Báo cáo thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm

22 6.4K 40
Báo cáo thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Báo cáo thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM - - BÁO CÁO THÍ NGHIỆM VI SINH VẬT HỌC THỰC PHẨM GVHD: Đào Thiện SVTH: Nhóm TP Hồ Chí Minh, Tháng 9/2013 BÀI 1: HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG THIẾT BỊ, DỤNG CỤ PHÒNG THÍ NGHIỆM QUAN SÁT TIÊU BẢN VI SINH VẬT DƯỚI KÍNH HIỂN VI QUANG HỌC Mục tiêu: - Chuẩn bị trang thiết bị cần thiết phòng thí nghiệm vi sinh vật Vận dụng quy tắc an toàn phòng thí nghiệm vi sinh vật I – Cơ sở lý thuyết Các quy tắc an toàn phòng thí nghiệm vi sinh vật • Hiểu nguyên tắc, phương pháp làm việc với vi sinh vật • Thao tác an toàn đối tượng vi sinh vật mật độ cao • Không ăn uốn, hút thuốc phòng thí nghiệm vi sinh vật • Mặc áo blouse thời gian thực hành • Không dùng miệng hút ống hút ( pipette) để định lượng vi sinh vật hay hóa chất, mà phải dùng bóp cao su thao tác hút ống hút • Hộp Petri đổ môi trường sau nuôi cấy vi sinh vật, không mở nắp, dùng tay để sờ dùng mũi để ngửi • Khi lỡ tay làm đổ vi sinh vật nơi làm việc, dùng khăn hay giấy tẩm cồn 70 độ để lau lau lại khăn hay giấy tẩm cồn 70 độ khác • Khi sử dụng que cấy để gieo cấy vi sinh vật cần phải khử trùng cách đốt lửa đèn cồn tránh vươn vãi xung quanh • Trước sau thao tác vi sinh vật cần lau tay kỹ cồn 70 độ Khi thực thao tác cần phải tránh xa lửa đèn cồn tay ướt • Cần ghi tên chủng vi sinh vật ngày tháng thí nghiệm lên dụng cụ chứa môi trường nuôi cấy vi sinh vật • Tất chất thải môi trường chứa nhiễm vi sinh vật cần hấp khử trùng trước đem đổ vào thùng rác Các dụng cụ nhiễm vi sinh vật cần ngâm dung dịch sát khuẩn trước rửa • Không đổ thạch vào bồn rửa ống thoát nước Dụng cụ thiết bị thí nghiệm vi sinh vật II – Tiến hành thí nghiệm Làm nút - Sau nhận dụng cụ ta phải làm dụng cụ nước - Sau dùng thấm nước làm khô  Ngăn ngừa chất từ môi trường nuôi cấy vào miệng tránh nhiễm tạp từ miệng vào môi trường Bước 1: Dùng tay xé miếng lớp hình chữ nhật, gấp rìa miếng vào cho gọn không bị xù Bước 2: chặt lại thành nút cho vừa khít ống nghiệm (không chặt không lỏng) để:  Không làm nút chặt gây vỡ ống nghiệm  Không làm nút lỏng dễ bị nhiễm tạp Bao giấy dụng cụ Mục đích: Trước hấp khử trùng dụng cụ, vật liệu, cần phải tiến hành bao gói kỹ kỹ thuật để thuận tiện cho công việc khử trùng, tránh tượng nứt vỡ hay bị tạp nhiễm sau hấp Trong phòng thí nghiệm vi sinh vật, người ta thường giấy nhiều dụng cụ: ống nghiệm, đĩa Petri, bình tam giác,… Bao gói dụng cụ: Sau làm nút, dụng cụ phải bao gói quy cách để đem hấp Bước 1: Đối với ống nghiệm đựng môi trường có nút bông, cần dùng giấy bọc chặt phía đầu nút lại Bước 2: Chai lọ bọc chặt phần nút giấy Bước 3: Pipette gói phía đầu nhỏ giọt, cuộn giấy dần theo kiểu xoáy trôn ốc hết phía đầu có nút Bước 4: Các pipet gói từ tới vài Các đĩa Petri gói thành chồng, chồng từ 3-5 Các dụng cụ khác, tuỳ theo yêu cầu mà có bao gói cho thích hợp Nếu hấp nồi hấp áp lực không bao gói giấy thấm nước mà phải dùng loại giấy dai, không thấm nước Các dụng cụ bao gói phải thật khô, sạch, tránh vỡ hấp Dụng cụ bao gói xong phải dán nhãn, đề ngày đem hấp để tiện việc theo dõi, sử dụng Hấp tiệt trùng dụng cụ  NỒI HẤP (AUTOCLAVE) Nguyên lý: Phương pháp sử dụng nồi hấp áp lực dựa nguyên tắc làm gia nhiệt vật nước bão hoà áp suất lớn áp suất khí Khi áp suất tăng, nhiệt độ tăng theo Tác dụng phối hợp nhiệt độ cao áp suất đảm bảo cho việc khử trùng thực tốt Khi hấp, áp lực tiêu diệt tế bào sinh dưỡng lẫn bào tử vi sinh vật  CÁCH VẬN HÀNH NỒI HẤP CƠ: Bước 1: Kiểm tra mực nước khoảng an toàn Đổ nước vào nồi hấp với lượng thích hợp (đến vạch chuẩn ống thuỷ tinh đặt phễu rót nước) Nước phải đủ, không nên đổ sôi nước lọt vào ống dẫn đến áp kế làm sai lạc số áp Nếu đổ ít, hiệu khử trùng kém, gây cháy nồi Tốt nên dùng nước cất cho vào nồi hấp không tạo canxi Bước 2: Bật công tắc để gia nhiệt trước (10-15 phút) Bước 3: Đặt dụng cụ vào buồng hấp Các đồ dùng phải bao gói kỹ xếp vào nồi hấp Đồ nặng Không nên xếp dụng cụ sát để nước di chuyển dễ dàng Bước 4: Kiểm tra đóng valve xả valve an toàn Bước 5: Đậy nắp vặn ốc đối xứng đôi Bước 6: Khi đồng hồ áp lực 0.4-0.5 kg/cm xả khí lần đồng hồ áp lực 0.1 kg/cm2 hay thấy buồng khí xả xuất dòng khí trắng liên tục đống valve xả Bước 7: Chờ cho đồng hồ áp lực atm hay nhiệt độ 121 C tính canh 15 phút Bước 8: Khi đủ thời gian khử trùng, đợi áp suất nồi hạ dần tới vạch số 0, mở van thông xả hết khí Vặn ốc, mở nắp, lấy đồ dùng khử trùng III - Câu hỏi thảo luận Nêu kỹ thuật chỉnh kính hiển vi quan sát trạng thái sống trạng thái chết  Khi vi sinh vật trạng thái sống: • Lấy phiến kính cho giọt nước hay giọt phẩm màu methylene blue (0.1%) Sau cho vi sinh vật hòa tan giọt nước hay giọt màu loãng • Đậy kính cho chân kính chạm vào giọt nước hay giọt màu, nghiêng góc 16% thêm phụ gia khác…) 20 Bước 4: Duy trì nhiệt độ canh trường 40-45oC Bước 5: Sau khuấy men vào sữa, xác định pH điểm đầu,rót dịch sữa vào hũ nhựa Bước 6: Ủ 40oC – Bước 7: Sau 6h lên men, xác định pH điểm cuối Bảo quản sữa chua tủ lạnh 2-4oC III – Câu hỏi ôn tập Mục tiêu việc đo hàm lượng chất khô dịch sữa nguyên liệu? Vật chất khô chủ yếu bao gồm mỡ sữa, protein, đường lactose, khoáng vitamin Sữa có lượng vật chất khô cao có giá trị dinh dưỡng cao Vật chất khô sữa thấp nghĩa sữa có giá trị dinh dưỡng thấp Nếu vật chất khô thấp, điều có nghĩa sữa bị pha thêm nước Vì thế, ta phải xác định hàm lượng chất sữa nhằm: - Đáp ứng yêu cầu theo đối tượng tiêu dung Đảm bảo chất lượng đề Thanh tra kiểm tra yêu cầu kiểm nghiệm Mặt khác, riêng trình lên men sữa chua, việc đo hàm lượng chất khô dịch sữa nguyên liệu làm tránh tượng tách lớp lên men Tại phải ủ dịch lên men 40-43oC? Nhiệt độ lên men tối ưu với sữa chua 42-43oC Ở nhiệt độ này, thích hợp cho vi khuẩn lactic dễ dang hoạt động ,các vi khuẩn lactic phân chia nhân lên nhanh, lên men tạo axit lactic làm cho sữa chua lên, protein sữa (gọi cazein) kết tủa làm sữa chuyển sang trang thái đặc, trình lên men xảy nhanh chóng va dễ dàng Nếu thay đổi nhiệt độ lên men chất lượng sản phẩm có thay đổi không thông số thay đổi theo? 21 Nhiệt độ lên men không ổn định làm thay đổi tỷ lệ chủng vi sinh vật  ảnh hưởng tới chất lượng sản phẩm Nhiệt độ lên men phụ thuộc vào tỷ lệ chủng Trong phạm vi nhiệt độ thấp, nhiệt độ tang lên tăng tốc độ sinh trưởng vi sinh vật phản ứng tế bào tăng toàn hoạt động trao đổi chất tăng lên nhiệt độ cao hơn, vi sinh vật tăng trưởng nhanh Lúc nhiệt độ tăng đến lúc định nhiệt độ tăng, tốc độ sinh trưởng giảm Khi nhiệt độ tăng cao, vi sinh vật chết gây biến tính enzyme oo 22 [...].. .Vi sinh vật tồn tại trong tự nhiên ở dạng quần xã gồm nhiều quần thể các loài vi sinh vật Vi c phân lập loài nhất định trong quần xã vi sinh vật dựa vào khả năng phân tách các tế bào ra thành riêng lẻ trên môi trường chọn lọc Hầu hết các phương pháp phân lập và thuần chủng vi sinh vật đều dựa trên một số kỹ thuật pha loãng để phân tách tế bào vi sinh vật kết hợp điều kiện nuôi... trang gạt đều giọt vi sinh vật trên bề mặt thạch Dùng que trang gạt xoay đều trên bề mặt thạch Trong khi gạt, xoay đĩa Petri tới lui 3 – 4 lần, mỗi lần ½ chu vi cho vi sinh vật được trải đều khắp trên bề mặt môi trường 15 Bước 4: Rút que trang ra khỏi đĩa, đậy đĩa, gói giấy và ủ ở nhiệt độ và thời gian thích hợp theo từng đối tượng vi sinh vật mục tiêu BÀI 5: LÊN MEN ETHANOL Mục tiêu: - Thực hiện quá trình... Cất vào tủ ấm với nhiệt độ và thời gian thích hợp tùy loài vi sinh vật 3 Trình bày phương pháp phân lập vi sinh vật bằng kỹ thuật cấy ria và kỹ thuật pha loãng kết hợp với cấy trải?  Kỹ thuật cấy ria trên đĩa petri:  Dùng que cấy vòng thao tác vô trùng nhúng vào dịch mẫu để có được vi sinh vật cần phân lập  Ria các đường trên đĩa petri chứa môi trường thạch thích hợp sau mỗi đường ria liên tục, đốt... dịch giống lên bề mặt thạch Trong khi trải, thực hiện xoay đĩa 1 vài lần, mỗi lần khoảng ½ chi vi đĩa tạo điều kiện cho thanh gạt trải dịch giống đều khắp bề mặt môi trường  Rút thanh gạt khỏi đĩa, gói và ủ ở nhiệt độ và thời gian thích hợp trong tủ ấm oo 14 BÀI 4: KỸ THUẬT PHÂN TÍCH VI SINH VẬT Mục tiêu: - Thực hiện được thí nghiệm lấy mẫu phân tích Thực hiện được kỹ thuật hộp trải và hộp đổ I... 3 Nếu thay đổi nhiệt độ lên men thì chất lượng sản phẩm có thay đổi không và thông số nào sẽ thay đổi theo? 21 Nhiệt độ lên men không ổn định sẽ làm thay đổi tỷ lệ chủng vi sinh vật  ảnh hưởng tới chất lượng sản phẩm Nhiệt độ lên men phụ thuộc vào tỷ lệ chủng Trong phạm vi nhiệt độ thấp, khi nhiệt độ tang lên sẽ tăng tốc độ sinh trưởng của vi sinh vật vì các phản ứng trong tế bào đều tăng cho nên toàn... ethanol là một loại sản phẩm lên men đường phổ biến của nhiều nhóm vi sinh vật Song tác nhân lên men chủ yếu là nấm men, đặc biệt là loài Saccharomyces cervisiae Nhiều loài vi khuẩn kỵ khí và hiếu khí tùy tiện cũng có khả năng tạo thành rượu như là một sản phẩm chủ yếu hay một sản phẩm phụ của quá trình lên men hexose và pentose Quá trình lên men ethanol nhờ nấm men là cơ sở của vi c sản xuất các loại... trong điều kiện kỵ khí, vi sinh vật chuyển hydro từ NADH đến acetaldehyde tạo thành rượu ethanol để tái tạo NAD + Sản phẩm tạo thành là ethanol và CO2 sẽ làm tăng thể tích vật chứa cơ chất, ta phải để trống thể tích nhằm tránh làm biến dạng vật chứa cơ chất 2 Ngoài phương pháp cảm quan, người ta còn dung phương pháp hóa học để định tính ethanol Nêu phương pháp đó Phương pháp hóa học: xác định ethanol... – Tiến hành thí nghiệm Phân lập vi sinh vật – Kỹ thuật cấy ria trên đĩa thạch Sử dụng các đĩa petri đã được chuẩn bị từ bài 2: petri chứa môi trường cao thịt- pepton và Czapek-Dox hoặc DRBC đã hấp khử trùng Các petri chứa môi trường Czapek –Dox dùng để phân lập vi khuẩn các petri chứa môi trường Czapek-Dox hoặc DRBC dùng để phân lập nấm men hay nấm mốc Bước 1: Làm lỏng môi trường bằng lo vi sóng Lắc... LÊN MEN LACTIC Mục tiêu: - Thực hiện quá trình lên men lactic Nhận biết dấu hiệu lên men lactic I – Cơ sở lý thuyết Cacbohydrat là nhóm các hợp chất không chứa N, chúng là nguồn cung cấp năng lượng chủ yếu cho đa phần các loại vi sinh vật Cacbohydrat trong tự nhiên thường tồn tại dưới dạng đường đơn , đường đôi, oligo hay đường đa có phân tử lượng lớn không phải mọi vi sinh vật đều có thể sử dụng được... vi sinh vật chuyển hydro từ NADH đến acetaldehyde tạo thành rượu ethanol để tái tạo NAD + Sản phẩm tạo thành là ethanol và CO2 Phương trình phản ứng: NADH 16 NAD+ C6H12O6 CH3COCOOH CH3CHO C2H5OH + CO2 + 113,4 Kj 2 Quy trình lên men cơm rượu Nếp trắng Nếp lức (Ngâm 30-60 phút) Vo gạo Vo gạo Nấu Để nguội (35-40oC) Phối trộn Nghiền mịn Men ngọt Ủ (30oC, 3-4 ngày) Sản phẩm cơm rượu II – Tiến hành thí nghiệm ... lý thuyết Kỹ thuật gieo cấy vi sinh vật Mục đích vi c gieo cấy vi sinh vật để nhân giống vi sinh vật; phát có mặt vi sinh vật mẫu (thực phẩm, bệnh phẩm, dược phẩm, mỹ phẩm, nước, đất ) cần phân... PHÒNG THÍ NGHIỆM QUAN SÁT TIÊU BẢN VI SINH VẬT DƯỚI KÍNH HIỂN VI QUANG HỌC Mục tiêu: - Chuẩn bị trang thiết bị cần thiết phòng thí nghiệm vi sinh vật Vận dụng quy tắc an toàn phòng thí nghiệm vi sinh. .. cho vi sinh không khí xâm nhập vào làm hỏng môi trường oo BÀI 3: KỸ THUẬT GIEO CẤY VÀ PHÂN LẬP VI SINH VẬT Mục tiêu: - Thực kỹ thuật gieo cấy vi sinh vật Thực kỹ thuật phân lập vi sinh vật

Ngày đăng: 24/02/2016, 11:12

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan