BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG PHẠM VĂN TÀI NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA THỨC ĂN VÀ MẬT ĐỘ NUÔI LÊN SINH TRƢỞNG VÀ TỶ LỆ SỐNG CỦA CÁ KHOANG CỔ CAM (Amphiprion percula Lacepede, 1802) GIAI ĐOẠN TỪ MỚI NỞ ĐẾN 60 NGÀY TUỔI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHÁNH HÒA - 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG PHẠM VĂN TÀI NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA THỨC ĂN VÀ MẬT ĐỘ NUÔI LÊN SINH TRƢỞNG VÀ TỶ LỆ SỐNG CỦA CÁ KHOANG CỔ CAM (Amphiprion percula Lacepede, 1802) GIAI ĐOẠN TỪ MỚI NỞ ĐẾN 60 NGÀY TUỔI LUẬN VĂN THẠC SĨ Ngành: Nuôi trồng thủy sản Mã số: 60620301 Quyết định giao đề tài: 1021/QĐ-ĐHNT ngày 07/10/2014 Quyết định thành lập HĐ: 1044/QĐ-ĐHNT ngày 10/11/2015 Ngày bảo vệ: 25/11/2015 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS NGUYỄN TẤN SĨ Chủ tịch Hội đồng: TS PHẠM QUỐC HÙNG Khoa sau đại học: HỒNG HÀ GIANG KHÁNH HỊA - 2015 LỜI CAM ĐOAN Các số liệu kết luận văn tốt nghiệp cao học phần nội dung nghiên cứu đề tài Khoa học Công nghệ cấp Bộ Giáo dục (Mã số: B2014–13– 09), Đại học Nha Trang chủ trì – ThS Trần Văn Dũng chủ nhiệm Đƣợc đồng ý chủ nhiệm đề tài, tham gia thực sử dụng số liệu đề tài Tôi xin cam đoan kết số liệu luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình nghiên cứu Khánh Hịa, ngày tháng 12 năm 2015 Tác giả luận văn Phạm Văn Tài iii LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, Viện Nuôi trồng Thủy sản, Khoa Sau Đại học Trƣờng Đại học Nha Trang quan tâm giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập nghiên cứu vừa qua Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Tấn Sỹ tận tình hƣớng dẫn, động viên dìu dắt tơi suốt q trình định hƣớng nghiên cứu, thực đề tài viết luận văn tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn ThS Trần Văn Dũng tạo điều kiện sở vật chất để thực tốt đề tài tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn thuộc Viện Nuôi trồng Thủy sản tập thể lớp CHNT 2013–2 nhiệt tình giúp đỡ, động viên trình học tập, nghiên cứu ng suốt thời gian thực đề tài Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình động viên giúp đỡ suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn! Khánh Hịa, ngày tháng 12 năm 2015 Tác giả luận văn Phạm Văn Tài iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN iii LỜI CẢM ƠN iv MỤC LỤC .v DANH MỤC HÌNH viii DANH MỤC ĐỒ THỊ ix TRÍCH YẾU LUẬN VĂN x Từ khóa: cá khoang cổ cam, sinh trƣởng, tỷ lệ sống, thức ăn, mật độ ƣơng xi MỞ ĐẦU .3 1.1 Đặc điểm sinh học cá khoang cổ cam cá khoang cổ nói chung 1.1.1 Đặc điểm phân loại, hình thái phân bố 1.1.1.1 Vị trí phân loại cá khoang cổ cam 1.1.1.2 Đặc điểm hình thái ải) [5] Hình 1.1 Cá khoang cổ 1.1.1.3 Đặc điểm phân bố 1.1.2 Đặc điểm cộng sinh với hải quỳ 1.1.3 Đặc điểm sinh trƣởng 1.1.4 Đặc điểm dinh dƣỡng 1.2.1 Đặc điểm sinh sản 1.2.1.3 Sự kết cặp, q trình đẻ chăm sóc trứng 10 1.2.2 Quá trình phát triển phôi .11 1.2.3 Thức ăn dinh dƣỡng giai đoạn ấu trùng cá khoang cổ 12 1.2.4 14 1.2.4.1 Ảnh hƣởng cá bố mẹ 14 1.2.4.2 15 1.2.4.3 18 1.2.4.4 19 1.3 Tình hình nghiên cứu giới Việt Nam 22 1.3.1 Trên giới .22 v 1.3.2 Trong nƣớc 24 CHƢƠNG PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Thời gian, đối tƣợng, địa điểm nghiên cứu 26 2.2 Vật liệu phƣơng pháp nghiên cứu 26 2.2.1 Sơ đồ nội dung nghiên cứu 26 2.2.2 Nguồn cá thí nghiệm 27 2.2.3 Nguồn nƣớc hệ thống bể thí nghiệm 27 2.2.4 Thức ăn nhân tạo 27 2.3 Bố trí thí nghiệm 28 2.3.1 Thí nghiệm ảnh hƣởng loại thức giai đoạn đến 30 ngày tuổi .28 2.3.2 Thí nghiệm ảnh hƣởng loại thức ăn giai đoạn 30–60 ngày tuổi 28 2.3.3 Thí nghiệm ảnh hƣởng mật độ giai đoạn nở đến 30 ngày tuổi .28 2.3.4 Thí nghiệm ảnh hƣởng mật độ ƣơng giai đoạn 30 – 60 ngày tuổi .29 2.4 Chăm sóc quản lý cá thí nghiệm 29 2.5 Phƣơng pháp thu thập xử lý số liệu .29 2.5.1 Các thông số môi trƣờng hệ thống nuôi 29 2.5.2 Xác định tốc độ tăng trƣở 29 2.5.3 Phƣơng pháp xử lý số liệu 30 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Thí nghiệm ảnh hƣởng thức ăn lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá khoang cổ cam giai đoạn từ nở đến 30 ngày tuổi .31 3.2 Thí nghiệm ảnh hƣởng thức ăn lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá khoang cổ cam giai đoạn từ 30 đến 60 ngày tuổi .34 3.3 Thí nghiệm ảnh hƣởng mật độ nuôi lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá khoang cổ cam giai đoạn từ nở đến 30 ngày tuổi 37 3.4 Thí nghiệm ảnh hƣởng mật độ nuôi lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá khoang cổ cam giai đoạn từ 30 đến 60 ngày tuổi 39 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ‰ Phần nghìn Art Artemia DHA 22:6n-3 Docosahexaenoic acid DO Dissolvel Oxygen Hàm lƣợng oxy hoà tan EPA 20:5n-3 Eicosapentaenoic acid HUFA High unsaturated fatty acids Axít béo có mức chƣa no cao L Lít n-Art nauplii Artemia NT Nghiệm thức SE Standard error Sai số chuẩn SGR Specific Growth Rate SL Total length ặc trƣng Chiều dài chiều dài chuẩn TACB Thức ăn chế biến TATH Thức ăn tổng hợp TN Thí nghiệm KST Kỹ sinh trùng vii DANH MỤC HÌNH ải) Hình 1.1 Cá khoang cổ Hình 1.2 Phân bố địa lý cá khoang cổ cam Hình 1.3 Vịng đời cá khoang cổ 10 ể A clarkii 12 Hinh 1.5 Hệ thống bể nuôi cá khoang cổ nemo 19 Hình 2.1 Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu 26 27 viii DANH MỤC ĐỒ THỊ Đồ thị 3.1 Ảnh hƣởng thức ăn đến SGRL .31 Đồ thị 3.2 Ảnh hƣởng thức ăn đến chiề - 32 Đồ thị 3.3 Ảnh hƣởng thức ăn đến tỷ lệ sống - .32 Đồ thị 3.4 Ảnh hƣởng thức ăn đến SGRL 34 Đồ thị 3.5 Ảnh hƣởng thức ăn đến chiề 35 Đồ thị 3.6 Ảnh hƣởng thức ăn đến tỷ lệ sống 35 Đồ thị 3.7 Ảnh hƣởng mật độ ƣơng đế - Đồ thị 3.8: Ảnh hƣởng mật độ ƣơng đến chiều dài từ Đồ thị 3.9: Ảnh hƣởng mật độ đến SGRL từ - Đồ thị 3.12 Ảnh hƣởng mật độ ƣơng đến tỷ lệ sống từ ix .38 .38 Đồ thị 3.10 Ảnh hƣởng mật độ ƣơng đến SGRLtừ Đồ thị 3.11 Ảnh hƣởng mật độ ƣơng đến chiều dài từ 37 40 - 41 - .41 TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Cá khoang cổ cam (Amphiprion percula) loài cá cảnh đƣợc ƣa chuộng giống cá khoang cổ, chúng có màu sắc sặc sỡ khả thích nghi cao điều kiện nuôi nhốt Do nhu cầu thị trƣờng cao khả cung cấp giống nhân tạo hạn chế làm gia tăng nguy cạn kiệt nguồn lợi tự nhiên nhiều loài cá cảnh, trƣờng hợp sử dụng biện pháp khai thác mang tính hủy diệt, việc hồn thiện quy trình sản xuất giống đối tƣợng cần thiết Việc ƣơng nuôi ấu trùng cá cảnh nói chung cá khoang cổ nói riêng phụ thuộc vào nhiều yếu tố nhƣ: hệ thống, kỹ thuật ni, dinh dƣỡng, mật độ ƣơng, chế độ chăm sóc, yếu tố mơi trƣờng dịch bệnh Trong đó, mật độ ƣơng thức ăn yếu tố quan trọng góp phần nâng cao tốc độ sinh trƣởng, tỷ lệ sống hiệu ƣơng nuôi lồi cá Tuy nhiên, hầu nhƣ chƣa có nghiên cứu mật độ ƣơng thức ăn ấu trùng cá khoang cổ cam giai đoạn nở đến 60 ngày tuổi Thí nghiệm mật độ ƣơng giai đoạn từ nở đến 30 ngày tuổi đƣợc thực với nghiệm thức (1, 3, con/L) nhằm tìm mật độ ƣơng thích hợp cho ấu trùng cá khoang cổ cam nở Kết nghiên cứu cho thấy, mật độ ƣơng có ảnh hƣởng lớn đến tốc độ sinh trƣởng đặc trƣng chiều dài toàn thân ấu trùng cá khoang cổ cam nở Trong đó, cá đƣợc ni mật độ con/L cho tốc độ sinh trƣởng đặc trƣng cao (3,89 3,77 %/ngày), (p>0,05), ƣơng mật độ con/L (2,99%/ngày /ngày) thấp mật độ con/L (2,48%/ngày), (p < 0,05) Tỷ lệ sống ấu trùng cá đƣợc ƣơng mật độ con/L đạ ệ sống cao (87,7 75,6%), cá đƣợc ƣơng mật độ con/L (44,0 %) thấp ƣơng mật độ con/L (27,7 %); (p < 0,05) Thí nghiệm mật độ ƣơng giai đoạn 30 đến 60 ngày tuổi đƣợc thực với nghiệm thức (1, 2, 3, con/l) nhằm tìm mật độ ƣơng thích hợp cho ấu trùng cá khoang cổ cam 30 ngày tuổi Kết nghiên cứu cho thấy, mật độ ƣơng có ảnh hƣởng lớn đến tốc độ sinh trƣởng đặc trƣng chiều dài toàn thân ấu trùng cá khoang cổ cam nở Trong đó, cá đƣợc ni mật độ con/L cho tốc độ sinh trƣởng đặc trƣng cao (0,75 0,59 %/ngày, ƣơng mật độ con/L (0,54 0,41%/ngày /ngày) thấp mật độ con/L (0,22%/gày); (p < 0,05) Tỷ lệ sống mật độ 1, con/L cao đạt (100%); (p>0,05), cá đƣợc ƣơng mật độ con/L (98 93 %); (p < 0,05) Thí nghiệm thức ăn giai đoạn từ nở đến 30 ngày tuổi đƣợc thực với nghiệm thức (luân trùng; n-Artemia; luân trùng + n-Artemia; thức ăn INVE ) nhằm tìm thức ăn thích hợp cho ấu trùng cá khoang cổ cam nở Kết nghiên cứu cho x 32 Bernhard K Synthetic astaxanthin The route of a carotenoid from research to co mmercialisation, In Krinsky NI, MathewsRoth MM, Taylor RF (eds), Carotenoids Plenum Press, New York: Chemistry and Biology; 1990 pp:337 – 364 33 Binesh CP, Renuka K, Malaichami N First report of viral nervous necrosis induced mass mortality in hatchery rearedlarvae of clownfish, Amphiprion sebae Bleeker 1853 J Fish Dis 2013 Dec; 36(12):1017 – 20 34 Binu V, Paulraj R Dietary influence on the egg production and larval viability in True Sebae Clownfish Amphiprion sebae Bleeker 1853.Asian Fisheries Science 2009(22): – 20 35 Boeuf G, Patrick P How sould salinity influence fish growth 2001; Vol 130 pp: 411 – 423 36 Brooks WR The acclimation of anemone fishes to sea anemones: Protection by changes in the fish‟s mucous coat USA: J exp mar Biol Ecol 1984; Vol.80, no.3, pp 277 - 285 37 Buston P Social hierarchies: size and growth modification in clownfish Nature; 2003 pp 145 – 146 38 Chambel, Severiano, Baptista, Mendes, Pedrosa Effect of stocking density and different diets on growth of Percula Clownfish Amphiprion pecurla (Lacepede, 1802) Springerplus 2015(4):183 DOI 10.1186/s40064 – 015 – 0967 39 Colombo G, Grandi G Histologicalstudy of the development and sexdifferentiation of the gonad in the European eel J Fish Biol 1996; 48: 493 – 512 40 Commission E Consultation Process On Monitoring Of International Trade In Ornamental Fish-background Document Cambridge United Nations Environment Programme, World Conservation Society Centre; 2008 pp.43 41 Davenport D, Norris KS Observations on the symbiosis of the sea anemone Stoichactis and the pomacentrid fish Amphiprion percula Boil bull Woods hole 1958; 115(3), pp 397 – 410 42 De SS, Anderson TA Fish Nutrition in Aquaculture Published by Chapman & Hall; 1995.pp 25 – 32 43 Delbare D, Lavens P Clownfish as a reference model for nutritional experiment of egg/Lavarl quality, in fish and selfish larviculture symposium European Aquaculture Society; 1995 p 22 – 25 44 Dhaneesh K, Ajith Kumar T, Balasubramania T Breeding and mass scale rearing of clownfish Amphiprion percula: feeding and rearing in brackishwater” Chinese Journal of Oceanology & Limnology; 2012 Jul, Vol 30 Issue 4, p.528 45 Dhaneesh KV, Ajith Kumar TT, Divya SP, Kumaresan S Influence of prompt first feeding on growth and survival of Clownfish Amphiprion percula larvae Emirates Journal of Food & Agriculture (EJFA) 2012 Feb; Vol 24 Issue 1, p92 46 Eibesfeldt E Land of a thousand Atolls London: Macgibbon and Kee Chapter XII – Anemone fish; 1965 p 195 47 Eschmeyer WN Encyclopedia of fishes Natural World Publishe & Academic Press; 1998 pp 205 – 208 48 FAO Manual on the Production and Use of Live Food for Aquaculture, Fao Fisheries Technical Paper 361; 1996 Available from URL: (http://www.fao.org/docrep/003/w3732e/w3732e00.htm#Contents) 47 49 Fautin DG, Allen GR Field guide to anemone fishes and their host sea anemones Perth: Western Australia museum; 1992 p.166 50 Fishtal ropagations Clownfish subfamily amphiprioninae [Online] 2014Nov; [1creens] Available from URL: http://www.fishtalpropagations.com/#!clownfish 51 Fricke HW Mating system, resource defence and sex change in the Anemonefish Amphiprion akalloisos Z Tierpsychol 1979; (50):313-326 52 Fricke HW Social control of sex: field experiments with the Anemonefish Amphiprion bicinctus Z Tierpsychol 1983; (61)71-77 53 Godwin JR, Fautin DF Defense of host actinians by anemonefishes Copeia 1992 pp 902- 908 54 Godwin JR, Fautin DF Behavioral aspects of protandrous sex change in the anemonefishes, Amphiprion melanopus and endocrine correlates Animal Behaviour 1994 (48): 55 - 567 55 Gordon AH, Kaiser P, Britz T Effect of feed type and age – at – weening on growth and survival of clownfish Amphiprion percula (Pomacentridae)” Aquarium Sciences and Conservation 1998 (2): 215 - 226 56 Grant E Grant's Guide to Fishes Scarborough: E.M Grant Pty Ltd; 1999 57 Green BS, Cormick MI Influence of larval feeding history on the body condition of Amphiprion melanopus J Fish Biol 1999 (55): 1273 - 1289 58 Green BS, Fisher R Temperature influences swi mming speed, growth and larval duration in coral reef fish larvae J Exp Mar Biol Ecol 2003 59 Guillard RRL Culture of phytoplanton for feeding marine invertebrates Massachusetts: Ple mm Publishing Corporation; 1975 pp 29 – 60 60 Guiter S Relations between sea anemones and marine organisms: the example of the symbiosis with the clown fish Alfort (France): Publisher Ecole Nationale Veterinaire; 1996.p 205 61 Haschick RD Reproductive behaviour ofthe Skunk Clownfish, Amphiprion akallopisos, under captive conditions, Master Thesis of Gent University Belgium; 1998 62 Hattori A Socially controlled growth and size - dependent sex change in the anemonefish Amphiprion frenatus in Okinawa, Japan Jap J Ichthyol 1991, vol 38, pp 165 – 178 63 Hoff FH, Snell TW Plankton culture manual, 5th ed Dade City, Florida, United States of America: Florida Aqua Farms; 1999 64 Hoff FH Conditioning, Spawning and Rearing of Fish with Emphasis on Marine Clownfish”, Moe, M., et al, Eds Florida United States of America: Aquaculture Consultants Inc; 1996 65 Hoff FH Conditioning, Spawning and Rearing of Fish with Emphasis on Marine Clownfishes Dade City Florida: Aquaculture Consultants, Inc; 1996.p 212 66 Holt GJ Research on culturing early life stages of marine ornamental species in Second International Conference on Marine Ornamentals: Collection, Culture and Conservation Programs and Abstracts, Florida, United States of America; 2001 pp 19 67 Hyllner SJ, Larson DGJ, Haux C Amino acid composition and endocrinecontrol of vitelline envelope proteins in European seabass (Dicentrarchus labrax) and 48 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 gilthead seabream (Sparus aurata) Molecular Reproductive Development 1995 (41): 339 – 347 Ignatius BR, Gaurau JK, Victor ACC Spawing and lavarl rearingtechnique for tropical clownfio sh A sebae under captive condion J Aqua Trop; 2011 (16) p.241 – 249 Johnston GT, Kaiser H Effect of feeding frequency and ration on the growth of juvenile clownfish (Amphiprion percula)”, 10th Southern African Marine Science Symposium (SAMSS 2002): Land, Sea and People in the New Millennium – Abstracts; 2000 Klinger RE, Floyd RF Fungal Diseases of Fish Report to Institude of Food and Agricultural Sciences; 1996 Kumar TT, Balasubramanian T Broodstock development, spawning and larval rearing of the false clown fish, Amphiprion ocellaris in captivity using estuarine water”, Current Science (00113891); 2009.p.148 Lange J The breeding of different coral fishes in the Zoo Aquarium Berlin Bull Inst Oceanogr (Monaco) 1989 (5): 219 - 222 Laura Q Automatic Clownfish Hatchery San Luis Obispo: Electrical Engineering – Department California Polytechnic State University; 2011 Lieske E, Myers R Collins Pocket Guide Coral reef fishesIndo – Pacific & Caribbean including the Red Sea Haper Collins Publishers; 1994 p.400 Mariscal RN A field and laboratory study of the symbiotic behavior of fishes and sea anemones from the tropical Indo – Paccific Univ Calif Pub In Zoology 1970; Vol 91, p 33 Mariscal RN The Symbiosis between tropical sea anemones and fishes: a review In: R.I Bowman (ed), Berkeley, Univ Calif Press The Galapagos; 1996 p.157-171 Mebs D Anemonefish symbiosis: Vulnerability and resistance of fish to the toxin of the sea anemone, Toxicology Abstracts; ASFA Marine Biotechnology Abstracts ASFA 1: Biological Sciences & Living Resources Frankfurt; 1994, Vol 32, (no.9), pp 1059 – 1068 Moe MA The marine aquarium handbook, Beginning to breeder American: Green Turtle Publication; 1992 p.318 Monica YT, Vanessa KC Development of larvae clownfish Amphiprion clarkii: effect of salinity and temperature World aquaculture adelaide (2014) Jun Mourente G, Odriozola JM Effect of broodstock diets on lipid classes and their fatty acid composition in eggs of gilthead sea bream (Sparus aurata) Fish Physiology and Biochemistry 1990 (8):93 - 101 Moyer JT, Bell LJ Reproductive behaviour of the anemonefish Amphiprion clarkii at Miyake Jima, Japan Jpn J Ichthyol 1976; Vol 23, (no.1), pp 23-32 Muthuwan V, Sawatpeera S, Munkongsomboon S, Chomrung, A Breeding and larval rearing of saddleback anemonefish Amphiprion polymnus Linneaus, (oral abstract), in Second International Conference on Marine Ornamentals: Collection, Culture and Conservation Programs and Abstracts", Florida, United States of America; 2001 p 72 Naas KE, Næss T Enhanced first feeding of halibut larvae (Hippoglossus hippoglossus L.) in green water Aquaculture 1992 (105):143 - 156 Nelso JS Fishes of the world Inc New York: John Wiley & Sons, 3rd ed.1994 49 85 Nelson,JS Fishes of world, 4ed Hoboken New Jersey USA: John Wiley & Son, Inc; 2006 p.601 86 Neugebauer W Sozuchren & Korallenfische Stuttgart: Aquarium magazine14 figs; 1969 Dec: pp.483 – 488 87 Niall GV, Winston DL, Horst K In vitro growth characteristics of five candidate aquaculture probiotics and two fish athogens grown in fish intestinal mucus Federation of European Microbiological Societies 2004; Volume 231, Issue 1, pages 145 – 152 88 Ochi H Temporal patterns of breeding and larval settlement in a temperate population of the tropical anemonefish Amphiprion clarkii Jap J Ichthyol 1985, Vol 32, pp 248 – 257 89 Reiran KI, Rainuzzo JR, Olsen Y Nutritional effects of algal addition in first – feeding of turbot (Scophthalmus maximus L.) larvae Aquaculture 1993 (118): 257 - 275 90 Rema Madhu KM, Retheesh T Life history pathways in false clown Amphiprion ocellaris Cuvier, 1830 A journey from egg to adult under captive condition 2012 Available online at: www.mbai.org.in 91 Rodriguez CJR, Cejas MV, Lorenzo A.Influence of n3 highly unsaturated fatty acid deficiency on the lipid composition of broodstock gilthead seabream (Sparus aurata) and on egg quality Fish Physiology and Biochemistry 1998 (18): 177 - 187 92 Rosenberg SG The anemonefishes of the Indo – Pacific Sea Frontiers 1988 (34): 16 - 21 93 Sales J, Janssens Nutrient requirements of ornamental fish Aquatic Living Resources 2003; 16(6), p.553 -540 94 Sasidharan PD, Thrippamalai TAK, Ramadoss R, Thangavel B Larval rearing of clownfish using Brachionus plicatilis otifer as starter food Science Asia 2011(37): 179 - 185 95 Shin H, Lee J, Choi C Effects of LED light spectra on the growth of the yellowtail clownfish Amphiprion clarkia Fisheries Science 2012 May, Vol 78 Issue 3, p549 96 Singhagraiwan T, Laitim W Study on culture red snapper Lutjanus argentimaculatus (Forsskal, 1775) in net cages with the different rate of feeding time Technical paper 1986 pp 37- 45 97 Songwut P, Sataporn D A simple method for cell culture of „Nemo‟ ocellaris clownfish (Amphiprion ocellaris, Cuvier 1830) Cell Biology International Reports 2014 June, Volume 21, Issue 1, p.39 - 45, 98 Steffens W Principles of Fish Nutrition Chichester: Ellis Horwood Limited; 1989 p.384 99 Sukjai R, Pisut M, Kannika C Gonadal Development and Sex Inversion in Saddleback Anemonefish Amphiprion polymnus Linnaeus (1758)” Kasetsart J (Nat Sci.) 2006 (40): 196 - 203 100 Swagat GA, Kumar TT, Balasubramanian T Reef fish Breeding and Hatchery Production Using Brackishwater A Sustainable Technology with Special Reference to Clark‟s Clownfish, Amphiprion Clarkii (Bennett, 1830) International Journal of Environmental Science and Development, Vol 3, No 1, February 2012 50 101 Torrissen OJ, Christiansen R, Estermann R Astaxanthin deposition in the flesh of Atlantic salmon (Salmo salar L.) in relation to dietary Astaxanthin concentration and feeding period Aquaculture Nutrition 1995 (1):77 - 84 102 Verwey J Coral reef studies I The symbiosis between damselfishes and sea anemones in Batavia Bay Treubia 1930; 12(3): 305 - 366 103 Wabnitz CM, Taylor EG, Razak T Fromocean to aquarium UK: Cambridge UNEPWCMC; 2003 p.66 104 Wallace IS, Murray AG, Gregory A, Munro ES The prevalence of infectious pancreatic necrosis virus in wild marine fish from Scotland with reference to clinically infected salmon farms; 2005 105 Watanable T, Kiron V Review: Prospectus in larval dietetics Aquaculture 1994 (124):223 - 251 106 Wilkens JD Clownfishes Vermont: Microcosm Shelburne; 1998 p 240 107 Wilkerson JD Clownfishes: A guide to their captive care, breeding and natural history United States of America : T.F.H Publications Inc; 2001 108 Wittenrich ML The Complete Illustrated Breeder‟s Guide to Marine Aquarium Fishes Neptune City New Jersey: T.F.H Publications; 2008 p.304 109 Wood EM Collection of coral reef fish for aquaria: global trade, conservation issues and management strategies Uk: Marine Conservation Society; 2001 p.80 110 Ye L, Yang S, Zhu X Effects of temperature on survival, development, growth and feeding of larvaeof Yellowtail clownfish Amphiprion clarkii (Pisces: Perciformes) Acta Ecologica Sinica 2011 (31): 241 – 245 111 Sahu PK, Jena J.K, Das PC, Mondal S, Das R Production performance of Labeo calbasu (Hamilton) in polyculture with three Indian major carps Catla catla (Hamilton), Labeo rohita (Hamilton) and Cirrhinus mrigala (Hamilton) with provision of fertilizers, feed and periphytic substrate as varied inputs Aquaculture 2007 (262):333-339 112 IUCN Species and Climate Change Losing Nemo [Online] 2010 Jul Available from URL: https://www.iucn.org/iyb/about/species_on_the_brink/species_climate/ 113 Norhed Project Biotechnology and Environment [Online] 2014 Jun Available from URL http://norhed.ntu.edu.vn/components/Biotechnology – Environment Accessed at 17/3/2015 114 Norhed Project Aquaculture Component [Online] 2014 Jun Available from URL: http://norhed.ntu.edu.vn/components/aquaculture, Accessed at 17/3/2015 51 PHỤ LỤC Ảnh hƣởng thức ăn lên sinh trƣởng tỷ lệ sống từ nở - 30 ngày Chiều dài thân, sinh trưởng đặc trưng tỷ lệ sống cá thí nghiệm N-Art -Art INVE b a d 9.41 ± 0.078 7.25 ± 0.026 14.4 ± 0.07 10.13 ± 0.049c 3.047 ± 0.0276a 2.18 ± 0.012b 4.47 ± 0.016d 3.29 ± 0.016c 40.3 ± 0.402b 23.0 ± 0.69a 80.3 ± 0.67c 37.3 ± 0.48b Thức ăn SL SGRL TLS Số liệu trình bày bảng giá trị trung bình ± sai số chuẩn Số liệu hàng có chữ khác thể sai khác có ý nghĩa thống kê (p< 0,05) b Descriptives 95% Confidence Interval for Mean Thƣc ăn SL N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Min Max LT 9.4100 40447 23352 8.4052 10.4148 9.11 9.87 n-Art 7.2500 13229 07638 6.9214 7.5786 7.10 7.35 LT+ n-Art 14.4000 36056 20817 13.5043 15.2957 14.10 14.80 INVE 10.1300 25632 14799 9.4933 10.7667 9.89 10.40 Total 12 10.2975 2.72287 78602 8.5675 12.0275 7.10 14.80 LT 3.0467 14364 08293 2.6898 3.4035 2.94 3.21 n-Art 2.1800 06245 03606 2.0249 2.3351 2.11 2.23 SGRL LT+ n-Art 4.4667 08327 04807 4.2598 4.6735 4.40 4.56 INVE 3.2900 08544 04933 3.0778 3.5022 3.21 3.38 Total 12 3.2458 85715 24744 2.7012 3.7904 2.11 4.56 LT 40.3333 2.08167 1.20185 35.1622 45.5045 38.00 42.00 n-Art 23.0000 3.60555 2.08167 14.0433 31.9567 20.00 27.00 TLS LT+ n-Art 80.3333 3.51188 2.02759 71.6093 89.0573 77.00 84.00 INVE 37.3333 2.51661 1.45297 31.0817 43.5849 35.00 40.00 Total 12 45.2500 22.38151 6.46098 31.0295 59.4705 20.00 84.00 ều dài ấu trùng c Subset for alpha = 0.05 Thƣc ăn n-Arte N 7.2500 -1- LT INVE LT + n-Art 9.4100 10.1300 14.4000 Sig 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed SGRL ấu trùng Bảng 1d Subset for alpha = 0.05 Thƣc ăn N n-Art 2.1800 LT INVE LT + n-Art 3 3.0467 3.2900 4.4667 Sig 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed ấu trùng e Subset for alpha = 0.05 Thƣc ăn N n-Art 23.0000 INVE 37.3333 LT 40.3333 LT+ n-Art Sig 80.3333 1.000 256 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed Ảnh hƣởng thức ăn lên sinh trƣởng tỷ lệ sống giai đoạn từ 30 đến 60 ngày hiều dài thân, sinh trưởng đặc trưng tỷ lệ sống cá thí nghiệm Thức ăn SL SGRL TLS Art 18.3 ± 0.18b 0.79 ± 0.032b 97.0 ± 0.57d Copepd 18.7 ± 0.12b 0.85 ± 0.020b 92.0 ± 1.5c TACB 16.4 ± 0.15a 0.42 ± 0.029a 71.3 ± 0.88a INVE 19.0 ± 0.12c 0.91 ± 0.021c 88.0 ± 0.57b Số liệu trình bày bảng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn Số liệu hàng có chữ khác thể sai khác có ý nghĩa thống kê (p< 0,05) -2- b Descriptives 95% Confidence Interval for Mean Thƣc ăn Std Std Mean Deviation Error Lower Bound Upper Bound Min N Art SL Max 18.3667 30551 17638 17.6078 19.1256 18.10 18.70 Copepd 18.7000 20000 11547 18.2032 19.1968 18.50 18.90 TACB 16.4333 25166 14530 15.8082 17.0585 16.20 16.70 INVE 19.0333 20817 12019 18.5162 19.5504 18.80 19.20 Total 12 18.1333 1.07478 31026 17.4505 18.8162 16.20 19.20 Art 7900 05568 03215 6517 9283 74 85 Copepd 8467 03512 02028 7594 9339 81 88 SGRL TACB 4167 05033 02906 2916 5417 37 47 INVE 9100 03606 02082 8204 9996 87 94 Total 12 7408 20411 05892 6111 8705 37 94 97.0000 1.00000 57735 94.5159 99.4841 96.00 98.00 Copepd 92.6667 2.51661 1.45297 86.4151 98.9183 90.00 95.00 TACB 71.3333 1.52753 88192 67.5388 75.1279 70.00 73.00 INVE 88.0000 1.00000 57735 85.5159 90.4841 87.00 89.00 Total 12 87.2500 10.25249 2.95964 80.7359 93.7641 70.00 98.00 Art TLS ều dài ấu trùng c Subset for alpha = 0.05 Thƣc ăn N TACB 16.4333 Art 18.3667 Copepd 18.7000 INVE Sig 18.7000 19.0333 1.000 134 134 Means for groups in homogeneous subsets are displayed SGRL ấu trùng d Thƣc ăn N Subset for alpha = 0.05 -3- TACB 4167 Art 7900 Copepd 8467 INVE 8467 9100 Sig 1.000 163 124 Means for groups in homogeneous subsets are displayed ấu trùng Bẳng 2e Subset for alpha = 0.05 Thƣc ăn N TACB 71.3333 INVE Copepdo Art Sig 88.0000 92.6667 97.0000 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed Ảnh hƣởng mật độ lên sinh trƣởng tỷ lệ sống giai đoạn từ nở đến 30 ngày Mật độ con/L SL SGRL TLS hiều dài thân, sinh trưởng đặc trưng tỷ lệ sống cá thí nghiệm con/L con/L con/L con/L d c b 12.1 ±0.15 11.7 ±0.12 9.2 ±0.12 7.9 ±0.09a 3.89 ± 0.041c 3.77 ± 0.032c 2.99 ± 0.043b 2.48 ± 0.038a 86.7 ± 2.40d 75.7 ± 2.40c 44.0 ± 1.53b 27.7 ± 1.45a Số liệu trình bày bảng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn Số liệu hàng có chữ khác thể sai khác có ý nghĩa thống kê (p< 0,05) b Descriptives Mật độ N SL Mean Std Deviation 95% Confidence Interval for Mean Std Error Lower Bound Upper Bound Min Max 1com/L 12.1333 25166 14530 11.5082 12.7585 11.90 12.40 3con/L 11.7000 20000 11547 11.2032 12.1968 11.50 11.90 5con/L 9.2667 20817 12019 8.7496 9.7838 9.10 9.50 7con/L 7.9333 15275 08819 7.5539 8.3128 7.80 8.10 12 10.2583 1.81632 52433 9.1043 11.4124 7.80 12.40 Total -4- Mật độ N Std Deviation Mean 95% Confidence Interval for Mean Std Error Lower Bound Upper Bound Min Max 1com/L 12.1333 25166 14530 11.5082 12.7585 11.90 12.40 3con/L 11.7000 20000 11547 11.2032 12.1968 11.50 11.90 5con/L 9.2667 20817 12019 8.7496 9.7838 9.10 9.50 7con/L 7.9333 15275 08819 7.5539 8.3128 7.80 8.10 1com/L 3.8967 07024 04055 3.7222 4.0711 3.83 3.97 3con/L 3.7767 05508 03180 3.6399 3.9135 3.72 3.83 SGRL 5con/L 2.9967 07371 04256 2.8136 3.1798 2.94 3.08 7con/L 2.4800 06557 03786 2.3171 2.6429 2.42 2.55 12 3.2875 60876 17573 2.9007 3.6743 2.42 3.97 1com/L 86.6667 4.16333 2.40370 76.3244 97.0090 82.00 90.00 3con/L 75.6667 4.16333 2.40370 65.3244 86.0090 71.00 79.00 TLS 5con/L 44.0000 2.64575 1.52753 37.4276 50.5724 42.00 47.00 7con/L 27.6667 2.51661 1.45297 21.4151 33.9183 25.00 30.00 42.6528 74.3472 25.00 90.00 SL Total Total 12 58.5000 24.94175 7.20006 ều dài ấu trùng c Subset for alpha = 0.05 Mật độ N 7con/L 7.9333 5con/L 3con/L 1com/L 3 9.2667 11.7000 12.1333 Sig 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed SGRL ấu trùng d Subset for alpha = 0.05 Mật độ 7con/L N 2.4800 -5- 5con/L 3con/L 3.7767 1com/L 3.8967 Sig 2.9967 1.000 1.000 058 Means for groups in homogeneous subsets are displayed ấu trùng Bảng 3e Subset for alpha = 0.05 Mật độ N 7con/L 27.6667 5con/L 3con/L 1com/L Sig 44.0000 75.6667 86.6667 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed Ảnh hƣởng mật độ lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá giai đoạn 30 - 60 ngày hiều dài thân, sinh trưởng đặc trưng tỷ lệ sống cá thí nghiệm Mật độ con/L SL SGRL TLS con/L 18.2 ± 0.12d 0.59 ±0.017d 100 ± 0.00c con/L 17.3 ± 0.09c 0.54 ±0.017c 100 ± 0.00c con/L 17.0 ± 0.09c 0.42 ±0.035c 100 ± 0.00c con/L 16.4 ± 0.18b 0.23 ±0.034b 98.0 ± 1.15b con/L 15.5 ± 0.15a 0.51 ±0.049a 93.0 ± 0.00a Số liệu trình bày bảng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn Số liệu hàng có chữ khác thể sai khác có ý nghĩa thống kê (p< 0,05) b Descriptives Mật độ Mean Std Deviation 1con/L 18.1667 20817 12019 17.6496 2con/L 17.3333 15275 08819 3con/L 17.0667 15275 4con/L 16.4333 5con/L N SL 95% Confidence Interval for Mean Total Std Error Lower Bound Upper Bound Min Max 18.6838 18.00 18.40 16.9539 17.7128 17.20 17.50 08819 16.6872 17.4461 16.90 17.20 30551 17638 15.6744 17.1922 16.10 16.70 15.5000 26458 15275 14.8428 16.1572 15.30 15.80 15 16.9000 94491 24398 16.3767 17.4233 15.30 18.40 03606 02082 6604 8396 72 79 SGRL 1con/L 7500 -6- Mật độ Mean Std Deviation 1con/L 18.1667 20817 12019 17.6496 2con/L 17.3333 15275 08819 3con/L 17.0667 15275 4con/L 16.4333 5con/L N SL 95% Confidence Interval for Mean Std Error Lower Bound Upper Bound Min Max 18.6838 18.00 18.40 16.9539 17.7128 17.20 17.50 08819 16.6872 17.4461 16.90 17.20 30551 17638 15.6744 17.1922 16.10 16.70 15.5000 26458 15275 14.8428 16.1572 15.30 15.80 2con/L 5967 03055 01764 5208 6726 57 63 3con/L 5433 03055 01764 4674 6192 51 57 4con/L 4167 06110 03528 2649 5684 35 47 5con/L 2233 05859 03383 0778 3689 18 29 5060 18742 04839 4022 6098 18 79 1con/L 100.0000 ± 00000 100.0000 100.0000 100.00 100.00 2con/L 100.0000 ± 00000 100.0000 100.0000 100.00 100.00 3con/L 100.0000 ± 00000 100.0000 100.0000 100.00 100.00 4con/L 98.0000 ± 1.15470 93.0317 102.9683 96.00 100.00 5con/L 93.0000 ± 00000 93.0000 93.0000 93.00 93.00 2.90812 75087 96.5895 99.8105 93.00 100.00 Total 15 TLS Total 15 98.2000 ều dài ấu trùng c Subset for alpha = 0.05 Mật độ N 5con/L 15.5000 4con/L 3con/L 17.0667 2con/L 17.3333 1con/L Sig 16.4333 18.1667 1.000 1.000 177 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed SGRL ấu trùng d Mật độ N Subset for alpha = 0.05 -7- 5con/L 2233 4con/L 3con/L 5433 2con/L 5967 1con/L 4167 7500 Sig 1.000 1.000 181 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed ấu trùng Bẳng 4e Subset for alpha = 0.05 Mật độ N 5con/L 93.0000 4con/L 1con/L 100.0000 2con/L 100.0000 3con/L 100.0000 Sig 98.0000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed Cơng thức thức ăn chế biến thí nghiệm môi trƣờng nuôi vi tảo Bảng 5a Công thức môi trường f/2 nuôi sinh khối tảo Các chất dinh dƣỡng Nồng độ cuối (mg/L) Dung dịch 1: KNO3 89,6 KH2PO4 5,6 Dung dịch 2: Na2EDTA 4,36 FeCl3.6H2O 3,15 CuSO4.5H2O 0,01 ZnSO4.6H2O 0,022 CoCl2.6H2O 0,01 MnCl2.6H2O 0,18 NaMoO4.6H2O 0,006 Thiamin (B1) 0,1 -8- Biotin (B6) 0,0005 Riboflavin (B12) 0,0005 Bảng 5b Công thức phối trộn thức ăn chế biến Thành phần Tỷ lệ phối trộn Gồm thịt tôm tƣơi 70% Thức ăn INVE 20% Tảo Spirulina khô 5% Astaxanthin 0.05% Bảng 5c Kích thước, thành phần dinh dưỡng thức ăn tổng hợp INVE Phƣơng pháp nuôi thức ăn sống sử dụng thí nghiệm a Ni sinh khối tảo Nguồn giống: tảo Nannochloropsis oculata, Isochrysis galbana đƣợc lƣu giữ thể tích – lít phịng thí nghiệm – với cƣờng độ ánh sáng 3000 lux, 16h/ngày Ttảo đƣợc nuôi môi trƣờng Guillard f/2(xem Bảng 5a - Phụ lục) Phƣơng pháp nuôi: tảo đƣợc ều kiện ánh sáng tự nhiên có mái che Mật độ cấy tảo ban đầu 0,5 x 106 tế bào/mL Các yếu tố môi trƣờng nƣớc nuôi: pH 7,8 – 8,5; nhiệt độ nƣớc: 28 – 30ºC; độ mặn 33 – 35‰ Thời gian thu hoạch sau – ngày mật độ tảo đạt từ – x 106 tế bào/L b Nuôi sinh khối luân trùng -9- Nguồn giống: luân trùng (B plicatilis) đƣợc lấy từ trại sản xuất giống cá biển địa bàn thành phố Nha Trang Phƣơng pháp nuôi: luân trùng đƣợc nuôi sinh khối composit 0,5 m3 theo phƣơng pháp thu hoạch bán liên tục Mật độ ban đầu 50 – 100 con/mL Thức ăn cho luân trùng ngày tảo N oculata với mật độ x 106 tế bào/mL Từ ngày nuôi thứ 3, mật độ luân trùng đạt 300 con/mL, thu hoạch 30 – 50 % đồng thời cấp tảo để trì mật độ thức ăn thể tích nƣớc Ngồi tảo, men bánh mì đƣợc sử dụng thiếu tảo với lƣợng 1,5 g/triệu luân trùng/ngày Copepoda c Ấp nở nauplii Artemia Tr ng Artemia Artemia Artemia franciscana – g trứng Artemia/L với sục khí mạnh vòng 24h Thu hoạch nauplius cách chiếu sáng che kín bể để ấu trùng tập trung d Lƣu giữ Copepoda Copepoda đƣợc mua từ trại sản xuất giống biển (anh Huy) Bãi Tiên – Nha Trang, sau đƣợc nuôi lƣu giữ cho ấu trùng ăn Copepoda đƣợc lƣu giữ bể composit phƣơng pháp nuôi Copepoda tƣơng tự nhƣ nuôi luân trùng - 10 - ... từ 30 đến 60 ngày tuổi (3) Nghiên cứu ảnh hƣởng mật độ nuôi lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá khoang cổ cam giai đoạn từ nở đến 30 ngày tuổi (4) Nghiên cứu ảnh hƣởng mật độ nuôi lên sinh trƣởng tỷ. .. (1) Nghiên cứu ảnh hƣởng thức ăn lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá khoang cổ cam giai đoạn từ nở đến 30 ngày tuổi (2) Nghiên cứu ảnh hƣởng thức ăn lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá khoang cổ cam giai đoạn. .. hƣởng mật độ ni lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá khoang cổ cam giai đoạn từ nở đến 30 ngày tuổi 37 3.4 Thí nghiệm ảnh hƣởng mật độ nuôi lên sinh trƣởng tỷ lệ sống cá khoang cổ cam giai đoạn từ