khảo sát khả năng kháng oxy hóa của cao phân đoạn thân ô rô (acanthus ilicifolius l ) in vitro

50 462 1
khảo sát khả năng kháng oxy hóa của cao phân đoạn thân ô rô (acanthus ilicifolius l ) in vitro

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MÔN SINH HỌC - - DƢƠNG THỊ NGỌC MAI KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO PHÂN ĐOẠN THÂN Ô RÔ (Acanthus ilicifolius L.) IN VITRO LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH: SINH HỌC 2015 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MÔN SINH HỌC - - DƢƠNG THỊ NGỌC MAI KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO PHÂN ĐOẠN THÂN Ô RÔ (Acanthus ilicifolius L.) IN VITRO LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH: SINH HỌC CÁN BỘ HƢỚNG DẪN TS ĐÁI THỊ XUÂN TRANG 2015 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 LỜI CẢM ƠN  Để hoàn thành đƣợc luận văn nổ lực phấn đấu thân việc học tập, tìm tòi nghiên cứu không khó khăn Nhờ có giúp đỡ, động viên quý thầy cô, cha mẹ, gia đình, bạn bè nguồn động viên to lớn, tạo nên động lực để hoàn thành tốt luận văn Với lòng trân trọng biết ơn sâu sắc, em xin gởi lời cám ơn sâu sắc đến: Cô TS Đái Thị Xuân Trang tận tình hƣớng dẫn, truyền đạt kiến thức vô quý báu, tạo điều kiện thuận lợi động viên giúp đỡ em suốt trình làm luận văn Cô Ngô Thị Kim Thoa, cô Lý Thị Thanh Thủy, thầy TS Nguyễn Trọng Tuân tạo điều kiện cho em đƣợc sử dụng thiết bị dụng cụ phòng thí nghiệm để thực luận văn Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy cô Bộ môn Sinh Học, Bộ môn Hóa Học - Khoa Khoa Học Tự Nhiên, Bộ môn Khoa Học Đất – Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng Bên cạnh đó, em xin gửi lời cám ơn đến anh Quách Hải Đăng Khôi, lớp Sinh học K36 tận tình bảo, truyền đạt kinh nghiệm giúp đỡ trình làm luận văn Cuối cùng, xin gửi lời cám ơn sâu sắc đến cha mẹ, gia đình tập thể lớp Sinh học K37 bên cạnh, động viên tinh thần tạo điều liện cho suốt trình học tập nghiên cứu Xin trân trọng cám ơn Cần Thơ, tháng 04 năm 2014 DƢƠNG THỊ NGỌC MAI i Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 LỜI CAM KẾT Em xin cam đoan công trình nghiên cứu thân cô hƣớng dẫn Các số liệu, kết trình bày luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố luận văn trƣớc Cán hƣớng dẫn Tác giả luận văn Ký tên Ký tên Đái Thị Xuân Trang Dƣơng Thị Ngọc Mai ii Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 PHẦN KÝ DUYỆT Cán hƣớng dẫn Tác giả luận văn Ký tên Ký tên Đái Thị Xuân Trang Dƣơng Thị Ngọc Mai DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG iii Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 MỤC LỤC TÓM TẮT ix CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu 1.3 Nội dung nghiên cứu CHƢƠNG 2.1 Đại cƣơng Ô Rô (Acanthus ilicifolius L.) 2.1.1 Khóa phân loại 2.1.2 Nguồn gốc 2.1.3 Đặc điểm phân loại 2.1.4 Đặc điểm Ô Rô nƣớc 2.1.5 Thành phần hóa học công dụng 2.2 Một số nghiên cứu Ô Rô (Acanthus ilicifolius L.) 2.2.1 Nghiên cứu nƣớc 2.2.2 Nghiên cứu nƣớc 2.3 Sơ lƣợc chất kháng oxy hóa 2.3.1 Stress oxy hóa 2.3.2 Chất kháng oxy hóa 2.3.3 Hoạt động chất kháng oxy hóa 2.4 Đại cƣơng bệnh liên quan đến stress oxy hóa 2.4.1 Bệnh cao huyết áp 2.4.2 Bệnh đái tháo đƣờng 2.4.3 Bệnh ung thƣ CHƢƠNG PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 3.1 Thời gian, địa điểm, phƣơng tiện 11 3.1.1 Thời gian 11 3.1.2 Địa điểm 11 3.1.3 Phƣơng tiện 11 iv Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 3.1.3.1 Đối tƣợng 11 3.1.3.2 Hóa chất 11 3.1.4 Dụng cụ thiết bị 11 3.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 12 3.2.1 Phƣơng pháp tách phân đoạn cao từ cao tổng 12 3.2.2 Khảo sát khả kháng oxy hóa tổng số (Total Antioxidant Status (TAS) assay) in vitro cao tách phân đoạn 14 3.2.3 IC50 (Inhibition concentration of 50%, khả loại bỏ 50% gốc tự do) 14 3.2.3.1 Định nghĩa 14 3.2.4 Thống kê phân tích số liệu 14 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 15 4.1 Khảo sát khả kháng oxy hóa tổng số (Total Antioxidant Status (TAS) assay) in vitro 15 4.2 Khả kháng oxy hóa tổng số cao hexan thân Ô Rô nƣớc 16 4.3 Khả kháng oxy hóa tổng số cao chloroform thân Ô Rô nƣớc 18 4.4 Khả kháng oxy hóa tổng số cao ethyl acetate thân Ô Rô nƣớc 18 4.5 So sánh hiệu kháng oxy hóa lại cao phân đoạn dựa vào giá trị IC50 22 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 23 5.1 Kết luận 23 5.2 Kiến nghị 23 PHỤ LỤC 29 PHỤ LỤC 33 v Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 DANH SÁCH BẢNG Bảng 4.1 Khả kháng oxy hóa tổng số cao phân đoạn hexan thân Ô Rô 16 Bảng 4.2 Khả kháng oxy hóa tổng số cao phân đoạn chloroform thân Ô Rô .18 Bảng 4.2 Khả kháng oxy hóa tổng số cao phân đoạn ethyl acetate thân Ô Rô 20 Bảng 4.4 Phƣơng trình hồi quy giá trị IC50 cao phân đoạn thân Ô Rô22 vi Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 DANH SÁCH HÌNH Hình 3.1 Quá trình tách phân đoạn cao thứ từ cao tổng 13 Hình 4.1 Đƣờng chuẩn khả kháng oxy hóa tổng số in vitro vitamin C 15 Hình 4.2 Hiệu suất loại bỏ gốc tự cao phân đoạn hexan thân Ô Rô 17 Hình 4.3 Hiệu suất loại bỏ gốc tự cao phân đoạn chloroform thân Ô Rô 19 Hình 4.4 Hiệu suất loại bỏ gốc tự cao phân đoạn ethyl acetate thân Ô Rô nƣớc .21 vii Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT OD Mật độ quang phổ ROS Reactive oxygen dismutase TAS Total Antioxidant Status TBA Acid thiobarbituric TBA-RS Thiobarbituric acid reactive substances IC50 Inhibition concentration of 50% viii Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 NADPH oxidase and superoxide dismutase in stroke-prone SHR Hypertension, 38: 66-611 Chinnavenkataraman Govindasamy, mani Arulpriya, 2008 Antimicrobial activity of Acanthus ilicifolius: Skin infection pathogens Asian Pacific Journal of Tropical Disease, 3(3): 180-183 Deshmukh, S.R., 2009 Antioxidant activity of Morinda citrifolia cultures: Prevention for major diseases Awishkar SGB Amravati University Journal, 1: 6-9 Graham, J.G., Quinn, M.L., Fabricant, D.S., Farnsworth, N.R., 2000 Plants used against cancer Journal Ethnopharmacol, 73: 347-377 Halliwell and Barry, 2007 Oxydative stress and cancer: have we moved forward? Biochemistry Journal,401 (1):p.1-11 Huo, C., Liang, H., G., Zhao, Y., Lin, W.A., 2008 New 5, 11epoxymegastigmane glucoside from Acanthus ilicifolius Natural Product Research, 22: 896-900 Jemal, A., Murray, T., Ward, E., Samuels, A., Tiwari, R C., Ghafoor, A., Feuer, E J., Thun, M J., 2005 Cancer Statistics CA-Cancer Journal for clinicians, 55: 10-30 Jia, N., Xiong, Y L., Kong, B., Liu, Q., Xia, X., 2012 Radical scavenging activity of black currant (Ribes nigrum L.) extract and its inhibitory effect on gastric cancer cell proliferation via induction of apoptosis Journal of Functional Foods Doi: 10.1016/j.jff.2012.01.009 Kanchanapoom, T., Kamel, M.s., Kasai, R., Yamasaki, K., Picheansoonthon, C., Hiraga, Y., 2001 Lignan glucosides from Acanthus ilicifolius Phytochemistry, 56:369-72 Kanchanapoom, T., Kasai, R., Yamasaki, K., 2002 Flavonoid Glycosides from Acanthus ilicifolius L Nature Medicine, 56:122 Kennedey, G., Vance, A., Spence, Margaret M., Aleander H., Christine U., and Jill, J F., Belch, 2005 Oxidative stress levels are raised in chronic fatigue syndrome and are associated with clinical symptoms Free radical biology & medicine, 39 (5): 584-579 Kiem, P.V., Quang T H., Huong, T T., Nhung, L.T H., Cuong, N X., Minh, C V., Choi, E M., Kim, Y H., 2008 Chemical Constituents of Acanthus ilicifolius L and Effect on Ostaoblastic MC3T3E1 Cells Archives of pharmacal research, 31: 823-829 Mates, J.M., Perez-Gomez C., and Castro, I.N.D., 1999 Antioxidant enzymes and human diseases, 32: 395-603 Muhamad, F., Asep, A.P., Raahmi, N., 2012 Antioidant and cytotoic activity of Acanthus ilicifolius flower Asian Pacific Journal of tropical Biomedicine, 3(1): 17-21 25 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 Murugan, R S., Priyadarsini, R V., Ramalingam, K., Hara, Y., Karunagaran, D., Nagini, S., 2010 Intrinsic apoptosis and NF-jB signaling are potential molecular targets for chemoprevention by black tea polyphenols in HepG2 cells in vitro and in a rat hepatocarcinogenesis model in vivo Food and Chemical Toxicology, 48: 3281-3287 Nagao, T., Otsuka, H., Sato, T., Yamasaki, K., 2005 Benzoxazinones from Acanthus ilicifolius Biochemical Systematics and Ecology, 33:643-645 Nirmala, P., Ramanathan, M., 2011 Effect of kaempferol on lipid peroxidation and antioxidant stutus in 1,2-dimethyl hydrazine induced colorectal carcinoma in rats European Journal of Pharmacology, 654: 7579 Pal, R., Girhepunje, K., Shrivastav, N., Hussain, M M., and Thirumoorthy, 2011 Antioxidant and free radical scavenging activity of ethanolic extract of Morinda citrifolia Annals of Biological Research, (1): 127-131 Prakash, A., Rigelhof, F., and Miller, E., 2000 Antioxidant activity Analytical progress Meedallion laboratories, 1-4 Proctor P H (1989) Free radicals and human disease CRC handbook of free radicals and antioxydants,1: 209-221 Rodrigo, R., Passalacqua, W., Araya, J., Orellana, M., Rivera, G., 2003 Implications of oxidative stress and homocysteine in the pathophysiology of essential hypertension The Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutision, 42: 1206-52 Rolland Y.,2004 Natural plant’s antioxydants OCL, 11(6): 419-424 Sies and Helmut, 1997 Oxidative stress: Oxidants and antioxidants Experimental physiology, 82 (2): 291 Singh, A., Sanjiv, D and Ashish, S., 2009 Acanthus ilicifolius Linn.-Lesser Known Medicinal Plants with Significant Pharmacological Activities Ethnobotanical Leaflets, 13: 431-436 Singh, D., Vidhu, A., 2011 Phytochemical and pharmacological potential of Acanthus ilicifolius Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences, 5(1): 1720 Singh, N., Dhalla, A.K., Seneviratne, C., P.K., 1995 “Oxydative stress and heart failuve” Molecular and Cellular Biochemistry, 147 (1): 77-81 Suganuma, M., Saha, A., Fujiki, H., 2011 New cancer treatment strategy using combination of green tea catechins and anticancer drugs Cancer Science, 102: 317-323 Thirunavukkarasu, P., Ramanathan, T and Ramkuma, L., 2011 Hemolytic and anti microbial effect in the leaves Acanthus ilicifolius Journal of Pharmacology and Toicology, 6(2):196-200 26 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 Thirunavukkarasu, P., Ramanathan, T., Shangmugapriya, R., Mamaheswari, G U and Renugadevi, G., 2008 Antioxidant and free Radical scavenging Effect of Acanthus ilicifolius Research Journal of Applied sciences, 6(3): 218-222 Tripathi, U.N., and Chandra, 2009 The plant estracts of Momordica charantia and Trigonella foenumm graecum have antioxidant and antihyperglycemic prooerties for cardiac tissue during diabetes mellitus Oxydative Medicine and cellular longevity 2: 290-296 Valko, M., Leibfritz, D., Moncol, J., Cronin, MTD., Mazur, M., Telser, J., 2007 Free radicals and antioxydants in normal physiological functions and human disease International Journal of Biochemistry&Cell Biology 39(1): 44-84 Wang, S., Meckling, K A., Marcone, M.F., Kakuda, Y., Tsao, R., 2011 Can phytochemical antioxidant rich foods act as anti-cancer agents? Food Research International, 44: 2545-2554 Wostmann, R., Liebezeit, G., 2008 Chemical composition of the mangrove holly Ancanthus ilicifolius (Acanthaceae) Senckenbergiana, 38: 31-37 Wu, J., Zhang, S., Xiao, Q., Li, Q., Huang, J., Long, L., Huang, L., 2003 Phenylethanoid and aliphatic alcohol glycosides from Acanthus ilicifolius Phytochemistry, 63: 491-495 Zhang, W., Li, Q., Huang, J., Xiao, Z., Long, L., 2004 Two New Cyclolignan Glycosides from Acanthus ilicifolius Zeitschrift fur Naturforschung, 59b: 341-344 Zimmet, P., Albertit, K.G M M And Shaw, J., 2001 Global and societal implication of the diabetes epidemic Insight Review Article, 6: 782-787 Zin, Z.M., Abdul-Hamid, A., and Osman A., 2002 Antioxidative activity of extracts from Mengkudu Morinda citrifolia L root Fruit and leaf Food Chemistry, 78: 227-231 27 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 PHỤ LỤC Bảng Đƣờng chuẩn TAS tính theo mg/ml Vitamin C Nồng độ Vitamin C (mg/ml) Giá trị OD 1,1280a ± 0,0226 20 0,9380b ± 0,0245 40 0,8340c ± 0,0274 60 0,7720d ± 0,0181 80 0,6783e ± 0,0211 100 0,5720f ± 0,0265 120 0,5037g ± 0,0074 140 0,4010h ± 0,0060 160 0,3403i ± 0,0222 180 0,3087i ± 0,0142 200 0,2107j ± 0,0074 Ghi chú: kí tự theo sau giá trị cột khác khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 5% 28 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 PHỤ LỤC Đƣờng chuẩn TAS tính theo mg/ml Vitamin C Nồng độ mg/ml 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 OD1 OD2 OD3 TBOD 1,080 1,126 1,253 1,153 1,124 1,011 1,231 1,122 1,149 1,073 1,105 1,109 0,919 0,988 0,979 0,962 0,899 0,907 0,933 0,913 0,895 0,934 0,988 0,939 0,886 0,775 0,778 0,813 0,862 0,795 0,815 0,824 0,902 0,890 0,803 0,865 0,798 0,763 0,806 0,789 0,737 0,748 0,774 0,753 0,729 0,695 0,898 0,774 0,621 0,626 0,715 0,654 0,635 0,756 0,685 0,692 0,643 0,662 0,762 0,689 0,611 0,522 0,502 0,545 0,629 0,568 0,597 0,598 0,596 0,521 0,602 0,573 0,498 0,496 0,509 0,501 0,514 0,469 0,553 0,512 0,471 0,461 0,562 0,498 0,419 0,372 0,412 0,401 0,394 0,381 0,446 0,407 0,358 0,393 0,434 0,395 0,387 0,327 0,348 0,354 0,382 0,305 0,408 0,365 0,365 0,332 0,269 0,322 0,358 0,312 0,233 0,301 0,347 0,320 0,248 0,305 0,302 0,317 0,281 0,300 0,284 0,195 0,145 0,208 0,291 0,234 0,204 0,219 0,293 0,198 0,124 0,205 29 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 Giá trị OD cao phân đoạn hexan Nồng độ mg/ml 0,5 1,5 2,5 OD1 OD2 OD3 TBOD 1,080 1,126 1,253 1,153 1,124 1,011 1,231 1,122 1,149 1,073 1,105 1,109 0,939 0,957 0,963 0,953 0,916 0,859 0,949 0,908 0,896 0,938 0,938 0,924 0,853 0,819 0,728 0,800 0,793 0,785 0,729 0,769 0,848 0,829 0,852 0,843 0,637 0,668 0,651 0,652 0,738 0,704 0,700 0,714 0,696 0,733 0,641 0,690 0,523 0,542 0,504 0,523 0,518 0,524 0,623 0,555 0,527 0,562 0,582 0,557 0,475 0,456 0,509 0,480 0,455 0,477 0,496 0,476 0,407 0,562 0,468 0,479 0,466 0,455 0,423 0,448 0,456 0,423 0,402 0,427 0,407 0,426 0,364 0,399 0,326 0,392 0,317 0,345 0,316 0,322 0,307 0,315 0,306 0,338 0,331 0,325 0,329 0,298 0,306 0,311 0,285 0,300 0,287 0,290 0,311 0,310 0,282 0,301 0,280 0,293 0,219 0,264 0,276 0,213 0,177 0,222 0,254 0,363 0,223 0,280 0,219 0,265 0,212 0,232 0,243 0,195 0,207 0,215 0,279 0,218 0,268 0,255 0,207 0,183 0,201 0,197 30 Luận văn tốt nghiệp Đại học 10 Sinh học k37 0,187 0,203 0,192 0,194 0,184 0,208 0,187 0,193 Giá trị OD cao phân đoạn chloroform Nồng độ mg/ml 0,05 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 OD1 OD2 OD3 TBOD 1,080 1,126 1,253 1,153 1,124 1,011 1,231 1,122 1,149 1,073 1,105 1,109 0,969 0,936 0,945 0,950 0,966 0,920 0,985 0,957 0,975 0,993 0,981 0,983 0,845 0,815 0,869 0,843 0,858 0,814 0,830 0,834 0,807 0,800 0,853 0,820 0,778 0,803 0,732 0,771 0,738 0,806 0,754 0,766 0,712 0,729 0,689 0,710 0,698 0,611 0,617 0,642 0,596 0,604 0,645 0,615 0,632 0,607 0,615 0,618 0,529 0,515 0,507 0,517 0,478 0,512 0,525 0,505 0,522 0,501 0,543 0,522 0,427 0,447 0,527 0,477 0,464 0,479 0,494 0,479 0,522 0,501 0,405 0,427 0,306 0,370 0,392 0,477 0,370 0,363 0,395 0,479 0,397 0,328 0,316 0,427 0,297 0,332 0,310 0,356 0,295 0,292 0,343 0,376 0,309 0,303 0,297 0,347 0,218 0,293 0,278 0,263 0,235 0,272 0,297 0,268 0,257 0,263 0,218 0,246 0,232 0,222 0,224 0,226 0,231 0,217 0,200 0,216 31 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 0,210 0,193 0,212 0,205 0,295 0,216 0,215 0,242 0,183 0,208 0,218 0,203 0,209 0,167 0,227 0,201 Giá trị OD cao phân đoạn ethyl acetate Nồng độ mg/ml 0,05 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 1,5 OD1 OD2 OD3 TBOD 1,080 1,126 1,253 1,153 1,124 1,011 1,231 1,122 1,149 1,073 1,105 1,109 0,946 0,935 1,035 0,972 0,959 0,937 1,038 0,978 0,908 0,911 0,956 0,925 0,835 0,789 0,875 0,833 0,900 0,873 0,897 0,890 0,897 0,743 0,817 0,819 0,787 0,760 0,739 0,762 0,741 0,767 0,709 0,739 0,781 0,737 0,735 0,751 0,550 0,513 0,497 0,520 0,526 0,500 0,564 0,530 0,509 0,488 0,578 0,525 0,433 0,389 0,405 0,409 0,505 0,497 0,501 0,501 0,482 0,506 0,398 0,462 0,360 0,312 0,330 0,334 0,373 0,329 0,318 0,340 0,308 0,330 0,307 0,315 0,268 0,203 0,183 0,280 0,214 0,225 0,209 0,216 0,241 0,252 0,260 0,251 0,218 0,198 0,202 0,206 0,208 0,215 0,189 0,202 0,213 0,205 0,227 0,215 0,176 0,220 0,162 0,186 0,193 0,209 0,183 0,195 32 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 PHỤ LỤC Khảo sát khả kháng oxy hóa tổng số (TAS assay) in vitro Anova đường chuẩn TAS theo mg/ml Vitamin C Source NĐ VTC Error Total DF 10 22 32 SS 2.510640 0.007980 2.518620 S = 0.01905 Level 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 N 3 3 3 3 3 MS 0.251064 0.000363 R-Sq = 99.68% Mean 1.1280 0.9380 0.8340 0.7720 0.6783 0.5720 0.5037 0.4010 0.3470 0.3020 0.2107 StDev 0.0226 0.0245 0.0274 0.0181 0.0211 0.0265 0.0074 0.0060 0.0223 0.0026 0.0074 F 692.16 P 0.000 R-Sq(adj) = 99.54% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ (*) (* (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) *) + -+ -+ -+ 0.25 0.50 0.75 1.00 Pooled StDev = 0.0190 Grouping Information Using Fisher Method NĐ VTC 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 N 3 3 3 3 3 Mean 1.12800 0.93800 0.83400 0.77200 0.67833 0.57200 0.50367 0.40100 0.34700 0.30200 0.21067 Grouping A B C D E F G H I J K Anova cao hexan thân Ô Rô nước Source DF SS MS NĐ cao Hexan 11 2.995082 0.272280 Error 24 0.012157 0.000507 Total 35 3.007239 S = 0.02251 Level 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 N 3 3 3 R-Sq = 99.60% Mean 1.1280 0.9283 0.8040 0.6853 0.5450 0.4783 StDev 0.0226 0.0228 0.0372 0.0313 0.0191 0.0021 F 537.51 P 0.000 R-Sq(adj) = 99.41% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(*) (*) (*) (*) (*) (*) 33 Luận văn tốt nghiệp Đại học 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.0 3 3 3 0.4247 0.3283 0.3007 0.2547 0.2340 0.1947 0.0246 0.0153 0.0105 0.0311 0.0201 0.0021 Sinh học k37 (*) (*) (*) (*) (*) (*) -+ -+ -+ -+ -0.25 0.50 0.75 1.00 Pooled StDev = 0.0225 Grouping Information Using Fisher Method NĐ cao Hexan 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.0 N Mean Grouping 1.12800 A 0.92833 B 0.80400 C 0.68533 D 0.54500 E 0.47833 F 0.42467 G 0.32833 H 0.30067 H 0.25467 I 0.23400 I 0.19467 J 3 3 3 3 3 3 Anova cao chloroform thân Ô Rô nước Source DF SS MS NĐ cao chlo 3.099164 0.344352 Error 20 0.011431 0.000572 Total 29 3.110595 S = 0.02391 Level 0.00 0.05 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 1.00 1.50 2.00 N 3 3 3 3 3 R-Sq = 99.63% Mean 1.1280 0.9583 0.8473 0.7507 0.5250 0.4573 0.3297 0.2283 0.2077 0.1940 StDev 0.0226 0.0290 0.0376 0.0115 0.0050 0.0462 0.0131 0.0197 0.0067 0.0075 F 602.50 R-Sq(adj) = 99.47% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) -+ -+ -+ -+ -0.25 0.50 0.75 1.00 Pooled StDev = 0.0239 Grouping Information Using Fisher Method NĐ cao chlo 0.00 0.05 0.10 0.20 0.30 0.40 N 3 3 3 P 0.000 Mean Grouping 1.12800 A 0.95833 B 0.84733 C 0.75067 D 0.52500 E 0.45733 F 34 Luận văn tốt nghiệp Đại học 0.50 1.00 1.50 2.00 3 3 0.32967 0.22833 0.20767 0.19400 Sinh học k37 G H H H Anova cao ethyl acetate thân Ô Rô nước Source DF SS MS Cao Ethyl 11 3.181572 0.289234 Error 24 0.015125 0.000630 Total 35 3.196697 S = 0.02510 Level 0.00 0.05 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 N 3 3 3 3 3 3 R-Sq = 99.53% Mean 1.1280 0.9633 0.8323 0.7490 0.6250 0.5147 0.4610 0.3597 0.3087 0.2590 0.2157 0.1887 F 458.96 P 0.000 R-Sq(adj) = 99.31% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ (*) (-*) (*) (*) (*) (-*) (*-) (*-) (*-) (*-) (-*) (-*) + -+ -+ -+ 0.25 0.50 0.75 1.00 StDev 0.0226 0.0174 0.0116 0.0339 0.0148 0.0087 0.0295 0.0148 0.0051 0.0115 0.0105 0.0618 Pooled StDev = 0.0251 Grouping Information Using Fisher Method Cao Ethyl 0.00 0.05 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 N 3 3 3 3 3 3 Mean Grouping 1.12800 A 0.96333 B 0.83233 C 0.74900 D 0.62500 E 0.51467 F 0.46100 G 0.35967 H 0.30867 I 0.25900 J 0.21567 K 0.18867 K Anova tương đương mg/ml vitamin C với nồng độ cao hexan thân Ô Rô nước Source nđ cao hexan Error Total S = 4.984 Level 0.0 N DF 11 24 35 SS 144448.9 596.1 145045.0 R-Sq = 99.59% Mean 0.00 StDev 0.00 MS 13131.7 24.8 F 528.74 P 0.000 R-Sq(adj) = 99.40% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(*) 35 Luận văn tốt nghiệp Đại học 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.0 3 3 3 3 3 25.84 54.60 82.06 114.53 129.96 142.37 164.66 171.06 181.71 186.49 195.59 5.28 8.60 7.23 4.41 0.48 5.69 3.53 2.43 7.19 4.64 0.48 Sinh học k37 (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) -+ -+ -+ -+ -0 60 120 180 Pooled StDev = 4.98 Grouping Information Using Fisher Method nđ cao hexan 10.0 8.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0 N 3 3 3 3 3 3 Mean 195.59 186.49 181.71 171.06 164.66 142.37 129.96 114.53 82.06 54.60 25.84 0.00 Grouping A B B C C D E F G H I J Anova tương đương mg/ml vitamin C với nồng độ cao chloroform thân Ô Rô nước Source DF SS nđ cao chlo 151047.2 Error 20 557.2 Total 29 151604.4 S = 5.278 Level 0.00 0.05 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 1.00 1.50 2.00 N 3 3 3 3 3 R-Sq = 99.63% Mean 0.00 18.90 44.58 66.94 119.16 134.81 164.35 187.80 192.58 195.74 StDev 0.00 6.72 8.70 2.66 1.16 10.69 3.02 4.55 1.54 1.75 MS 16783.0 27.9 F 602.39 P 0.000 R-Sq(adj) = 99.47% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(*) (*) (*) (*) (*) (*-) (*) (*) (*) (*) -+ -+ -+ -+ -0 60 120 180 Pooled StDev = 5.28 Grouping Information Using Fisher Method nđ cao 36 Luận văn tốt nghiệp Đại học clo 2.00 1.50 1.00 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0.05 0.00 N 3 3 3 3 3 Mean 195.74 192.58 187.80 164.35 134.81 119.16 66.94 44.58 18.90 0.00 Sinh học k37 Grouping A A A B C D E F G H Anova tương đương mg/ml vitamin C với nồng độ cao ethyl acetate thân Ô Rô nước Source DF SS nđ cao ethyl 11 152206.5 Error 24 403.6 Total 35 152610.1 MS 13837.0 16.8 S = 4.101 R-Sq(adj) = 99.61% Level 0.00 0.05 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 R-Sq = 99.74% N 3 3 3 3 3 3 Mean 0.00 17.74 48.05 67.33 96.02 121.55 133.96 157.41 169.21 180.70 190.73 190.81 StDev 0.00 4.02 2.68 7.83 3.42 2.02 6.82 3.43 1.19 2.67 2.43 5.35 F 822.91 P 0.000 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(*) (*) (*) (*) (*) (*) *) (*) (*) (*) (*) (*) -+ -+ -+ -+ -0 60 120 180 Pooled StDev = 4.10 Grouping Information Using Fisher Method nđ cao ethyl 1.00 0.90 0.80 0.70 0.60 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0.05 0.00 N 3 3 3 3 3 3 Mean Grouping 190.81 A 190.73 A 180.70 B 169.21 C 157.41 D 133.96 E 121.55 F 96.02 G 67.33 H 48.05 I 17.74 J 0.00 K Anova hiệu suất kháng oxy hóa cao hexan Source cao hexan Error Total DF 11 24 35 SS 23537.41 109.70 23647.11 MS 2139.76 4.57 F 468.14 37 P 0.000 Luận văn tốt nghiệp Đại học S = 2.138 Level 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.0 N 3 3 3 3 3 3 R-Sq = 99.54% Mean 0.000 17.700 28.693 39.197 51.647 57.587 62.367 70.900 73.347 77.353 79.243 82.740 StDev 0.000 1.233 4.086 3.751 2.620 0.780 1.487 0.943 0.701 2.739 1.993 0.157 Sinh học k37 R-Sq(adj) = 99.32% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) -+ -+ -+ -+ -0 25 50 75 Pooled StDev = 2.138 Grouping Information Using Fisher Method cao hexan 10.0 8.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0 N 3 3 3 3 3 3 Mean 82.740 79.243 77.353 73.347 70.900 62.367 57.587 51.647 39.197 28.693 17.700 0.000 Grouping A A B B C C D E F G H I J Anova hiệu suất kháng oxy hóa cao chloroform Source DF SS cao chlo 24039.98 Error 20 102.87 Total 29 24142.84 S = 2.268 Level 0.00 0.05 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 1.00 1.50 2.00 N 3 3 3 3 3 MS 2671.11 5.14 R-Sq = 99.57% Mean 0.000 15.043 24.860 33.450 53.440 59.407 70.777 77.947 81.580 82.790 StDev 0.000 1.969 3.707 1.021 1.265 4.682 0.975 2.564 0.843 1.006 F 519.34 P 0.000 R-Sq(adj) = 99.38% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) -+ -+ -+ -+ -0 25 50 75 38 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 Pooled StDev = 2.268 Grouping Information Using Fisher Method cao chlo 2.00 1.50 1.00 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0.05 0.00 N 3 3 3 3 3 Mean Grouping 82.790 A 81.580 A B 77.947 B 70.777 C 59.407 D 53.440 E 33.450 F 24.860 G 15.043 H 0.000 I Anova hiệu suất kháng oxy hóa cao ethyl acetate Source cao ethyl Error Total S = 1.505 Level 0.00 0.05 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 N 3 3 3 3 3 3 DF 11 24 35 SS 24577.63 54.34 24631.97 MS 2234.33 2.26 R-Sq = 99.78% Mean 0.000 14.560 26.207 33.613 44.593 54.363 59.147 68.107 72.633 77.040 80.887 80.933 StDev 0.000 3.128 0.623 2.166 0.517 1.244 2.142 1.415 0.243 0.865 0.567 1.666 F 986.76 R-Sq(adj) = 99.68% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -(*) (*) *) *) (*) (* (* *) (*) (*) *) *) -+ -+ -+ -+ -0 25 50 75 Pooled StDev = 1.505 Grouping Information Using Fisher Method cao ethyl 1.00 0.90 0.80 0.70 0.60 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0.05 0.00 N 3 3 3 3 3 3 Mean 80.933 80.887 77.040 72.633 68.107 59.147 54.363 44.593 33.613 26.207 14.560 0.000 P 0.000 Grouping A A B C D E F G H I J K 39 [...]... học Sinh học k37 4.3 Khả năng kháng oxy hóa tổng số của cao phân đoạn chloroform thân Ô Rô Khả năng kháng oxy hóa tổng số ở các nồng độ của cao phân đoạn chloroform thân Ô Rô đƣợc tính tƣơng đƣơng mg/ml vitamin C dựa vào phƣơng trình đƣờng chuẩn y = -0,004322x + 1,040 (R2 = 0,98 7) Bảng 4.2: Khả năng kháng oxy hóa tổng số của cao phân đoạn chloroform thân Ô Rô Nồng độ cao (mg/ml) Hiệu suất kháng oxy hóa. .. 200 3) Tuy nhiên còn rất ít nghiên cứu khoa học chứng minh tác dụng chữa bệnh trên của cây Ô Rô (Acanthus ilicifoliua L. ) Đề tài “KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO PHÂN ĐOẠN THÂN Ô RÔ (Acanthus ilicifolius L. ) IN VITRO đƣợc thực hiện Nhằm mục tiêu chứng minh hoạt tính sinh học của cây Ô Rô 1 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 1.2 Mục tiêu Mục tiêu đề tài khảo sát khả năng kháng oxy hóa. .. số của cao phân đoạn ethyl acetate thân Ô Rô Khả năng kháng oxy hóa tổng số ở các nồng độ của cao phân đoạn ethyl acetate thân Ô Rô đƣợc tính tƣơng đƣơng mg/ml vitamin C dựa vào phƣơng trình đƣờng chuẩn y = -0,004322x + 1,040 (R2 = 0,98 7) Bảng 4.3: Khả năng kháng oxy hóa tổng số của caophân đoạn ethyl acetate thân Ô Rô Nồng độ cao (mg/ml) Hiệu suất kháng oxy hóa ( %) Hàm l ợng chất kháng oxy hóa tƣơng... công khác của nghiên cứu trong nƣớc đối với cây Ô Rô vào năm 2008 (Kiem et al., 200 8) Đề tài “Đặc điểm về hình thái giải phẫu và khảo sát khảo sát khả năng kháng oxy hóa của cây Ô Rô (Acanthus ilicifolius L. ) chứng minh khả năng kháng oxy hóa cao methanol cây Ô Rô (Nguyễn Thị Yến Chi, 201 4) 2.2.2 Nghiên cứu ngoài nƣớc Nhiều công trình nghiên cứu trên thế giới liên quan đến cây Ô Rô (A .ilicifolius L. ). .. (Total Antioxidant Status (TAS) assay) của cao chiết phân đoạn hexan, chloroform, ethyl acetate của thân cây Ô Rô (Acanthus ilicifolius L. ) trong điều kiện in vitro 1.3 Nội dung nghiên cứu Chiết phân đoạn từ cao methanol thân cây Ô Rô nƣớc ngọt bằng dung môi hexan, chloroform, ethyl acetate Sử dụng phƣơng pháp TAS để xác định khả năng kháng oxy hóa tổng số cao chiết phân đoạn thân Ô Rô nƣớc ngọt in vitro. .. chất chuẩn l vitamin C (IC50 = 110, 2), cho thấy khả năng kháng oxy hóa tổng số (TAS) của cao phân đoạn ethyl acetate(IC50 = 0,3 2) cao hơn chất chuẩn 344,4 l n , cao phân đoạn chloroform (IC50 = 0,4 1) cao hơn chất chuẩn 268,8 l n Khả năng kháng oxy hóa tổng số (TAS) của cao phân đoạn hexan (IC50 = 1073, 3) thấp hơn chất chuẩn 9,7 l n Từ khóa: cây Ô Rô, chất kháng oxy hóa, gốc tự do, TAS,… ix Luận văn... 9,7 l n 5.2 Kiến nghị Tiếp tục khảo sát khả năng kháng oxy hóa của cao phân đoạn ethyl acetate thân Ô Rô bằng các phƣơng pháp khác nhau (DPPH, ức chế gốc tự do NO ) Xác định thành phần hóa học hiện diện trong cao phân đoạn ethyl acetate cây Ô Rô Khảo sát ảnh hƣởng của cao chiết phân đoạn ethyl acetate cây Ô Rô đến quá trình oxy hóa ở mức độ in vivo 23 Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 TÀI LIỆU... đoạn thân Ô Rô nƣớc ngọt giảm l n l ợt l cao ethyl acetate (IC50 = 0,3 2), cao chloroform(IC50 = 0,4 1), cao hexan (IC50 = 1073, 3) Điều này có nghĩa l khả năng kháng oxy hóa của cao ethyl acetate l cao nhất và cao hơn vitamin C (IC50 = 110, 2) gấp 344,4 l n, cao chloroform cao hơn vitamin C gấp 268,8 l n Ngƣợc l i, cao hexan có hiệu quả kháng oxy hóa rất thấp, và thấp hơn chất chuẩn vitamin C 9,7 l n... Sinh học k37 CHƢƠNG 5 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Khả năng kháng oxy hóa tổng số của cao ethyl acetate (IC50 = 0,3 2) cao hơn khả năng kháng oxy hóa chất chuẩn vitamin C (IC50 = 110, 2) gấp 344,4 l n, cao chloroform (IC50 = 0,4 1) cao hơn khả năng kháng oxy hóa chất chuẩn vitamin C gấp 268,8 l n Khả năng kháng oxy hóa tổng số của cao hexan (IC50 = 1073, 3) rất thấp và thấp hơn chất chuẩn vitamin...Luận văn tốt nghiệp Đại học Sinh học k37 TÓM TẮT Cây Ô Rô thuộc l loại thực vật tiểu mộc thuộc họ Acanthus, mọc hoang ở những nùng nƣớc l , vùng ven biển hay bên bờ sông Khả năng kháng oxy hóa của cao phân đoạn thân Ô Rô (Acanthus ilicifolius L. ) đƣợc xác định bằng phƣơng pháp khảo sát khả năng kháng oxy hóa tổng số (Total Antioxidant Status (TAS) assay) in vitro Kết quả đƣợc so ... 200 3) Tuy nhiên nghiên cứu khoa học chứng minh tác dụng chữa bệnh Ô Rô (Acanthus ilicifoliua L. ) Đề tài “KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO PHÂN ĐOẠN THÂN Ô RÔ (Acanthus ilicifolius L. ) IN VITRO ... công khác nghiên cứu nƣớc Ô Rô vào năm 2008 (Kiem et al., 200 8) Đề tài “Đặc điểm hình thái giải phẫu khảo sát khảo sát khả kháng oxy hóa Ô Rô (Acanthus ilicifolius L. ) chứng minh khả kháng oxy. .. NHIÊN BỘ MÔN SINH HỌC - - DƢƠNG THỊ NGỌC MAI KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO PHÂN ĐOẠN THÂN Ô RÔ (Acanthus ilicifolius L. ) IN VITRO LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH: SINH HỌC CÁN

Ngày đăng: 17/02/2016, 10:03

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan