15 Staphylococcus aureus Tụ cầu khuẩn Nhóm thực : 1) Huỳnh Phương Anh 2) Lê Thị Khánh An 3) Ngô Thị Thúy An 4) Lê Minh Chí 5) Nguyễn Thị Kim Cương 6) Lê Minh Duy 7) Trương Thị Thanh Hiền 8) Dương Minh Hoàng 9) Trần Phâm Tuệ Hưng 10)Đỗ Thị Xuân Hương 11)Trần Đức Kiên 12)Bùi Thị Kim Phụng 13)Võ Đình Uy Viễn I) GIỚI THIỆU 0918005 0918019 0918022 0918052 0918056 0918074 0918149 0918161 0918200 0918201 0918225 0918355 0918596 Chi Staphylococus cầu khuẩn Gram dương, giới thiệu Sổ tay Hệ thống vi khuẩn học Bergey Được chia làm nhóm: Hiếu khí (Micrococcus, planococcus, and Deinococcus) kị khí (Staphylococcus, Stomatococcus, Streptococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Aerococcus, Coprococus, Sacina) Họ Micrococcaceae gồm loài: Micrococcus, Stomatococus, Planococus, Staphylococus Thuộc tính khác biệt cầu khuẩn Gram dương gồm xếp tế bào, hiếu khí bắt buộc, hiếu khí tùy ý vi hiếu khí, kị khí bắt buộc, phản ứng catalase, diện cytochrome, sản phẩm lên men kị khí chủ yếu từ carbohydrates, peptidoglycan, acid teichois thành tế bào, menaquinones Sự phân loại Staphylococus aures sau: Giới: Procaryotae Ngành: Firmicutes Lớp: Firmibacteria Họ: Micrococaceae Chi: Staphylococcus Loài: Aureus Hiện có 32 loài Staphylococcus xác nhận Một vài loài khác nghiên cứu Bảng danh sách 332 loài tìm thấy họ Tên Staphylococcus có nguồn gốc từ tiếng Hi Lạp, Staphylo có nghĩa chùm nho cossus có nghĩa chùm, Staphylococcus có nghĩa “quả chùm nho” Staphylococci tế bào hình cầu có đường kính từ 0.5 đến 1.5µm, tồn tế bào đơn lẻ, thành cặp thành cụm Cụm hình thành chủ yếu tăng trưởng môi trường rắn kết từ phân chia tế bào theo nhiều mặt phẳng, kết hợp với xu hướng tế bào gần Sự hiển thị không gian chiều thể rõ gắn kết bao phủ lên tế bào, nhiên, tế bào màu thường mang lại xuất phiến bất thường tế bào Staphylococci vi khuẩn Gram dương, không di động không sinh bào tử, nang hình thành nuôi cấy, nói chung không xuất pha tĩnh tế bào Sắc tố khuẩn lạc môi trường không chuyên biệt tryptic soy agar nằm khoảng từ màu trắng kem đến mà cam sáng Hầu hết chủng Staphylococci xem nhóm tác nhân gây bệnh mức II (potential hazard) Staphylococcicus hyicus xếp vào nhóm tác nhân gây bệnh mức IV (potential danger, nguy hiểm) Loài Staphylococal vi khuẩn hiếu khí hay yếm khí tùy ý có hô hấp lên men biến dưỡng Staphylococci thông qua chu trình glycolysis, nối hexose monophosphate, chu trình tricarboxylic acid Chúng dương tính với catalase va sử dụng lượng lớn carbonhydrates Staphylococcicus aureus loài phổ biến chi Staphylococcicus Nó cần có mặt amino acid vitamin cho tăng trưởng hiếu khí, : uracil, lên men amino acid vitamin cần cho phát triển sinh vật hiếu khí Trong S aureus có khả tăng trưởng kị khí tăng trưởng tốt điều kiện hiếu khí Nhiệt đọ tối ưu cho tăng trưởng kà 35 0C giới hạn chịu đựng từ 10 đến 45 0C Giới hạn chịu đựng độ pH cần cho phát triển từ 4.5 đến 9.3, pH tối ưu khoảng 7.0 đến 7.5 Khi điều kiện môi trường trở nên khắt nghiệt hơn, giới hạn chịu đựng độ pH giảm Thành phần chủ yếu thành tế bào S aureus peptidoglycan, chiếm 50% trọng lượng tế bào quy định hình dạng bền vững Peptidoglycan polymer polysaccharide không phân nhánh, gồm liên kết β(1-4), chuỗi có chứa xen kẻ đơn vị N-acetylglucosamine, với khỏang 60% N-acetylmuramic acid residues o-acetylated Luợng lớn O-acetylation giúp cho tế bào kháng thủy phân lysozyme Pentapeptide liên kết bên với lượng dư acid muramic, liên kết đồng hóa trị pentaglycine với L-lysine chuỗi D-alanine khác Phức hợp peptidoglycan nhóm chuỗi polymer phosphate với acid teichois Acid Teichoic (chiếm 40% trọng lượng vách tế bào) liên kết cộng hóa trị với peptidoglycan màng tế bào Xương sống thành tế bào teichoic acid chuỗi xen kẽ ribitolphosphate liên kết với D-alanine liên kết α β-glycosidic xuyên qua N-acetylglucosamine Các thành phần vỏ S.aureus acid N-acetylaminouromic N- acetylfucosamine Muời kiểu nhóm huyết xác định, với gen để sản xuất vỏ nang nằm operon Kết nang vi khuẩn có khả chống thực bào Một vài chủng S.aureus có kết nang, chúng có nguy gây nguy hiểm cho động vật Bao nang thường phát thể sống lại không xuất nuôi cấy Phạm vi màu sắc từ màu trắng xám, đến mà vàng cam màu cam Sổ tay Bergey nói sắc tố triterpenoid carotenoids dẫn xuất chúng nằm màng tế bào Sắc tố thường có sau 18-24 giờ của sự tăng trưởng ở 37 0C, có màu rõ rệt mẻ nuôi cấy được cất giữ ở nhiệt độ phòng vòng 24-48 giờ Sắc tố không được tạo thành quá trình tăng trưởng kị khí hoặc mẻ nuôi cấy lỏng Nói chung S aureus tăng trưởng và cạnh tranh đàn áp các sinh vật hiện diện khác Mặc dù giá trị D khác với loài nhiệt độ dung môi, giá trị D giảm sau phút 60oC cho thấy S.aureus không chịu nhiệt Khả chịu nhiệt chịu ảnh hưởng của pH, Aw , và thời gian của mẻ nuôi cấy Đun nóng các sản phẩm thịt đến nhiệt độ khoảng 770C thường là đủ để giết hết S aureus S.aureus kháng với nhiệt độ thấp Nhưng lại rất nhạy cảm với môi trường có tính acid và một loạt các hợp chất hóa học và thuốc kháng sinh II BỆNH NGOÀI ĐƯỜNG RUỘT : Staphylococci là một phần bình thường của hệ vi sinh của thể động vật, chúng được tìm thấy bề mặt da và tóc, mũi, miệng và cổ họng Staphylococcus epidermidi, xâm chiếm hầu tất cả các bề mặt biểu bì, S aureus xâm chiếm chủ yếu màng nhầy Các sinh vật này xâm chiếm vào trẻ sơ sinh vài ngày sau sinh Polledo et al đã nghiên cứu xử lý 300 mẫu thực phẩm Họ phát hiện rằng có 83 (27.6%) là thể truyền bệnh có tụ cầu dương tính với coagulase (enzyme gây đông tụ) và 118 (39.3%) dương tính với coagulase – tụ cầu âm tính hốc mũi Thú vị là nam giới được phát hiện có mang tụ cầu dương tính coagulase nhiều so với nữ giới Ba mươi sáu cá thể được phát hiện có tụ cầu enterotoxigenic Tỷ lệ này trái ngược với tỷ lệ 40-50% theo báo cáo của Bergdoll Thể truyền bệnh không có triệu chứng của tụ cầu có thể được chia làm nhiều kiểu: thể truyền bệnh mạn tính, người mang bệnh nuôi dưỡng loại S aureus thời gian kéo dài, thể truyền bệnh/ người mang bệnh cấp tính, họ không thường xuyên mang Staphylococci gây bệnh, lúc có lúc không, họ mang một loại cho thời gian nhất định, và sau đó mang loại khác; người không mang mầm bệnh, là những người hiếm hoặc không bao giờ mang mầm bệnh độc hại S aureus Người mang bệnh/ thể truyền bệnh có triệu chứng nhiễm S aureus là những người mang bệnh công khai Con người được coi là môi trường sống của S aureus tự nhiên Staphylococci có thể gây bệnh ở hầu hết các mô thể, S aureus.là nguyên nhân phổ biến nhất gây bệnh nhiễm trùng suppurating ( mụn nhọt, nổi mụn) và là một các vi khuẩn gây bệnh lâu nhất Một các báo cáo đầu tiên công bố về bệnh S aureus là vào năm 1871 với nhà bác học người Đức - Van Reclinhausen, người đã quan sát khuẩn cầu, mà ông đã cô lập từ thận của bệnh nhân đã chết sau sốt Các tụ cầu được coi là tác nhân gây bệnh hội mà quá trình xâm nhiễm thường là qua da hoặc qua màng nhày Các tổn thương thường gặp nhất là áp xe da hoặc vết bỏng, mà vùng trọng tâm của nhiễm trùng thường có mũ một phần hoặc hoàn toàn, có vách bao quanh xuất phát từ các mô xung quanh Các vùng của sự hình thành áp xe thường là nang long và tuyến mồ hôi Nhọt là một loạt các áp xe kết nối với Sự lây của nhiễm trùng thể, các quan chính và các mô có thể xảy bằng cách lây lan qua các mô tiếp giáp hoặc lây lan qua hệ bạch huyết và máu Tổn thương di được tạo một loạt các mô Nhiễm trùng nghiêm trọng có thể xảy ở những người nhạy cảm như: trẻ em, người bị bỏng hoặc chấn thương, và người rối suy nhược mạn tính (ung thư, xơ nang vv…) Bệnh tụ cầu nghiêm trọng thường được gây bởi tụ cầu khuẩn âm tính coagulase Chúng xâm nhập vào thể qua các vết thương hở ở các mô biểu bì như: tiêm chích, ống thông, hoặc các dụng cụ y tế khác Một hệ thống bạch cầu bình thường giúp thể có thể chống lại sự xâm nhập của các vi khuẩn này, sự bất thường của các miễn dịch dịch thể có thể góp phần làm cho thể dễ mắc bệnh Bệnh tụ cầu có thể được lây lan bằng hai cách là thông qua hô hấp và tiếp xúc với da và quần áo của người bệnh Bệnh tụ cầu thường có ở bệnh viện với 90% biến thể có đặc tính kháng peniciline Các biến thể xuất nhanh chóng vài bệnh nhân sau điều trị liệu pháp kháng sinh Một số kháng sinh khác tới nơi vài biến thể kháng erythomycin, neomycin, streptomycin, gentamicin, tetracycline, chloramphenicol Cả plasmics nhiễm sắc thể staphylococus tìm thấy mã hóa cho khả kháng kháng sinh Một số bệnh nghiêm trọng gây chúng bao gồm: nhiễm trùng máu, viêm màng tim, viêm tủy xương, viêm phổi Một số bệnh khác như: triệu chứng shock độc, viêm ruột kết, ngộ độc thực phẩm III ĐẶC TÍNH S.areus loài vi khuẩn quan tâm công nghiệp thực phẩm Ngộ độc thực phẩm Staphylcocus nguyên nhân hàng đầu vụ ngộ độc thực phẩm không riêng Hoa Kỳ, mà nhiều quốc gia khác Nó gần so sánh với Samonella tác nhân gây ngộ độc thực phẩm phổ biến cho dẫn đầu nguyên nhân gây ngộ độc thực phẩm Ngộ độc Staphylcocus diễn kết việc tiêu thụ độc tố enterotoxin chịu nhiệt sản xuất vi khuẩn suốt trình sinh trưởng A Các hoạt động nước Một lý mà S.aureus quan tâm nghiên cứu khả phát triển 0.83 a w tức thấp so với phát triển loài vi khuẩn Phần lớn biến thể S.aureus có khả chịu đựng cao môi trường muối đường phát triển điều kiện vượt 0.83 đến 0.99 a w S.areus phát triển mạnh điều kiện khoảng lớn 0.99 sinh trưởng điều kiện a w thấp phụ thuộc vào điều kiện tăng trưởng khác cách thích hợp Chỉ số aw thấp cho phát triển chúng lớn điều kiện kị khí (0.90) S.aureus phát triển tốt điều kiện nước muối 16% (0.88aw) đường 50% (0.97 aw) B Enzymes ngoại bào S.aureus sản xuất lượng lớn enzyme ngoại bào Iandolo (8) cho S.areus có khả sản xuất 34 loại protein ngoại bào khác nhau, dòng đơn sản xuất tất loại protein Có ý kiến cho sản xuất protein ngoại bào giúp cho vi khuẩn xâm nhập vào mô khỏe mạnh tránh khỏi máy miễn dịch thể Một vài dạng enzyme có giá trị nhận diện vi khuẩn Bjorklind Arvidson phát phần lớn protein ngoại bào sản xuất vào cuối trình tăng trưởng Coagulase Bảng 2: Protein độc tố ngoại bào Staphylococcus aureus Coagulase Endopeptidase Fibronolysin Enterotoxins A-E Metalloprotease Độc tố gây hội chứng Elastase Penicillinase shock Protein A Serine Protease Độc tố tróc da A B Lipase Nuclease Staphylococcal Leukocidin Pyrogenic exotoxin Nhân tố Sucinic oxidase Collagenase Staphylokinase Lysostaphin Phospholipase Acid phosphatase Thiol protease Hemolysins Alkaline phosphataseotein Fibrinogen biding protein lysozyme Fibronectin – binding proetin a Elastin binding protein Colagen Binding protein Fibronectin binding B Nhân tố Clumping Nhân tố Matrix Adhesin Coagulase enzyme quan trọng sản xuất S.aureus Hai loại enzyme coagulase gồm dạng tự dạng nằm tế bào Hai loại khác đặc tính miễn dịch số hoạt động nhỏ Coalgulase ngoại bào tồn tự nhiên có nhiều kiểu nhận dạng Có 93-100% tương hợp sản phẩm Coagulase enterotoxin S.aureus dương tính với coagulase có khả hình thành cục máu đông Enzyme sản xuất biến thể độc biết đến có khả gây bệnh hình thành cục máu đông Tuy nhiên, tầm quan trọng hàng rào chống lại lây nhiễm không toàn vẹn, dòng S.aureus âm tính với coagulase nguyên nhân gây bệnh Sự đóng cục máu thể liên quan đến số lượng thành phần Một cách vắn tắt, cục máu đông định hình yếu tố đông máu có huyết chuyển hóa thành mạng lưới có tên fibirn, Staphylococus aureus hoạt động việc chuyển đổi fibrinogen thành fibrin Một lí cho việc sử dụng rộng rãi coagulase để xác nhận dương tính với S.aureus kiểm tra thực dễ dàng dễ nhận biết Tế bào loài sinh vật nghi ngờ trộn với huyết tương người thỏ (được thêm vào citrate, oxalate, EDTA để khử ion Ca, yêu cầu đông máu invivo), sử dụng phương pháp xét nghiệm ống, sử dụng phương pháp xét nghiệm dựa mẫu kính hiển vi Slide hay ống xét nghiệm ủ 370C – gi Tuy nhiên, phương thức mô tả Bacteriological Analytical Manual (10), yêu cầu khối kết đông bền diện ống xét nghiệm trút ngược xem dương tính Kết phương pháp mẫu, nơi tế bào kết thành khối xem dương tính Weer-Pothoff al.(11) so sánh bảy coagulase test phương pháp nhận dạng staphylococus Nhìn chung, thử nghiệm thương mại cho kết nhạy ống xét nghiệm thông thường hay xét nghiệm mẫu Nuclease chịu nhiệt Nuclease chịu nhiệt chẩn đoán quan trọng S.aureus Những Nuclease sản xuất trình tăng trưởng bình thường có khả công ribonucleic deoxyribonucleic S.aureus có khả sản xuất nuclease ngoại bào có khả chịu nhiệt Sự diện hai loại nuclease (chịu nhiệt nhạy nhiệt) nguyên nhân tạo nên khác biệt chủng loại Gudding cho biết S.aureus S.intermedius and S.hylius Subsp Tất Hyicus sản xuất nuclease chịu nhiệt Như tên gọi nó, neclease chịu nhiệt vô bền vững điều kiện nhiệt độ cao bền vững nước sôi vòng 30 phút mà biến đổi nghiêm trọng Một test diễn tả hoạt động nuclease chịu nhiệt Phương pháp dùng Toluidine blue deoxyribonucleic acid agar dùng để nhận dạng Trên khối agar (trên có khuẩn lạc S.aureus cô lập phát triển) lấy mẫu cấy vào môi trường ống mẫu đun sôi 15phút Tiêu làm việc lấy mẫu Toluidine blue deoxyribonucleic acid agar cộng với chút agar tốt chứa khuẩn lạc Mẫu đun sôi chỗ ủ môi trường ẩm ướt 350C Kết dương tính cho thấy vùng màu hồng sáng DNA thủy phân Giống coagulase, việc sản xuất nuclease chịu nhiệt enteroxigenicity giống đến 95 tới 100% Ratner Strattion cho biết đối lập thử nghiệm thermonuclease coagulase 250 mẫu máu người Tuy nhiên, Adekeye cho biết thermonuclese hiệu nhận biết S.aureus cô lập từ động vật (không phải người) Ngược lại với Staphylcococal ngoại bào, nuclease chịu nhiệt sản xuất suốt trình tăng trưởng tế bào Các loại Enzyme khác S.aureus sản xuất nhiều loại enzyme ngoại bào khác có giá trị chẩn đoán giúp đỡ thể sinh bệnh Staphylokinase gây tan khối vài lipase có khả tạo vòng tan thạch trứng đục Hyaluronidase sản xuất hầu hết dòng S.aureus, loại enzyme thúc đẩy lan tỏa mô việc khử trùng hợp hyaluronic acid Những loài enzyme khác sản xuất S.aureus bao gồm penicillinase, protease (collagenase, elastase, endopeptidase, metalloprotease, serine protease, thioprotease), lipase (phospholipase phosphatase – acid alkaline), fibrinolysin (biến đổi fibin thành sản phẩm hòa tan), protein A (dạng phức hợp lớp màng thành tế bào làm suy yếu oposin hóa huyết thanh, lytic enzyme (staphylcococal lysozyme lysostaphin) C Toxins – Hemolysins loại khác Hemolysin, tương tự staphylolysin, sản xuất S.aureus đặt tên alpha, beta, gamma delta; dòng đơn sản xuất hay nhiều emolysins Những protein ngoại bào khác biệt khả dung giải hồng cầu chúng loài động vật khác Gamma hemolysin Panton- Valentine leukocidin (phân giải leukocyte) hợp thành từ hai cấu tử, số có hai Tất ngoại trừ delta-hemolysins tạo vòng tan bao quanh khuẩn lạc S.aureus phát triển quanh thạch máu Staphylococi sinh mủ phân giải hemoglobin phản ứng dương tính với coagulase Một số độc tố khác sản xuất S.aureus exfoliatin, leukocidin, pyrogenic exotoxin (29,30) Sự tương phản với enterotoxins vi khuẩn gram âm ( sản xuất protein chuyên chở đặc biệt) phần operon mã hóa độc tố SEs xem exotoxins kết hợp protein với phần phi protein (31) SEs hoàn chỉnh kết hợp chuỗi polypeptide đơn với 230 – 239 amino acid, xếp thành phân tử nặng từ 26,360 tới 28,494 có thắt nút (loop) disulfide gần phân tử (Bảng 4) Phân tích amino acid SEs cho thấy giàu lysine, asparatate glutamic acid(6) (Bảng 5) Ngoài ra, tích điện dương chúng đóng vai trò quan trọng gây nôn mửa IV CÁC ĐỘC TỐ TRONG RUỘT 1) Cấu trúc Trình tự nucleotide gen mã hóa cho SEA, SEB, SEC 1, SEC3, SSD, SEE ( sea,seb,sec1, sec3 ,sed see) (32-37) trình tự amino acid SEA, SEB, SEC (38-40) báo cáo SEs thuộc họ enterotoxins lớn gọi pyrogenic toxins ( PTs), gồm có pyrogenic toxins A B, TSST-1 , streptococal pyrogenic toxins A-C ( SPE A-C) (41-47) PTs tiết lộ giá trị mặt sinh học, bao gồm tác nhân nguyên phân tế bào lympho, chặn miễn dịch, sốt, làm tăng tính nhạy cảm với endotoxin So sánh PTs nhận 43- 85 % trình tự nucleotid đặc trưng( 33) Nucleotid đặc biệt amino acid tương đồng entC1, entB SPE A nhận ra, entC1 entB gióng với SPE A(36) Couch Betley (33) báo cáo SEC có 98% trình tự nucleotide tương đồng với SEC 1, SEC1 SEB thể 68% amino acid tương đồng Cả SEB SEC có tương đồng cấu trúc cao, đặc biệt vùng đầu amino carboxy, với tính chất định kháng nguyên nó, trọng lượng phân tử tương đồng, cầu disulfile đơn nhóm sulhydryl tự (41,51,55,56) Vùng đầu amino SEB SEC1 thể tính kháng nguyên – chịu trách nhiệm cho phản ứng chéo với kháng thể huyết (57), mức độ cao không tương đồng đầu amino SEA giải thích lý kháng huyết SEA phản ứng chéo với SEB hay SEC1 (38) 10 Những tượng tái phục hồi tế bào tổn thương hay bị stress tìm thấy số hàng hóa, vật phẩm Các điều kiện gây tổn thương tế bào khuẩn tụ cầu bao gồm sốc nhiệt (132,133), đông lạnh đông lạnh khô (134), xạ (135), giảm hút nước(136) tiếp súc với số hóa chất khác axit muối (137,138) Một vài vị trí bị tổn thương tiến hành tế bào Các báo cáo phổ biến màng tế bào chất với thất thoát tổng hợp chất cấu thành tế bào chất (132,136,139,140) thoái hóa ribosome RNA (141,142) Các vị trí tổn thương khác gồm biến chất protein bất hoạt enzyme Nucleic Acids Sự ảnh hưởng RNA lần tìm thấy nhà xét nghiệm tìm thấy huyền phù nhiệt S.aureus bị 260 nm vật liệu hút nước Iandolo Ordal (132) cho 260 nm vật liệu hút nước thoát từ S.aureus bị sốc nhiệt RNA Rnu Các nghiên cứu sau cho thấy vật liệu thoái hóa RNA ribosome thành phần tế bào (141,133) Sự thoái hóa ribosome RNA ribosome invivo kết sốc nhiệt S.aureus (141,144,145) Phân tích gradient nồng độ sucrose ribosome từ tế bào sốc nhiệt cho thấy tiểu đơn vị 30S bị tiêu diệt có chọn lọc Hiện tượng chuyển điện tử gel polyacryamide RNA ribosome chiết xuất từ tế bào sốc nhiệt cho thấy RNA 16S bị thoái hóa RNA 26S bình thường Rosenthal Iandolo (141) cho suốt thời gian sốc nhiệt, RNA 16S bị thoái hóa hoàn toàn RNA 23S biến đổi Sự sốc nhiệt tế bào vi khuẩn với có mặt ion phosphate quy định thúc đẩy thoái hóa RNA kích thích hoạt động ribonulease phá vỡ ổn định ribosome chelation Mg 2+ nội bào Vì vậy, thoái hóa ribosome vi khuẩn cầu nối hidro bị phá vỡ Sự phục hồi tổn thương tương ứng với giai đoạn tái phục hồi tế bào Vì tổn thương ribosome thoái hóa RNA ribsome thương tổn chủ yếu sinh vật stress nhiệt, thấy tổng hợp RNA ribosome đơn vị ribosome chủ yếu trình phục hồi (130) Iandolo Ordal (144) co tổng hợp RNA cần thiết cho phục hồi Họ 24 khẳng định tổng hợp RNA xảy trước tổng hợp protein diễn tổng hợp protein bị ức chế Ở thí nghiệm tiếp theo, Rosenthal Iandolo (141) tìm thấy tiểu đơn vị 30S 16S RNA bị thoái hóa trình sốc nhiệt Tuy nhiên, tiểu đơn vị 50S, 30S, tái sinh suốt trình phục hồi tổng hợp protein Flowers Martin (148) xác định trình đơn vị ribosome suốt phục hồi tế bào sốc nhiệt S.aureus Các tế bào phục hồi tìm thấy có chứa phân tử ribonucleoprotein (49S, 26S 30S) Hiệu ứng chuyển điện tử gel polyacrylamide cho thấy phân tử 49S chứa RNA 23S, phân tử 36S chứa RNA 16S tiền 16S Các phân tử với đặc tính lắng đọng tương tự tìm thấy tế bào không bị sốc nhiệt Độc tố Oxygen Phân tử oxy hoàn tan lượng nhỏ nước, với 9mg/L hòa tan 20 oC 1atm (130,149) Chỉ 7mg O2/L hòa tan chất dinh dưỡng nước hầm thịt 30 oC Tuy nhiên, phân tử oxy hoàn tan gấp từ đến lần dung dịch hửu cơ, ví trở nên cô đặc màng tế bào hút mỡ (150) Phân tử oxy thuận tử hai electron hóa trị không bắt cặp với Dạng phân tử oxy cấu hình lượng với electron không bắt cặp song song chuyển điện tử cho đất Ozon Ozon cung cấp lượng cho Oxy đơn phân, mà có hai e tự vòng xoay không đối xứng Hai dạng oxy đơn phân tồn lượng bất đối xứng Đầu tiên, hai phân tử có lượng yếu biến đổi e tự trạng thái ổn định trở nên bắt cặp quỹ đạo vòng xoay vất đối xứng Phân tử lại biến đổi e bị đưa vào vòng xoay nghịch chuyển, với hai e tự lại quỹ đạo khác Oxy đơn phân phản ứng đặc biệt đe doa cho toàn thành phần tế bào (150) Trong có đời sống ngắn môi trường nước, gây tổn thương cho vùng lipid/protein., ví màng tế bào, nơi tiếp xúc với cầu nối C-C polyunsaturated fatty acids, nơi oxy đơn phân không bị ngăn chặn tồn lâu (149) 25 Ozon chứa hai e tự vòng xoau đối xứng Các vòng xoay electron đối xứng ngăn hướng vào cặp electron (149) Vì vậy, để trình giảm hóa trị xảy ra, e spin bị nghịch chuyển để trách xếp spin đối xứng orbital Kết là, có đủ lượng, đường univalent phản ứng oxy ưa tiên đường divalent Sản phẩm phản ứng khử univalent phân tử oxy gốc tự hydroperoxyl dạng proton gốc anion superoxide dạng ion hóa (bảng 6) Gốc tự superoxide anion (O 2.-) hoạt động chất khử mạnh tác nhân oxy hóa bắt đầu chuỗi phản ứng gốc tự Gốc superoxide H2O2 tương tác để hình thành gốc hydroxyl OH, chất oxy hóa mạnh biết đến Cuối cùng, nguyên tử oxy tạo phản ứng O 2.- với OH (150) tương tác hai phân tử H2O2 (151) Hydrogen peroxide hình thành khử hai electron phân tử oxy phân tách superoxide Nó chất oxy hóa mạnh có tác dụng diệt khuẩn, chức thời gian, phơi sáng, tập trung, hình thành bào tử không hình thành bào tử vi khuẩn (152) Hydrogen peroxide sản xuất hầu hết tế bào sinh trưởng hiếu khí (vi khuẩn, thực vật động vật) hoạt động superoxide dismutase (SOD) số enzymes flavin liên kết Hydrogen peroxide phản ứng ổn định dạng trung gian đường univalent, chất oxy hóa mạnh có khả gây tổn thương phục hồi thành phần khác tế bào Hydrogen peroxide chất diệt khuẩn sử dụng ansiseptic cục nhiều năm (153.154) Hiệu H2O2 thay đổi tùy theo nồng độ, nhiệt độ, thời gian điều trị, loại số lượng sinh vật (152, 155) Cách thức hoạt động H2O2 tế bào vi khuẩn lớn Ví dụ, H2O2 bất hoạt enzym cách thay đổi acid amin (156,157) Các tác động thoái biến H2O2 DNA chứng minh Hydrogen peroxide phân hủy DNA cách thay đổi cấu trúc bậc bậc Độ lớn tương đối tỷ lệ suy thoái (158-161) sau: phá hủy base > phá vỡ sợi đơn > phá vỡ sợi đôi > liên kết ngang 26 Sản phẩm thứ ba khử univalent O gốc tự hydroxyl Gốc hydroxyl mặt lý thuyết tạo số cách khác Beauchamp Fridovich (162) cho thấy gốc tự hydroxyl tạo số lượng đáng ý phản ứng O2.- H2O2 hệ thống nước Gốc OH chất oxy hóa mạnh biết đến gây nhiều loại tổn thương Oxy tổn thương gây tử vong Biểu ảnh hưởng độc hại oxy kết nỗ lực cải thiện môi trường sử dụng cô lập S.aureuns Những nghiên cứu kiểm tra tác động tác nhân phân hủy H2O2 (catalase, peroxidase, pyruvate) môi trường rắn chất lỏng khác (137.138.163.164) Kỹ thuật mạ kép môi trường Tryptic Soy Agar (TSA) TSA cộng với 7,0% NaCl (TSAS) để đo mức độ stress phát triển Iandolo Ordal (132) Trước đốt nóng, việc đếm S aureus MF31 tương tự hai môi trường Sau làm nóng 52 0C 20 phút đệm phosphate kali 100mm (pH 7.2), đếm TSAS giảm xuống 0,001% tìm thấy TSA, 99% tổng số tế bào bị tổn thương(137) Tuy nhiên, catalase pyruvate thêm vào TSAS, việc đếm tế bào bị thương nhiệt tăng gấp 14.000 lần, khoảng 76% tìm thấy TSA Điều kiện có catalase cho chủng staphylococcal khác môi trường agar chọn lọc có tác động làm tăng số tế bào đếm Bổ sung catalase đồng thời với diện phosphatidylcholine phần chiết thịt bò thạch Vogel Johnson có hiệu môi trường cho số lượng đếm tốt so với thạch Baird-Parker (164) Môi trường thạch Baird-Parker khuyến cáo dùng cho thực phẩm thuốc Sự kiểm soát (10) số lượng đếm S aureus Brewer et al (163) phát triển số phương pháp có khả bị biến đổi điều kiện dùng catalase pyruvate Phương pháp thường xuyên phát diện với số lượng thấp S aureus bị bỏ sót phương pháp 27 Quan sát cho thấy catalase pyruvate làm tăng số tế bào đếm S aureus bị nhiệt-stress dùng tác nhân thông qua giảm sút H2O2 Bucker et al (165) thừa nhận tế bào bị tổn thương nhiệt phục hồi gồm hiếu khí kỵ khí Các tế bào thừa nhận phục hồi kỵ khí cho thấy độ nhạy với NaCl, cho thấy mức độ catalase bị giảm, có peroxidase hydro tạo Độ pH tối ưu S aureus MF-31 catalase 5-6 (130.166) Các enzyme ổn định phạm vi pH 4-9 Các điểm đẳng điện 5,3 ± 0,1 đơn vị pH Với ý cho ổn định nhiệt độ, S aureus MF-31 catalase tinh khiết ổn định 520C sau 45 phút làm nóng Enzyme bị bất hoạt 600C 10 phút Tuy nhiên, điều phụ thuộc vào nồng độ enzyme diện protectans trọng lượng phân tử đơn phân 64.000 ± 1.000 dalton, trọng lượng đa phân 235.000 ± 5.000 dalton Phân tích amino axit cho thấy S aureus MF-31 catalase tương tự phân tích acid amin catalase từ nguồn khác Hàm lượng sắt S aureus MF-31 tìm thấy 0.098% Enzyme bị ức chế nồng độ milligram sodium cyanide, sodium azide, hydroxylamine, cho thấy diện chất xúc tác kim loại nặng Tác dụng muối, pH, nồng độ muối ảnh hưởng tới tính hoạt động Anion chloride ức chế hoạt động catalase độ pH thấp, ức chế bị ảnh hưởng cation Natri clorua ức chế pH thấp so với clorua, magiê clorua Hoạt động superoxide dismutase chứng minh hạ xuống nhiệt độ gây chết S aureus MF-31 (520C, đệm phosphate) (167) Khi tế bào đun nóng 90 phút, nồng độ SOD giảm khoảng 20%, thời gian 99% tế bào bị chết Tổn thất quan sát hoạt động không lớn, mức giảm dự tính với mức giảm mức catalase đáng kể Tế bào S aureus nhiệt độ gần gây chết khảo nghiệm mức độ SOD trình làm hư hại thời gian phục hồi Có suy giảm đáng kể (~ 85%) hoạt động SOD lúc bắt đầu giai đoạn phục hồi Sự suy giảm xấp xỉ với hoạt động caralase trình stress nhiệt Mức độ 28 chậm trễ khoảng 2,5 tế bào bắt đầu phân chia Sau 2,5 giờ, mức SOD tăng đồng thời với tăng số lượng tế bào VI Phát đếm Có bốn lý loại thực phẩm thành phần kiểm tra để xác định diện S aureus (130): Để xác nhận diện S aureus sau đợt bùng phát ngộ độc thực phẩm Để xác định có hay không thực phẩm nguồn tiềm ngộ độc thực phẩm tụ cầu Để chứng minh ô nhiễm xử lý sau Là phần chương trình kiểm soát chất lượng thường xuyên Nó quan sát thấy tế bào tụ cầu nguy hiểm nhấn mạnh , nhiều người không phát triển phương tiện thông tin chọn lọc Những lý cho việc thất bại, phương pháp khắc phục nó, nghiên cứu rộng rãi S.aureus Việc lựa chọn phương pháp để phát S aureus phụ thuộc vào mục đích để thực khảo nghiệm sản xuất có liên quan Khi thức ăn bị nghi ngờ nguồn gốc bùng phát loại thực phẩm ngộ độc tụ cầu, số lượng lớn S, aureu thường xuyên nhạy cảm phương pháp không yêu cầu Phương pháp nhạy cảm để phát số lượng nhỏ S.aureus sinh vật chí chiếm ưu mẫu Vì lý này, phương tiện truyền thông ức chế chọn lọc sử dụng để phân lập đếm Phương tiện truyền thông lựa chọn sử dụng số hóa chất độc hại khác để đạt chọn lọc Một số nguyên liệu sử dụng bao gồm natri clorua, tellurite, lithium chloride, kháng sinh khác Một số phương tiện truyền thông đề xuất cho cô lập S aureus từ thức ăn có nhiều 100 gram Một số số bao gồm Trung bình Staphylococal 100, Agar Vogel-Jonhson, lòng đỏ trứng thạch azide-natri, thạch tellurite-polymyxin-trứng lòng đỏ, Baird-Parker Agar (Bảng 29 7) Thành phần phương tiện truyền thông tiêu biểu chọn lọc tụ cầu tìm thấy bảng Hầu hết phương tiện truyền thông chọn lọc phù hợp với điều tra S aureus bình thường chủng âm Tuy nhiên, bảo quản, chế biến, tác dụng phụ khác điều kiện, căng thẳng it nguy hiểm xảy ra, kết tăng nhạy cảm S aureus cho đại lý chọn lọc Bởi tế bào bị thương tăng nhạy cảm cho đại lý chọn lọc, S aureus không bị phát thủ tục điều tra chọn lọc thông thường Baird-Parker Davenport (168) chứng minh phục hồi tế bào nóng khô S aureus bị giảm hoạt động cách nung nóng sấy khô máu, có catalase, bổ sung pyruvate, ông PED điều tra cách tiêu diệt H 2O2 sản xuất tế bào phục hồi thấy thạch Baird-Parker (BP) đạt yêu cầu liệt kê tế bào bị thương so sánh với phương tiện truyền thông chọn lọc tụ cầu (169-171) Việc bổ sung catalase tryptic thạch đậu nành cộng với 7% NaCl (TSAS) (Bảng 9) phương tiện truyền thông lựa chọn khác làm tăng liệt kê nhiệt nhấn mạnh tế bào S aureus, việc bổ sung nhiệt bất hoạt catalase có ảnh hưởng điều tra (130, 137, 138) Việc bổ sung catalase khác lựa chọn phương tiện truyền thông tìm thấy để tăng điều tra tế bào stress nhiệt chủng âm (138) Carlsson et al (172) cho phosphat glucose hấp với môi trường pH trung tính kiềm, sản phẩm kết nhanh chóng tự động bị oxy hóa, tạo thành phản ứng loài Những nỗ lực thực để phát triển phương tiện chọn lọc tụ cầu cung cấp cho liệt kê thạch BP khắc phục khó khăn việc sử dụng agar BP (ví dụ với sản phẩm sữa) chi phí trình mô tả Martin (130) Andrews, Martin (164) sửa đổi Vogel Johnson thạch việc bổ sung chiết xuất từ thịt bò 0,5%, 0,2% DNA, phosphatidycholine 0,2% (lecithin), 780 đơn vị catalase trải bề mặt thạch trước để tiêm chủng Việc tìm thấy phosphatidycholine-Vogel Johnson 30 Bảng Ví dụ thông tin chọn lọc Staphylococcus aureus Agar medium Staphylococus Medium 110 Thành phần chọn lọc Sodium chloride Vogel-Johnson Egg yolk-sodium azide Lithium Nguồn cấp Mannitol Gelatin chloride Mannitol Potassium tellurite Tellurite Glycine Lithium chloride Potassium tellurite Phenol red Egg yolk Tellurite Polymyxin B sulfate Lithium chloride Egg Baird-Parker Potassium tellurite yolk Tellurite Bảng Phương tiện truyền thông tiêu biểu chọn lọc tụ cầu Thành phần Nước mắm Chiết xuất… Chiết xuất thịt bò LiCl Glycine Sodium pyruvate Potassium phosphate dibasic Mannitol Phenol red Phosphatidyl choline DNA Agar Tellrite (1%) Egg yolk(50%) Catalase B-P(g/L) PVCJ(g/L) VJ(g/L) pH 7.0 10 5 12 10 pH 7.2 10 5 10 _ pH7.2 10 _ 10 _ _ 5 _ _ _ _ 18 10 mL 53 mL _ 10 0.025 2 16 10 mL _ 780 units 10 0.025 _ _ 16 20 mL _ _ B-P = baird-parker agar; PCVJ = phosphatidyl choline-Vogel and Johnson agar; VJ = Vogel Johnson agar stress nhiệt MF-31 Bảng enzyme catalase vàand tế bào S.aureus 31 Medium Unstressed cells Stress cells CFU/mL % enumerationb CFU/mL % enumerationb B-P 3.9x109 100 2.4 x109 100 VJ+ catc 3.5 x109 90 6.2 x108 26 VJ+ catc 4.2 x109 108 2.9 x109 121 TSA 3.4 x109 87 1.9 x109 79 TSA +catc 3.9 x109 100 2.5 x109 104 TSAS 3.1 x109 79 1.8 x107 0.8 TSAS + catc 3.5 x109 90 1.2 x109 50 MSA 3.0 x109 77 2.5x106 0.1 MSA+ catc 3.4 x109 87 7.2x108 30 S110 2.2 x109 56 2.3x106 0.1 S110 + catc 2.5 x109 64 3.7 x108 15 TPEY 4.2 x109 108 8.0 x108 33 TPEY +catc 4.3 x109 110 2.5 x109 104 CFU = Colony–forming unit; B-P =Bard-Parker agar; VJ = Vogel and Johnson agar; TSA = Tryptic soy agar; TSAS = TAS +7%NaCl;MSA = Mannitol salt agar; S110= Staphylococcal 110 agar ;TPEY = telluritepolymysin egg-yolk agar Những tế bào bị sốc nhiệt dung dịch đệm kali photphate 100 mM(pH= 7.2) 52 oC 15 phút Phần trăm thống kê tính cách chia CFU/mL môi trường khác nhau, CFU/mL B-P nhân với 100 Catalase (cat) hoạt hóa khoảng 780 đơn vị đĩa Agar (PCVJ) đưa đến số lượng liệt kê tương đương stress tế bào S.aureus staphylococci từ nhiễm mẫu thực phẩm cách tự nhiên mà tìm thấy 32 cho liệt kê B-P Sự liệt kê với công cụ dễ B-P cho phép xác nhận sản phẩm Dnase Idziak Mosse(173) biến đổi công thức thạch B-P cách thay đổi lòng đỏ trứng gà huyết tương heo(B-PP) nhận rằng, dựa vào tính chọn lọc, mô tả triệu chứng gia tăng tính nhạy cảm, thạch B-PP tốt thạch B-P Lachia mô tả phương pháp đơn giản cho thống kê S.aureus từ thưc phẩm Ông thay lòng đỏ trứng thạch B-P Tween 80(0.05%wt/vol) MgCl2(0.1%) Khi hổn hợp thêm vào thạch B-P lòng đỏ trứng gà, khôi phục lại stress tế bào so sánh để phục hồi lại môi trường thạch B-P hoàn thiện Metzer-Morgenstern Katzenelson(175) phát triển staphylococcal môi trường có chọn lọc xác định 4-S agar Môi trường cho phép cô lập, xác định staphylococci đạt bước Coagulase âm tính staphylococci dạng nhỏ, cụm khuẩn xám đến xám đậm xung quanh dày đặc, trắng đục Không may stress tế bào nhiệt bị ức chế phương pháp này,và thời kì tiền ủ bệnh dịch tim phụ thuôc vào thống kê tế bào bị thương Phương pháp báo cáovà trở nên nhạy với s.aureus Khi số lượng thấp S.aureus đoán trước 1mẫu thực phẩm, phương thức số lượng lớn nhất(MPN) thường dùng Công nghệ MPN xem xét nhiều kết phép thống kê số lượng thấp sinh vật số lượng sinh vật diện mức cao(176-178) Giá trị MPN ước lượng quần thể không thống kê xác khả sống sinh vật Sự đếm vi sinh vật học cho biết “số lượng vi sinh vật khối lượng mẫu phương pháp MPN” Thể mật độ 89/g 95% tất mẫu(179) Bởi tính có chọn lọc nó, NaCl(10%) họp canh trypticsoy(TSBS) môt phương thức MPN Sau 48h TSBS, ống nghiệm phải đánh dấu B-P agar thêm 48h để cố(180) Sự thống kê tế bào S.aureus bị tổn thương TSBS cho thấy hạ xuống(163,180) Brewer công nhận thêm 1% pyruvate catalase gia tăng đáng kể thống kê tế 33 bào stress Bởi nhu cầu để thêm vào catalase sau hấp khử trùng, pyruvate cân nhắc Những khuẩn tụ cầu khác môi trường MPN kiểm tra(181,182) A Phương pháp dò tìm Số lượng cao Khi mẫu nghĩ chứa lớn 1000 S.aureus tế bào gram, môi trường đề nghị cho thống kê rộng B-P agar (183) Những mẫu cho chất pha loãng vô trùng 1.00 ml trải đĩa ba môi trường B-P agar; đĩa phải khô, lật ngược ủ 48h 35 oC.Những vùng S.aureus điển hình có màu đen đến xám đậm, mọc vòng quanh, trơn, lồi, ướt, thường có màu sáng rìa ,được bao xung quanh miền đục tủa,và thường có màu sáng vùng Những nhóm nhớt(184) Không may vùng thường không thấy rõ gây số tế bào S.aureus bị hỏng Số lượng thấp Phương pháp phân tích hóa học(AOAC)để nhận số lượng nhỏ S.aureus MPN mà dùng ống MPN chứa TSBS 1% sodium pyruvate(185) Trong nghiên cứu, phương pháp trình bày để diễn đạt gia tăng mức độ cao, trung bình thấp thống kê S.aureus từ làm nhiễm sản phẩm cách tự nhiên có độ chọn lọc cao Những ống MPN cấy từ độ pha loãng thích hợp ủ 37oC 48h Những ống xác nhận âm tính thành sọc B-P agar ủ 35oC- 37oC 48h Lancette cộng nhận thêm 1% pyruvate vào TSBS MPN cho thấy thống kê tốt làm nhiễm thực phẩm tự nhiên nhân tạo so với TSBS Họ nhận thêm pyruvate vào TSBS gia tăng khôi phục stress nhiệt staphylococci không stress Kết họ tương tự Brewer cộng sự(163), với catalase pyruvate đưa đến tăng cường khôi phục Để cố, ống MPN âm tính thường dùng để cấy truyền B-P agar, theo dõi thử nghiệm sinh hóa B Thử nghiệm củng cố 34 Những thử nghiệm củng cố cho S.aureus đồng nhất, âm tính bao gồm cocci gram âm, sản phẩm beta hemolysis thạch máu, thử nghiệm coagulase, thử nghiệm catalase(sản phẩm O2 phân hủy H2O2) sử dụng glucose mannitol kị khí sản phẩm nuclease chịu nhiệt Thử nghiệm thêm vào thường trình bày để xác định nhạy cảm đối tượng nghi ngờ cô lập vào enzyme lysostaphin Đặc biệt lysostaphin dung giải tế bào giống Staphylococus Hawcroft and Geary (186) tìm hạn chế chiều dài phân tích đa hình gen cho ribosomal RNA (“ribotyping”) công cụ hữu ích cho việc nhận staphylococal VII NGỘ ĐỘC THỰC PHẨM Một vài thức ăn cung cấp S.aureus nguồn dinh dưỡng môi trường phù hợp tiềm cho nguồn bệnh từ thực phẩm Ở Mỹ, thực phẩm thường gồm đùi nướng, thịt lợn, rau sống (thịt, khoai tây), bánh với kem thêm sữa trứng, sữa bột, whey Trong vài ví dụ, nguồn ô nhiễm S.aureu từ người cầm thức ăn mang đến tổn thương sản xuất nội độc tố S.aureus người mang đến triệu chứng Thiết bị xử lí thực phẩm bị ô nhiễm sữa từ bò bị viêm vú chứa staphylococal tiềm cho nguồn sinh vật Thường thì, S.aureus đưa vào thực phẩm kết trình ô nhiễm Sau thực phẩm không trữ nhiệt độ_điều cho phép S.aureus phát triển sản xuất độc tố Một ngoại lệ sau trình xử lí ô nhiễm xảy sản xuất xúc xích lên men tự nhiên Trong trường hợp này, S.aureus tăng trưởng đủ để sản xuất độc tố trước bị ức chế acid lactic, sản xuất suốt trình lên men Hầu hết triệu chứng thường có ngộ độc thực phẩm staphylococal buồn nôn, nôn, bụng co cứng, tiêu chảy Những triệu chứng khác nôn không tiêu chay, tiêu chảy không nôn Khi xảy trường hợp nghiêm trọng, thêm vào triệu chứng đau đầu, co thắt bắp, kiệt sức Thỉnh thoảng , sốt nhẹ có vài nạn nhân Cơ chế phản ứng SE không hiểu hoàn toàn, đòi hỏi phải nhiễm độc thẳng vào nội tạng bụng Sự công vài triệu chứng, tiêu biểu cho trúng độc thực phẩm, thường xảy 35 khoảng thời gian 1-6 sau tiêu thụ thứ ăn ô nhễm Thời gian trung bình cho công 2-3 giờ, triệu chứng phát triển sau Sự phát triển triệu chứng xác định nhạy cảm nạn nhân lượng chất đọc tiêu thụ Phải 1-3 ngày để phục hồi hoàn toàn tùy sức khỏe cá nhân; nhiên, vài triệu chứng nghiêm trọng phải khoảng thời gian dài để phục hồi Tỉ lệ tử vong ngộ độc thực phẩm staphylococal vô thấp có, thường số người già trẻ em VIII PHÂN LOẠI THỂ THỰC KHUẨN Trạng thái căng S.aureus thường nhận bacteriophage typing Thể thực khuẩn phát Swort Anh vào năm 1915; thể thực khuẩn có khả dung giải tế bào S.aureus Từ thời gian typing bacteriophage đưa vào loại S aureus Năm nhóm chia vào host-range đặc trưng, loại chứa nhiều loài thực khuẩn thể, khác tế bào S.aureus đến typing bacteriophage (bảng 10) Một giọt huyền phù chuẩn hóa phage (thường kiểm tra pha loãng RTD) diễn bề mặt thạch trước tiêm chủng nặng staphylococal để kiểm tra Mẫu vùng ly giải ghi lại sau ủ qua đêm 30 độ C Sử dụng phage typing công cụ quan trọng dịch tễ học sử dụng để xác định nguồn độc tố Những loại S.aureus tìm thấy phân hủy nhóm III thường liên quan đến bùng nổ bệnh thực phẩm Không phải tất môi trường nuôi cấy đặc trưng cho phương pháp này, mẫu nhạy cảm lưu thông thay đổi theo thời gian vị trí Bảng 10 Staphylococal Typing phage Group Phage group Group I Phage within group 29, 52, 52A, 79, 80 Group II 3A, 3B, 3C, 55, 71 36 Group III 6, 7, 42E, 47, 53, 54, 75, 77, 83A, 84, 85 Group IV 42D Miscellaneous 81, 94, 95, 96 IX TÓM TẮT S.aureus cầu khuẩn gam dương nguyên nhân nhiễm độc nghiêm trọng người dễ bị bệnh vi khuẩn gây bệnh dẫn đầu Một vài đặc tính quan trọng S.aureus gồm khả tồn phát triển giảm nước sản xuất khối lượng lớn nhiều độc tố enzyme ngoại bào Một số quan trọng gồm coagulase, nuclease ổn định nhiệt, penicillinase, hemolysins, hội chứng sốc độc tố, độc tố tụ cầu khuẩn ruột sản sinh suốt trình phát triển S.aureus thực phẩm, mg tụ cầu khuẩn nguyên nhân gây ngộ độc thực phẩm người Nội độc tố bền nhiệt sản sinh điều kiện phát triển đa dạng Chúng tìm cách sử dụng mô hình động vật hoặc phương pháp miễn dịch Những tế bào S.aures bị tổn thương nhẹ xử lý (nhiệt, đông lạnh, v.v.) tế bào trở nên nhạy cảm với thay đổi môi trường thấy tế bào chủ hiệu lực Sự giảm sản phẩm oxi độc tố chúng bao gồm thiếu chọn lọc môi trường để liệt kê tìm tế bào bị tổn thương Thạch Baird-Parker số sử dụng cho phương thức 10% NaCl 1% pyruvate đề nghị liệt kê cho ví dụ chứa số cao thấp Ngộ độc thực phẩm tụ cầu khuẩn nguyên nhân dẫn đầu bùng nổ dich bệnh giới Các triệu chứng bao gồm buồn nôn, nôn, tiêu chảy kiệt sức REFERENCES Sneath, P.A.,Mair, N.E., Sharpe, M.E., and Holt, J.G (1986) Section 12 gram-positive cocci Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, Vol 2, williams and Wilkins, Baltimore, MD, pp 999-1103 37 (1982) American Type Culture collection Catalogue of Strains I 15th ed., Rockville, MD Longree, K (1972) Quality Food Sanitation, Wiley-Science, New York Polledo, J.J.F., Garcia, M.L., Moreno B., and Menes, I (1985) Importance of food handler as a source of enterotoxigenic staphylococi Zbl Bakt., Abt Orig B., 181:364 Bergdoll, M.S (1989) Staphylococus aureus In Foodborne Bacterial Pathogens (M.P.Doyle, ed.), Marcel Dekker, Inc., New York,p 463 38 [...]... phẩm nào có môi trường thuận lợi và bị ô nhiễm với một loại enterotoxigenic của S .aureus là có khả năng gây ngộ độc thực phẩm do tụ cầu khuẩn Các yếu tố ảnh hưởng đến sự tăng trưởng và sản xuất của tụ cầu và độc tố ruột đã được xem xét và sẽ được đề cập vắn tắt ở đây Người đọc muốn tìm hiểu xa hơn nữa về sự phát triển của S .aureus và sản xuất của SEs điều đó vượt ra ngoài phạm vi của chương này Mức độ... PHÂN LOẠI THỂ THỰC KHUẨN Trạng thái căng của S .aureus thường được nhận ra bởi bacteriophage typing Thể thực khuẩn được phát hiện đầu tiên bởi Swort ở Anh vào năm 1915; thể thực khuẩn này có khả năng dung giải các tế bào của S .aureus Từ thời gian đó bộ typing bacteriophage đã được đưa vào loại của S aureus Năm nhóm được chia vào host-range đặc trưng, mỗi loại chứa nhiều loài thực khuẩn thể, khác nhau... rãi trong S .aureus Việc lựa chọn các phương pháp để phát hiện của S aureus phụ thuộc vào mục đích để thực hiện khảo nghiệm và sản xuất có liên quan Khi thức ăn bị nghi ngờ là nguồn gốc của sự bùng phát các loại thực phẩm ngộ độc tụ cầu, số lượng lớn của S, aureu thường xuyên hiện tại và nhạy cảm phương pháp không có thể được yêu cầu Phương pháp nhạy cảm hơn là để phát hiện số lượng nhỏ của S .aureus không... tra để xác định sự hiện diện của S aureus (130): 1 Để xác nhận sự hiện diện của S aureus sau một đợt bùng phát ngộ độc thực phẩm 2 Để xác định có hay không thực phẩm là một nguồn tiềm năng của ngộ độc thực phẩm do tụ cầu 3 Để chứng minh ô nhiễm xử lý sau 4 Là một phần của một chương trình kiểm soát chất lượng thường xuyên Nó đã được quan sát thấy rằng khi các tế bào tụ cầu ít nguy hiểm được nhấn mạnh... B-P agar thêm 48h để cũng cố(180) Sự thống kê những tế bào S .aureus bị tổn thương trong TSBS cho thấy sự hạ xuống(163,180) Brewer và công sự đã nhận ra rằng thêm 1% pyruvate hoặc catalase gia tăng đáng kể sự thống kê những tế 33 bào stress Bởi vì nhu cầu để thêm vào catalase sau khi hấp khử trùng, pyruvate được cân nhắc hơn Những khuẩn tụ cầu khác môi trường MPN đã được kiểm tra(181,182) A Phương pháp... phẩm bởi tụ cầu phải được xét nghiệm để tìm kiếm sự hiện diện của S .aureus còn hoạt tính và sự hiện diện của SE Điều này là vì khả năng chịu nhiệt của SE tốt hơn nếu so sánh với S .aureus, nó có thể là thực phẩm đóng vai trò là nguồn gốc của một dịch ngộ độc do thực phẩm nhiễm staphycococal nhưng không có sự hiện diện của sinh vật hữu hiệu Để xác nhận một đợt bùng phát nhiễm độc thực phẩm do tụ cậu,... chọn lọc phù hợp với điều tra của S aureus bình thường hoặc không có chủng âm Tuy nhiên, do bảo quản, chế biến, hoặc tác dụng phụ khác điều kiện, sự căng thẳng it nguy hiểm có thể xảy ra, kết quả là tăng nhạy cảm của S aureus cho các đại lý chọn lọc Bởi vì các tế bào bị thương tăng nhạy cảm cho các đại lý chọn lọc, S aureus có thể không bị phát hiện trong các thủ tục điều tra chọn lọc thông thường... bào nóng hoặc khô của S aureus có thể bị mất hoặc giảm hoạt động của nó bằng cách nung nóng hoặc sấy khô và máu, trong đó có catalase, bổ sung của pyruvate, ông PED trong điều tra bằng cách tiêu diệt H 2O2 sản xuất bởi các tế bào phục hồi của nó thấy rằng thạch Baird-Parker (BP) là đạt yêu cầu liệt kê các tế bào bị thương khi so sánh với các phương tiện truyền thông chọn lọc tụ cầu (169-171) Việc bổ... amino acid của PT thể hiện rằng: một vài đầu carboxyl và vùng trung tâm của trình tự sơ cấp được bảo tồn đồng đều trong họ PT Ví dụ, Họ có thể khám phá thêm bằng chứng về khu vực carboxyl của tụ cầu khuẩn và liên cầu độc tố gây sốt được dùng chung hoạt tính sinh học và nhiều phản ứng chéo epitopes Hầu hết công việc đã được thực hiện vào việc xác định thành phần acid amin, gen ent, những thuộc tính hóa... 2.0 Đây là khả năng chịu được sự tấn công của những sự thủy giải protein hỗ trợ khả năng của chúng vẫn hoạt động sau khi uống hoặc hoạt động duy trì thực phẩm trong nhiều năm 3) Sản xuất 14 Các tụ độc tố tụ cầu khuẩn được sản xuất trong nguồn giàu dinh dưỡng và các nơi truyền nguồn dinh dưỡng khó khăn Theo Smith và các cộng sự các yếu tố sau ảnh hưởng đến cả sự phát triển và sản xuất độc tố: kích cỡ ... enterotoxigenic S .aureus có khả gây ngộ độc thực phẩm tụ cầu khuẩn Các yếu tố ảnh hưởng đến tăng trưởng sản xuất tụ cầu độc tố ruột xem xét đề cập vắn tắt Người đọc muốn tìm hiểu xa phát triển S .aureus. .. penicillinase, hemolysins, hội chứng sốc độc tố, độc tố tụ cầu khuẩn ruột sản sinh suốt trình phát triển S .aureus thực phẩm, mg tụ cầu khuẩn nguyên nhân gây ngộ độc thực phẩm người Nội độc tố... 81, 94, 95, 96 IX TÓM TẮT S .aureus cầu khuẩn gam dương nguyên nhân nhiễm độc nghiêm trọng người dễ bị bệnh vi khuẩn gây bệnh dẫn đầu Một vài đặc tính quan trọng S .aureus gồm khả tồn phát triển