BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y DƯƠNG ĐÌNH HIẾU NGHIÊN CỨU HÌNH THÁI VÀ ĐÁNH GIÁ LIÊN TỤC PHÔI VÀ NGÀY TUỔI CỦA BỆNH NHÂN THỤ TINH TRONG ỐNG NGHIỆM LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y DƯƠNG ĐÌNH HIẾU NGHIÊN CỨU HÌNH THÁI VÀ ĐÁNH GIÁ LIÊN TỤC PHÔI VÀ NGÀY TUỔI CỦA BỆNH NHÂN THỤ TINH TRONG ỐNG NGHIỆM Chuyên ngành: Mô Phôi thai học Mã số: 62.72.01.03 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Hướng dẫn Khoa học: GS.TS.NGUYỄN ĐÌNH TẢO PGS.TS QUẢN HOÀNG LÂM HÀ NỘI - 2016 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết luận án trung thực chưa công bố công trình nghiên cứu khác TÁC GIẢ LUẬN ÁN DƯƠNG ĐÌNH HIẾU LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám đốc Học viện Quân y, Phòng sau đại học, Trung tâm đào tạo, nghiên cứu Công nghệ Phôi cho phép tạo điều kiện cho thực thành công luận án Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới GS.TS Nguyễn Đình Tảo, PGS.TS Quản Hoàng Lâm, người thầy trực tiếp, tận tâm hết lòng hướng dẫn, tạo điều kiện cho kinh nghiệm quí báu suốt thời gian nghiên cứu hoàn thành luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn nhà khoa học, Thầy (Cô) Hội đồng chấm luận án cấp sở, cấp trường đóng góp ý kiến quý báu để hoàn thiện luận án Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn đến: Tập thể cán bộ, nhân viên Trung tâm Đào tạo, nghiên cứu Công nghệ Phôi – Học viện Quân y tạo điều kiện giúp đỡ trình học tập, thu thập số liệu hoàn thành luận án Cuối cùng, xin cảm ơn gia đình, người thân bạn bè động viên, hỗ trợ mặt sống, học tập công tác Hà Nội, ngày 18 tháng 02 năm 2016 Dương Đình Hiếu MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục biểu đồ, sơ đồ Danh mục hình Danh mục ảnh Trang ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình vô sinh giới Việt Nam 1.1.1 Khái niệm vô sinh 1.1.2 Tình hình vô sinh giới 1.1.3 Tình hình vô sinh Việt Nam 1.2 Quá trình thụ tinh làm tổ phôi người 1.2.1 Sự thụ tinh - giai đoạn hình thành hợp tử 1.2.2 Sự phân cắt làm tổ phôi 1.3 Nuôi cấy phôi điều kiện in vitro 1.3.1 Những hiểu biết phát triển phôi môi trường in vitro 1.3.2 Một số quan điểm nuôi cấy phôi ống nghiệm người 1.3.3 Nuôi cấy phôi kéo dài số giải pháp khắc phục tình trạng phôi chuyển ngày 1.4 Các nghiên cứu hình thái phôi nuôi cấy giai đoạn phôi phân cắt 12 1.4.1 Mối liên quan yếu tố hình thái phôi ngày kết thụ tinh ống nghiệm 1.4.2 Một số phương pháp đánh giá phân loại phôi giai đoạn phân cắt 12 18 1.5 Hình thái phôi nuôi cấy ngày mối liên quan đến hình thái phôi nuôi cấy ngày 1.5.1 Những nghiên cứu hình thái phôi nuôi cấy ngày 21 1.5.2 Mối liên quan hình thái phôi nuôi cấy ngày ngày 27 21 1.6 Những nghiên cứu đánh giá phân loại phôi liên tục 29 1.7 Đồng thuận đánh giá chất lượng hình thái noãn phôi nuôi cấy ống nghiệm 1.7.1 Đồng thuận đánh giá chất lượng hợp tử phôi nuôi cấy ngày 32 33 1.7.2 Đồng thuận đánh giá chất lượng phôi nuôi cấy ngày 34 1.7.3 Đồng thuận đánh giá chất lượng phôi túi 35 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1 Đối tượng nghiên cứu 37 2.1.1 Đối tượng 37 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 38 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 38 2.2 Phương pháp nghiên cứu 38 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 38 2.2.2 Cỡ mẫu, chọn mẫu 39 2.2.3 Phương pháp, kỹ thuật 42 2.2.4 Đánh giá hình thái cấu trúc phôi 48 2.2.5 Các tỉ lệ thành công kỹ thuật thụ tinh ống nghiệm 52 2.2.6 Thu thập số liệu 53 2.2.7 Phân tích xử lý số liệu 57 2.2.8 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 58 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 59 3.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu 59 3.2 Hình thái phôi nuôi cấy ngày 64 3.2.1 Các đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 64 3.2.2 Kích thước chiều dày màng suốt phôi nuôi cấy ngày 3.3 Đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 70 3.4 Mối tương quan đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày ngày 3.4.1 Mối tương quan đặc điểm hình thái phôi ngày đến khả hình thành phôi túi 3.4.2 Mối tươngquan đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày chất lượng phôi túi 3.5 Bước đầu đánh giá phân loại phôi liên tục nuôi cấy phôi ngày ngày 3.5.1 Bước đầu đánh giá phân loại phôi liên tục nuôi cấy phôi ngày 3.5.2 Bước đầu đánh giá phân loại phôi liên tục nuôi cấy phôi túi 81 3.6 So sánh kết chuyển phôi ngày ngày có áp dụng phân loại phôi liên tục 3.6.1 Một số yếu tố ảnh hưởng đến kết 95 3.6.2 So sánh tỉ lệ phôi làm tổ, tỉ lệ có thai, đa thai nhóm nghiên cứu 96 75 81 84 88 89 91 95 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 100 4.1 Bàn luận đối tượng nghiên cứu phương pháp nghiên cứu 100 4.2 Đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 107 4.2.1 Về đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 107 4.2.2 Đường kính, chiều dày màng suốt mối liên quan với đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 4.3 Đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 111 4.4 Mối tương quan hình thái phôi nuôi cấy ngày ngày 117 113 4.4.1 Mối tương quan hình thái phôi ngày khả hình thành phôi túi 4.4.2 Mối tương quan hình thái phôi ngày chất lượng phôi túi 117 4.5 Bước đầu đánh giá phân loại phôi liên tục nuôi cấy phôi ngày ngày 4.6 So sánh kết chuyển phôi ngày ngày có áp dụng phân loại phôi liên tục KẾT LUẬN 125 KIẾN NGHỊ 139 HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO 140 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ KẾT QUẢ CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 121 129 137 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Phần viết tắt ESHRE E2 FSH hCG ICM ICSI IVF LH MESA MVBT NPB PESA PLPLT PN TE TESE VINAGOFP A Phần tên đầy đủ European Society of Human Reproduction and Embryology (Hiệp hội sinh sản phôi Châu Âu) Estradiol Follicle stimulating hormone (Hormon kích thích nang noãn) Human chorionic gonadotropin Inner Cell Mass (Khối tế bào phôi ) Intracytoplasmic Sperm Injection (Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn) In Vitro Fertilization (Thụ tinh ống nghiệm) Luteinizing Hormone (Hormon kích thích hoàng thể) Microsurgical Epididymal Sperm Aspiration (Lấy tinh trùng từ mào tinh vi phẫu thuật) Mảnh vỡ bào tương Nucleolar Precursor Bodies (Hạt nhân tiền nhân) Percutaneous Epididymal Sperm Aspiration (Chọc hút tinh trùng từ mào tinh qua da) Phân loại phôi liên tục Pronuclei (Tiền nhân) Trophectoderm (Lớp tế bào nuôi) Testicular Sperm Extraction (Lấy tinh trùng từ tinh hoàn phẫu thuật mổ tinh hoàn) Vietnam Gynaecology and Obstetrics Association (Hội phụ sản khoa sinh đẻ có kế hoạch Việt nam) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 Tên bảng Trang Các đặc tính sinh lý phát triển phôi người trước sau nén Phân loại phôi túi theo tiêu chuẩn Gardner D K (1999) 22 Phân loại hợp tử theo Scott L (2000) 33 Đồng thuận phân loại hợp tử ngày tổ chức Alpha 34 Đồng thuận đánh giá phân loại phôi ngày tổ chức 34 Alpha 1.6 Đồng thuận đánh giá chất lượng phôi túi tổ chức Alpha 35 2.1 Thời điểm đánh giá thụ tinh phân loại phôi giai đoạn 46 2.2 Phân loại hình thái phôi ngày theo tiêu chuẩn đồng thuận 50 2.3 Phân loại chất lượng phôi túi 52 3.1 Tuổi thời gian vô sinh trung bình nhóm bệnh 59 nhân nghiên cứu 3.2 Phân loại vô sinh nguyên phát vô sinh thứ phát 60 3.3 Đặc điểm phân bố theo nguyên nhân vô sinh 61 So sánh kết xét nghiệm FSH, LH, E2 ngày chu kỳ kinh 3.4 62 3.5 Đặc điểm kích thích buồng trứng 62 3.6 Các kỹ thuật thực nhóm nghiên cứu 64 3.7 Phân bố phôi theo số lượng phôi bào phôi ngày 65 3.8 Phân bố theo tỉ lệ mảnh vỡ bào tương 67 3.9 Phân loại chất lượng phôi nuôi cấy ngày 70 3.10 Đường kính phôi chiều dày ZP phôi ngày 70 3.11 So sánh đường kính phôi chiều dày màng suốt 71 nhóm nghiên cứu 3.12 So sánh kích thước phôi phôi có phôi bào đồng 73 không đồng Bảng Tên bảng Trang 3.13 So sánh kích thước phôi phôi có chất lượng khác 74 theo tiêu chuẩn phân loại đồng thuận tổ chức Alpha 3.14 Mối liên quan hình thái nuôi nụ phôi 76 3.15 Phân loại chất lượng 184 phôi túi nuôi cấy ngày 77 3.16 Đường kính chiều dày màng suốt phôi túi 77 3.17 So sánh kích thước phôi túi theo chất lượng phôi 80 3.18 Khả hình thành phôi túi phôi nuôi cấy ngày có số phôi bào khác Mối tương quan tỉ lệ mảnh vỡ bào tương khả hình thành phôi túi Mối tương quan phân loại chất lượng phôi nuôi cấy 81 3.19 3.20 83 84 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 Hourvitz A., Lerner G L., Elizur S E., et al (2006), “Role of embryo quality in predicting early pregnancy loss following assisted reproductive technology”, Reprod Biomed Online, 13, pp 504 - 509 Johnson M., Gardner D K (2011), "Embryo culture in the twenty-first century", Human Assisted Reproductive Technology-Future Trends in Laboratory and clinical practice, Cambridge University Press, pp 232-247 Kallen B., Finnstrom O., Lindam A., et al (2010), "Blastocyst versus cleavage stage transfer in in vitro fertilization: differences in neonatal outcome?", Fertil Steril, 94(5), pp 1680-1683 Kamran S C., Reichman D E., Missmer S A., et al (2012), "Day embryo shape as a morphologic selection parameter in in vitro fertilization", J Assist Reprod Genet, 29(10), pp 1135 - 1139 Keltz M D., Shorupski J C., Bradlye K., et al (2006), “Predictors of embryo fragmentation and outcome after fragment removal in in vitro fertilization”, Fertil Steril, 86, pp 321- 324 Kirkegaard K., Agerholm I., Ingerslev H J (2012), “Time-lapse monitoring as a tool for clinical embryo assessment”, Hum Reprod, 27, pp 1277 - 1285 Kirkegaard K., Hindkjaer J., Grondahl M L, et al (2012), "A randomized clinical trial comparing embryo culture in a conventional incubator with a time-lapse incubator", J Assist Reprod Genet, 29(6), pp 565-572 Kolibianakis M E., Griesinger G (2011), "GnRH antagonist in ART", Human Assisted Reproductive Technology-Future Trends in Laboratory and clinical practice, Cambridge University Press, pp 73 - 80 Lane M., Gardner D K (2007), “Embryo culture medium: which is the best?” Best Prac Res Clin Obstet Gynaecol, 21, 1, pp 83 - 100 Laasch C and Puscheck E (2004), "Cumulative embryo score, not endometrial thickness, is best for pregnancy prediction in IVF", J Assist Reprod Genet, 21(2), pp 47 - 50 Lee T H., Chen C D., Wu M Y., et al (2013), "Blastocyst morphology score as an indicator of embryo competence for women aged younger than 38 years in in vitro fertilization cycles", Taiwan J Obstet Gynecol, 52(3), pp 374 - 380 Lemmen J G., Agerholm I., Ziebe S (2008), “Kinetic markers of human embryo quality using time-lapse recordings of IVF/ICSIfertilized oocytes”, Reprod Biomed Online, 17, pp 385 - 391 Levitas E., Lunenfeld E., Har-Vardi I., et al (2004), "Blastocyststage embryo transfer in patients who failed to conceive in three or more day 2-3 embryo transfer cycles: a prospective, randomized study", Fertil Steril, 81(3), pp 567 - 571 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 Liu Q., Zhu G., Hu J., et al (2008), "Relationship between pronuclear scoring and embryo quality and implantation potential in IVF-ET", J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci, 28(2), pp 204 - 206 Magli M C., Gianaroli L., Ferraretti A P., et al (2007), “Embryo morphology and development are dependent on the chromosomal complement”, Fertil Steril, 87, pp 534 - 540 Maheshwari A., Griffiths S., Bhattacharya S (2011), "Global variations in the uptake of single embryo transfer", Hum Reprod Update, 17(1), pp 107 - 120 Mascarenhas M N., Flaxman S R., Boerma T., et al (2012), "National, regional, and global trends in infertility prevalence since 1990: a systematic analysis of 277 health surveys", PLoS Med, 9(12), e1001356 Meriano J., Clark C., Cadesky K., et al (2004), “Binucleated and multinucleated blastomeres in embryos derived from human assisted reproduction cycles”, Reprod BioMed Online, 9, pp 511 - 520 Montag M., Liebenthron J., and Koster M (2011), "Which morphological scoring system is relevant in human embryo development?", Placenta, 32 (3), pp 252 - 256 Moriwaki T., Suganuma N., Hayakawa M., et al (2004), “Embryo evaluation by analysing blastomere nuclei”, Hum Reprod, 19, pp 152-156 Munne S (2006), “Chromosome abnormalities and their relationship to morphology and development of human embryos”, Reprod Biomed Online, 12, pp 234 - 253 Munne S., Chen S., Colls P., et al (2007), "Maternal age, morphology, development and chromosome abnormalities in over 6000 cleavagestage embryos", Reprod Biomed Online, 14(5), pp 628-634 Munne S., Tomkin G., Cohen J (2009), "Selection of embryos by morphology is less effective than by a combination of aneuploidy testing and morphology observations", Fertil Steril, 91(3), pp 943-945 Nicoli A., Palomba S., Capodanno F., et al (2013), "Pronuclear morphology evaluation for fresh in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) cycles: a systematic review", J Ovarian Res, 6(1), pp 64 Nomura M., Iwase A., Furui K., et al (2007), "Preferable correlation to blastocyst development and pregnancy rates with a new embryo grading system specific for day embryos", J Assist Reprod Genet, 24(1), pp 23 -28 Prados F J., Debrock S., Lemmen J G., et al (2012), "The cleavage stage embryo", Hum Reprod, 27, Suppl 1, pp 50 - 71 Pribenszky C., Matyas S., Kovacs P., et al (2010), "Pregnancy 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 achieved by transfer of a single blastocyst selected by time-lapse monitoring", Reprod Biomed Online, 21(4), pp 533 - 536 Qian Y L., Ye Y H., Xu C M., et al (2008), "Accuracy of a combined score of zygote and embryo morphology for selecting the best embryos for IVF", J Zhejiang Univ Sci B, 9(8), pp 649 - 655 Racowsky C., Combelles C M., Nureddin A (2003), "Day and day morphological predictors of embryo viability", Reprod Biomed Online, 6(3), pp 323 - 331 Racowsky C., Jackson K V., Cekleniak N A., et al (2000), “The number of eight-cell embryos is a key determinant for selecting day or day transfer”, Fertil Steril, 73, pp 558 - 564 Racowsky C., Vernon M., Mayer J., et al (2010), "Standardization of grading embryo morphology", Fertil Steril, 94(3), pp 1152 - 1153 Racowsky C., Stern J E., Gibbons W E., et al (2011), “National collection of embryo morphology data into Society for Assisted Reproductive Technology Clinic Outcomes Reporting System: associations among day cell number, fragmentation and blastomere asymmetry, and live birth rate”, Fertil Steril, 95, pp 1985 - 1989 Richter K S., Bugge K R., Bromer J G., et al (2007), "Relationship between endometrial thickness and embryo implantation, based on 1,294 cycles of in vitro fertilization with transfer of two blastocyststage embryos", Fertil Steril, 87(1), pp 53 - 59 Richter K S., Harris D C., Daneshmand S T., et al (2001), "Quantitative grading of a human blastocyst: optimal inner cell mass size and shape", Fertil Steril, 76, pp 1157 - 1167 Rienzi L., Ubaldi F., Iacobelli M., et al (2005), “Significance of morphological attributes of the early embryo”, Reprod Biomed Online, 10, pp 669 - 681 Salumets A., Granskog C H., Suikkaro A M., et al (2001),“The predictive value of pronuclear morphology of zygotes in assessment of human embryo quality”,Human Reproduction, 16(10), pp 2177 - 2181 Sathananthan H., Menezes J., Gunasheela S (2003), “Mechanics of human blastocyst hatching in vitro”, Reprod BioMed Online, 7, pp 228 - 234 Scott L., Alvero R., Leondires M., et al (2000), "The morphology of human pronuclear embryos is positively related to blastocyst development and implantation", Hum Reprod, 15(11), pp 2394- 2403 Scott L., Finn A., O’Leary T., et al (2007), “Morphologic parameters of early cleavage-stage embryos that correlate with fetal development and delivery: prospective and applied data for increased pregnancy rates”, Hum Reprod, 22, pp 230 - 240 90 91 92 93 94 95 96 97 Shapiro B S., Daneshmand S T., Garner F C., et al (2008), "Large blastocyst diameter, early blastulation, and low preovulatory serum progesterone are dominant predictors of clinical pregnancy in fresh autologous cycles", Fertil Steril, 90, pp 302 - 309 Sohrabvand F., Shariat M., Fotoohi G N., et al (2011), "Comparison of two embryo scoring systems for prediction of outcome in assisted reproductive techniques cycles", Acta Med Iran, 49(12), pp 784- 788 Stone B A., Greene J., Vargyas J M., et al (2005), “Embryo fragmentation as a determinant of blastocyst development in vitro and pregnancy outcomes following embryo transfer”, Am J Obstet Gynecol, 192(6), pp 2014 - 2019 Stoop D., Van Landuyt L., Van den Abbeel E., et al (2011), "Should a single blastocyst transfer policy be a clinical decision or should it depend on the embryological evaluation on day 3?", Reprod Biol Endocrinol, 9, pp 60 Stylianou C., Critchlow D., Brison D R., et al (2012), “Embryo morphology as a predictor of IVF success: an evaluation of the proposed UK ACE grading scheme for cleavage stage embryos”, Hum Fertil (Camb), 15(1), pp 11 - 17 Tao T., Robichaud A., Mercier J., et al (2013), "Influence of group embryo culture strategies on the blastocyst development and pregnancy outcome", J Assist Reprod Genet, 30(1), pp 63 - 68 Terriou P., Giorgetti C., Hans E., et al (2007), "Relationship between even early cleavage and day embryo score and assessment of their predictive value for pregnancy", Reprod Biomed Online, 14(3), pp 294 - 299 Thompson S M., Onwubalili N., Brown K., et al (2013), " Blastocyst expansion score and trophectoderm morphology strongly predict successful clinical pregnancy and live birth following elective single embryo blastocyst transfer (eSET): a national study", J Assist Reprod Genet, 30(12), pp 1577 - 1581 98 Thurin A., Hardarson T., Hausken J., et al (2005), “Predictors of ongoing implantation in IVF in a good prognosis group of patients”, Hum Reprod, 20, pp 1876 - 1880 99 Vajta G., Rienzi L., Cabo A., et al (2010), "Ernbryo culture: can we perform better than nature", Reprod BioMed Online, 20, pp 453- 469 100 Van den Abbeel E., Balaban B., Ziebe S., et al (2013), “Association between blastocyst morphology and outcome of single-blastocyst transfer”, Reprod Biomed Online, 27(4), pp 353 - 361 101 Van den Berg I M., Laven J S., Stevens M., et al (2009), "X 102 103 104 105 106 107 108 109 110 chromosome inactivation is initiated in human preimplantation embryos", Am J Hum Genet, 84(6), pp 771 - 779 Van Royen E., Mangelschots K., De Neubourg D., et al (2001), “Calculating the implantation potential of day embryos in women younger than 38 years of age: a new model”, Hum Reprod, 16, pp 326 - 332 Van Royen E., Mangelschots K., et al (2003), “Multinucleation in cleavage stage embryos”, Hum Reprod, 18, pp 1062 - 1069 Van Voorhis B., Thomas M., Surrey E., et al (2010), "What consistently high-performing in vitro fertilization programs in the U.S do?", Fertil Steril, 94, pp 1346 - 1349 Wong C C., Loewke K E., Bossert N L., et al (2010), “Noninvasive imaging of human embryos before embryonic genome activation predicts development to the blastocyst stage”, Nat Biotechnol, 28, pp 1115 - 1121 Wu Y., Gao X., Lu X., et al (2014), "Endometrial thickness affects the outcome of in vitro fertilization and embryo transfer in normal responders after GnRH antagonist administration", Reprod Biol Endocrinol, 12, p 96 Yang Z., Liu J., Collins G S., et al (2012), "Selection of single blastocysts for fresh transfer via standard morphology assessment alone and with array CGH for good prognosis IVF patients: results from a randomized pilot study", Mol Cytogenet, 5(1), p 24 Zander-Fox D L., Tremellen K., and Lane M (2011), "Single blastocyst embryo transfer maintains comparable pregnancy rates to double cleavage-stage embryo transfer but results in healthier pregnancy outcomes", Aust N Z J Obstet Gynaecol, 51(5), pp 406 - 410 Zegers H F., Adamson G D, de Mouzon J., et al (2009), "International Committee for Monitoring Assisted Reproductive Technology (ICMART) and the World Health Organization (WHO) revised glossary of ART terminology", Fertil Steril, 92, pp 1520-1540 Ziebe S., Lundin K., Loft A., et al (2003), “FISH analysis for chromosomes 13, 16, 18, 21, 22, X and Y in all blastomeres of IVF preembryos from 144 randomly selected donated human oocytes and impact on pre-embryo morphology”, Hum Reprod, 18, pp 2575– 2581 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Danh sách bệnh nhân nghiên cứu Phụ lục 2: Bệnh án nghiên cứu Phụ lục 3: Bệnh án làm thụ tinh ống nghiệm, cam kết tự nguyện đơn xin làm kỹ thuật hỗ trợ sinh sản DANH SÁCH BỆNH NHÂN NGHIÊN CỨU STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 Họ tên Nguyễn Thị Lệ T Tạ Thị N Nguyễn Thị Thanh T Hoàng Thị L Nguyễn Thị H Hà Thị L Nguyễn Thị H Nguyễn Thị Thu H Hoàng Thị Hải Y Đào Thị N Tạ Thu T Tân Thị N Trần Thị Thanh T Lê Thị Vân N Nguyễn Thị Kim B Trịnh Thị Thanh T Đỗ Thị H Nguyễn Thị Anh N Hoàng Cẩm T Trương Thị H Lê Thị T Bùi Thị T Vũ Thị H Trần Thị H Nguyễn Thị H Nguyễn Thị T Triệu Thị Hương Q Nguyễn Thị Thúy L Nguyễn Anh H Tuổi Tỉnh 31 28 33 32 28 34 31 28 32 31 33 Hà Nội Hà Nội Hà Nội Bắc Giang Bắc Ninh Quân Đoàn II Hưng Yên Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Quảng Ninh Hà Nội Thái Bình Hưng Yên Hà Nội Quảng Ninh Hà Nội Hà Nội Hà Nam Hà Nội Hà Nội Hà Giang Hà Nội Hải Dương Hà Nội Hà Nội Hà Nội Tuyên Quang 27 32 29 30 31 35 33 32 32 23 32 35 34 26 31 34 30 32 Nhóm NC 3 2 2 3 3 Số hồ sơ 4900 5013 4866 5100 4894 4969 4985 4997 4911 5053 4877 4706 4876 4968 4941 4967 5088 5110 4922 4944 5047 4720 4994 4923 5032 4878 4833 4917 5012 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 Lưu Mai H Mai Mỹ H Nguyễn Thu P Đỗ Thị L Nông Thị D Nguyễn Thị T Trần Thị N Hoàng Thị T Nguyễn Thanh N Nguyễn Thị Thanh N Đỗ Thị L Nguyễn Thị H Nguyễn Thị T Nguyễn Thị T Lại Thị Thanh L Trần Thị L Nguyễn Thị Thúy L Hà Thị T Nguyễn Thị Thu H Nguyễn Thị L Vũ Thị T Âu Thị H Nguyễn Thị Thu H Đào Thị T Mẫn Hoài V Nguyễn Thị Hồng V Tạ Thị Thu H Nguyễn Minh P Nguyễn Thành N Đới Thị S Nguyễn Thị V Trương Thanh N Lương Thị Thu N 29 30 31 35 32 33 28 29 27 31 33 31 26 29 28 23 28 28 29 33 26 30 33 28 30 32 35 31 29 25 31 31 34 Thanh Hóa Hải Phòng Hà Nội Hà Nội Hưng Yên Hưng Yên Hà Nam Thanh Hóa Hà Tĩnh Hà Nội Hà Nội Bắc Ninh Hà Nội Hà Nội Hà Nội Bắc Ninh Hà Nam Bắc Giang Hà Nội Bắc Ninh Hải Dương Tuyên Quang Hà Nội Hưng Yên Hà Nội Quảng Bình Hà Nam Thái Nguyên Hà Nội Hà Nội Hòa Bình Tuyên Quang Hưng Yên 3 1 3 2 3 2 3 1 1 2 4978 5052 4769 5083 4910 5178 4934 5081 4914 4971 4952 4993 4860 5029 5098 4905 4991 5171 5103 5059 4831 4770 4884 5138 5028 5140 5076 5020 4266 5109 4825 4897 4797 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 Nguyễn Thị Lan P Nguyễn Thị L Nguyễn Thị Bich T ĐàmThị H Phạm Thị Thanh B Bùi Thúy D Trần Thị T Nguyễn Thị T Nguyễn Thị H Phạm Thị Q Nghiêm Thị Hồng B Lê Thị D Đinh Thị N Đặng Thị T Nguyễn Thị P Dương Thị C Nguyễn Thị N Nguyễn Thị T Nguyễn Thị M Lê Thị Thu T Nguyễn Thị D Đỗ Thị P Nguyễn Thị H Phan Thị H Nguyễn Thị M Lê Thị L Hoàng Trần T Kim T Vũ Thị Lê H Nguyễn Thị P Trần Thị N Trịnh Ngọc C Thái Thị H Dư Thị H 33 28 30 35 32 27 30 28 32 32 28 32 34 27 29 33 25 30 30 33 26 28 25 31 31 27 29 35 28 35 32 33 30 Vĩnh Phúc Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Bắc Ninh Hải Dương Hà Nội Ninh Bình Nghệ An Hưng Yên Hà Nội Hà Nội Bắc Ninh Hà Nội Hà Nội Hà Nội Ninh Bình Hải Dương Thanh Hóa Hà Nội Thái Bình Vĩnh Phúc Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Nghệ An Hà Nội 3 1 2 3 3 2 1 4925 5352 5084 5068 5092 5064 5293 5036 5184 5155 5164 5245 4890 5120 5242 5236 5146 5307 5329 5067 5234 5203 4851 5243 5023 5273 5456 4929 5315 5257 5435 5339 5209 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 Nguyễn Thị T Lưu Thị L Phạm Thanh H Dương Thị Thanh M Nguyễn Thị H Đỗ Thị T Vũ Thị Hồng P Nguyễn Thị H Đinh Thị H Phạm Thúy V Bùi Thị Huyền T Bùi Thị L Quản Thị Hồng T Trần Thị D Trần Thị H Dương Thị H Phạm Thị V Hà Thị Hồng L Vũ Thị Hiền T Nguyễn Thị Thu H Lê Thị Vân A Vũ Thị Phương T Nguyễn Như Q Phạm Thị Hồng H Nguyễn Thị T Nguyễn Thị H Ngô Thị Thanh T Vũ Thị Thanh T Nguyễn Thị A Lê Thị T Hà Thị Phương T Hà Thị H Trần Thúy D 31 32 29 31 31 26 27 31 32 31 26 30 33 27 28 28 28 28 32 30 28 29 29 31 32 30 31 33 32 29 29 31 31 Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Bắc Ninh Bắc Ninh Hà Nội Yên Bái Quảng Ninh Ninh Bình Hà Nội Nam Định Phú Thọ Thanh Hóa Nam Định Bắc Ninh Hà Nội Vĩnh Phúc Hà Nội Ninh Bình Hà Nam Hà Nội Thái Bình Hà Nội Hưng Yên Hà Nội Hà Nội Thanh Hóa Hà Nội Bắc Giang Ninh Bình 3 3 1 2 1 3 3 5409 5299 5241 5285 5308 5458 5371 5282 5244 5474 5376 5336 5476 5303 5447 5471 5249 5199 5368 5291 5311 5396 5448 5470 5523 5349 5472 5301 5424 5404 5374 5503 5512 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 Nguyễn Thị Thái H Phạm Thị Huyền C Đỗ Thị Minh T Vũ Thị M Nguyễn Thị Hải Y Phùng Thị H Bùi Thị L Trịnh Phương H Phạm Thị S Trần Thị X Trần Thị L Đinh Thị Hồng N Chu Thị H Chu Thị H Lê Thị Phương T Trần Thị L Vũ Thị D Đoàn Thị H Hoàng Thị Lê N Nguyễn Thị H Đỗ Thị X Trương Thị Thanh N Bùi Thị L Nguyễn Thị D Nguyễn Thị Thanh N Lê Thị L Nguyễn Thị Thu T Trần Thị Quỳnh T Lại Thị Thu H Kiều Nguyệt M Đào Ngọc A Phùng Thị Diệu L Lại Thị Kim Q 28 31 32 31 28 30 28 34 35 30 31 27 30 32 30 27 23 32 33 32 26 31 30 29 33 30 28 30 29 33 31 31 34 Hà Nam Hưng Yên Hà Nội Hà Nam Hà Nội Hà Nội Hà Nam Bắc Giang Nam Định Hà Nam Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Nam Định Hải Phòng Hà Nội Thái Bình Hải Dương Hà Nội Tuyên Quang Nghệ An Thái Bình Hà Nội Hà Nam Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội 2 1 2 3 3 1 3 5553 5538 5442 5434 5333 5567 5381 5427 5579 5507 5399 5636 5670 5653 5007 5363 5608 5539 5556 5570 5600 5634 5391 5550 5673 5530 5569 5618 5595 5490 5696 5616 5555 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 Nguyễn Thị D Trần Thị T Nguyễn Thị H Lưu Thị Minh T Trần Thị Thu T Đào Thị Phương L Đặng Thị Kim Th Trần Thị Phương L Đinh Thị Thu H Đặng Thị T Trần Thị Mỹ H Nguyễn Thị Thu H Phạm Thị Kim L Phạm Thị T Vũ Thị T Nguyễn Thị Như N Nguyễn Thanh T Phạm Thị Q Đặng Thị N Hoàng Thị C 30 30 33 28 33 34 34 28 33 24 32 29 28 30 33 32 34 32 33 34 Hà Nội Hà Nội Hà Nội Hà Nội Phú Thọ Bắc Ninh Thái Nguyên Hà Nội Vĩnh Phúc Hà Nội Hà Nội Hà Nội Quảng Ninh Hà Nội Hà Nội Bắc Ninh Lào Cai Hà Nội Bắc Giang Hải Phòng Xác nhận Trung tâm Công nghệ Phôi GIÁM ĐỐC TRUNG TÂM Đại tá, PGS TS Quản Hoàng Lâm 3 3 3 2 2 5473 5630 5601 5758 5566 5642 5635 5821 5524 5639 5588 5617 5442 5580 5736 5726 5677 5782 5715 5748 BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU Hành chính: - Họ tên bệnh nhân: Số bệnh án: - Tuổi: - Địa chỉ: - Điện thoại: - Chẩn đoán: Số năm VS: (năm) - Nhóm NC: - Ngày chọc trứng: - Ngày chuyển phôi: Nguyên nhân vô sinh: Các xét nghiệm nội tiết Xét nghiệm nội tiết N2CKK: FSH: mIU/mL LH: mIU/mLE2: pg/mL Xét nghiệm E2 N8 FSH:: pg/mL Sử dụng kỹ thuật hỗ trợ sinh sản: Phác đồ kíchthíchnoãn: Tổng liều FSH: IU Số nang SA: (nang) Số noãn chọc hút: (noãn) Người đánh giá: Phân loại phôi liên tục theo chất lượng phôi: Số phôi thụ tinh: (phôi) Số phôi chuyển: (phôi) Phôi Phôi ngày Hợp tử Hình thái Đường kính (μm) Phôi ngày Màng ZP ( μm ) Hình thái Đường kính ( μm ) Màng ZP ( μm ) Lựa chọn phôi chuyển 10 11 12 13 14 15 Đánh giá kết labô Ngày nuôi cấy Ngày Ngày Ngày Chuyển phôi: Người đánh giá Ký tên Phụ trách labô 7.1 Niêm mạc tử cung: .mm 7.2 Kỹ thuật chuyển phôi: Kết quả: - Thai sinh hoá: Chỉ số β-hCG: (mIU/mL) - Thai lâm sàng: Số túi ối: Số tim thai: Ngày SA: ./ ./ Người siêu âm: - Thai sinh sống: Số thai: thai Tuổi thai: tuần Người ghi: Xác nhận huy trung tâm [...]... thống đánh giá lựa chọn phôi có tính liên tục cho phép lựa chọn được những phôi tiềm năng nhất nhằm nâng cao tỉ lệ thành công và giảm nguy cơ đa thai Vì vậy chúng tôi thực hiện đề tài: Nghiên cứu hình thái và đánh giá liên tục phôi 3 và 5 ngày tuổi của bệnh nhân thụ tinh trong ống nghiệm Với mục tiêu của đề tài: - Xác định đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 3 và phôi nuôi cấy ngày 5 trong ống nghiệm. .. Trang 3. 28 3. 29 3. 30 3. 31 3. 32 4.1 So sánh tỉ lệ thụ tinh, số lượng phôi chuyển và chiều dày niêm mạc tử cung của 3 nhóm nghiên cứu Tỉ lệ làm tổ của 3 nhóm nghiên cứu 95 Kết quả thai sinh hóa và thai lâm sàng giữa các nhóm nghiên cứu So sánh tỷ lệ thai sinh sống ở các nhóm nghiên cứu 97 Số túi ối, số thai sinh sống của các bệnh nhân ở 3 nhóm nghiên cứu Tổng hợp kết quả thụ tinh ống nghiệm của 3 nhóm nghiên. .. chất lượng phôi nuôi cấy ngày 3 và 88 chất lượng phôi túi phân theo 3 loại tốt, trung bình và xấu 3. 25 Phân bố 452 phôi nuôi cấy ngày 3 có đánh giá phân loại 89 phôi ngày 1 và ngày 3 3.26 Mối tương quan giữa đánh giá phân loại liên tục ngày 1, 92 ngày 3 đến chất lượng phôi túi 3. 27 Đánh giá tỉ lệ thành công khi chuyển phôi túi chất lượng tốt 94 của các phôi có tiêu chuẩn phân loại phôi liên tục khác... của 3 nhóm nghiên cứu 98 96 97 1 35 DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3. 1 3. 2 3. 3 3. 4 3. 5 3. 6 3. 7 3. 8 Tên biểu đồ Trang Tỉ lệ phác đồ kích thích buồng trứng ở 3 nhóm nghiên cứu 63 Sự đồng đều giữa các phôi bào của 132 3 phôi ngày 3 66 Sự đồng đều phôi bào của phôi ngày 3 theo từng nhóm 66 Mối tương quan giữa số lượng phôi bào của phôi nuôi cấy 72 ngày 3 với đường kính phôi và chiều dày màng trong suốt Mối tương... phôi ngày 3 của bệnh nhân tiếp tục nuôi cấy sang ngày 5, sẽ có khoảng 60% số phôi đạt đến giai đoạn phôi túi [29]  25 1.4 Các nghiên cứu hình thái phôi nuôi cấy giai đoạn phôi phân cắt 1.4.1 Mối liên quan giữa các yếu tố hình thái phôi ngày 3 và kết quả thụ tinh trong ống nghiệm Ở hầu hết các cơ sở thực hiện kỹ thuật thụ tinh trong ống nghiệm trên thế giới, phổ biến hiện nay vẫn áp dụng việc đánh giá. .. Trang 15 16 19 48 49 50 DANH MỤC CÁC ẢNH Ảnh Tên ảnh 2.1 Phần mềm đo đạc hình thái phôi RI-Research Instruments Trang 54 3. 1 3. 2 3. 3 3. 4 3. 5 3. 6 3. 7 3. 8 3. 9 3. 10 Phôi nuôi cấy ngày 3 chất lượng tốt (Phôi có 9 phôi bào, không có mảnh vỡ bào tương) Phôi nuôi cấy ngày 3 chất lượng tốt (Phôi có 10 phôi bào, 5% mảnh vỡ bào tương ) Phôi nuôi cấy ngày 3 chất lượng trung bình (Phôi có 6 phôi bào không đều, 25% ... năng phân loại phôi chất lượng xấu và trung bình của phương pháp phân loại này không rõ ràng 1 .5 Hình thái phôi ngày 5 và mối liên quan đến hình thái phôi ngày 3 1 .5. 1 Những nghiên cứu về hình thái phôi nuôi cấy ngày 5 Mặc dù trường hợp thụ tinh trong ống nghiệm thành công đầu tiên trên thế giới là từ kết quả chuyển phôi giai đoạn phôi túi (phôi nuôi cấy ngày 5) , nhưng hiện nay việc chuyển phôi tại hầu... đến 2 phôi có tiềm năng nhất sử dụng cho chuyển phôi Tại Việt nam cũng đã có những nghiên cứu công bố về các đặc điểm hình thái phôi người nuôi cấy trong ống nghiệm ngày 1, 2 và 3, nhưng chưa có công trình nghiên cứu hình thái phôi ngày 5 (giai đoạn blastocyst) một cách đầy đủ và hệ thống Hơn nữa, chưa có nghiên cứu nào xác định mối liên quan về mặt hình thái giữa phôi nuôi cấy ngày 3 và phôi ngày 5, .. .ngày 3 và khả năng hình thành phôi túi 3. 21 Mối tương quan giữa số lượng phôi bào đến tốc độ phát 85 triển, chất lượng lá nuôi và nụ phôi của phôi nuôi cấy ngày 5 3. 22 Khảo sát mối tương quan giữa tỉ lệ mành vỡ bào tương của 86 phôi nuôi cấy ngày 3 và các đặc điểm hình thái phôi túi 3. 23 Mối tương quan giữa đặc điểm đồng đều phôi bào của phôi 87 nuôi cấy ngày 3 với đặc điểm hình thái phôi túi 3. 24... tương) Phôi nuôi cấy ngày 3 chất lượng xấu (Phôi có 5 phôi bào không đều, 50 % mảnh vỡ bào tương) Phôi nuôi cấy ngày 5 chất lượng tốt (Phôi túi phân loại 3AA) Phôi nuôi cấy ngày 5 chất lượng tốt (Phôi túi đã thoát màng phân loại 4AA) Phôi nuôi cấy ngày 5 chất trung bình (Phôi túi phân loại 3BB) Phôi nuôi cấy ngày 5 chất lượng xấu (Phôi túi phân loại độ 2) Phôi phân loại liên tục ngày 1 và ngày 3 Phôi ... tài: Nghiên cứu hình thái đánh giá liên tục phôi ngày tuổi bệnh nhân thụ tinh ống nghiệm Với mục tiêu đề tài: - Xác định đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày phôi nuôi cấy ngày ống nghiệm - Đánh. .. túi 3. 5 Bước đầu đánh giá phân loại phôi liên tục nuôi cấy phôi ngày ngày 3. 5. 1 Bước đầu đánh giá phân loại phôi liên tục nuôi cấy phôi ngày 3. 5. 2 Bước đầu đánh giá phân loại phôi liên tục nuôi...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y DƯƠNG ĐÌNH HIẾU NGHIÊN CỨU HÌNH THÁI VÀ ĐÁNH GIÁ LIÊN TỤC PHÔI VÀ NGÀY TUỔI CỦA BỆNH NHÂN THỤ TINH TRONG ỐNG NGHIỆM Chuyên ngành: Mô Phôi