I Đại học Thái Nguyên Trờng đại học Nông Lâm Trần minh tâm Tình hình bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ tỉnh vĩnh phúc, xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn e.coli biện pháp phòng trị Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp Chuyên ngành: Thú y M số: 60.62.50 Ngời hớng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Quang Tuyên PGS.TS Cù Hữu Phú Thái nguyên - 2007 I Lời cam đoan Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết luận văn trung thực cha đợc công bố công trình nghiên cứu khác Tôi xin đảm bảo thông tin, trích dẫn luận văn đ4 đợc rõ nguồn gốc Thái Nguyên - 2007 Tác giả luận văn Trần Minh Tâm II Lời cảm ơn T ôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ thầy cô giáo Khoa Sau đại học - Trờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, thầy cô giáo đ4 giảng dạy suốt trình học thực tập Đặc biệt, xin bày tỏ lòng biết ơn PGS.TS Nguyễn Quang Tuyên, PGS.TS Cù Hữu Phú đ4 tận tình hớng dẫn, giúp đỡ hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn L4nh đạo Chi cục Thú y Vĩnh Phúc, gia đình, anh em, bạn bè đồng nghiệp đ4 tạo điều kiện động viên giúp đỡ hoàn thành tốt chơng trình học tập Thái Nguyên - 2007 Tác giả luận văn Trần Minh Tâm III Mục lục Lời cam đoan I Lời cảm ơn II Mục lục III Danh mục chữ viết tắt IV Danh mục bảng số liệu V Danh mục biểu đồ VI Danh mục ảnh t liệu đề tài VI I Mở đầu Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài ý nghĩa khoa học thực tiễn Chơng 1: Tổng quan tài liệu 1.1 Tình hình nghiên cứu hội chứng tiêu chảy lợn 1.1.1 Nguyên nhân vi khuẩn 1.1.2 Nguyên nhân virus 1.1.3 Nguyên nhân ký sinh trùng 1.1.4 ảnh hởng môi trờng, khí hậu 1.1.5 ảnh hởng chăm sóc, nuôi dỡng không kỹ thuật 1.2 Tình hình nghiên cứu vi khuẩn E.coli gây bệnh tiêu chảy lợn 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nớc 1.2.2 Tình hình nghiên cứu nớc 1.3 Một số đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn E.coli 1.3.1 Đặc tính hình thái 1.3.2 Đặc tính nuôi cấy 1.3.3 Đặc tính sinh hoá 1.3.4 Sức đề kháng Trang 1 4 7 9 12 15 16 16 17 18 IV 1.3.5 Cấu trúc kháng nguyên vi khuẩn E.coli 1.4 Các yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli 1.4.1 Các yếu tố độc tố 1.4.2 Các độc tố gây bệnh vi khuẩn E.coli 1.5 Cơ chế gây bệnh vi khuẩn E.coli 1.6 Bệnh tiêu chảy E.coli lợn theo mẹ 1.6.1 Triệu chứng 1.6.2 Bệnh tích 1.6.3 Điều trị 1.6.4 Phòng bệnh Chơng 2: Đối tợng, nội dung, vật liệu 18 24 24 28 32 33 33 33 34 35 37 phơng pháp nghiên cứu 2.1 Đối tợng, địa điểm thời gian nghiên cứu 37 37 2.2 Nội dung nghiên cứu 2.2.1 Điều tra tình hình lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy năm 37 2006 tỉnh Vĩnh Phúc 2.2.2 Nuôi cấy, phân lập xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn E.coli lợn 37 theo mẹ bị tiêu chảy 2.2.3 Xác định số đặc tính sinh vật hóa học chủng E.coli 37 phân lập đợc 2.2.4 Xác định Serotype kháng nguyên O, K chủng E.coli phân lập 37 đợc 2.2.5 Nghiên cứu biện pháp phòng, trị bệnh tiêu chảy cho lợn theo 37 mẹ nuôi tỉnh Vĩnh Phúc 2.3 Vật liệu dùng nghiên cứu 2.3.1 Mẫu bệnh phẩm 2.3.2 Động vật thí nghiệm 2.3.3 Các loại hóa chất môi trờng 2.3.4 Các loại kháng huyết chuẩn để định type vi khuẩn E.coli phân lập đợc 37 37 38 38 38 V 2.3.5 Các loại hóa chất môi trờng dùng cho phản ứng PCR 2.3.6 Máy móc thiết bị 38 39 2.4 Phơng pháp nghiên cứu 2.4.1 Phơng pháp nghiên cứu dịch tễ học 2.4.2 Phơng pháp phân lập vi khuẩn E.coli môi trờng nuôi cấy 2.4.3 Phơng giám định đặc tính sinh hóa vi khuẩn E.coli 2.4.4 Xác định serotype kháng nguyên O vi khuẩn E.coli phản ứng ngng kết nhanh phiến kính 2.4.5 Xác định kháng nguyên K88 phản ứng ngng kết nhanh phiến kính 2.4.6 Phơng pháp xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli 2.4.7 Thử nghiệm biện pháp phòng trị bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ vi khuẩn E.coli gây Vĩnh Phúc 2.4.8 Phơng pháp xử lý số liệu 39 Chơng 3: Kết thảo luận 3.1 Điều kiện tự nhiên tình hình chăn nuôi Vĩnh Phúc 3.1.1 Tình hình chăn nuôi dịch bệnh đàn gia súc, gia cầm 3.1.2 Tình hình dịch bệnh đàn gia súc 3.2 Kết điều tra tình hình lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy năm 2006 địa bàn tỉnh Vĩnh Phúc 3.2.1 Kết điều tra tỷ lệ lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy chết tiêu chảy 3.2.2 Kết điều tra lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy theo tuổi Vĩnh Phúc 3.2.3 Kết điều tra tỷ lệ lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy theo tháng năm Vĩnh Phúc 3.2.4 Kết điều tra tỷ lệ lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy theo kiểu chuồng nuôi Vĩnh Phúc 3.2.5 Kết điều tra tỷ lệ lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy theo giống lợn Vĩnh Phúc 39 39 41 41 42 43 45 45 46 46 46 47 48 48 51 54 56 59 3.3 Đặc điểm bệnh tích đại thể lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu 60 chảy E.coli gây tỉnh Vĩnh Phúc 3.4 Kết phân lập vi khuẩn E.coli lợn theo mẹ Vĩnh Phúc 62 VI 3.4.1 Kết nuôi cấy phân lập vi khuẩn E.coli từ phân lợn theo 62 mẹ mắc tiêu chảy 3.4.2 Kết phân lập vi khuẩn E.coli từ bệnh phẩm 64 3.5 Kết kiểm tra số đặc tính sinh vật hóa học vi khuẩn 65 E.coli phân lập đợc 3.6 Kết xác định Serotype kháng nguyên O chủng E.coli 66 phân lập đợc 3.7 Kết xác định khả bám dính khả sản sinh độc tố chủng vi khuẩn E.coli nhóm ETEC 3.7.1 Kết xác định khả bám dính chủng vi khuẩn ETEC 3.7.2 Kết xác định khả sinh độc tố vi khuẩn E.coli phân lập đợc 3.7.3 Kết xác định khả dung huyết vi khuẩn E.coli 3.7.4 Tổ hợp yếu tố gây bệnh mang chủng E.coli 68 3.8 Kiểm tra độc lực vi khuẩn E.coli tiêm truyền chuột bạch 77 69 71 73 74 3.9 Kết xác định tính mẫn cảm vi khuẩn E.coli phân lập đợc 79 với số loại kháng sinh hóa dợc 3.10 Kết đánh giá bớc đầu hiệu lực vac xin phòng bệnh tiêu 81 chảy cho lợn theo mẹ 3.11 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy 85 E.coli gây lợn theo mẹ Vĩnh Phúc Chơng 4: Kết luận đề nghị 88 4.1 Kết luận 88 4.2 Đề nghị 89 Tài liệu tham khảo 90 Phụ lục: Một số hình ảnh t liệu đề tài 98 IV VII Danh mục chữ viết tắt AMP BHI ColV dGTP DNA EaggEC E coli EMB Ent EPEC ETEC Hly F LT LTa LTb PCR SLT SLTI SLTII ST ST (a,b) ST1 ST2 Stx2e VT2e VTEC : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : Adenosine 5-monophosphate Brain-heart infusion Colicin V deoxy guanosine triphosphate Deoxyribonucleic acid Enteroaggregative Escherichia coli Eosin Methylene Blue Agar Enterotoxin (Độc tố đờng ruột) Enteropathogenic Escherichia coli (Mầm bệnh độc tố đờng ruột E coli) Enterotoxigenic Escherichia Coli (Độc tố đờng ruột E.coli) Haemolyzin Fimbriae (Yếu tố bám dính) Heat-Labile enterotoxin (Độc tố không chịu nhiệt) Heat-Labile enterotoxin a Heat-Labile enterotoxin b Polymerase Chain Reaction (Phản ứng nhân gen) Shiga-like toxin Shiga-like toxin I Shiga-like toxin II Heat-stable enterotoxin (độc tố chịu nhiệt) Heat-stable enterotoxin (a,b) Shiga like toxin Shiga like toxin Shiga toxin 2e Verocytotoxin 2e Verotoxigenic Escherichia Coli V VIII Danh mục bảng số liệu Bảng 2.1 Bảng 2.2 Bảng 3.1 Bảng 3.2 Bảng 3.3 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Bảng 3.6 Bảng 3.7 Bảng 3.8 Bảng 3.9 Bảng 3.10 Bảng 3.11 Bảng 3.12 Bảng 3.13 Bảng 3.14 Bảng 3.15 Bảng 3.16 Bảng 3.17 Bảng 3.18 Bảng 3.19 Bảng 3.20 Bảng 3.21 Trang Thành phần phản ứng PCR Chơng trình PCR nhân gen Số lợng gia súc , gia cầm tỉnh vĩnh Phúc từ 2002 - 2006 Tình hình dịch bệnh gia súc năm 2005 2006 Kết điều tra tỷ lệ lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy chết tiêu chảy Vĩnh Phúc Kết điều tra lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy theo tuổi Kết điều tra tỷ lệ lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy theo tháng năm Kết điều tra tỷ lệ lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy theo kiểu chuồng nuôi Kết điều tra lợn theo mẹ mắc tiêu chảy theo loại lợn Bệnh tích đại thể lợn theo mẹ mắc bệnh tiêu chảy tỉnh Vĩnh Phúc Kết phân lập vi khuẩn E.coli từ phân lợn theo mẹ bị tiêu chảy Kết phân lập vi khuẩn E.coli từ bệnh phẩm lợn theo mẹ bị tiêu chảy Kết giám định số đặc tính sinh hoá chủng E.coli phân lập đợc Kết xác định Serotype kháng nguyên O chủng E.coli phân lập đợc Kết xác định khả bám dính chủng vi khuẩn E.coli phân lập đợc Kết xác định khả sản sinh độc tố vi khuẩn E.coli Kết xác định khả dung huyết chủng E.coli phân lập đợc Tổ hợp yếu tố gây bệnh mang chủng E.coli Các yếu tố gây bệnh chủng E.coli đợc lựa chọn để thử độc lực Kết kiểm tra độc lực số chủng vi khuẩn E.coli chuột bạch Kết kiểm tra kháng sinh đồ vi khuẩn E.coli phân lập đợc Kết đánh giá bớc đầu hiệu lực vắc xin phòng bệnh tiêu chảy cho lợn theo mẹ Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ vi khuẩn E.coli gây 44 44 46 47 49 51 54 57 59 61 63 64 66 67 69 71 73 75 77 78 79 83 86 IX VI Danh mục biểu đồ Trang Biểu đồ 3.1 So sánh tỷ lệ lợn ốm chết tổng đàn 49 Biểu đồ 3.2 So sánh tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy nhóm ngày tuổi 52 Sự ảnh hởng nhiệt độ, độ ẩm tháng năm Biểu đồ 3.3 đến tỷ lệ tiêu chảy lợn 55 So sánh tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy kiểu chuồng Biểu đồ 3.4 nuôi khác 58 Biểu đồ 3.5 So sánh tỷ lệ serotype kháng nguyên O phân lập đợc 68 So sánh nhóm yếu tố gây bệnh chủng E.coli Biểu đồ 3.6 phân lập đợc 75 89 + Kháng nguyên bám dính K88 chiếm tỷ lệ cao (74,44%), kháng nguyên K99 chiếm 25,56% + Số chủng sinh độc tố STb chiếm tỷ lệ cao 84,44%, tiếp đến độc tố STa (60,00%) thấp độc tố không chịu nhiệt (32,22%) 4.1.7 Các chủng E.coli thuộc ETEC phân lập đợc có tỷ lệ khác năm nhóm tổ hợp yếu tố gây bệnh là: LT+STa+STb + K88+Hly + (52,22%) LT+STa +STb + K88+Hly - (11,11%) STa + K99 + (17,18%) STa + STb + (3,33%) STb + (15,56%) 4.1.8 Vi khuẩn E.coli phân lập đợc có độc lực mạnh, có 7/9 chủng vi khuẩn gây chết 100% số chuột vòng 18 - 72 giờ, 2/9 gây chết 50% số chuột 4.1.9 Vi khuẩn E.coli phân lập đợc mẫn cảm cao với kháng sinh nh: Ceftiofur (100%), Apramycin (97,78%) Amikacin (93,33%) nhng lại kháng mạnh với kháng sinh: Tetracyclin (95,56%), Streptomycin (88,89%), Trimethoprim (82,22%), Amoxicillin (75,55%) 4.1.10 Nofloxacin Colistin hai loại kháng sinh sử dụng để điều trị bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ có hiệu tốt địa bàn Vĩnh Phúc, không nên sử dụng Amoxycilin đ4 bị vi khuẩn kháng Trong điều trị phải ý bổ sung chất điện giải vitamin để có kết cao 4.2 Đề nghị 4.1 Tiếp tục nghiên cứu sâu hội chứng tiêu chảy lợn theo mẹ nuôi tỉnh Vĩnh Phúc đặc biệt nguyên nhân gây tiêu chảy nh: Vi rút, loại vi khuẩn khác, yếu tố thức ăn, chế độ chăm sóc nuôi dỡng 4.2 Nghiên cứu chế tạo vác xin phòng bệnh tiêu chảy cho lợn với chủng vi khuẩn E.coli có đặc điểm sinh vật, hoá học, yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli đ4 phân lập đợc 90 4.3 Triển khai áp dụng kết nghiên cứu để tài vào thực tế sản xuất chăn nuôi hộ, trang trại địa bàn tỉnh nh công tác quản lý quan thú y Tài liệu tham khảo A Tiếng Việt Đặng Xuân Bình (2004), Vai trò vi khuẩn Escherichia coli Clostridium Perfrigens bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ, biện pháp phòng trị Luận án tiến sĩ nông nghiệp, Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Việt Nam, Hà Nội Phùng Quốc Chớng (1995), Tình hình nhiễm Salmonella lợn vùng Tây Nguyên khả phòng trị Luận án PTS khoa học Nông nghiệp, trờng Đại học Nông nghiệp I Hà Nội Chi cục Thú y Vĩnh Phúc, Báo cáo tình hình dịch bệnh gia súc, gia cầm hàng tháng, năm 2005 2006 Cục Thống kê tỉnh Vĩnh Phúc, Niên giám thống kê tỉnh Vĩnh Phúc năm 2002, 2003, 2004, 2005, 2006 NXB Thống kê Hà Nội Đỗ Trung Cứ, Trần Thị Hạnh, Nguyễn Quang Tuyên (2000), Sử dụng chế phẩm sinh học Biosubtyl để phòng trị bệnh tiêu chảy lợn trớc sau cai sữa Tạp chí KHKT Thú y, số 2, Tr 58 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phợng, Lê Ngọc Mỹ (1995), Bệnh đờng tiêu hoá lợn Nhà xuất nông nghiệp Đào Trong Đạt, Phan Thanh Phợng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (1996), Bệnh lợn nái lợn NXB Nông nghiệp, Hà Nội Tr 44-81 Erwin M Kohler, Tiêu chảy lợn sơ sinh Cẩm nang chăn nuôi lợn công nghiệp NXB Hà Nội 1996 tr 734 Trần Thị Hạnh, Đặng Xuân Bình (2002), Chế tạo, thử nghiệm số chế 91 phẩm sinh học phòng trị bệnh tiêu chảy phân trắng lợn E.coli Cl perfringens Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, số 1, Tr 19-28 10 Phạm Khắc Hiếu (1998), ứng dụng chế phẩm sinh vật hữu hiệu EMI phòng trị hội chứng tiêu chảy lợn Báo cáo khoa học hội nghị tổng kết năm 1998 chơng trình nghiên cứu đề tài khoa học cấp nhà nớc EM, Hà Nội 11 Phạm Khắc Hiếu, Bùi Thị Tho (1999), Một số kết nghiên cứu tính kháng kháng thuốc vi khuẩn gây bệnh thú y Kết nghiên cứu KHKT khoa Chăn nuôi Thú y NXB Nông nghiệp Tr 134-138 12 Lý Thị Liên Khai (2001), Phân lập, xác định độc tố ruột chủng E.coli gây tiêu chảy cho heo Khoa học Kỹ thuật thú y, số 2, Tr 13-18 13 Phạm Văn Khuê, Phan Lục (1996), Giáo trình Ký sinh trùng thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 14 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Ngân, Lê Minh - Đại học Nông lâm Thái Nguyên, Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn Thái Nguyên, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, số 4, 2006, trang 94 15 Nguyễn Lơng, Hoàng Ngọc Thuý, Nguyễn Thị Cúc (1963), Báo cáo tổng kết khoa chăn nuôi thú y Đại học Nông nghiệp I Hà Nội 16 Vũ Bình Minh, Cù Hữu Phú (1999), Kết phân lập vi khuẩn E.coli salmonella lợn mắc bệnh tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật hoá học chủng phân lập, tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, số 1, tr 15-22 17 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trơng Quang, Phùng Quốc Chớng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thạch (1997), Bệnh viên ruột ỉa chảy lợn, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, Hội Thú y Việt Nam, số 2, tr 39-45 18 Nguyễn Thị Ngữ (2005), Nghiên cứu tình hình hội chứng tiêu chảy lợn huyện Chơng mỹ, Hà Tây, xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli Salmonela, biện pháp phòng trị Luận văn thạc sĩ khoa học Nông nghiệp, Hà Nội 92 19 Sử An Ninh (1995), Các tiêu sinh lý, sinh hoá máu, nớc tiểu hình thái đại thể số tuyến nội tiết lợn mắc bệnh phân trắng Luận án tiến sỹ nông nghiệp, trờng ĐHNNI Hà Nội 20 Nguyễn Thị Nội (1986), Tìm hiểu vai trò Escherichia coli bệnh phân trắng lợn vacxin dự phòng Luận án Phó tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Việt Nam 21 Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thị Sở, Trần Thị Thu Hà (1993), Nghiên cứu vacxin đa giá Salsco phòng bệnh ỉa chảy lợn Kết nghiên cứu khoa học kỹ thuật thú y Tr 54-58 22 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Vũ Bình Minh, Đỗ Ngọc Thuý (2000), Kết phân vi khuẩn E.coli Salmonella lợn mắc bệnh tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh hoá chủng vi khuẩn phân lập đợc biện pháp phòng trị Kết nghiên cứu khoa học kỹ thuật thú y 19962000, NXB Nông nghiệp, Hà Nội Tr 171-176 23 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thúy, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hờng, Đào Thị Hảo Vũ Ngọc Quý, Kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn theo mẹ số trại lợn miền Bắc Việt Nam, xác định tỷ lệ kháng kháng sinh yếu tố gây bệnh chủng E coli phân lập đợc Báo cáo khoa học CNTY (2002-2003) 24 Nguyễn Vĩnh Phớc (1970), Vi sinh vật học thú y, NXB Đại học trung học chuyên nghiệp Hà Nội 25 Phan Thanh Phợng, Trần Thị Hạnh, Phạm Thi Ngọc, Ngô Hoàng Hng (1996), Nghiên cứu xác định vai trò vi khuẩn yếm khí Clostridium perfrigens hội chứng tiêu chảy lợn Tạp chí Nông nghiệp công nghiệp thực phẩm (số 12), Hà Nội, Tr 495-496 26 Phan Thanh Phợng (1988), Phòng chống bệnh phó thơng hàn lợn NXB Nông nghiệp, Hà Nội 27 Tô Thị Phợng (2006), Nghiên cứu tình hình hội chứng tiêu chảy lợn ngoại hớng nạc Thanh Hoá biện pháp phòng, trị Luận văn thạc sĩ 93 nông nghiệp, chuyên ngành thú y Đại học Nông nghiệp I Hà Nội 28 Sở Nông nghiệp PTNT Vĩnh Phúc, Báo cáo tình hình thực nhiệm vụ công tác năm 2006 kế hoặch năm 2007 29 Lê Văn Tạo, Khơng Bích Ngọc, Nguyễn Thị Vui, Đoàn Băng Tâm (1990-1991), Xác định yếu tố gây bệnh di truyền Plasmid vi khuẩn E.coli để chọn giống sản xuất vacxin phòng bệnh phân trắng lợn Công trình nghiên cứu khoa học kỹ thuật 1990-1991 Tr 77-81 30 Lê Văn Tạo, Khơng Bích Ngọc, Nguyễn Thị Vui, Đoàn Băng Tâm (1993), Nghiên cứu chế tạo vacxin E.coli cho uống phòng bệnh ỉa chảy phân trắng lợn Tạp chí khoa học công nghệ quản lý kinh tế Tr 324-326 31 Lê Văn Tạo (1996), Cấu trúc Fimbriae, kháng nguyên bám dính K88 vi khuẩn E.coli vai trò trình gây bệnh phân trắng lợn Tạp chí Nông nghiệp, công nghiệp thực phẩm số năm 1996, Hà Nội 1996 Tr 62-63 32 Lê Văn Tạo (2006), Bệnh vi khuẩn Escherichia coli gây lợn Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú Y- Tập XIII- số 3-2006 33 Đoàn Thị Băng Tâm (1987), Bệnh động vật nuôi Tập I NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, Tr 119-135 34 Nguyễn Nh Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hơng (1997), Vi sinh vật Thú y Tr 81-85 35 Trịnh Văn Thịnh (1964), Giáo trình bệnh nội khoa bệnh ký sinh trùng thú y, NXB Nông thôn, Hà Nội 36 Trung tâm dự báo khí tợng thuỷ văn tỉnh Vĩnh Phúc, Thông báo khí tợng thuỷ văn tháng 12/2006 Vĩnh Phúc 37 Bùi Thị Tho, Phạm Khắc Hiếu (1996), Kiểm tra số yếu tố ảnh hởng đến tính mẫn cảm tính kháng thuốc E.coli phân lập từ bệnh lợn phân trắng Khoa học kỹ thuật thú y tập III, số Tr 57-62 38 Đỗ Ngọc Thuý, D.Trott, A Frost, K.Townsend, Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Âu Xuân Tuấn, Nguyễn Xuân Huyên, Văn Thị Hờng, Vũ 94 Ngọc Quý (2002), Tính kháng kháng sinh vi khuẩn E.coli phân lập từ lợn tiêu chảy số tỉnh phía Bắc Việt Nam Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, số Tr 21 - 27 39 Trịnh Quang Tuyên, Lê Văn Tạo, Cù Hữu Phú, Phạm Thị Thanh Hoa (2003), Xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli gây bệnh tiêu chảy cho lợn trại chăn nuôi lợn tập trung miền Bắc Việt Nam, Tạp chí Nông nghiệp phát triển nông thôn, số 7, tr 859-860 40 Trịnh Quang Tuyên (2006), Xác định yếu tố gây bệnh E.coli bệnh tiêu chảy phù đầu lợn chăn nuôi tập trung Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, 2006 41 Tạ Thị Vịnh, Đặng Khánh Vân (1996), Bớc đầu thăm dò xác định E.coli lợn bình thờng lợn mắc hội chứng tiêu chảy Hà Tây Hà Nội Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y số B Tiếng nớc 42 Bertschinger H.U, Faibrother J.M, Nielsen N.O, Pohlenz J.F, Escherichia coli infection Diseases of swine IOWA State University press/AMES, IOWA U.S.A 7th Edition 1992, p 487-488 43 Blanco, J.E., M Blanco, A Mora and J Blanco 1997, Prevalence of bacterial resistance to Quinolones and otherr antimicrobials among avian E.coli strain isolated from septicemic and healthy chiken in Spain Journal of clinical microbiology Vol 35, No.8, p 2184-2185 44 Brown V.(1981), Escherichia coli cell centaning the Col.V.Plamid produce The iron ionophore aerobactin FEMS Microbicl Lett, p 225-228 45 Carter, G.R.; Chengappa, M.M.; Rober, TS A.W (1995), Essentials of veterinary Microbiology Copyright 1995 Williams and Wikkins, Rose tree corporate Center Building 1400 North providence Rd, Suite 5025 Media PA 19063 2043 A waverly Company 1995 46 Cavalieri, S J Snynder, I.S (1982), Cytotoxin activity of a partially purifield 95 Escherichia coli alpha haemolysin J Med Microbiology 15, 1982, p 11-21 47 Cox E, Houvenagel A (1993), Comparison of the invitro adhension of K88, K99, F41 and 987P positive Escherichiae coli to intestinal villi of to week old pigs Vet Microbiol, pp 7-18 48 Elsinghorst E A and Weit J A 1994, Epithelial cell invasion and adherence directed by the enterotoxigenic E.coli tib locus is assocated with a 104 kilodalton outer membrane protein Infect Immun, 62, pp 3463-3471 49 Evan, D.G.; Evans, D.J.; Gorbach, S.L (1973), Production of Vascular permeability factor by enterotoxigenic Escherichia coli isolated from man Infect Immun V8, p 725 730 50 Fairbrother, j.m.; Bestchinger, H.U; Nielsen, O N.; Pohlenz, j.f (1992), Escherichia coli infections diseases of swine Seventh Edition Wolfe publishing Ltd Australian1992, p 489 497 51 Falkow S, P Small, R Isberg, S.F.Hayes, and D.Corwin (1987), A molecular stragety for the stady of bacteria invasion, Rev infect Dis 9, P.5450-5455 52 Freter, R.; Alweiss, B; Obrien, P.C.M (1981), Roce of chemotoxin in the association of motile bacteria with intestinal mucose: in vitro studies Infect Immu 34, p 211 249 53 Giannella R.A., Rout W.R., Formal S.P., Colling H (1976), Role of plasma filtration in the intestinal fluid secretion medicated by infection with Salmonella typhymurium,P 470-474 54 Gyles G.L (1992), Escherichia coli cytotoxins and enterotoxin Can J Microbiol 38 - p 734 - 746 55 Isaacson R E (1983), Regulation of expression of Escherichia coli pilus K99, infect Immun (40), pp 633- 639 56 Jacob, A A C and de Graaf, F K (1985), Production of K88, K99 and F41 fimbriae in relation to growth phage and rapid procedure for adhesion 96 purinfication FEMS Micribiol, lett, (26), pp 15-19 57 Jone, G W and Rutter, J M (1977), Role of the K88 antigen in the pathogenesis of neonatal diarrhea caused by Escherichiae coli in piglets Infection and Immunity 6, pp 918- 927 58 Jones, Richardson (1983), The contribution of manose sensitive and manose sensitive heamagglutinate activities J.Gen Microbiol V 127, P 361 -370 59 Ketyle I; Emodyl; Kentrohrt (1975), Mouse lang Oedema caused by a toxin substance of Escherichia coli strains Acta Microbiol A cad Sci Hung 25, p 307 317 60 Lindhl, M and Carlstedt, I (1990), Binding of K99 fimbriae of enterotoxingenic E coli to pig small intestinal mucin glycopeptide J Gene Microbiol, pp 1609-1614 61 Nagy, B Fekete, P.Z (1999), Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) in farm animál, Vet Res, 30, P 259-284 62 Ngeleka, M., Prichard, J., Appleyard, G., Middleton, P.M., Faibrother, J.M., 2003, Isolation and association of Echerichia coli AIDA-I/STb, rather than EASTI pathotype with diarrhea in piglets and antibiotic sensitivity of isolates J Vet Diagn Invest 15, 242-252 63 Orskov, I.; Birch, F; Andersen, A (1980), Comparison of Escherichia coli fimbriae antigen f7 with type I Fimbriae Infect Immun 27 p 657 666 64 Plonait H, Bickhardt K, 1997, Salmonella Infection and Salmonellose, p 334 338 65 Radostits O.M cộng sự, 1997, Role of fimbriae F18 for actively acquired immunity against porcine enterotoxigenic Escherichia coli, Vet Microbiol, 1997, P 133 66 Raybould T J G, Grouch C F, Acres S D (1987), Monoclonal antibody response, hemagglutination and capture enzyme linked in immuno sorbert 97 assays for direct detection and quantitation of F41 and K99 fimbrial antigen in enterotoxingenic Escherichiae coli J Clin Microbiol, pp 278-284 67 Sabo, J.; Popella, P.; Vilimek, L., Elias, J.; Prispevok, K 1981, Bacteriologicky dianostike enteropatogenych Kmonov E.coli presipantyv, Zbor Vet Spravy M PVZ SSR No 9/10S P 143 151 68 Smith H.W (1963), The haemolysins of Escherichia coli J Pathol Bacterrial P 197-212 69 Smith H.W, Halls S (1967), The transmissible nature of the genetic factor in E.coli that controls hemolysin production J Gen Microbiol 47 1967, p 153-161 70 Sokol A, Mikula I, Sova C (1981), Neonatal coli-infecie ich laboratorina diagnostina a prevencia UOLV- Kosise P.40-45 71 Virrgnial, Wwaterst and Jorge H Crosa (1991), Colicin V virulence plasmid, Microbiological Review Sept p 437 450 72 Đỗ Ngọc Thuý (2004), The significance of Enterotoxigenic E.coli as a cause of pre-weaning piglet diarrhoea in North Vietnam Luận án tiến sĩ, Viện Thú Y Quốc Gia 73 Zinner, S.H; Peter, G (1983), The potential role of cell wall core glycolipids in the immuno - prophylaxis and immunotherapy of gram negative red bacteracmin medical Microbiology volume Immunization against bacterial Edited by C.S.F Easmon and J Jeljaedzewicz Academic Press, London and New York P 71 - 85.Zinner, S.H; Peter, G (1983) The potential role of cell wall core glycolipids in the immuno prophylaxis and immunotherapy of gram - negative red bacteracmin medical Microbiology volume Immunization against bacterial Edited by C.S.F Easmon and J Jeljaedzewicz Academic Press, London and New York P 71 - 85 98 Một số hình ảnh t liệu đề tài ảnh 1: Lợn nuôi kiểu chuồng 99 ảnh 2: lợn nuôi kiểu chuồng sàn ảnh 3: lợn theo mẹ mắc tiêu chảy 100 ảnh 4: phân lợn tiêu chảy ảnh 5: bệnh tích ruột lợn tiêu chảy 101 ảnh 6: dày chứa đầy sữa cha tiêu ảnh 7: hình thái vi khuẩn e.coli kính hiển vi 102 ảnh 8: phản ứng sinh indol M ảnh 5: Các sản phẩm phản ứng PCR phức hợp sau trình điện di M: 100 bp DNA marker Giếng 1, 2, 6: STa, LT dơng tính Giếng 3, 7: STb, LT dơng tính Giếng 4: Âm tính ảnh 9: kết PCR ảnh 6: lợn nuôi kiểu chuồng sàn 103 ảnh 10: kết kháng sinh đồ [...]... nuôi lợn nái sinh sản Vì vậy, để có cơ sở khoa học cho vi c nghiên cứu, xây dựng biện pháp phòng và điều trị bệnh có hiệu quả, nhằm hạn chế những thiệt hại do vi khuẩn E.coli gây ra cho lợn con, chúng tôi nghiên cứu đề tài: "Tình hình bệnh tiêu chảy ở lợn con theo mẹ tại tỉnh Vĩnh Phúc, xác định yếu tố gây bệnh của vi khuẩn E.coli và biện pháp phòng trị" 2 Mục tiêu của đề tài Điều tra tình hình lợn con. .. tạp ở đờng tiêu hoá, do nhiều nguyên nhân, nhiều yếu tố tác động Trong phạm vi nghiên cứu của đề tài, chúng tôi xin trình bày vai trò gây bệnh của vi khuẩn E.coli ở lợn con trong thời gian bú sữa mẹ 9 1.2 Tình hình nghiên cứu về vi khuẩn E.coli gây bệnh tiêu chảy ở lợn 1.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nớc ở nớc ta, bệnh tiêu chảy do vi khuẩn E.coli gây ra ở lợn xuất hiện từ lâu và cho đến nay bệnh. .. E.coli gây ra ở lợn con theo mẹ trên địa bàn Vĩnh Phúc Kết quả nghiên cứu đạt đợc đ4 đa ra thực trạng bệnh tiêu chảy trên lợn con theo mẹ nuôi tại tỉnh Vĩnh Phúc Kết quả xác định đợc các yếu tố gây bệnh của vi khuẩn E.coli nh: Yếu tố bám dính, độc tố, khả năng kháng kháng sinh làm cơ sở khoa học cho các nghiên cứu tiếp theo, nhằm hoàn thiện các nghiên cứu về vi khuẩn E.coli gây bệnh tiêu chảy ở lợn Kết quả... bị tiêu chảy trong giai đoạn còn đang bú sữa mẹ nuôi tại tỉnh Vĩnh Phúc, xác định đợc một số đặc tính gây bệnh của vi khuẩn E.coli phân lập từ lợn con theo mẹ bị tiêu chảy, từ đó xây dựng phác đồ điều trị có hiệu quả bệnh tiêu chảy của lợn con theo mẹ do E.coli trên địa bàn tỉnh Vĩnh Phúc 3 3 ý nghĩa khoa học và thực tiễn Đây là đề tài đầu tiên nghiên cứu về hội chứng tiêu chảy do vi khuẩn E.coli gây. .. chia F18 thành 2 loại là F18ab và F18ac F18ab thờng thấy trong bệnh phù đầu, trong khi đó F18ac phân lập đợc từ lợn con tiêu chảy trớc cai sữa 1.4 Các yếu tố gây bệnh của vi khuẩn E.coli Vi khuẩn E.coli trở thành vi khuẩn gây bệnh khi có các yếu tố gây bệnh quan trọng sau: 1.4.1 Các yếu tố không phải là độc tố 1.4.1.1 Khả năng bám dính của vi khuẩn Khả năng bám dính là yếu tố vô cùng quan trọng để thực... Autovacxin phòng bệnh tiêu chảy liều tiêm 3- 5 ml /con, đạt tỷ lệ phòng bệnh 89,22% Đỗ Trung Cứ và cộng sự (2000) [5] sử dụng chế phẩm Biosubtyl phòng bệnh tiêu chảy cho lợn con, làm giảm đợc 42% số lợn tiêu chảy ở lợn con giai đoạn từ 1 đến 60 ngày tuổi Đỗ Ngọc Thuý và cộng sự (2002) [38] đ4 xác định tỷ lệ kháng kháng sinh của 106 chủng vi khuẩn E.coli phân lập từ lợn con theo mẹ bị tiêu chảy, có xu... phần vào vi c hạn chế những thiệt hại do bệnh tiêu chảy gây ra cho lợn con, đ4 có nhiều tác giả nghiên cứu và thu đợc nhiều thành công ở những góc độ khác nhau Nhng cho đến nay, bệnh tiêu chảy ở lợn con theo mẹ vẫn còn là bệnh gây thiệt hại lớn cho chăn nuôi lợn do tính chất phức tạp của mầm bệnh, với nhiều nguyên nhân và các yếu tố tác động Những nghiên cứu về bệnh do vi khuẩn E.coli gây ra nh bệnh. .. bệnh phân trắng, bệnh tiêu chảy và bệnh phù đầu ở lợn con, đ4 đợc các tác giả đ4 nghiên cứu ở một số tỉnh miền Bắc, đồng bằng sông Cửu Long, các tỉnh Đông Nam Bộ và đ4 có một số kết quả khác nhau tuỳ theo từng vùng địa lý 12 Tuy nhiên, trên địa bàn tỉnh Vĩnh Phúc, cha có công trình nào nghiên cứu về bệnh tiêu chảy do E.coli gây ra ở lợn con theo mẹ và xây dựng các biện pháp phòng và điều trị có hiệu quả... Enteropathegenic E.coli (AEEC) Từ đó sắp xếp các Serotype cùng mang các yếu tố gây bệnh vào các nhóm gây nên những thể bệnh đặc trng cho từng lứa tuổi lợn khác nhau nh sau: 14 Bảng các chủng E.coli gây bệnh trên lợn (Fairbrother 1992) [50] Serotyp Thể bệnh Loại vi vi khuẩn gây ra của khuẩn E.coli E.coli E.coli Các yếu tố gây bệnh ST STb LT VT F4 F5 T6 K88 K99 987P + O8 K316 Gây bệnh ỉa + + O9 K35 chảy ở lợn +... chảy ở lợn con là do E.coli gây ra Vì vậy, bệnh do E.coli gây ra có vị trí đặc biệt trong các bệnh nhiễm khuẩn ở lợn con Lý Thị Liên Khai và cộng sự (2000) [12] đ4 phân lập và xác định độc tố ruột của các chủng E.coli gây bệnh tiêu chảy cho lợn con, tác giả cho rằng các chủng F4 (K88) sinh độc tố ruột LT và ST, F5 (K99) và F6 (987P) sinh độc tố ruột ST và độc tố ST trở nên độc khi sức đề kháng của vật