Đang tải... (xem toàn văn)
BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV) BÁO cáo VIRUS học đại CƯƠNG VIRUS gây BỆNH đốm TRẮNG TRÊN tôm (WSSV)
BỘ GIÁO DỤCyVÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC BÀI BÁO CÁO VIRUS HỌC ĐẠI CƯƠNG MÃ HỌC PHẦN: CS108 VIRUS GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG TRÊN TÔM (White Spot Syndrom Virus – WSSV) CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN TS Bùi Thị Minh Diệu Nguyễn Nhật Huỳnh B1303667 Đỗ Thị Huỳnh Mai B1303679 Nguyễn Thị Trúc Mai B1303680 Nguyễn Thị Kiều Nga B1303685 Lê Hải Đăng B1400179 Cần Thơ, 10/2015 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương MỤC LỤC A GIỚI THIỆU B NỘI DUNG I Sơ lược virus gây bệnh đốm trắng tôm 1 Phân loại tên gọi .1 a Phân loại b Tên gọi Bảng Tên gọi virus gây bệnh đốm trắng số quốc gia 2 Hình thái Hình Virus đốm trắng tôm (WSSV) hình que kích thước 133-164 x 296-383 nm kính hiển vi Hình WSSV hình que, có phần phụ giống đuôi .3 Cấu trúc protein .3 Hình Mô hình cấu trúc hạt virion WSSV Hình Nucleocapsid WSSV nhuộm âm kính hiển vi điện tử Hình Cấu trúc nuclecapsis WSSV Hình Vị trí protein cấu trúc chủ yếu WSSV Hình Mô hình 3D phức hợp protein màng hình thành protein cấu trúc virus đốm trắng Bảng Tên, khung đọc mã, số lượng acid amin trọng lượng thực tế trọng lượng lí thuyết 39 loại protein WSSV (Jyh-Ming Tsai cộng sự., 2004) Vật liệu di truyền 10 Hình Vị trí 39 gen mã hóa cho 39 protein cấu trúc gennome WSSV 10 Đặc tính sinh học 11 II Quá trình sinh bệnh virus .12 Cơ chế gây bệnh (xâm nhiễm) 12 Hình Các mô mục tiêu WSSV tôm .13 Hình 10 Quá trình xâm nhiễm nhân lên virus WSSV tế bào chủ 14 Hình 11 Cơ chế chép virus WSSV 14 Hình 12 Cơ chế dịch mã virus WSSV tế bào chủ 15 Cơ chế lây lan 15 Hình 13 Hai đường lây nhiễm WSSV ao nuôi (theo Pasano L M., 1960) 16 III Bệnh đốm trắng tôm 16 Lịch sử phân bố bệnh .16 Hình 14 Phân bố địa lý bệnh đốm trắng (FAO Fishery Statistics, 2002) 17 Tình hình bệnh tác hại bệnh đốm trắng với nghề nuôi tôm Việt Nam Thế giới 17 a Thế giới 17 b Việt Nam 18 Kí chủ WSSV .18 Biểu hiện, bênh tích 18 a Dấu hiệu bên 18 Hình 15 Các dấu hiệu bên tôm nhiễm WSSV .19 b Dấu hiệu bên 19 Hình 16 Mang tôm bị nhiễm đốm trắng 20 Hình 17 Dạ dày tôm bị nhiễm đốm trắng 20 Phương pháp chuẩn đoán bệnh 21 5.1 Sơ lược phương pháp chẩn đoán bệnh đốm trắng tôm 21 Bảng Đánh giá khả phát bệnh đốm trắng tôm sú phương pháp khác (Lightner, 1997) .21 i Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương 5.2 Phương pháp PCR 21 IV Phòng điều trị 22 V Kết luận kiến nghị .23 VI Tài liệu tham khảo 24 DANH SÁCH HÌNH A GIỚI THIỆU B NỘI DUNG Bảng Tên gọi virus gây bệnh đốm trắng số quốc gia Hình Virus đốm trắng tôm (WSSV) hình que kích thước 133-164 x 296-383 nm kính hiển vi Hình WSSV hình que, có phần phụ giống đuôi .3 Hình Mô hình cấu trúc hạt virion WSSV Hình Nucleocapsid WSSV nhuộm âm kính hiển vi điện tử Hình Cấu trúc nuclecapsis WSSV Hình Vị trí protein cấu trúc chủ yếu WSSV Hình Mô hình 3D phức hợp protein màng hình thành protein cấu trúc virus đốm trắng Bảng Tên, khung đọc mã, số lượng acid amin trọng lượng thực tế trọng lượng lí thuyết 39 loại protein WSSV (Jyh-Ming Tsai cộng sự., 2004) Hình Vị trí 39 gen mã hóa cho 39 protein cấu trúc gennome WSSV 10 Hình Các mô mục tiêu WSSV tôm .13 Hình 10 Quá trình xâm nhiễm nhân lên virus WSSV tế bào chủ 14 Hình 11 Cơ chế chép virus WSSV 14 Hình 12 Cơ chế dịch mã virus WSSV tế bào chủ 15 Hình 13 Hai đường lây nhiễm WSSV ao nuôi (theo Pasano L M., 1960) 16 Hình 14 Phân bố địa lý bệnh đốm trắng (FAO Fishery Statistics, 2002) 17 Hình 15 Các dấu hiệu bên tôm nhiễm WSSV .19 Hình 16 Mang tôm bị nhiễm đốm trắng 20 Hình 17 Dạ dày tôm bị nhiễm đốm trắng 20 Bảng Đánh giá khả phát bệnh đốm trắng tôm sú phương pháp khác (Lightner, 1997) .21 DANH SÁCH BẢNG ii Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương A GIỚI THIỆU B NỘI DUNG Bảng Tên gọi virus gây bệnh đốm trắng số quốc gia Hình Virus đốm trắng tôm (WSSV) hình que kích thước 133-164 x 296-383 nm kính hiển vi Hình WSSV hình que, có phần phụ giống đuôi .3 Hình Mô hình cấu trúc hạt virion WSSV Hình Nucleocapsid WSSV nhuộm âm kính hiển vi điện tử Hình Cấu trúc nuclecapsis WSSV Hình Vị trí protein cấu trúc chủ yếu WSSV Hình Mô hình 3D phức hợp protein màng hình thành protein cấu trúc virus đốm trắng Bảng Tên, khung đọc mã, số lượng acid amin trọng lượng thực tế trọng lượng lí thuyết 39 loại protein WSSV (Jyh-Ming Tsai cộng sự., 2004) Hình Vị trí 39 gen mã hóa cho 39 protein cấu trúc gennome WSSV 10 Hình Các mô mục tiêu WSSV tôm .13 Hình 10 Quá trình xâm nhiễm nhân lên virus WSSV tế bào chủ 14 Hình 11 Cơ chế chép virus WSSV 14 Hình 12 Cơ chế dịch mã virus WSSV tế bào chủ 15 Hình 13 Hai đường lây nhiễm WSSV ao nuôi (theo Pasano L M., 1960) 16 Hình 14 Phân bố địa lý bệnh đốm trắng (FAO Fishery Statistics, 2002) 17 Hình 15 Các dấu hiệu bên tôm nhiễm WSSV .19 Hình 16 Mang tôm bị nhiễm đốm trắng 20 Hình 17 Dạ dày tôm bị nhiễm đốm trắng 20 Bảng Đánh giá khả phát bệnh đốm trắng tôm sú phương pháp khác (Lightner, 1997) .21 iii Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương iv Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương VIRUS GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG TRÊN TÔM (WSSV) A GIỚI THIỆU Nuôi trồng thủy sản ngành đóng góp vai trò quan trọng việc xuất số quốc gia giới, đặc biệt nước Châu Á Trung Quốc, Thái Lan, Indonesia, Việt Nam Ở Việt Nam, nghề nuôi tôm phát triển mạnh trở thành ngành kinh tế góp phần đem lại nguồn thu nhập cho người dân góp phần pháp triển kinh tế xã hội Ngày nay, để tăng sản lượng diện tích nuôi tôm áp dụng biện pháp kỹ thuật tiên tiến song song tác động đến sinh thái dẫn đến ô nhiễm môi trường bùng phát dịch bệnh Trong có bệnh đốm trắng tôm, bệnh đặc biệt nguy hiểm gây tác hại nghiêm trọng đến nghề nuôi tôm Đặc trưng bệnh gây nên tỷ lệ chết cao gây chết hàng loạt cho tôm thời gian ngắn ao nuôi bị nhiễm bệnh Khả lây nhiễm bệnh cao dễ bùng phát thành dịch bệnh.Bệnh đốm trắng bệnh virus gây hội chứng đốm trắng (White Spot Syndrome Virus (WSSV)) gây Chính vậy, báo cáo thực nhằm tìm hiểu bổ sung kiến thức sơ lược loại virus, ảnh hưởng bệnh virus gây cách phòng điều trị B NỘI DUNG I Sơ lược virus gây bệnh đốm trắng tôm Phân loại tên gọi a Phân loại WSSV phân loại thuộc họ Baculoviridae (Francki ctv,1991) Tuy nhiên phân tích trình tự gần hệ gen WSSV cho thấy chúng mã hóa loại protein không giống protein Baculovirus protein ribonucleotide reductase (RR1 RR2)(van Hulten ctv, 2000b), protein VP26, VP28 (van Hulten ctv, 2000c) WSSV không giống protein Ngoài ra, trình tự nucleotide toàn hệ gene WSSV cho thấy nhiều gen không giống gene virus khác ( van Hulten ctv, 2001; Yang ctv, 2001) Sự khác biệt genome phổ ký chủ rộng WSSV chứng tỏ WSSV đại diện cho họ (van Hulten ctv, 2000a) Theo hội nghị virus học quốc tế lần thứ 12 (2002), nhà khoa học phân loại bệnh đốm trắng giống Whisspovirus thuộc họ Nimaviridae (Tạp chí thông tin KHCN Kinh Tế Thủy Sản, số – 2004) Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương b Tên gọi Bảng Tên gọi virus gây bệnh đốm trắng số quốc gia Tên China Baculovirus (CBV) Hypodermal and hematopoietic necrosis baculovirus (HHNBV) Rod-shaped Virus of Penaeus japomicus (RV-PJ) Penaeus chinesis Baculovirus (PCBV) Penaeus monodon non-occluded Baculovirus II (PmNOII) Penaeus monodon non-occluded Baculovirus III (PmNOIII) Systemic ectodermal and mesodermal baculovirus (SEMBV) China Baculo-live virus (CBV) White Spot Baculovirus (WSBV) Yellow head disease-like virus Prawn White Spot Baculovirus (PWSBV) White Spot Syndrome Baculovirus (WSSB) White Spot Syndrome Virus (WSSV) Vị trí Trung Quốc Tài liệu tham khảo Chamberlain, 1994 Trung Quốc Huang ctv, 1994 Nhật Inouye ctv, 1994 Trung Quốc Zhan ctv 1995 Thái Lan Đài Loan Thái Lan Woongteerasupaya ctv, 1995 Wang, 1995 Woogteerasupaya Trung Quốc Đài Loan Đài Loan ctv, 1995 Tapay ctv, 1996 Chang ctv,1996 Wang ctv,1996 Trung Quốc Yang ctv, 1997 Thái Lan Durand ctv, 1997 Đài Loan Lo Kou, 1998 *(Nguồn: http://tai-lieu.com/tai-lieu/khoa-luan-ung-dung-ky-thuat-hoa-mo-mien-dich immunohistochemistry-trong-chan-doan-mam-benh-virus-dom-trang-white-spot-6636/) Hình thái Virus dạng hình que, hình cầu hình trứng, kích thước 120 – 275 nm, có đuôi phụ đầu kích thước 70 – 300 nm Virus có lớp protein, trọng lượng phân tử từ 15 – 28 kD Vỏ bao có lớp protein VP28 VP29, nucleocapside có lớp VP26, VP24, VP15 Nhân cấu trúc DNA mạch đôi (Tạp chí thông tin KHCN kinh tế thủy sản, số – 2004) Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình Virus đốm trắng tôm (WSSV) hình que kích thước 133-164 x 296-383 nm kính hiển vi *(Nguồn: http://tepbac.com/news/full/9535/Hoi-chung-chet-do-o-tom-he-chan-trangLitopenaeus-vannamei.htm) Hình WSSV hình que, có phần phụ giống đuôi *(Nguồn: http://agriviet.com/threads/benh-dom-trang-va-virus-gay-benh-dom-trang.16095/) Cấu trúc protein Các virion WSSV có ba lớp cấu trúc xung quanh DNA cốt lõi nó: màng bao, capsid vật chất di truyền Mỗi nucleocapsid có đường kình 65 – 70 nm chiều dài 300 – 350 nm, ( van Hulten at el., 2001a) Màng lipid capsis Lõi nucleoprottein Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình Mô hình cấu trúc hạt virion WSSV *(Nguồn: http://luanvan.co/luan-van/luan-van-xac-dinh-thanh-phan-protein-cua-virus-gay-hoichung-dom-trang-white-spot-syndrome-virus-wssv-nhan-sinh-khoi-28595/) Hình Nucleocapsid WSSV nhuộm âm kính hiển vi điện tử *(Nguồn:http://luanvan.co/luan-van/luan-van-xac-dinh-thanh-phan-protein-cua-virus-gay-hoi-chungdom-trang-white-spot-syndrome-virus-wssv-nhan-sinh-khoi-28595/) Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình Cấu trúc nuclecapsis WSSV *(Nguồn:http://luanvan.co/luan-van/luan-van-xac-dinh-thanh-phan-protein-cua-virus-gay-hoi-chungdom-trang-white-spot-syndrome-virus-wssv-nhan-sinh-khoi-28595/ ) Kích thước trung bình nucleocapsid 80 x 350 nm Nucleocapsid cấu tạo vòng tròn xếp thành chồng (khoảng 14 – 15 vòng) quấn quanh trục dài, vòng tròn có hai đường kẻ sọc gồm cặp capsomer hình cầu, capsomer hìnhcầu có đường kính nm, khoảng cách vòng nm Nucleocapsid chứa đựng bên dsDNA, không vùi (Occlusion body) Hơn 40 protein WSSV biêt Trong đó, có 38 protein cấu trúc tìm thấy virion WSSV Trong số có 21 protein tìm thấy màng bao, 10 tìm thấy nucleocapsid, tìm thấy lớp tegunment (đây cấu trúc cho nằm màng bao nucleocapsid (Escobedo – Bonilla et al., 2008) Hơn 90% protein không giống protein biết đến khác Phần lớn protein nucleocapsid VP664 (664kDa), VP26 (26kDa), VP24 (24kDa),VP15 (15kDa) (Leu et al., 2005; van Hunten et al., 2000a, 2000c) Theo nhà khoa học WSSV có loại protein VP28, VP26, VP29, VP15 VP28 VP19 nằm vỏ virus, VP26, VP14, VP15 diện nucleocapsid có tương đồng trình tự acidamin VP28 VP26 41% VP28 VP24 46% (Hulten cộng sự., 2000b) Protein vỏ VP28 có vai trò đặc biệt giúp WSSV xâm nhiễm vào thể tôm Hình Vị trí protein cấu trúc chủ yếu WSSV *(Nguồn: http://staff.kmutt.ac.th/~triwit.rat/Shrimp%20research.htm) Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương làm trung hòa protein phong bì không trung hòa WSSV chưa rõ phải nghiên cứu thêm Vật liệu di truyền Hình Vị trí 39 gen mã hóa cho 39 protein cấu trúc gennome WSSV Bộ gen virus WSSV giải mã vào năm 2001 (Yang.spp 2001) Cho đến năm 2002 WSSV xác định virus động vật có gen lớn Virus WSSV lòai virus thuộc họ Nimaviridae (Vlak et al., 2005).Bộ gen virus WSSV phân tử DNA sợi đôi, dạng vòng với A + T 59% phân bố đồng với Nét độc đáo WSSV diện ORF dài khoảng 18234 nucleotid với chức không rõ, collagen giống ORF, chín vùng, phân tán dọc theo gen, dòng chứa số biến lặp song song 250 bp Kích cỡ gen khác tùy thuộc vào vùng địa lí phân lập, Thái lan WSSV có kích thước 292967 bp, chứa 184 khung đọc mở (van Hulten cộng sự., 2001) Trung quốc WSSV có kích thước 305107 bp chứa 181 bp khung đọc mở (GenBank Accession No AF332093) Đài Loan WSSV có kích thước 307287 bp chứa 532 khung đọc mở (Theo Jyh – Ming Tsai cộng sự., 2004) 10 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Bộ gen WSSV chứa đựng 531 – 684 ORFs (open reading frame, ORF) với ATG mã mở đầu (Escobedo – Bonella et al, 2008) Trong số có từ 181 – 184 ORFs mã hóa cho protein với kích cỡ từ 51 đến 6077 amino acid (van Hulten et al.,2001c) Dựa tương đồng gen khác ghi nhận ngân hàng gen 12 (6%) ORFs đoán chức (bảng 1) Phần lớn gen biết liên quan đến nhân lên DNA trao đổi chất DNA polymerase (Chen et al.,2002; van Hultenet al., 2001b), ribonucleotide reductase (Tsai etal., 2000a), Chimeric thymidine-thymidylate kinase (Tsai et al., 200ob; Tzeng etal., 2002), thymidylate synthase, dUTPase endonuclease không đặc hiệu (Witteveldt etal., 2001) Bên cạnh ORFs mã hóa cho protein cấu trúc nên virion có ORFs mã hóa cho 40 protein phụ virion virus xác định gen WSSV Bảng Chức số ORFs WSSV theo tương đồng với ngân hàng gen (Mark, 2015) (số thứ tự ORF dựa theo mã hóa van Hulten et al., 2001b) Đặc tính sinh học Virus đốm trắng ký sinh tổ chức ngoại bì, trung bì, mang, quan lymphoid biểu bì vỏ kitin Virus xâm nhập vào nhân tế bào gây hoại tử 11 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương sưng to Cũng đa số virus, virus WSSV có sức chịu đựng yếu với yếu tố môi trường Theo Chang công tác viên (1998): ‒ Sau 48 – 72 sau tiếp xúc môi trường nước mà không tìm đượcvật chủ WSSV bị phân hủy ‒ Trong khoảng nhiệt độ 55 – 750C – 90 phút, virus khả gây nhiễm ‒ Virus sống tồn nước có độ mặn từ – 40‰, độ pH từ – 10, có khả chịu đựng nhiệt độ từ – 800C ‒ Virus khả gây nhiễm sau 60 phút tia UV x 105μWs/cm ‒ Ozone nồng độ 0.5 μg/ml làm bất hoạt WSSV 250C II Quá trình sinh bệnh virus Cơ chế gây bệnh (xâm nhiễm) Virus WSSV có DNA mạch đôi (dsDNA) Quá trình xâm nhiễm virus đốm trắng mô tả sau: Đầu tiên, VP28 bề mặt virus gắn lên bề mặt tế bào làm trung gian cho trình xâm nhiễm virus cách gắn trực tiếp lên receptor chuyên biệt cho WSSV hay đẩy mạnh trình xâm nhập cách hoạt hóa vị trí dung hợp WSSV xâm nhập vào tế bào (Qi ctv, 2004) Virus màng bao, tiếp xúc với màng tế bào chủ vào theo chế nhập bào, đồng thời màng tế bào chủ bao lấy virus Trong giai đoạn đầu trình lây nhiễm, virus đốm trắng xâm nhập vào dày, mang, biểu bì, mô liên kết gan tụy Ở giai đoạn sau quan bạch huyết, tuyến anten, mô cơ, mô tạo máu, tim, đoạn ruột sau số phần ruột Như vậy, dày, mang, biểu bì, quan bạch huyết, mô tạo máu tuyến anten bị nhiễm nặng giai đoạn cuối (Hendrik Marks, 2005) 12 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình Các mô mục tiêu WSSV tôm *(Nguồn: Báo cáo virus gây hội chứng đốm trắng tôm) Đến nhân, virus đưa gen vào trong, chúng tiến hành nhân bản, phiên mã, dịch mã dựa vật chất lượng tế bào Thông qua trình này, số lượng virus tăng lên nhanh, đồng thời làm thay đổi hoạt động bình thường tế bào chủ Virus WSSV thuộc họ Nimaviridae (nhóm I) theo hệ thống phân loại Baltimore (International Committee on Taxnomy of Virus –ICTV), chúng nhân lên phiên mã bên nhân tế bào chủ theo chế nhóm virus Theo đó, sợi (-) DNA virus làm khuôn để tổng hợp mRNA Ở nhân, giai đoạn đầu trình xâm nhiễm, xuất thể sợi, hình hạt (có thể chất virus), cấu trúc giống màng Sau quan sát thấy ống dài rỗng Những ống nhỏ vỡ thành mảnh nhỏ, hình thành nucleocapsid Có hai giả thuyết phát triển hình dạng WSSV Theo số tác giả, trước phần lõi vào nucleocapsid bao phủ màng (envelop), để lại khoang hở Protein nhân (nucleoprotein) dạng sợi chui vào capsid thông qua khoang hở Khi phần lõi hoàn tất, phần bao thu hẹp đầu hở tạo thành đuôi virion trưởng thành Trái lại, số tác giả khác cho nucleocapsid hoàn chỉnh lắp ráp đầu tiên, sau bao lại (Wang ctv, 13 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương 2000) Sau lắp ráp, virion trưởng thành kết lại với thành dãy phân tán dịch nhân Làm WSSV virion rời khỏi tế bào chủ chưa biết rõ sau virion phá hủy tế bào nhiễm bệnh thoát ngoài, chúng tiếp tục xâm nhập vào tế bào bên cạnh theo phân thải môi trường Hình 10 Quá trình xâm nhiễm nhân lên virus WSSV tế bào chủ Hình 11 Cơ chế chép virus WSSV *(Nguồn: TS Bùi Thị Minh Diệu, giảng Virus học đại cương) 14 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình 12 Cơ chế dịch mã virus WSSV tế bào chủ * (Nguồn: TS Bùi Thị Minh Diệu, giảng Virus học đại cương) Cơ chế lây lan Có hai đường lan truyền chủ yếu: Lan truyền theo chiều dọc: mầm bệnh lan truyền trực tiếp từ bố mẹ nhiễm bệnh sang Lan truyền theo chiều ngang: đường lây nhiễm chủ yếu Theo cách này, mầm bệnh truyền từ loài giáp xác khác tôm, cua, chân chèo bị nhiễm bệnh từ vào ao nuôi hay ao Các tôm khỏe ao ăn tôm bị nhiễm đốm trắng chết làm bệnh lan truyền nhanh, chim ăn tôm bệnh từ ao mang thức ăn rơi vãi đến nơi khác làm bệnh lây lan Ngoài việc sử dụng dụng cụ nuôi, đánh bắt chung ao nuôi nguyên nhân lây lan bệnh (Trần Thị Việt Ngân, 2002) 15 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình 13 Hai đường lây nhiễm WSSV ao nuôi (theo Pasano L M., 1960) *(Nguồn: Trần Thị Việt Ngân, 2002) III Bệnh đốm trắng tôm Lịch sử phân bố bệnh Bệnh đốm trắng xuất lần vùng đông bắc Đài Loan vào cuối năm 1991 đầu 1992 đầm nuôi tôm sú nuôi với tỷ lệ chết cao Sau bệnh nhanh chống lan rộng tình ven biển từ bắc tới nam Trung Quốc Các loài tôm M japonicus, P monodon, Fenneropenaeus chinensis bị nhiễm bệnh, sau dịch bệnh lan sang Nhật Bản, Thái Lan, Indonesia, Ấn Độ, Texas kèm theo sa sút nghiêm trọng sản lượng tôm nuôi quốc gia Từ năm 1999, bệnh đốm trắng xuất lan nhanh từ Trung Mỹ đến Bắc Mỹ sau lan khắp Châu Âu Châu Úc Ở Việt Nam, vào tháng năm 1994, huyện Bình Đại, huyện Thạnh Phú tỉnh Bến Tre tháng 3,4 năm 1994 đầm nuôi huyện Cần Giờ, Tp Hồ Chí Minh phát tôm bị bệnh đốm trắng chết hàng loạt sau 30-40 ngày nuôi 16 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình 14 Phân bố địa lý bệnh đốm trắng (FAO Fishery Statistics, 2002) *(Nguồn: http://luanvan.co/luan-van/luan-van-xac-dinh-thanh-phan-protein-cua-virus-gay-hoichung-dom-trang-white-spot-syndrome-virus-wssv-nhan-sinh-khoi-28595/) Tình hình bệnh tác hại bệnh đốm trắng với nghề nuôi tôm Việt Nam Thế giới Bệnh đốm trắng bệnh nguy hiểm tôm nuôi Bệnh xảy tất nước nuôi tôm ảnh hưởng phần lớn đền nghề nuôi tôm công nghiệp giới (Nguyễn Văn Hào, 2000) a Thế giới Trong thời gian qua, bệnh đốm trắng bùng phát nhiều khu vực nuôi tôm giới, đặc biệt nước châu Á Bệnh gây tỉ lệ chết cao gây thiệt hại lớn cho nghề nuôi tôm công nghiệp Trung Quốc, Nhật Bản, Indonesia Ấn Độ Trong thời gian 1994-1995, virus gây bệnh đốm trắng gây chết hầu hết tôm nuôi (P monodon, P indicus) dọc theo bờ biển phía Đông phía Tây Ấn Độ (Tạp chí thông tin KHCN Kinh tế Thủy Sản, số 4-2004) Ở Thái Lan, dịch bệnh đốm trắng bùng nổ làm giảm sản lượng nuôi từ 225000 năm 1995 xuống 160000 năm 1996, làm thiệt hại 500 triệu USD Ở nước châu Á, bệnh gây thiệt hại khoảng tỷ USD năm (Nguyễn Văn Hào, 2000) 17 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương b Việt Nam Từ tháng 01 đến tháng 11 năm 2014, dịch bệnh đốm trắng xảy 250 xã, 69 huyện thuộc 22 tỉnh, thành phố gồm: Hải Phòng, Quảng Ninh, Nghệ An, Hà Tĩnh, Quảng Bình, Quảng Trị, Thừa Thiên Huế, Quảng Ngãi, Bình Định, Phú Yên, Khánh Hòa, TP Hồ Chí Minh, Đồng Nai, Bà Rịa – Vũng Tàu, Long An, Tiền Giang, Bến Tre, Kiên Giang, Trà Vinh, Sóc Trăng, Bạc Liêu, Cà Mau Tổng diện tích nuôi tôm bị bệnh 22.624,04 ha, chiếm 3,33% tổng diện tích thả nuôi nước; diện tích nuôi tôm quảng canh bán thâm canh bị bệnh 13.329,4 ha, diện tích nuôi quảng canh cải tiến bị bệnh 9.294,64 Bệnh xảy tôm thẻ tôm sú, tôm có độ tuổi từ 10-110 ngày sau thả Tôm sú đối tượng nuôi bị thiệt hại lớn với diện tích 13.529,47 ha, chiếm 59,80% tổng diện tích bị bệnh đốm trắng So với năm 2013, 11 tháng đầu năm 2014, dịch bệnh đốm trắng xảy với phạm vi hẹp diện tích bị bệnh cao 1,85 lần Cả nước có tỉnh công bố dịch Sóc Trăng, Nghệ An Quảng Ninh, Sóc Trăng tỉnh bị thiệt hại lớn (10.933,82 ha, chiếm 48,33% diện tích bị bệnh đốm trắng nước) (Hội thảo khoa học bệnh đốm trắng bệnh hoại tử gan tụy cấp tôm nuôi nước lợ, 2014) Kí chủ WSSV Virus gây bệnh đốm trắng phân bố rộng nhiều vật chủ, virus không nhiễm số loài tôm he (Panaeus) nuôi Tây bán cầu mà xuất rộng mười chân (Decapoda) tôm biển, tôm hùm cua (Walker and Mohan, 2009) Một số vật chủ truyền bệnh WSSV động vật hai mảnh vỏ, giun nhiều tơ, Copepod, số loài chân khớp Isopoda tích lũy WSSV mật độ cao mà không biểu bệnh (OIE, 2009) Ở Việt Nam, mầm bệnh WSSV nhiễm nhiều loại tôm he nuôi sống tự nhiên: tôm sú (P mondon), tôm thẻ (P indicus), tôm rảo (Metapenaeus ensis), tôm đất (M lysianassa), tôm chân trắng (L.vannamei) nhập vào nuôi Việt Nam (Tạp chí thông tin KHCN Kinh Tế Thủy Sản, số 4-2004) Biểu hiện, bênh tích a Dấu hiệu bên Tôm nhiễm bệnh xuất dấu hiệu đỏ thân với đốm trắng bên lớp vỏ đầu ngực, đốm trắng có kích thước từ 0.5-2 mm xuất lớp vỏ đầu 18 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương ngực đốt đuôi cuối (với tôm kích thước nhỏ không thấy đốm trắng mà thấy thân có màu hồng đến hồng đỏ) Tôm bị bệnh dễ dàng phát lúc nhỏ trưởng thành (Phạm Minh Nhựt, 2006) Trong nhiều trường hợp, tôm hấp hối bệnh WSSV chuyển sang màu hồng đến màu nâu đỏ-gọi bệnh thân đỏ Bệnh tỉ lệ chết cao, tới 100% (Trần Thị Minh Tâm Đái Uy Ban, 1999) Những dấu hiệu khác: tôm nhiễm bệnh có biểu giảm ăn đột ngột, tôm thẻ chân trắng có tượng ăn nhiều trước giảm ăn Tôm bơi lờ đờ, lên tầng mặt, tấp vào bờ chết, thịt đục, hoạt động kém, phần phụ bị tổn thương, nắp mang phồng lên vỏ có nhiều sinh vật bám Khi có dấu hiệu sức khỏe tôm yếu, đồng thời đốm trắng xuất hiện, tỷ lệ tôm phát bệnh từ 3-10 ngày 100% tôm chết hầu hết ao nuôi (Bùi Quang Tế, 2003) Tuy nhiên, cần phân biệt trường hợp bệnh giống bệnh đốm trắng Trong trường hợp này, đốm trắng xuất loang lỗ thân tôm tôm chết rải rác kéo dài, lột xác xong, đốm trắng bong khỏi vỏ tôm hoạt động trở lại bình thường Dấu hiệu pH cao tôm bị nhiễm khuẩn Hình 15 Các dấu hiệu bên tôm nhiễm WSSV b Dấu hiệu bên Tế bào tôm bị bệnh đốm trắng có tượng trương nhân Gan, tụy trương nhân có màu trắng vàng trở nên giòn Dấu hiệu đặc trưng mô bệnh sinh học xuất thể vùi crowdry type A trương nhân 19 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình 16 Mang tôm bị nhiễm đốm trắng Hình 17 Dạ dày tôm bị nhiễm đốm trắng *(Nguồn:http://luanvan.net.vn/luan-van/benh-do-virus-va-vi-khuan-tren-tom-the-chan-trang-49503/) 20 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Phương pháp chuẩn đoán bệnh 5.1 Sơ lược phương pháp chẩn đoán bệnh đốm trắng tôm Việc chẩn đoán virus bệnh đốm trắng thực từ 20-40 ngày bệnh khởi phát Hiện có nhiều phương pháp khác để chẩn doán bệnh PCR, ELISA, thăm dò DNA,… Năm 1997, Lightner đưa bảng đánh giá chung phương pháp ứng dụng để chẩn doán virus gây bệnh đốm trắng Bảng Đánh giá khả phát bệnh đốm trắng tôm sú phương pháp khác (Lightner, 1997) Phương pháp chẩn đoán WSSV Kết Kính hiển vi quang học ++ Kính hiển vi phản quang + Kính hiển vi đen ++ Kính hiển vi điện tử truyền suốt + Kính hiển vi điện tử quét - Kháng thể huỳnh quang - ELISA với PABs - ELISA với MABs - Mô học ++ DNA mẫu dò ++ PCR +++ Theo đó, phương pháp PCR có độ xác độ tin cậy cao Do dó, người ta thường dùng phương pháp PCR để chẩn đoán virus gây bệnh đốm trắng 5.2 Phương pháp PCR Nguyên tắc: PCR kỹ thuật in-vitro Bằng kỹ thuật này, chuỗi phân tử DNA đặc thù nằm hai vùng chuỗi biết khuếch đại chu kỳ nhiệt lặp lặp lại Mỗi chu kỳ PCR gồm giai đoạn chính: - Biến tính: chuỗi DNA kép thành mạch đơn, nhiệt độ 92 – 95oC, chuỗi xoắn kép DNA tách thành mạch đơn - Gắn mồi: bắt cặp đoạn mồi (primers) mạch DNA đơn, o bắt cặp theo chiều 3’ sợi DNA mục tiêu nhiệt độ khoảng 45 – 55 C 21 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học - Báo cáo Virus học đại cương Kéo dài: tổng hợp mạch DNA bổ sung từ điểm bắt cặp đoạn mồi (primers) mạch DNA đơn nhờ enzyme DNA polymerase, từ đầu 3’ o primers nhiệt độ khoảng 70 – 75 C Mỗi chu kỳ DNA gồm giai đoạn Số chu từ n khoảng 25 – 40 chu kỳ Số lượng đoạn gen khuếch đại, theo lý thuyết , với n số chu kỳ Mục đích PCR khuyết đại phân đoạn DNA virus gây bệnh Trước đây, để chẩn doán virus gây bệnh đốm trắng người ta sử dụng phương pháp PCR cổ điển Ngày nay, với tiến khoa học, dựa phản ứng PCR cổ điển người ta phát triển nhiều phương pháp PCR cho kết có độ tin cậy cao, thời gian thực nhanh Bảng Một số phương pháp PCR đại Phương pháp Nested PCR So sánh với PCR cổ điển Sử dụng cặp mồi thay cặp mồi Trong đó, cặp mồi thứ nằm cặp mồi thứ Phương pháp cho nhiều đoạn sản phâm DNA PCR cổ điển Thay dùng điện di để phát DNA, kỹ thuật sử dụng hệ thống quang học dược thiết kế máy PCR để đo cường độ ánh sáng sinh Real time-PCR tương ứng với lượng sản phẩm PCR khuyết đại Để phát lượng ánh sáng sinh người ta sử dụng SYBR GREEN dùng đoạn dò TaqMan Cho kết nhanh chạy điện di IV Phòng điều trị Hiện bệnh chưa có biện pháp chữa trị, hầu hết trường hợp bệnh có biện pháp phòng tránh, cụ thể: - Tôm bố mẹ dùng cho sinh sản phải kiểm tra kỹ phương pháp PCR không nhiễm tác nhân virus WSSV - Tôm giống trước nuôi phải kiểm tra kỹ mầm bệnh nguy hiểm phương pháp PCR, đặc biệt bệnh virus đốm trắng WSSV 22 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương - Có thể áp dụng kỹ thuật sốc formol 150-200ppm 30 phút đàn Poslarvae trước đưa vào nuôi, để loại cá thể yếu mang mầm bệnh - Cần thực kỹ khâu tẩy dọn ao nuôi để diệt virus tự do, diệt ngăn chặn cá thể trung gian có mang mầm bệnh virus WSSV (cua, còng, tôm tự nhiên…) Hoặc dùng loại thuốc sát trùng mạnh (Nevugon, formol, chlorine…) tẩy dọn ao, làm khả cảm nhiễm virus tự nước - Chọn mùa vụ nuôi thích hợp để nuôi yếu tố quan trọng nhằm hạn chế thiệt hại bệnh - Ngoài trình nuôi cần quản lý tốt môi trường ao nuôi, tránh gây biến động đột ngột môi trường, dẫn đến sốc môi trường cho tôm làm cho tôm dễ mẫn cảm với tác nhân gây bệnh điều kiện tốt cho bệnh bùng phát - Nên nuôi tôm theo quy trình khép kín theo phương pháp thay nước, nguồn nước đưa vào ao phải lọc kỹ diệt mầm bệnh, để thực nội dung đòi hỏi ao phải có ao chứa lắng lọc xử lý trước sử dụng cho nuôi tôm - Nhằm tránh lây lan mầm bệnh ao, tốt không nên sử dụng chung dụng cụ (lưới, vợt, thuyền…) Kiểm tra thường xuyên màu sắc, khả bắt mồi, tình trạng sức khỏe tôm để kịp thời phát xử lý Khi ao khác trại xung quanh xảy đốm trắng, người nuôi cần chủ động ngưng bón vi sinh để chuyển sang dùng chất sát trùng để loại bỏ mầm bệnh nước Trộn Vitamin C vào thức ăn để tăng sức đề kháng cho tôm cải thiện môi trường (giảm khí độc, ổn định độ kiềm) suốt thời gian - Đối với ao tôm bệnh, nên vớt tôm chết khỏi ao Sau dùng Chlorine với liều lượng 30 kg/1.000 m3; formol 200 lít/1.000 m3 hòa nước tạt xuống ao, ngâm ngày xổ môi trường Khi phát bệnh tốt thu hoạch để giảm thiệt hại V Kết luận kiến nghị Bệnh đốm trắng tôm bệnh vô nguy hiểm, gây thiệt hại nặng nề cho ngành nuôi trồng tôm kinh tế nước nhà Vì bệnh virus gây ra, thuốc trị nên để hạn chế việc phát sinh lan truyền bệnh cần tạo nguồn tôm giống bệnh, chuẩn bị ao nuôi, theo dõi điều kiện nuôi trồng vệ sinh nguồn nước, dụng cụ nuôi 23 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Ngoài ra, với phát triển công nghệ sinh học, việc tạo vắc xin phòng bệnh đốm trắng tôm dựa protein đóng vai trò xâm nhập capsid virus cần nghiên cứu phát triển sâu rộng Bên cạnh đó, cần trọng khâu nâng cao sức đề kháng cho tôm nuôi thông qua việc sử dụng biện pháp quản lí chăm sóc tốt, dùng thức ăn chất lượng cao để nuôi tôm, cho tôm ăn bổ sung loại enzyme, vitamin, chất khoáng vi lượng nhằm giúp tôm tăng cường khả tiêu hóa sức đề kháng với bệnh VI Tài liệu tham khảo Đoàn Bình Minh, 2006 Xác định thành phần protein virus gây hội chứng đốm trắng (White Spot Syndrom Virus – WSSV) nhân sinh khối tế bào côn trùng Sepodotera frugiperda (Sf9) nuôi cấy in vitro Chung Thị Nghiêm, 2009 Ứng dụng phương pháp PCR-Genotyping nghiên cứu tác nhân gây bệnh đốm trắng (WSSV) tôm sú Phạm Minh Nhựt, 2006 Bước đầu khảo sát trình phát sinh bệnh virus đốm trắng tôm sú (Penaus monodon) mô hình gây nhiễm thực nghiệm chuẩn phương pháp hóa mô miễn dịch Hội thảo khoa học bệnh đốm trắng bệnh hoại tử gan tụy cấp tôm nuôi nước lợ, 2014 Truy cập từ www.fistenet.gov.vn/e-nuoi-trong-thuy-san/phong-chongdich-benh/tinh-hinh-dich-benh-111om-trang-va-benh-hoai-tu-gan-tuy-cap-tren-tomnuoi-nuoc-lo/ Đặng Thị Hoàng Oanh Nguyễn Thanh Phương, 2012 Các bệnh nguy hiểm tôm nuôi Đồng Bằng Sông Cửu Long, Tạp chí Khoa học trường Đại học Cần Thơ 24 [...]... tôm bị nhiễm đốm trắng Hình 17 Dạ dày của tôm bị nhiễm đốm trắng *(Nguồn:http://luanvan.net.vn/luan-van/benh-do -virus- va-vi-khuan-tren-tom-the-chan-trang-49503/) 20 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương 5 Phương pháp chuẩn đoán bệnh 5.1 Sơ lược về các phương pháp chẩn đoán bệnh đốm trắng trên tôm Việc chẩn đoán virus bệnh đốm trắng được thực hiện từ 20-40 ngày khi bệnh khởi phát... nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình 9 Các mô mục tiêu của WSSV trên tôm *(Nguồn: Báo cáo virus gây hội chứng đốm trắng trên tôm) Đến nhân, virus đưa bộ gen vào trong, tại đây chúng sẽ tiến hành nhân bản, phiên mã, dịch mã dựa trên vật chất và năng lượng của tế bào Thông qua quá trình này, số lượng virus tăng lên rất nhanh, đồng thời làm thay đổi hoạt động bình thường của tế bào chủ Virus WSSV... của virus WSSV trong tế bào chủ Hình 11 Cơ chế sao chép của virus WSSV *(Nguồn: TS Bùi Thị Minh Diệu, bài giảng Virus học đại cương) 14 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình 12 Cơ chế dịch mã của virus WSSV trong tế bào chủ * (Nguồn: TS Bùi Thị Minh Diệu, bài giảng Virus học đại cương) 2 Cơ chế lây lan Có hai con đường lan truyền chủ yếu: Lan truyền theo chiều dọc: mầm bệnh. .. http://luanvan.co/luan-van/luan-van-xac-dinh-thanh-phan-protein-cua -virus- gay-hoichung-dom-trang-white-spot-syndrome -virus- wssv-nhan-sinh-khoi-28595/) 2 Tình hình bệnh và tác hại của bệnh đốm trắng với nghề nuôi tôm tại Việt Nam và Thế giới Bệnh đốm trắng là một trong những bệnh nguy hiểm nhất đối với tôm nuôi hiện nay Bệnh xảy ra ở tất cả các nước nuôi tôm và ảnh hưởng phần lớn đền nghề nuôi tôm công nghiệp và trên thế giới (Nguyễn Văn Hào, 2000) a Thế giới Trong thời gian qua, bệnh đốm trắng đã bùng... dấu hiệu sức khỏe tôm yếu, đồng thời các đốm trắng xuất hiện, tỷ lệ tôm phát bệnh từ 3-10 ngày là 100% và tôm chết hầu hết trong ao nuôi (Bùi Quang Tế, 2003) Tuy nhiên, cần phân biệt những trường hợp bệnh giống bệnh đốm trắng Trong trường hợp này, những đốm trắng xuất hiện loang lỗ trên thân tôm và tôm chỉ chết rải rác hoặc kéo dài, khi lột xác xong, các đốm trắng bong ra khỏi vỏ và tôm hoạt động trở... nguyên nhân lây lan bệnh (Trần Thị Việt Ngân, 2002) 15 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình 13 Hai đường lây nhiễm của WSSV trong ao nuôi (theo Pasano L M., 1960) *(Nguồn: Trần Thị Việt Ngân, 2002) III Bệnh đốm trắng trên tôm 1 Lịch sử và phân bố bệnh Bệnh đốm trắng xuất hiện lần đầu tiên ở vùng đông bắc của Đài Loan vào cuối năm 1991 đầu 1992 ở các đầm nuôi tôm sú nuôi với... bị bệnh đốm trắng So với năm 2013, trong 11 tháng đầu năm 2014, dịch bệnh đốm trắng xảy ra với phạm vi hẹp hơn nhưng diện tích bị bệnh cao hơn 1,85 lần Cả nước có 3 tỉnh công bố dịch là Sóc Trăng, Nghệ An và Quảng Ninh, Sóc Trăng là tỉnh bị thiệt hại lớn nhất (10.933,82 ha, chiếm 48,33% diện tích bị bệnh đốm trắng trong cả nước) (Hội thảo khoa học bệnh đốm trắng và bệnh hoại tử gan tụy cấp trên tôm. .. hoặc do tôm bị nhiễm khuẩn Hình 15 Các dấu hiệu bên ngoài của tôm nhiễm WSSV b Dấu hiệu bên trong Tế bào tôm bị bệnh đốm trắng có hiện tượng trương nhân Gan, tụy trương nhân có màu trắng vàng và trở nên giòn hơn Dấu hiệu đặc trưng về mô bệnh sinh học là sự xuất hiện của các thể vùi crowdry type A trong trương nhân 19 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình 16 Mang của tôm bị... đầu ngực, đốm trắng có kích thước từ 0.5-2 mm xuất hiện đầu tiên trên lớp vỏ đầu 18 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương ngực và đốt đuôi cuối cùng (với tôm kích thước còn nhỏ đôi khi không thấy đốm trắng mà chỉ thấy thân có màu hồng đến hồng đỏ) Tôm bị bệnh dễ dàng phát hiện lúc còn nhỏ và sắp trưởng thành (Phạm Minh Nhựt, 2006) Trong nhiều trường hợp, tôm hấp hối do bệnh WSSV... nuôi tôm trên thế giới, đặc biệt là các nước châu Á Bệnh đã gây tỉ lệ chết cao và gây thiệt hại lớn cho nghề nuôi tôm công nghiệp ở Trung Quốc, Nhật Bản, Indonesia và Ấn Độ Trong thời gian 1994-1995, virus gây bệnh đốm trắng đã gây chết hầu hết tôm nuôi (P monodon, P indicus) dọc theo bờ biển phía Đông và phía Tây Ấn Độ (Tạp chí thông tin KHCN và Kinh tế Thủy Sản, số 4-2004) Ở Thái Lan, dịch bệnh đốm trắng ... bệnh đốm trắng tôm sú phương pháp khác (Lightner, 1997) .21 iii Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương iv Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại. .. Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Phương pháp chuẩn đoán bệnh 5.1 Sơ lược phương pháp chẩn đoán bệnh đốm trắng tôm Việc chẩn đoán virus bệnh đốm trắng thực từ 20-40 ngày bệnh khởi phát... 2005) 12 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Báo cáo Virus học đại cương Hình Các mô mục tiêu WSSV tôm *(Nguồn: Báo cáo virus gây hội chứng đốm trắng tôm) Đến nhân, virus đưa gen vào trong, chúng tiến