Lê Thăng, Quyền Đình Thi, Nguyễn Mộng Hùng, Nguyễn Huỳnh Minh Quyên, Nguyễn Chí Thành (2009), Công nghệ sinh học phân tử - Nguyên lý ứng dụng ADN tái tổ hợp – Bernard R Glick, Jack J Pasternak, NXB Khoa học Kỹ thuật, (tr43) Tài liệu tiếng Anh Aarnio M, Sankila R, Pukkala E, Salovaara R, Aaltonen L, de la Chapelle A, Peltomäki P, Mecklin J-P, Järvinen H (1999), “Cancer risk in mutation carriers of DNA mismatch repair genes”, Int J Cance, 81, pp 214–218 Cecily PV, Elaine L, Wade SS (2008), “Confirmation of single exon deletions in MLH1 ADN MSH2 using quantitative PCR”, ARUP institute for clinical ADN Experimental pathology, Salt Lake City Học viên Khóa 2010 – 2012 68 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân 10 Chapman Anthony Hugh & Jean François Adell (2004) Radiology and imaging of the colon Springer ISBN: 3540435972, 9783540435976 11 De la Chapelle A (2004), “Genetic Predisposition to Colorectal Cancer: Lynch Syndrome (HNPCC)”, Nature Publishing Group , Nat Rev Cancer, 4(10) 12 Hendriks YM, de Jong AE, Morreau H, et al (2006), “Diagnostic approach ADN management of Lynch syndrome (hereditary nonpolyposis colorectal carcinoma): a guide for clinicians”, CA Cancer J Clin,56(4), pp 213-238 13 Huang J, Kuismanen SA, Liu T, et al (2001), “MSH6 and MSH3 are rarely involved in genetic predisposition to nonpolypotic colon cancer”, Cancer Res,61(4), pp 1619-1623 14 Iaccarino I, Marra G, Palombo F, Jiricny J (1998), “hMSH2 and hMSH6 play distinct roles in mismatch binding ADN contribute differently to the ATPase activity of hMutSalpha”, EMBO J, 17(9), pp 2677-2686 15 Jiricny J (2000), “Mediating mismatch repair”, Nat Genet, 24(1), pp 6-8 16 Loukola A, Vilkki S, Singh J, Launonen V, Aaltonen LA (2000), “Germline ADN somatic mutation analysis of MLH3 in MSI-positive colorectal cancer”, Am J Pathol, 157(2), pp 347-352 17 Lynch, H T., Smyrk, T., Watson, P., Lanspa, S J., Boman, B M., Lynch, P M., Lynch, J F., Cavalieri (1991), “Hereditary colorectal cancer” Semin Oncol, 18: 337 – 366 18 Mangold E et al 2005 Spectrum and frequencies of mutations in MSH2 and MLH1 identified in 1,721 German families suspected of hereditary nonpolyposis colorectal cancer Int J Cancer: 116, 692–702 Học viên Khóa 2010 – 2012 69 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân 19 Manuel Perucho, “Genetic and Epigenetic Modification of MLH1” (2000), American Journal of Pathology, 157:1052-1053 20 Minna Nyström-Lahti, Ramon Parsons, Pertti Sistonen, Lea Pylkkänen, Lauri A Aaltonen, Fredrick S Leach, Stanley R Hamilton, Patrice Watson, Earlene Bronson, Ramon Fusaro, Jennifer Cavalieri, Jane Lynch, Stephen Lanspa, Tom Smyrk, Patrick Lynch, Thomas Drouhard, Kenneth W Kinzler, Bert Vogelstein, Henry T Lynch, Albert de la Chapelle, and Päivi Peltomäki (1994), “Mismatch Repair Genes on Chromosomes 2p and 3p Account for a Major Share of Hereditary Nonpolyposis Colorectal Cancer Families Evaluable by Linkage”, Am J Hum Genet, 55(4): 659–665 21 Modrich P (2006), “Mechanisms in eukaryotic mismatch repair”, J Biol Chem, 281(41), 30305-30309 22 Myers RM, Maniatis T, Lerman LS Detection and localization of single base changes by denaturing gradient gel electrophoresis Methods Enzymol 155: 501-527, 1987 23 Ohmiya N, Matsumoto S, Yamamoto H, Baranovskaya S, Malkhosyan SR, Perucho M (2001), “Germline ADN somatic mutations in hMSH6 ADN hMSH3 in gastrointestinal cancers of the microsatellite mutator phonotype” Gene, 272(1-2), pp 301-313 24 Orita M, Iwahana H, Kanazawa H, Hayashi K, Sekiya T (1989), “Detection of polymorphism of human DNA by gel electrophoresis as single strand conformation polymorphism”, Proc Natl Acad Sci USA, 86, pp 27662770 25 Papp J, Kovacs ME, Olah E (2007), “Germline MLH1 ADN MSH2 mutational spectrum including frequent large genomic aberrations in Học viên Khóa 2010 – 2012 70 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân Hungarian hereditary non-polyposis colorectal cancer families: implications for genetic testing”, World J Gastroenterol,13(19), pp 2727-2732 26 Peltomäki P (2005), “Lynch syndrome genes”, Fam Cancer, 4(3), pp 227232 27 Peltomäki P, Vasen HF (1997), “Mutations predisposing to hereditary nonpolyposis colorectal cancer: database ADN results of a collaborative study”, The International Collaborative Group on Hereditary Nonpolyposis Colorectal Cancer, Gastroenterology, 113(4), pp 1146-1158 28 Salehi M, Amani S, Javan S, Emami M H, Salamat M R, and Noori Daloii M R 2009 Evaluation of MLH1 and MSH2 Gene Mutations in a Subset of Iranian Families with Hereditary Nonpolyposis Colorectal Cancer (HNPCC) Journal of Sciences, Islamic Republic of Iran 20(1): 7-12 29 Screening for Lynch Syndrome by Microsatellite Instability Analysis and Immunohistochemistry – Jason D Merker, MD, PhD,CAP Molecular Oncology Committee 30 Stewart B W and Kleihues P (2003), “World Cancer Report”, IARC Press, Lyon 31 Vasen HF, Mecklin JP, Khan PM, Lynch HT (1991), “The International Collaborative Group on Hereditary Non-Polyposis Colorectal Cancer (ICGHNPCC)”, Dis Colon Rectum, 34(5), pp 424-425 32 Vasen HF, Watson P, Mecklin JP, Lynch HT (1999), “New clinical criteria for hereditary nonpolyposis colorectal cancer (HNPCC, Lynch syndrome) proposed by the International Collaborative group on HNPCC”, Gastroenterology, 116(6), pp 1453-1456 33 Viswanadham Duppatla, Nimesh Joseph, Desirazu N Rao (2006), Prokaryotic DNA Mismatch Repair, Elsevier Inc, Indian Học viên Khóa 2010 – 2012 71 Nguyễn Thị Mai Luận văn Cao học Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Hồng Vân 34 Warthin, A.S (1925), “The further of study of a cancer family”, J Cancer Res, 279 – 286 35 Watson P , Lynch HT, Shaw TG, et al (1999), “Clinical impact of molecular genetic diagnosis, genetic counseling, and management of hereditary cancer Part I: Studies of cancer in families”, Cancer, 86(11 Suppl), pp 2449-2456 36 Yamashita, K., Dai, T., Dai, Y., Yamamoto, F., Perucho (2003), “Genetics supersedes epigenetics in colon cancer phenotype”, Cancer Cell, 4: 121-131 37 Zhang H, Zhang YZ, Zhang MZ, Sheng JQ, Fu L, Huang JS, Han M, Mu H, Li AQ, Wu ZT, Han Y, Li SR (2008), “Mismatch repair gene mutations in Chinese HNPCC patients”, Cytogenet Genome Res, 122, pp 22-27 Các trang Web 38 http://atlasgeneticsoncology.org 39 http://biosiva.50webs.org 40 http://ghr.nlm.nhi.gov/gene/MSH2 41 http://openi.nlm.nhi.gov 42 http://www.bookrags.com/research/heteroduplex-analysis-wog/ 43 http://www.genetests.org 44 http://www.mayoclinic.com 45 http://www.ncbi.nlm.nih.gov Học viên Khóa 2010 – 2012 72 Nguyễn Thị Mai [...]... 1.2.2.3 Chẩn đoán lâm sàng bệnh ung thư đại trực tràng Ung thư đại trực tràng dạng HNPCC thư ng hình thành ung thư từ khi còn khá trẻ, trung bình vào độ tuổi 40, có những trường hợp sớm hơn Với các bệnh nhân mang đột biến dòng mầm ở hội chứng này không những có nguy cơ cao phát sinh bệnh ung thư mà còn làm tăng nguy cơ mắc một số bệnh ung thư khác như ung thư nội mạc tử cung, dạ dày, buồng trứng, ruột... DUNG NGHIÊN CỨU 1.5.1 Mục tiêu nghiên cứu Sử dụng một số kỹ thuật sinh học phân tử (PCR-SSCP và giải trình tự ADN) để phân tích một số trình tự mã hóa (exon) của gen MSH2 từ các bệnh nhân ung thư đại trực tràng 1.5.2 Nội dung nghiên cứu Đề tài được thực hiện với các nội dung chính bao gồm: 1 Thu thập và bảo quản các mẫu bệnh phẩm (mô ung thư) của 42 bệnh nhân người Việt Nam bị mắc ung thư đại trực tràng. .. sở phân tử của ung thư đại trực tràng di truyền Ung thư đại trực tràng là một trong những bệnh được xác định là di truyền ngoài những nguyên nhân lối sống và tuổi tác Do hội chứng này liên quan đến đột biến xảy ra tại một trong các gen thuộc hệ thống nhận biết và sửa chữa các bazơ bắt cặp sai MMR Hiện nay, tính bất ổn vi vệ tinh MSI và cơ chế MMR được coi là cơ sở phân tử giải thích sự hình thành ung. .. thể Đây chính là nguyên nhân sâu xa của hầu hết các bệnh ung thư trong đó có ung thư đại trực tràng Người ta đã thống kê được một số gen chính trong hệ thống MMR có liên quan đến ung thư đại trực tràng được biết đến thông qua Bảng 3 Bảng 3: Các gen MMR liên quan đến ung thư đại trực tràng Gen Vị trí trên Số exon NST Số axit Số đột biến đã được amin phát hiện MLH1 3p21 19 756 >250 MSH2 2p16 16 934 >170... đặc biệt là dạng HNPCC Bảng 5: Nguy cơ mắc một số bệnh ung thư ở người có đột biến gen liên quan đến ung thư đại trực tràng dạng HNPCC so với các cá thể bình thư ng (Aarnio M 1999) [8] Tỷ lệ mắc bệnh Ung thư của cá thể bình Cá thể có liên quan tới HNPCC Tỷ lệ mắc bệnh thư ng Độ tuổi trung bình bắt đầu mắc bệnh Đại trực tràng 5.5% 80% 44 Nội mạc tử cung 2.7% 20% - 60% 46 Dạ dày