TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM BÁO CÁO KẾT QUẢ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP TRƯỜNG MÃ SỐ: SV 2013-01 Tên đề tài: “NHÂN GIỐNG CÂY BÌNH VÔI TÍM (Stephanla rotunada Luour) BẮNG PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬT” CHỦ TRÌ ĐỀ TÀI : Đào Bá Tuyên Thái Nguyên , 2014 KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM BÁO CÁO KẾT QUẢ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP TRƯỜNG MÃ SỐ: SV 2013-01 Tên đề tài: “NHÂN GIỐNG CÂY BÌNH VÔI TÍM (Stephanla rotunada Luour) BẮNG PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬT” : Đào Bá Tuyên Chủ trì đề tài Những người tham gia : Thời gian thực : Từ 03/2013 – 03/2014 Giảng viên hướng dẫn : ThS Vi Đại Lâm Địa điểm nghiên cứu : Phòng thí nghiệm Khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Thái Nguyên, 2014 LỜI CẢM ƠN Sau năm tham gia thực đề tài nghiên cứu khoa học, em hoàn thành đề tài nghiên cứu Nhân dịp em xin bày tỏ lòng biết ơn tới: Ths Vi Đại Lâm Ths Nguyễn Thị Tình, Khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn tới Ks Lã Văn Hiền giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em suốt trình thực đề tài Đồng thời, em xin chân thành cảm ơn thầy cô Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên dạy dỗ, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm nghiên cứu khoa học suốt thời gian học tập Cuối em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè ủng hộ, động viên để em có tự tin học tập nghiên cứu khoa học Do thời gian thực đề tài có giới hạn nên đề tài tránh khỏi sai sót Em mong nhận đóng góp ý kiến thầy cô bạn để đề tài em hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn ! Thái Nguyên, tháng 03 năm 2014 Sinh viên Đào Bá Tuyên TÓM TẮT KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ Tên đề tài: “Nhân giống bình vôi tím (Stephania rotunada Luour)bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật” - Mã số: SV 2013-01 - Chủ nhiệm đề tài: Sv Đào Bá Tuyên - Tell: (+84)1658889205 E-mail: tuyen.badao1992@gmail.com - Cơ quan chủ trì đề tài: Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên - Cơ quan phối hợp thực : - Bộ môn Công nghệ sinh học, khoa Công nghệ sinh học - công nghệ thực phẩm, Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên - Thời gian thực hiện: từ tháng năm 2013 đến tháng năm 2014 Mục đích Hoàn thiện quy trình nhân giống bình vôi tím (Stephania rotunada Luour) phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật Nội dung - Nghiên cứu ảnh hưởng hóa chất khử trùng đến khả tạo vật liệu vô trùng - Nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng đến khả tái sinh, nhân nhanh Bình Vôi tím - Nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng đến khả rễ Bình Vôi tím Kết đạt - Sản phẩm khoa học: 01 báo cáo đề tài nghiên cứu khoa học - Sản phẩm ứng dụng: Bước đầu hoàn thiện quy trình nhân giống bình vôi tím (Stephania rotunada Luour) phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật SUMMARY - Research Project Title “ Propagation of Stephania rotunada Luour by Plant tissue culture techni que ” - Code number: T2013-01 - Coordinator: Dao Ba Tuyen - Tell: 01658889205 Email: tuyen.badao1992@gmail.com - Implementing Institution: Thai Nguyen University of Agricultural and Forestry - Cooperating Institution: Faculty of Biotechnology and Food Technology - Duration: March 2013 to March 2014 Objectives: Implement the Plant breeding on Stephania rotunada Luour by Plant tissue culture Main contents: - The effects of chemical disinfection on ability to produce sterilized materials - The influences of growth stimulants substance on ability to produce roots of Stephania rotunada Luour - The influence of growth stimulants on ability to regenerate and proliferate roots of Stephania rotunada Luour Obtained results: - Scientific Result: 01 Scientific researched Report - Applied Result: Construct the general process of Plant breeding on Stephania rotunada Luour by Plant tissue culture M ỤC L ỤC Trang PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu Bình vôi .3 2.1.1 Phân loại khoa học 2.1.2 Đặc điểm hình thái phân bố 2.2 Vai trò bình vôi tím 2.2.1 Giá trị kinh tế 2.2.2 Giá trị dược liệu .5 2.3 Khái quát nuôi cấy mô tế bào thực vật .7 2.3.1 Tính toàn (Totipotence ) tế bào 2.3.2 Sự phân hóa phản phân hóa tế bào 2.3.3 Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3.3.1 Điều kiện nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3.3.2 Thành phần môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật .9 2.3.4 Các giai đoạn nhân giống vô tính in vitro 13 2.3.4.1 Chọn lọc chuẩn bị mẹ 13 2.3.4.3 Nhân nhanh 13 2.3.4.4 Tạo in vitro hoàn chỉnh 14 2.3.4.5 Thích ứng in vitro điều kiện tự nhiên 14 2.4 Tình hình nhân giống sử dụng củ Bình vôi 14 2.5 Tình hình nghiên cứu nước nước 15 LỜI CẢM ƠN Sau năm tham gia thực đề tài nghiên cứu khoa học, em hoàn thành đề tài nghiên cứu Nhân dịp em xin bày tỏ lòng biết ơn tới: Ths Vi Đại Lâm Ths Nguyễn Thị Tình, Khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn tới Ks Lã Văn Hiền giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em suốt trình thực đề tài Đồng thời, em xin chân thành cảm ơn thầy cô Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên dạy dỗ, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm nghiên cứu khoa học suốt thời gian học tập Cuối em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè ủng hộ, động viên để em có tự tin học tập nghiên cứu khoa học Do thời gian thực đề tài có giới hạn nên đề tài tránh khỏi sai sót Em mong nhận đóng góp ý kiến thầy cô bạn để đề tài em hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn ! Thái Nguyên, tháng 03 năm 2014 Sinh viên Đào Bá Tuyên PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 30 5.1 Kết luận 30 5.2 Kiến nghị 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO 31 DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Phân loại khoa học Chi Bình vôi (Stephania spp) [1] Bảng 3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ thời gian khử trùng 20 dung dịch NaOCl đến khả tạo mô nấm vi khuẩn 20 Bảng 3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch Ca(OCl)2 đến khả tạo mô nấm vi khuẩn 20 Bảng 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tái sinh chồi từ chồi nách thân Bình Vôi 21 Bảng 3.4 Nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp nồng độ BA NAA đến khả nhân nhanh chồi Bình Vôi 22 Bảng 3.5 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến 23 khả rễ Bình Vôi 23 Bảng 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ thời gian khử trùng dung dịch NaOCl đến khả tạo mô nấm vi khuẩn 24 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch Ca(OCl)2 đến khả tạo mô nấm vi khuẩn 25 Bảng 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả 26 Bảng 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA NAA đến khả nhân nhanh chồi Bình vôi 27 Bảng 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ Bình vôi sau tuần nuôi cấy 28 DANH MỤC HÌNH Trang Hình 2.1: Cây Bình vôi (Stephania rotunda Lour) DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Phân loại khoa học Chi Bình vôi (Stephania spp) [1] Bảng 3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ thời gian khử trùng 20 dung dịch NaOCl đến khả tạo mô nấm vi khuẩn 20 Bảng 3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch Ca(OCl)2 đến khả tạo mô nấm vi khuẩn 20 Bảng 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tái sinh chồi từ chồi nách thân Bình Vôi 21 Bảng 3.4 Nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp nồng độ BA NAA đến khả nhân nhanh chồi Bình Vôi 22 Bảng 3.5 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến 23 khả rễ Bình Vôi 23 Bảng 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ thời gian khử trùng dung dịch NaOCl đến khả tạo mô nấm vi khuẩn 24 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch Ca(OCl)2 đến khả tạo mô nấm vi khuẩn 25 Bảng 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả 26 Bảng 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA NAA đến khả nhân nhanh chồi Bình vôi 27 Bảng 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ Bình vôi sau tuần nuôi cấy 28 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Môi trường Các thành phần môi trường MS (Murashige Skoog, 1962) Thành phần khoáng đa lượng NH-4NO3 Nồng độ (mg/l) 1650 KNO3 1900 CaCl2.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4 Thành phần khoáng vi lượng MnSO4.H2O ZnSO4.7H2O H3BO3 KI Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 440 370 170 Nồng độ (mg/l) 23,3 8,6 6,2 0,83 0,25 0,025 0,025 Na2EDTA FeSO47H2O 37,3 27,8 Nồng độ (mg/l) 0,1 0,5 0,5 2,0 Vitamin Thiamin HCl Nicotinic Axit Pyridoxine HCl Glyxine TLTK bổ sung [5] Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhị, Lê Thi Muội (1997), Công nghệ sinh học cải tiến giống trồng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội [18] Đinh Đoàn Long, Lê Huy Hàm, Đỗ Năng Vịnh, Hà Thị Thuý, Bernd Bueter (2004), “Nhân giống vô tính in vitro dòng Kava (Pipe methusticum G Forster) có hoạt tính sinh học cao”, Những vấn đề nghiên cứu Khoa học sống, Nxb KH&KT Hà Nội, tr.536 -50 33 Phụ lục 2: Một số ảnh thí nghiệm CT CT CT CT CT Hình 1: Cây Bình vôi môi trường tái sinh 34 CT CT CT CT Hình 2: Cây Bình vôi môi trường nhân nhanh sau tuần 35 CT CT CT CT CT Hình 3: Cây Bình vôi môi trường nhân nhanh sau tuần 36 DANH MỤC HÌNH Trang Hình 2.1: Cây Bình vôi (Stephania rotunda Lour) BALANCED ANOVA FOR VARIATE MC FILE NAOCL 25/ 2/14 16:22 :PAGE VARIATE V005 MC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================= ================ CT 20.6667 * RESIDUAL 2.58333 18 5.33333 8.72 0.000 296296 * TOTAL (CORRECTED) 26 26.0000 1.00000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAOCL 25/ 2/14 16:22 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS MS MN MC 1.33333 8.00000 0.666667 1.66667 7.00000 1.33333 3 1.33333 6.33333 2.33333 3.00000 6.00000 1.00000 4.33333 4.00000 1.66667 3.66667 3.66667 2.66667 3.33333 6.00000 0.666667 4.66667 4.00000 1.33333 2.66667 4.00000 3.33333 SE(N= 3) 5%LSD 18DF 0.314270 0.368514 0.933741 1.09491 38 0.314270 0.933741 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAOCL 25/ 2/14 16:22 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 27) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | | | | MS 27 2.8889 1.2810 0.54433 18.8 0.0000 MN 27 5.4444 1.6013 0.63828 11.7 0.0000 MC 27 1.6667 1.0000 0.54433 32.7 0.0001 Bảng Kết nghiên cứu hiệu khử trùng mẫu Ca(OCl)2 BALANCED ANOVA FOR VARIATE MS FILE CAOCL2 25/ 2/14 16:37 :PAGE Hieu qua khu trung mau bang Canxi hypoclorit VARIATE V003 MS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================= ================ CT 34.2667 * RESIDUAL 8.56667 10 3.33334 25.70 0.000 333334 * TOTAL (CORRECTED) 14 37.6000 39 2.68571 BALANCED ANOVA FOR VARIATE MN FILE CAOCL2 25/ 2/14 16:37 :PAGE VARIATE V004 MN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================= ================ CT 41.0667 * RESIDUAL 10.2667 10 2.66667 38.50 0.000 266667 * TOTAL (CORRECTED) 14 43.7333 3.12381 BALANCED ANOVA FOR VARIATE MC FILE CAOCL2 25/ 2/14 16:37 :PAGE VARIATE V005 MC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================= ================ CT 30.2667 * RESIDUAL 7.56667 10 666669 113.50 0.000 666669E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 30.9333 2.20952 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CAOCL2 25/ 2/14 16:37 :PAGE 40 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS MS MN MC 5.33333 4.66667 0.000000 8.66667 1.33333 0.000000 3 9.33333 0.666667 0.000000 8.33333 0.666667 6.33333 SE(N= 3) 0.000000 3.66667 0.333333 5%LSD 10DF 1.00000 1.05035 0.298143 0.149071 0.939458 0.469730 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CAOCL2 25/ 2/14 16:37 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 15) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | | | | MS 15 7.6000 1.6388 0.57735 7.6 0.0001 MN 15 1.4667 1.7674 0.51640 35.2 0.0000 MC 15 0.93333 1.4864 0.25820 27.7 0.0000 Bảng Kết qua nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến tái sinh mẫu sau tuần nuôi cấy 41 PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Bình Vôi tím, dân tộc Tày tỉnh Bắc Kạn thường gọi “cà tòm đeng” có nghĩa bình vôi đỏ, tên khoa học “Stephania rotunada lour” thuộc họ tiết dê (Menispermaceae) Bình Vôi tím dây leo giống loại Bình Vôi khác, gốc rễ hình thành củ, mọc bám vào vách đá củ Bình Vôi tím nhỏ loại trắng nhiều (chỉ nặng khoảng 0,5kg - 1kg), vỏ củ mầu nâu, dây mầu tím, phần thịt củ mầu đỏ, nhựa dây mầu đỏ Phần dây leo y hệt bình vôi trắng, non mầu tím Cây Bình Vôi tím phân biệt đực rõ hoa đực hoa khác gốc, củ khác, củ thường tròn, củ đực thường dài Bình Vôi tím loại dược liệu quý, gặp, thuộc loại Dùng để điều trị bệnh đường ruột (như viêm loét dầy, viêm đại tràng, lỵ cấp mãn…) bệnh khớp thần kinh Đặc biệt, dùng bột củ bình vôi tím với liều lượng 5g - 10g/ngày có tác dụng tiêu u (u đại tràng, u phổi) Dùng củ tươi giã nát tẩm nước vo gạo để đắp u lành tính bên kể biếu basedow có hiệu tốt, u nhỏ lại trông thấy sau đợt điều trị từ 10 ngày - 15 ngày Hiện với nhu cầu sử dụng ngày tăng việc khai thác liên tục nhiều năm không ý tới bảo vệ tái sinh, cộng với nhiều nguyên nhân khác làm Bình vôi tím (Stephania rotunada Lour) vốn phân bố phổ biến tỉnh miền núi phía bắc bị suy giảm nghiêm trọng, có nguy bị tuyệt chủng Ngày nay, với phát triển khoa học kỹ thuật việc ứng dụng nuôi cấy mô tế bào thực vật nhân giống trở nên phổ biến Nuôi cấy mô tế bào tạo giống trồng bệnh, chất lượng tốt, độ đồng cao hệ số nhân lớn Nhận thức vấn đề bảo tồn phát triển loài thuốc quí có tiềm Xuất phát từ lý tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nhân giống bình vôi tím (Stephania rotunada lour) phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật ” 1.2 Mục tiêu đề tài Hoàn thiện quy trình nhân giống Bình Vôi tím (Stephania rotunada lour)bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TS 25/ 2/14 17: :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 15) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | SMTS 15 8.2667 1.7512 0.44721 | | | | 5.4 0.0000 Bảng Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ chất kích thích sinh trưởng thời gian đến khả nhân nhanh Bình vôi BALANCED ANOVA FOR VARIATE 4T FILE NN 25/ 2/14 23:53 :PAGE Anh huong cua chat kich thich sinh truong va thoi gian den su nhan nhanh VARIATE V003 4T LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================= ================ CT 6.73067 * RESIDUAL 1.68267 10 166667 100.96 0.000 166667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 6.89733 492667 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 6T FILE NN 25/ 2/14 23:53 :PAGE VARIATE V004 6T 43 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================= ================ CT 8.80667 * RESIDUAL 2.20167 10 193334 113.88 0.000 193334E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 9.00000 642857 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NN 25/ 2/14 23:53 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 4T 6T 1.96667 2.56667 2.76667 3.73333 3 2.10000 2.73333 1.23333 2.03333 0.866667 1.43333 SE(N= 3) 5%LSD 10DF 0.745357E-01 0.802774E-01 0.234865 0.252957 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NN 25/ 2/14 23:53 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 15) SD/MEAN | 44 | | NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | | | | 4T 15 1.7867 0.70190 0.12910 7.2 0.0000 6T 15 2.5000 0.80178 0.13904 5.6 0.0000 Bảng Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ Bình vôi sau tuần nuôi cấy BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR FILE RR 26/ 2/14 4:59 :PAGE Ket qua nghien cuu anh huong cua nong NAA den kha nang re cay Binh voi VARIATE V003 SR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================= ========== CT 862667 * RESIDUAL 215667 29.41 0.000 10 733333E-01 733333E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 936000 668571E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RR 26/ 2/14 4:59 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SR 1.43333 2.00000 3 2.10000 45 2.00000 1.76667 SE(N= 3) 0.494413E-01 5%LSD 10DF 0.155791 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RR 26/ 2/14 4:59 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 15) SD/MEAN | SR | NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | 15 1.8600 0.25857 | | | 0.85635E-01 4.6 0.0000 46 | [...]... số nhân lớn Nhận thức được vấn đề bảo tồn và phát triển những loài cây thuốc quí có tiềm năng Xuất phát từ những lý do trên chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Nhân giống cây bình vôi tím (Stephania rotunada lour) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật ” 1.2 Mục tiêu của đề tài Hoàn thiện quy trình nhân giống cây Bình Vôi tím (Stephania rotunada lour )bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực. .. của tế bào 7 2.3.2 Sự phân hóa và phản phân hóa tế bào 8 2.3.3 Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật 8 2.3.3.1 Điều kiện nuôi cấy mô tế bào thực vật 8 2.3.3.2 Thành phần môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật .9 2.3.4 Các giai đoạn của nhân giống vô tính in vitro 13 2.3.4.1 Chọn lọc và chuẩn bị cây mẹ 13 2.3.4.3 Nhân nhanh 13 2.3.4.4 Tạo cây. .. quan trọng nhất trong sự tăng trưởng, phát triển hình thái của tế bào và mô thực vật trong nuôi cấy là thành phần môi trường nuôi cấy Thành phần môi trường nuôi cấy mô tế bào thay đổi tuỳ theo loài thực vật, loại tế bào, mô và bộ phận nuôi cấy Mặc dù có sự đa dạng về thành phần và nồng độ các chất nhưng tất cả các loại môi trường nuôi cấy mô đều gồm các thành phần sau: các khoáng đa lượng, các khoáng... tế bào chuyên hóa sang tế bào phôi sinh để thực hiện chức năng phân chia Hoạt động của các quá trình này được điều khiển bởi các chất điều hòa sinh trưởng thực vật, cũng như các yếu tố nhiệt độ, môi trường, ánh sáng 2.3.3 Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật Môi trường nuôi cấy là điều kiện tối cần thiết, là yếu tố quyết định cho sự phân hoá tế bào và cơ quan nuôi cấy 2.3.3.1 Điều kiện nuôi cấy mô. .. đến khả năng tái sinh, nhân nhanh cây Bình Vôi tím - Nghiên cứu ảnh hưởng của chất kích thích sinh trưởng đến khả năng ra rễ của cây Bình Vôi tím 3 Kết quả chính đạt được - Sản phẩm khoa học: 01 báo cáo đề tài nghiên cứu khoa học - Sản phẩm ứng dụng: Bước đầu hoàn thiện quy trình nhân giống cây bình vôi tím (Stephania rotunada Luour) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật điểm của sinh học hiện... thực vật 1 1.3 Ý nghĩa của đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học Kết quả nghiên cứu sẽ xây dựng quy trình kỹ thuật nhân giống cây Bình vôi bằng phương pháp nuôi cấy in vitro là cơ sở nhân nhanh loài dược liệu quí có nguy cơ cạn kiệt 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn Kết quả nghiên cứu góp phần bổ sung cho kĩ thuật nhân giống Bình vôi, nhân nhanh cây giống sạch bệnh, chất lượng đảm bảo và bảo tồn nguồn gen quí hiếm Thực. .. lí học thực vật quốc tế (IAPP), nguyên tố khoáng mà thực vật cần với nồng độ lớn hơn 0,5 mmol/l gọi là nguyên tố đa lượng, nguyên tố khoáng mà thực vật cần có nồng độ nhỏ hơn 0,5 mmol được gọi là nguyên tố vi lượng Nguyên tố khoáng là nhu cầu rất cần thiết đối với nuôi cấy mô thực vật Giống như cây trồng ngoài tự nhiên các mô và cơ thể thực vật khi nuôi cấy trong ống nghiệm trên môi trường nhân tạo... mặt trong mô Môi trường nhân tạo sử dụng phổ biến nhất thường được sử dụng trong nuôi cấy mô, tế bào thực vật là môi trường MS (Murashige và Skoog (1962) cũng được thiết lập dựa trên nguyên tắc này [11] c) Đường Đường là thành phần quan trọng trong tất cả các môi trường dinh dưỡng nuôi cấy mô thực vật Đường cần thiết cho sự sinh trưởng và phát triển vì quá trình quang hợp của mô hoặc cây nuôi cấy là không... hợp thực hiện : - Bộ môn Công nghệ sinh học, khoa Công nghệ sinh học - công nghệ thực phẩm, Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên - Thời gian thực hiện: từ tháng 3 năm 2013 đến tháng 3 năm 2014 1 Mục đích Hoàn thiện quy trình nhân giống cây bình vôi tím (Stephania rotunada Luour) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 2 Nội dung chính - Nghiên cứu ảnh hưởng của hóa chất khử trùng đến khả năng tạo vật. .. nguyên tố dinh dưỡng thiết yếu của thực vật Nhu cầu của mô thực vật nuôi cấy đối với nguyên tố dinh dưỡng khoáng khác nhau so với thực vật ngoài đồng ruộng Hệ rễ thực vật lấy dinh dưỡng từ đất chủ yếu theo phương thức hấp thu chủ động, còn mô nuôi cấy dinh dưỡng khoáng từ môi trường theo phương thức hấp thu bị động là chính Theo nguyên tắc thành phần môi trường nuôi cấy sẽ được xây dựng trên thành phần