Nghiên cứu khả năng đối kháng với VIBRIO và đánh giá tính an toàn đối với ấu trùng tôm sú của một số chủng BACILLUS phân lập từ trùn quế

158 1.1K 2
Nghiên cứu khả năng đối kháng với VIBRIO và đánh giá tính an toàn đối với ấu trùng tôm sú của một số chủng BACILLUS phân lập từ trùn quế

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Nghiên cứu khả năng đối kháng với VIBRIO và đánh giá tính an toàn đối với ấu trùng tôm sú của một số chủng BACILLUS phân lập từ trùn quế

i LỜI CẢM ƠN Thực đề tài nghiên cứu khoa học hội giúp học hỏi thêm nhiều kỹ năng, nâng cao tinh thần kỹ luật, học hỏi, tìm tòi để thực công việc, đồng thời giúp có thêm kỹ giải vấn đề Để đạt kết này, cố gắng thân phải kể đến giúp đỡ thầy cô, gia đình bạn bè Trước tiên, xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến gia đình luôn ủng hộ, tạo điều kiện tốt để học tập, nghiên cứu Tiếp đến xin cảm ơn thầy cô khoa Công nghệ sinh học, trường đại học Mở TP HCM tận tình giảng dạy, truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm quý giá làm tảng cho ứng dụng vào thực đề tài nghiên cứu Và đặc biệt xin cảm ơn thầy Nguyễn Văn Minh Cô Dương Nhật Linh, người tận tình dẫn, động viên, tạo cho em niềm say mê nghiên cứu Bên cạnh xin cảm ơn tất bạn bè bên cạnh chia sẻ động viên, giúp vượt qua khó khăn thời gian qua Tp Hồ Chí Minh, ngày 31 tháng 05 năm 2011 Nhóm i ii MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ 11 Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 14 1.1 SƠ LƯỢC VỀ TÌNH HÌNH NUÔI TÔM, BỆNH VÀ CÁCH PHÒNG TRỊ BỆNH TRÊN TÔM 15 1.1.1 Tình hình nuôi trồng thủy sản giới [3, 6] 15 1.1.2 Tình hình nuôi trồng thủy sản Việt Nam[3, 5] 15 1.2 KHÁI QUÁT VỀ TÔM SÚ [33, 41] 16 1.2.1 Phân loài 16 1.2.2 Các giai đoạn phát triển .17 1.2.3 Tuổi thành thục 18 1.2.4 Tập tính ăn 18 1.2.5 Lột xác .19 1.3 BỆNH DO VI KHUẨN VIBRIO TRÊN TÔM [31, 4, 5, 23] 19 1.4 TÌNH HÌNH DÙNG HÓA CHẤT, KHÁNG SINH ĐIỀU TRỊ BỆNH CHO TÔM [34, 36] 22 1.5 PROBIOTIC-CHẾ PHẨM SINH HỌC TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 23 1.5.1 Định nghĩa probiotic [13, 5, 25, 8] 23 1.5.2 Cơ chế tác dụng probiotic nuôi trồng thủy sản [40] 24 1.5.3 Ưu điểm probiotic phòng trị bệnh cho tôm .28 1.5.4 Tình hình nghiên cứu sử dụng probiotic nuôi trồng thủy sản [35, 39, 22, 9, 30] 29 1.6 TRÙN QUẾ, MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VÀ ỨNG DỤNG TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 35 1.6.1 Trùn quế phân trùn quế [38, 5] .35 ii iii 1.6.2 Chế phẩm sinh học từ trùn quế nuôi trồng thủy sản 38 1.7 VI KHUẨN BACILLUS .40 1.7.1 Đặc điểm chủng vi khuẩn Bacillus 40 1.7.2 Cấu trúc bào tử vi khuẩn [12] .40 1.7.3 Quá trình tạo bào tử Bacillus [17] 41 1.7.4 Ứng dụng Bacillus nuôi trồng thủy sản [40, 19, 20, 24, 28] 42 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 44 2.1 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 45 2.2 VẬT LIỆU 45 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 45 2.2.2 Môi trường - hóa chất 45 2.2.3 Thiết bị - dụng cụ 46 2.3 BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM .48 2.4 TÁI PHÂN LẬP BACILLUS .49 2.5 THỬ ĐỐI KHÁNG .50 2.5.1 Thử đối kháng phương pháp cấy vạch vuông góc [26] 50 2.5.2 Thử đối kháng phương pháp đổ thạch hai lớp [26] 51 2.6 THỬ NGHIỆM ĐỒNG NUÔI CẤY [27] 52 2.7 THÍ NGHIỆM ĐÁNH GIÁ ĐỘ AN TOÀN CỦA CÁC CHỦNG BACILLUS 54 2.7.1 Thử khả gây dung huyết [1] .54 2.7.2 Thử nghiệm tính an toàn cho chủng Bacillus lên ấu trùng tôm sú [11] 54 2.8 XỬ LÝ KẾT QUẢ 57 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .58 iii iv 3.1 KẾT QUẢ TÁI PHÂN LẬP BACILLUS 59 3.2 KẾT QUẢ THỬ ĐỐI KHÁNG 62 3.2.1 Thử đối kháng phương pháp cấy vạch vuông góc 62 3.2.2 Thử đối kháng phương pháp đổ thạch hai lớp 65 3.3 THỬ NGHIỆM ĐỒNG NUÔI CẤY 71 3.3.1 Kết đồng nuôi cấy chủng Bacillus với V parahaemolyticus 71 3.3.2 Kết đồng nuôi cấy chủng Bacillus với V alginolyticus .81 3.3.3 Kết đồng nuôi cấy chủng Bacillus với V harveyi 88 3.4 THÍ NGHIỆM ĐÁNH GIÁ ĐỘ AN TOÀN CỦA CÁC CHỦNG BACILLUS: 97 3.4.1 Thử khả gây dung huyết 97 3.4.2 Thử nghiệm tính an toàn chủng Bacillus lên ấu trùng tôm sú .99 100 Chương 101 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 101 4.1 KẾT LUẬN .102 4.2 KIẾN NGHỊ 102 TÀI LIỆU THAM KHẢO 104 PHỤ LỤC .108 iv v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ANOVA One-way analysis of variance CFU Đơn vị khuẩn lạc Cs Cộng DC Đối chứng LB Luria Bertani NA Nutrient Agar NB Nutrient Broth PL Postlarvae (hậu ấu trùng) TCBS Thiosulphate citrate bile salts sucrose v vi DANH MỤC CÁC ĐƠN VỊ ĐO % µl ‰ cm g g/L L m mg mL nm o C pH Phần trăm Microlít Phần nghìn Centimét Gam Gam/lít Lít Mét Miligam Millilít nanomet Nhiệt độ bách phân Độ pH vi vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Kết tái phân lập 60 Bảng 3.2 Kết thử đối kháng phương pháp vạch vuông góc .63 Bảng 3.3 Kết thử đối kháng phương pháp đổ thạch hai lớp 66 Bảng 3.4 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F2 với V parahaemolyticus (tính LOG10 CFU/mL) 71 Bảng 3.5 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F10 với V parahaemolyticus (tính LOG10 CFU/mL) 73 Bảng 3.6 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F11 với V parahaemolyticus (tính LOG10 CFU/mL) 74 Bảng 3.7 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F27 với V parahaemolyticus (tính LOG10 CFU/mL) 76 Bảng 3.8 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F28 với V parahaemolyticus (tính LOG10 CFU/mL) 77 Bảng 3.9 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F33 với V parahaemolyticus (tính LOG10 CFU/mL) 78 Bảng 3.10 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F2 với V alginolyticus (tính LOG10 CFU/mL) .81 Bảng 3.11 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F10 với V alginolyticus (tính LOG10 CFU/mL) .82 Bảng 3.12 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F11 với V alginolyticus ( tính LOG10 CFU/mL) .83 Bảng 3.13 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F27 với V alginolyticus (tính LOG10 CFU/mL) .84 Bảng 3.14 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F28 với V alginolyticus (tính LOG10 CFU/mL) .86 vii viii Bảng 3.15 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F33 với V alginolyticus (tính LOG10 CFU/mL) .87 Bảng 3.16 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F2 với V harveyi (tính LOG10 CFU/ mL) 88 Bảng 3.17 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F10 với V harveyi (tính LOG10 CFU/ mL) 89 Bảng 3.18 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F11 với V harveyi (tính LOG10 CFU/ mL) 90 Bảng 3.19 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F27 với V harveyi (tính LOG10 CFU/ mL) 92 Bảng 3.20 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F28 với V harveyi (tính LOG10 CFU/ mL) 94 Bảng 3.21 Kết đồng nuôi cấy chủng vi khuẩn F33 với V harveyi (tính LOG10 CFU/ mL) 95 Bảng 3.22 Kết khả gây dung huyết 97 Bảng 3.23 Tỷ lệ sống ấu trùng tôm sú sau 24 bổ sung Bacillus 99 viii ix DANH MỤC CÁC ĐỒ THỊ ix x DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Các giai đoạn phát triển ấu trùng tôm sú .18 Hình 1.2 Vi khuẩn Vibrio 20 Hình 1.3.Bệnh đỏ dọc thân bệnh phát sáng tôm 22 Hình 1.4 Vi khuẩn Bacillus .40 Hình 1.5 Cấu trúc bào tử .41 Hình 2.6 Quy trình thí nghiệm 48 Hình 2.7 Phương pháp cấy vạch thẳng vuông góc 51 Hình 2.8 Sơ đồ bố trí thí nghiệm đồng nuôi cấy .53 Hình 2.9 Sơ đồ bố trí thí nghệm đánh giá tính an toàn cho chủng vi khuẩn thử nghiệm lên ấu trùng tôm sú 55 Hình 2.10 Thuần hóa tôm 55 Hình 2.11 Toàn cảnh bố trí thí nghiệm 56 Hình 2.12 Hộp bố trí thí nghiệm 56 Hình 3.13 Đặc điểm khuẩn lạc Bacillus NA sau 24h nuôi cấy 59 Hình 3.14 Nhuộm gram Bacillus .59 Hình 3.15 Thử đối kháng phương pháp cấy vạch vuông góc 65 Hình 3.16 Thử nghiệm khả đối kháng phương pháp đổ thạch lớp .70 Hình 3.17 Trải đĩa kiểm tra mật độ V harveyi đồng nuôi cấy với F27 mật độ 107 ngày .97 Hình 3.18 Kết thử khả gây dung huyết 98 x 75.3863 Total 14 Anova: Single Factor P28-2D SUMMARY Varianc Groups 10 Count Sum 30.12615 Average 10.04205 10.3098 e 0.001715 10 30.92958 9.84706 0.001088 10 29.54119 24.1241 8.04138 0.005506 10 1.56E-05 0.04691 DC 27.17301 9.057671 ANOVA Source of P- Variation SS MS F Between Groups 10.15562 0.11048 2.538906 0.01104 229.7908 10 10.26611 14 Within Groups Total df Anova: Single Factor P28-3D SUMMARY Varianc Groups Count Sum 25.4427 Average e 10 3 8.48091 0.008202 0.00073 10 26.70757 8.902523 8.74308 0.02744 10 26.22926 7.94094 10 DC 3 23.82282 31.3568 10.4523 0.051002 0.237942 144 value 8.59E- F crit 3.4780 10 ANOVA Source of P- Variation SS df Between Groups Within Groups 10.58882 0.650651 MS 10 F 40.6854 value 3.71E- F crit 3.4780 06 F 346.432 value 1.13E- F crit 3.4780 10 2.647205 0.065065 11.2394 Total 14 Anova: Single Factor P28-4D SUMMARY Varianc Groups Count Sum Average 8.14032 e 10 24.42099 23.1316 7.71054 0.017982 10 24.3317 0.007175 10 24.7524 8.110581 1.13E-05 0.05460 10 3 33.1812 8.250811 0.00035 DC 11.06042 ANOVA Source of P- Variation SS df MS Between Groups Within Groups 22.2081 0.160263 10 Total 22.36836 14 5.552025 0.016026 Anova: Single Factor P28-5D SUMMARY Varianc Groups Count Sum Average e 145 23.5440 7.84800 10 23.4061 0.000237 10 3 7.802045 7.51541 0.000951 10 22.54623 0.012761 0.02133 10 23.36052 34.0406 7.78684 11.3468 DC 0.000597 ANOVA Source of P- Variation SS 31.4605 Between Groups Within Groups 0.071757 df 10 MS 7.86514 F 0.007176 1096.075 value 3.65E- F crit 3.4780 13 value 1.65E- F crit 3.4780 08 31.5323 Total 14 Anova: Single Factor P28-6D SUMMARY Varianc Groups Count Sum 23.8334 Average 7.94448 e 10 5 7.85730 10 23.57191 7.24456 3.64E-05 0.03391 10 10 3 21.7337 20.36907 6.789689 0.022101 0.13732 DC 30.3195 10.1065 ANOVA Source of Variation Between Groups PSS 19.4869 df MS 4.87173 F 125.9675 146 0.38674 Within Groups Total 0.03867 10 19.8737 14 Anova: Single Factor P28-7D SUMMARY Varianc Groups Count Sum Average e 0.00095 10 23.66571 7.888571 7.50396 0.01046 10 22.51188 19.3633 6.45444 10 3 6.40648 0.000524 10 19.21945 9.30097 7.25E-05 DC 27.90292 0.03015 ANOVA Source of P- Variation SS 17.0486 Between Groups 0.08432 4.262161 0.00843 10 17.13297 14 Within Groups Total df MS F 505.435 value 1.73E- F crit 3.4780 11 Anova: Single Factor A28-OD SUMMARY Varianc Groups Count Sum Average e 0.35880 10 10.1181 10.7357 3.3727 3.57857 10 3 0.05187 0.14355 10 13.12857 4.37619 147 3.02719 10 DC 3 9.08158 11.73827 3.912755 0.000204 0.001382 df MS F 7.19364 P-value 0.00537 F crit 3.4780 4 ANOVA Source of Variation SS 3.19864 Between Groups Within Groups Total 0.799662 1.111623 10 0.111162 4.31027 14 Anova: Single Factor A28-1D SUMMARY Varianc Groups Count Sum 32.4835 Average e 0.04470 10 10 3 31.8695 30.3531 10.82786 10.62317 0.000107 10 3 10.11771 9.90754 0.029996 10 DC 3 29.72263 29.18897 9.729656 0.293219 0.190605 df MS 0.65874 F P-value 0.111727 5.895997 0.010559 ANOVA Source of Variation SS 2.63497 Between Groups Within Groups 1.117273 10 Total 3.752247 14 Anova: Single Factor A28-2D SUMMARY Varianc Groups 10 Count Sum 33.3746 Average 11.12489 e 0.000767 148 F crit 3.4780 9.73650 10 29.20952 0.058212 0.04396 10 29.71517 27.6646 9.905056 0.00153 10 3 33.7346 9.221544 11.2448 DC 0.026877 MS 2.39666 F 91.2335 0.02627 ANOVA Source of Variation SS 9.58665 Between Groups Within Groups 0.262695 df 10 P-value 7.92E-08 F crit 3.4780 9.84934 Total 14 Anova: Single Factor A28-3D SUMMARY Varianc Groups Count Sum Average e 0.05733 10 29.6103 9.8701 9.48583 10 10 3 28.4575 27.32097 9.106989 9.04019 0.00727 0.000288 10 27.12057 0.001568 0.01366 DC 35.1045 11.7015 df MS 3.57639 F P-value 0.016025 223.1711 9.92E-10 ANOVA Source of Variation SS 14.3055 Between Groups Within Groups 0.160253 10 149 F crit 3.4780 14.4658 Total 14 Anova: Single Factor A28-4D SUMMARY Varianc Groups Count Sum Average e 0.36389 10 10 10 3 24.84223 26.48558 27.273 8.280745 8.828526 9.091 9.04314 0.177806 0.007778 10 27.12943 0.082057 0.03414 DC 39.00672 13.00224 df MS F P-value 81.50208 1.37E-07 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 43.4038 1.33137 10.85095 0.13313 10 Within Groups 44.7351 Total 14 Anova: Single Factor A28- 5D SUMMARY Varianc Groups Count Sum 22.90889 Average 7.636296 8.89356 e 0.049562 26.6807 24.7673 0.421207 10 10 3 27.74759 35.1411 8.255781 9.249197 0.000908 1.5E-06 0.07614 DC 11.71372 10 10 150 F crit 3.4780 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 29.21761 1.09564 Within Groups df MS 7.30440 F 66.6677 0.10956 10 P-value 3.59E-07 F crit 3.4780 30.3132 Total 14 Anova: Single Factor A28-6D SUMMARY Varianc Groups Count Sum 24.7471 Average 8.24904 e 0.08397 10 8.41312 10 25.23937 23.6704 7.89015 0.258615 10 0.002536 0.00967 10 23.55 35.0543 7.850001 11.6847 DC 0.024905 MS 7.87794 F 103.738 ANOVA Source of Variation SS 31.5117 Between Groups 0.75940 0.07594 10 32.27119 14 Within Groups Total df Anova: Single Factor A28-7D SUMMARY Varianc Groups 10 Count Sum 25.46264 Average 8.48754 e 0.00500 151 P-value 4.24E-08 F crit 3.4780 7.608296 7.422781 7.53409 0.36942 0.000606 0.00488 10 10 3 22.82489 22.26834 10 22.60228 34.1487 DC 3 11.38291 7.28E-06 MS F 110.538 ANOVA Source of Variation SS 33.5970 Between Groups 0.75984 8.399265 10 0.075985 Within Groups df P-value 3.12E-08 F crit 3.4780 34.3569 Total 14 Anova: Single Factor H28-0D SUMMARY Varianc Groups Count Sum 9.45255 Average 3.15085 e 10 3 11.4558 3.81863 0.03433 10 13.1054 0.009824 10 4.36849 3.83623 0.253658 0.02933 10 DC 3 11.50871 14.21589 4.73863 0.002265 df MS 1.09545 F P-value 16.62732 0.000204 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 4.38181 0.06588 0.658828 10 152 F crit 3.4780 5.04064 Total 14 Anova: Single Factor H28-1D SUMMARY Varianc Groups Count Sum Average 8.84056 e 10 10 3 26.52168 27.83142 9.277141 0.321608 0.002107 0.01486 10 25.89679 8.632264 8.47567 0.02484 10 25.42703 0.35880 DC 28.1181 9.3727 df MS 0.46425 F 3.21408 ANOVA Source of Variation SS 1.85703 Between Groups 1.44444 0.14444 10 Within Groups 3.30148 Total 14 Anova: Single Factor H28-2D SUMMARY Varianc Groups Count Sum 31.5118 Average 10.5039 e 0.01046 10 31.8839 10 10.62797 10.4136 0.03433 0.40197 10 31.24092 30.4835 10 9 10.1612 0.000224 153 P-value 0.061118 F crit 3.4780 DC 10.3067 0.53630 30.92023 ANOVA Source of Variation SS df MS Between Groups Within Groups 0.38596 1.966589 10 Total 2.352548 14 F 0.49064 0.09649 0.196659 P-value 0.74305 F crit 3.4780 Anova: Single Factor H28-3D SUMMARY Varianc Groups Count Sum Average e 0.00423 10 10 3 29.59799 27.2667 9.865997 9.088901 9.95395 0.082057 0.00037 10 29.86187 6.00413 10 DC 3 18.01242 27.8169 9.272301 0.022873 0.728595 df MS 7.93835 F 47.3571 0.167627 ANOVA Source of Variation SS 31.7534 Between Groups Within Groups 1.676272 10 33.4296 Total 14 Anova: Single Factor H28-4D SUMMARY Varianc Groups 10 Count Sum 25.99989 Average 8.66663 e 0.00107 154 P-value 1.82E-06 F crit 3.4780 23.3339 10 10 3 22.4738 7.77799 7.491265 0.00021 0.000126 0.01066 10 DC 3 17.56575 28.48777 5.855251 9.495925 0.021368 df MS 5.61643 F 839.779 0.006688 ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups 22.46573 0.06688 10 Total 22.53261 14 P-value 1.38E-12 F crit 3.4780 Anova: Single Factor H28-5D SUMMARY Varianc Groups 10 Count Sum 18.58576 Average 6.195253 7.32633 e 0.01173 10 21.979 4.2E-06 0.15574 10 17.90069 17.0631 5.966898 5.68770 10 3 9.39701 0.124278 DC 28.19103 0.001213 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 27.75829 0.58594 Within Groups df MS 6.93957 F P-value 0.05859 118.434 2.23E-08 10 28.3442 Total 14 155 F crit 3.4780 Anova: Single Factor H28-6D SUMMARY Varianc Groups 10 Count Sum 22.72221 23.7361 Average 7.57407 e 0.058562 10 7.912059 0.002293 0.01963 10 19.80061 15.8997 6.600203 0.03893 10 DC 3 28.8485 5.299909 9.616166 0.123695 df MS 7.69046 F 158.164 ANOVA Source of Variation SS 30.7618 Between Groups 0.48623 0.04862 10 Within Groups 31.2480 Total 14 Anova: Single Factor H28-7D SUMMARY Varianc Groups Count Sum Average e 0.00573 10 21.471 7.156999 0.00065 10 20.12121 6.707068 5.77641 0.12355 10 17.32925 13.2743 4.42479 0.01941 10 9 9.57109 DC 28.71328 0.026923 156 P-value 5.4E-09 F crit 3.4780 ANOVA Source of Variation SS 43.4337 Between Groups 0.35256 MS 10.8584 F 307.985 10 0.035256 43.7863 14 Within Groups Total df P-value 2.02E-10 F crit 3.4780 Phụ lục 3: : Kết xử lý thống kê ANOVA yếu tố thí nghiệm thử tính an toàn chủng Bacillus lên ấu trùng tôm sú Anova: Single Factor SUMMARY Groups ĐC F10 F2A1 F28 F11 F27 F33 Count 6 6 6 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 4446.164 13531.94 Total 17978.11 Sum 273.3333 141.6667 118.3333 115 253.3333 208.3333 131.6667 df Average 45.55556 23.61111 19.72222 19.16667 42.22222 34.72222 21.94444 Variance 458.5185 336.0185 430.463 761.9444 400.7407 76.01852 242.6852 MS F P-value F crit 741.0273 1.916647 0.1055461 2.3717812 35 386.627 41 157 158 [...]... KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG VỚI VIBRIO VÀ ĐÁNH GIÁ TÍNH AN TOÀN ĐỐI VỚI ẤU TRÙNG TÔM SÚ CỦA MỘT SỐ CHỦNG BACILLUS PHÂN LẬP TỪ TRÙN QUẾ” Trong nghiên cứu này, các chủng Bacillus đã được phân lập từ trùn quế tiếp tục được nghiên cứu khả năng đối kháng với một số vi khuẩn Vibrio gây bệnh và đánh giá tính an toàn đối với ấu trùng tôm sú trong điều kiện phòng thí nghiệm Thành công của đề tài sẽ cung cấp thêm cơ sở... là khả năng đối kháng với Vibrio và khả năng tạo bào tử của nó Theo báo cáo của nhóm tác giả Nguyễn Văn Minh và cs (2010) thì một số chủng Bacillus phân lập được từ trùn quế và phân trùn quế có khả năng chịu muối mật, pH acid dạ dày và khả năng đối kháng tốt đối với một số vi khuẩn gây bệnh cho động vật thủy sản [5] Trên cơ sở đó, chúng tôi thực hiện đề tài “NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG VỚI VIBRIO VÀ... phòng và trị bệnh do vi khuẩn, đặc biệt do nhóm Vibrio spp gây ra trên động vật thủy sản Mục tiêu − Tái phân lập Bacillus từ trùn quế và phân trùn quế − Thử khả năng đối kháng của Bacillus với V harveyi, V parahaemolyticus, V alginolyticus − Đồng nuôi cấy Bacillus với 3 loài vi khuẩn gây bệnh, kiểm tra sự thay đổi mật độ của vi khuẩn Vibrio theo thời gian nuôi cấy − Thử nghiệm tính an toàn của các chủng. .. sự phát triển của ấu trùng, men vi sinh góp phần hạn chế số lượng vi khuẩn Vibrio sp trong môi trường bể ương, với tỷ lệ sống của ương ấu trùng tôm càng xanh khá cao, dao động từ 59,1 76,6% Kết quả này là cơ sở cho những nghiên cứu về hiệu quả và phương thức sử dụng men vi sinh trong môi trường ương nuôi tôm càng xanh nhằm cải thiện môi trường và nâng cao năng suất ương ấu trùng  Một số chế phẩm sinh... nuôi tôm ở Philippin, nghiên cứu của Moriarty (1999) cho thấy rằng có thể cứu sống 80% tôm bệnh khi trong ao nuôi có sử dụng chế phẩm sinh học Garriques và Arevalo, (1995) đưa dòng Vibrio alginolyticus vào bể ương ấu trùng tôm (Litopenaeus vannamei) mỗi ngày Tỷ lệ sống trung bình và trọng lượng tôm cao nhất trong bể có thêm vi khuẩn hữu ích so với bể xử lý bằng kháng sinh oxytetracyline và đối chứng Số. .. chất và những chất sinh học như: dịch chiết của tảo, sản phẩm ngoại bào của vi khuẩn Kamei và cs (1988) đã báo cáo rằng chủng Pseudomonas spp., Vibrios spp., phân lập từ nơi ấp trứng cá hồi có hoạt tính kháng virus IHNV (infectious hematopoietic necrosis virus) với tỉ lệ giảm > 50%.[25] Direkbusarakom và cs (1998) đã phân lập được 2 chủng Vibrio. sp NICA 1030 và NICA 1031 từ nơi ấp trứng tôm sú, 2 chủng. .. Phạm vi phân bố của tôm sú khá rộng, từ Ấn Độ Dương qua hướng Nhật Bản, Đài Loan, phía Đông Tahiti, phía Nam châu Úc và phía Tây châu Phi Nhìn chung, tôm sú phân bố từ kinh độ 30E đến 155E từ vĩ độ 35N tới 35S xung quanh các nước vùng xích đạo, đặc biệt là Indonesia, Malaixia, Philippin và Việt Nam Tôm bột, tôm giống và tôm gần trưởng thành có tập tính sống gần bờ biển và rừng ngập mặn ven bờ Khi tôm trưởng... nhạy cảm với sự khô, chỉ tồn tại 10 phút ở 55oC [4] Vibrio là một trong những tác nhân gây ra dịch bệnh lớn ở động vật giáp xác và cá Vibrio gây chết ấu trùng tôm, tôm giống, tôm thương phẩm và kể cả tôm trưởng thành Dịch bệnh có thể gây chết 100% Bệnh do Vibrio là một trong những nguyên nhân chính gây chết cho tôm nuôi trên toàn thế giới Loài vi khuẩn Vibrio phân bố rộng rãi , thường gây nhiễm trùng. .. tăng khả năng hấp thụ thức ăn và hạn chế bệnh do Aeromonas và Vibrio gây ra Chế phẩm BioF có 9,2 x 108 - 8,9 x 109 CFU/g • Chế phẩm sinh học BIOCHIE bào gồm một số chủng thuộc chi Bacillus (Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Bacillus licheniformis) và chi Lactobacillus dùng để xử lý nước trong ao nuôi thủy sản Các chủng trên có khả năng phân hủy các hợp chất hữu cơ từ thức ăn và chất thải của tôm, ... 1.6 TRÙN QUẾ, MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VÀ ỨNG DỤNG TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 1.6.1 Trùn quế và phân trùn quế [38, 5] Trùn đất có mặt ở khắp mọi nơi trên thế giới, với khoảng 4.500 loài, trong đó ở Việt Nam có trên 110 loài, nhưng chỉ có sáu tới tám loài được nuôi để sử dụng và sản xuất phân bón Trong số đó có loài Eisenia fetida (trùn Quắn) và đặc biệt là loài Perionyx excavatus (thường gọi là trùn đỏ hay trùn ... tài “NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG VỚI VIBRIO VÀ ĐÁNH GIÁ TÍNH AN TOÀN ĐỐI VỚI ẤU TRÙNG TÔM SÚ CỦA MỘT SỐ CHỦNG BACILLUS PHÂN LẬP TỪ TRÙN QUẾ” Trong nghiên cứu này, chủng Bacillus phân lập từ trùn. .. kháng với Vibrio khả tạo bào tử Theo báo cáo nhóm tác giả Nguyễn Văn Minh cs (2010) số chủng Bacillus phân lập từ trùn quế phân trùn quế có khả chịu muối mật, pH acid dày khả đối kháng tốt số vi... nghiên cứu này, chủng Bacillus phân lập từ trùn quế tiếp tục nghiên cứu khả đối kháng với số vi khuẩn Vibrio gây bệnh đánh giá tính an toàn ấu trùng tôm sú điều kiện phòng thí nghiệm Thành công đề

Ngày đăng: 13/03/2016, 11:21

Từ khóa liên quan

Mục lục

  • ĐẶT VẤN ĐỀ

  • Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

    • 1.1 SƠ LƯỢC VỀ TÌNH HÌNH NUÔI TÔM, BỆNH VÀ CÁCH PHÒNG TRỊ BỆNH TRÊN TÔM

      • 1.1.1 Tình hình nuôi trồng thủy sản trên thế giới [3, 6]

      • 1.1.2 Tình hình nuôi trồng thủy sản ở Việt Nam[3, 5]

      • 1.2 KHÁI QUÁT VỀ TÔM SÚ [33, 41]

        • 1.2.1 Phân loài

        • 1.2.2 Các giai đoạn phát triển

        • 1.2.3 Tuổi thành thục

        • 1.2.4 Tập tính ăn

        • 1.2.5 Lột xác

        • 1.3 BỆNH DO VI KHUẨN VIBRIO TRÊN TÔM [31, 4, 5, 23]

        • 1.4 TÌNH HÌNH DÙNG HÓA CHẤT, KHÁNG SINH ĐIỀU TRỊ BỆNH CHO TÔM [34, 36]

        • 1.5 PROBIOTIC-CHẾ PHẨM SINH HỌC TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN

          • 1.5.1 Định nghĩa probiotic [13, 5, 25, 8]

          • 1.5.2 Cơ chế tác dụng của probiotic trong nuôi trồng thủy sản [40]

            • 1.5.2.1 Tiết ra các hợp chất ức chế[40]

            • Có rất nhiều nghiên cứu chứng minh rằng có nhiều dòng vi khuẩn in-vitro kìm hãm được các mầm bệnh trong nuôi trồng thủy sản. Những nghiên cứu này cũng chứng minh khả năng kìm hãm vi khuẩn khác của những dòng vi khuẩn thông thường dễ tìm thấy trong môi trường.

            • Theo Sugita và cs (1997) những quần thể sinh vật này có thể tiết vào môi trường những chất có tính sát khuẩn hoặc kìm hãm vi khuẩn gây ảnh hưởng đến quần thể vi sinh khác, nhằm gián tiếp cạnh tranh dinh dưỡng và năng lượng có sẵn trong môi trường. Sự hiện diện những vi khuẩn này sản sinh chất kìm hãm, có thể tiết trong ruột, trên bề mặt cơ thể vật chủ hay ra môi trường nước làm rào cản sự nhân lên của vi khuẩn cơ hội, gây ức chế các vi sinh vật gây bệnh. Sản phẩm có thể là chất kháng sinh, siderophore, men phân hủy, H2O2, acid hữu cơ…

            • Thành phần chất tiết ra khó có thể xác định được nên được gọi chung là chất ức chế. Vi khuẩn lactic từ lâu được biết là loại tiết ra chất kháng vi khuẩn (bacteriocin) chống lại các vi khuẩn Gram (+). Phần lớn các vi khuẩn gây bệnh trong thủy sản là nhóm Gram (-). Vì vậy, tác động ức chế của vi khuẩn lactic trong nuôi trồng thủy sản bị hạn chế nhưng nó là vi khuẩn không có hại và là đối tượng cạnh tranh chỗ cư trú.

            • Nhiều vi khuẩn khác cũng tiết ra chất ức chế chống lại các vi khuẩn gây bệnh như Aeromonas hydrophila và Vibrio parahaemolyticus. Cơ chế tiết ra chất chống lại vi khuẩn gây bệnh trong các thử nghiệm ở mức tế bào in-vitro rất phổ biến trong môi trường nước.

            • 1.5.2.2 Cạnh tranh nơi cư trú[40]

            • Olsson và cs (1992) khẳng định cạnh tranh chỗ bám trong ruột của vật chủ có ảnh hưởng rất quan trọng đến sức khoẻ của vật chủ. Việc bám dính được vào lớp màng nhầy của ruột là rất cần thiết để vi khuẩn thiết lập quần thể trong hệ ruột của cá. Khả năng bám dính lên thành ruột là tiêu chuẩn lựa chọn đầu tiên của vi khuẩn hữu ích. Sự bám dính trên màng ruột có thể là chuyên biệt, không chuyên biệt.

            • 1.5.2.3 Cạnh tranh dinh dưỡng và năng lượng[40]

            • Nhiều quần thể vi sinh vật cùng tồn tại trong cùng một hệ sinh thái thì sẽ có sự cạnh tranh về dinh dưỡng và năng lượng. Cạnh tranh trong giới vi sinh vật chủ yếu là xảy ra ở nhóm dị dưỡng như cạnh tranh các chất hữu cơ mà chủ yếu là nguồn carbon và năng lượng. Rico-Mora (1998) đã cho một dòng vi khuẩn được chọn lọc có khả năng phát triển trên môi trường nghèo hữu cơ. Tác giả cấy vi khuẩn này vào bể nuôi tảo khuê cùng với Vibrio alginolyticus thì vi khuẩn Vibrio này không phát triển và thử nghiệm in-vitro không thấy có sự ức chế. Do đó chứng tỏ vi khuẩn được chọn lọc cạnh tranh lấn át Vibrio trong điều kiện nghèo hữu cơ. Do vậy những dòng vi khuẩn chọn lọc sẽ có ưu thế trong việc cạnh tranh năng lượng và dinh dưỡng.

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan